專利名稱：血液處理用過濾器及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及血液處理用過濾器。更詳細地，本發(fā)明涉及為了從紅血球制劑或者全血制劑中同時除去白血球和血小板的過濾器及其制備方法。
背景技術(shù)：
在輸血領(lǐng)域，一般進行的是在從供血者采集的血液中添加抗凝劑的全血輸血即所謂的全血輸血之外，從全血中分離的授血者必須的血液成分再將其輸注即所謂的成分輸血。成分輸血中，根據(jù)授血者必須的血液成分有紅血球輸血、血小板輸血、血漿輸血等，其中使用的血液成分制劑有紅血球制劑、血小板制劑、血漿制劑等。
另外，近年來這些全血輸血及成分輸血中，除去血液制劑中含有的混入白血球后輸血，即所謂的進行白血球除去輸血。這些制劑中混入的白血球，誘發(fā)伴隨輸血的頭痛、惡心、惡寒、非溶血性發(fā)熱反應、異體抗原過敏、GVHD、病毒感染等副作用是已經(jīng)明確的原因。因此，為防止這些副作用將血液制劑中的白血球除去到足夠低的水平是必須的。
另一方面，至于說到紅血球制劑，離心分離時有時混入一部分血小板。已經(jīng)有被認為是血小板的原因的非溶血性副作用的報告，盡可能地除去血小板是優(yōu)選的。還有，血小板中朊病毒的存在近年來也有報告，從抑制朊病毒感染的危險的觀點出發(fā)，不僅要從紅血球制劑而且也要從全血制劑中除去血小板的必要性被認為是很高的。因此，提供可以從血液制劑中高除去率地除去血小板的方法成為一個急迫的課題。
作為從以血液為主，含有白血球的細胞懸浮液除去白血球的方法，有通過將細胞懸浮液離心分離除去白血球的離心法，通過將細胞懸浮液置于過濾器上，將白血球吸附在過濾器上除去的過慮器法，在血液袋中的細胞懸浮液中加入添加了葡聚糖的生理鹽水并混合后，抽吸除去懸浮的白血球?qū)拥钠暇厶欠ǖ?。其中，由于具有白血球除去性能?yōu)異、操作簡便、以及成本低等優(yōu)點，過濾器法被廣泛使用。
特開平3-158168號公報(JP3-158168A)中，發(fā)現(xiàn)通過纖維疊層物的白血球濃度，可以相對于纖維疊層物的厚度成指數(shù)函數(shù)地被除去。這樣，建議白血球在沿纖維疊層物厚度方向流動時，每次與纖維在纖維的交織點附近接觸，有一定的概率被吸附，證實了上述吸附除去說。
因此，過去的白血球除去過濾器中的高性能化的研究，集中在提高纖維與白血球接觸的頻率，即降低纖維的平均直徑，提高填充密度，或者使用具有更均勻的纖維直徑分布的無紡布(特開平2-203909號公報(JP2-203909A))等，很少有關(guān)注無紡布表面的化學性狀的。
通過降低纖維的平均直徑，提高填充密度，或者使用具有更均勻的纖維直徑分布的無紡布，雖然可以得到良好的白血球和血小板除去過濾器，但由于產(chǎn)生因血液的濕潤斑，過濾器整體不能有效地發(fā)揮機能，結(jié)果發(fā)生白血球除去和血小板除去參差不齊，因此必須改善無紡布表面的化學性狀。
作為少數(shù)關(guān)注無紡布表面化學性狀的其他研究實例，有通過放射線接枝的表面改性方法(特開平1-249063號公報(JP1-249063A))，特表平3-502094號公報(JP3-502094A)等)。前者以提高血小板通過率為表面改性的目的，后者以賦予親水性并容易由血液啟動為目的，但任何一個都不是以提高白血球，或者白血球和血小板的吸附概率為目的的。
另一方面，特開平6-247862號公報(JP6-247862A)中，公開了具有堿性功能基和非離子性親水基，堿性功能基相對與非離子性親水基的摩爾比為0.6以上不足6，而且堿性功能基為5×10-5meq/m2以上不足0.1meq/m2的密度的過濾器材料。但是，該過濾器材料紅血球的吸附抑制效果不充分，另外，穩(wěn)定提高白血球的除去能力困難。
另外，WO87/05812號公報中，在實施例中公開了用適量具有非離子性親水基和堿性含氮功能基，含有0.2重量％以上不足4.0重量％的堿性含氮功能基的聚合物被覆的過濾器材料白血球除去效能優(yōu)異，而且血小板的通過性高。另外，在比較例中記載了如果使用含有更多堿性含氮功能基的聚合物，白血球、血小板同時的除去率高。但是，WO87/05812號公報中，對于牛血液的處理有具體地記載，但對于人血液的處理沒有具體記載，對于人血液的白血球和血小板除去率不清楚。還有，WO87/05812號公報中，有關(guān)對于紅血球制劑的白血球和血小板的除去沒有任何公開。
還有，本發(fā)明者，發(fā)現(xiàn)在過濾器基質(zhì)上被覆聚合物的血液處理用過濾器中，該聚合物中含有的低分子量成分的含量在人全血處理中與白血球的除去率有關(guān)，專利申請了從全血中選擇除去白血球的過濾器(日本國特愿平2000-099715號)。但是，該申請發(fā)明中，關(guān)于從全血或紅血球制劑中同時除去白血球和血小板沒有任何研究。
附圖的簡單說明

圖1是表示本發(fā)明的血液處理用過濾器的制備中使用的聚合物的分子量分布的圖；圖2是表示本發(fā)明的血液處理用過濾器的聚合物涂布量與從全血中的血小板除去率的關(guān)系的圖；圖3是表示本發(fā)明的血液處理用過濾器的聚合物涂布量與從紅血球制劑中的血小板除去率的關(guān)系的圖；圖4是表示本發(fā)明的血液處理用過濾器的X線光電子能譜(XPS)的一個實例；圖5是表示為了制備本發(fā)明的血液處理用過濾器的裝置的一個實例的正面圖。

發(fā)明內(nèi)容鑒于此狀況，本發(fā)明者們，為了開發(fā)可以從紅血球制劑或全血制劑中同時高除去率地除去白血球和血小板的血液處理用過濾器，進行了深入研究。
結(jié)果意外地，本發(fā)明者們，發(fā)現(xiàn)在聚合物被覆的過濾器基質(zhì)，通過被覆特定量的聚合物，可以得到同時具有高白血球除去效能，和高血小板除去率的血液處理用過濾器。
基于上述新發(fā)現(xiàn)，完成了本發(fā)明。
因此，本發(fā)明的主要目的，是提供可以有效地用于從紅血球制劑或全血制劑中同時除去白血球和血小板的血液處理用過濾器及其制備方法。
本發(fā)明的上述及其它諸目的、諸特征以及諸優(yōu)點，從在參照所附的附圖同時進行的下列詳細的說明及權(quán)利要求的范圍可以明確。
根據(jù)本發(fā)明，提供一種過濾器，是為了從紅血球制劑或者全血制劑除去白血球和血小板的過濾器，其特征在于包含聚合物被覆的過濾器基質(zhì)，該聚合物在該過濾器基質(zhì)全表面積的每單位面積中含有0.5～10mg/m2，該聚合物的凝膠滲透色譜圖中，具有峰值分子量1/4以下分子量的低分子量成分的含量為20％以下的分子量分布。
下面，為了使本發(fā)明的理解容易，首先列舉本發(fā)明的基本特征及優(yōu)選的諸方式。
1.過濾器，是為了從紅血球制劑或全血制劑中除去白血球及血小板的過濾器，其特征在于包含聚合物被覆的過濾器基質(zhì)，該聚合物，在該過濾器基質(zhì)全表面積的每單位面積中含有0.5～10mg/m2，該聚合物的凝膠滲透色譜圖中，具有峰值分子量1/4以下分子量的低分子量成分的含量為20％以下的分子量分布。
2.權(quán)利要求1記載的過濾器，其特征在于相對于過濾器基質(zhì)的全表面積聚合物的被覆率不足70％。
3.權(quán)利要求1或2記載的過濾器，其特征在于聚合物具有非離子性親水基和堿性含氮功能基。
4.權(quán)利要求1～3中任意一項記載的過濾器，其特征在于聚合物的重量平均分子量為300000～3000000。
5.權(quán)利要求1～4中任意一項記載的過濾器，其特征在于過濾器基質(zhì)是由熱可塑性聚合物形成的。
6.權(quán)利要求1～5中任意一項記載的過濾器，其特征在于過濾器基質(zhì)是無紡布。
7.權(quán)利要求1～6中任意一項記載的過濾器的制備方法，其特征在于將由含有為反應的單體和低聚物的聚合物和1種以上的溶劑形成的聚合物溶液通過熱誘導相分離法和/或非溶劑誘導相分離法液-液相分離為富聚合物層溶液和貧聚合物層溶液后，將分別回收的富聚合物相溶液用溶劑稀釋并被覆到過濾器基質(zhì)上。
下面對于本發(fā)明進行詳細地說明。
本發(fā)明的過濾器，特征在于包含聚合物被覆的過濾器基質(zhì)，該聚合物，在該聚合物的凝膠滲透色譜圖中，具有峰值分子量1/4以下分子量的低分子量成分的含量為20％以下的分子量分布。
所謂本發(fā)明中的低分子量成分，是指聚合物的凝膠滲透色譜圖(參照圖1)中，相對于峰值分子量，即具有最大強度的分子量，具有其1/4以下分子量的聚合度低的成分。作為低分子量成分，可以列舉例如二聚體、三聚體、低聚物等。
本發(fā)明中的，所謂凝膠滲透色譜圖中，具有峰值分子量1/4以下分子量的低分子量成分的含量為20％以下，是指在圖1所示的凝膠滲透色譜圖中相對于全部峰面積，具有峰值分子量1/4以下分子量的峰面積部分的比例為20％以下。另外，圖1中，橫坐標表示分子量，縱坐標表示RI(根據(jù)示差折射計的強度)。
聚合物的分子量和分子量分布，通過凝膠色譜測定。即，使用連接了將聚合物溶解在將LiBr(溴化鋰)加入N，N-二甲基甲酰胺中使其為1毫摩爾的溶液(下面稱為“溶液A”)中的溶液的凝膠滲透色譜(GPC)(主體日本國東ソ-(株)制HPLC8020+分析程序GPC-LALLS Ver.2.03)，在40℃的溫度下測定RI(示差折射計)。柱，由保護柱(日本國東ソ-(株)TSK guardcoloum HXL-H)和本柱(前段柱日本國東ソ-(株)制TSKgel GMHxLB0032，后段柱日本國東ソ-(株)制TSKgelα-M B0011)組成。另外，使用(測定)條件，在移動相溶液A，柱溫度40℃下進行。還有，聚合物的分子量和分子量分布的計算中，使用日本國ヅ-エルサイエソス(株)銷售的(英國聚合物實驗室社制)的聚甲基丙烯酸甲酯(M-M-10組)的已知分子量與該聚甲基丙烯酸甲酯的GPC測定值(Retention Time)的關(guān)系。
聚合物的分子量和分子量分布的測定，可以在將聚合物被覆在過濾器基質(zhì)之前，在對過濾器中的聚合物測定時，可以將聚合物從過濾器中提取出來并測定。
從過濾器提取聚合物，是通過將過濾器浸漬在不溶解過濾器基質(zhì)但溶解聚合物的溶劑中而進行。聚合物如果是由(甲基)丙烯酸2-羥基乙酯和(甲基)丙烯酸二甲基氨基乙酯形成的共聚物，作為溶劑，可以使用N，N-二甲基甲酰胺和甲醇、乙醇、丙醇等醇類。將聚合物提取后，通過干燥除去該溶劑后，通過上述方法進行聚合物的分子量分布的測定。
本發(fā)明的過濾器中使用的聚合物，通過常規(guī)的聚合方法合成聚合物后，為了降低低分子量成分必須進行精制。
在聚合物的凝膠滲透色譜圖中，將具有相對于峰值分子量1/4以下分子量的低分子量成分降低到不足20％，作為從聚合物中除去低分子量成分的方法且現(xiàn)有技術(shù)已知的再沉淀法、分餾法是困難的。
本發(fā)明中，為了使聚合物中含有的低分子量成分的量降低，顯示如上所示的分子量分布的方法沒有限定，可以列舉例如色譜法和相分離法等。所謂使用本發(fā)明中所述相分離法的聚合物精制方法，是指將聚合物溶液通過熱誘導相分離法和/或非溶劑誘導相分離法液液相分離為富聚合物層溶液和貧聚合物層溶液后，僅分別回收富聚合物層溶液的方法。
如果在容器內(nèi)將聚合物液液相分離并將其放置一定時間，相分離為完全的2相溶液，由于比重高的富聚合物層溶液成為下層溶液，通過或者除去上層的貧聚合物層溶液，或者僅抽取下層的富聚合物層溶液可以分別回收富聚合物層溶液。
本發(fā)明中所謂液液相分離，是指將在一定溫度下均勻溶解的聚合物溶液分離為含有的聚合物濃度和分子量分布不同的2相溶液(富聚合物層溶液和貧聚合物層溶液)，不包括析出固相和固體聚合物的相變化。
本發(fā)明中所謂熱誘導相分離法，是指將在一定溫度下均勻溶解的聚合物溶液通過以一定速度冷卻或加熱將該聚合物溶液分離為多相(例如，液相與液相、液相與固相、液相與液相和固相等)。其中，本發(fā)明中僅使用分為液相與液相的相變化。
另外，本發(fā)明中所謂非溶劑誘導相分離法，是指通過在一定溫度下均勻溶解的聚合物溶液中添加該聚合物的非溶劑，將聚合物溶液分離為多相(例如，液相與液相、液相與固相、液相與液相和固相等)。其中，本發(fā)明中僅使用分為液相與液相的相變化。
另外一般地，在制備分子量特別高的聚合物時，為了盡可能地提高單體轉(zhuǎn)化率進行各種努力的情況居多，與此相伴，也有分子量特別高的聚合物中低分子量成分的含量極少的情況。本發(fā)明中，使用該分子量特別高的聚合物的情況下，即使沒有另外的處理，也可以顯示如上述的分子量分布。
本發(fā)明中，作為被覆過濾器基質(zhì)的聚合物，使用重量平均分子量為300000～3000000，優(yōu)選為300000～2000000，更優(yōu)選為350000～2000000的聚合物。重量平均分子量不足300000，存在本發(fā)明中過濾器中溶出物的量增加的傾向。另外，重量平均分子量如果超過3000000，聚合物在溶劑中難以溶解，存在被覆困難的傾向。
作為本發(fā)明中使用的聚合物，只要時在水中膨脹，但在水中不溶解的就可以，沒有特別的限制，可以例示單獨和多種具有磺酸基、羧基、羰基、氨基、酰胺基、氰基、羥基、甲氧基、磷酸基、氧乙烯基、亞胺基、酰亞胺基、亞胺醚基、吡啶基、吡咯烷酮、咪唑基、季銨基等的聚合物。
其中，優(yōu)選具有非離子性親水基和堿性含氮功能基的共聚物。
作為本發(fā)明中的非離子性親水基，可以列舉羥基和酰胺基等。
作為含有非離子性親水基的單體，可以列舉含有上述羥基和酰胺基的單體，例如(甲基)丙烯酸2-羥基乙酯、(甲基)丙烯酸2-羥基丙酯、乙烯醇(聚合為醋酸乙烯后，使其水解)、(甲基)丙烯酰胺、N-乙烯吡咯烷酮等。另外，作為非離子性親水基，除上述的羥基和酰胺基外也可以列舉聚環(huán)氧乙烷鏈。作為含有聚環(huán)氧乙烷鏈的單體，可以例舉(甲基)丙烯酸甲氧基乙二醇酯、(甲基)丙烯酸甲氧基二乙二醇酯、(甲基)丙烯酸甲氧基三乙二醇酯、(甲基)丙烯酸甲氧基四乙二醇酯等(甲基)丙烯酸烷氧基聚乙二醇酯類等。上述單體中，從獲得的容易程度、聚合時操作的容易、血液流動時的性能觀點出發(fā)，優(yōu)選使用(甲基)丙烯酸2-羥基乙酯。
另外，作為堿性含氮功能基，可以列舉伯氨基、仲氨基、叔氨基、季銨基、和吡啶基、咪唑基等含氮芳香族等。
作為具有堿性含氮功能基的單體，可以列舉烯丙胺；(甲基)丙烯酸二甲基氨基乙酯、(甲基)丙烯酸二甲基氨基丙酯、3-二甲基氨基-2-羥基(甲基)丙烯酸酯等(甲基)丙烯酸衍生物；p(對)-二甲基氨基甲基苯乙烯、對-二甲基氨基乙基苯乙烯等苯乙烯衍生物；2-乙烯基吡啶、4-乙烯基吡啶、4-乙烯基吡啶等含氮芳香族化合物的乙烯衍生物；以及將上述乙烯化合物通過鹵代烷基化成季銨鹽的衍生物。上述單體中，從得到容易、聚合時的操作的容易、血液流動時的性能等出發(fā)，優(yōu)選使用(甲基)丙烯酸二甲基氨基乙酯，(甲基)丙烯酸二乙基氨基乙酯。
為了從全血或紅血球制劑中同時吸附除去白血球和血小板，聚合物的被覆量(涂布量)為0.5mg(聚合物)/m2(過濾器基質(zhì)全表面積的每單位面積)～10mg/m2，優(yōu)選為1mg/m2～7.5mg/m2。涂布量不足0.5mg/m2白血球除去性能差異很大，如果超過10mg/m2，存在血小板的除去率低于95％的傾向。
由于血小板誘發(fā)同種免疫反應，在荷蘭等設立了將其在紅血球制劑中的混入數(shù)控制在1.5×1010以下/單位的標準。在從全血中不通過離心條件而僅過濾進行充分的血小板除去中，要求95％以上的除去率。
另外本發(fā)明中所謂的全表面積(m2)，是指將被覆用的過濾器基質(zhì)的重量(g)與該過濾器基質(zhì)的比表面積(m2/g)的相乘得到的值，不僅包含過濾器基質(zhì)的表面積部分，也包含內(nèi)部細孔的表面積的值。另外，本發(fā)明中所謂的比表面積，是指將用日本國(株)島津制作所制的“アキユソ-ブ2100E”或與其相同式樣的機器，在0.50g～0.55g的范圍內(nèi)稱量的過濾器基質(zhì)填充到樣品管中，在上述アキユソ-ブ主體上在1×10-4mmHg的真空度(室溫下)脫氣處理20小時后，吸附氣氪氣，吸附溫度液氮溫度下測定的值。
另外，本發(fā)明中的每單位面積過濾器基質(zhì)全表面積的聚合物涂布量Y(mg/m2)，可以從過濾器基質(zhì)每單位切割面積(m2)聚合物量X(mg/m2)，基質(zhì)目付(單位面積重量)(g/m2)，以及基質(zhì)的比表面積B(mg/m2)通過下式求出。此處所謂基質(zhì)目付是指基質(zhì)的每單位切割面積的重量(g/m2)。
Y＝X/(A×B)圖2，表示發(fā)明者們試驗聚合物的涂布量與從全血中的血小板除去性能關(guān)系的結(jié)果。圖2中，表示相對于每基質(zhì)全表面積的聚合物涂布量(mg/m2)，全血中的血小板除去率。該試驗中使用的聚合物，是由(甲基)丙烯酸2-羥基乙酯和(甲基)丙烯酸二甲基氨基乙酯形成的共聚物，基質(zhì)是由平均纖維直徑為1.2μm的聚對苯二甲酸乙二酯纖維形成的無紡布(40g/m2目付，空隙率79％，厚度0.25mm，比表面積2.01m2/g)。如圖2所示，可以理解聚合物的涂布量在10mg/m2以下全血中的血小板除去率顯著地增大。
另外，圖3，表示試驗聚合物的涂布量與紅血球制劑中血小板的除去性能關(guān)系的結(jié)果。使用中使用的聚合物和基質(zhì)，與上述全血中血小板除去性能試驗相同。在圖3中，可以理解如果聚合物的涂布量減少，血小板的除去率增大，關(guān)于紅血球制劑中血小板的除去率，聚合物的涂布量在10mg/m2以下也顯著地增大。
圖2～圖3所示的關(guān)于聚合物涂布量與血小板除去率的特異性，過去是未知的，這次，由本發(fā)明者們首次發(fā)現(xiàn)。
本發(fā)明的過濾器中，相對于過濾器基質(zhì)的全表面的聚合物被覆率，優(yōu)選不足70％。該被覆率(％)，通過X射線光電子分光光度法(XPS)測定，從過濾器基質(zhì)被覆部分中的聚合物量與過濾器基質(zhì)材料的量求出。
本發(fā)明中所謂被覆率，是指相對于構(gòu)成過濾器基質(zhì)的各元素的全表面由聚合物被覆的表面的比例。由于現(xiàn)在沒有精確測定上述過濾器基質(zhì)全表面的被覆率的方法，本發(fā)明中，過濾器基質(zhì)全表面中的被覆率通過XPS測定，將所得的值作為其代表值。由聚合物的過濾器基質(zhì)全表面的被覆率不足70％，優(yōu)選不足50％。這一點，在本發(fā)明中很重要，為了實現(xiàn)本發(fā)明的目的“提供同時具有高白血球除去效能與血小板除去率，可以有效地用于從紅血球制劑和全血中的白血球和血小板除去處理的血液處理用過濾器”，被覆率優(yōu)選不足70％，更優(yōu)選不足50％。被覆率在70％以上，存在或者血小板的除去率降低，或者血小板除去率的值差異變大的傾向。
另外，由于被覆率越低血小板除去率就越高，本發(fā)明中優(yōu)選盡可能降低被覆率。
這樣，被覆率與過濾器性能，特別是血小板除去率存在密切關(guān)系的原因雖然不明確，但可推定如下。
過濾器基質(zhì)的表面，由于存在很多容易吸附血小板的部位(下面將該部位稱為“血小板吸附部位”)，在盡可能地露出沒有被聚合物被覆的過濾器基質(zhì)表面的狀態(tài)下，血小板與過濾器基質(zhì)一旦接觸，血小板就容易吸附在過濾器基質(zhì)上。
本發(fā)明的血液處理用過濾器中，過濾器基質(zhì)的被覆率，可以使用在使用單色化的X射線源，測定從物體表面通常數(shù)10(オソグストロ-ム)～100的深度的化學狀態(tài)時使用的X射線光電子分光光度法(X-射線光電子能譜)(下面，稱為“XPS”)，通過下列方法測定。
首先，選擇XPS譜中最明確地反映過濾器基質(zhì)與聚合物的存在比的元素或部分結(jié)構(gòu)。該元素或部分結(jié)構(gòu)，參考過濾器與聚合物的結(jié)構(gòu)差，例如下列差異進行選擇·過濾器基質(zhì)中含有的某些元素，聚合物中不含有。
·某些共同部分的結(jié)構(gòu)的存在比，在過濾器基質(zhì)與聚合物中不同等差異。
因此，分別對于過濾器基質(zhì)的標準品與聚合物的標準品測定XPS譜，在XPS譜中觀測，求出歸屬于上述被選擇的元素或者部分結(jié)構(gòu)的峰面積，與其它特定的峰面積的比率，過濾器基質(zhì)為X1，聚合物標準品為X2。
另一方面，如果將過濾器基質(zhì)表面用聚合物被覆，在本發(fā)明的過濾器表面，根據(jù)被覆的比例混合過濾器基質(zhì)和聚合物，在提高被覆率的同時，過濾器表面聚合物的存在比增加。結(jié)果，如果測定上述過濾器表面的XPS譜，得到過濾器基質(zhì)與聚合物的混合物的譜，與該過濾器相關(guān)的、歸屬于上述選擇的元素或部分結(jié)構(gòu)的峰面積，相對于其它特定的峰面積的比率X，在X1和X2之間。利用該值，定義過濾器表面的過濾器基質(zhì)與涂層材料(聚合物)的存在比(即被覆率)。
關(guān)于上述方法，以過濾器基質(zhì)是聚對苯二甲酸乙二酯(下面稱為“PET”)，聚合物是聚甲基丙烯酸羥基乙酯(下面稱為“PHEMA”)的情況為例，具體地說明。
PET和PHEMA均是由氫、碳和氧構(gòu)成的聚合物，只在PET和PHEMA之一中含有的元素沒有。因此，只在PET和PHEMA之一中含有的元素作為指標，不能測定PET和PHEMA的存在比。因此，著眼于化學鍵狀態(tài)不同的碳原子含量的差異，測定PET和PHEMA的存在比。
構(gòu)成PET和PHEMA的碳原子，可以分為下列3類a)羰基碳原子b)僅通過單鍵與氧原子直接鍵合的碳原子c)沒有與氧原子直接鍵合的碳原子。
在構(gòu)成PET的結(jié)構(gòu)單位中，含有2個羰基碳原子，2個僅通過單鍵與氧原子直接鍵合的碳原子和6個沒有與氧原子直接鍵合的碳原子。
另一方面，在構(gòu)成PHEMA的結(jié)構(gòu)單位中，含有1個羰基碳原子，2個僅通過單鍵與氧原子直接鍵合的碳原子和3個沒有與氧原子直接鍵合的碳原子。
分別在PET和PHEMA中，沒有與氧原子直接鍵合的碳原子，與羰基碳原子的存在比(個數(shù)的比)，均為3∶1。
但是，在PET中，僅通過單鍵與氧原子直接鍵合的碳原子，與羰基碳原子的存在比(個數(shù)比)為1∶1，相應地在PHEMA中，僅通過單鍵與氧原子直接鍵合的碳原子，與羰基碳原子的存在比(個數(shù)比)為2∶1。
該比率的不同，作為XPS譜中峰強度比(峰面積比)的差被檢測。即，PET的XPS譜中，相對于歸屬于僅通過單鍵與氧原子直接鍵合的碳原子的峰強度(面積)與歸屬于羰基碳原子的峰強度(面積)的比為1∶1，PHEMA的XPS譜中，歸屬于僅通過單鍵與氧原子直接鍵合的碳原子的峰強度(面積)與歸屬于羰基碳原子的峰強度(面積)比為2∶1。
另一方面，如果將由PET纖維制備的無紡布表面用PHEMA被覆，在本發(fā)明的過濾器表面，根據(jù)被覆比例混合TET和PHEMA，在被覆率提高的同時，過濾器表面的PHEMA的存在比增加。結(jié)果，如果測定上述無紡布表面的XPS譜，得到PET和PHEMA混合物的譜，歸屬于僅通過單鍵直接與氧原子鍵合的碳原子的峰強度(面積)與歸屬于羰基碳原子的峰強度(面積)的比，在PET與PHEMA之間。被覆為0％時，峰強度(面積)的比為1∶1，伴隨被覆率提高接近為2∶1，被覆率為100％時，峰的強度(面積)比為2∶1。
利用它們，對于通過由PET纖維制備法無紡布表面用PHEMA被覆得到的本發(fā)明的過濾器，可以定義被覆率。
PET、PHEMA和本發(fā)明的過濾器，XPS譜中在大約如圖4所示位置觀測到峰。圖4中的峰a歸屬于羰基碳原子，峰b歸屬于僅通過單鍵與氧原子直接鍵合的碳原子，峰c歸屬于沒有與氧原子直接鍵合的碳原子。
因此，以PET標準品中峰a與峰b的面積比為1∶x，PHEMA標準品中峰a與峰b的面積比為1∶y，樣品中峰a與峰b的面積比為1∶z時，樣品中的被覆率，通過下式定義。
被覆率(％)＝{|z-x|/|y-x|}×100過濾器基質(zhì)與聚合物的組合是PET與PHEMA的組合以外的組合的情況下，也可以通過同樣的方法求出被覆率。
本發(fā)明中，如上所述求出的關(guān)于過濾器表面被覆率的值稱為過濾器的被覆率。
但是本發(fā)明中，不僅是過濾器表面，而且構(gòu)成過濾器的過濾器基質(zhì)元件的全表面(即直至過濾器內(nèi)部)如果不被聚合物被覆，難以得到所期望的性能。因此進行下列的操作，確認即使過濾器內(nèi)部過濾器基質(zhì)也被均勻地被覆。
首先，在過濾器上適宜地選擇一個部位，在所選擇的部位切斷過濾器。然后，在切斷面中，在從一方的表面附近、另一方的表面附近與2個表面等距離的部位合計3個地方，分別隨機地選擇5個地方，得到XPS譜。然后，確認其XPS譜形狀，沒有大的差異即確認是相同的。因此，評價被覆厚度方向的均一性。
一旦進行過濾器的切斷，就在過濾器斷面中露出過濾器基質(zhì)，結(jié)果可看到過濾器斷面中的被覆率大幅度降低。這大大地影響其XPS譜，由于過濾器斷面的XPS譜中的聚合物信號強度降低，過濾器斷面的XPS譜的形狀，與過濾器表面XPS譜的形狀不同。另外，將各過濾器斷面的XPS譜的形狀進行比較時，測定區(qū)域必須狹窄的關(guān)系上，噪音增多，由于難以得到鮮明的譜，因此即使比較其XPS譜中的信號強度比(峰面積比)也沒有意義。因此，各過濾器斷面的XPS譜中，觀測相同位置上的信號時，即，分別的XPS譜中觀測的信號的化學位移相等時，譜的形狀被認為是相同的。
下面，說明本發(fā)明的血液處理用過濾器的制備方法。
本發(fā)明的血液處理用過濾器，通過(1)用將聚合物溶解在溶劑中的溶液(下面稱為“聚合物涂層溶液”)被覆過濾器基質(zhì)，或者，將過濾器基質(zhì)浸漬在聚合物溶液中后，(2)通過機械壓縮、重力、離心分離、吹氣、或者減壓抽吸等從過濾器基質(zhì)上除去剩余的溶液后，或者，在非溶劑中浸漬脫溶劑后干燥而制備。
涂層(被覆)前，為了將聚合物與過濾器基質(zhì)緊密粘接，可以將過濾器基質(zhì)表面用γ(伽馬)射線照射、UV(紫外線)照射、電暈放電等離子處理、等離子處理或者使用化學品等氧化也是有效的。另外，在涂層后的氣體中，或者液體中通過熱處理，增強過濾器基質(zhì)與聚合物的粘接，使聚合物內(nèi)發(fā)生交聯(lián)反應可以使涂層穩(wěn)定化。還有，涂層可以在形成過濾器基質(zhì)的同時進行，也可以在成型后進行。
作為將聚合物溶液涂布在過濾器基質(zhì)上的方法，有在過濾器基質(zhì)上比所期望的量過量地涂布后再將其減少至規(guī)定的涂布量的后計量法，和在過濾器基質(zhì)上涂布前將預先計量好的所期望涂布量的聚合物溶液轉(zhuǎn)移到過濾器基質(zhì)上的前計量法，可以是其中的任何一種。
作為涂布后的干燥方法，可以使用在干燥氣體中或減壓氛圍氣中，常溫下，或者，邊加熱邊干燥等的方法。
用于溶解聚合物的溶劑，例如聚合物如果是由(甲基)丙烯酸2-羥基乙酯和(甲基)丙烯酸二甲基氨基乙酯形成的共聚物，可以列舉乙二醇、二乙二醇等二醇類；甲醇、乙醇、n(正)-丙醇、異丙醇、正-丁醇、t(叔)-丁醇等醇類；N，N-二甲基甲酰胺和甲基溶纖劑等。這些溶劑可以單獨使用，也可以多種混合使用。另外，可以使用在其中添加水的溶劑。
作為本發(fā)明的血液處理用過濾器的過濾器基質(zhì)，除了通過熔體噴射法或瞬時紡絲法或抄漿法等制造的無紡布外，可以是紙、織物、篩網(wǎng)織物以及高分子多孔物質(zhì)等已知的過濾器材料中的任意一種方式，但無紡布是特別適宜的方式。還有，此處所謂無紡布，是指不是通過編織而是將纖維或者絲的集合體通過化學、熱、或者機械地結(jié)合的布狀的織物。
作為纖維原材料，可以列示聚酰胺、芳香族聚酰胺、聚酯、聚丙烯腈、聚三氟氯乙烯、聚苯乙烯、聚(甲基)丙烯酸甲酯、聚乙烯、聚丙烯、聚-4-甲基戊烯等合成纖維，或纖維素、纖維素醋酸酯等再生纖維等。
如果是由無紡布和織物形成的過濾器基質(zhì)，其平均纖維直徑為0.3μm～10μm，優(yōu)選為0.3μm～3μm，進一步優(yōu)選為0.5μm～1.8μm。平均纖維直徑不足0.3μm的情況下，通過血液時壓力損失過高存在不實用的危險，相反如果超過10μm，由于纖維與白血球的接觸概率過低，存在本發(fā)明的白血球除去不能充分發(fā)揮的危險。
另外，此處所謂平均纖維直徑，是指從構(gòu)成過濾器基質(zhì)的無紡布或織物的一部分取樣，通過電子顯微鏡照相測定的平均直徑。該平均纖維直徑是根據(jù)下列順序求出的值。
即，從過濾器基質(zhì)的無紡布或者織物將被認為實質(zhì)上均勻過濾器基質(zhì)的一部分取樣，使用掃描電子顯微鏡等，照相。取樣時，將過濾器基質(zhì)分成邊長為0.5cm的正方形，從其中隨機取樣6個地方。隨機取樣中，例如在上述各區(qū)域設定編號后，通過使用隨機抽樣數(shù)字表等方法，可以選擇必須的地方的區(qū)域。另外，開始抽樣的3個區(qū)域，對于一面(為方便下面稱為A面)，另外，對于殘余的3個區(qū)域為另一面(為方便下面稱為B面)，將其中央部分在放大倍率2500倍下照相。對于取樣的各區(qū)域中央部分基其附近的地方進行照相，直到照相的纖維的總數(shù)超過100。對于這樣得到的照相，測定所照的全部纖維的直徑。此處所謂直徑，是指相對于纖維軸直角方向的纖維寬度。測定的全部纖維的直徑之和被纖維數(shù)除的值作為平均直徑。但是，多個纖維重疊，成為其它纖維的陰影其寬度無法測定的情況下，或者，多個纖維熔融，成為粗纖維的情況下，進一步顯然直徑不同的纖維混合的情況，等等情況下，消除這些數(shù)據(jù)。另外，A面與B面明顯地平均直徑不同的情況下，就不能將其認為是單一的過濾器基質(zhì)。此處所謂“明顯地平均纖維直徑不同”是指被認為具有統(tǒng)計意義的差的情況。此時，作為A面一側(cè)與B面一側(cè)不同的過濾器基質(zhì)，在發(fā)現(xiàn)兩面的界面后，再分別測定兩者的平均纖維直徑。
另外，由無紡布或織物形成的過濾器基質(zhì)的空隙率，優(yōu)選50％以上不足95％，更優(yōu)選70％以上不足90％?？障堵什蛔?0％的情況下血液流動變差，另外95％以上由于過濾器基質(zhì)的機械強度差也不適宜?？障堵实臏y定，測定切斷在規(guī)定面積的過濾器基質(zhì)干燥時的重量(W1)，進一步測定厚度算出體積(V)。將該過濾器基質(zhì)浸漬在純凈水中，測定脫氣后含水的過濾器基質(zhì)重量(W2)。從該值通過如下所示的算式求出空隙率。
另外，下列算式中ρ為純凈水的密度。
空隙率(％)＝(W2-W1)×100/ρ/V作為高分子多孔物質(zhì)，可以列示聚乙烯、聚丙烯、聚-4-甲基戊烯、聚乙烯醇縮甲醛、聚丙烯腈、聚砜、纖維素、纖維素醋酸酯、聚氨基甲酸酯、聚乙酸乙烯酯、聚酯、聚酰胺、聚醚亞酰胺、聚(甲基)丙烯酸酯、聚偏氟乙烯、聚亞酰胺等多孔物質(zhì)。
高分子多孔物質(zhì)，平均氣孔徑為1μm～60μm，優(yōu)選為1μm～30μm，更優(yōu)選為1μm～20μm。不足1μm血液等含有白血球和血小板的液體的流動變差，如果超過60μm，由于多孔物質(zhì)與白血球接觸的概率過低白血球的除去率變低，因此不好。此處所謂平均氣孔徑，表示根據(jù)ASTM F316-86中記載的氣流法在POROFIL(COULTERELECTRONICS LTD.制)液中測定的平均孔徑。
使用本發(fā)明的制備方法得到的血液處理用過濾器，可以填充在具有通常公知的血液的入口和出口的適當?shù)难哼^濾用過濾器基質(zhì)容器中而使用。
本發(fā)明的過濾器，根據(jù)其厚度不同，可以使用1片，也可以多片重迭使用。重疊的片數(shù)根據(jù)血液過濾條件不同沒有界限，但通常使用數(shù)片至數(shù)十片。另外，過濾器基質(zhì)是織物或無紡布的情況下，也可以重疊使用其它纖維形成的過濾器基質(zhì)。
另外，過濾器數(shù)片重疊使用的情況下，為了從紅血球制劑或者全血中有效地除去白血球和血小板，優(yōu)選通過凝膠滲透色譜圖中具有峰值分子量1/4以下的分子量的低分子量成分的量為20％以下的分子量分布的聚合物，被覆使用至少過濾器基質(zhì)中孔徑最小的或者纖維直徑最小的過濾器基質(zhì)的過濾器(主過濾器)，更優(yōu)選全部過濾器被聚合物被覆。
相對于組合孔徑或者纖維直徑不同的多片過濾器基質(zhì)時的過濾器基質(zhì)，聚合物的涂布量，單獨(1片)或多個(片)相同孔徑或者纖維直徑的過濾器基質(zhì)合在一起測定，分別計算每一相同孔徑或者纖維直徑的過濾器基質(zhì)。
重迭使用多片不同種類過濾器基質(zhì)的情況下，所謂過濾器涂布量每單位面積的過濾器基質(zhì)全表面積為0.5～10mg/m2，使用最小孔徑或者最小纖維直徑的過濾器基質(zhì)的過濾器(主過濾器)的涂布量必須在其范圍內(nèi)。
發(fā)明的最佳實施方式下面，通過實施例說明本發(fā)明，但本發(fā)明并不因此受任何限定。
<被覆率的測定方法>
各種測定，通過下列方法進行。
1)過濾器基質(zhì)表面的聚合物被覆率的測定方法聚合物被覆的過濾器基質(zhì)表面被覆率的測定，在將過濾器切割為約1cm的正方形的樣品上進行。
準備膜狀或者板狀的PET(聚對苯二甲酸乙二酯)標準品，將粉末擠壓成丸狀固化的聚合物((甲基)丙烯酸2-羥基乙酯-(甲基)丙烯酸二甲基氨基乙酯的共聚物，或者(甲基)丙烯酸2-羥基乙酯-(甲基)丙烯酸二乙基氨基乙酯共聚物)標準品。分析，X射線電子能譜(XPS)裝置(日本國(株)島津制作所制AXIS-Ultra)，以及X射線源使用Al Kα單色化光源(300W)，Narrow Scan10eVdPass Energy以及分析面積700μm×300μm，在有帶電中和的條件下進行。
圖4中，表示通過上述分析得到的，相對于Binding Energy(eV)的強度(Intensity)(a.u.)(angstrom unit)的Narrow ScanX射線光電子譜的一例。
2)峰分離的過程峰分離中使用Eclipse Datasystem Version 2.1(英國Fisons SurfaceSystem社制)的軟件。
程序1規(guī)定如圖4的X射線光電子能譜所示的匯集了a～c3個峰的峰分離面積，用Shirley法除去陰影。
程序2指定圖4中分別相當于a(來源于O-C＝O鍵中有下劃線的碳)，b(來源于C-C-O鍵中有下劃線的碳)，c(來源于C-C-C鍵或C-CH3鍵中有下劃線的碳)的峰的3個Gaussiian/Lorentzian混合峰，將峰中心，峰高度，半數(shù)寬，Gaussiian/Lorentzian混合比作為峰分離參數(shù)。
程序3用minimum Chi-Square法實施峰分離，求出峰a和峰b的面積比。此處，在峰分離中加入以下限制條件。
①樣品中峰a和峰b的半數(shù)寬的差，PET標準品中峰a與峰b的半數(shù)寬的差在±0.1eV的范圍內(nèi)。
②峰a與峰b的Gaussiian/Lorentzian的混合比(峰a的值)為±0.15。峰c的Gaussiian/Lorentzian的混合比在0.2～0.55的范圍內(nèi)。
程序4.PET標準品中峰a與峰b的面積比為1∶x，將聚合物粉末形成丸狀的聚合物標準品中峰a與峰b的面積比為1∶y，樣品中峰a與峰b的面積比為1∶z時，該樣品的被覆率通過下式計算。
被覆率(％)＝{|z-x|/|y-x|}×100另外，測定中使用的過濾器樣品，使用殘留溶劑量在1ppm以下厚度為0.1mm以上的。
3)過濾器基質(zhì)厚度方向中被覆率差的測定方法除Narrow Scan40eV的Pass Energy以及分析面積27μmφ的分析條件以外，在與上述1)說明的“過濾器基質(zhì)表明的被覆率測定方法”相同的測定條件下進行。
測定部位，是過濾器一面的表面附近的斷面部分與其他面的表面附近的斷面部分，以及位于過濾器兩表面的中間的斷面部分，分別隨機地選擇5個地方測定。
下列實施例和比較例中，實施例1-1～1-8，以及比較例1-1～1-3，是關(guān)于紅血球制劑處理的，實施例2-1～實施例2-7，以及比較例2-1～2-4，是關(guān)于全血處理的，參考例1以及2是關(guān)于使用的聚合物溶出物試驗的實例。
<實施例1-1>
(聚合物涂層溶液的配制)在由97摩爾％的(甲基)丙烯酸2-羥基乙酯和3摩爾％(甲基)丙烯酸二甲基氨基乙酯形成的共聚物(重量平均分子量570,000，堿性氮原子的含量0.32重量％，非離子性親水基97摩爾％，堿性氮原子的量3摩爾％，峰值分子量3.75×105，低分子量成分的含量26.0％)形成的聚合物溶液(共聚物濃度39重量％，乙醇溶液)中加入4倍體積量的乙醇并在40℃均勻溶解。通過將該溶液在25℃的室溫下放置12小時熱誘導相分離法進行液液相分離后，僅分別回收富聚合物層溶液(共聚物濃度31重量％)。
確認在所得富聚合物層溶液中，溶解了堿性氮原子的含量0.32重量％，非離子性親水基97摩爾％，堿性氮原子的量3摩爾％，峰值分子量3.92×105，低分子量成分含量14.5％的(甲基)丙烯酸2-羥基乙酯-(甲基)丙烯酸二甲基氨基乙酯共聚物，很明顯通過液液相分離精制減少了聚合物中的低分子量成分。
該富聚合物層溶液中加入乙醇后調(diào)整為在40℃的溫度下溶解，共聚物濃度0.06重量％的均勻的聚合物涂層溶液。
(涂布)使用圖5所示的裝置，進行聚合物的涂布，圖5中的符號如下。
1過濾器基質(zhì)供給滾筒2聚合物溶液涂布槽3聚合物溶液保溫用恒溫槽4滾筒5壓輥6過濾器卷曲用滾筒7過濾器基質(zhì)8聚合物溶液
9浸漬滾筒10恒溫槽內(nèi)的調(diào)溫水11干燥裝置(低溫一側(cè))12干燥裝置(高溫一側(cè))使用圖5的裝置，將30m平均纖維直徑為1.2μm的聚對苯二甲酸乙二酯形成的無紡布(40g/m2目付，空隙率79％，厚度0.25mm，密度0.16g/cm3，寬300mm，比表面積2.01m2/g)連續(xù)地在上述40℃的溶液中浸漬后，通過間隙為0.13mm的滾筒間而夾持。將3m無紡布通過40℃的第1干燥室內(nèi)(風速15m/秒)，3m通過60℃的第2干燥室(風速15m/秒)后卷曲。線速度，固定為3m/分。通過第1干燥室后殘余的乙醇量為11％。另外，卷取時殘余乙醇量在1％以下，卷取后過濾器之間沒有粘接，可以有效地生產(chǎn)。過濾器中的聚合物涂布量為0.62mg/m2，被覆率為20％。
(血液評價)將36片從這樣制備的過濾器中任意選擇的一部分切斷為63mm×63mm的正方形的過濾器重疊，以填充密度為約0.23g/cm3填充到具有血液導入口和導出口的容器中。過濾器的有效過濾橫斷面積為60mm×60mm＝3600mm2，厚度為8mm。
紅血球制劑，使用270mL從在相對于450mL血液中添加63mLCPD液(檸檬酸-磷酸-葡聚糖)的513mL(25℃)全血中，采血后8小時離心分離除去血小板血漿，加入作為紅血球保存液的SAGM(鹽水-腺嘌呤-葡萄糖-甘露糖醇)的濃紅血球制劑(血球比率60％)。
使用上述過濾器，將上述濃紅血球制劑，以落差70cm過濾。過濾中的血液處理速度，調(diào)整為25mL/分鐘。進行過濾直至血液袋內(nèi)沒有血液，回收過濾的血液。
測定過濾前的制劑(下面稱為過濾前液)，以及回收的制劑(下面稱為回收液)的白血球濃度與過濾前液的體積以及回收液的體積，根據(jù)下式求出白血球除去效能。
另外，過濾前液和回收液的體積，是各自的重量除以血液制劑的比重的值。過濾前液以及回收液的白血球濃度的測定，根據(jù)如下所示的方法進行。將600μL液體加入含有已知數(shù)量熒光顆粒的TruCOUNT試管中。進一步將2400μL LeucoCOUNT試劑加入試管中，緩慢混合。在室溫暗處，保溫5分鐘。將這樣調(diào)整的10支TruCOUNT試管連續(xù)地用流體定位計(フロ-サイトメ-タ，F(xiàn)ACSCalibur HG日本國日本ベクトソデイツソソ(株)制)測定。另外，LeucoCOUNT試劑和TruCOUNT試管用LeucoCOUNT試劑盒(日本國日本ベクトソデイツソソ(株)制BD-340523)。
另外，制劑中血小板的濃度，在多項目自動血球計數(shù)裝置(日本國SYSMEX社制 K-4500)上將ストマライザ-(日本國SYSMEX社制)用作溶血劑測定，血小板除去率通過下式算出。
將該過濾器進行3次的血液評價的平均值示于表1中。白血球選擇除去過濾器中，要求白血球除去效能5Log以上的性能，可以理解白血球除去效能中得到了高性能。
另外，血小板除去率中也可以得到95％以上的高除去性能。
<實施例1-2>
除在實施例1-1中使用的富聚合物層溶液中加入乙醇，使用共聚物濃度1.25重量％的聚合物溶液外，與實施例1-1同樣地進行操作。過濾器中的聚合物涂布量為9.55mg/m2，被覆率為50％。
此時的血液評價結(jié)果示于表1中。得到高的白血球除去效能。另外，血小板除去率中也得到95％以上的高除去效能。
<實施例1-3>
除代替實施例1-1中使用的無紡布使用平均纖維直徑1.2μm的聚(對苯二甲酸丙二酯)纖維形成的無紡布(40g/m2目付，空隙率75％，厚度0.23mm，密度0.17g/cm3，寬300mm，比表面積1.98m2/g)以外，進行與實施例1-1相同的操作。過濾器中的聚合物涂布量為0.54mg/m2，被覆率20％。
此時血液的評價結(jié)果示于表1中。得到高的白血球除去效能。另外，血小板除去率中也得到95％以上的高除去性能。
<實施例1-4>
除代替實施例1-1中使用的富聚合物層溶液使用由95摩爾％(甲基)丙烯酸2-羥基乙酯和5摩爾％(甲基)丙烯酸二乙基氨基乙酯形成的共聚物(峰值分子量4.08×105，低分子量成分的含量9.9％，堿性氮原子的含量0.53重量％，非離子性親水基95摩爾％，堿性氮原子的量5摩爾％)形成的富聚合物層溶液(共聚物濃度30重量％)外，進行與實施例1-1同樣的操作。過濾器中聚合物的涂布量為0.72mg/m2，被覆率20％。
此處，峰值分子量4.08×105，低分子量成分的含量為9.9％的(甲基)丙烯酸2-羥基乙酯-(甲基)丙烯酸二乙基氨基乙酯共聚物形成的富聚合物層溶液，是用由95摩爾％的(甲基)丙烯酸2-羥基乙酯和5摩爾％(甲基)丙烯酸二乙基氨基乙酯形成的共聚物(重量平均分子量650000，堿性氮原子含量0.53重量％，95摩爾％離子性親水基，5摩爾％的堿性氮原子的量，峰值分子量3.62×105，低分子量成分的含量21.2％)形成的聚合物溶液(共聚物濃度41重量％，乙醇溶液)，通過與實施例1-1同樣的方法得到的。很明顯通過該液液相分離精制降低了聚合物中低分子量成分。
此時的血液評價結(jié)果示于表1中。得到高白血球除去效能。另外，血小板除去率中也得到95以上的高除去效能。
<實施例1-5>
除代替實施例1-1中使用的富聚合物層溶液，使用峰值分子量3.82×105，低分子量成分的含量為12.4％的與實施例1-1相同化學組成形成的共聚物(堿性氮原子含量0.32重量％，非離子性親水基97摩爾％，堿性氮原子含量3摩爾％)形成的富聚合物層溶液(共聚物濃度40重量％)外，進行與實施例1-1相同的操作。過濾器中聚合物的涂布量0.68mg/m2，被覆率為20％。
此處，由峰值分子量3.82×105，低分子量成分的含量為12.4％的(甲基)丙烯酸2-羥基乙酯-(甲基)丙烯酸二甲基氨基乙酯共聚物形成的富聚合物層溶液，通過在實施例1中使用的精制前的聚合物溶液中加入2倍體積量的乙醇，在40℃均勻溶解后，均勻攪拌的同時將相對于聚合物溶液0.033倍體積量的正己烷少量逐滴滴加通過非溶劑誘導相分離法液液相分離僅分別回收富聚合物層溶液而得到的。很明顯通過該液液相分離精制降低了聚合物中的低分子量成分。
此時的血液評價結(jié)果示于表1中。得到高的白血球除去效能。另外，在血小板除去率中也得到95％以上的高除去性能。
<實施例1-6>
除代替實施例1-1中使用的富聚合物成溶液，使用由峰值分子量3.80×105，低分子量成分的含量為18.9％的與實施例1-1相同的化學組成形成的共聚物(堿性氮原子的含量0.32重量％，非離子性親水基97摩爾％，堿性氮原子的量3摩爾％)形成的富聚合物層溶液(共聚物濃度28重量％)外，進行與實施例1-1相同的操作。過濾器中聚合物涂布量為0.58mg/m2，被覆率為20％。
此處，由峰值分子量3.80×105，低分子量成分的含量為18.9％的(甲基)丙烯酸2-羥基乙酯-(甲基)丙烯酸二甲基氨基乙酯共聚物形成的富聚合物成溶液，是通過在實施例1-1中使用的精制前的聚合物溶液中加入3倍體積量的純凈水并在40℃均勻溶解后，調(diào)整為15℃室溫下放置12小時通過熱誘導相分離和非溶劑誘導相分離的組合液液相分離并僅分別回收富聚合物成溶液(共聚物濃度28重量％)而得到的。很明顯通過該液液相分離降低了聚合物中低分子量成分的量。
此時的血液評價結(jié)果示于表2中。得到了高的白血球除去效能。另外，在血小板除去率中也得到了95％以上的高除去性能。
<比較例1-1>
代替實施1-4中使用的富聚合物成溶液，由峰值分子量3.62×105，低分子量成分的含量為20.9％的與實施例1-4相同的化學組成形成的共聚物(堿性氮原子的含量0.53重量％，非離子性親水基95摩爾％，堿性氮原子的量5摩爾％)外，進行與實施例1-1相同的操作。
此時的血液評價結(jié)果示于表2中。另外，過濾器中的聚合物涂布量為0.50mg/m2，被覆率為20％。
此處，峰值分子量3.62×105，低分子量成分的含量為20.9％的(甲基)丙烯酸2-羥基乙酯-(甲基)丙烯酸二乙基氨基乙酯共聚物，是將實施例1-4中使用的精制前的聚合物溶液均勻攪拌的同時少量逐漸滴加到約20倍體積量的純凈水中使析出并再沉淀精制，進一步將該析出物在40℃通過真空干燥得到的。結(jié)果白血球除去效能低于5Log。
<比較例1-2>
除在實施例1-1中使用的富聚合物層溶液中加入乙醇，使用共聚物濃度為0.04重量％的聚合物溶液外，進行與實施例1-1相同的操作。
此時的血液評價結(jié)果示于表2中。進行3次的血液評價結(jié)果，白血球的除去效能差異大，結(jié)果是平均的結(jié)果低于5Log。另外，過濾器中聚合物的涂布量為0.40mg/m2，被覆率為20％。
<比較例1-3>
除代替實施例1-1中使用的涂層過濾器使用未涂布聚合物的過濾器基質(zhì)以外，進行與實施例1-1相同的操作。
此時的血液評價結(jié)果示于表2中。進行3次的血液評價結(jié)果，白血球除去效能差異大，結(jié)果是平均的結(jié)果低于5Log。
<實施例2-1>
除血液評價中使用的血液為全血外，進行與實施例1-1相同的操作。
即，通過與實施例1-1相同的方法，配制聚合物涂布溶液并涂布制作過濾器。與實施例1-1同樣地，低分子量成分的含量為14.5％，聚合物涂布量為0.62mg/m2，被覆率為20％。過濾器中，代替紅血球制劑，從在相對于450mL血液中添加63mL CPD液(檸檬酸-磷酸-葡聚糖)的513mL人保存1天的全血在過濾器上過濾270mL外，與實施例1-1同樣地進行血液評價。
該過濾器的血液評價進行3次的平均值示于表3中?？芍桨籽虺バ?Log以上的結(jié)果，白血球除去效能中也得到高的性能。
<實施例2-2>
除在實施例2-1中使用的富聚合物成溶液中加入乙醇，使用共聚物濃度為1.25重量％的聚合物涂布溶液外，進行與實施例2-1相同的操作。過濾器中聚合物的涂布量為8.96mg/m2，被覆率為50％。
此時的血液評價結(jié)果示于表3中。得到白血球除去效能和血小板除去率同時高的結(jié)果。
<實施例2-3>
除代替實施例2-1中使用的無紡布，使用平均纖維直徑為1.2μm的聚(對苯二甲酸丙二酯)纖維形成的無紡布(40g/m2目付，空隙率75％，厚度0.23mm，密度0.17g/cm3，寬300mm，比表面積1.98m2/g)外，進行與實施例2-1相同的操作。過濾器中聚合物的涂布量為0.65mg/m2，被覆率為20％。
此時血液評價結(jié)果示于表3中。得到白血球除去效能和血小板除去率同時高的結(jié)果。
<實施例2-4>
除代替實施例2-1中使用的富聚合物成溶液，使用95摩爾％由(甲基)丙烯酸2-羥基乙酯和5摩爾％(甲基)丙烯酸二乙基氨基乙酯形成的共聚物(峰值分子量4.08×105，低分子量成分的含量為9.9％，堿性氮原子的含量0.53重量％，非離子性親水基95摩爾％，堿性氮原子的量5摩爾％形成的富聚合物成溶液(共聚物濃度29重量％)外，進行與實施例2-1相同的操作。過濾器中聚合物的涂布量為0.60mg/m2，被覆率為20％。
此時的血液評價結(jié)果示于表3中。得到白血球除去效能和血小板除去率同時高的結(jié)果。
<實施例2-5>
除代替實施例2-1中使用的富聚合物層溶液，使用峰值分子量3.82×105，低分子量成分的含量為12.4％的與實施例1-1相同化學組成形成的共聚物(堿性氮原子的含量0.32重量％，非離子性親水基97摩爾％，堿性氮原子的量3摩爾％)形成的富聚合物層溶液(共聚物濃度40重量％)外，進行與實施例2-1相同的操作。過濾器中聚合物的涂布量為0.68mg/m2，被覆率為50％。
此時的血液評價結(jié)果示于表3中。得到白血球除去效能和血小板除去率同時高的結(jié)果。
<實施例2-6>
除代替實施例2-1中使用的富聚合物層溶液，使用峰值分子量3.80×105，低分子量成分的含量為12.9％的與實施例1-1相同化學組成形成的共聚物(堿性氮原子的含量0.32重量％，非離子性親水基97摩爾％，堿性氮原子的量3摩爾％)形成的富聚合物層溶液(共聚物濃度28重量％)外，進行與實施例2-1相同的操作。過濾器中聚合物的涂布量為0.62mg/m2，被覆率為20％。
此時的血液評價結(jié)果示于表4中。得到白血球除去效能和血小板除去率同時高的結(jié)果。
<實施例2-7>
除在實施例2-1中使用的富聚合物層溶液中加入乙醇，使用共聚物濃度0.50重量％的聚合物涂布溶液外，進行與實施例2-1相同的操作。過濾器中聚合物的涂布量為4.58mg/m2，被覆率為40％。
此時的血液評價結(jié)果示于表4中。得到白血球除去效能和血小板除去率同時高的結(jié)果。
<比較例2-1>
除代替實施例2-1中使用的富聚合物層溶液，使用峰值分子量3.62×105，低分子量成分的含量為20.6％的與實施例1-1相同化學組成形成的共聚物(堿性氮原子的含量0.53重量％，非離子性親水基97摩爾％，堿性氮原子的量5摩爾％)外，進行與實施例2-1相同的操作。過濾器中聚合物的涂布量為0.58mg/m2，被覆率為20％。
此時的血液評價結(jié)果示于表4中。進行3次的血液評價結(jié)果，血小板的除去率差異大，結(jié)果是平均的結(jié)果低于95％。
<比較例2-2>
除在實施例2-1中使用的富聚合物層溶液中加入乙醇，使用共聚物濃度為0.04重量％的聚合物涂布溶液外，進行與實施例2-1相同的操作。此時的血液評價結(jié)果示于表4中。進行3次的血液評價結(jié)果，白血球的除去效能差異大，結(jié)果是平均的結(jié)果低于5Log。另外，過濾器中聚合物的涂布量為0.40mg/m2，被覆率為20％。
<比較例2-3>
除代替實施例2-1中使用的涂層過濾器，使用未涂布聚合物的過濾器基質(zhì)外，進行與實施例2-1相同的操作。此時的血液評價結(jié)果示于表4中。進行3次血液評價的結(jié)果，白血球除去效能差異大，結(jié)果是平均的結(jié)果低于5Log。

<參考例1>
除使用共聚物濃度3重量％的聚合物涂布液外，與實施例1-4同樣地得到涂布量73mg/m2的過濾器。將得到的過濾器根據(jù)對于“滅菌后輸血裝置標準(平成10年12月11日醫(yī)藥發(fā)第1079號)”的橡膠制的材料溶出物試驗評價。其結(jié)果，高錳酸鉀還原性，以消耗量的差為0.21mL，蒸發(fā)殘留物為0.05mg。
<參考例2>
除使用比較例1-1中使用的聚合物外，與參考例1同樣地得到涂布量為71mg/m2的過濾器。實施相同的溶出物試驗的結(jié)果，高錳酸鉀的還原性，以消耗量的差為0.36mL，蒸發(fā)殘留物為0.20mg。
通過參考例1、2的比較，從本發(fā)明中使用的過濾器的溶出量少，可以理解安全性更優(yōu)異。如果使用本發(fā)明中的血液處理用過濾器，從紅血球制劑或者全血，可以在很低地控制血漿和紅血球損失的同時，有效地選擇性地除去成為輸血后各種副作用原因的白血球和血小板。本發(fā)明中的血液處理用過濾器，可以在醫(yī)藥用途、醫(yī)療用途和一般工業(yè)用途的血液制劑的制備中極為有利地使用。
權(quán)利要求
1.過濾器，是為了從紅血球制劑或全血制劑中除去白血球和血小板的過濾器，其特征在于包含由聚合物被覆的過濾器基質(zhì)，該聚合物在該過濾器基質(zhì)全表面積的每單位面積中含有0.5～10mg/m2，該聚合物的凝膠滲透色譜圖中，具有峰值分子量1/4以下分子量的低分子量成分的含量為20％以下的分子量分布。
2.權(quán)利要求1記載的過濾器，其特征在于相對于過濾器基質(zhì)的全表面的聚合物被覆率不足70％。
3.權(quán)利要求1或2記載的過濾器，其特征在于聚合物具有非離子性親水基和堿性含氮功能基。
4.權(quán)利要求1～3記載的過濾器，其特在于聚合物的重量平均分子量為300000～3000000。
5.權(quán)利要求1～4中任意一項記載的過濾器，其特在于過濾器基質(zhì)是由熱可塑性聚合物形成的。
6.權(quán)利要求1～5中任意一項記載的過濾器，其特在于過濾器基質(zhì)是無紡布。
7.權(quán)利要求1～6中任意一項記載的過濾器的制備方法，其特在于將由含有未反應的單體和低聚物的聚合物和1種以上的溶劑形成的聚合物溶液通過熱誘導相分離法和/或非溶劑誘導相分離法液-液相分離為富聚合物層溶液和貧聚合物層溶液后，將分別回收的富聚合物相溶液用溶劑稀釋并被覆到過濾器基質(zhì)上。
全文摘要
本發(fā)明涉及為了從紅血球制劑或全血制劑中除去白血球和血小板的過濾器，其特征在于含有由聚合物被覆的過濾器基質(zhì)，該聚合物在該過濾器基質(zhì)全表面積的每單位面積中含有0.5～10mg/m
文檔編號B01J20/26GK1489485SQ02804286
公開日2004年4月14日 申請日期2002年1月29日 優(yōu)先權(quán)日2001年1月29日
發(fā)明者大石輝彥, 三浦司和, 和 申請人:旭醫(yī)學株式會社