專利名稱：一種低溫下去除污水中磷的金黃桿菌及分離培養(yǎng)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于污水處理領(lǐng)域，涉及一株具有低溫下去除污水中磷的金黃桿菌及分離培養(yǎng)方法。
背景技術(shù)：
低溫對(duì)生物處理能力產(chǎn)生重大影響的原因是由于溫度的降低影響了微生物的生長(zhǎng)及代謝。聚磷菌雖是低溫耐冷菌，但在溫度下降過程中，聚磷菌的釋磷和吸磷速率也受到影響，，從而導(dǎo)致污水處理廠冬季出水水質(zhì)下降。因此亟需一種在低溫條件下能強(qiáng)化去除污水中磷的菌株。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有菌株低溫脫磷效果不佳的不足，提供一種去除污水中磷的金黃桿菌。本發(fā)明的第二個(gè)目的是提供一種去除污水中磷的金黃桿菌的分離培養(yǎng)方法。本發(fā)明的第三個(gè)目的是提供一種去除污水中磷的金黃桿菌的用途。本發(fā)明的技術(shù)方案概述如下一種低溫下去除污水中磷的金黃桿菌(Chryseobacterium sp.)深黃聚磷CGMCC No. 5282，其具有在低溫好氧條件下去除污水中磷的能力。一種低溫下去除污水中磷的金黃桿菌(Chryseobacterium sp.)深黃聚磷CGMCC No. 5282在低溫好氧條件下去除污水中磷的用途。低溫優(yōu)選為8 12 °C。低溫下去除污水中磷的金黃桿菌的的分離培養(yǎng)方法，包括如下步驟(1)將富磷培養(yǎng)液放入小試SBR反應(yīng)器中，將污水處理廠污泥接種所述富磷培養(yǎng)液中，在8 12°C，連續(xù)培養(yǎng)20天，運(yùn)行周期為6小時(shí)，其中包括厭氧攪拌2. 5小時(shí)，好氧 2. 5小時(shí)，靜置0. 5小時(shí)，排上清液及補(bǔ)充新的富磷培養(yǎng)液共0. 5小時(shí)；運(yùn)行期間保持污泥濃度為3000mg/L ； (2)取IOmL步驟(1)獲得的污泥，加入已裝有90mL滅菌蒸餾水和20 30粒滅菌玻璃珠的250ml錐形瓶中，振蕩10 30min，使細(xì)菌細(xì)胞充分釋放到上清液中；靜置20 40min，取ImL上清液加入裝有9mL無菌蒸餾水的試管中，得到10_2的菌懸液，按上述方法依次做系列稀釋，一直做到10_8為止；(3)選取梯度為10_5 10_8的菌懸液，分別取ImL接種于富磷固體培養(yǎng)基，每個(gè)稀釋度做3個(gè)平行樣，編號(hào)；10°C在有氧的條件下保濕培養(yǎng)2 3周；(4)從步驟(3)中的富磷固體培養(yǎng)基平板中挑選菌落大，形態(tài)不同的單菌落，在富磷固體培養(yǎng)基平板中再次劃線分離，重復(fù)平板劃線分離3-4次，使平板上的菌落在顯微鏡中的形態(tài)相同，單一，大小相似即為單菌落，命名為深黃聚磷，經(jīng)鑒定為低溫下去除污水中憐的金黃桿菌(Chryseobacterium sp.)所述富磷培養(yǎng)液為由下述組分組成=CH3COONa · 3H20 3. 32g、KH2PO4 43. 75mg、CaCl2 · 2H20 25. 68mg、KNO3 485. 94mg、MgSO4 · 7H20 91. 26mg,5mL Tris 緩沖液和 2mL 微量元素；加蒸餾水至IOOOmL,調(diào)節(jié)pH為7. 2 ；所述微量元素溶液的組成為EDTA5g、FeSO4 · 7H20 5g、CuSO4 · 5H20 1. 6g、 MnCl2 · 4H20 5g、(NH4)6Mo7O2 · 4H20 50mg、H3B0350mg、KI IOmg 禾口 CoCl2 · 6H20 50mg 力口蒸溜水至 lOOOmL。所述富磷固體培養(yǎng)基為由下述組分組成=CH3COONa · 3H20 3. 32g、KH2PO4 43. 75mg、 CaCl2 · 2H20 25. 68mg、KNO3 485. 94mg、MgSO4 · 7H20 91. 26mg,5mL Tris 緩沖液和 2mL 微量元素，瓊脂20g,加蒸餾水至IOOOmL,調(diào)節(jié)pH為7. 2 ；所述微量元素溶液的組成為EDTA5g、FeSO4 · 7H20 5g、CuSO4 · 5H20 1. 6g、 MnCl2 · 4H20 5g、(NH4)6Mo7O2 · 4H20 50mg、H3BO3 50mg、KI IOmg 禾口 CoCl2 · 6H20 50mg 加蒸溜水至 lOOOmL。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明盡管受到低溫環(huán)境的明顯抑制，投加本發(fā)明的一種低溫下去除污水中磷的金黃桿菌(Chryseobacterium sp.)深黃聚磷CGMCC No. 5282在低溫下，特別是在 8-12°C的條件下，對(duì)磷去除有明顯的強(qiáng)化作用，磷去除率提高了 10%，優(yōu)于一級(jí)A的出水標(biāo)準(zhǔn)(水溫彡12°C時(shí)，一級(jí)A標(biāo)準(zhǔn)的控制指標(biāo)為0. 5mg/L)。


圖1為一種低溫下去除污水中磷的金黃桿菌(Chryseobacterium sp.)深黃聚磷 CGMCC No. 5282的馴化分離培養(yǎng)流程圖。圖2為深黃聚磷去除磷的試驗(yàn)。圖3為金黃桿菌(Chryseobacterium sp.)深黃聚磷細(xì)菌鑒定方法流程。
具體實(shí)施例方式下面通過具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說明。實(shí)施例1低溫下去除污水中磷的金黃桿菌的的分離培養(yǎng)方法，包括如下步驟(1)將富磷培養(yǎng)液放入小試SBR反應(yīng)器中，將天津紀(jì)莊子污水處理廠曝氣池的污泥接種所述富磷培養(yǎng)液中，在10°c，連續(xù)培養(yǎng)20天，運(yùn)行周期為6小時(shí)，其中包括厭氧攪拌 2. 5小時(shí)，好氧2. 5小時(shí)，靜置0. 5小時(shí)，排上清液及補(bǔ)充新的富磷培養(yǎng)液共0. 5小時(shí)；運(yùn)行期間保持污泥濃度為3000mg/L ；(2)取IOmL步驟(1)獲得的污泥，加入已裝有90mL滅菌蒸餾水和30粒滅菌玻璃珠的250ml錐形瓶中，振蕩20min，使細(xì)菌細(xì)胞充分釋放到上清液中；靜置30min，取ImL上清液加入裝有9mL無菌蒸餾水的試管中，得到10_2的菌懸液，按上述方法依次做系列稀釋， 一直做到10_8為止；(3)選取梯度為10_5 10_8的菌懸液，分別取ImL接種于富磷固體培養(yǎng)基，每個(gè)稀釋度做3個(gè)平行樣，編號(hào)；10°C在有氧的條件下保濕培養(yǎng)3周；(4)從步驟(3)中的富磷固體培養(yǎng)基平板中挑選菌落大，形態(tài)不同的單菌落，在富磷固體培養(yǎng)基平板中再次劃線分離，重復(fù)平板劃線分離4次，使平板上的菌落在顯微鏡中的形態(tài)相同，單一，大小相似即為單菌落，命名為深黃聚磷，經(jīng)鑒定為低溫下去除污水中磷的金黃桿菌(Chryseobacterium sp.)實(shí)施例2富磷培養(yǎng)液為由下述組分組成CH3COONa · 3H20 3. 32g, KH2PO4 43. 75mg、CaCl2 · 2H20 25. 68mg、KNO3 485. 94mg、 MgSO4 · 7H20 91. 26mg、5mL Tris緩沖液和2mL微量元素；加蒸餾水至IOOOmL,調(diào)節(jié)pH為 7. 2 ；所述微量元素溶液的組成為=EDTA5g、FeSO4 · 7H20 5g、CuSO4 · 5H20 1. 6g、 MnCl2 · 4H20 5g、(NH4)6Mo7O2 · 4H20 50mg、H3BO3 50mg、KI IOmg 和 CoCl2 · 6H20 50mg 加蒸餾水至 lOOOmL。實(shí)施例3富磷固體培養(yǎng)基為由下述組分組成CH3COONa · 3H20 3. 32g、KH2PO4 43. 75mg、CaCl2 · 2H20 25. 68mg、KNO3 485. 94mg、 MgSO4 · 7H20 91. 26mg、5mL Tris緩沖液和2mL微量元素，瓊脂20g，加蒸餾水至lOOOmL，調(diào)節(jié)PH為7. 2 ；所述微量元素溶液的組成為=EDTA5g、FeSO4 · 7H20 5g、CuSO4 · 5H20 1. 6g、 MnCl2 · 4H20 5g、(NH4)6Mo7A · 4H20 50mg、H3BO3 50mg、KIlOmg 禾口 CoCl2 · 6H20 50mg 加蒸溜水至 lOOOmL。實(shí)施例4本發(fā)明的金黃桿菌(Chryseobacterium sp.)，具有以下微生物學(xué)特性1.形態(tài)學(xué)特性在顯微鏡下觀察，為桿狀，長(zhǎng)2. 7 μ m，寬0. 4 μ m ；在富磷固體培養(yǎng)基上形成黃色菌落。2.培養(yǎng)學(xué)特性在10°C下，在富磷固體培養(yǎng)基中培養(yǎng)時(shí)，本發(fā)明的Chryseobacterium sp.菌株具有以下特性。表面干燥，邊緣不規(guī)則，菌體呈粒狀，顏色為黃色。3.生理特性好氧條件下去除污水中磷的革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌，接觸酶陰性、甲基紅試驗(yàn)陽(yáng)性、水解淀粉、液化明膠、產(chǎn)生吲哚、生長(zhǎng)PH值為6 8，生長(zhǎng)溫度5 30°C。
權(quán)利要求
1.一種低溫下去除污水中磷的金黃桿菌(Chryseobacterium sp.)深黃聚磷CGMCC No. 5282，其具有在低溫好氧條件下去除污水中磷的能力。
2.權(quán)利要求的一種低溫下去除污水中磷的金黃桿菌(Chryseobacteriumsp.)深黃聚磷CGMCC No. 5282在低溫好氧條件下去除污水中磷的用途。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的用途，其特征是所述低溫為8 12°C。
4.權(quán)利要求1的低溫下去除污水中磷的金黃桿菌的的分離培養(yǎng)方法，其特征是包括如下步驟(1)將富磷培養(yǎng)液放入小試SBR反應(yīng)器中，將污水處理廠污泥接種所述富磷培養(yǎng)液中， 在8 12°C，連續(xù)培養(yǎng)20天，運(yùn)行周期為6小時(shí)，其中包括厭氧攪拌2. 5小時(shí)，好氧2. 5小時(shí)，靜置0. 5小時(shí)，排上清液及補(bǔ)充新的富磷培養(yǎng)液共0. 5小時(shí)；運(yùn)行期間保持污泥濃度為 3000mg/L ；(2)取IOmL步驟(1)獲得的污泥，加入已裝有90mL滅菌蒸餾水和20 30粒滅菌玻璃珠的250ml錐形瓶中，振蕩10 30min，使細(xì)菌細(xì)胞充分釋放到上清液中；靜置20 40min， 取ImL上清液加入裝有9mL無菌蒸餾水的試管中，得到10_2的菌懸液，按上述方法依次做系列稀釋，一直做到10_8為止；(3)選取梯度為10_5 10_8的菌懸液，分別取ImL接種于富磷固體培養(yǎng)基，每個(gè)稀釋度做3個(gè)平行樣，編號(hào)；10°C在有氧的條件下保濕培養(yǎng)2 3周；(4)從步驟(3)中的富磷固體培養(yǎng)基平板中挑選菌落大，形態(tài)不同的單菌落，在富磷固體培養(yǎng)基平板中再次劃線分離，重復(fù)平板劃線分離3-4次，使平板上的菌落在顯微鏡中的形態(tài)相同，單一，大小相似即為單菌落，命名為深黃聚磷，經(jīng)鑒定為低溫下去除污水中磷的金黃桿菌(Chryseobacterium sp.)
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的低溫下去除污水中磷的金黃桿菌的的分離培養(yǎng)方法，其特征是所述富磷培養(yǎng)液為由下述組分組成=CH3COONa · 3H20 3. 32g,KH2PO4 43. 75mg、CaCl2 · 2H20 25. 68mg、KNO3 485. 94mg、MgSO4 · 7H20 91. 26mg、5mL Tris 緩沖液和 2mL 微量元素；加蒸餾水至IOOOmL,調(diào)節(jié)pH為7. 2 ；所述微量元素溶液的組成為EDTA 5g、FeSO4 · 7H20 5g、CuSO4 · 5H20 1. 6g、 MnCl2 · 4H205g、(NH4)6Mo7O2 · 4H20 50mg、H3BO3 50mg、KI IOmg 禾口 CoCl2 · 6H20 50mg 力口蒸溜水至 1000mL。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的低溫下去除污水中磷的金黃桿菌的的分離培養(yǎng)方法，其特征是所述富磷固體培養(yǎng)基為由下述組分組成=CH3COONa · 3H20 3. 32g、KH2PO4 43. 75mg、 CaCl2 · 2Η2025· 68mg、KN03 4 8 5 . 94mg、MgSO4 · 7H20 91. 26mg、5mL Tris 緩沖液和 2mL 微量元素，瓊脂20g,加蒸餾水至IOOOmL,調(diào)節(jié)pH為7. 2 ；所述微量元素溶液的組成為=EDTA 5g、FeSO4 · 7H20 5g、CuSO4 · 5H20 1. 6g、MnCl2 · 4H20 5g、(NH4)6Mo7O2 · 4H20 50mg、H3BO3 50mg、KI IOmg 禾口 CoCl2 · 6H20 50mg 加蒸溜水至 IOOOmL0
全文摘要
本發(fā)明公開了一種低溫下去除污水中磷的金黃桿菌及分離培養(yǎng)方法，一種低溫下去除污水中磷的金黃桿菌(Chryseobacterium sp.)深黃聚磷CGMCC No.5282，其具有在低溫好氧條件下去除污水中磷的能力。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明盡管受到低溫環(huán)境的明顯抑制，投加本發(fā)明的一種低溫下去除污水中磷的金黃桿菌(Chryseobacterium sp.)深黃聚磷CGMCC No.5282在低溫下，特別是在8-12℃的條件下，對(duì)磷去除有明顯的強(qiáng)化作用，磷去除率提高了10％，優(yōu)于一級(jí)A的出水標(biāo)準(zhǔn)(水溫≤12℃時(shí)，一級(jí)A標(biāo)準(zhǔn)的控制指標(biāo)為0.5mg/L)。
文檔編號(hào)C02F3/02GK102433277SQ20111041628
公開日2012年5月2日 申請(qǐng)日期2011年12月14日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月14日
發(fā)明者胡春萍 申請(qǐng)人:首創(chuàng)愛華(天津)市政環(huán)境工程有限公司