本發(fā)明涉及一種DNA保存方法以及設(shè)備,具體為一種DNA標(biāo)本常溫保存制備方法以及封裝設(shè)備。
背景技術(shù):
DNA是一種長鏈聚合物,組成單位為四種脫氧核苷酸,即腺嘌呤脫氧核苷酸(dAMP脫氧腺苷)、胸腺嘧啶脫氧核苷酸(dTMP脫氧胸苷)、胞嘧啶脫氧核苷酸(dCMP脫氧胞苷)、鳥嘌呤脫氧核苷酸(dGMP脫氧鳥苷)。而脫氧核糖(五碳糖)與磷酸分子借由酯鍵相連,組成其長鏈骨架,排列在外側(cè),四種堿基排列在內(nèi)側(cè)。每個糖分子都與四種堿基里的其中一種相連,這些堿基沿著DNA長鏈所排列而成的序列,DNA標(biāo)本的保存在現(xiàn)有技術(shù)中,為了延長保存時間,利用高壓或者高溫的方式來進行減少氧氣濃度的處理以及密封處理,那么會損傷DNA,保存的質(zhì)量不高,而且密封的時候不能保證一個比較理想的低氧氣環(huán)境下進行操作,很難降低保存瓶內(nèi)的氧氣含量,目前市場上還不存在常溫狀態(tài)下進行保存封裝的方法。
技術(shù)實現(xiàn)要素:
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種標(biāo)本瓶內(nèi)氧氣含量低、常溫封裝的DNA標(biāo)本常溫保存制備方法以及封裝設(shè)備。
為解決上述技術(shù)問題,本發(fā)明的技術(shù)方案是:DNA吸附于吸附膜上,取出吸附膜置于3毫升消毒潔凈標(biāo)本瓶內(nèi),再將標(biāo)本瓶置于DNA常溫保存自動封裝機上并將DNA常溫保存自動封裝機置于真空干燥箱室內(nèi);第一次抽真空至0.005MPa,加溫至10-35度,干燥30分鐘;充入氦氣至0.1MPa;第二次抽真空至0.005MPa;第二次充入氦氣至0.1MPa;第三次抽真空至0.005MPa;DNA常溫保存自動封裝機自動將膠塞塞入標(biāo)本瓶的瓶口;取出DNA常溫保存自動封裝機并取出標(biāo)本瓶,在標(biāo)本瓶外加金屬蓋帽,在金屬蓋帽外連同標(biāo)本瓶頸部用樹脂永久封裝。
作為優(yōu)選的技術(shù)方案,DNA常溫保存自動封裝機工作環(huán)境溫度為40-50度。
作為優(yōu)選的技術(shù)方案,所述的標(biāo)本瓶封裝過程為,將標(biāo)本瓶放入模具中,加樹脂凝固,封裝至標(biāo)本瓶金屬蓋帽下方,然后涂上脫模劑涂層或涂有脫模劑涂層的隔離墊,再次注塑,利用樹脂將金屬蓋帽以及涂上脫模劑涂層或涂有脫模劑涂層的隔離墊包含在內(nèi),形成永久封裝結(jié)構(gòu)。
為解決上述技術(shù)問題,本發(fā)明的進一步技術(shù)方案是:包括真空干燥箱、DNA常溫保存自動封裝機,所述的真空干燥箱包括箱體,在箱體側(cè)壁上設(shè)有一個加熱腔,加熱腔內(nèi)固定設(shè)置電熱絲,在箱體上設(shè)有真空閥、補充閥。
作為優(yōu)選的技術(shù)方案,所述的DNA常溫保存自動封裝機包括瓶座、壓板,在瓶座上固定設(shè)置彈簧桿,彈簧桿的一端設(shè)置擋環(huán),壓板套設(shè)在彈簧桿上,構(gòu)成滑移配合,在壓板的兩側(cè)分別設(shè)置平衡彈簧、溫度補償彈簧,平衡彈簧套設(shè)在彈簧桿上,一端頂住瓶座,另一端頂住壓板,所述的溫度補償彈簧套設(shè)在彈簧桿上,一端頂住壓板,另一端頂住彈簧桿的擋環(huán)。
作為優(yōu)選的技術(shù)方案,溫度補償彈簧的溫度補償溫度為40-50度。
為解決上述技術(shù)問題,本發(fā)明的進一步技術(shù)方案是:包括樹脂封裝體、樹脂封裝蓋、隔離層,樹脂封裝體內(nèi)設(shè)有用于容納DNA標(biāo)本瓶瓶體的空腔,樹脂封裝蓋內(nèi)設(shè)有用于容納DNA標(biāo)本瓶瓶蓋的空腔,樹脂封裝體、樹脂封裝蓋對應(yīng)扣合,隔離層設(shè)置在樹脂封裝體、樹脂封裝蓋之間,尺寸小于樹脂封裝體的尺寸,隔離層的周圍用樹脂封塑,連接樹脂封裝體、樹脂封裝蓋,形成永久密閉空間,所述的隔離層是脫模劑涂層或兩面涂有脫模劑涂層的隔離墊。
作為優(yōu)選的技術(shù)方案,在隔離層上設(shè)有通孔,通過樹脂封塑,構(gòu)成連接樹脂封裝體與樹脂封裝蓋的連接柱。
作為優(yōu)選的技術(shù)方案,所述的隔離墊邊緣設(shè)有凸起的破壞平衡齒。
作為優(yōu)選的技術(shù)方案,在隔離墊的中心設(shè)有一個定位孔,定位孔套設(shè)在DNA標(biāo)本瓶蓋上。
由于采用了上述技術(shù)方案,那么瓶內(nèi)氧氣等有害氣體在三次充氦氣過程中被大量排除,在抽真空后瓶內(nèi)的真空狀態(tài)能迫使DNA吸附材料微小空隙中和DNA密切接觸的氧氣等有害氣體逸出,并進一步稀釋氧氣等不利DNA保存的有害氣體。最后在橡膠塞外蓋設(shè)置金屬蓋帽,在金屬蓋帽外包裹高分子材料隔絕氧氣防止橡膠塞氧化后松動溢入空氣。流程最后還會在標(biāo)本瓶外用金屬盒包裝防止有害射線對DNA的破壞,使經(jīng)過去除核酸酶、蛋白質(zhì)和RNA的DNA在干燥隔絕空氣和正常室溫條件下達到常溫長期保存的效果。
附圖說明
為了更清楚地說明本發(fā)明實施例或現(xiàn)有技術(shù)中的技術(shù)方案,下面將對實施例或現(xiàn)有技術(shù)描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹,顯而易見地,下面描述中的附圖僅僅是本發(fā)明的一些實施例,對于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來講,在不付出創(chuàng)造性勞動性的前提下,還可以根據(jù)這些附圖獲得其他的附圖。
圖1是本發(fā)明第一磚體的結(jié)構(gòu)示意圖;
圖2是DNA標(biāo)本瓶永久密封盒的結(jié)構(gòu)示意圖;
圖3是隔離層的結(jié)構(gòu)示意圖。
具體實施方式
本發(fā)明一種DNA標(biāo)本常溫保存制備方法,首先要先制作標(biāo)本,將口腔拭子的棉簽用剪刀從桿上剪下置于2ml離心管中,加入400μl Buffer ATL;加入20μl Proteinase K,渦旋震蕩15秒,充分混勻,56℃水浴30分鐘,期間混勻一次;加入400μl Buffer AL,充分混勻,70℃水浴10分鐘,此時溶液應(yīng)變清亮,簡短離心,使管壁上的溶液收集到管底;加入400μl無水乙醇,渦旋震蕩充分混勻,簡短離心,使管壁上的溶液收集到管底;將上步所得溶液或乳濁液分兩次轉(zhuǎn)移到吸附柱中,一次不超過700μl,8000×g離心1分鐘,棄濾液,將吸附柱重新放回收集管中;加入500ul清洗液,8000×g離心1分鐘,棄濾液;加入600ul清洗液,8000×g離心1分鐘,棄濾液;加入600ul清洗液,8000×g離心1分鐘,棄濾液;最高速離心1分鐘,將吸附柱轉(zhuǎn)移到新的1.5ml離心管;開蓋最高速離心3分鐘,取出吸附柱中的DNA吸附膜,DNA吸附于吸附膜上,分裝保存,取出吸附膜置于3毫升消毒潔凈標(biāo)本瓶內(nèi),再將標(biāo)本瓶置于DNA常溫保存自動封裝機上并將DNA常溫保存自動封裝機置于真空干燥箱室內(nèi);第一次抽真空至0.005MPa,加溫至10-35度,干燥30分鐘;充入氦氣至0.1MPa;第二次抽真空至0.005MPa;第二次充入氦氣至0.1MPa;第三次抽真空至0.005MPa;DNA常溫保存自動封裝機自動將膠塞塞入標(biāo)本瓶的瓶口;取出DNA常溫保存自動封裝機并取出標(biāo)本瓶,在標(biāo)本瓶外加金屬蓋帽,在金屬蓋帽外連同標(biāo)本瓶頸部用樹脂永久封裝,DNA常溫保存自動封裝機工作環(huán)境溫度為40-50度,所述的標(biāo)本瓶封裝過程為,將標(biāo)本瓶放入模具中,加樹脂凝固,封裝至標(biāo)本瓶金屬蓋帽下方,然后涂上脫模劑涂層或涂有脫模劑涂層的隔離墊,再次注塑,利用樹脂將金屬蓋帽以及涂上脫模劑涂層或涂有脫模劑涂層的隔離墊包含在內(nèi),形成永久封裝結(jié)構(gòu)。
通過上述方法,可以逐漸驅(qū)逐氧氣等對于DNA有傷害的氣體,在真空環(huán)境中直接進行封裝,而傳統(tǒng)的方法,是在非真空環(huán)境下完成的,需要瞬間用惰性氣體將其他氣體沖出,瞬間高溫融化封裝,本發(fā)明指的常溫為相對低溫,60度以下,這樣的溫度對DNA標(biāo)本不會產(chǎn)生影響,而本方法的優(yōu)點在于在真空環(huán)境下實現(xiàn)常溫封裝,標(biāo)本瓶加厚能提高其強度,在抽真空需要加溫,是為了對真空環(huán)境進行干燥,而封裝溫度,是對因為真空隔絕無法進行封裝動作,需要溫度出發(fā)溫度補償彈簧來進行自動封裝。
參考圖1可知,本發(fā)明一種DNA標(biāo)本常溫保存制備設(shè)備包括真空干燥箱、DNA常溫保存自動封裝機,所述的真空干燥箱包括箱體1,在箱體1側(cè)壁上設(shè)有一個加熱腔13,加熱腔13內(nèi)固定設(shè)置電熱絲2,在箱體1上設(shè)有真空閥11、補充閥12,所述的DNA常溫保存自動封裝機包括瓶座3、壓板4,在瓶座3上固定設(shè)置彈簧桿5,彈簧桿5的一端設(shè)置擋環(huán)51,壓板4套設(shè)在彈簧桿5上,構(gòu)成滑移配合,在壓板4的兩側(cè)分別設(shè)置平衡彈簧6、溫度補償彈簧7,平衡彈簧6套設(shè)在彈簧桿5上,一端頂住瓶座3,另一端頂住壓板4,所述的溫度補償彈簧7套設(shè)在彈簧桿5上,一端頂住壓板4,另一端頂住彈簧桿5的擋環(huán)51,溫度補償彈簧7的溫度補償溫度為40-50度。
本結(jié)構(gòu)的使用,是通過補充閥進行補充氣體,而真空閥是用于抽真空,通過至少一次的抽氣和充氣來完成真空狀態(tài),降低有害氣體含量,然后通過電熱絲的加溫來升高溫度,先將塞子貼在壓板上,將標(biāo)本瓶放置在瓶座上,對位完成后,通過溫度升高來驅(qū)使溫度補償彈簧舒張,將壓板下壓,完成標(biāo)本瓶封裝,恢復(fù)溫度后,壓板復(fù)位,就能完成封裝,能在真空狀態(tài)下完成自動封裝動作。
氦氣瓶輸氣管子通過氣體流量計接入真空干燥箱的補充閥,關(guān)閉真空干燥箱真空閥,真空干燥箱,抽完真空后打開補充閥,打開氦氣瓶的閥和氣體流量計的閥,氦氣自動進入,流量計用于控制氦氣進入真空干燥箱的流量。
參考圖2、圖3可知,本發(fā)明DNA標(biāo)本瓶永久密封盒,包括樹脂封裝體101、樹脂封裝蓋102、隔離層103,樹脂封裝體101內(nèi)設(shè)有用于容納DNA標(biāo)本瓶瓶體104的空腔,樹脂封裝蓋102內(nèi)設(shè)有用于容納DNA標(biāo)本瓶104瓶蓋的空腔,樹脂封裝體101、樹脂封裝蓋102對應(yīng)扣合,隔離層103設(shè)置在樹脂封裝體101、樹脂封裝蓋102之間,尺寸小于樹脂封裝體101的尺寸,隔離層103的周圍用樹脂封塑,連接樹脂封裝體101、樹脂封裝蓋102,形成永久密閉空間,所述的隔離層103是兩面涂有脫模劑涂層的隔離墊,在隔離層103上設(shè)有通孔1031,通過樹脂封塑,構(gòu)成連接樹脂封裝體與樹脂封裝蓋的連接柱,所述的隔離墊邊緣設(shè)有凸起的破壞平衡齒1032,在隔離墊的中心設(shè)有一個定位孔1033,定位孔1033套設(shè)在DNA標(biāo)本瓶蓋上。
采用了上述技術(shù)方案,在使用的時候能實現(xiàn)永久性的封裝,利用脫模劑或者涂有脫模劑的隔離墊來防止脂封裝體、樹脂封裝蓋之間的結(jié)合,周圍封塑連接結(jié)構(gòu),用手就能擰開,而連接柱對連接的力加強了,防止該結(jié)構(gòu)落地破損,因此本發(fā)明的結(jié)構(gòu),不僅能實現(xiàn)永久封裝的效果,而且可以通過手動直接打開,開啟方便輕松,保護DNA標(biāo)本瓶在開啟過程中受到損壞。
以上顯示和描述了本發(fā)明的基本原理、主要特征及本發(fā)明的優(yōu)點。本行業(yè)的技術(shù)人員應(yīng)該了解,本發(fā)明不受上述實施例的限制,上述實施例和說明書中描述的只是說明本發(fā)明的原理,在不脫離本發(fā)明精神和范圍的前提下,本發(fā)明還會有各種變化和改進,這些變化和改進都落入要求保護的本發(fā)明范圍內(nèi)。本發(fā)明要求保護范圍由所附的權(quán)利要求書及其等效物界定。