專利名稱：一種從烏飯樹葉中提取天然黑色素的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種天然色素的提取方法，特別是一種從烏飯樹葉中提取天然黑色素的方法。
背景技術(shù)：
植物中的黑色素具有促進視紅素再合成、Vp樣機能、改善血液微循環(huán)、抗?jié)?、抗炎癥、抗衰老等多種藥理活性。它包括花青素，黃酮類色素等多種色素成分，黑色素提取主要是溶劑提取法。
《食品與發(fā)酵工業(yè)》2004年第30卷第9期上發(fā)表王立、姚源惠的文章“烏飯樹葉中黃酮類色素的提取與分離純化”，確立黃酮類色素的最佳提取條件提取次數(shù)2次，乙醇體積分數(shù)60％，溫度60℃，固液比1g∶35ml。
《中國野生植物資源》1997年第22卷第4期上發(fā)表胡志杰、姜萍等的文章“烏飯樹葉色素提取工藝及色素性質(zhì)再研究”，確定以55％的乙醇作溶劑，55℃提取，總提取時間不超過6.5小時為最適宜條件。
發(fā)明專利“用黑芝麻提取黑色素的方法”(申請?zhí)?1104469.8)，介紹了用堿溶液浸提黑芝麻中的黑色素的方法。
《中國糧油學(xué)報》1998年第13卷第2期上發(fā)表張名位、孫玲等的文章“黑米、黑大豆、黑芝麻中天然色素性質(zhì)的比較研究”，介紹了鹽酸乙醇溶劑結(jié)合柱層析提取黑色素的方法。
上述黑色素的提取方法均未采用酶制劑，影響黑色素的提取率。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的，是利用酶制劑結(jié)合溶劑提取烏飯樹葉中黑色素，提高黑色素的提取率。
本發(fā)明的一種從烏飯樹葉中提取天然黑色素的方法，原料為烏飯樹葉，試劑有果膠酶(30000IU)，纖維素酶(15000IU)，95％乙醇(食品級)，檸檬酸(食品級)，磷酸氫二鈉(食品級)。
本發(fā)明的一種從烏飯樹葉中提取天然黑色素的方法，由以下步驟組成
(1)備料將新鮮的烏飯樹葉干燥、粉碎，40目過篩，得到烏飯樹葉干粉備用。
(2)配制緩沖溶液將0.1mol/L檸檬酸溶液與0.2mol/L磷酸氫二鈉溶液按1∶1.5～2的體積比混合，再加水稀釋2倍，配制成緩沖溶液。
(3)配制酶液混合緩沖溶液、果膠酶和纖維素酶，并充分攪拌使其完全溶解，從而形成均勻的酶液；緩沖溶液的用量按烏飯樹葉干粉重量(kg)∶緩沖溶液體積(L)＝1∶15～30的比例計算；果膠酶和纖維素酶的用量為每L的緩沖溶液加入0.1～0.3g果膠酶與0.1～0.3g纖維素酶。
(4)投料按烏飯樹葉干粉重量(kg)∶緩沖溶液體積(L)＝1∶15～30的比例，將烏飯樹葉干粉加入酶液中。
(5)酶解將烏飯樹葉干粉與酶液攪拌均勻后，在50～55℃的恒溫水浴鍋內(nèi)避光保溫，每30min攪動一次，酶解3～4h，生成酶解液和殘渣的混合物。
(6)提取按每kg烏飯樹葉干粉加入15～30L的75-97％乙醇的方法，將75-97％乙醇加入上述酶解液和殘渣混合物中，在60～65℃條件下提取2～3h，經(jīng)過濾，得到黑色提取液。
(7)成品置黑色提取液于60～70℃的烘箱中烘至恒重，得到天然黑色素。
本發(fā)明的一種從烏飯樹葉中提取天然黑色素的方法，以天然植物烏飯樹葉為主要原料，采用酶制劑結(jié)合溶劑提取天然黑色素，其優(yōu)點是天然黑色素產(chǎn)品安全性好、質(zhì)量佳(見表1)，黑色素提取率較醇提取法高30～40％，酶制劑的用量少，而且工藝簡單，操作方便，效率高，適合工業(yè)化生產(chǎn)。使用果膠酶和纖維素酶可以破壞植物原料中以纖維素為主的細胞壁結(jié)構(gòu)及其細胞間相連的果膠物質(zhì)，使提取傳質(zhì)阻力減小，使內(nèi)容物黑色素成分易于溶出。乙醇溶液作為醇溶性黑色素的提取溶劑。檸檬酸-磷酸緩沖溶液起到調(diào)節(jié)溶液pH值的作用。按本發(fā)明的方法配制的緩沖溶液，經(jīng)檢測其pH＝6，可以保證酶制劑作用的最佳效果。
取本發(fā)明的黑色素提取液與醇提法得到的黑色素提取液，均稀釋100倍，用紫外分光光度儀，在色素的最大吸收波長243nm下，測定其吸光值(見表1)。采用本發(fā)明的酶法結(jié)合溶劑提取的黑色素，其吸光值為0.538，明顯高于醇提法提取黑色素的吸光值0.417；經(jīng)計算提取率較醇提取法高30％。
表1 酶法結(jié)合溶劑提取與醇提法提取的吸光值對比

具體實施例為了充分公開本發(fā)明的一種從烏飯樹葉中提取天然黑色素的方法，下面結(jié)合實施例加以說明。
實施例一種從烏飯樹葉中提取天然黑色素的方法取采收期為5-6月的天然烏飯樹葉為原料，提取方法包括以下步驟(1)置新鮮的烏飯樹葉于65℃烘箱中烘干，用高速組織搗碎機粉碎，40目過篩，得到烏飯樹葉干粉備用。
(2)取0.1mol/L檸檬酸溶液180ml，0.2mol/L磷酸氫二鈉溶液320ml，混合并稀釋定容至1000ml，配制成緩沖溶液。
(3)取250ml的緩沖溶液，加入0.05g果膠酶與0.075g纖維素酶，攪拌使其完全溶解，形成均勻的酶液。
(4)在上述的酶液中加入10g的烏飯樹葉干粉。
(5)攪拌均勻后于50℃的恒溫水浴鍋內(nèi)避光保溫，每30min攪動一次，酶解3h，生成酶解液和殘渣的混合物。
(6)在酶解液和殘渣的混合物中加入250ml95％乙醇，于60℃條件下提取2h，經(jīng)過濾得黑色提取液。
(7)置黑色提取液于65℃的烘箱中烘至恒重，得到天然黑色素。
權(quán)利要求
1.一種從烏飯樹葉中提取天然黑色素的方法，其特征在于由以下步驟組成(1)備料將新鮮的烏飯樹葉干燥、粉碎，40目過篩，得到烏飯樹葉干粉備用；(2)配制緩沖溶液將0.1mol/L檸檬酸溶液與0.2mol/L磷酸氫二鈉溶液按1∶1.5～2的體積比混合，再加水稀釋2倍，配制成緩沖溶液；(3)配制酶液混合緩沖溶液、果膠酶和纖維素酶，并充分攪拌使其完全溶解，從而形成均勻的酶液；緩沖溶液的用量按烏飯樹葉干粉重量(kg)∶緩沖溶液體積(L)＝1∶15～30的比例計算；果膠酶和纖維素酶的用量為每L的緩沖溶液加入0.1～0.3g果膠酶與0.1～0.3g纖維素酶；(4)投料按烏飯樹葉干粉重量(kg)∶緩沖溶液體積(L)＝1∶15～30的比例，將烏飯樹葉干粉加入酶液中；(5)酶解將烏飯樹葉干粉與酶液攪拌均勻后，在50～55℃的恒溫水浴鍋內(nèi)避光保溫，每30min攪動一次，酶解3～4h，生成酶解液和殘渣的混合物；(6)提取按每kg烏飯樹葉干粉加入15～30L的75-97％乙醇的方法，將75-97％乙醇加入上述酶解液和殘渣混合物中，在60～65℃條件下提取2～3h，經(jīng)過濾，得到黑色提取液；(7)成品置黑色提取液于60～70℃的烘箱中烘至恒重。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從烏飯樹葉中提取天然黑色素的方法，其特征在于由以下步驟組成(1)置新鮮的烏飯樹葉于65℃烘箱中烘干，用高速組織搗碎機粉碎，40目過篩，得到烏飯樹葉干粉備用；(2)取0.1mol/L檸檬酸溶液180ml，0.2mol/L磷酸氫二鈉溶液320ml，混合并稀釋定容至1000ml，配制成緩沖溶液；(3)取250ml的緩沖溶液，加入0.05g果膠酶與0.075g纖維素酶，攪拌使其完全溶解，形成均勻的酶液；(4)在上述的酶液中加入10g的烏飯樹葉干粉；(5)攪拌均勻后于50℃的恒溫水浴鍋內(nèi)避光保溫，每30min攪動一次，酶解3h，生成酶解液和殘渣的混合物；(6)在酶解液和殘渣的混合物中加入250ml95％乙醇，于60℃條件下提取2h，經(jīng)過濾得黑色提取液；(7)置黑色提取液于65℃的烘箱中烘至恒重。
3.按照權(quán)利要求1或2的方法制備的天然黑色素。
全文摘要
一種從烏飯樹葉中提取天然黑色素的方法，以天然植物烏飯樹葉為主要原料，采用酶制劑結(jié)合溶劑提取天然黑色素。制備方法包括以下步驟備料、配制緩沖溶液、配制酶液、投料、酶解、提取和成品。利用本發(fā)明的方法制備的天然黑色素，產(chǎn)品安全性好、質(zhì)量佳，酶制劑的用量少，黑色素提取率較醇提取法高30～40％，而且工藝簡單，操作方便，效率高，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號C09B61/00GK1939979SQ200510104210
公開日2007年4月4日 申請日期2005年9月30日 優(yōu)先權(quán)日2005年9月30日
發(fā)明者陳紹軍, 余清 申請人:福建農(nóng)林大學(xué)