一種柑橘病毒樣品采樣器的制造方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本實(shí)用新型涉及一種柑橘病毒樣品采樣器。
【背景技術(shù)】
[0002]柑橘病毒病的主要防治方法是種植無(wú)病毒苗木，以及及時(shí)根除帶毒植株。為保證苗木無(wú)毒，苗圃的母本樹(shù)、采穗樹(shù)都需要定期做無(wú)病毒檢測(cè)，出圃苗木需要抽檢是否帶病毒。果園的疑似帶病毒植株需進(jìn)一步檢查確診，避免無(wú)毒植株被根除。
[0003]目前，由于分子生物學(xué)檢測(cè)的速度快、效率高，已成為病毒檢測(cè)的主要方法。然而，分子生物學(xué)檢測(cè)對(duì)病毒樣品的新鮮度要求很高。過(guò)去，從田間帶到實(shí)驗(yàn)室的枝葉很容易出現(xiàn)枯老，導(dǎo)致分子生物學(xué)檢測(cè)無(wú)法成功。隨著硝酸纖維素膜在樣品采集上的應(yīng)用，可有效解決樣品的新鮮度問(wèn)題。硝酸纖維素膜可長(zhǎng)時(shí)間保存病毒樣品，且省去核酸抽提的繁瑣步驟，從而增強(qiáng)分子生物學(xué)檢測(cè)法的優(yōu)勢(shì)。
[0004]現(xiàn)有的利用硝酸纖維素膜采集柑橘病毒樣品的方法存在以下缺陷:采樣前，必須特意在硝酸纖維素膜上畫(huà)出直線印跡，形成網(wǎng)格狀的采樣區(qū)，區(qū)分各個(gè)樣品，采樣操作步驟繁瑣；硝酸纖維素膜質(zhì)地柔軟，在田間采樣時(shí)必須佩帶堅(jiān)硬平臺(tái)支撐，否則無(wú)法點(diǎn)樣操作；田間很難實(shí)現(xiàn)帶無(wú)菌手套的采樣操作，手容易接觸膜造成RNase (核糖核酸酶)污染，從而影響后續(xù)的分子生物學(xué)檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
【實(shí)用新型內(nèi)容】
[0005]本實(shí)用新型所要解決的技術(shù)問(wèn)題是，克服上述【背景技術(shù)】的不足，提供一種操作步驟簡(jiǎn)單、能避免污染的柑橘病毒樣品采樣器。
[0006]本實(shí)用新型解決其技術(shù)問(wèn)題采用的技術(shù)方案是，一種柑橘病毒樣品采樣器，包括樣品盒，所述樣品盒兩側(cè)的盒壁上均設(shè)有扣手位凹槽，樣品盒的盒壁內(nèi)表面設(shè)有卡扣位，樣品盒內(nèi)底面放置有硝酸纖維素膜，硝酸纖維素膜上放置有網(wǎng)格板，所述網(wǎng)格板內(nèi)部設(shè)有網(wǎng)格，網(wǎng)格板底部緊密接觸硝酸纖維素膜，網(wǎng)格板四周設(shè)有向外延伸的邊沿，網(wǎng)格板外側(cè)設(shè)有與卡扣位配合使用的卡扣腳，網(wǎng)格板與樣品盒卡合。
[0007]進(jìn)一步，所述樣品盒包括盒蓋，所述盒蓋與盒身鉸接。
[0008]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本實(shí)用新型的優(yōu)點(diǎn)如下:
[0009]設(shè)有網(wǎng)格板，網(wǎng)格板的底部緊壓在硝酸纖維素膜上，在硝酸纖維素膜上產(chǎn)生網(wǎng)格狀的壓痕，能形成樣品分界線，省去在硝酸纖維素膜上畫(huà)直線印跡的步驟；網(wǎng)格板與樣品盒的卡合能固定硝酸纖維素膜，無(wú)需田間再額外佩帶堅(jiān)硬平臺(tái)，而直接將樣品盒放在手上，在網(wǎng)格下的每一塊硝酸纖維素膜上采樣即可，植物組織能夠均勻地壓印于硝酸纖維素膜上，采樣操作步驟簡(jiǎn)單，采樣效果好；該采樣器能避免手直接與硝酸纖維素膜接觸，潔凈無(wú)菌，避免樣品被污染。
【附圖說(shuō)明】
[0010]圖1是本實(shí)用新型實(shí)施例的樣品盒的結(jié)構(gòu)示意圖。
[0011]圖2是本實(shí)用新型實(shí)施例的網(wǎng)格板的頂部結(jié)構(gòu)示意圖。
[0012]圖3是本實(shí)用新型實(shí)施例的網(wǎng)格板的底部結(jié)構(gòu)示意圖。
[0013]圖中一樣品盒，2—扣手位凹槽，3—卡扣位，4一盒蓋，5—網(wǎng)格板，6—網(wǎng)格，7—卡扣腳。
【具體實(shí)施方式】
[0014]下面結(jié)合附圖及具體實(shí)施例對(duì)本實(shí)用新型作進(jìn)一步詳細(xì)描述。
[0015]參照?qǐng)D1，本實(shí)施例包括樣品盒1，樣品盒I兩側(cè)的盒壁上均設(shè)有扣手位凹槽2，樣品盒I的盒壁內(nèi)表面設(shè)有卡扣位3，樣品盒I內(nèi)底面放置有硝酸纖維素膜，硝酸纖維素膜上放置有網(wǎng)格板5，網(wǎng)格板5內(nèi)部設(shè)有網(wǎng)格6，網(wǎng)格板5底部緊密接觸硝酸纖維素膜，；參照?qǐng)D2、圖3，網(wǎng)格板5四周設(shè)有向外延伸的邊沿，網(wǎng)格板5外側(cè)設(shè)有與卡扣位3配合使用的卡扣腳7，網(wǎng)格板5與樣品盒I卡合。
[0016]樣品盒I和網(wǎng)格板5均為矩形結(jié)構(gòu)，樣品盒I和網(wǎng)格板5的邊角均為倒角。
[0017]根據(jù)網(wǎng)格板5的尺寸設(shè)計(jì)，樣品盒I的長(zhǎng)為98臟，寬為65mm。
[0018]網(wǎng)格板5內(nèi)網(wǎng)格6的數(shù)量和尺寸根據(jù)成人手抓物品的舒適感、硝酸纖維素膜的利用率和點(diǎn)樣的舒適感設(shè)計(jì)，網(wǎng)格板5的網(wǎng)格6為矩形網(wǎng)格，每行網(wǎng)格6的數(shù)量為8個(gè)，每列網(wǎng)格6的數(shù)量為5個(gè)；網(wǎng)格6的長(zhǎng)寬高均為10mm。
[0019]樣品盒I包括盒蓋4，盒蓋4與盒身鉸接。
[0020]樣品盒I和網(wǎng)格板5以聚乙烯塑料為材料，經(jīng)過(guò)吹塑加工制成。樣品盒I與硝酸纖維素膜的接觸面光滑平整，網(wǎng)格板5與硝酸纖維素膜的的接觸面光滑平整。網(wǎng)格板5四周向外延伸的邊沿能標(biāo)記字母或數(shù)字，用作網(wǎng)格6的坐標(biāo)。網(wǎng)格板5外側(cè)的扣腳7與樣品盒I的盒壁內(nèi)表面的卡扣位3卡合，使網(wǎng)格板5的底部緊壓在硝酸纖維素膜上，在硝酸纖維素膜上產(chǎn)生網(wǎng)格狀的壓痕，形成樣品分界線。樣品盒I盒壁上的扣手位凹槽2方便手指伸入，從樣品盒I內(nèi)取出網(wǎng)格板5。
[0021]在接觸硝酸纖維素膜之前，樣品盒I和網(wǎng)格板5需經(jīng)除RNase酶處理。
[0022]該采樣器在田間采樣的具體使用步驟如下:
[0023](I)用消毒的剪刀將待檢測(cè)柑橘植株的幼嫩的枝條或者葉柄剪出平滑整齊的切P ;
[0024](2)打開(kāi)樣品盒I的盒蓋4，左手拿樣品盒1，右手將柑橘枝條或者葉柄在一個(gè)網(wǎng)格孔的硝酸纖維素膜上按壓，持續(xù)1-2秒，使植物汁液印跡在硝酸纖維素膜上，重復(fù)該步驟6-8次，且各個(gè)印跡不重疊；
[0025](3)待樣品印跡完后，蓋上盒蓋4 ;
[0026](4)樣品采集完畢，保存在干燥的環(huán)境中，進(jìn)行后續(xù)的分子生物學(xué)檢測(cè)。
[0027]該采樣器在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行病毒檢測(cè)的具體使用步驟如下:
[0028](I)打開(kāi)盒蓋4，取出網(wǎng)格板5，帶手套取出硝酸纖維膜，用消毒剪刀將每個(gè)樣品的印跡按照網(wǎng)格板5按壓的分區(qū)剪開(kāi)；
[0029](2)每個(gè)樣品印跡放入一個(gè)PCR管中，加入洗脫液50微升；密封后置于PCR儀中，95°C保溫5min，立即置于冰上靜置4min ；
[0030](3)按照實(shí)時(shí)熒光PCR (PCR:聚合酶鏈反應(yīng)，體外酶促合成特異DNA片段的一種方法)的流程進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
[0031]本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以對(duì)本實(shí)用新型實(shí)施例進(jìn)行各種修改和變型，倘若這些修改和變型在本實(shí)用新型權(quán)利要求及其等同技術(shù)的范圍之內(nèi)，則這些修改和變型也在本實(shí)用新型的保護(hù)范圍之內(nèi)。
[0032]說(shuō)明書(shū)中未詳細(xì)描述的內(nèi)容為本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的現(xiàn)有技術(shù)。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種柑橘病毒樣品采樣器，其特征在于:包括樣品盒(1)，所述樣品盒(I)兩側(cè)的盒壁上均設(shè)有扣手位凹槽(2)，樣品盒(I)的盒壁內(nèi)表面設(shè)有卡扣位(3)，樣品盒(I)內(nèi)底面放置有硝酸纖維素膜，硝酸纖維素膜上放置有網(wǎng)格板(5)，所述網(wǎng)格板(5)內(nèi)部設(shè)有網(wǎng)格(6)，網(wǎng)格板(5)底部緊密接觸硝酸纖維素膜，網(wǎng)格板(5)四周設(shè)有向外延伸的邊沿，網(wǎng)格板(5)外側(cè)設(shè)有與卡扣位(3)配合使用的卡扣腳(7)，網(wǎng)格板(5)與樣品盒(I)卡合。
2.如權(quán)利要求1所述的柑橘病毒樣品采樣器，其特征在于:所述樣品盒(I)包括盒蓋(4)，所述盒蓋(4)與盒身鉸接。
【專利摘要】一種柑橘病毒樣品采樣器，包括樣品盒，樣品盒兩側(cè)的盒壁上均設(shè)有扣手位凹槽，樣品盒的盒壁內(nèi)表面設(shè)有卡扣位，樣品盒內(nèi)底面放置有硝酸纖維素膜，硝酸纖維素膜上放置有網(wǎng)格板，網(wǎng)格板內(nèi)部設(shè)有網(wǎng)格，網(wǎng)格板底部緊密接觸硝酸纖維素膜，網(wǎng)格板四周設(shè)有向外延伸的邊沿，網(wǎng)格板外側(cè)設(shè)有與卡扣位配合使用的卡扣腳，網(wǎng)格板與樣品盒卡合。本實(shí)用新型的網(wǎng)格板在硝酸纖維素膜上產(chǎn)生網(wǎng)格狀的壓痕，形成樣品分界線，在網(wǎng)格下的每一塊硝酸纖維素膜上采樣即可，植物組織能夠均勻地壓印于硝酸纖維素膜上，采樣效果好；且避免手直接與硝酸纖維素膜接觸，潔凈無(wú)菌，避免樣品被污染。
【IPC分類】C12M1-26
【公開(kāi)號(hào)】CN204509333
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201520161730
【發(fā)明人】戴素明, 鄧子牛, 李芳 , 李大志
【申請(qǐng)人】湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)
【公開(kāi)日】2015年7月29日
【申請(qǐng)日】2015年3月23日