專利名稱：特效菌ypc－ta3及處理廢水的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明創(chuàng)造涉及特效微生物菌的篩選純化及處理化工廢水的方法。
背景技術(shù)：
對苯二甲酸(以下簡稱PTA)作為石油化工企業(yè)的重要產(chǎn)品之一，相應(yīng)產(chǎn)生的廢水排放量也相當(dāng)大，其廢水中COD高達(dá)幾千甚至上萬。由于PTA廢水中的污染物多為芳香族化合物，同時PTA也是一種毒害性污染物，而且廢水的處理難度較大，屬于難生物降解的廢水。因此深入研究開發(fā)高效廉價大規(guī)模工業(yè)化降解處理PTA廢水的技術(shù)及裝備具有十分重要的意義。
現(xiàn)有各種處理PTA廢水的技術(shù)均有一定的缺陷和不足。總的來說有的工藝復(fù)雜，構(gòu)筑物多，基建投資大，出水質(zhì)量一般有的污泥產(chǎn)量大，占地面積大，運(yùn)行費(fèi)用高。其主要的原因之一就是處理裝置中有效菌含量低，雜菌含量過高，即缺少對污水中污染物具有高效降解作用的有效菌，尤其是針對PTA廢水中具有的高效降解菌。
本發(fā)明采用微生物篩選、純化技術(shù)，從自然環(huán)境中獲得原始菌株，以芳香羧酸為碳源進(jìn)行純化培養(yǎng)，獲得對芳香羧酸具有高效降解作用的菌株，并測定其對COD及芳香羧酸的降解性能。測定結(jié)果，該菌降解性能優(yōu)良，對芳香羧酸廢水的生物處理有很大的應(yīng)用價值。
三、發(fā)明的內(nèi)容本發(fā)明目的為了提供對芳香羧酸，特別是苯二甲酸具有高效降解作用的特效菌，所述特效菌為YPC-TA3，(Clavibacter xyliyzsc，保藏在CGMCC，保藏編號No.1201，保藏日期2004年8月3日)本發(fā)明另一目的是一種利用上述特效菌YPC-TA3處理廢水的方法。
本發(fā)明的技術(shù)構(gòu)思從自然環(huán)境中獲得原始菌株樣本，進(jìn)行篩選培養(yǎng)，獲得初步菌株樣本，接種后進(jìn)行芳香羧酸降解性能測試，選取性能最好的為目標(biāo)樣本既特效菌。
以下對本發(fā)明作進(jìn)一步描述一、菌株分離篩選方法(一)試劑配制1.芳香羧酸貯備液稱取40g純對苯二甲酸(或鄰苯二甲酸、間苯二甲酸、苯甲酸)溶于1000ml蒸餾水中，用Na2CO3調(diào)節(jié)在7.2～7.7之間。
2.富集培養(yǎng)液I牛肉膏0.1g，蛋白胨0.2g，NaCl 0.2g，溶于100ml蒸餾水中。
3.富集培養(yǎng)液II牛肉膏0.5g，蛋白胨0.5g，NaCl 0.2g，溶于100ml蒸餾水中。
4.篩選培養(yǎng)基瓊脂4g，Na2HPO40.1g，(NH4)2SO40.2g，對苯二甲酸(或鄰苯二甲酸、間苯二甲酸、苯甲酸)貯備液20ml，加蒸餾水至100ml。
5.模擬廢水Na2HPO40.05g，(NH4)2SO40.1g，對苯二甲酸(或鄰苯二甲酸、間苯二甲酸、苯甲酸)貯備液5ml，加蒸餾水至100ml。
6.富集培養(yǎng)基瓊脂0.6g，牛肉膏0.6g，蛋白胨0.6g，NaCl 0.4g，溶于100ml蒸餾水中。
7.保存培養(yǎng)基Na2HPO40.1g，(NH4)2SO40.2g，瓊脂2g，對苯二甲酸(或鄰苯二甲酸、間苯二甲酸、苯甲酸)貯備液1ml，溶于100ml蒸餾水中。
(二)篩選方法1、初篩第一步取芳香羧酸堆場上某處土壤約1g，用50ml富集培養(yǎng)液I室溫?fù)u床培養(yǎng)24小時。
第二步將第一步獲得的菌懸液稀釋至10-5～10-6，在篩選培養(yǎng)基上涂布，培養(yǎng)48小時，進(jìn)行馴化。
第三步配制摸擬廢水，測其COD，記為初始COD。
第四步從第二步所制篩選培養(yǎng)基上生長的菌落中挑出18個，移入18瓶各含50ml富集培養(yǎng)液II的瓶中，室溫?fù)u床培養(yǎng)24小時。
第五步將第四步獲得的菌懸液各取10ml，離心12min，棄上清液，將沉淀物移入模擬廢水中，在660nm波長處測定其吸光度，確定其菌體濃度。培養(yǎng)48小時，離心12min，取上清液做COD，記為終了COD。
降解率＝(1-終了COD/初始COD)*100計算，降解率大于80％的進(jìn)行保存。
COD測定方法見GB11914-892、復(fù)篩先后使用了兩種方法，對初篩獲得的菌株作進(jìn)一步篩選與純化。
方法一與初篩過程基本相同，區(qū)別在于用冰箱中保存的菌株代替芳香羧酸堆場的土壤。
方法二取冰箱保存的菌株，從第四步開始與初篩各步驟相同。
二、菌株YPC-TA3的生物學(xué)特性YPC-TA3菌株鑒定菌株鑒定依據(jù)為《伯杰氏細(xì)菌分類手冊》(第八版)，鑒定到屬。

對菌株進(jìn)一步鑒定采用16s rRNA基因全序列分析1.16s rRNA基因全序列分析(1)菌體培養(yǎng)與收集干菌片在含1000mg/L的對苯二甲酸基本液體培養(yǎng)基中(以芳香羧酸為碳源)富集活化，涂布相同的固體平板，待菌落長出后，檢查菌落的純度與形態(tài)，YPC-TA3菌落小，呈半透明白色；挑取單菌落，接種于LB平板中。
菌株經(jīng)LB平板活化后，挑取單菌落接種于20mlLB培養(yǎng)液中，28℃恒溫振蕩(200r/min)培養(yǎng)，在對數(shù)生長期離心(4℃，12000rpm，10min)收集菌體。
(2)總DNA的小量提取取1.5ml菌液5000rpm離心4min，去除上清，用1mlTE緩沖液清洗菌體，5000rpm離心4min，去除上清，以270μl TE緩沖液懸浮菌體。加入15μl溶菌酶溶液，于37℃水浴15min。加15μl 10％SDS，混勻。加10μl蛋白酶K，混勻，37℃水浴1h。加200ul 5M保存于4℃的Nacl，劇烈振蕩。加500μl酚∶氯仿∶異戊醇(25∶24∶1)，輕輕振蕩均勻，10000rpm離心10min，吸取上清液至新離心管中。加400ulTE緩沖液后，加500ul異丙醇混勻，置于-20℃過夜以充分沉淀DNA。取出后以10000rpm于4℃離心10min，去除上清，用70％于4℃預(yù)冷的乙醇洗沉淀3次，風(fēng)干，溶于50μl TE(PCR反應(yīng)專用)緩沖液中。
(3)16s rDNA擴(kuò)增體系的設(shè)計用于擴(kuò)增供試菌株16s rDNA的PCR引物為P1和P6，它們來源于E.coli 16s rRNA基因序列的保守區(qū)域。引物P1和P6的序列如下正向引物5′-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3′為Ecoli 8-27。
反向引物5′-TACCTTGTTACGACTT-3′，下游序列位于1492-1507堿基位置。
上述引物由上海博亞公司合成。根據(jù)該公司產(chǎn)品說明，用無菌重蒸水將引物溶解至終濃度為100μM，于-20℃下保存。
(4)PCR擴(kuò)增反應(yīng)依次于0.5ml PCR管中加入ddH2O、擴(kuò)增緩沖液、dNTP、Taq酶、Mg2+、P1、P6和模板DNA。瞬間離心后置于PCR儀(Biorad icycle)中進(jìn)行預(yù)變性(95℃，10min)，再進(jìn)行擴(kuò)增循環(huán)。本實(shí)驗采用的循環(huán)條件為94℃變性1min，55℃退火1min，72℃延伸3min，循環(huán)35次，循環(huán)結(jié)束后72℃延長10min，4℃保存。
(5)PCR產(chǎn)物的檢測、回收與純化取2μl擴(kuò)增產(chǎn)物與3μl無菌水、1μl上樣緩沖液混勻后，在0.75％的瓊脂糖凝膠板上進(jìn)行電泳(5v/cm)。以DNA marker DL2000為標(biāo)準(zhǔn)分子量對照。電泳后經(jīng)EB染色，于紫外燈下觀察，檢測擴(kuò)增片段的長度和濃度，保存擴(kuò)增成功的樣品。
PCR產(chǎn)物的回收純化采用TaKaRa公司的PCR Fragment Recovery Kit試劑盒。
(6)連接載體采用購自TaKaRa公司的PMD 18-T Vector。構(gòu)建以下體系pMD 18-T Vector 1ul
Insert DNA 1ulLigation Solution5uldH2O補(bǔ)足到10ul于16℃反應(yīng)過夜。
(7)培養(yǎng)DH5a感受態(tài)細(xì)胞接種單菌落至5ml LB試管中，于37℃劇烈振蕩培養(yǎng)7h，以1％接種量接種至100ml LB三角瓶中繼續(xù)培養(yǎng)，隨時檢測OD值，待OD600為0.35時，迅速將搖瓶冰浴10min，使培養(yǎng)物冷至0℃，4℃于4000rpm離心3min，去除上清，以10ml冰預(yù)冷的0.1mol/l CaCl2重懸細(xì)胞，冰浴30min，4℃于5000rpm離心3min，去除上清，回收細(xì)胞。每50ml初始培養(yǎng)物用2ml冰預(yù)冷的0.1mol/l CaCl2重懸細(xì)胞沉淀，冰浴4h，得到感受態(tài)細(xì)胞。
(8)轉(zhuǎn)化DNA入感受態(tài)細(xì)胞用冷卻的無菌吸頭吸取200ul感受態(tài)細(xì)胞懸液至無菌2ml離心管，每管加10ul DNA，輕輕混勻，冰浴30min。在預(yù)加溫至42℃的水浴鍋中放置正好90s后，快速轉(zhuǎn)管至冰盒上冰浴1-2min，每管加預(yù)熱至37℃的LB培養(yǎng)基800ul，在搖床上以低于50rp而速度溫育60min，使細(xì)菌復(fù)蘇并表達(dá)質(zhì)粒編碼的抗生素抗性標(biāo)記基因。配置如下含相應(yīng)標(biāo)記平板每100ml LB中含x-gal(20mg/ml)200ul、IPTG(200mg/ml)12ul、Amp(100mg/ml)100ul。在每塊以上平板上涂布200ul已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細(xì)胞，置于室溫直至液體被吸收，倒置于37℃培養(yǎng)，待12-16h后出現(xiàn)菌落。
(9)檢測挑取白斑菌落，提取質(zhì)粒，以HindIII和EcoRI進(jìn)行雙酶切(體系外源DNA 5ul，Buffer1ul，dH2O 3ul，HindIII和EcoRI各lul)，在0.75％的瓊脂糖凝膠板上進(jìn)行電泳(5v/cm)，檢測片斷大小。
2 16S rRNA基因序列的測定和分析將質(zhì)粒菌株交由Takara公司測序。所測序列進(jìn)入GenBank數(shù)據(jù)庫進(jìn)行相似性分析。
3.基于16s rDNA比較的系統(tǒng)發(fā)育圖所測序列進(jìn)入GenBank數(shù)據(jù)庫進(jìn)行相似性分析，并與GenBank中的已知序列在ClustalX(1.8)程序包中進(jìn)行多重序列匹配排列(Multiple Alignments)分析，最后形成一個多重序列匹配排列陣，其中形成的缺口用橫杠“-”填補(bǔ)，在MEGA2程序包中用Neighbor-Joining法構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹。
從N-J法建立的系統(tǒng)發(fā)育樹(圖)上可以看出YPC-TA3菌株與Clavibacter xyli位于同一分支內(nèi)，但16s rDNA相似性僅為50％，具有遺傳的特異性，因此該菌應(yīng)為Clavibacter xyli中的一個新亞種，我們稱之為Clavibacter xyli yzsc。
在不同地點(diǎn)取苯甲酸或苯二甲酸堆場上的不同土壤進(jìn)行該菌株的篩選，結(jié)果基本相同。證明本菌株的篩選具有再現(xiàn)性。
三、菌株YPC-TA3對苯二甲酸的降解性能本發(fā)明的特效菌對芳香羧酸有良好的降解作用，特別是苯二甲酸，如對苯二甲酸、鄰苯二甲酸、間苯二甲酸，本課題組對此作了反復(fù)研究1、COD/苯二甲酸降解曲線測定自冰箱保存的斜面各接一環(huán)菌苔至50ml培養(yǎng)液II，共四瓶，室溫180rpm搖床培養(yǎng)24小時，混合后4000rpm離心15min，將所得菌泥平均分配至9瓶模擬廢水(50ml)中，使初始吸光度(660nm)在0.4～0.6之間，室溫180rpm搖床培養(yǎng)，每4-6小時，取少量菌懸液，4000rpm離心15min，取上清液測定COD及對苯二甲酸，直至COD降到300mg/l(對苯二甲酸在50mg/l左右)以下，做出COD及對苯二甲酸與時間的關(guān)系曲線，即為COD、對苯二甲酸降解曲線。
在對苯二甲酸濃度為3550mg/L的模擬廢水中，按0.5g/L的接種量接入活化的特效菌。在室溫下培養(yǎng)，定時測定對苯二甲酸降解率及菌體濃度，特效菌的對苯二甲酸降解曲線如圖1。
特效菌的COD降解曲線如圖2COD降解至0后有上升現(xiàn)象，而對苯二甲酸降解則無此現(xiàn)象，這可能是由于對苯二甲酸碳源被利用完后的菌體破碎所致。
2、菌株的COD/對苯二甲酸耐受性方法基本同降解曲線，但改變了模擬廢水中的初始對苯二甲酸濃度，測試不同濃度下對苯二甲酸、COD的降解情況。
1)不同初始COD的降解情況時間(小時) COD(mg/L)0641413.5 23003639 220442)不同初始對苯二甲酸的降解情況時間(小時) 對苯二甲酸(mg/L)
0355010 25031922.5 600由表可知1)初始對苯二甲酸與降解時間有相關(guān)性，初始對苯二甲酸高，降解時間長，反之亦然。
2)隨著初始對苯二甲酸升高后，細(xì)菌的降解速度及去除率有所下降。
3)在初篩過程中，曾試驗過高于7000mg/L對苯二甲酸模擬廢水，菌株亦可承受，經(jīng)96小時降解后，對苯二甲酸為140mg/L。
3、不同pH值對對苯二甲酸降解菌的降解能力影響選擇的pH范圍為5.5、6、7、8、9、10、10.5，在相同的36小時培養(yǎng)時間、相同生物量、35℃溫度和150rpm震蕩速率時進(jìn)行試驗。開始的對苯二甲酸濃度一致，最后測溶液中對苯二甲酸、TOC的濃度和pH值。
對苯二甲酸降解菌對pH有較寬的適應(yīng)范圍，pH在5.5-9的范圍內(nèi)，都有很好的降解能力。pH5.5-8是對苯二甲酸降解菌的最適范圍。在低pH時，對苯二甲酸降解過程中，降解菌能提高培養(yǎng)液的對處理pH值，當(dāng)初始的培養(yǎng)液pH為5.5時，通過微生物處理以后，最終的pH達(dá)到9.5，因此，對于正常的廢水處理中，沒有必要使進(jìn)水的pH調(diào)到中性。而且可使用出水對進(jìn)水PH進(jìn)行調(diào)節(jié)，減少進(jìn)水PH調(diào)節(jié)的物質(zhì)損耗。
4、不同生物量對對苯二甲酸降解菌降解能力的影響方法基本同COD、對苯二甲酸降解曲線，但在將菌泥分配給模擬廢水時，形成菌液的初始濃度梯度，觀察不同投加量下降解曲線的變化。大量培養(yǎng)對苯二甲酸菌，分別測定培養(yǎng)液中微生物的數(shù)量和生物量，然后以一倍，二倍和三倍的生物量加入到培養(yǎng)液中，36小時后觀察培養(yǎng)液中對苯二甲酸、TOC濃度和pH值。
YPC-TA3菌株在營養(yǎng)肉湯中培養(yǎng)后，生物量為1.070g/L。取不同的生物量加入的30ml的對苯二甲酸液體中，進(jìn)行培養(yǎng)。
不同生物量對相同濃度的對苯二甲酸廢水產(chǎn)生不同的影響，加入的對苯二甲酸降解菌的數(shù)量多，在單位時間內(nèi)對對苯二甲酸的降解效率高，對TOC降低也有同樣的結(jié)果。但是，不同生物量對處理后最終出水的pH影響不大，都維持在9.0左右。
5、不同溫度對對苯二甲酸降解菌降解能力的影響選擇的溫度為25、30、35、39℃，在相同的36小時時間、生物量、pH7和震蕩速率時進(jìn)行試驗。開始的對苯二甲酸濃度一致。
不同溫度對對苯二甲酸降解菌的影響比較大，在25-35℃時都能生長，并隨溫度升高，對苯二甲酸的去除率提高，對TOC也時同樣的結(jié)果。在25℃，對苯二甲酸的去除率比TOC的去除率要高。
6、不同振蕩速率對對苯二甲酸降解菌降解能力的影響選擇0、50、100、150r/Min的振蕩速率，在相同的對苯二甲酸濃度，在相同的生物量、pH7時，36小時后觀察最后溶液中對苯二甲酸、TOC的濃度和pH值。
不同振蕩速率對對苯二甲酸降解菌的處理效果影響較大，提高振蕩速率，增加液體的供氧量，使對苯二甲酸的處理效率提高。由于對苯二甲酸降解菌是嚴(yán)格的好氧菌，如果在厭氧狀態(tài)下，對對苯二甲酸不起降解作用。在相同條件下，最后處理后的培養(yǎng)液中pH都在8.9左右。因此，可以從pH的變化反映對苯二甲酸處理的效果。
以上方法不限于對苯二甲酸，本課題組還試驗了間苯二甲酸、鄰二苯甲酸、苯甲酸，本發(fā)明的特效菌對他們都有良好的降解作用。
7、保存方法依據(jù)簡單可靠的原則，我們先后試驗了兩種方法。
1)液體石蠟保存法將保存培養(yǎng)基做斜面，菌株劃線培養(yǎng)24小時，注入已滅菌的液體石蠟，保持液面高于斜面上端1cm，置于冰箱4℃保存。
2)Stamp保存法取富集菌體0.5ml，將等體積已滅菌的A、B液混合，然后將混合液與菌體混合成菌懸液，按1∶100加入C液，用滅菌注射器滴加在聚乙烯膜上，置無菌工作臺上吹淋48小時，膠帶封口，置冰箱4℃保存。
發(fā)明創(chuàng)造的效果芳香羧酸是較難降解的化合物，本發(fā)明的特效菌YPC-TA3對芳香羧酸有較強(qiáng)的降解能力，在對苯二甲酸濃度為3550mg/L、pH為7的模擬廢水中，按0.5g/L的接種量接入活化的高效降解菌，室溫下?lián)u瓶培養(yǎng)，經(jīng)過20-25小時，對苯二甲酸濃度降為0mg/L，降解時間短、降解效率高。
四

圖1 YPC-TA3對對苯二甲酸的降解曲線圖2 YPC-TA3對COD的降解曲線本發(fā)明的微生物保藏保藏日2004年8月3日，保藏編號No.1201，中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏，地址北京海淀區(qū)中關(guān)村北一條13號中國科學(xué)院微生物研究所。
五具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1菌種采集篩選取對苯二甲酸堆場上某處土壤約1g，置于含50ml富集培養(yǎng)液I的錐形瓶中，室溫?fù)u床培養(yǎng)24小時，培養(yǎng)溫度25℃；pH為7。
第二步 將第一步獲得的菌懸液稀釋至10-5～10-6，在篩選培養(yǎng)基上涂布，培養(yǎng)48小時，進(jìn)行馴化。
第三步 配制摸擬廢水，測其COD，記為初始COD。
第四步 從第二步所制篩選培養(yǎng)基上生長的菌落中挑出18個，移入18瓶各含50ml富集培養(yǎng)液II的錐形瓶中，室溫?fù)u床培養(yǎng)24小時。
第五步 將第四步獲得的菌懸液各取10ml，離心12min，棄上清液，將沉淀物移入模擬廢水中，在660nm波長處測定其吸光度，確定其菌體濃度。培養(yǎng)48小時，離心12min，取上清液做COD，記為終了COD。
降解率大于80％的進(jìn)行保存。
配制培養(yǎng)基，瓊脂4g，Na2HPO40.1g，(NH4)2SO40.2g，對苯二甲酸0.8克，加蒸餾水至100ml。倒入培養(yǎng)皿制成固體培養(yǎng)基，涂布培養(yǎng)24小時(培養(yǎng)溫度30℃)，即可出現(xiàn)白色菌落。
配制模擬廢水，Na2HPO40.05g，(NH4)2SO40.1g，對苯二甲酸濃度為3550mg/L，用Na2CO3調(diào)節(jié)pH為5.5，加蒸餾水至100ml。高溫滅菌，按0.5g/L的接種量接入活化的高效降解菌，室溫下?lián)u瓶培養(yǎng)，經(jīng)過20-25小時，對苯二甲酸濃度降為0mg/L。
利用該菌種處理對苯二甲酸化工廢水的方法，是將上述處理模擬廢水的方法簡單放大對苯二甲酸石油化工工業(yè)廢水，對苯二甲酸濃度為3550mg/L，加入營養(yǎng)鹽Na2HPO40.05g/L，(NH4)2SO40.1g/L。用Na2CO3調(diào)節(jié)pH為5.5，加水一倍，高溫滅菌。按0.5g/L的接種量接入活化的高效降解菌，室溫下利用風(fēng)機(jī)曝氣加氧培養(yǎng)，經(jīng)過20-25小時，對苯二甲酸濃度降為0mg/L。
實(shí)施例2菌種采集篩選步驟及處理化工廢水的方法同實(shí)施例1，區(qū)別在于用苯甲酸替代對苯二甲酸。培養(yǎng)溫度25℃；pH為5.5。
實(shí)施例3菌種采集篩選步驟及處理化工廢水的方法同實(shí)施例1，區(qū)別在于培養(yǎng)溫度35℃；pH為9；配制模擬廢水，Na2HPO40.05g，(NH4)2SO40.lg，對苯二甲酸濃度為7000mg/L，用Na2CO3調(diào)節(jié)pH為9，加蒸餾水至100ml。高溫滅菌，按0.5g/L的接種量接入活化的高效降解菌，室溫下?lián)u瓶培養(yǎng)，經(jīng)96小時降解后，對苯二甲酸為130mg/L。
實(shí)施例4菌種采集篩選步驟及處理化工廢水的方法同實(shí)施例1，區(qū)別在于培養(yǎng)溫度30℃；pH為8；配制模擬廢水，Na2HPO40.05g，(NH4)2SO40.1g，間苯二甲酸濃度為4020mg/L，用Na2CO3調(diào)節(jié)pH為7的，加蒸餾水至100ml。高溫滅菌，按0.5g/L的接種量接入活化的高效降解菌，室溫下?lián)u瓶培養(yǎng)，經(jīng)96小時降解后，間苯二甲酸為23mg/L。
實(shí)施例5菌種采集篩選步驟及處理化工廢水的方法同實(shí)施例1，區(qū)別在于配制模擬廢水，Na2HPO40.05g，(NH4)2SO40.1g，鄰苯二甲酸濃度為3850mg/L，用Na2CO3調(diào)節(jié)pH為7的，加蒸餾水至100ml。高溫滅菌，按0.5g/L的接種量接入活化的高效降解菌，室溫下?lián)u瓶培養(yǎng)，經(jīng)96小時降解后，鄰苯二甲酸為20mg/L。
實(shí)施例6菌種采集篩選步驟及處理化工廢水的方法同實(shí)施例1，區(qū)別在于配制模擬廢水，Na2HPO40.05g，(NH4)2SO40.1g，苯甲酸濃度為4010mg/L，用Na2CO3調(diào)節(jié)pH為7的，加蒸餾水至100ml。高溫滅菌，按0.5g/L的接種量接入活化的高效降解菌，室溫下?lián)u瓶培養(yǎng)，經(jīng)96小時降解后，苯甲酸為26mg/L。
權(quán)利要求
1.一種降解廢水中芳香羧酸，特別是降解對苯二甲酸的特效菌株，其特征在于所述菌株為YPC-TA3，Clavibacter xyliyzsc，保藏在CGMCC，保藏編號No.1201，保藏日期2004年8月3日。
2.按權(quán)利要求1所述的特效菌株YPC-TA3，其特征在于從含芳香羧酸的堆場中分離得到；該菌株適宜在溫度25～35℃，PH值5.5～9條件下培養(yǎng)；以芳香羧酸為碳源。
3.按權(quán)利要求1或2所述的特效菌株YPC-TA3，其特征在于從含二羧酸的堆場中分離得到；該菌株適宜在溫度35℃，PH值5.5～8條件下培養(yǎng)；以芳香二羧酸為碳源。
4.一種利用利用權(quán)利要求1所述特效菌YPC-TA3降解含芳香羧酸廢水的方法，步驟如下加入營養(yǎng)鹽Na2HPO4，(NH4)2SO4，調(diào)節(jié)pH為5.5～9，加水一倍，高溫滅菌，按0.5g/L的接種量接入活化的高效降解菌，室溫下曝氣加氧培養(yǎng)，經(jīng)過20～25小時，即可。
5.按照權(quán)利要求4所述的特效菌YPC-TA3降解含芳香羧酸廢水的方法，其特征在于所述所述芳香羧酸至少包括苯二甲酸。
6.按照權(quán)利要求4所述的特效菌YPC-TA3降解含芳香羧酸廢水的方法，其特征在于所述芳香羧酸至少包括對苯二甲酸。
全文摘要
本發(fā)明屬于處理廢水中芳香羧酸的微生物菌株發(fā)明及利用該菌株處理廢水的用途發(fā)明，本發(fā)明包括篩選純化降解芳香羧酸的特效菌YPC－TA3，以芳香羧酸為碳源的培養(yǎng)基篩選獲得，為好氧菌，該菌株可降解廢水中芳香羧酸，特別是苯二甲酸。本發(fā)明的特效菌降解時間短，降解效率高。
文檔編號C02F3/34GK1605625SQ20041004180
公開日2005年4月13日 申請日期2004年8月27日 優(yōu)先權(quán)日2004年8月27日
發(fā)明者陳俊, 鄭國洋, 黃勇, 朱建忠, 章曉春, 王桂林, 周立進(jìn), 王洪麗, 陸建華, 羅翔, 喻敬周 申請人:揚(yáng)子石油化工股份有限公司