一種核酸提取裝置的制造方法
【技術(shù)領域】
[0001] 本實用新型涉及生物技術(shù)領域，尤其涉及一種核酸提取裝置。
【背景技術(shù)】
[0002] 核酸包括脫氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)兩類，是一切生物體的遺傳物質(zhì)， 在細胞中主要存在于細胞核內(nèi)并以與蛋白質(zhì)結(jié)合的狀態(tài)存在。核酸提取是生命科學研究、 生物技術(shù)應用及基因診斷中非常重要的一項技術(shù)，早期的核酸提取是建立在苯酚氯仿抽提 去雜質(zhì)與乙醇沉淀核酸的原理上的，但這一方法非常累贅。目前，商品化的核酸提取方法主 要建立在固相吸附方法上，即在特定的條件下（如PH、特定的鹽等)將核酸分子吸附在某種 固相吸附劑表面，然后加以洗脫的純化方法，主要包括以下兩種：（1)離心柱法：以含硅材料 或者其它可以吸附核酸的固體為介質(zhì)裝填在離心柱中，并用胍鹽等離液鹽作為結(jié)合劑，當 核酸分子通過離心柱時即被吸附在固相上，然后用含乙醇的溶液洗去雜質(zhì)，最后用低鹽溶 液將核酸洗脫下來;該方法簡單便捷，提取效率高，提取效果好，是目前使用最多的核酸純 化方法，缺點是提取過程中需要反復離心，不便于高通量、自動化操作。（2)磁珠法:利用表 面包裹硅材料或者其它能結(jié)合核酸的材料的磁性微球作為固相載體，在離液鹽(鹽酸胍、異 硫氰酸胍等)和在外加磁場的作用下，從樣本中分離DNA和RNA;該方法操作簡單，易于實現(xiàn) 自動化、高通量操作，缺點是成本較高，提取效率易受影響，不同樣品、不同廠家、不同批次 的磁珠提取效果變化較大。
[0003] 固相吸附法的技術(shù)關鍵為：（1)高效的固相吸附材料；（2)輔助核酸結(jié)合固相材料 特殊溶液。目前，使用最廣泛的固相吸附材料是含硅材料，如美國專利N0 6，218，531公開的 二氧化硅;又如美國專利N0 5，503，816公開的多種具有親水性和正電性的含硅材料，優(yōu)選 的含硅材料包括硅酸硼、硅酸鋁、磷酸硅酸、羰基硅、磺基硅和膦?；?，其中一些材料可以 在不使用離液劑、僅使用水的情況下回收DNA。在結(jié)合劑中，最重要的是離液劑(chaotrope， chaotropic agent)，包括離液鹽（chaotropic salt)，常用的離液劑包括碘化鈉(Nal)、尿 素、鹽酸胍(Gu_HCl)、高氯酸鈉(NaC104)和溴化鉀(KBr)等。此外，也有使用醇類作為結(jié)合 劑，如歐洲專利N0 0512676 A1和美國專利N05,783,686中公開的100%的乙醇。
[0004] 為對現(xiàn)有的核酸提取方法進行改進，申請?zhí)枮?01410333236.7(申請公布號為 CN104059849A)的中國發(fā)明專利《一種用于核酸快速提取的裝置及一種核酸快速提取方法》 公開了一種用于核酸快速提取的裝置及一種核酸快速提取方法，該裝置包括注射器、中空 的轉(zhuǎn)接器、核酸吸收膜管、加樣針四個部分，在經(jīng)過臨床樣本裂解處理、注射器抽吸、核酸吸 附膜吸附核酸、漂洗液漂洗核酸吸附膜、洗脫液洗脫核酸等步驟后，可以獲得純的核酸溶液 而用于下游實驗。雖然該專利可在一體化的裝置中實現(xiàn)核酸的提取，但是在利用該裝置提 取核酸時，無論是"兩抽一推"法還是"三推"法中，最后將吸附在濾膜上的核酸成分洗脫時 都需要更換新的注射器，此外"兩抽一推"法中由于注射器腔容積有效，對樣本的清洗次數(shù) 有限，因此對核酸提取物的純化程度造成的限制，而"三推"法中每一次"推"均需將注射器 取下吸收相應的液體，無法實現(xiàn)自動化操作。 【實用新型內(nèi)容】
[0005] 本實用新型所要解決的技術(shù)問題是針對現(xiàn)有技術(shù)而提供一種結(jié)構(gòu)簡單、使用方便 的核酸提取裝置。
[0006] 本實用新型解決上述技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案為：一種核酸提取裝置，包括具 有第一連接端和吸附端的吸附管、設置在上述吸附端并能吸附待處理樣品中核酸成分的吸 附濾芯和活塞管，該活塞管中內(nèi)置有能沿活塞管內(nèi)壁上下移動移動的活塞，且該活塞管包 括第二連接端和敞口端并通過第二連接端與第一連接端連接而與吸附管連通，其特征在 于，還包括用于抽吸流經(jīng)吸附濾芯的液體的抽吸組件。
[0007] 或者，一種核酸提取裝置，包括具有第一連接端和吸附端的吸附管、設于上述吸附 端并能吸附待處理樣品中核酸成分的吸附濾芯及內(nèi)置有活塞的活塞管，該活塞管包括第二 連接端和敞口端，并通過第二連接端與第一連接端連接而與吸附管連通，所述敞口端設置 有一密封圈，所述活塞嵌設在該密封圈中并能沿活塞管長度方向上下移動，其特征在于，還 包括用于抽吸流經(jīng)吸附濾芯的液體的抽吸組件。
[0008] 為使裝置結(jié)構(gòu)簡單并使抽吸組件的抽吸效果較好，作為優(yōu)選，所述抽吸組件包括 吸管、單向閥以及真空栗，該吸管一端用于抽吸液體，另一端通過單向閥與真空栗連接;或 者，所述吸收組件包括吸管、電動閥門以及電動氣栗，該吸管一端用于抽吸液體，另一端通 過電動閥門與電動氣栗連接。
[0009] 進一步，所述吸附濾芯與活塞之間形成液體腔，所述吸管插設于液體腔的腔壁上。
[0010] 進一步，所述吸管的一端豎向延伸至吸附管中并位于吸附濾芯上方，從而加快液 體腔的液體經(jīng)抽吸組件外排的速度，且吸管的自由端套設有一次性保護管，核酸提取中可 更換一次性保護管，避免吸管端部污染，保證核酸的提取純度。
[0011] 第一連接端與第二連接端的連接方式有多種，為方便操作，所述第一連接端與第 二連接端可拆卸連接，本實用新型中可拆卸連接可有多種形式，如螺紋連接，即第一連接端 與第二連接端通過螺紋連接，又如卡扣連接，第一連接端卡入第二連接端或第二連接端卡 入第一連接端。
[0012] 進一步，為實現(xiàn)上述可拆卸連接同時也使第一連接端與第二連接端連接穩(wěn)固，作 為優(yōu)選，所述第一連接端和第二連接端均呈圓臺狀，第二連接端卡入第一連接端且其外周 面與第一連接端的內(nèi)周面緊密貼合。
[0013] 作為優(yōu)選，所述吸附濾芯為核酸吸附膜或核酸吸附填料，當吸附濾芯為核酸吸附 膜時可選用玻璃纖維膜或硅膠膜。
[0014] 為易于實現(xiàn)該裝置的自動化操作，作為優(yōu)選，該裝置還包括用于驅(qū)動活塞沿活塞 管內(nèi)壁上下移動的驅(qū)動裝置，例如步進電機驅(qū)動的蝸桿裝置等。
[0015] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本實用新型的優(yōu)點在于:該核酸提取裝置中設置抽吸組件，提取 過程中待處理樣品經(jīng)吸附濾芯過濾后的濾液和漂洗液清洗后的廢液均能直接通過抽吸組 件抽吸，整個提取過程中無需拆裝裝置，結(jié)構(gòu)簡單、操作方便，實現(xiàn)了核酸提取操作連續(xù)性， 易于實現(xiàn)核酸的自動化提取，此外，能根據(jù)需要進行多次漂洗，保證了核酸提取的質(zhì)量，是 一種快捷、高效的核酸提取方法，可廣泛推廣應用。
【附圖說明】
[0016] 圖1為本實用新型實施例1中核酸提取裝置結(jié)構(gòu)示意圖；
[0017] 圖2為本實用新型實施例1中核酸提取裝置局部結(jié)構(gòu)示意圖；
[0018] 圖3為本實用新型實施例3中核酸提取方法操作流程示意圖；
[0019] 圖4為本實用新型實施例2中核酸提取裝置結(jié)構(gòu)示意圖。
【具體實施方式】
[0020] 以下結(jié)合附圖實施例對本實用新型作進一步詳細描述。
[0021] 實施例1:
[0022] 如圖1和圖2所示，一種核酸提取裝置，包括具有第一連接端12和吸附端11的吸附 管1、吸附濾芯3以及內(nèi)置有能沿管內(nèi)壁上下位移的活塞4的活塞管2。本實用新型中吸附管1 可為一次性吸附管，其吸附端11設置有用于吸附待處理樣品中核酸成分的吸附濾芯3?；钊?管2包括第二連接端22和敞口端21，該第二連接端22和上述第一連接端12均呈圓臺狀并通 過可拆卸方式連接，具體地，第二連接端22卡入第一連接端12且其外周面與第一連接端12 的內(nèi)周面緊密貼合，使得活塞管2與吸附管1連通。此外，該裝置外部還設置有能驅(qū)動活塞4 沿活塞管2內(nèi)壁上下移動的驅(qū)動裝置7,方便操作，為核酸的自動化提取提供基礎。
[0023] 上述吸附濾芯3與活塞4之間形成液體腔5,該液體腔5上設置有用于抽吸液體腔5 中液體的抽吸組件6，該抽吸組件6包括吸管61、單向閥62以及真空栗63，吸管61插設于液體 腔5腔壁，一端豎向延伸至吸附管1中并位于吸附濾芯3上方，另一端通過單向閥62與真空栗 63連接，當然吸收組件也可以是其他可能的組合形式，如：吸收組件包括吸管、電動閥門以 及電動氣栗，該吸管一端用于抽吸液體，另一端通過電動閥門與電動氣栗連接，在此不再贅 述。提取過程中待處理樣品經(jīng)吸附濾芯3過濾后的濾液和漂洗液清洗后的廢液均能直接通 過抽吸組件6抽吸。為避免吸管61的端部在核酸提取過程中受到污染，從而影響核酸提取的 純度，吸管61的自由端（即位于吸附濾芯3上方的端部)套設有一次性保護管8,核酸提取中 通過更換一次性保護管8,進一步保證核酸提取的純度。
[0024] 實施例2:
[0025] 如圖4所示，與上述實施例1不同的是，實施例2中活塞管2內(nèi)置有活塞4,活塞管2的 敞口端21設置有一密封圈9,活塞4嵌設在該密封圈9中并能沿活塞管2長度方向上下移動。
[0026] 本實用新型中的核酸提取裝置可作為獨立的裝置用于核酸的提取，也可以作為核 酸自動提取裝置的一部分，從而實現(xiàn)核酸的自動化提取。
[0027] 利用上述實施例1中核酸提取裝置的