專利名稱：一種環(huán)金屬化銥-偶氮配合物及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及硫醇檢測領(lǐng)域，具體涉及一種新的環(huán)金屬化銥配合物的制備方法和應(yīng)用。
背景技術(shù)：
生理硫醇指包含巰基殘基的氨基酸，寡肽或蛋白質(zhì)，主要包括半胱氨酸，高半胱氨酸和谷胱甘肽。由于具有強(qiáng)的還原能力，生理硫醇在體內(nèi)扮演著十分有效的抗氧化劑作用， 能高效快速清除自由基而使得生物體免受氧化損傷。研究表明，半胱氨酸缺乏會出現(xiàn)在許多病癥中，比如小孩生長緩慢，嗜睡癥，皮膚松弛，肝臟損傷等，而高半胱氨酸的濃度還是埃爾茨海默癥以及心血管疾病的誘因。谷胱甘肽作為細(xì)胞內(nèi)含量最高的非蛋白硫醇，是維持蛋白質(zhì)中半胱氨酸殘基的硫醚基團(tuán)處于還原狀態(tài)的主要因素，常用還原型/氧化型_谷胱甘肽的比例來作為表征細(xì)胞損傷程度的一個重要指標(biāo)。因此，對生理硫醇的實(shí)時檢測對上述疾病的診斷，甚至在早期預(yù)防，能起到十分重要的指導(dǎo)意義。目前，生理硫的醇檢測手段比較多樣，比如高效液相色譜法，毛細(xì)管電泳法，電化學(xué)分析法等。但這些分析手段的主要研究對象是血液或其他生理液體，無法直接應(yīng)用于細(xì)胞內(nèi)的實(shí)時分析，而且都必須借用昂貴的高分辨分析儀器，對樣品的前期處理，實(shí)驗參數(shù)優(yōu)化等要求嚴(yán)格，分析時間較長，這些不足限制了其應(yīng)用。
熒光分析法可以避免上述問題而引起廣泛關(guān)注。目前國內(nèi)的商用生理硫醇檢測試劑盒仍未發(fā)展成熟，但用于細(xì)胞內(nèi)生理硫醇水平的熒光分析手段的研究已初步開展。人們將有機(jī)熒光基團(tuán)和硫醇反應(yīng)開關(guān)共價連接在一起，用于生理硫醇的檢測。常用的識別硫醇的基團(tuán)包括常用醛基，磺酸酯，馬來亞酰胺，二硫鍵等，常用的有機(jī)熒光基團(tuán)有芘，二甲酰亞萘胺，氧雜蒽，羅丹明，熒光素等(泛￡ . Soc. Rev. 2012，W，52-67)。這類有機(jī)熒光分析試劑存在一些缺點(diǎn)(V. Fernandez-Moreira, F. L. Thorp-Greenwood and Μ. P. Coogan. Chem. Commun. 2010，46, 186-202):具有比較高的細(xì)胞毒性，染料與細(xì)胞作用后，導(dǎo)致細(xì)胞的死亡，影響對細(xì)胞正常狀態(tài)的觀測；光穩(wěn)定性低，因受空氣中或介質(zhì)中活性劑基團(tuán)(單線態(tài)氧等)的作用，染料在激發(fā)波長照射后，熒光不斷減弱，光漂泊現(xiàn)象嚴(yán)重，不利于成像穩(wěn)定(M. S. Lowry, ff. R. Hudson, R. A. Pascal and S. Bernhard. J. Am. Chem. Soc. 2004，126, 14129-14135);激發(fā)和發(fā)射光譜的交叉嚴(yán)重(stoke shif小)，一般在幾十個納米左右，不利于區(qū)分內(nèi)源熒光和降低染料本身的自淬滅?；谟袡C(jī)染料存在的若干缺點(diǎn)，人們更多的把目光轉(zhuǎn)向具有優(yōu)良光電屬性的過渡金屬配合物上。環(huán)金屬化銥配合物，由于其優(yōu)良的光物理和光化學(xué)性質(zhì)，穩(wěn)定性好，并且具有良好的脂溶性，易于穿透細(xì)胞膜而進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，在細(xì)胞內(nèi)的熒光成像分析試劑方面具有其獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn)。發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于以下幾項提供一種銥_偶氮多吡啶配合物，以及其制備方法和應(yīng)用。
本發(fā)明通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)上述目的
一種銥-偶氮多卩比唳配合物，簡稱[Ir (pq)2azobpyIr (pq)2]2+,結(jié)構(gòu)式如式I所示
權(quán)利要求
1. 一種環(huán)金屬化銥-偶氮配合物，其結(jié)構(gòu)式如式I所示
2.如權(quán)利要求I所述的銥-偶氮配合物的制備方法，其特征在于由4，4’’ -偶氮-2，2’ -聯(lián)吡啶配體和銥二氯橋前體反應(yīng)制得。
3.如權(quán)利要求2所述銥-偶氮配合物的制備方法，其特征在于步驟如下將4，4’’_偶氮-2，2’ -聯(lián)吡啶配體和(2-苯基喹啉)銥二氯橋前體加入有機(jī)溶劑中加熱攪拌，反應(yīng)結(jié)束后旋干溶劑，純化，得權(quán)利要求I所述銥-偶氮配合物。
4.如權(quán)利要求3所述銥-偶氮配合物的制備方法，其特征在于所述的有機(jī)溶劑為甲醇、氯仿混合溶劑。
5.如權(quán)利要求4所述銥-偶氮配合物的制備方法，其特征在于所述的有機(jī)溶劑為體積比在1:廣1:5的甲醇、氯仿混合溶劑。
6.如權(quán)利要求3所述銥-偶氮配合物的制備方法，其特征在于所述的反應(yīng)條件為回流反應(yīng)4 8 ho
7.如權(quán)利要求3所述銥-偶氮配合物的制備方法，其特征在于所述的純化方法為硅膠柱層析純化。
8.如權(quán)利要求I所述的銥-偶氮配合物在熒光檢測體生理硫醇方面的應(yīng)用。
9.如權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于應(yīng)用于體外檢測或細(xì)胞內(nèi)檢測。
全文摘要
本發(fā)明公開了環(huán)金屬化銥-偶氮配合物的制備以及其在檢測生理硫醇方面的應(yīng)用。本發(fā)明涉及的配合物能特異性與生理硫醇反應(yīng)，產(chǎn)生熒光響應(yīng)，并具有較強(qiáng)的細(xì)胞膜穿透性和較低的細(xì)胞毒性，能識別細(xì)胞內(nèi)的硫醇，在實(shí)時、快速檢測生理硫醇方面將具有極大的應(yīng)用潛力。
文檔編號C09K11/06GK102924529SQ20121047797
公開日2013年2月13日 申請日期2012年11月22日 優(yōu)先權(quán)日2012年11月22日
發(fā)明者巢暉, 李觀營, 陳禹, 許文超, 劉疆平, 計亮年 申請人:中山大學(xué)