用于從脂肪乳糜中快速分離間充質(zhì)干細胞的試劑盒的制作方法
【專利摘要】本實用新型公開了一種用于從脂肪乳糜中快速分離間充質(zhì)干細胞的試劑盒，包括盒蓋和盒體，在盒蓋內(nèi)側設置有用于放置一次性器械耗材的收納袋，盒體內(nèi)水平設置有隔板，隔板上設置有3個獨立的插孔，放置洗滌液的250mL洗滌瓶、放置消化酶的30mL消化酶瓶和放置原代細胞培養(yǎng)基的250mL培養(yǎng)基瓶分別插在3個獨立的插孔中，所述盒蓋和盒體的一側鉸接形成翻蓋結構。本實用新型使用方便，省去準備時間，洗滌液可以降低細菌污染率，采用細胞消化酶得到的細胞純度高，收獲細胞數(shù)更多增殖更快，一般7天即可完成原代細胞培養(yǎng)。
【專利說明】
用于從脂肪乳糜中快速分離間充質(zhì)干細胞的試劑盒
技術領域
[0001]本實用新型涉及一種分離間充質(zhì)干細胞的試劑盒，尤其是一種用于從脂肪乳糜中快速分離間充質(zhì)干細胞的試劑盒。
【背景技術】
[0002]吸脂(Liposuct1n)，為醫(yī)書中的抽取脂肪，吸脂手術是利用器械通過皮膚小切口伸入皮下脂肪層將脂肪碎塊吸出以達到吸收脂肪的目，適用于體態(tài)整形。
[0003]吸脂手術屬于外科體形雕塑手術中的一種，原理是通過負壓吸引的方法把身體某一部位多余的脂肪給吸出來，以達到局部迅速瘦體的目的。全身吸脂的常見部位有:面部、雙下巴、頸部、肩背、四肢、手腳、上下腹部、側腰、上臀、臀部縮小及提臀等。
[0004]傳統(tǒng)的吸脂美容已經(jīng)越來越普遍，脂肪乳糜是抽脂術廢棄物。但是目前越來越多的研究將脂肪分離間充質(zhì)干細胞用于臨床研究。傳統(tǒng)的脂肪乳糜中的間充質(zhì)干細胞分離方法已經(jīng)比較成熟，但是分離過程所用試劑需要前期配制和準備工作，而且過程比較復雜，所需要的試劑耗材較多，分離耗時較長且原代生長緩慢，處理過程易污染。
【實用新型內(nèi)容】
[0005]本實用新型所要解決的技術問題是，提供一種提高分離速度，并且縮短分離前期試劑配制和準備工作所耗時間，明顯降低標本污染率的用于從脂肪乳糜中快速分離間充質(zhì)干細胞的試劑盒。
[0006]為了解決上述技術問題，本實用新型采用的技術方案是:一種用于從脂肪乳糜中快速分離間充質(zhì)干細胞的試劑盒，包括盒蓋和盒體，在盒蓋內(nèi)側設置有用于放置一次性器械耗材的收納袋，盒體內(nèi)水平設置有隔板，隔板上設置有3個獨立的插孔，放置洗滌液的250mL洗滌瓶、放置消化酶的30mL消化酶瓶和放置原代細胞培養(yǎng)基的250mL培養(yǎng)基瓶分別插在3個獨立的插孔中，一次性器械耗材的收納袋分為兩個區(qū)域，一個區(qū)域中裝有一次性無菌鑷子2把、一次性無菌平皿I個、一次性無菌10um細胞篩網(wǎng)I個，另一區(qū)域裝有一次性50mL無菌離心管2個、一次性250mL無菌離心管2個、一次性1ml無菌刻度吸管5支。
[0007]所述盒蓋和盒體的一側鉸接形成翻蓋結構。
[0008]本實用新型的有益效果是:使用方便，省去準備時間，洗滌液可以降低細菌污染率，采用細胞消化酶得到的細胞純度高，收獲細胞數(shù)更多增殖更快，一般7天即可完成原代細胞培養(yǎng)。傳代后，一般2-3天細胞密度即可達到80%，為利用脂肪乳糜中的間充質(zhì)干細胞進行進一步科學研究提供了豐富的來源。
【附圖說明】
[0009]圖1是本實用新型的用于從脂肪乳糜中快速分離間充質(zhì)干細胞的試劑盒的結構示意圖。
【具體實施方式】
[0010]下面結合附圖和【具體實施方式】對本實用新型作進一步詳細說明:
[0011]如圖1所述，本實用新型的用于從脂肪乳糜中快速分離間充質(zhì)干細胞的試劑盒，包括盒蓋I和盒體2，在盒蓋內(nèi)側設置有用于放置一次性器械耗材的收納袋3，盒體2內(nèi)水平設置有隔板7，隔板7上設置有3個獨立的插孔，放置洗滌液的250mL洗滌瓶4、放置消化酶的30mL消化酶瓶5和放置原代細胞培養(yǎng)基的250mL培養(yǎng)基瓶6分別插在3個獨立的插孔中，一次性器械耗材的收納袋3分為兩個區(qū)域，一個區(qū)域中裝有一次性無菌鑷子2把、一次性無菌平皿I個、一次性無菌10um細胞篩網(wǎng)I個，另一區(qū)域裝有一次性50mL無菌離心管2個、一次性250mL無菌離心管2個、一次性1ml無菌刻度吸管5支。
[0012]所述盒蓋I和盒體2的一側鉸接形成翻蓋結構。
[0013]本實用新型徹底解決使用者洗刷器械后的內(nèi)毒素殘留問題，提供洗滌液、消化酶和培養(yǎng)基提高脂肪乳糜分離速度，并且縮短分離前期配液和洗刷器械所耗時間，預防標本污染。
[0014]所述250ml洗滌液含有120U/mL青霉素、120U/mL鏈霉素、50mg/mL溶菌酶的生理鹽水溶液。
[0015]消化酶30mL為質(zhì)量/體積百分比濃度為0.5 %的IV型膠原酶和10A的I型膠原酶溶液。
[0016]250mL原代細胞培養(yǎng)基，為含有80ng/mL EGF、80ng/mL bFGF和50ng/mLaFGF、體積分數(shù)為1 %胎牛血清的AMEM溶液。
[0017]本實用新型進行脂肪乳糜間充質(zhì)干細胞快速分離的步驟如下:
[0018]步驟一:打開50ml—次性無菌離心管和一次性無菌鑷子。
[0019]步驟二:打開一次性濾網(wǎng)，用一次性1mL刻度吸管將乳糜吸出過濾，將留下的脂肪組織放入50mL離心管。
[0020]步驟三:打開洗滌液，加入至一次性50mL離心管中，大約45mL。
[0021 ]步驟四:用一次性無菌鑷子將脂肪乳糜固體組織放入步驟三中的裝有洗滌液的離心管中反復顛倒洗滌。洗滌后1200r/min，5min離心，用一次性1mL無菌刻度吸管吸棄上清液，重復洗滌二次。
[0022]步驟五:將消化酶取出，將組織放入50mL離心杯中，按照每克期待組織ImL消化酶的比例，加入消化酶后，放入搖床中37 °C，140r/miη消化20?30miη。
[0023]步驟六:取出一次性細胞篩網(wǎng)，再將洗滌液取出，消化后，向離心管中加入40mL洗滌液洗滌后經(jīng)過一次性細胞篩網(wǎng)過濾，將固體過濾后，將細胞懸液1200r/min，5min離心，重復離心操作一次。
[0024]步驟七:培養(yǎng)基取出，加入離心后沉淀物中，充分混勻后加入培養(yǎng)瓶中。待24小時后換液。
[0025]綜上所述，本實用新型的內(nèi)容并不局限在上述的實施例中，相同領域內(nèi)的有識之士可以在本實用新型的技術指導思想之內(nèi)可以輕易提出其他的實施例，但這種實施例都包括在本實用新型的范圍之內(nèi)。
【主權項】
1.一種用于從脂肪乳糜中快速分離間充質(zhì)干細胞的試劑盒，包括盒蓋(I)和盒體(2)，其特征在于，在盒蓋(I)內(nèi)側設置有用于放置一次性器械耗材的收納袋(3)，盒體(2)內(nèi)水平設置有隔板(7)，隔板(7)上設置有3個獨立的插孔，放置洗滌液的250mL洗滌瓶(4)、放置消化酶的30mL消化酶瓶(5)和放置原代細胞培養(yǎng)基的250mL培養(yǎng)基瓶(6)分別插在3個獨立的插孔中，一次性器械耗材的收納袋(3)分為兩個區(qū)域，一個區(qū)域中裝有一次性無菌鑷子2把、一次性無菌平皿I個、一次性無菌10um細胞篩網(wǎng)I個，另一區(qū)域裝有一次性50mL無菌離心管2個、一次性250mL無菌離心管2個、一次性1ml無菌刻度吸管5支。2.根據(jù)權利要求1所述的用于從脂肪乳糜中快速分離間充質(zhì)干細胞的試劑盒，其特征在于，所述盒蓋(I)和盒體(2)的一側鉸接形成翻蓋結構。
【文檔編號】C12M1/12GK205653447SQ201620391385
【公開日】2016年10月19日
【申請日】2016年5月3日 公開號201620391385.3, CN 201620391385, CN 205653447 U, CN 205653447U, CN-U-205653447, CN201620391385, CN201620391385.3, CN205653447 U, CN205653447U
【發(fā)明人】劉俊江, 魯振宇, 韓洪起, 張冰晶, 秦臻, 徐悅
【申請人】天津普瑞賽爾生物科技有限公司