一種核酸快速提取試劑盒的制作方法
【專利摘要】本實用新型公開了一種核酸快速提取試劑盒，屬于試劑盒技術領域。該試劑盒包括盒體，所述盒體內設置有儲存容器，所述儲存容器內設有依次連通的采樣管、裂解管、磁珠管、漂洗管及廢液收集管；所述采樣管內設有用于隔離所述裂解管的第一隔膜，所述裂解管內設有用于隔離所述磁珠管的第二隔膜，所述磁珠管內設有用于隔離所述漂洗管的第三隔膜，所述漂洗管內由上往下依次設有第四隔膜和第五隔膜；所述漂洗管對應于所述第五隔膜上方的位置上設有磁鐵片。該試劑盒不僅結構簡單、操作簡便快捷、提取時間短，而且核酸樣品收率高、核酸樣品污染少。
【專利說明】
一種核酸快速提取試劑盒
技術領域
[0001]本實用新型涉及試劑盒技術領域，具體涉及一種核酸快速提取試劑盒。
【背景技術】
[0002]核酸是遺傳信息的載體，是最重要的生物信息分子，是分子生物學研究的主要對象，因此DNA的提取也應是分子生物學實驗技術中的最重要、最基本的操作。傳統(tǒng)的酚-氯仿純化方法，雖然提取核酸的得率高且適用于大多數(shù)生物樣本，但實驗操作時間長、步驟繁瑣、容易造成DNA的污染，也不利于自動化和多個樣本的同時純化，對微量生物樣品DNA純化亦存在困難;此外，酚、氯仿等有機試劑易造成環(huán)境污染，有損操作者的健康。與傳統(tǒng)的酚-氯仿純化方法相比，磁珠法是近年來發(fā)展迅速的一種DNA純化方法，它具有操作簡單、純化質量高、無酚、氯仿等有機試劑的污染等優(yōu)點，加上磁珠法不需要沉淀、過濾、離心等操作，大大縮短了核酸提取的時間，大大地提高了效率。但是，現(xiàn)有的磁珠法提取核酸也存在以下缺點:由于在離心管中進行提取，需要反復開蓋加液、蓋蓋混勻、再開蓋棄液過程，反復開蓋不僅極其不方便，而且極容易使得被提取物受到污染。因此，有必要開發(fā)出一種適用磁珠法、快速、簡便、易于操作、能夠推廣使用的核酸提取試劑盒產品。
【實用新型內容】
[0003]為了克服現(xiàn)有技術的不足，本實用新型的目的在于提供一種核酸快速提取試劑盒，該試劑盒不僅結構簡單、操作簡便快捷、提取時間短，而且核酸樣品收率高、核酸樣品污染少。
[0004]為解決上述問題，本實用新型所采用的技術方案如下:
[0005]—種核酸快速提取試劑盒，其包括盒體，所述盒體內設置有儲存容器，所述儲存容器內設有依次連通的采樣管、裂解管、磁珠管、漂洗管及廢液收集管;所述采樣管內設有用于隔離所述裂解管的第一隔膜，所述裂解管內設有用于隔離所述磁珠管的第二隔膜，所述磁珠管內設有用于隔離所述漂洗管的第三隔膜，所述漂洗管內由上往下依次設有第四隔膜和第五隔膜;所述漂洗管對應于所述第五隔膜上方的位置上設有磁鐵片。
[0006]為了便于吸取含有核酸的洗脫液，優(yōu)選地，所述漂洗管的底部設有磁鐵片。
[0007]為了使液體完全地流向下一管，優(yōu)選地，所述采樣管、裂解管、磁珠管的底部均設有導流支撐塊。
[0008]優(yōu)選地，為了防止廢液收集管內的廢液回流至漂洗管，所述漂洗管與所述廢液收集管的連通處高于所述第五隔膜，所述漂洗管對應于所述第五隔膜上方的內壁上固設有導流安裝塊，所述磁鐵片設于所述導流安裝塊上。
[0009]作為本實用新型的優(yōu)選實施方式，所述第四隔膜在所述漂洗管上的位置高于所述漂洗管與所述廢液收集管的連通處。
[0010]為了便于液體完全地流向下一管，進一步地，所述采樣管、裂解管、磁珠管及漂洗管的高度依次增大;所述漂洗管與所述磁珠管的高度差大于所述磁珠管與所述裂解管的高度差。
[0011]為了進一步地防止廢液收集管內的廢液回流至漂洗管，優(yōu)選地，所述廢液收集管的高度大于或等于所述漂洗管的高度。
[0012]為了便于工作人員操作，優(yōu)選地，所述儲存容器的一側設有手持部。
[0013]作為本實用新型的優(yōu)選實施方式，所述儲存容器上設有封口膜。
[0014]為了便于刺破隔膜和提高本實用新型的適用范圍，優(yōu)選地，所述盒體上還設有洗耳球和若干吸頭。
[0015]相比現(xiàn)有技術，本實用新型的有益效果在于:
[0016]1.采樣管、裂解管、磁珠管、漂洗管及廢液收集管依次連通，便于加、取液和棄液，不需要逐管反復開蓋加液、棄液等繁瑣的操作，克服了原技術逐管反復開蓋加液和棄液等繁瑣的操作，提取時間縮短至10_15min，可一次性大批量快速提取樣品的核酸，大大提高工作效率；
[0017]2.各種試劑分區(qū)、連續(xù)存放，免去了分別添加試劑的麻煩，使得提取過程易于操作、簡單快捷，不僅可以滿足實驗室需要，還可以滿足醫(yī)院等常規(guī)環(huán)境常見病原菌核酸的快速提?。?br>[0018]3.耗材少，優(yōu)于傳統(tǒng)的試劑盒，其提取成本是深孔板法的1/10，提取過程無需離心，無需依賴其它大型儀器；
[0019]4.由于本實用新型能夠很好地避免取液、棄液等繁瑣操作，使得提取純化過程中所受到的污染大大減少，從而使得核酸提取的純度高、量大；另外，本實用新型的新結構使得核酸的提取、分離、純化一體化，真正實現(xiàn)從樣品到產品的過程。
【附圖說明】
[0020]圖1為本實用新型所述的試劑盒的整體示意圖；
[0021 ]圖2為本實用新型所述的儲存容器的結構示意圖；
[0022]其中，1、盒體;2、儲存容器;21、采樣管;211、第一隔膜;22、裂解管;221、第二隔膜；23、磁珠管；231、第三隔膜;24、漂洗管；241、第四隔膜;242、第五隔膜;25、廢液收集管；26、手持部;3、磁鐵片;4、導流支撐塊;5、導流安裝塊;6、封口膜;7、吸頭;8、洗耳球。
【具體實施方式】
[0023]下面結合附圖和【具體實施方式】對本實用新型作進一步詳細說明。
[0024]如圖1?圖2所示，為本實用新型所述的一種核酸快速提取試劑盒，其包括盒體I，盒體I的一側上鉸接有盒蓋，盒蓋可相對于盒體I打開或閉合鎖緊，使得盒體I內的試劑或工具在運輸過程中不會受到污染。具體地，盒體I內設置有用于分類地儲存各種提純試劑的儲存容器2，該儲存容器2內設有依次連通的采樣管21、裂解管22、磁珠管23、漂洗管24及廢液收集管25，該儲存容器2的頂部密封設有用于防止試劑被污染的封口膜6。
[0025]其中，采樣管21內設有用于隔離裂解管22的第一隔膜211，即第一隔膜211位于采樣管21與裂解管22的連通處的上方，在采樣管21對應于第一隔膜211與封口膜6之間的位置內裝有混合酶工作液，采樣管21主要用于待提純核酸的采樣、孵育。裂解管22內設有用于隔離磁珠管23的第二隔膜221，即第二隔膜221位于裂解管22與磁珠管23的連通處的上方，在裂解管22對應于第二隔膜221與封口膜6之間的位置內裝有裂解液，裂解管22主要用于破裂細胞，使得蛋白質變性沉淀、核酸被釋放到水相。磁珠管23內設有用于隔離漂洗管24的第三隔膜231，即第三隔膜231位于磁珠管23與漂洗管24的連通處的上方，在磁珠管23對應于第三隔膜231與封口膜6之間的位置內裝有磁珠工作液，磁珠管23主要用于磁珠在微觀界面上與核酸分子特異性的識別和高效結合。漂洗管24內由上往下依次設有第四隔膜241和第五隔膜242，第四隔膜241位于漂洗管24與廢液收集管25的連通處的上方，第四隔膜241與封口膜6之間的位置上裝有抑制劑和漂洗液，主要用于終止裂解過程并漂洗;第五隔膜242靠近漂洗管24的底部并位于漂洗管24與廢液收集管25的連通處的下方，第五隔膜242與漂洗管24底部之間的位置內裝有洗脫液，用于將吸附在磁珠上的核酸洗脫下來。具體地，封口膜6可被撕破，封口膜6可以是一體的，也可以是每個管口的位置分別設有一塊封口膜6;所有的隔膜均可被刺破。
[0026]為了使液體完全地流向下一管，采樣管21、裂解管22、磁珠管23的底部均設有導流支撐塊4，該導流支撐塊4分別固定地設置于管的底部并位于連通處，該導流支撐塊4在橫截面上呈直角三角形，三角形的斜邊靠近連通處，因此對液體具有很好導流作用，能夠有效地避免液體部分滯留于管的底部造成浪費，有效提高試劑的利用率。
[0027]為了防止廢液收集管25內的廢液回流至漂洗管24，漂洗管24與廢液收集管25的連通處高于第五隔膜242。漂洗管24對應于第五隔膜242上方的內壁上固設有導流安裝塊5，該導流安裝塊5包括第一導流安裝塊和第二導流安裝塊，第一導流安裝塊的斜邊和第二導流安裝塊的斜邊相對，第一導流安裝塊和第二導流安裝塊之間設有用于刺破第五隔膜242的間隙。第一導流安裝塊和第二導流安裝塊上均設有用于吸附磁珠的磁鐵片3。進一步地，為了便于吸取含有核酸的洗脫液，漂洗管24的底部也設有磁鐵片3，磁珠吸附于磁鐵片3上不會影響吸取核酸。
[0028]為了便于液體完全地流向下一管，進一步地，采樣管21、裂解管22、磁珠管23及漂洗管24的高度依次增大；漂洗管24與磁珠管23的高度差大于磁珠管23與裂解管22的高度差。為了進一步地防止廢液收集管25內的廢液回流至漂洗管24，廢液收集管25的高度大于或等于漂洗管24的高度。
[0029]為了便于工作人員操作，儲存容器2的一側設有手持部26。為了便于刺破隔膜，盒體I上還設有若干吸頭7，優(yōu)選地，該吸頭7為ΙΟΟΟμΙ移液槍的吸頭7，當然，也可以是注射器等工具，只要能夠實現(xiàn)刺破隔膜并不會帶入污染即可。為了提高本實用新型的適用范圍，盒體I上還設有洗耳球8，也可以是其他能夠實現(xiàn)吹打液體的工具。由于本試劑盒配置了吸頭7和洗耳球8，使得本實用新型能夠很好地適用于醫(yī)院等常規(guī)非實驗環(huán)境常見病原菌核酸的快速提取。為了便于工作人員觀察提取的具體情況，儲存容器2由透明的材料制成。本實用新型的儲存容器2、吸頭7等均是一次性的。
[0030]本實用新型的使用過程如下:
[0031]首先，在盡可能潔凈的環(huán)境下撕去封口膜6，然后取待提取樣品如血培養(yǎng)的液體培養(yǎng)基或者真菌或細菌的菌液等ΙΟΟμΙ加入采樣管21中，用洗耳球8吹打混勻后，37°C下孵育1min;接著用吸頭7刺破第一隔膜211靠近裂解管22的一側，使得待提取樣品和混合酶工作液的混合液沿著導流支撐塊4的斜邊緩緩流入裂解管22中，使得裂解管22中的裂解液與待提純樣品混勻充分接觸、反應，使細胞破裂，使得蛋白質變性沉淀、核酸被釋放到水相;然后更換吸頭7并刺破裂解管22內的第二隔膜221，使混合液流入磁珠管23并與磁珠工作液充分混勻，使得核酸吸附在磁珠上;更換吸頭7并刺破磁珠管23內的第三隔膜231，使得磁珠和混合液流向漂洗管24，此時磁珠會吸附在磁鐵片3上，混合液流向廢液收集管25內；接著更換吸頭7刺破第四隔膜241，使得抑制劑和漂洗液往下流動并沖洗吸附在磁鐵上的磁珠，終止裂解過程并洗掉蛋白質等其他物質，最后略微傾斜儲存容器2使得抑制劑和漂洗液流入廢液收集管25;然后更換吸頭7并刺破第五隔膜242，使用洗耳球8反復吹打漂洗管24底部的洗脫液，使洗脫液上沖，使得吸附在磁珠上的核酸洗脫下來，即獲得待檢樣品的核酸。最后吸取漂洗管24底部的含有核酸的液體，進行后續(xù)實驗。
[0032]綜上所述，本實用新型由于采用采樣管、裂解管、磁珠管、漂洗管及廢液收集管依次連通的結構，使得提取過程不需要逐管反復開蓋加液、棄液等繁瑣的操作，克服了逐管反復開蓋加液和棄液等繁瑣的操作，提取時間縮短至10_15min，可一次性大批量快速提取樣品的核酸，大大提高了工作效率。
[0033]上述實施方式僅為本實用新型的優(yōu)選實施方式，不能以此來限定本實用新型保護的范圍，本領域的技術人員在本實用新型的基礎上所做的任何非實質性的變化及替換均屬于本實用新型所要求保護的范圍。
【主權項】
1.一種核酸快速提取試劑盒，其特征在于:其包括盒體，所述盒體內設置有儲存容器，所述儲存容器內設有依次連通的采樣管、裂解管、磁珠管、漂洗管及廢液收集管;所述采樣管內設有用于隔離所述裂解管的第一隔膜，所述裂解管內設有用于隔離所述磁珠管的第二隔膜，所述磁珠管內設有用于隔離所述漂洗管的第三隔膜，所述漂洗管內由上往下依次設有第四隔膜和第五隔膜;所述漂洗管對應于所述第五隔膜上方的位置上設有磁鐵片。2.根據(jù)權利要求1所述的試劑盒，其特征在于:所述漂洗管的底部設有磁鐵片。3.根據(jù)權利要求1所述的試劑盒，其特征在于:所述采樣管、裂解管、磁珠管的底部均設有導流支撐塊。4.根據(jù)權利要求1所述的試劑盒，其特征在于:所述漂洗管與所述廢液收集管的連通處高于所述第五隔膜，所述漂洗管對應于所述第五隔膜上方的內壁上固設有導流安裝塊，所述磁鐵片設于所述導流安裝塊上。5.根據(jù)權利要求1?4中任一項所述的試劑盒，其特征在于:所述第四隔膜在所述漂洗管上的位置高于所述漂洗管與所述廢液收集管的連通處。6.根據(jù)權利要求1?4中任一項所述的試劑盒，其特征在于:所述采樣管、裂解管、磁珠管及漂洗管的高度依次增大;所述漂洗管與所述磁珠管的高度差大于所述磁珠管與所述裂解管的高度差。7.根據(jù)權利要求1?4中任一項所述的試劑盒，其特征在于:所述廢液收集管的高度大于或等于所述漂洗管的高度。8.根據(jù)權利要求1?4中任一項所述的試劑盒，其特征在于:所述儲存容器的一側設有手持部。9.根據(jù)權利要求1?4中任一項所述的試劑盒，其特征在于:所述儲存容器上設有封口膜。10.根據(jù)權利要求1?4中任一項所述的試劑盒，其特征在于:所述盒體上還設有洗耳球和若干吸頭。
【文檔編號】C12N15/10GK205473832SQ201620217297
【公開日】2016年8月17日
【申請日】2016年3月21日
【發(fā)明人】許朋
【申請人】許朋