專利名稱：柵藻藻株及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及微生物領(lǐng)域,尤其涉及一種柵藻ENN33 (Scenedesmus sp.)及其應(yīng)用。
背景技術(shù)：
隨著世界化石燃料儲(chǔ)備量的逐步耗竭，二氧化碳排放量的不斷增加以及全球氣候的日益趨暖，人類的生存和發(fā)展?fàn)顩r已經(jīng)面臨前所未有的挑戰(zhàn)。因此，因此，世界各國(guó)都在積極尋找能夠替代石油產(chǎn)品的可再生能源，其中，生物柴油就是一種重要的生物能源，然而，常見(jiàn)的油料作物例如玉米和大豆等培育周期較長(zhǎng)，占用農(nóng)田較多，會(huì)產(chǎn)生“與人爭(zhēng)糧，與糧爭(zhēng)地”問(wèn)題，從而導(dǎo)致“解決了能源危機(jī)，卻出現(xiàn)糧食危機(jī)”的尷尬結(jié)果。微藻是一類在陸地、海洋分布廣泛，營(yíng)養(yǎng)豐富，生長(zhǎng)周期短，光合利用度高的以光合自養(yǎng)產(chǎn)生能量的低等植物，是自然界起源最早、分布最廣、種類和數(shù)量最大的生物質(zhì)資源。在一定條件下許多微藻能夠在細(xì)胞中大量積累儲(chǔ)藏性三酰甘油(微藻油)(類似于植物 油)，其最高含量可達(dá)到細(xì)胞干重的50%以上。與高等陸生油料作物相比，微藻的單位面積油產(chǎn)量是油料植物油產(chǎn)量的數(shù)十倍，經(jīng)過(guò)生物冶煉可以生產(chǎn)生物柴油等多種生物燃料，被認(rèn)為是最有可能最有潛力成為石油替代品的生物質(zhì)資源。除了油產(chǎn)量非常高之外，微藻還富含蛋白質(zhì)、脂肪、碳水化合物、各種氨基酸、維生素、抗生素、高不飽和脂肪酸以及其它多種生物活性物質(zhì)，因此，在保健食品、醫(yī)藥和飼料等領(lǐng)域也同樣具有很好的開(kāi)發(fā)前景，例如，用于食料和醫(yī)藥業(yè)(人和動(dòng)物的營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充物維生素、蛋白質(zhì)、脂肪酸、多糖等)；提取化工產(chǎn)業(yè)如化妝品、精細(xì)化工產(chǎn)品等；作為能源產(chǎn)生沼氣、燃料；用于餌料和飼料業(yè)(魚蝦、甲殼動(dòng)物等水產(chǎn)動(dòng)物的餌料、家禽飼料等)；農(nóng)業(yè)上作為土壤調(diào)節(jié)劑、肥料等。此外，微藻的環(huán)境適應(yīng)能力非常強(qiáng)，對(duì)營(yíng)養(yǎng)的要求也很簡(jiǎn)單，可在各種嚴(yán)苛環(huán)境下生長(zhǎng)。例如,微藻可通過(guò)光合作用吸收污水中的硝酸鹽、亞硝酸鹽、銨鹽、磷酸鹽等無(wú)機(jī)鹽的氮磷合成氨基酸、蛋白質(zhì)、磷脂等有機(jī)物，形成微藻細(xì)胞，從而降低水體中的氮磷含量，因此微藻可用于去除污水中的氮磷。微藻還可利用工業(yè)廢氣中的CO2，減少CO2的排放。因此微藻在無(wú)論是工業(yè)環(huán)境保護(hù)方面還是城市環(huán)境保護(hù)方面也都有很好的應(yīng)用前景。還有一些微藻可以生長(zhǎng)在高鹽、高堿環(huán)境的水體中，可充分利用灘涂、鹽堿地、沙漠等不適宜進(jìn)行耕種的土地進(jìn)行大規(guī)模培養(yǎng)，也可利用海水、鹽堿水、工業(yè)廢水等非農(nóng)用水進(jìn)行培養(yǎng)，被譽(yù)為可循環(huán)的“綠色油田”，因此發(fā)展微藻培養(yǎng)及其相關(guān)工業(yè)也非常適合土地尤其是耕地資源相對(duì)緊缺的我國(guó)。目前國(guó)內(nèi)外都積極開(kāi)展了對(duì)于微藻的開(kāi)發(fā)尤其是其在生物能源應(yīng)用方面的開(kāi)發(fā)，這其中以對(duì)小球藻的研究居多。CN101460609公開(kāi)了一種新的小球藻屬(CHL0RELLA)物種及其應(yīng)用CN101565675公開(kāi)了一種小球藻及其培養(yǎng)方法和它在生物柴油生產(chǎn)中的應(yīng)用；CN101824386公開(kāi)了一株小球藻，及其在生產(chǎn)微藻油脂和固定CO2中的應(yīng)用；CN102093955公開(kāi)了一株小球藻及其在利用污水培養(yǎng)與生物柴油轉(zhuǎn)化體系中的應(yīng)用；CN102229889公開(kāi)了一株小球藻及其培養(yǎng)方法和在CO2的固定，廢水的凈化，油脂、蛋白質(zhì)、色素、淀粉、多糖、核酸等生物質(zhì)的生產(chǎn)應(yīng)用。柵藻是淡水中常見(jiàn)的浮游微藻，極喜在營(yíng)養(yǎng)豐富的靜水中繁殖。許多種類對(duì)有機(jī)污染物具有較強(qiáng)的耐性，在水質(zhì)評(píng)價(jià)中可作為指示生物，并且在水體自凈和污水凈化中有一定作用，是有機(jī)污水氧化塘生物相中的優(yōu)勢(shì)種類。它可與細(xì)菌同時(shí)附著在水中有機(jī)物碎片和其他水生植物體上，形成膠質(zhì)層，吸附有機(jī)物。柵藻進(jìn)行光合作用時(shí)，一方面產(chǎn)生氧氣供細(xì)菌分解有機(jī)質(zhì)的需要，另一方面還可直接利用有機(jī)質(zhì)作為碳源和氮源，使水中有機(jī)物迅速降解，從而凈化水體。柵藻細(xì)胞內(nèi)含有豐富的蛋白質(zhì)和維生素，是魚類很好的飼料，如利用有機(jī)污水氧化塘養(yǎng)魚，可獲高產(chǎn)。大量繁殖的藻體也可作家禽的飼料。目前國(guó)內(nèi)外對(duì)于柵藻的開(kāi)發(fā)還不是很多，CN101565674公開(kāi)了一株低營(yíng)養(yǎng)柵藻及其在污水深度處理中的應(yīng)用，該柵藻藻株可在低營(yíng)養(yǎng)環(huán)境中生長(zhǎng)，因此可將二級(jí)出水中的氮磷去除到很低水平；CN102083957公開(kāi)了一種具有高效去除二氧化碳特征性的凸頭狀柵藻原變種微藻及其用途，尤其是二氧化碳固定率高的凸頭狀柵藻原變種微藻及其用途；CN102250773公開(kāi)了一株?yáng)旁寮捌渑囵B(yǎng)方法和在CO2的固定，廢水的凈化，油脂、蛋白質(zhì)、色素、淀粉、多糖、核酸等生物質(zhì)的生產(chǎn)等領(lǐng)域中的應(yīng)用；季祥、王金榮等人(一株斜生柵藻的篩選及生長(zhǎng) 條件的優(yōu)化[J]。水產(chǎn)科技情報(bào)，2010:37 (6))獲得了一株含油相對(duì)較高、長(zhǎng)勢(shì)較好的藻種柵藻藻株。盡管微藻具有非常良好的能源、環(huán)境保護(hù)甚至醫(yī)藥等開(kāi)發(fā)前景，并且相關(guān)的研究工作也已經(jīng)逐漸展開(kāi)，但是目前已知的微藻，尤其是柵藻，含油量通常在40%以下、對(duì)CO2的處理能力、極端環(huán)境耐受等方面的性能上還普遍偏低。因此需要開(kāi)發(fā)性能更好，更適于工業(yè)應(yīng)用的藻種。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種對(duì)環(huán)境適應(yīng)能力強(qiáng)，油脂含量高，對(duì)CO2的處理能力強(qiáng)的更加適于工業(yè)應(yīng)用的柵藻。為達(dá)此目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案在第一方面,本發(fā)明提供了一種柵藻ENN33 (Scenedesmus sp.),保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心(CGMCC)，保藏日期為2012年07月13日，保藏號(hào)為CGMCC No. 6347。本發(fā)明提供的柵藻ENN33中脂肪酸在藻粉中的含量可以大于40%干重，優(yōu)選地大于50%干重，更優(yōu)選地為56°/Γ60%干重，最優(yōu)選地為58%。本發(fā)明提供的柵藻ΕΝΝ33含有蝦青素、β -胡蘿卜素、葉黃素、玉米黃質(zhì)和角黃素。本發(fā)明提供的柵藻ΕΝΝ33的耐受溫度可以為-10°C至44°C，優(yōu)選地6°C至40°C，更優(yōu)選地8°C至30°C，還更優(yōu)選地10°C至20°C，最優(yōu)選地15°C。本發(fā)明提供的柵藻ENN33 可以在-10°C、_9°C、_8°C、_7°C、_6°C、_5°C、_4°C、_3V、-2°C> -rC>0oC>rC>2oC>3oC>4oC>5oC>6oC>7oC>8oC>9°C>10oC>irC>12oC>13oC>14oC>15 °C、16 °C、17 °C ,18 °C >19 °C >20 °C >21 °C >22 °C >23 °C >24 °C >25 °C >26 °C >27 °C >28 °C >29 °C、3(TC、31°C、32t、33t、34t、35t、36t、37t、38t、39t、4(rC、41t、42t、46、43t或
44 °C下生長(zhǎng)。在第二方面，本發(fā)明提供了如第一方面所述的柵藻ENN33的培養(yǎng)方法，所述方法包括將柵藻藻株ENN 33綠色細(xì)胞接種在BGlI培養(yǎng)基中，其中光照強(qiáng)度50-500 μ mol/m2. s,優(yōu)選 100-450 μ mol/m2. s、更優(yōu)選 150-400 μ mol/m2. s、還更優(yōu)選 200-350 μ mol/m2. S、最優(yōu)選 250-300 μ mol/m2. s，pH 值 7-9、優(yōu)選 7. 5-8. 5，更優(yōu)選 8，溫度 15_35°C、優(yōu)選 20-30。。、更優(yōu)選25°C。在本發(fā)明的柵藻ENN33的培養(yǎng)方法中，光照強(qiáng)度可以為50 μ mol/m2· s、80 μ mol/m2. s> 100 μ mol/m2. s> 120 μ mol/m2. s> 150 μ mol/m2. s、180 μ mol/m2· s>200 μ mol/m2. s、220 μ mol/m2. s、250 μ mol/m2. s、280 μ mol/m2. s、300 μ mol/m2. s、320 μ mol/m2. s、350 μ mol/m2. s、380 μ mol/m2. s、400 μ mol/m2. s、420 μ mol/m2. s、450 μ mol/m2. s、480 μ mol/m2. s 或500 μ mol/m2. s ;pH 值可以為 7、7· 2、7· 5、7· 8、8、8. 2、8· 5、8· 8 或 9 ;溫度可以為 15°C、16°C、17 °C ,18 °C >19 °C >20 °C >21 °C >22 °C >23 °C >24 °C >25 °C >26 °C >27 °C >28 °C、29 °C、30 °C、31 °C、32°C、33°C、34°C或 35。。。在第三方面，本發(fā)明提供了如第一方面所述的柵藻ENN33在脂肪酸生產(chǎn)中的應(yīng)用，優(yōu)選地，所述脂肪酸是肉豆蘧酸、棕櫚酸、棕櫚油酸、硬脂酸、十八碳烯酸、十八碳二烯酸、十八碳四烯酸、α -亞麻酸、Y -亞麻酸和/或二十碳五烯酸?！?br> 在第四方面，本發(fā)明提供了如第一方面所述的柵藻ΕΝΝ33在生物燃料生產(chǎn)中的應(yīng)用，優(yōu)選地，所述生物燃料是生物柴油或生物乙醇。在第五方面，本發(fā)明提供了如第一方面所述的柵藻ΕΝΝ33在環(huán)境保護(hù)中的應(yīng)用，優(yōu)選地所述環(huán)境保護(hù)為污水處理或CO2減排，所述污水處理包括污水的脫氮、除磷、有機(jī)物降解和/或重金屬離子吸附。在第六方面，本發(fā)明提供了如第一方面所述的柵藻ΕΝΝ33在包含肉豆蘧酸、棕櫚酸、棕櫚油酸、硬脂酸、十八碳烯酸、亞油酸、十八碳四烯酸、α-亞麻酸、Y-亞麻酸、花生酸、山崳酸、二十碳五烯酸、蝦青素、β -胡蘿卜素、葉黃素、玉米黃質(zhì)和/或角黃素的藥物的制備中的用途。在第七方面，本發(fā)明提供了如第一方面所述的柵藻ΕΝΝ33在包含肉豆蘧酸、棕櫚酸、棕櫚油酸、硬脂酸、十八碳烯酸、亞油酸、十八碳四烯酸、α-亞麻酸、Y-亞麻酸、花生酸、山崳酸、二十碳五烯酸、蝦青素、胡蘿卜素、葉黃素、玉米黃質(zhì)和/或角黃素的食品、保健品、飼料和/或水產(chǎn)品餌料生產(chǎn)中的用途。在第八方面，本發(fā)明提供了如第一方面所述的柵藻ΕΝΝ33在包含肉豆蘧酸、棕櫚酸、棕櫚油酸、硬脂酸、十八碳烯酸、亞油酸、十八碳四烯酸、α-亞麻酸、Y-亞麻酸、花生酸、山崳酸、二十碳五烯酸、蝦青素、β -胡蘿卜素、葉黃素、玉米黃質(zhì)和/或角黃素的化妝品生產(chǎn)中的應(yīng)用。在本發(fā)明中，BGll培養(yǎng)基為本領(lǐng)域中最常用的藻類培養(yǎng)基，其具體組分見(jiàn)下文。本發(fā)明的有益技術(shù)效果為I、本藻種生長(zhǎng)速度快，CO2利用率高，且細(xì)胞沉降性好，便于收集，適宜于高密度養(yǎng)殖，適合產(chǎn)業(yè)化推廣2、本藻種油脂積累快，含油量高，適合用來(lái)生產(chǎn)生物柴油3、本藻種能有效去除水中的氮，適宜用于廢水處理4、本藻種本藻種溫度耐受范圍廣泛，適合全年養(yǎng)殖。


圖I是本發(fā)明的柵藻ENN33在顯微鏡下的鏡檢圖片。圖2顯示本發(fā)明的柵藻ENN33的ITS及5. 8S部分核苷酸序列在GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)中進(jìn)行BLAST比對(duì)的結(jié)果。圖3是采用鄰位相連(Neighbor-joining)算法構(gòu)建的柵藻ENN33的系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)化樹(shù)。圖4是本發(fā)明的柵藻ENN33的室內(nèi)養(yǎng)殖生長(zhǎng)曲線。圖5是本發(fā)明的柵藻ENN33在高溫條件下的生長(zhǎng)曲線。圖6是本發(fā)明的柵藻ENN33在低溫條件下的生長(zhǎng)曲線(一)。
圖7是本發(fā)明的柵藻ENN33的低溫條件下的生長(zhǎng)曲線(二)。圖8是本發(fā)明的柵藻ENN33的廢水廢氣養(yǎng)殖生長(zhǎng)曲線。圖9是本發(fā)明的柵藻ENN33的色素百分含量圖。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合附圖并通過(guò)具體實(shí)施方式
來(lái)進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明的技術(shù)方案。實(shí)施例I篩選產(chǎn)油柵藻藻株取無(wú)菌水稀釋溶解后的從烏蘭察布取回的土壤，在400倍顯微鏡觀察后，大約細(xì)胞濃度為800—1200個(gè)/ml，用毛細(xì)管取大約I μ I的藻液，接種于48孔裝有BGll培養(yǎng)基的培養(yǎng)板中，在25°C、光照強(qiáng)度為50 μ mol/m2. s情況下進(jìn)行培養(yǎng)，當(dāng)達(dá)到一定細(xì)胞濃度時(shí)，顯微鏡觀察，選擇只有單藻株的孔，稀釋至細(xì)胞濃度為1000-3000個(gè)/ml后鋪平板，得到單藻株。重復(fù)此過(guò)程，直到獲得純培養(yǎng)的藻株，本發(fā)明中對(duì)其編號(hào)稱為“ENN33”。實(shí)施例2鑒定藻種及其在進(jìn)化樹(shù)上的分類。藻株鑒定采取形態(tài)鑒定和分子鑒定相結(jié)合的方法。I.形狀鑒定(見(jiàn)圖I):對(duì)上述分離出來(lái)的藻株ENN33在1000倍顯微鏡進(jìn)行觀察，藻體為單細(xì)胞或定型群體形態(tài)存在，定型群體由2個(gè)或4個(gè)細(xì)胞組成，群體細(xì)胞并列直線成一列或略作交互排列；細(xì)胞紡錘形，上下兩端逐漸尖細(xì)，細(xì)胞壁平滑。4個(gè)細(xì)胞的群體寬12-34 μ m，細(xì)胞長(zhǎng)10-20 μ m，寬3-9 μ m。色素體周生，片狀，具蛋白核一枚。無(wú)性繁殖產(chǎn)生似親孢子。檢索《中國(guó)淡水藻類一系統(tǒng)、分類及生態(tài)》，發(fā)現(xiàn)此藻在形態(tài)上分類相同的為綠藻門(Chlorophyta)、綠藻綱(Chlorophyceae)、綠球藻目(Chlorococcales)、柵藻科(Scenedesmaceae)、棚藻屬(Scenedesmus)。2.分子鑒定A，A，從分離的衣藻擴(kuò)增其ITS及5. 8S部分核苷酸序列用CTAB法提取培養(yǎng)4天的ENN33藻基因組DNA。取一定量的細(xì)胞，研磨處理后加入適量CTAB緩沖液，勻漿，加入等體積的酚氯仿抽提，等體積異丙醇沉淀，75%乙醇洗滌后溶于一定體積滅菌雙蒸水中，紫外分光光度計(jì)檢測(cè)其濃度和純度。ITS序列擴(kuò)增采用真核生物ITS擴(kuò)增通用引物(引物合成由上海生工生物工程公司合成)。引物I 5，GGAAGTAAAAGTCGTAACAAGG 3，引物2 5，GCATATCAATAAGCGGAGGA 3，取I μ I總DNA為模板。擴(kuò)增條件如下94°C變性5min，然后94°C 40s, 56°C 40s，72°C 2min 30個(gè)循環(huán)，最后72°C IOmin0 I. 0%的瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)其擴(kuò)增產(chǎn)物，PCR擴(kuò)增獲得約750bp片斷。序列如下(下劃線部分為引物序列)GGAAGTAAAAATCGTAACAAGGTTTCCGTAGGTGAACCTGCGGAAGGATCATTGAATTATAAAAACCACAATGTGAACCTCAACGTTCCGTGCCTCTGCTGCCAGCGGGGCAACGGGCTTTCAGCTCGTTGCTACTTGCAGCTGGCATCGGCATTGCTGCCGTTGCCAGTGGCGCTTTGGCATGACCTTACACCAGTCTAACCACTGTAAAAACCAAAATCTGAAGCTCTGACTGCTATTAACTGGCGGTCTTAACCAAAGACAACTCTCAACAACGGATATCTTGGCTCTCGCAACGATGAAGAACGCAGCGAAATGCGATACGTAGTGTGAATTGCAGAATTCCGTGAACCATCGAATCTTTGAACGCATATTGCGCTCGAGCCCTCGGGCAAGAGCATGTCTGCCTCAGCGTCGGTTTACACCCTCACCCCTCCCTCCTTGTGTGGGTCGGTTGGCTTGCTAGCCAGCCTTAGGGGTGGATCTGGCTTCCCCAAACTGCTCCGGCAGGTTGGGTTGGCTGAAGTTTAGAGGCTTAAACAAGGACCCGATATGGGCTTCAACTGGATAGGTAGCACCGGCTTCTGCCGACTACACGAAGTTGTGGCTTGTGGACTTTGTTAGGGGCCAAGCAGGAAACATGCTCTGCATGTTCTAAACTTTCGACCTGAGCTCAGGCAAGGCTACCCGCTGAACTTAAACATATCAAAAACCGGAGGAAAGAGAATCCTCCGCTTATTGATATGCoB，所克隆的核苷酸序列同源性搜索
將獲得的ENN33的ITS序列及5. 8S部分序列登錄GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行BLAST比對(duì),結(jié)果顯示與ACCESSION號(hào)為AM419228. I的Scenedesmus. sp的內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)1、5. 8S核糖體RNA基因和內(nèi)轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)2的序列具有較高的相似性達(dá)93% (圖2)。C，根據(jù)上述序列作出進(jìn)化樹(shù)。利用NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)中的BLAST工具對(duì)藻株ENN33的ITS部分序列進(jìn)行序列相似性分析。選取部分同源序列和該藻株的ITS部分序列利用ClustaLx軟件包進(jìn)行序列同源進(jìn)化比對(duì)，形成一個(gè)多重序列匹配排列矩陣。然后，運(yùn)用Mega4. O軟件，采用鄰位相連算法，自展數(shù)據(jù)集bootstraps值為1000構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育進(jìn)化樹(shù)。見(jiàn)圖3。根據(jù)形態(tài)和ITS blast的結(jié)果，限定ENN33為柵藻屬(Scenedesmus)。發(fā)明人已將所述藻株于2012年07月13日保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心(北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路I號(hào)院3號(hào)，簡(jiǎn)稱CGMCC)，其保藏號(hào)為CGMCCNo.6347。實(shí)施例3 ENN 33藻的室內(nèi)養(yǎng)殖及油脂積累將處在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的柵藻藻株ENN 33綠色游動(dòng)細(xì)胞接種在配制好的BGll培養(yǎng)基(配方見(jiàn)表I)中，使細(xì)胞密度達(dá)到0D750為O. 2-0. 8之間。培養(yǎng)過(guò)程光照強(qiáng)度控制在50-500 μ mol/m2. s，在培養(yǎng)期內(nèi)，通過(guò)向培養(yǎng)液中通入I. 5-2%的二氧化碳和空氣的混合氣體，將培養(yǎng)基的PH值調(diào)節(jié)在7-9之間，溫度調(diào)控在15-35°C范圍內(nèi)。培養(yǎng)所使用的反應(yīng)器為40_內(nèi)徑、長(zhǎng)度600_的柱式反應(yīng)器。培養(yǎng)過(guò)程中，定時(shí)取樣測(cè)定干重，結(jié)果見(jiàn)圖4。培養(yǎng)進(jìn)行到第16天，藻液顏色變黃時(shí)，將藻液收集，通過(guò)離心或自然沉降的方法獲得藻泥，將藻泥在進(jìn)行真空冷凍干燥。表IBGll培養(yǎng)基配方
權(quán)利要求
1.一種柵藻ENN33 (Scenedesmus sp.),保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心(CGMCC)，保藏日期為2012年07月13日，保藏編號(hào)為CGMCC No. 6347。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的柵藻ENN33，其特征在于，所述柵藻ENN33中脂肪酸的含量為大于40%干重，優(yōu)選地大于50%干重，更優(yōu)選地為56°/Γ60%干重，最優(yōu)選地為58%。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的柵藻ΕΝΝ33，其特征在于，所述柵藻ΕΝΝ33的耐受溫度為-10°C至44°C，優(yōu)選地6°C至40°C，更優(yōu)選地8°C至30°C，還更優(yōu)選地10°C至20°C，最優(yōu)選地15°C。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的柵藻ENN33，其特征在于，所述柵藻ENN33含有蝦青素、β-胡蘿卜素、葉黃素、玉米黃質(zhì)和角黃素。
5.如權(quán)利要求I至4中任一項(xiàng)所述的柵藻ΕΝΝ33的培養(yǎng)方法，所述方法包括將柵藻藻株ΕΝΝ33綠色細(xì)胞接種在BGll培養(yǎng)基中，其中光照強(qiáng)度50-500 μ mol/m2. s,優(yōu)選100-450 μ mol/m2. S、更優(yōu)選 150-400 μ mol/m2. s、還更優(yōu)選 200-350 μ mol/m2. S、最優(yōu)選250-300 μ mol/m2. s，pH 值 7-9、優(yōu)選 7. 5-8. 5，更優(yōu)選 8，溫度 15-35°C、優(yōu)選 20-30°C、更優(yōu)選 25。。。
6.如權(quán)利要求I至4中任一項(xiàng)所述的柵藻ENN33在脂肪酸生產(chǎn)中的應(yīng)用，優(yōu)選地，所述脂肪酸是肉豆蘧酸、棕櫚酸、棕櫚油酸、硬脂酸、十八碳烯酸、亞油酸、十八碳四烯酸、α -亞麻酸、Y-亞麻酸、花生酸、山崳酸和/或二十碳五烯酸。
7.如權(quán)利要求I至4中任一項(xiàng)所述的柵藻ΕΝΝ33在生物燃料生產(chǎn)中的應(yīng)用，優(yōu)選地，所述生物燃料是生物柴油或生物乙醇。
8.如權(quán)利要求I至4中任一項(xiàng)所述的柵藻ΕΝΝ33在環(huán)境保護(hù)中的應(yīng)用，優(yōu)選地所述環(huán)境保護(hù)為污水處理或CO2減排，所述污水處理包括污水的脫氮、除磷、有機(jī)物降解和/或重金屬離子吸附。
9.如權(quán)利要求I至4中任一項(xiàng)所述的柵藻ΕΝΝ33在制備包含肉豆蘧酸、棕櫚酸、棕櫚油酸、硬脂酸、十八碳烯酸、亞油酸、十八碳四烯酸、α-亞麻酸、Y-亞麻酸、花生酸、山崳酸、二十碳五烯酸、蝦青素、胡蘿卜素、葉黃素、玉米黃質(zhì)和/或角黃素的藥物中的應(yīng)用。
10.如權(quán)利要求I至4中任一項(xiàng)所述的柵藻ΕΝΝ33在包含肉豆蘧酸、棕櫚酸、棕櫚油酸、硬脂酸、十八碳烯酸、亞油酸、十八碳四烯酸、α-亞麻酸、Y-亞麻酸、花生酸、山崳酸、二十碳五烯酸、蝦青素、胡蘿卜素、葉黃素、玉米黃質(zhì)和/或角黃素的食品、保健品、飼料、水產(chǎn)品餌料、化妝品和/或色素生產(chǎn)中的用途。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種柵藻藻株(Scenedesmus sp.)及其應(yīng)用，本發(fā)明的柵藻具有生長(zhǎng)速度快、油脂積累快、含油量高、能夠有效去除水中的含氮化合物等優(yōu)點(diǎn)，并且含有適合部分有益的色素，可用于生物柴油生產(chǎn)，食品、保健品、飼料、水產(chǎn)品餌料、藥物以及化妝品和色素的生產(chǎn)。
文檔編號(hào)C02F3/32GK102911872SQ201210318629
公開(kāi)日2013年2月6日 申請(qǐng)日期2012年8月31日 優(yōu)先權(quán)日2012年8月31日
發(fā)明者羅少敬, 鄧平, 李青, 吳洪, 王冰 申請(qǐng)人:新奧科技發(fā)展有限公司