本發(fā)明屬于熒光納米材料，具體涉及一種利用過期藥物合成的熒光探針及其制備方法和應(yīng)用，尤其是一種以具有苯環(huán)結(jié)構(gòu)的過期藥物為碳源的熒光探針及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、含有次氯酸根的鹽被稱為次氯酸鹽。最廣為人知的一種家用次氯酸鹽消毒劑是次氯酸鈉。

2、次氯酸(hclo)是一種強(qiáng)效的消毒劑，其氧化能力可以有效地破壞微生物的細(xì)胞膜和蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)，從而殺死細(xì)菌、病毒和真菌等病原體。由于其高效性和相對(duì)安全性，次氯酸在物體表面、水和食品、室內(nèi)空氣以及個(gè)人衛(wèi)生等消毒領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用。當(dāng)clo-的含量超標(biāo)時(shí)，會(huì)引起關(guān)節(jié)炎、腫瘤、癌癥等疾病，因此，國(guó)家食品藥品檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)需對(duì)蔬菜等食品中農(nóng)藥殘留進(jìn)行實(shí)施定期和不定期抽查，以保障公眾的健康安全。故建立高效、快速、精準(zhǔn)地檢測(cè)蔬菜中農(nóng)藥殘留的方法迫在眉睫。

3、氯霉素(ch?l?oramphen?ico?l，cap)屬于廣譜抗生素，對(duì)革蘭氏陽(yáng)性、陰性菌均有抑制作用，曾廣泛用于畜禽疾病的防治。若氯霉素在供人類食用的動(dòng)物體內(nèi)殘留未消，它便有可能沿著食物鏈傳遞至人體內(nèi)，即便是在微量水平上，也可能對(duì)人體健康產(chǎn)生深遠(yuǎn)的影響。目前，氯霉素類抗生素的液質(zhì)聯(lián)用測(cè)定方法多用于食品中殘留的測(cè)定，針對(duì)孕婦這類特殊人群體內(nèi)抗生素殘留的檢測(cè)方法較少，因此，該種方法不適用于日常抽檢使用。

4、但臨床研究已證實(shí)，氯霉素有較強(qiáng)的毒副作用，可抑制骨髓造血功能造成過敏反應(yīng)，引起再生障礙性貧血，長(zhǎng)期食用氯霉素殘留的動(dòng)物性食品，可能引起腸道菌群失調(diào)并抑制抗體形成，因此，很多國(guó)家禁止在動(dòng)物飼養(yǎng)和治療中使用氯霉素，并規(guī)定在動(dòng)物性食品中不得檢出氯霉素，我國(guó)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部第250號(hào)公告也同樣對(duì)此作出明確規(guī)定。因此對(duì)食品中的氯霉素檢測(cè)需要適用于廣泛人群的精準(zhǔn)檢測(cè)手段，以確保消費(fèi)者的健康和食品安全。

5、綜上，本技術(shù)的目的是提供一種具有高抗干擾性的熒光傳感器，能夠在復(fù)雜環(huán)境中有效地區(qū)分目標(biāo)分析物，且能夠針對(duì)性的檢出次氯酸根離子(clo-)和氯霉素(cap)，以便于能夠在檢測(cè)日常水質(zhì)中的次氯酸根離子，以及肉類產(chǎn)品中氯霉素殘留量的快速篩查，為食品安全和環(huán)境保護(hù)提供了檢測(cè)方法。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、為實(shí)現(xiàn)上述目的，本技術(shù)選用過期藥物作為熒光探針的碳源，通過水熱法處理過期藥物制備了一種熒光探針，用于檢測(cè)次氯酸根離子和氯霉素，具體如下：

2、一種利用過期藥物合成的熒光探針，所述探針為以過期藥物阿苯達(dá)唑和乙醇作為原料，通過水熱合成法，制備得的具有綠色熒光的熒光碳點(diǎn)abz-cds。

3、進(jìn)一步地，一種利用過期藥物合成的熒光探針的制備方法，包括以下步驟：

4、步驟一，每1.2g阿苯達(dá)挫粉末溶解于15ml乙醇溶液中，

5、步驟二，將步驟一中徹底混合均勻后的溶液轉(zhuǎn)移到聚四氟乙烯的高溫反應(yīng)容器中，180℃，6h促進(jìn)反應(yīng)；

6、步驟三，反應(yīng)結(jié)束后，反應(yīng)釜自然降溫至室溫；

7、步驟四，離心去除粗大沉淀物質(zhì)，再通過0.22μm的微孔濾膜進(jìn)行過濾，得到純化的熒光碳點(diǎn)abz-cds，所述abz-cds在4℃的環(huán)境下儲(chǔ)存。

8、熒光碳點(diǎn)abz-cds在檢測(cè)次氯酸根離子和氯霉素中的應(yīng)用。

9、進(jìn)一步地，所述abz-cds作為熒光探針用于檢測(cè)次氯酸根離子clo-。

10、進(jìn)一步地，所述abz-cds檢測(cè)次氯酸根離子clo-的步驟包括：

11、1)將abz-cds溶解于水中獲得5μg/l濃度的abz-cds溶液；

12、2)將含有c?lo-的溶液與abz-cds溶液混合，加入不同體積1mm?clo-溶液，用ph為8.0的緩沖溶液定容到2ml，形成clo-濃度梯度，λem為485nm下分別測(cè)得不同濃度clo-溶液的熒光強(qiáng)度，獲得f0；

13、3)將待測(cè)樣品ph＝4.0的條件下與abz-cds溶液混合，得到待測(cè)樣品混合溶液，反應(yīng)10min，測(cè)得待測(cè)樣品混合溶液的熒光強(qiáng)度f；

14、4)根據(jù)熒光猝滅效率f/f0與clo-濃度的線性關(guān)系計(jì)算出待測(cè)樣品中clo-的濃度；

15、所述線性關(guān)系為取得熒光猝滅效率f/f0與clo-濃度的線性關(guān)系。

16、進(jìn)一步地，所述取得熒光猝滅效率f/f0與clo-濃度的線性關(guān)系包括：

17、在0～5μm范圍內(nèi)，其線性方程為y1＝0.02678-0.21263x；r12＝0.9959；檢出限lod1＝0.0141μm；

18、在5～15μm范圍內(nèi)，線性方程為y2＝0.01549x+0.97667；r22＝0.9889；lod2＝0.193μm；

19、在15～125μm范圍內(nèi)，線性方程為y3＝1.27538-0.00587x；r32＝0.9987；lod3＝0.511μm。

20、進(jìn)一步地，所述abz-cds作為熒光探針用于快速檢測(cè)氯霉素cap含量。

21、進(jìn)一步地，所述abz-cds檢測(cè)氯霉素cap的步驟包括

22、1)將abz-cds溶解于水中獲得5μg/l濃度的abz-cds溶液；

23、2)將含有氯霉素cap的溶液與5μl?abz-cds溶液混合，加入不同體積1mm?cap溶液，用ph＝8的緩沖溶液定容到1.0ml，以此形成cap的濃度梯度，λem為485nm下分別測(cè)得不同濃度cap溶液的熒光強(qiáng)度，獲得f0；

24、3)將待測(cè)樣品在ph＝4的條件下與abz-cds溶液混合，得到待測(cè)樣品混合溶液，反應(yīng)15min，測(cè)得待測(cè)樣品混合溶液的熒光強(qiáng)度f；

25、4)根據(jù)熒光猝滅效率f/f0與cap濃度的線性關(guān)系計(jì)算出待測(cè)樣品中cap的濃度。

26、進(jìn)一步地，熒光猝滅效率f/f0與cap濃度的線性關(guān)系計(jì)算出待測(cè)樣品中cap的濃度，包括：

27、熒光線性范圍在0～10μm時(shí)，其線性方程為y1＝2.25748-0.128x；r12＝0.9907；檢出限lod1＝0.0141μm(s/n＝0.141)；

28、熒光線性范圍在10～200μm時(shí)，其線性方程為y2＝0.00312x+0.8578；r22＝0.9930；檢出限lod2＝0.193μm(s/n＝1.93)。

29、本發(fā)明的工作機(jī)理：本發(fā)明采用水熱法處理過期藥物制備碳點(diǎn)，利用具有苯環(huán)結(jié)構(gòu)的過期藥物(阿苯達(dá)挫)為原料，采用水熱法反應(yīng)結(jié)束后獲得粗碳點(diǎn)，再經(jīng)離心和微孔膜過濾獲得純化熒光碳點(diǎn)abz-cds，使用該碳點(diǎn)檢測(cè)clo-的含量時(shí)，在0-5μm和5-15μm范圍內(nèi)，隨著clo-濃度增高，abz-cds在485nm處的熒光強(qiáng)度值逐漸增加；在15-125μm范圍內(nèi)，隨著clo-的逐漸加入，abz-cds的綠色熒光逐漸減弱。使用該碳點(diǎn)檢測(cè)食品中殘留的cap的含量時(shí)，在0-10μm范圍內(nèi)，隨著cap濃度的不斷增大，abz-cds在485nm處的熒光強(qiáng)度值逐漸降低；在10～200μm濃度范圍內(nèi)，隨著cap濃度不斷增大，abz-cds在485nm處的熒光強(qiáng)度值逐漸升高。

30、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是：

31、(1)使用過期藥物阿苯達(dá)挫為原料，實(shí)現(xiàn)了資源的循環(huán)利用，綠色生產(chǎn)；

32、(2)制備的新碳點(diǎn)用于檢測(cè)氯酸根離子(clo-)和氯霉素(cap)檢出效果好，靈敏度高；

33、(3)能夠針對(duì)性的檢出clo-和cap，以便于能夠在檢測(cè)日常水質(zhì)以及蔬菜殘留中的次氯酸根離子，以及肉類產(chǎn)品中氯霉素殘留量的快速篩查，為食品安全和環(huán)境保護(hù)提供了檢測(cè)方法。