一種干細(xì)胞灌流培養(yǎng)系統(tǒng)的制作方法
【專利摘要】本實(shí)用新型公開了一種干細(xì)胞灌流培養(yǎng)系統(tǒng),包括灌流瓶、飼養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)器、細(xì)胞灌流槽和廢液瓶,灌流瓶瓶口處設(shè)置有第一氣體濾頭及第一連接管,第一連接管另一端浸入到飼養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)器內(nèi);飼養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)器底部設(shè)置有細(xì)胞培養(yǎng)板,飼養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)器中部設(shè)置有第一嵌入式過濾膜;飼養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)器通過第二連接管與細(xì)胞灌流槽連通;細(xì)胞灌流槽中部設(shè)置有第二嵌入式過濾膜,細(xì)胞灌流槽外設(shè)置有電熱裝置,電熱裝置由設(shè)置于細(xì)胞灌流槽外的恒溫控制器控制。本新型結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)合理,可重復(fù)性強(qiáng),操作簡單,降低了污染和飼養(yǎng)層細(xì)胞參雜的機(jī)會(huì),可根據(jù)檢測出干細(xì)胞的存活率、數(shù)目及濃度數(shù)據(jù)來調(diào)節(jié)最佳的溫度、PH值及流速,提高干細(xì)胞的培養(yǎng)速率。
【專利說明】
一種干細(xì)胞灌流培養(yǎng)系統(tǒng)
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本實(shí)用新型涉及一種細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域,具體是一種干細(xì)胞灌流培養(yǎng)系統(tǒng)。
【背景技術(shù)】
[0002]20世紀(jì)50年代,科學(xué)家在畸形胎瘤中首次首次發(fā)現(xiàn)了胚胎干細(xì)胞,從此開創(chuàng)了干細(xì)胞生物學(xué)研究的歷程。干細(xì)胞的研究與應(yīng)用幾乎涉及所有生命科學(xué)和生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域,是當(dāng)今生命科學(xué)領(lǐng)域的熱點(diǎn)和重點(diǎn)。干細(xì)胞能自我更新和多向分化的生物學(xué)特性使得干細(xì)胞研究在動(dòng)物克隆、新型高效藥物的開發(fā)和腫瘤臨床治療等方面有著廣泛的應(yīng)用前景。
[0003]在胚胎干細(xì)胞體外培養(yǎng)中,除了正常的培養(yǎng)基外,需要先培養(yǎng)一層特殊的細(xì)胞,然后再在其上接種要實(shí)驗(yàn)的干細(xì)胞。這些特殊的細(xì)胞就是飼養(yǎng)層細(xì)胞,通常是成纖維類細(xì)胞,這些細(xì)胞可以分泌一些未知的必須生長因子如白血病抑制因子、干細(xì)胞因子和堿性成纖維細(xì)胞生長因子等,提供胚胎干細(xì)胞、誘導(dǎo)多能干細(xì)胞更好的營養(yǎng)。這些因子對干細(xì)胞的存活和增殖是必需的,不僅可以使其數(shù)量增加,而且與干細(xì)胞在體內(nèi)外的分化有關(guān)。實(shí)驗(yàn)證明,飼養(yǎng)層細(xì)胞的作用不僅僅是產(chǎn)生了一些細(xì)胞因子,在大多數(shù)細(xì)胞發(fā)育和分化過程中,細(xì)胞的黏附作用都發(fā)揮了相當(dāng)重要的作用。
[0004]通常在胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)體系下,飼養(yǎng)層細(xì)胞與干細(xì)胞處于共培養(yǎng)狀態(tài),兩者無法分離徹底。如果采用飼養(yǎng)層與干細(xì)胞分別靜態(tài)培養(yǎng)的方式,無法實(shí)時(shí)將飼養(yǎng)層細(xì)胞分泌的因子傳送到干細(xì)胞培養(yǎng)體系內(nèi),且操作過程多,大多不被采用。傳統(tǒng)共培養(yǎng)方式影響干細(xì)胞純度,已在干細(xì)胞應(yīng)用等方面起到了很大的限制作用。
【實(shí)用新型內(nèi)容】
[0005]本實(shí)用新型的目的在于提供一種干細(xì)胞灌流培養(yǎng)系統(tǒng),以解決上述【背景技術(shù)】中提出的問題。
[0006]為實(shí)現(xiàn)上述目的,本實(shí)用新型提供如下技術(shù)方案:
[0007]—種干細(xì)胞灌流培養(yǎng)系統(tǒng),包括灌流瓶、飼養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)器、細(xì)胞灌流槽和廢液瓶,所述灌流瓶瓶口處設(shè)置有第一氣體濾頭及第一連接管,所述第一連接管上設(shè)置有第一PH值檢測儀,所述第一連接管另一端浸入到飼養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)器內(nèi);所述飼養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)器底部設(shè)置有細(xì)胞培養(yǎng)板,所述飼養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)器中部設(shè)置有第一嵌入式過濾膜;所述飼養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)器通過第二連接管與細(xì)胞灌流槽連通,所述第二連接管上設(shè)置有第二 PH值檢測儀及第一控速流體推進(jìn)器;所述細(xì)胞灌流槽中部設(shè)置有第二嵌入式過濾膜,所述細(xì)胞灌流槽外設(shè)置有電熱裝置,所述電熱裝置由設(shè)置于細(xì)胞灌流槽外的恒溫控制器控制;所述細(xì)胞灌流槽內(nèi)設(shè)置有探頭,所述探頭與細(xì)胞灌流槽上端的細(xì)胞存活率分析計(jì)數(shù)器連接;所述細(xì)胞灌流槽通過第三連接管與廢液瓶連通,所述第三連接管上設(shè)置有第二控速流體推進(jìn)器,所述廢液瓶的瓶口處設(shè)置有第二氣體濾頭。
[0008]作為本實(shí)用新型進(jìn)一步的方案:所述第一PH值檢測儀及第二 PH值檢測儀均為數(shù)顯式PH值檢測儀。
[0009]作為本實(shí)用新型再進(jìn)一步的方案:所述第一連接管及第二連接管的管口位于第一嵌入式過濾膜上方。
[0010]作為本實(shí)用新型再進(jìn)一步的方案:所述第三連接管的管口位于第二嵌入式過濾膜的上方。
[0011]作為本實(shí)用新型再進(jìn)一步的方案:所述第二連接管的管口及探頭均位于第二嵌入式過濾膜的下方。
[0012]與現(xiàn)有技術(shù)相比,本實(shí)用新型的有益效果是:由于在飼養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)器中設(shè)置了第一嵌入式過濾膜,該過濾膜是半透膜,其具體孔徑大小控制在能阻止飼養(yǎng)層細(xì)胞穿過但能實(shí)現(xiàn)液體通過;同樣的,在細(xì)胞灌流槽中設(shè)置的第二嵌入式過濾膜也是半透膜,其具體孔徑大小也是控制在能阻止待培養(yǎng)干細(xì)胞穿過但能實(shí)現(xiàn)液體通過;將飼養(yǎng)層細(xì)胞和待培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行分開培養(yǎng),在采用半透膜作為過濾裝置后使得飼養(yǎng)層細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子等都可以隨同培養(yǎng)液一起進(jìn)入細(xì)胞灌流槽中,同時(shí)又可以阻止飼養(yǎng)層細(xì)胞和其它雜細(xì)胞進(jìn)入細(xì)胞灌流槽中;待培養(yǎng)的干細(xì)胞可以全部留在細(xì)胞灌流槽中,不會(huì)隨培養(yǎng)液一起流入廢液瓶,提高了出產(chǎn)率。
[0013]設(shè)置第一PH值檢測儀及第二 PH值檢測儀,所述所述第一 PH值檢測儀及第二 PH值檢測儀均為數(shù)顯式PH值檢測儀,可以實(shí)時(shí)直觀的觀察進(jìn)入飼養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)器及細(xì)胞灌流槽的液體的PH值;設(shè)置第一氣體濾頭及第二氣體濾頭,使灌流瓶及廢液瓶與外界壓強(qiáng)相同的同時(shí)還可以隔絕外界空氣中的細(xì)菌污染;設(shè)置第一控速流體推進(jìn)器及第二控速流體推進(jìn)器,可以控制液體的流速;設(shè)置電熱裝置及恒溫控制器,可以調(diào)節(jié)細(xì)胞灌流槽內(nèi)的溫度并保持恒溫;設(shè)置探頭及細(xì)胞存活率分析計(jì)數(shù)器,可以檢測出不同溫度、PH值及流速下細(xì)胞灌流槽中干細(xì)胞的存活率、數(shù)目及濃度數(shù)據(jù),并以此來選擇最佳的溫度、PH值及流速,可提高干細(xì)胞的培養(yǎng)速率。
[0014]綜上所述,本新型結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)合理,可重復(fù)性強(qiáng),操作簡單,降低了污染和飼養(yǎng)層細(xì)胞參雜的機(jī)會(huì),可根據(jù)檢測出干細(xì)胞的存活率、數(shù)目及濃度數(shù)據(jù)來調(diào)節(jié)最佳的溫度、PH值及流速,提高干細(xì)胞的培養(yǎng)速率。
【附圖說明】
[0015]圖1為干細(xì)胞灌流培養(yǎng)系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)示意圖。
[0016]圖中:1-灌流瓶,2-第一氣體濾頭,3-第一連接管,4-第一PH值檢測儀,5_第一嵌入式過濾膜,6-飼養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)器,7-第二連接管,8-第二 PH值檢測儀,9-第一控速流體推進(jìn)器,I O-第二嵌入式過濾膜,11-細(xì)胞存活率分析計(jì)數(shù)器,12-探頭,13-細(xì)胞灌流槽,14-第二控速流體推進(jìn)器,15-第三連接管,16-第二氣體濾頭,17-廢液瓶,18-電熱裝置,19-恒溫控制器,20-細(xì)胞培養(yǎng)板。
【具體實(shí)施方式】
[0017]下面將結(jié)合本實(shí)用新型實(shí)施例中的附圖,對本實(shí)用新型實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述,顯然,所描述的實(shí)施例僅僅是本實(shí)用新型一部分實(shí)施例,而不是全部的實(shí)施例。基于本實(shí)用新型中的實(shí)施例,本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其他實(shí)施例,都屬于本實(shí)用新型保護(hù)的范圍。
[0018]請參閱圖1,一種干細(xì)胞灌流培養(yǎng)系統(tǒng),包括灌流瓶1、飼養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)器6、細(xì)胞灌流槽13和廢液瓶17,所述灌流瓶I瓶口處設(shè)置有第一氣體濾頭2及第一連接管3,所述第一連接管3上設(shè)置有第一PH值檢測儀4,所述第一連接管3另一端浸入到飼養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)器6內(nèi);所述飼養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)器6底部設(shè)置有細(xì)胞培養(yǎng)板20,所述飼養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)器6中部設(shè)置有第一嵌入式過濾膜5;所述飼養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)器6通過第二連接管7與細(xì)胞灌流槽13連通,所述第二連接管7上設(shè)置有第二 PH值檢測儀8及第一控速流體推進(jìn)器9;所述細(xì)胞灌流槽13中部設(shè)置有第二嵌入式過濾膜10,所述細(xì)胞灌流槽13外設(shè)置有電熱裝置18,所述電熱裝置18由設(shè)置于細(xì)胞灌流槽13外的恒溫控制器19控制;所述細(xì)胞灌流槽13內(nèi)設(shè)置有探頭12,所述探頭12與細(xì)胞灌流槽13上端的細(xì)胞存活率分析計(jì)數(shù)器11連接;所述細(xì)胞灌流槽13通過第三連接管15與廢液瓶17連通,所述第三連接管15上設(shè)置有第二控速流體推進(jìn)器14,所述廢液瓶17的瓶口處設(shè)置有第二氣體濾頭16。
[0019]本實(shí)用新型的工作原理是:由于在飼養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)器6中設(shè)置了第一嵌入式過濾膜5,該過濾膜是半透膜,其具體孔徑大小控制在能阻止飼養(yǎng)層細(xì)胞穿過但能實(shí)現(xiàn)液體通過;同樣的,在細(xì)胞灌流槽13中設(shè)置的第二嵌入式過濾膜也是半透膜,其具體孔徑大小也是控制在能阻止待培養(yǎng)干細(xì)胞穿過但能實(shí)現(xiàn)液體通過;將飼養(yǎng)層細(xì)胞和待培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行分開培養(yǎng),在采用半透膜作為過濾裝置后使得飼養(yǎng)層細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子等都可以隨同培養(yǎng)液一起進(jìn)入細(xì)胞灌流槽13中,同時(shí)又可以阻止飼養(yǎng)層細(xì)胞和其它雜細(xì)胞進(jìn)入細(xì)胞灌流槽13中;待培養(yǎng)的干細(xì)胞可以全部留在細(xì)胞灌流槽13中,不會(huì)隨培養(yǎng)液一起流入廢液瓶17,提高了出產(chǎn)率。
[0020]設(shè)置第一 PH值檢測儀4及第二 PH值檢測儀8,所述所述第一 PH值檢測儀4及第二 PH值檢測儀8均為數(shù)顯式PH值檢測儀,可以實(shí)時(shí)直觀的觀察進(jìn)入飼養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)器6及細(xì)胞灌流槽13的液體的PH值;設(shè)置第一氣體濾頭2及第二氣體濾頭16,使灌流瓶I及廢液瓶17與外界壓強(qiáng)相同的同時(shí)還可以隔絕外界空氣中的細(xì)菌污染;設(shè)置第一控速流體推進(jìn)器9及第二控速流體推進(jìn)器14,可以控制液體的流速;設(shè)置電熱裝置18及恒溫控制器19,可以調(diào)節(jié)細(xì)胞灌流槽13內(nèi)的溫度并保持恒溫;設(shè)置探頭12及細(xì)胞存活率分析計(jì)數(shù)器11,可以檢測出不同溫度、PH值及流速下細(xì)胞灌流槽中干細(xì)胞的存活率、數(shù)目及濃度數(shù)據(jù),并以此來選擇最佳的溫度、PH值及流速,可提高干細(xì)胞的培養(yǎng)速率。
[0021]對于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言,顯然本實(shí)用新型不限于上述示范性實(shí)施例的細(xì)節(jié),而且在不背離本實(shí)用新型的精神或基本特征的情況下,能夠以其他的具體形式實(shí)現(xiàn)本實(shí)用新型。因此,無論從哪一點(diǎn)來看,均應(yīng)將實(shí)施例看作是示范性的,而且是非限制性的,本實(shí)用新型的范圍由所附權(quán)利要求而不是上述說明限定,因此旨在將落在權(quán)利要求的等同要件的含義和范圍內(nèi)的所有變化囊括在本實(shí)用新型內(nèi)。不應(yīng)將權(quán)利要求中的任何附圖標(biāo)記視為限制所涉及的權(quán)利要求。
[0022]此外,應(yīng)當(dāng)理解,雖然本說明書按照實(shí)施方式加以描述,但并非每個(gè)實(shí)施方式僅包含一個(gè)獨(dú)立的技術(shù)方案,說明書的這種敘述方式僅僅是為清楚起見,本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)將說明書作為一個(gè)整體,各實(shí)施例中的技術(shù)方案也可以經(jīng)適當(dāng)組合,形成本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解的其他實(shí)施方式。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種干細(xì)胞灌流培養(yǎng)系統(tǒng),包括灌流瓶、飼養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)器、細(xì)胞灌流槽和廢液瓶,其特征在于,所述灌流瓶瓶口處設(shè)置有第一氣體濾頭及第一連接管,所述第一連接管上設(shè)置有第一 PH值檢測儀,所述第一連接管另一端浸入到飼養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)器內(nèi);所述飼養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)器底部設(shè)置有細(xì)胞培養(yǎng)板,所述飼養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)器中部設(shè)置有第一嵌入式過濾膜;所述飼養(yǎng)層細(xì)胞培養(yǎng)器通過第二連接管與細(xì)胞灌流槽連通,所述第二連接管上設(shè)置有第二PH值檢測儀及第一控速流體推進(jìn)器;所述細(xì)胞灌流槽中部設(shè)置有第二嵌入式過濾膜,所述細(xì)胞灌流槽外設(shè)置有電熱裝置,所述電熱裝置由設(shè)置于細(xì)胞灌流槽外的恒溫控制器控制;所述細(xì)胞灌流槽內(nèi)設(shè)置有探頭,所述探頭與細(xì)胞灌流槽上端的細(xì)胞存活率分析計(jì)數(shù)器連接;所述細(xì)胞灌流槽通過第三連接管與廢液瓶連通,所述第三連接管上設(shè)置有第二控速流體推進(jìn)器,所述廢液瓶的瓶口處設(shè)置有第二氣體濾頭。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的干細(xì)胞灌流培養(yǎng)系統(tǒng),其特征在于,所述第一PH值檢測儀及第二 PH值檢測儀均為數(shù)顯式PH值檢測儀。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的干細(xì)胞灌流培養(yǎng)系統(tǒng),其特征在于,所述第一連接管及第二連接管的管口位于第一嵌入式過濾膜上方。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的干細(xì)胞灌流培養(yǎng)系統(tǒng),其特征在于,所述第三連接管的管口位于第二嵌入式過濾膜的上方。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的干細(xì)胞灌流培養(yǎng)系統(tǒng),其特征在于,所述第二連接管的管口及探頭均位于第二嵌入式過濾膜的下方。
【文檔編號(hào)】C12M1/12GK205473830SQ201620085421
【公開日】2016年8月17日
【申請日】2016年1月27日
【發(fā)明人】胡士軍
【申請人】胡士軍