專利名稱：山茱萸果核中抗氧化物的提取方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種從山茱萸果核中制備抗氧化物的方法。
背景技術(shù)：
抗氧化劑在防止和延緩自然氧化的過程中起著十分關(guān)鍵的作用，因此在實(shí)際生活 中應(yīng)用較為廣泛?？寡趸瘎膩碓瓷戏譃楹铣珊吞烊粌纱箢惪寡趸瘎?。由于使用合成抗氧 化劑的限制和公眾健康意識(shí)的提高，在抗氧劑的研究方面，人們將更多的目光轉(zhuǎn)向了天然 抗氧劑。一般來說，由于天然抗氧化劑安全、環(huán)境友好，消費(fèi)者更傾向于使用天然抗氧化劑。 此外，天然抗氧化劑在預(yù)防性和治療性藥物中的應(yīng)用也變得十分重要。山茱萸為落葉喬木或小喬木，在我國(guó)河南、浙江、陜西等省有大量的分布。山茱萸 的干燥成熟果肉為一種常用中藥，具有補(bǔ)益肝腎，澀精固脫的作用，臨床用于眩暈耳鳴，腰 膝酸痛，陽(yáng)痿遺精，遺尿尿頻，崩漏帶下，大汗虛脫，內(nèi)熱消渴等癥。山茱萸果肉是多種中成 藥的主要原料藥，如六味地黃丸等。因此，每年山茱萸果肉在我國(guó)消費(fèi)量巨大，而在山茱萸 果肉加工制備過程中產(chǎn)生的大量果核在實(shí)際生產(chǎn)中卻被作為廢物丟掉。山茱萸果核中含有 大量的多酚類成分，該類成分具有良好的抗氧化作用。目前，以山茱萸果核為原料有針對(duì)性 的從中制備純天然抗氧化物的方法還未發(fā)現(xiàn)。

發(fā)明內(nèi)容
針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù)中存在的不足，本發(fā)明的目的在于提供一種從山茱萸果核中制 備抗氧化物的方法。本發(fā)明的目的是通過如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)取干燥的山茱萸果核，適當(dāng)粉碎，將其置于滲漉罐內(nèi)，用沸程60 90°C的石油醚 進(jìn)行滲漉提取，然后用丙酮進(jìn)行滲漉提取，收集丙酮滲漉液，回收溶劑，得總提取物；總提取 物加水分散，用乙酸乙酯進(jìn)行萃取，分取乙酸乙酯萃取液，回收溶劑，干燥，即得抗氧化物。上述技術(shù)方案中，滲漉用沸程60 90°C石油醚的用量為藥材重量的5 10倍體 積份。上述技術(shù)方案中，滲漉用丙酮的用量為藥材重量的5 10倍體積份。上述技術(shù)方案中，總提取物加水分散時(shí)，加水的體積為藥材重量的0. 5 2倍體積 份。上述技術(shù)方案中，每次萃取時(shí)，乙酸乙酯的體積為藥材重量的1 3倍體積份。上述技術(shù)方案中，乙酸乙酯萃取的次數(shù)為3 5次。上述技術(shù)方案中，以沒食子酸丙酯為對(duì)照品，所得抗氧化物中多酚類成分的含量 為50 80%。上述技術(shù)方案中，藥材和溶劑的重量體積比的單位為kg/L。采用本方法制備山茱萸果核抗氧化物，制備工藝路線簡(jiǎn)單，操作簡(jiǎn)便，適合于工業(yè) 化大規(guī)模生產(chǎn)。
下面實(shí)驗(yàn)例用于進(jìn)一步說明但不限于本發(fā)明。實(shí)驗(yàn)例1 山茱萸果核抗氧化物對(duì)DPPH自由基清除率的測(cè)定溶液配制DPPH溶液的配制精密稱取DPPH 9. 2mg置于IOOmL容量瓶中，用無水 乙醇定容至刻度；樣品溶液的配制精密稱取5. Omg山茱萸果核抗氧化物，置于50mL容量 瓶中，用無水乙醇定容至刻度。樣品測(cè)定精密移取0. ImL的樣品液置于試管中，加50 %的乙醇至5mL，再加入 2mLDPPH溶液，加塞搖勻，置于暗處?kù)o置30min后，于517nm處測(cè)定吸光度值A(chǔ)。將所得數(shù)據(jù)帶入下列公式計(jì)算其抑制率抑制率=[I-(Ai-Aj)/Ac]X 100%其中Ai為待測(cè)樣品與DPPH自由基溶液混合后在波長(zhǎng)517nm處的吸光度值；Aj為 待測(cè)樣品液與溶劑混合后在波長(zhǎng)517nm處的吸光度值；Ac為DPPH自由基溶液與溶劑混合 后在波長(zhǎng)517nm處的吸光度值。結(jié)果山茱萸果核抗氧化物對(duì)DPPH自由基清除率的IC5tl為1.沈μ g/mL。實(shí)驗(yàn)例2 山茱萸果核抗氧化物中多酚類成分的含量測(cè)定溶液配制對(duì)照品(沒食子酸丙酯)溶液的配制稱取一定量的沒食子酸丙酯， 置于50ml的量瓶中，加無水乙醇適量超聲溶解，再用無水乙醇定容至刻度，制成濃度為 0. 608mg/mL的溶液；樣品溶液的配置稱取一定量山茱萸果核抗氧化物，置于50ml的量瓶 中，加無水乙醇適量超聲溶解，再用無水乙醇定容至刻度，制成濃度為0. 408mg/mL的溶液。線性關(guān)系考察精密吸取0. 5,1. 0,1. 5,2. 0,2. 5,3. 0,3. 5mL濃度為 0. 608mg/mL ^ 沒食子酸丙酯的標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別置于不同的25mL容量瓶中，加水至體積為5mL，再加入酒石 酸鐵試劑5mL，后用pH7. 5的磷酸緩沖溶液定容至25mL，混勻，暗處?kù)o置15min后，于540nm 處測(cè)定吸光度。以吸光度A為縱坐標(biāo)，樣品溶度C為橫坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸得回歸方程·Λ = 13. 638C-0. 0178 (r = 0. 997)，表明沒食子酸丙酯在0. 01216 0. 08512mg/mL范圍內(nèi)線性 關(guān)系良好。精密度試驗(yàn)精密吸取沒食子酸丙酯對(duì)照品溶液2. OmL,置于不同的25mL容量瓶 中，加水至體積為5mL，再加入酒石酸鐵試劑5mL，后用pH7. 5的磷酸緩沖溶液定容至25mL， 混勻，暗處?kù)o置15min后，于540nm處連續(xù)測(cè)定5次吸光度。吸光度的RSD值為2. 1 %。穩(wěn)定性試驗(yàn)精密吸取山茱萸果核抗氧化物溶液4mL，置于25mL容量瓶中，加水至 體積為5mL，再加入酒石酸鐵試劑5mL，后用pH7. 5的磷酸緩沖溶液定容至25mL，混勻，暗處 靜置15min后，于540nm處測(cè)吸光度，并且每隔5min測(cè)定一次，共考察65min。吸光度的RSD 值為 0. 679%。重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)精密稱取5份山茱萸果核抗氧化物10mg，置于25mL容量瓶中，無水 乙醇超聲溶解，并定容至刻度，分別精密移取上述溶液4mL置于不同的25mL容量瓶中，加水 至體積為5mL，再加入酒石酸鐵試劑5mL，后用pH7. 5的磷酸緩沖溶液定容至25mL，混勻，暗 處?kù)o置15min后，于540nm處測(cè)定吸光度，并計(jì)算含量，得山茱萸果核抗氧化物中多酚類成 分的含量為63. 77% (以沒食子酸丙酯計(jì))，RSD為2. 5%?；厥章蕦?shí)驗(yàn)精密稱取5份山茱萸果核抗氧化物10mg，置于25mL容量瓶中，無水 乙醇超聲溶解，并定容至刻度，分別精密移取上述溶液2mL置于不同的25mL容量瓶中，再分 別加入沒食子酸丙酯對(duì)照品溶液1. OmL，加水至體積為5mL，再加入酒石酸鐵試劑5mL，后用PH7. 5的磷酸緩沖溶液定容至25mL，混勻，暗處?kù)o置15min后，于540nm處測(cè)定吸光度，并計(jì) 算回收率為97. 57%, RSD為1. 01%。樣品測(cè)定精密稱取3份山茱萸果核抗氧化物10mg，置于25mL容量瓶中，無水乙 醇超聲溶解，并定容至刻度，分別精密移取上述溶液4mL置于不同的25mL容量瓶中，加水至 體積為5mL，再加入酒石酸鐵試劑5mL，后用pH7. 5的磷酸緩沖溶液定容至25mL，混勻，暗處 靜置15min后，于MOnm處測(cè)定吸光度，并計(jì)算含量，得山茱萸果核抗氧化物中多酚類成分 的含量為64. 12% (以沒食子酸丙酯計(jì))。
具體實(shí)施例實(shí)施例1 取干燥的山茱萸果核10kg，適當(dāng)粉碎成，將其置于滲漉罐內(nèi)，用50L沸程 60 90°C的石油醚進(jìn)行滲漉提取，然后再用50L丙酮進(jìn)行滲漉提取，收集丙酮滲漉液，回收 溶劑，得總提取物；總提取物加5L水分散，用乙酸乙酯進(jìn)行萃取5次，每次用量是10L，分取 乙酸乙酯萃取液，回收溶劑，干燥，即得抗氧化物。實(shí)施例2 取干燥的山茱萸果核10kg，適當(dāng)粉碎成，將其置于滲漉罐內(nèi)，用IOOL 沸程60 90°C的石油醚進(jìn)行滲漉提取，然后再用IOOL丙酮進(jìn)行滲漉提取，收集丙酮滲漉 液，回收溶劑，得總提取物；總提取物加20L水分散，用乙酸乙酯進(jìn)行萃取3次，每次用量是 30L，分取乙酸乙酯萃取液，回收溶劑，干燥，即得抗氧化物。實(shí)施例3 取干燥的山茱萸果核，適當(dāng)粉碎成，將其置于滲漉罐內(nèi)，用70L沸程 60 90°C的石油醚進(jìn)行滲漉提取，然后再用70L丙酮進(jìn)行滲漉提取，收集丙酮滲漉液，回收 溶劑，得總提取物；總提取物加IOL水分散，用乙酸乙酯進(jìn)行萃取5次，每次用量是20L，分 取乙酸乙酯萃取液，回收溶劑，干燥，即得抗氧化物。
權(quán)利要求
1.一種從山茱萸果核中制備抗氧化物的方法，其特征在于包括如下步驟取干燥的山 茱萸果核，適當(dāng)粉碎，將其置于滲漉罐內(nèi)，用沸程60 90°C的石油醚進(jìn)行滲漉提取，然后用 丙酮進(jìn)行滲漉提取，收集丙酮滲漉液，回收溶劑，得總提取物；總提取物加水分散，用乙酸乙 酯進(jìn)行萃取，分取乙酸乙酯萃取液，回收溶劑，干燥，即得抗氧化物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1中所述的制備方法，其特征是滲漉用沸程60 90°C石油醚的用量 為藥材重量的5 10倍體積份。
3.根據(jù)權(quán)利要求1中所述的制備方法，其特征是滲漉用丙酮的用量為藥材重量的 5 10倍體積份。
4.根據(jù)權(quán)利要求1中所述的制備方法，其特征是總提取物加水分散時(shí)，加水的體積為 藥材重量的0. 5 2倍體積份。
5.根據(jù)權(quán)利要求1中所述的制備方法，其特征是每次萃取時(shí)，乙酸乙酯的體積為藥材 重量的1 3倍體積份。
6.根據(jù)權(quán)利要求1中所述的制備方法，其特征是乙酸乙酯萃取的次數(shù)為3 5次。
7.根據(jù)權(quán)利要求1中所述的制備方法，其特征是以沒食子酸丙酯為對(duì)照品，所得抗氧 化物中多酚類成分的含量為50 80%。
8.根據(jù)權(quán)利要求1 7任意一項(xiàng)的制備方法得到的抗氧化物。
全文摘要
山茱萸果核中抗氧化物的提取方法。本發(fā)明涉及一種從山茱萸果核中制備抗氧化物的方法。本發(fā)明的主要步驟如下將山茱萸果核脫脂，用丙酮進(jìn)行滲漉提取，回收溶劑，加水分散，用乙酸乙酯萃取，分取乙酸乙酯萃取液，回收溶劑，即得山茱萸果核抗氧化物。采用該方法可簡(jiǎn)便、有效地從山茱萸果核中制備抗氧化物，豐富了山茱萸果核的利用方法，為山茱萸果核的進(jìn)一步開發(fā)奠定基礎(chǔ)。
文檔編號(hào)C09K15/34GK102061175SQ20101059497
公開日2011年5月18日 申請(qǐng)日期2010年12月20日 優(yōu)先權(quán)日2010年12月20日
發(fā)明者姜華, 張倩, 時(shí)清亮, 李軍, 李曉明, 秦雙雙, 趙士陽(yáng), 路西明 申請(qǐng)人:河南科技大學(xué)