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核酸分子長期保存的方法和實施這種長期保存的包裝的制作方法

文檔序號:4291133閱讀:1060來源:國知局

專利名稱::核酸分子長期保存的方法和實施這種長期保存的包裝的制作方法
技術領域
:本發(fā)明屬于化工或生物領域,具體涉及一種適合于保存DNA的包裝以及DNA分子的長期保存方法。
背景技術
:核酸(nucleicacid)是生物特有的重要的大分子化合物,廣泛存在于各類生物細胞中。核酸及其組成單位在生物的個體發(fā)育、生長、繁殖、遺傳和變異等生命過程中起著重要的作用。核酸主要包括核糖核酸(RNA)或脫氧核糖核酸(DNA)。DNA通常是生命的物質基礎,由五種元素---碳、氫、氧、氮、磷構成的四種核苷酸序列。目前,核酸的研究越來越成為生物科學的核心,帶動了生物化學、分子生物學和分子遺傳學乃至整個生命科學研究的發(fā)展。核酸攜帶有生物遺傳信息,并且,不同的生物種類所攜帶的遺傳信息差別較大,而同種類個體之間所攜帶的遺傳信息相對而言差別較小,然而由于核酸的多樣性,即使同一種類的不同個體之間也均是有差異的。具有親緣關系的親本和子代之間遺傳信息較接近,核酸上所攜帶的遺傳信息的鑒別現(xiàn)在也成為鑒定親緣關系的標志,正在越來越廣泛地被應用。此外,核酸作為傳遞遺傳信息的載體,也是極其具有收藏價值的。例如可采集自身或他人的核酸,長期保存,作為紀念。然而,核酸是一種非常不穩(wěn)定的大分子化合物,其在許多條件下均可能發(fā)生降解。造成核酸降解的外界物理因素如溫度、濕度、紫外線等;化學因素如pH值、水解反應、氧化反應等;生物因素如酶解及微生物侵染等。這些因素都直接與核酸的構型、分子組成有關。即使在核酸提取的時候,也極易于因操作不當而造成降解。特別是當將核酸作為紀念用途,保存于例如掛件等飾品中時,由于會被佩帶于人體或與人體接近,隨著人體的活動,易于接觸到高溫或強光線等不利環(huán)境因素,從而更易于造成降解。因此,需要一種可長期保存核酸的包裝器具,其具有良好的保護作用,可有效地阻止核酸的降解。
發(fā)明內容本發(fā)明的目的在于提供一種復合材料組合物。本發(fā)明的目的還在于提供由所述復合材料組合物制成的容器。本發(fā)明的目的還在于提供含有核酸的飾品。在本發(fā)明的第一方面,提供一種復合材料組合物,所述的組合物含有以下組分:(a)雙酚A-環(huán)氧氯丙垸環(huán)氧樹脂63-69重量份;(b)聚苯乙烯31-35重量份;和(c)2-(2,-羥基-3,,5,-二叔-甲基苯基)苯并三唑0.15-0.4重量份,并且,組分(a)+(b)+(c)在占復合材料組合物總重量的40-100%。在另一優(yōu)選例中,組分(a)+(b)+(c)在占復合材料組合物總重量的55-100%;較佳的,組分(a)+(b)+(c)在占復合材料組合物總重量的80-100%;更佳的,組分(a)+(b)+(c)在占復合材料組合物總重量的99-100%。較佳的,各組分的含量如下(a)雙酚A-環(huán)氧氯丙烷型環(huán)氧樹脂(b)聚苯乙烯(c)2-(2,-羥基-3,,5,-二叔-甲基苯基)苯并三唑更佳的,各組分的含量如下(a)雙酚A-環(huán)氧氯丙烷型環(huán)氧樹脂(b)聚苯乙烯(c)2-(2,-羥基-3,,5,-二叔-甲基苯基)苯并三唑在另一優(yōu)選例中,所述的聚苯乙烯為65.5-67.5重量份;32-34重量份;和0.2-0.35重量份。66.75重量份;33重量份;和0.25重量份。其中,n是選自20-40(較佳的28-35;更佳的為29-31)的正整數(shù)'在另一優(yōu)選例中,所述的雙酚A-環(huán)氧氯丙垸型環(huán)氧樹脂的為其中,m為選自30-50(較佳的35-45;更佳的為39-41)的正整數(shù)。在另一優(yōu)選例中,所述的組合物通過以下方法制備以有機溶劑溶解所述的聚苯乙烯;之后加入雙酚A-環(huán)氧氯丙烷型環(huán)氧樹脂和2-(2'-羥基-3',5'-二叔-甲基苯基)苯并三唑;在5055。C的溫度下進行溶解和混合;其中,所述的組分(a)+(b)+(c)的總重量與有機溶劑體積的比例為1:(5-15)(g:ml)。在另一優(yōu)選例中,在進行溶解和混合時,以N,N,N-三丁基-l-丁銨溴化物作為相轉移催化劑。在另一優(yōu)選例中,N,N,N-三丁基-l-丁銨溴化物的用量按照體積比是0.1-0.5%(如0.2%)。最優(yōu)選的,所述的有機溶劑是三氯甲垸。在另一優(yōu)選例中,所述的組分(a)+(b)+(c)的總重量與有機溶劑體積比例為1:(8-12);最佳的是約l:10(g:ml)。在另一優(yōu)選例中,所述方法還包括將充分混合后的復合材料組合物進行成形,從而獲得一種容器。在本發(fā)明的第二方面,提供一種用于保存核酸的容器,所述的容器是由所述的復合材料組合物制備而成。在另一優(yōu)選例中,所述的容器長度為2-50rora(較佳的3-20鵬,更佳的5-10irnn),其橫截面積在4-2000mm2(較佳的9-300咖2;更佳的25-6Smm2)。在另一優(yōu)選例中,所述的容器的形狀可以是圓柱形、圓球型、螺旋形、長方體形、圓錐形等,或者也可以是不規(guī)則的形狀。在另一優(yōu)選例中,所述的容器包括外殼(11)和外殼蓋(12);且外殼(ll)與外殼蓋(12)可密合。在本發(fā)明的第三方面,提供所述的容器的用途,用于保存核酸。在另一優(yōu)選例中,所述的核酸包括脫氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)。在本發(fā)明的第四方面,提供一種飾品,所述的飾品包括外飾(2),被外飾(2)包被或裝載的容器(1),和位于容器(1)內的核酸。在另一優(yōu)選例中,所述的外飾(2)的材料選自(但不限于)水晶、玻璃、塑料、金屬、瑪瑙、玉、石材、陶瓷、木材。較佳的,所述的材料是透明的材料。本發(fā)明的其它方面由于本文的公開內容,對本領域的技術人員而言是顯而易見的。圖l顯示了核酸保存用的容器的示意圖。其中,ll為外殼,lll為核酸的裝入口,12為外殼蓋。圖2顯示了飾品的示意圖。其中,l為核酸保存用的容器,2為外飾。具體實施例方式本發(fā)明人針對目前核酸樣品易于降解,難以長期保存等特點,研制了一種可用于長期保存核酸的容器,所述的容器由含有以下組分的復合材料制備而成雙酚A-環(huán)氧氯丙垸型環(huán)氧樹脂、聚苯乙烯和2-(2,-羥基-3',5'-二叔-甲基苯基)苯并三唑。本發(fā)明人意外地發(fā)現(xiàn),該容器可極好地保護核酸不被降解。如本文所用,術語"含有"或"包括"包括了"包含"、"主要由......構成(制成)"、"基本上由......構成"、和"由......構成"。組合物本發(fā)明提供一種復合材料組合物,所述的復合材料組合物含有如表1所述的組分表1<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>本發(fā)明人意外地發(fā)現(xiàn),以雙酚A-環(huán)氧氯丙烷型環(huán)氧樹脂、聚苯乙烯和2-(2,-羥基-3',5'-二叔-甲基苯基)苯并三唑以適當?shù)呐浔然旌喜⒅瞥扇萜骱?,該容器可極好地保護核酸不被降解。所述的雙酚A-環(huán)氧氯丙垸型環(huán)氧樹脂是一種本領域常用的環(huán)氧樹脂,可通過商購獲得,或可通過本領域常規(guī)的制備方法制備,例如將雙酚A與環(huán)氧氯丙烷在堿性催化劑作用下縮聚形成。作為本發(fā)明的優(yōu)選方式,所述的雙酚A-環(huán)氧氯丙烷型環(huán)氧樹脂的結構式為其中,m為選自30-50(較佳的35-45)的正整數(shù)。所述的聚苯乙烯也是一種本領域常用的材料,其通常無色透明,可由苯乙烯單體經(jīng)自由基縮聚反應形成。作為本發(fā)明的優(yōu)選方式,所述的聚苯乙烯(人>)中,n為選自20-40(較佳的28-35)的正整數(shù)。當用于本發(fā)明時,與雙酚A-環(huán)氧氯丙垸型環(huán)氧樹脂和聚苯乙烯相配合,所述的2-(2'-羥基-3',5'-二叔-甲基苯基)苯并三唑可發(fā)揮優(yōu)異的吸收紫外線的作用。作為一種優(yōu)選方式,本發(fā)明的組合物可通過以下方式制備而成以三氯甲烷作為溶劑,以N,N,N-三丁基-1-丁銨溴化物作為相轉移催化劑,溶解所述的聚苯乙烯;之后加入雙酚A-環(huán)氧氯丙垸型環(huán)氧樹脂和2-(2,-羥基-3',5'-二叔-甲基苯基)苯并三唑,充分混合;較佳地,在5055。C的溫度下進行溶解和混合。核酸保存用容器本發(fā)明還提供了一種用于保存核酸的容器,所述的容器是由本發(fā)明所述的復合材料制備而成。所述的容器可通過將上述制備的組合物置于模具中成形而獲得,成形的方法是本領域己知的。例如可將所述復合材料置于模具中,加溫到60-7(TC,然后降溫獲得。對所述的容器的形狀沒有特別的限制,可以是圓柱形、圓球型、螺旋形、長方體形、圓錐形等,或者也可以是不規(guī)則的形狀。對所述的容器的大小沒有特別的限制,主要取決于所需保存的核酸的量。作為本發(fā)明的優(yōu)選方式,所述的容器包括外殼11和外殼蓋12,且外殼ll與外殼蓋12可密合。核酸可以由外殼11上的裝入口111加入到容器中。所述的容器具有結構穩(wěn)定、抗擠壓、防紫外線等作用。對所述的外殼與外殼該之間密合的方式?jīng)]有特別的限制,可采用本領域常用的方式。例如,通過設置相配合的螺旋結構(旋蓋式封閉),或卡式結構;此外,也可采用一些黏合劑(如環(huán)氧樹脂黏合劑)進行黏合。作為本發(fā)明的優(yōu)選方式,當用于制備飾品時,所述的容器長度為2-50mra,較佳的3-20ram,更佳的5-10mm;其橫截面積在4-2000mm2,較佳的9-300mm2,更佳的25-65mra2。作為本發(fā)明的優(yōu)選方式,所述的外殼11或外殼蓋12是通過一次成型技術制成的,從而保證DNA分子受到外力擠壓和光照作用下保持穩(wěn)定的化學結構和物理性質。本發(fā)明的容器可以是透明的,也可以通過在復合材料中加入一些本領域常用的著色劑(如二氧化鈦),使容器具有所需的顏色。本發(fā)明還提供了一種飾品,所述的飾品包括外飾2,被外飾2包被或裝載的容器l,和位于容器1內的核酸??赏ㄟ^在外飾上預留放入口,將容器1置于外飾2內部。也可通過黏合材料(如環(huán)氧樹脂黏合劑)將容器1粘合到外飾2的內部。對于外飾2的材料沒有特別的限制,可以是本領域常規(guī)用于制備飾品的材料;其形狀和大小也可可參照本領域常規(guī)的飾品。例如所述的外飾2的材料選自(但不限于)水晶、玻璃、琉璃、塑料、金屬、瑪瑙、玉、石材、陶瓷、木材。此外,兩個或多個包含相同種或不同種核酸的容器可被置于同一外飾中。核酸本發(fā)明所述的核酸包括脫氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)。核酸通常存在于溶液(如緩沖液)中,或被制成凍干粉的形式。由于DNA溶解在液體溶液中,一般常溫下只能保存最多一周就會降解,保存在4t大概12個月(冰箱冷藏室),保存在-2(TC度會久一點(冰箱冷凍室)。反復凍融也是造成DNA降解的一種因素。干燥狀態(tài)的DNA更有利于保存。因此,作為本發(fā)明的優(yōu)選方式,所述的核酸是凍干處理的。核酸的提取是分子生物學研究的基礎技術,提取的核酸的純度及結構完整性是進行基因工程(分子生物學)各項研究所必需的條件。酚抽提法、異丙醇沉淀法和甲酰胺裂解法是提取DNA最為經(jīng)典的方法,目前很多新方法都是在它們的基礎上經(jīng)過改進而得來的。這三種方法均要利用蛋白酶K和十二烷基硫酸鈉(SDS)來消化破碎細胞。在酚抽提法、異丙醇沉淀法中,裂解液先用酚/氯仿(體積比為25:24)去除蛋白質,再分別用乙醇或異丙醇沉淀DNA。甲酰胺法是利用高濃度的甲酰胺解聚蛋白質(各種核蛋白)與DNA的結合,然后利用透析來處理DNA樣品。目前也可運用一些全自動核酸提取工作站(如Kurabo公司生產(chǎn)的核酸提取工作站),對樣品中的核酸進行全自動的制備。提高核酸的純度,最大程度減少被降解的風險。在這種工作站中,離心機和機械加樣系統(tǒng)整合其中,可實現(xiàn)全自動的制備,完全避免了傳統(tǒng)抽提方法的弊端(操作過程繁瑣,用時長,且所用試劑有毒性)。利用全自動的核酸制備方法具有以下特點操作簡單、自動處理,降低了在核酸制備過程中被污染的風險。本發(fā)明的主要優(yōu)點在于選用合適的材料制備成對于核酸具有良好的保護作用的容器,從而使得核酸可被長期保存(保存時間可超過500年)。將含有核酸的容器置于飾品中,從而使其更有紀念價值。下面結合具體實施例,進一步闡述本發(fā)明。應理解,這些實施例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。實施例1DNA保護容器1的制作采用的組分配方如下表1。<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>將聚苯乙烯按照上述配方分別稱取后置于容器中,然后加入1000ml三氯甲烷,以1.5mlN,N,N-三丁基-l-丁銨溴化物為相轉移催化劑使之溶解,然后加入雙酚A-環(huán)氧氯丙烷型環(huán)氧樹脂和2-(2,-羥基-3',5'-二叔-甲基苯基)苯并三唑,在53"C下充分混合后,用于制備成形的DNA外殼。根據(jù)所需的DNA外殼的形狀,制備用于一次成型的模具,所述的模具包括核酸外殼的模具的以及外殼蓋的模具。將上述混合的材料加料到模具中,加熱至65'C,進行一次定型,從而獲得合適的DNA外殼,該外殼的尺寸是長度為10ram,其橫截面積在65mm2,外殼蓋與外殼可通過螺旋結構密合。按照前述方法,分別獲得容器l(配方l,獲得5個成品),容器2(配方2,獲得5個成品),容器3(配方3,獲得5個成品),容器4(配方4,獲得5個成品)。所述的容器的示意圖如圖l所示,其中,ll為外殼,lll為核酸的裝入口,12為外殼蓋。實施例2全自動的核酸制備法提取DNA運用Kurabo公司的全自動核酸提取工作站,對樣品中的DNA進行全自動的制備。提高DNA的純度,同時最大程度減少被降解的風險。抽取2ml人體靜脈血作為樣本,置于離心管中離心棄上清,獲取下層血細胞,取下層溶液溶解于2ml氯仿/異戊醇(l:l)溶液中,置于全自動核酸提取工作站(Kurabo公司)進行全自動DNA提取。獲得溶解于TRIS-EDTA緩沖液中的DNA,將該DNA進行凍干處理,最終獲得以干粉狀態(tài)存在的DNA。實施例3包含DNA的水晶飾品的制備用移液器將上述制備的DNA轉移入上述制備的容器中,密封,從而獲得內里裝有DNA的容器。在水晶飾品的里面預留一個與容器的外形相匹配的空間,在容器的外表面上涂敷一層環(huán)氧樹脂黏合劑,然后黏合于水晶飾品的內部,從而獲得攜帶DNA的水晶飾品。所述的水晶飾品的示意圖如圖2。其中,l為核酸保存用的容器,2為外飾。實施例4不同環(huán)境下水晶飾品內DNA的穩(wěn)定性測試為了證明本發(fā)明的容器對于核酸樣品具有防止降解的作用,本發(fā)明人進行了試驗。擴大樣品量的基礎上,按照前述相同的方法提取DNA,制成凍干粉狀樣品,將各凍干樣品分成等量的35份。取20份等量的DNA樣品,分別置于本發(fā)明人前述制備的容器1(5個),容器2(5個),容器3(5個),容器4(5個)中,每一容器1份。取5份等量的DNA樣品,分別置于由褐色玻璃制成的5個形狀大小與容器l相同的容器a中。取5份等量的DNA樣品,分別置于5個形狀大小與容器1相同的容器b中,其中,容器b的材料的配方為雙酚A-環(huán)氧氯丙烷型環(huán)氧樹脂(m二40)58重量份、聚苯乙烯(『30)41重量份、2-(2,-羥基-3,,5,-二叔-甲基苯基)苯并三唑l重量份;制備方法同實施例1。取5份等量的DNA樣品,分別置于5個形狀大小與容器1相同的容器c中,其中,容器c的材料的配方為雙酚A-環(huán)氧氯丙烷型環(huán)氧樹脂(n^40)72重量份、聚苯乙烯(『30)27.9重量份、2-(2,-羥基-3,,5,-二叔-甲基苯基)苯并三唑0.l重量份;制備方法同實施例l。在密封裝樣后,將上述35個容器分別置于35個相同的水晶飾品的內部,制成35個水晶飾品。將上述35個水晶飾品在波長為260nm的紫外光下照射30分鐘,然后將各水晶飾品拆開,并從各容器中移取出DNA,采用熒光光度法(g卩PicoGreen熒光試劑與DNA結合能產(chǎn)生可激發(fā)熒光的復合物、再用熒光分光光度計對復合物進行定量檢測)鑒定DNA的降解情況。結果發(fā)現(xiàn),在較長時間的紫外光照射后,5個以容器1制備的水晶飾品中DNA的降解率為0。/。;5個以容器2制備的水晶飾品中DNA的降解率為0。/。;5個以容器3制備的水晶飾品中DNA的降解率為20%;5個以容器4制備的水晶飾品中DNA的降解率為20%。在較長時間的紫外光照射后,5個以容器a制備的水晶飾品中DNA的降解率為100%;5個以容器b制備的水晶飾品中DNA的降解率為60。/。;5個以容器c制備的水晶飾品中DNA的降解率為80%。在本發(fā)明提及的所有文獻都在本申請中引用作為參考,就如同每一篇文獻被單獨引用作為參考那樣。此外應理解,在閱讀了本發(fā)明的上述講授內容之后,本領域技術人員可以對本發(fā)明作各種改動或修改,這些等價形式同樣落于本申請所附權利要求書所限定的范圍。權利要求1.一種復合材料組合物,其特征在于,所述的組合物含有以下組分(a)雙酚A-環(huán)氧氯丙烷型環(huán)氧樹脂63-69重量份;(b)聚苯乙烯31-35重量份;和(c)2-(2’-羥基-3’,5’-二叔-甲基苯基)苯并三唑0.15-0.4重量份,并且,組分(a)+(b)+(c)在占復合材料組合物總重量的40-100%。2.如權利要求l所述的復合材料組合物,其特征在于,各組分的含量如下:(a)雙酚A-環(huán)氧氯丙垸型環(huán)氧樹脂65.5-67.5重量份;(b)聚苯乙烯32-34重量份;和(c)2-(2,-羥基-3,,5'-二叔-甲基苯基)苯并三唑0.2-0.35重量份。3.如權利要求l所述的復合材料組合物,其特征在于,所述的聚苯乙烯為:其中,n是選自20-40的正整數(shù)。4.如權利要求1所述的復合材料組合物,其特征在于,所述的雙酚A-環(huán)氧氯丙烷型環(huán)氧樹脂的為其中,m為選自30-50的正整數(shù)。5.如權利要求1所述的復合材料組合物,其特征在于,所述的組合物通過以下方法制備以有機溶劑溶解所述的聚苯乙烯;之后加入雙酚A-環(huán)氧氯丙垸型環(huán)氧樹脂和2-(2,-羥基-3,,5,-二叔-甲基苯基)苯并三唑;在5055。C的溫度下進行溶解和混合;其中,所述的組分(a)+(b)+(c)的總重量與有機溶劑體積的比例為1:(5-15)。6.如權利要求5所述的復合材料組合物,其特征在于,在進行溶解和混合時,以N,N,N-三丁基-l-丁銨溴化物作為相轉移催化劑。7.—種用于保存核酸的容器,其特征在于,所述的容器是由權利要求l-6任一所述的復合材料組合物制備而成。8.如權利要求7所述的容器,其特征在于,所述的容器包括外殼(ll)和外殼蓋(12);且外殼(11)與外殼蓋(12)可密合。9.權利要求7-8任一所述的容器的用途,其特征在于,所述的容器用于保存核酸。10.—種飾品,其特征在于,所述的飾品包括外飾(2),被外飾(2)包被或裝載的容器(1),和位于容器(1)內的核酸。全文摘要本發(fā)明公開了一種可用于制備核酸保存用容器的復合材料組合物,其包括雙酚A-環(huán)氧氯丙烷型環(huán)氧樹脂、聚苯乙烯和2-(2’-羥基-3’,5’-二叔-甲基苯基)苯并三唑。本發(fā)明還公開了以該組合物制成的核酸保存用容器,以及含有核酸的飾品。文檔編號B65D85/00GK101575441SQ20081003704公開日2009年11月11日申請日期2008年5月7日優(yōu)先權日2008年5月7日發(fā)明者盧莉瓊申請人:上海優(yōu)你生物科技有限公司
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