專(zhuān)利名稱(chēng)：通過(guò)反相制備色譜法分離和純化至少一種麻醉生物堿的方法和系統(tǒng)的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及工業(yè)分離和純化至少一種麻醉生物堿(narcotic alkaloid)的方法和系統(tǒng)，尤其是涉及通過(guò)反相制備色譜法分離和純化至少一種麻醉生物堿的方法和系統(tǒng)。
背景技術(shù)：
之前，嗎啡、可待因、東罌粟堿(oripavine)、蒂巴因(thebaine)、罌粟堿和那可汀(narcotine，noscapine)等麻醉生物堿是通過(guò)溶液萃取法分離出。分離包括純化和脫色，然后分離的麻醉生物堿通過(guò)碳吸附和沉淀。遺憾的是，除了去掉顏色和其它不需要的物質(zhì)之外，碳會(huì)不可逆地吸附感興趣的生物堿。這導(dǎo)致了收率損失，而且收率損失還存在于生物堿分離物的上清液中。乙醇等是常規(guī)用于改善沉淀純度的溶劑，然而這些額外的溶劑常常導(dǎo)致還沒(méi)有回收完全的上清液中存在收率損失。在某些實(shí)例中，為了達(dá)到所需的純度需要進(jìn)行多次沉淀。這極大地提高了程序的復(fù)雜性，因?yàn)樯锨逡喉毥?jīng)循環(huán)回收。這些附加的沉淀還需要在過(guò)程中使用更大量的未加工的麻醉生物堿和更長(zhǎng)的循環(huán)時(shí)間。而且，除了有時(shí)需要加熱和冷卻的時(shí)間外，沉淀過(guò)程變得冗長(zhǎng)。另外根據(jù)最終生產(chǎn)的麻醉生物堿的粒徑不同，某些沉淀的過(guò)濾時(shí)間還需延長(zhǎng)。
目前通過(guò)溶劑萃取、吸附和沉淀來(lái)純化麻醉生物堿的方法存在的其它缺點(diǎn)包括重復(fù)的純粹人工的處理操作來(lái)回收麻醉生物堿。這些操作導(dǎo)致對(duì)生物堿更多的商業(yè)開(kāi)發(fā)需要輔助依靠工程控制和個(gè)別保護(hù)性裝置。這種生產(chǎn)是單調(diào)乏味的。
雖然已經(jīng)通過(guò)改進(jìn)沉淀過(guò)程來(lái)改善溶劑提取和使生物堿沉淀，但是由于分離過(guò)程需要顯著不同的溶解性故上述方法仍然存在限制。沉淀后提高純度經(jīng)常會(huì)導(dǎo)致上清液中產(chǎn)量的降低。
對(duì)溶劑萃取法進(jìn)行了改進(jìn)的一個(gè)特例可參見(jiàn)2000年4月25日公開(kāi)的US6054584A，該專(zhuān)利文獻(xiàn)中公開(kāi)了一種從溶于堿性乙醇溶液中的鴉片中提取嗎啡的方法。之后對(duì)該堿性乙醇溶液進(jìn)行過(guò)濾，濾出液中的乙醇被除去留下濾渣，然后用pH值至少為11的堿性水溶液萃取濾渣。可以將堿性水溶液進(jìn)行過(guò)濾移走水溶萃取步驟后殘留的任何固體物質(zhì)，接著加入足量的鹽進(jìn)行攪拌避免生成乳狀液。堿性水溶液或?yàn)V出液用苯或甲苯進(jìn)行萃取后，將堿性水溶濾出液的pH值調(diào)至8.5至9.5之間，從而使嗎啡沉淀出用于回收。
除了利用碳吸附外還有其它多種吸附方法，其中一種是通過(guò)離子交換進(jìn)行吸附。雖然該方法可用于可待因和嗎啡，但它的局限性是需要低的進(jìn)料液濃度，因?yàn)槠渲行枰褂靡鸪恋碜饔玫母遬H緩沖液。任何沉淀步驟均可能潛在影響整個(gè)純化過(guò)程。該方法的另一個(gè)不利之處是需要顯著量的鹽類(lèi)，這樣在透析或反相滲透等其它步驟中需要進(jìn)行去離子處理。
另一種吸附方法是經(jīng)由極性相互作用或正相吸附。雖然該方法成功了，但是它需要廣泛使用有機(jī)溶劑，而且，雖然生物堿可以相互分離，但是需要進(jìn)一步的蒸發(fā)。
另一種吸附方法是基于分子的大小利用膜將生物堿與其它組分分離。該純化方法局限于移走的組分不是較大的就是較小的，故由于膜本身的缺陷使得該方法存在收率損失。
任何關(guān)于麻醉生物堿的色譜分析法并沒(méi)有教導(dǎo)本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員使用制備色譜法。和制備色譜法不同，色譜分析法通常需要把通過(guò)紫外吸收測(cè)定的每個(gè)峰完全分開(kāi)。這可以通過(guò)將極少量的料液加到柱子上并使用小的粒徑(通常小于5μm(196.85微英寸))的固定相獲得。小的粒徑使得系統(tǒng)產(chǎn)生比在制備色譜法中高許多的壓力。這種較高的壓力要求使用巨大堅(jiān)固和昂貴的色譜裝置，這不利于該色譜分析法的商業(yè)發(fā)展?？紤]到每次運(yùn)行只能上極少量的料液，這種裝置還必須非常大。在制備色譜法中，目的是回收所需純度的所需料液組分，回收的所需的組分可以是不純的，只要不純程度在特定的限制之內(nèi)。為了達(dá)到分離的目的，固定相的粒徑需要足夠小，但通常大于10微米(393.70微英寸)。這制約了壓力的下降。而且在制備色譜法中，料液的最大添加量是受獲得所需產(chǎn)品質(zhì)量的限制的，這使得產(chǎn)品可以最大濃度脫離柱子，從而可以減小下游裝備尤其是任一蒸發(fā)或濃縮單元的尺寸。
任何關(guān)于麻醉生物堿的色譜分析法并沒(méi)有教導(dǎo)本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員使用制備色譜法。和制備色譜法不同，由于色譜分析法通常需要把通過(guò)紫外吸收測(cè)定的每個(gè)峰完全分開(kāi)，否則不同的麻醉生物堿從層析柱上洗脫時(shí)很難對(duì)之進(jìn)行確定。而且，與制備色譜法相比，色譜分析法通常能控制洗脫的純度和每種具有獨(dú)立峰的產(chǎn)物。同樣地，使用色譜分析裝置以及小粒徑的昂貴的固定相介質(zhì)的上樣比例產(chǎn)生了比制備色譜法高許多的壓力。這種較高的壓力要求使用巨大堅(jiān)固的和昂貴的色譜裝置，這不利于該色譜分析法的商業(yè)發(fā)展。本發(fā)明的目的是克服上述存在的一個(gè)或多個(gè)問(wèn)題，這些缺陷和缺點(diǎn)包括但不局限于麻醉生物堿的收率損失，冗長(zhǎng)純粹的人工處理操作如上樣和非上樣的離心或過(guò)濾，操作者需要依賴(lài)保護(hù)性轉(zhuǎn)置，為了達(dá)到必需的純度要求而要進(jìn)行大量的操作步驟和潛在的多次沉淀。
發(fā)明綜述本發(fā)明的一個(gè)方面涉及使用公開(kāi)的制備色譜法分離至少一種麻醉生物堿的方法，該方法包括將固定相介質(zhì)加載到色譜柱上，添加粗的(crude)麻醉生物堿至色譜柱上，在色譜柱上應(yīng)用至少一種流動(dòng)相，和從色譜柱上回收至少一種麻醉生物堿洗脫液。
本發(fā)明的另一個(gè)方面涉及使用公開(kāi)的制備色譜法分離至少一種麻醉生物堿的方法，該方法包括在具有固定相介質(zhì)的色譜柱上添加粗的麻醉生物堿，接著應(yīng)用一系列的流動(dòng)相，如三種，至色譜柱上。第一流動(dòng)相是pH值約為2-5的酸溶液，從而可以從色譜柱上順序回收包括嗎啡、可待因和東罌粟堿這三種麻醉生物堿洗脫液。用于色譜柱的第二流動(dòng)相是一種pH值約為2-5的第一溶劑，通過(guò)它可以從色譜柱上回收蒂巴因洗脫液。加到色譜柱上的第三流動(dòng)相是一種pH值約為2-5的第二溶劑，通過(guò)它可以從色譜柱上回收那可汀，罌粟堿洗脫液。
本發(fā)明的另一個(gè)方面涉及使用公開(kāi)的制備色譜法分離至少一種麻醉生物堿的系統(tǒng)，該系統(tǒng)包括具有入口和出口的制備色譜柱，為了提高生產(chǎn)能力該色譜柱的直徑至少為5微米(1.97英寸)。該系統(tǒng)還包括具有上下兩面的平板的活塞以及連接平板上面的桿。在色譜柱中包括位于平板上表面以上的流體室和位于平板下表面下的介質(zhì)室。平板隔離了流體室和介質(zhì)室。通過(guò)該裝置，在流體室中加入液體后會(huì)產(chǎn)生液壓，從而使得活塞往下運(yùn)動(dòng)并壓縮介質(zhì)室中的固定相介質(zhì)。在色譜柱入口流進(jìn)粗的麻醉生物堿溶液后也是在該入口加入至少一種流動(dòng)相，隨后至少一種麻醉生物堿從色譜柱的出口洗脫。
本發(fā)明的另一方面涉及使用公開(kāi)的制備色譜法分離至少一種麻醉生物堿的系統(tǒng)。該系統(tǒng)包括具有入口和出口的制備色譜柱，該色譜柱的直徑至少為5微米(1.97英寸)。該系統(tǒng)還包括具有上下兩面的平板的活塞以及連接平板上表面的桿。在色譜柱中包括位于平板上面以上的流體室和位于平板下面以下的介質(zhì)室。通過(guò)該裝置，在流體室中加入液體后會(huì)產(chǎn)生液壓，從而使活塞往下運(yùn)動(dòng)并壓縮介質(zhì)室中的固定相介質(zhì)。在色譜柱入口收到了至少一種流動(dòng)相后，同樣經(jīng)由該入口收到粗的麻醉生物堿溶液，其中至少一種麻醉生物堿隨后從色譜柱的出口洗脫。系統(tǒng)中至少有一個(gè)能使固定相介質(zhì)進(jìn)入色譜柱入口并在之后壓縮固定相介質(zhì)時(shí)移走液體的閥裝置，其中至少有一個(gè)在壓縮固定相介質(zhì)后使粗的麻醉生物堿溶液流入色譜柱入口后再加入至少一種流動(dòng)相的閥裝置。之后至少一種閥裝置可以使至少一種麻醉生物堿從色譜柱的出口洗脫。
以上只是對(duì)本發(fā)明涉及的一些方面進(jìn)行了說(shuō)明，由此并不能認(rèn)為已經(jīng)列舉包括了與本發(fā)明相關(guān)的所有方面。通過(guò)以下的公開(kāi)和相關(guān)附圖，上述的幾個(gè)方面和其它方面對(duì)于本領(lǐng)域的技術(shù)人員來(lái)說(shuō)是顯而易見(jiàn)。


為了更好地理解本發(fā)明，可以參考隨后的附圖，其中圖1為從粗的生物堿溶液中回收麻醉劑洗脫液的系統(tǒng)示意圖，該系統(tǒng)包括制備色譜柱、液壓施加裝置、液體施加裝置、液體凈化裝置(fluid purgemechanism)和洗脫收集裝置。
圖2為圖1所示的制備色譜柱的透視圖，該制備色譜柱用于從本發(fā)明相關(guān)的粗的生物堿溶液中回收麻醉劑洗脫液。
圖3為圖1所示制備色譜柱和閥裝置的示意圖，其中制備色譜柱剛剛完成固定相介質(zhì)的轉(zhuǎn)移并釋放出經(jīng)液體凈化裝置從入口進(jìn)入色譜柱的液體。
圖4為圖3所示制備色譜柱和閥裝置的示意圖，該圖顯示了壓縮固體介質(zhì)和經(jīng)液體凈化裝置從制備色譜柱出口釋放液體的過(guò)程。
圖5為圖3和圖4所示的制備色譜法的示意圖，該圖顯示了從制備色譜柱的入口加入溶劑和從制備色譜柱的出口洗脫麻醉生物堿的過(guò)程。
發(fā)明詳述參照?qǐng)D1，用于從粗的生物堿溶液中回收麻醉劑洗脫液的本發(fā)明的系統(tǒng)示意圖通常由數(shù)字1表示。高性能制備液相色譜柱(HPLC)由數(shù)字10表示，其具有一個(gè)頂部8和底部9。在示范的優(yōu)選系統(tǒng)中的制備色譜柱10的直徑至少約為5厘米(1.97英寸)。制備色譜柱10的長(zhǎng)度對(duì)于本方法不是關(guān)鍵的，優(yōu)選地長(zhǎng)度范圍為約5厘米(1.97英寸)至100厘米(39.4英寸)，更優(yōu)選的長(zhǎng)度范圍為約20厘米(7.87英寸)30厘米(11.81英寸)。能夠提供建立符合該條件的制備色譜柱的商家很多，包括Amicon公司，其辦公點(diǎn)位于72 Cherry Hill Drive，Beverly，Massachusetts01915。Amicon公司是PROCHROM色譜柱的制造商。其它制造商包括TechniKrom股份有限公司，其辦公點(diǎn)位于1801 Maple Avenue，Evanston，Illinois 60201。本發(fā)明可應(yīng)用于各種高性能液相色譜柱但不局限于本專(zhuān)利申請(qǐng)?jiān)敿?xì)描述的特定技術(shù)方案。
在制備色譜柱10中有一個(gè)活塞12可以上下移動(dòng)?；钊?2將制備色譜柱10分為兩個(gè)動(dòng)態(tài)室，位于活塞12下面以下的室為介質(zhì)室11，上面以上為流體室15?；钊?2的外周就象密封條一樣貼在制備色譜柱10的側(cè)壁上。制備色譜柱中的活塞12的運(yùn)動(dòng)源于液壓供給裝置20提供的流體如食用油等壓力的施加。
經(jīng)由與液壓開(kāi)關(guān)24相連的第一液壓導(dǎo)管16提供液壓，該液壓開(kāi)關(guān)24經(jīng)液壓導(dǎo)管22與流體室15通過(guò)流體相連。第一液壓導(dǎo)管16的另一端與壓力泵26連接。壓力泵26經(jīng)第二液壓導(dǎo)管18從液體貯存池28獲得液體。液壓開(kāi)關(guān)24使得液體貯存池28中的液體在壓力泵26產(chǎn)生的壓力下經(jīng)液壓導(dǎo)管22進(jìn)入流體室15，從而促使活塞12往下運(yùn)動(dòng)。當(dāng)液壓閥24轉(zhuǎn)向另一個(gè)方向時(shí)，液體經(jīng)第三液壓導(dǎo)管32回到液體貯存池28中。
液體供給裝置31可以提供a)至少一種介質(zhì)沖洗溶液；b)粗的生物堿溶液；和c)用于制備色譜柱10的至少一種流動(dòng)相。在優(yōu)選方案中至少有一種介質(zhì)沖洗溶液和三種流動(dòng)相。然而，獨(dú)立的液體供應(yīng)轉(zhuǎn)置31適用于提供制備色譜柱10所需的各種單獨(dú)的溶液或流動(dòng)相。液體供應(yīng)轉(zhuǎn)置31包括一個(gè)經(jīng)由第一液體導(dǎo)管46提供給制備色譜柱10液體的液體槽44，其中液體導(dǎo)管46與控制液體槽44中液體流動(dòng)的液體閥48連接。液體閥48的另一端與第二液體導(dǎo)管47連接，第二液體導(dǎo)管47與液體泵49相通。液體泵49與第三液體導(dǎo)管50相連，液體可以流經(jīng)第三液體導(dǎo)管50至制備色譜柱10的入口52。液體泵49的非限制性的說(shuō)明性的例子如VARIANPrepstarTM泵。VARIAN是Varian公司聯(lián)合注冊(cè)的商標(biāo)，該公司位于3120 Hansen Way，Palo Alto，California 94304-1030。液體從流體入口52經(jīng)一內(nèi)部導(dǎo)管54直接流入活塞下并進(jìn)入制備色譜柱10的介質(zhì)室11中。
該系統(tǒng)中還有一個(gè)洗脫收集裝置43，該裝置包括一個(gè)洗脫液槽56用于通過(guò)與洗脫檢測(cè)設(shè)備82相通的第6液體導(dǎo)管80收集從制備色譜柱10上洗脫的麻醉生物堿，當(dāng)這些麻醉生物堿從制備色譜柱10上洗脫時(shí)，可用于檢測(cè)特定的麻醉生物堿的洗脫檢測(cè)設(shè)備82如但不局限于VARIANPrepstarTM紫外分光光度計(jì)。
洗脫檢測(cè)設(shè)備82經(jīng)由第五液體導(dǎo)管62與第二液體閥60相連，該閥門(mén)60控制液體如洗脫的麻醉生物堿流入洗脫液槽56，第二液體閥60的另一端與第四液體導(dǎo)管58相連，后者與制備色譜柱10的出口相通。
流體凈化裝置39包括流體凈化導(dǎo)管66，其可選地允許流體如氣體或液體脫離制備色譜柱10。流體凈化導(dǎo)管66經(jīng)由第一流體導(dǎo)管68與制備色譜柱10的入口52相通，流體導(dǎo)管68與第一流體控制閥70相連，該控制閥70控制流體如氣體等從介質(zhì)室11經(jīng)制備色譜柱的10的上部8釋放。流體控制閥70的另一端與第二流體導(dǎo)管72相連，后者與液體凈化裝置66連接，當(dāng)?shù)谝涣黧w控制閥70開(kāi)啟后，它可用于將流體從介質(zhì)室11中放出。而且，流體凈化裝置66可選地允許流體經(jīng)制備色譜柱10的流體出口64通過(guò)與第二流體控制閥76相連的第三流體導(dǎo)管74從介質(zhì)室11脫離，其中控制閥76控制流體從介質(zhì)室11經(jīng)制備色譜柱10的底部9釋放。第二流體控制閥76的另一端與第四流體導(dǎo)管78相連，后者與流體凈化裝置66相通，這樣當(dāng)?shù)诙黧w控制閥76打開(kāi)時(shí)，流體從介質(zhì)室11中放出。
如圖2所示，制備色譜柱10由三根邊支撐36與制備色譜柱10的上部連接，制備色譜柱10的下部9經(jīng)三根側(cè)支撐38附著于三根邊支撐36上。三根邊支撐36可置于機(jī)輪40上。優(yōu)選在制備色譜柱10的上方有一個(gè)壓力量具42用于指示制備色譜柱10中位于活塞上的流體室15的液壓值。
如圖3所示，過(guò)程的第一步是經(jīng)一個(gè)轉(zhuǎn)換漏斗(transferr funnel)34將固定相介質(zhì)13提供給色譜柱10。固定相介質(zhì)13優(yōu)選但不是必須的是可以懸浮于溶液中形成漿液，其中溶液優(yōu)選沒(méi)有浮力的，這樣固定相介質(zhì)13就不會(huì)浮在上面。有關(guān)此類(lèi)型溶液的說(shuō)明性的但非局限性的例子可以包括乙腈，其它可以使用的溶液包括水、甲醇、乙醇和異丙醇。色譜柱10中優(yōu)選具有至少0.255千克(8.995盎司)的固定相介質(zhì)13。
固定相介質(zhì)13優(yōu)選疏水物質(zhì)，包括硅石、鈦氧化物、鋯氧化物和聚合物顆粒。顆?？梢允嵌嗫谆驘o(wú)孔的，粒徑優(yōu)選從約1微米(39.4微英寸)至約200微米(7874微英寸)，更優(yōu)選從約20微米(787.4微英寸)至約50微米(1968.5微英寸)。多孔顆粒優(yōu)選包含直徑約30埃(0.12微英寸)至約1000埃(3.94微英寸)的孔，其表面積優(yōu)選約100平方米/克(3,407平方碼/盎司)至約1000平方米/克(33,488平方碼/盎司)。固定相介質(zhì)13可優(yōu)選包括苯基基團(tuán)、氰基基團(tuán)或具有2至30個(gè)碳原子的碳鏈(線性或分枝的)。反相制備色譜法是基于無(wú)極性固定相和極性流動(dòng)相的親水或親脂性。連接苯基的氰基或碳鏈的疏水性越大，制備色譜柱10保留疏水組分的趨勢(shì)越大。這樣，隨著最大極性組分的首先洗脫，親水組分比疏水組分洗脫得更快些。
一個(gè)任選的步驟包括流體去除，在該情形下以氣體為例，氣體從介質(zhì)室11經(jīng)制備色譜柱10的上部8通過(guò)內(nèi)部導(dǎo)管54并經(jīng)由第一流體導(dǎo)管68移出流體出口52。然后流體通過(guò)開(kāi)啟的第一流體控制閥70并經(jīng)由第二流體導(dǎo)管72移出流體凈化裝置66，該第二流體導(dǎo)管連接在第一流體控制閥70和流體凈化裝置66之間。然而可以免去該過(guò)程步驟，因?yàn)楣潭ㄏ嘟橘|(zhì)13必須盡可能快地被壓縮，如在為了避免空隙的產(chǎn)生而使固定相介質(zhì)13從懸浮液中澄清出來(lái)前的幾秒鐘內(nèi)被壓縮。
該過(guò)程的第二步是壓縮固定相介質(zhì)13，優(yōu)選但不是必須的是產(chǎn)生壓緊的基質(zhì)，這可以通過(guò)以下方式完成從如圖1中所示的疏水性貯存槽28中抽出液壓的流體，再經(jīng)由第二液壓導(dǎo)管18流入液壓泵26中。液壓的流體從液壓泵26中抽出并經(jīng)由第一液壓導(dǎo)管16流過(guò)液壓閥24，然后開(kāi)啟液壓閥24，從而使液壓的流體在壓力作用下經(jīng)液壓入口導(dǎo)管22流入制備色譜柱10的流體室15中。液壓活塞12上的壓力促使其擠壓固定相介質(zhì)13，如圖4所示。首先，液壓活塞12處于可能的最高位置，這樣介質(zhì)室11中處于最大的體積狀態(tài)。施用的壓力能發(fā)生顯著變化，優(yōu)選大于流動(dòng)相穿過(guò)壓緊的固定相介質(zhì)13過(guò)程中產(chǎn)生的回壓(backpressure)。流體可以是氣體、沒(méi)有浮力的溶劑或兩者結(jié)合使用，然后將流體從介質(zhì)室11經(jīng)制備色譜柱10的底部9從流體出口64經(jīng)第三導(dǎo)管74放出。接著流體流經(jīng)開(kāi)啟的第二流控閥76并經(jīng)過(guò)第四流體導(dǎo)管78通過(guò)流體凈化裝置66，該流體導(dǎo)管78連接在第二流控閥76和流體凈化裝置66之間，這形成了在介質(zhì)的顆粒間和顆?？變?nèi)含有溶劑的被壓實(shí)的固定相介質(zhì)13。
如圖5所示，該過(guò)程的第三步是用酸溶液將溶液從制備色譜柱10的介質(zhì)室11中沖洗出。酸溶液通常包括pH值約為2至5的任何弱酸。非限制性的實(shí)例包括但不局限于醋酸、甲酸、草酸、琥珀酸、乳酸和酒石酸。
這種介質(zhì)沖洗溶液如酸溶液可以通過(guò)前述的液體供給裝置31由液體槽44提供。介質(zhì)沖洗溶液從液體槽44經(jīng)由第一液體導(dǎo)管46通過(guò)開(kāi)啟的第一液體閥48和隨后經(jīng)由第二液體導(dǎo)管47進(jìn)入液體泵49。接著液體泵49中的介質(zhì)沖洗溶液流經(jīng)第三液體導(dǎo)管50進(jìn)入制備色譜柱10的流體入口52，然后經(jīng)內(nèi)部導(dǎo)管54進(jìn)入介質(zhì)室11。
該方法的第四步是從粗的來(lái)源物制備生物堿溶液來(lái)生產(chǎn)鹽溶液。該物質(zhì)被混入含有任一種pH約為2-5的弱酸的水溶液中。非限制性實(shí)例包括但不局限于醋酸、甲酸、草酸、琥珀酸、乳酸和酒石酸。優(yōu)選弱的有機(jī)酸，例如其中可以選擇pH值約為2-5、更優(yōu)選約為3-4的醋酸。硫酸、鹽酸和磷酸等強(qiáng)酸可能會(huì)導(dǎo)致粗的生物堿溶液中的蒂巴因的降解。隨著介質(zhì)沖洗溶液的加入，這種粗的生物堿溶液從前述的液體供給裝置31經(jīng)液體槽44加到制備色譜柱10的介質(zhì)室11中。粗的生物堿溶液從液體槽44經(jīng)由第一液體導(dǎo)管46流經(jīng)開(kāi)啟的第一液體閥48，然后經(jīng)第二液體導(dǎo)管47流過(guò)液體泵49。經(jīng)過(guò)液體泵49的粗的生物堿溶液接著流經(jīng)第三液體導(dǎo)管50流入制備色譜柱10的流體入口52中，然后其經(jīng)內(nèi)部導(dǎo)管54進(jìn)入介質(zhì)室11。粗的生物堿溶液中的所需麻醉生物堿的量可隨著面積(area)百分?jǐn)?shù)(面積％)進(jìn)行變化，面積百分?jǐn)?shù)被定義為所需麻醉生物堿的面積除以粗的生物堿溶液中所有檢測(cè)組分的總面積得到的值。對(duì)具有最小直徑為5厘米(1.97英寸)的制備色譜柱10來(lái)說(shuō)，優(yōu)選使用至少0.255克(0.009盎司)的粗的生物堿溶液，更優(yōu)選至少8.50克(0.300盎司)的粗的麻醉生物堿溶液。
最感興趣的一個(gè)特定的但非局限性的例子是使用粗的印度鴉片來(lái)源的一種生物堿溶液，這是因?yàn)橛《却种莆锸窃衔镔|(zhì)中最少經(jīng)加工的。優(yōu)選添加試劑來(lái)提高蒂巴因的純度。這可在粗的印度生物堿溶液溶解和過(guò)濾后進(jìn)行。試劑必須是可與酸性雜質(zhì)形成離子對(duì)的，其中這些酸性雜質(zhì)會(huì)與蒂巴因結(jié)合抑制回收。當(dāng)?shù)侔鸵驈乃嵝噪s質(zhì)中游離出來(lái)時(shí)，蒂巴因的純度在顯著脫色的同時(shí)翻了一倍。使用的試劑不能影響洗脫、純度或粗的印度料液中其它所需生物堿的回收。優(yōu)選的試劑是三乙胺，然而其它幾種離子交換劑也可以滿足需要，它們?nèi)绲痪窒抻诎丙}基硫酸氫鹽、十二烷基硫酸鈉、庚烷磺酸鈉和硫酸銨，料液中試劑的濃度范圍為約2.0-2.5體積百分?jǐn)?shù)。如果料液中的試劑小于1.8體積百分?jǐn)?shù)就不能獲得所需的蒂巴因純度。而且，料液的pH值在加入了較多的試劑如三乙胺時(shí)可適當(dāng)提高。由于料液所需的pH值約為3.0-3.5，故使用的試劑濃度不能將料液的pH值提高至該范圍之上或之下。例如，三乙胺的濃度優(yōu)選為0.5-5.0體積％之內(nèi)，并且優(yōu)選不能高于2.5體積％太多。
上樣比例是固定相介質(zhì)13的量除以粗的生物堿溶液量得到的值，其范圍約為1∶1-1∶1000，優(yōu)選1∶3-1∶40，更優(yōu)選1∶10-1∶30，其中存在一個(gè)色譜分析法的標(biāo)記對(duì)照，而壓實(shí)的固定相介質(zhì)13對(duì)粗的生物堿溶液的上樣比例大于1∶50,000。
過(guò)程的第五步是添加各種流動(dòng)相，如給制備色譜柱10添加三種流動(dòng)相以從制備色譜柱10的流體出口64獲得洗脫液。雖然三種流動(dòng)相優(yōu)選用于回收六種麻醉生物堿洗脫液，但本發(fā)明也可以使用一種流動(dòng)相并僅回收一種麻醉生物堿洗脫液或是上述之間的各種組合。洗脫一種麻醉生物堿所需的流動(dòng)相的體積除以固定相介質(zhì)13所保留的流動(dòng)相的體積得到的值被定義為洗脫體積的無(wú)量綱值，它可應(yīng)用于任何尺寸的制備色譜柱10。
參照?qǐng)D5，可以從前述的液體供給裝置31經(jīng)液體槽44往介質(zhì)室11中加入流動(dòng)相。同介質(zhì)沖洗溶液和粗的生物堿溶液一樣，流動(dòng)相后來(lái)也被加進(jìn)制備色譜柱10的介質(zhì)室11中。而且，唯一的液體供給裝置31或是一種分離裝置可用于每一流動(dòng)相。流動(dòng)相從液體槽44經(jīng)由第一液體導(dǎo)管46穿過(guò)開(kāi)啟的第一液體閥48并經(jīng)第二液體導(dǎo)管47進(jìn)入液體泵49中。接著液體泵49中的流動(dòng)相通過(guò)第三液體導(dǎo)管50進(jìn)入制備色譜柱的流體入口52，接著經(jīng)內(nèi)部導(dǎo)管進(jìn)入介質(zhì)室11中。制備色譜主10的介質(zhì)室11含有固定相介質(zhì)13和粗的生物堿溶液，該固定相介質(zhì)13優(yōu)選但不是必須地可被擠壓。生物堿從流體出口64洗脫并進(jìn)入第四液體導(dǎo)管58，接著到達(dá)第二液體閥60。打開(kāi)第二液體閥60，使洗脫的生物堿可以經(jīng)洗脫檢測(cè)裝置82如紫外線檢測(cè)器如分光光度計(jì)等流進(jìn)第五液體導(dǎo)管62，然后經(jīng)第六液體導(dǎo)管80進(jìn)入洗脫液槽56中。在一個(gè)運(yùn)行過(guò)程中優(yōu)選至少一升(0.264加侖)的洗脫液經(jīng)過(guò)制備色譜柱10。由于在該過(guò)程中僅丟失了極少量的麻醉生物堿，例如對(duì)于最小直徑為5厘米(1.97英寸)的制備色譜柱10來(lái)說(shuō)，至少需要0.255克(0.009盎司)洗脫的麻醉生物堿，優(yōu)選至少6.38克(0.225盎司)的洗脫的麻醉生物堿，更優(yōu)選至少8.50克(0.300盎司)洗脫的麻醉生物堿。
使用的第一流動(dòng)相是一種酸溶液。酸溶液非限制性的例子包括但不局限于醋酸、甲酸、草酸、琥珀酸、乳酸和酒石酸，其pH值優(yōu)選范圍為約2-5、更優(yōu)選約3-4。一種弱的有機(jī)酸如醋酸是較優(yōu)選的，因?yàn)槠渌^強(qiáng)的酸會(huì)降解存在生物堿溶液中的蒂巴因。
從制備色譜柱10上洗脫的第一麻醉生物堿包括嗎啡。一旦嗎啡從制備色譜柱10上移走，用苛性堿溶液調(diào)節(jié)嗎啡洗脫液的pH值至約8.7-9.1來(lái)沉淀嗎啡。然后將沉淀的嗎啡從苛性堿溶液中分離出來(lái)并進(jìn)行洗滌。可以通過(guò)任何適合的方法如使用離心分離機(jī)或過(guò)濾器(未給出)來(lái)分離沉淀。該純化過(guò)程獲得了相對(duì)高的產(chǎn)量。如本專(zhuān)利申請(qǐng)通篇所定義的，麻醉生物堿的產(chǎn)量是移走的麻醉生物堿的量除以添加到制備色譜柱10上的粗的生物堿溶液的量得出的值?？列詨A溶液可以?xún)?yōu)選包括氫氧化鈉，然而還可以使用其它大量的苛性堿溶液，例如但不局限于氫氧化鉀、氫氧化銨、和堿金屬的碳酸鹽。在優(yōu)選的技術(shù)方案中，氫氧化鈉以約5-50重量％的范圍存在，優(yōu)選約25重量％。
由于來(lái)自鴉片的嗎啡可以轉(zhuǎn)化成可待因，來(lái)自土耳其或澳大利亞的嗎啡可用于生產(chǎn)嗎啡制品。這里僅有一種可待因色譜法步驟用于粗的和合成的可待因混合物。該反應(yīng)步驟通過(guò)嗎啡脫水開(kāi)始，接著加入一種有機(jī)溶劑和通過(guò)加熱蒸發(fā)掉水分完成。有機(jī)溶劑優(yōu)選甲苯，然而其它有機(jī)溶劑如乙酸乙酯、氯仿、異丁醇和己烷也適用。然后準(zhǔn)備一種甲基化溶液，甲基化溶液非限制性的說(shuō)明包括溶于乙醇的含有三甲苯基氯化銨的混合乙醇鈉?？纱蚍肿訉?shí)際上是具有一個(gè)額外甲基基團(tuán)的嗎啡。隨后將甲基化溶液逐漸地加入到有機(jī)溶劑如甲苯、嗎啡的漿液中。當(dāng)添加完成后，加入水在理想的pH 11.5時(shí)結(jié)束反應(yīng)。pH值范圍優(yōu)選為約8-14，更優(yōu)選為約11-12。這使得溶液形成了兩層底部含有未反應(yīng)嗎啡的水溶層以及上層含有可待因的有機(jī)溶劑如甲苯層。富含可待因的甲苯接著被萃取進(jìn)pH5.5的水溶液中。將水溶的可待因溶液進(jìn)一步酸化至pH約為3.0-3.5，然后將之加到色譜柱10上。未反應(yīng)的嗎啡按前述步驟進(jìn)行沉淀。
在舉例性說(shuō)明中包括了大量的步驟，而并不局限于通過(guò)反應(yīng)將嗎啡轉(zhuǎn)化為可待因。舉例說(shuō)明但非限制性的數(shù)量包括1千克(35.27盎司)。第一步是轉(zhuǎn)移嗎啡和可待因固體到轉(zhuǎn)換器皿(未顯示出)中。第二步是加入一種有機(jī)溶劑如甲苯，溶劑的使用量范圍優(yōu)選約從5升(1.32加侖)至50升(13.2加侖)，更優(yōu)選從約9升(2.38加侖)至約11升(2.91加侖)，理想的是約10升(2.64加侖)。第三步是加熱溶液至約100攝氏度(212華氏度)至約120攝氏度(248華氏度)的范圍之內(nèi)，更優(yōu)選在約105攝氏度(221華氏度)至約115攝氏度(239華氏度)的范圍之內(nèi)，理想的是在約111攝氏度(231.8華氏度)時(shí)移走水和在約104攝氏度(219.2華氏度)時(shí)釋放出水合的水。
第四步，在移走水后，在約85攝氏度(185華氏度)至約115攝氏度(239華氏度)范圍之內(nèi)和更優(yōu)選約95攝氏度(203華氏度)至約100攝氏度(212華氏度)的范圍之內(nèi)冷卻內(nèi)容物。然而高于100攝氏度(212華氏度)的溫度會(huì)造成更大程度的蒸發(fā)。
第五步是通過(guò)往分離器中的乙醇中加入21重量％的乙醇鈉來(lái)制備甲基化溶液。加入的乙醇鈉的摩爾數(shù)等于被轉(zhuǎn)化的嗎啡的摩爾數(shù)。對(duì)于1千克(35.27盎司)的嗎啡來(lái)說(shuō)，溶液體積優(yōu)選為約0.7升(0.18492加侖)至約1.7升(0.45加侖)，更優(yōu)選從約1.1升(0.29加侖)至約1.4升(0.37加侖)，最優(yōu)選約1.23升(0.33加侖)。
第六步是在乙醇鈉中加入三甲苯基氯化銨(苯胺鹽)，其加入的摩爾數(shù)等于轉(zhuǎn)換的嗎啡的摩爾數(shù)。對(duì)于1千克(35.27盎司)的嗎啡來(lái)說(shuō)，加入的苯胺鹽的量?jī)?yōu)選為0.3千克(10.58盎司)至0.85千克(29.98盎司)，更優(yōu)選為0.5千克(17.64盎司)至0.65千克(22.93盎司)，最優(yōu)選為0.57千克(20.11盎司)。
第七步是另外加入乙醇來(lái)溶解鹽，加入的乙醇量?jī)?yōu)選為約0.6升(0.16加侖)至約4.4升(1.16加侖)，更優(yōu)選為約1.2升(0.32加侖)至約2.2升(0.58加侖)，最優(yōu)選約1.5升(0.40加侖)。
第八步是在室溫如22攝氏度(72華氏度)時(shí)攪拌溶液至少5分鐘。第九步是在往溶于甲苯等有機(jī)溶劑的嗎啡漿液中加入甲基化溶液，該過(guò)程在約30-300分鐘內(nèi)和更優(yōu)選在約50-70分鐘內(nèi)完成，更短的添加時(shí)間會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)生更多的雜質(zhì)。反應(yīng)的溫度優(yōu)選保持在約80攝氏度(176華氏度)至約120攝氏度(248華氏度)之間，更優(yōu)選在約90攝氏度(194華氏度)至約100攝氏度(212華氏度)之間。然而，更低的溫度導(dǎo)致不能獲得完全轉(zhuǎn)化的可待因，而更高的溫度將導(dǎo)致更多的雜質(zhì)形成。反應(yīng)漿液將最終形成溶液。
第十步是在加入甲基化溶液后加入額外的乙醇來(lái)沖洗盛有溶液的轉(zhuǎn)換器皿，乙醇的添加量?jī)?yōu)選為約100毫升(3.38盎司)至1500毫升(50.72盎司)，更優(yōu)選為約300毫升(10.14盎司)至400毫升(13.53盎司)，最優(yōu)選為約321毫升(10.86盎司)。需要緩慢加入乙醇沖洗液來(lái)保持反應(yīng)溫度大于90攝氏度(194華氏度)。
第十一步是在約95攝氏度(203華氏度)至約125攝氏度(257華氏度)的范圍內(nèi)加熱反應(yīng)混合物，更優(yōu)選加熱溫度處于約105攝氏度(221華氏度)至約115攝氏度(239華氏度)之間，從而使得所有的乙醇蒸發(fā)。
第十二步是移走乙醇和將混合物冷卻至約75攝氏度(167華氏度)至約95攝氏度(203華氏度)之間，和更優(yōu)選冷卻至約82攝氏度(179.6華氏度)至約88攝氏度(190.4華氏度)之間.
第十三步是加入約1.5升(0.40加侖)至約20升(5.28加侖)、更優(yōu)選3.2升(0.85加侖)至約3.8升(1.00加侖)體積的水來(lái)終止反應(yīng)。
第十四步是通過(guò)加入氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)生成的水相的pH值，使之升高至11.5之上。除了氫氧化鈉溶液，其它如氫氧化鉀溶液、氫氧化銨溶液和等堿溶液也可以使用。
第十五步是攪拌層液至少10分鐘，然后靜置至少5分鐘使之分相。下層水相含有未反應(yīng)的嗎啡，上層甲苯相含有可待因。
第十六步是從轉(zhuǎn)化器皿中排出水溶層，該層接下來(lái)會(huì)被置于嗎啡沉淀容器中(未顯示)。
第十七步是轉(zhuǎn)移有機(jī)溶劑如甲苯層至抽出器(未顯示)中并將之與水進(jìn)行混合，加入的水量為約30升(7.93加侖)至約200升(52.83加侖)，更優(yōu)選為約40升(10.57加侖)至約60升(15.85加侖)。
第十八步是用硫酸、醋酸、鹽酸和甲酸等酸調(diào)節(jié)水溶層的pH值至5.2-5.9。盡管pH小于5時(shí)無(wú)法移走不穩(wěn)定的雜質(zhì)，而pH大于6時(shí)將無(wú)法將可待因完全轉(zhuǎn)移進(jìn)水溶層，但pH值可以為3.0-7.0。
第十九步是混合層液至少5分鐘，攪動(dòng)之后靜置分離至少5分鐘。
然后將水溶層注入制備色譜柱10，接著在水溶層中加入更多的酸調(diào)節(jié)所需的pH值，pH值優(yōu)選范圍為1.0-5.5和更優(yōu)選3.0-3.5。酸流入制備色譜柱10后按前述方法進(jìn)行處理。甲苯層或者作為無(wú)用的廢棄物或者是加到蒸餾柱上用于回收。
使用相同的第一流動(dòng)相，該流動(dòng)相是上述的酸溶液而且也是經(jīng)由前述的應(yīng)用裝置31供給的，從制備色譜柱10上洗脫的第二麻醉生物堿是可待因。
一旦可待因從制備色譜柱10上洗脫，就可經(jīng)一加熱應(yīng)用程序(未顯示)將可待因洗脫液進(jìn)行蒸發(fā)濃縮。
對(duì)于從非常粗的和未加工的來(lái)源得到的生物堿溶液如印度來(lái)源的生物堿溶液中分離可待因來(lái)說(shuō)，特定的但不是局限性的例子是優(yōu)選增加處理步驟。在該情形中，在印度粗的生物堿溶液中的可待因以低濃度存在并且在色譜法中被進(jìn)一步稀釋?？纱騼?yōu)選的濃度范圍為約2克/升(0.267盎司/加侖)至約30克/升(4.0盎司/加侖)，更優(yōu)選濃度范圍為約15克/升(2.0盎司/加侖)至約25克/升(3.34盎司/加侖)?？纱蛞源笥?0克/升的濃度不完全溶于水中。
從粗的生物堿溶液如印度來(lái)源中洗脫的可待因含有明顯的雜質(zhì)。優(yōu)選地，來(lái)自印度來(lái)源的可待因部分需要被蒸發(fā)以獲得足夠高的濃度用于另外的處理。由于存在幾種具有較小可溶性的雜質(zhì)，可待因的直接沉淀是無(wú)效的?？纱虻募兓瘍?yōu)選通過(guò)液-液萃取入甲苯而達(dá)到。通過(guò)兩步萃取，可待因與留在水溶層的色素和雜質(zhì)完全分離開(kāi)。雖然僅一步萃取法或步驟可待因的回收率較少，而多于兩步萃取法或步驟中回收量多不了多少，但是優(yōu)選萃取的次數(shù)或步驟是兩步。由于甲苯在水中的溶解度低和已證實(shí)的效果，故優(yōu)選有機(jī)溶劑為甲苯，然而，其它如乙酸乙酯、氯仿、異丁醇和己烷等溶劑也適用。溶劑對(duì)水溶液的比率優(yōu)選為約0.5-3.0，和更優(yōu)選在0.8-1.2之間。比率低于0.5的有機(jī)溶劑的使用會(huì)導(dǎo)致需要更多的萃取和步驟，而比率高于3.0的有機(jī)溶劑的使用會(huì)稀釋可待因并使得附加回收量變少。
優(yōu)選萃取的pH值為11.5，雖然較低的pH10也可以應(yīng)用，但pH值至少為11.5是優(yōu)選的，因?yàn)槿闋钜盒纬芍饕趐H11.5時(shí)被消除的。
在萃取中使用的堿優(yōu)選250毫克/毫升(33.4盎司/加侖)的氫氧化鈉。該堿溶液的使用量范圍從約50毫克/毫升(6.68盎司/加侖)至750毫克/毫升(100.0盎司/加侖)，更優(yōu)選使用量范圍從約150毫克/毫升(20.0盎司/加侖)至350毫克/毫升(46.7盎司/加侖)。
然而，也可使用其它的堿如但不局限于氫氧化銨或氫氧化鉀。較高的堿濃度會(huì)導(dǎo)致pH調(diào)節(jié)的減弱而容易引起過(guò)調(diào)節(jié)，而較低的堿濃度會(huì)導(dǎo)致對(duì)可待因更大的稀釋。萃取步驟的攪拌時(shí)間優(yōu)選至少一分鐘這樣較長(zhǎng)的時(shí)間以確保更好的質(zhì)量傳遞，一分鐘以下的攪拌時(shí)間會(huì)引起不完全的質(zhì)量傳遞。停留優(yōu)選至少一分鐘。根據(jù)乳狀液存在的量可能需要較長(zhǎng)的停留時(shí)間。如果存在任何一種乳狀液，就需要停留5到10分鐘促使分層。可待因現(xiàn)在處于甲苯層中。隨后將這種甲苯加到嗎啡轉(zhuǎn)換成可待因的反應(yīng)器中。
反應(yīng)完成和分層后，將可待因從甲苯反萃取進(jìn)一種水溶層中。這可通過(guò)在萃取的可待因溶液中加入一種有機(jī)酸并進(jìn)行攪拌完成。攪拌時(shí)間優(yōu)選至少一分鐘，這樣較長(zhǎng)的時(shí)間可以確保更好的質(zhì)量傳遞，一分鐘以下的攪拌時(shí)間會(huì)引起不完全的質(zhì)量傳遞。有機(jī)酸優(yōu)選硫酸，然而還可以使用其它有機(jī)酸如但不局限于醋酸、甲酸、鹽酸和磷酸。優(yōu)選的反萃取次數(shù)或步驟為一。然而額外的反萃取或步驟可能產(chǎn)生少許益處或者根本就沒(méi)有益處。有機(jī)酸對(duì)水溶液的比率優(yōu)選約為1.0-3.0之間，更優(yōu)選約為1.6-2.4之間。使用比率低于1.0的較少的有機(jī)酸會(huì)導(dǎo)致可待因稀釋及很少的附加回收率，而使用比率高于3.0的較多的有機(jī)酸時(shí)由于水溶層中可待因溶解性的限制會(huì)導(dǎo)致收率損失。用于反萃取的pH值優(yōu)選低于5.0、更優(yōu)選低于3.5。然而，如果反萃取的pH值大于3.5，由于可待因生物堿不完全地轉(zhuǎn)化成更可溶的鹽，故水溶層中可待因的回收較少。攪拌和放置時(shí)間必須同時(shí)優(yōu)選為至少一分鐘。較長(zhǎng)的攪拌時(shí)間確保了可待因的質(zhì)量傳遞。由于反萃取過(guò)程中的層分離迅速，靜止時(shí)間不必如在先前萃取步驟中那么長(zhǎng)。
在反萃取后，可待因(包括從前述的嗎啡中合成的任一種可待因)被添加到色譜柱10上，并用一種水性流動(dòng)相洗脫。接著經(jīng)由一加熱應(yīng)用程序(未顯示)進(jìn)行蒸發(fā)來(lái)濃縮可待因洗脫液。
一旦可待因被蒸發(fā)處理，用一種苛性堿溶液將可待因洗脫液的pH值調(diào)節(jié)至9以上和優(yōu)選11以上沉淀出可待因。接著將沉淀出的可待因從苛性堿溶液中分離出來(lái)并進(jìn)行洗滌。分離可經(jīng)任一種適合的方法如使用離心機(jī)或過(guò)濾器進(jìn)行(未顯示)?？列詨A溶液優(yōu)選包括氫氧化鈉，然而其它多種苛性堿溶液包括但不局限于氫氧化鉀、氫氧化銨和堿金屬碳酸鹽也可以使用。在優(yōu)選的技術(shù)方案中，氫氧化鈉存在的范圍為約5重量％至約50重量％，優(yōu)選約25重量％。
此外，使用相同的第一流動(dòng)相，該流動(dòng)相是上述的酸溶液而且也是經(jīng)由前述的應(yīng)用裝置31供給的，從制備色譜柱10上洗脫的第三麻醉生物堿是東罌粟堿。一旦東罌粟堿從制備色譜柱10上脫離，就可以經(jīng)一加熱應(yīng)用程序(未顯示)將該洗脫液進(jìn)行蒸發(fā)濃縮。東罌粟堿從制備色譜柱10上洗脫后，用苛性堿溶液調(diào)節(jié)東罌粟堿的pH值至約8-10、優(yōu)選約8.7-9.1來(lái)沉淀東罌粟堿。然后將沉淀的東罌粟堿從苛性堿溶液中分離出來(lái)并進(jìn)行洗滌。可以通過(guò)任何適合的方法如使用離心分離機(jī)或過(guò)濾器(未給出)來(lái)分離沉淀?？列詨A溶液可以?xún)?yōu)選包括氫氧化鈉，然而，其它一些苛性堿溶液如但不局限于氫氧化鉀、氫氧化銨、和堿金屬的碳酸鹽也可以使用。在優(yōu)選的技術(shù)方案中，氫氧化鈉以約5-50重量％的范圍存在，優(yōu)選約25重量％。
第二流動(dòng)相優(yōu)選含有一種溶劑，其說(shuō)明性的但非局限性的例子包括有機(jī)溶劑如乙腈和低級(jí)烷基(C1-C5)乙醇如甲醇和異丙醇溶液，該溶劑也是經(jīng)前述的應(yīng)用裝置31供給制備色譜柱10的。第二流動(dòng)相優(yōu)選包括占第二流動(dòng)相約5-25體積％、優(yōu)選10體積％的乙腈。第二流動(dòng)相的pH值優(yōu)選在約2-5之間，更優(yōu)選在3-4之間。
利用該第二流動(dòng)相，含有蒂巴因的第四麻醉生物堿從制備色譜柱10上洗脫。一旦蒂巴因從制備色譜柱10上脫離，就可以經(jīng)一加熱應(yīng)用程序(未顯示)將該洗脫液進(jìn)行蒸發(fā)濃縮。
當(dāng)使用了非常粗的來(lái)源的未加工的原料如在印度發(fā)現(xiàn)的原料時(shí)，優(yōu)選但是任選的可以先用有機(jī)溶劑對(duì)之進(jìn)行液-液萃取。該萃取會(huì)去掉顯著的雜質(zhì)和色素，從而顯著提高蒂巴因生物堿的水性。蒂巴因生物堿的濃度范圍優(yōu)選為約1克/升(0.134盎司/加侖)至約8克/升(1.07盎司/加侖)，更優(yōu)選濃度范圍為約3克/升(0.40盎司/加侖)至約4克/升(0.534盎司/加侖)。更高的濃度會(huì)導(dǎo)致含有一些蒂巴因的焦油(tar)沉淀。雖然僅一步萃取法或步驟蒂巴因的回收率較少，而大于兩步萃取法或步驟中額外回收率并不很多，但是優(yōu)選萃取的次數(shù)或步驟是二。由于甲苯具有在水中的溶解度低的特性和已證實(shí)的效果，故優(yōu)選有機(jī)溶劑為甲苯，然而，其它如乙酸乙酯、氯仿、異丁醇和己烷等溶劑也適用。溶劑對(duì)水溶液的比率優(yōu)選為約0.5-3.0，和更優(yōu)選在0.9-1.2之間。比率低于0.5的有機(jī)溶劑的使用會(huì)導(dǎo)致需要更多的萃取和步驟，而比率高于3.0的有機(jī)溶劑的使用會(huì)稀釋蒂巴因并使得附加回收量變少。優(yōu)選萃取的pH值范圍在約5-11之間、更優(yōu)選在約6-7之間。較高的萃取pH值會(huì)導(dǎo)致形成乳狀液和增加靜置時(shí)間。加入的堿優(yōu)選是氫氧化鈉。在萃取中使用的堿優(yōu)選250毫克/毫升(33.4盎司/加侖)的氫氧化鈉。該堿溶液的使用量范圍從約50毫克/毫升(6.68盎司/加侖)至750毫克/毫升(100.0盎司/加侖)，更優(yōu)選使用量范圍從約150毫克/毫升(20.0盎司/加侖)至350毫克/毫升(46.7盎司/加侖)。如果使用了更高的堿濃度會(huì)導(dǎo)致pH調(diào)節(jié)的減弱而容易引起過(guò)調(diào)節(jié)，而較低的堿濃度會(huì)導(dǎo)致蒂巴因更大的稀釋。根據(jù)乳狀液存在的量確定靜置的時(shí)間優(yōu)選至少10分鐘長(zhǎng)。
接下來(lái)的一步是往分離容器中的萃取的蒂巴因溶液中加入一種有機(jī)酸進(jìn)行反萃取，之后進(jìn)行攪拌。優(yōu)選的攪拌時(shí)間優(yōu)選至少一分鐘，這樣較長(zhǎng)的時(shí)間可以確保更好的質(zhì)量傳遞，一分鐘以下的攪拌時(shí)間會(huì)引起不完全的質(zhì)量傳遞。有機(jī)酸優(yōu)選醋酸，然而其它有機(jī)酸如但不局限于甲酸和草酸。應(yīng)避免使用無(wú)機(jī)酸以防蒂巴因的大量降解。優(yōu)選的反萃取次數(shù)或步驟為一。然而額外的反萃取或步驟可能產(chǎn)生少許益處或者根本就沒(méi)有益處。有機(jī)酸對(duì)水溶液的比率優(yōu)選約為1.0-5.0之間，更優(yōu)選約為2.0-3.0之間。使用比率低于1.0的較少有機(jī)酸會(huì)導(dǎo)致蒂巴因稀釋及很少的附加回收，而使用比率高于5.0的較多有機(jī)酸時(shí)會(huì)導(dǎo)致蒂巴因從有機(jī)酸如甲苯層中的轉(zhuǎn)移不完全。優(yōu)選的pH值范圍為約2.5-4.0、更優(yōu)選為約3.0-3.5。pH值小于2.5會(huì)導(dǎo)致蒂巴因的降解，而pH值大于4.0會(huì)有蒂巴因從甲苯等有機(jī)溶劑層中轉(zhuǎn)移不完全的風(fēng)險(xiǎn)。攪拌和放置時(shí)間必須同時(shí)優(yōu)選為至少一分鐘。較長(zhǎng)的攪拌時(shí)間確保了可待因的質(zhì)量傳遞。由于反萃取過(guò)程中的層分離迅速，靜止時(shí)間不必如在先前萃取步驟中那么長(zhǎng)。
對(duì)于來(lái)源于粗的未加工的生物堿溶液如印度來(lái)源的蒂巴因的特例來(lái)說(shuō)，另外添加一種有機(jī)溶劑會(huì)在形成沉淀時(shí)提高蒂巴因的純度。來(lái)源于印度粗的生物堿溶液的蒂巴因的濃度范圍優(yōu)選為約1克/升(0.13盎司/加侖)至約20克/升(2.67盎司/加侖)，更優(yōu)選濃度范圍為約2克/升(0.267盎司/加侖)至約6克/升(0.80盎司/加侖)。濃度低于1克/升(0.13盎司/加侖)會(huì)導(dǎo)致固體中蒂巴因純度的降低。有機(jī)溶劑優(yōu)選乙醇，因?yàn)橐掖寄芙档偷侔鸵蛟谏锨逡褐械娜芙庑?。然而，其它酒精如但不局限于異丙醇和甲醇也能適用。有機(jī)溶劑的濃度優(yōu)選為約5體積％-20體積％，更優(yōu)選為約8體積％-12體積％。有機(jī)溶劑的濃度低于5體積％時(shí)對(duì)改善蒂巴因的純度的益處很少，而當(dāng)有機(jī)溶劑的濃度高于20體積％時(shí)會(huì)導(dǎo)致更多的蒂巴因溶解，從而固體中蒂巴因的回收量較少。
用一種苛性堿溶液將蒂巴因洗脫液的pH值調(diào)至9以上和優(yōu)選11以上以沉淀出蒂巴因。接著將沉淀出的蒂巴因從苛性堿溶液中分離出來(lái)并進(jìn)行洗滌。分離可經(jīng)任一種適合的方法如使用離心機(jī)或過(guò)濾器進(jìn)行(未顯示)。苛性堿溶液優(yōu)選包括氫氧化鈉，然而其它多種苛性堿溶液包括但不局限于氫氧化鉀、氫氧化銨和堿金屬碳酸鹽也可以使用。在優(yōu)選的技術(shù)方案中，氫氧化鈉存在的范圍為約5重量％至約50重量％，優(yōu)選約25重量％。
對(duì)于來(lái)源于粗的未加工的生物堿溶液如印度來(lái)源的蒂巴因洗脫液的特例來(lái)說(shuō)，使用的堿優(yōu)選為250毫克/毫升(33.4盎司/加侖)的氫氧化鈉。該堿溶液的使用量范圍從約50毫克/毫升(6.68盎司/加侖)至750毫克/毫升(100.0盎司/加侖)，更優(yōu)選使用量范圍從約150毫克/毫升(20.0盎司/加侖)至350毫克/毫升(46.7盎司/加侖)。而且，如前所述，多種苛性堿溶液也可以使用，例如但不局限于氫氧化鉀、氫氧化銨和堿金屬碳酸鹽。如果使用了更高的堿濃度會(huì)導(dǎo)致pH調(diào)節(jié)的減弱而容易引起過(guò)調(diào)節(jié)，而較低的堿濃度會(huì)導(dǎo)致蒂巴因更大的稀釋。在pH調(diào)節(jié)時(shí)的一個(gè)重要方面是保持溶液的溫度。溫度優(yōu)選保持在約20攝氏度(68華氏度)至約80攝氏度(176華氏度)之間，更優(yōu)選在約50攝氏度(122華氏度)至約60攝氏度(140華氏度)之間。優(yōu)選加熱蒂巴因溶液是由于蒂巴因沉淀迅速導(dǎo)致固體中帶有雜質(zhì)。從約50攝氏度(122華氏度)至約60攝氏度(140華氏度)的這個(gè)優(yōu)選的溫度范圍能有效地抑制快速沉淀。溫度高于80攝氏度(176華氏度)會(huì)引起生物堿溶液的沸騰以及蒂巴因的降解。對(duì)于來(lái)源于非常粗的和未加工的生物堿溶液如印度來(lái)源的蒂巴因洗脫液的這個(gè)例子來(lái)說(shuō)，即使也可能使pH值低于10，但優(yōu)選pH值高于11以確保蒂巴因的可溶性。
在得到大于11的最終pH值后，優(yōu)選將蒂巴因漿液冷卻至至少室溫的條件，該條件優(yōu)選為小于25攝氏度(77華氏度)和大于0攝氏度(32華氏度)。高于25攝氏度(77華氏度)會(huì)導(dǎo)致蒂巴因更大的溶解性，而低于0攝氏度(32華氏度)會(huì)造成蒂巴因漿液的凍結(jié)。
第三流動(dòng)相優(yōu)選含有溶劑，說(shuō)明性的但非局限性的例子包括有機(jī)溶劑如乙腈和低級(jí)烷基(C1-C5)醇如甲醇和異丙醇溶液，該溶劑也是經(jīng)前述的應(yīng)用裝置31供給制備色譜柱10的。第三流動(dòng)相優(yōu)選包括占第二流動(dòng)相約15-40體積％、更優(yōu)選占約15-25體積％、最優(yōu)選占約20體積％的乙腈。第三流動(dòng)相的pH值范圍優(yōu)選在約2-5之間，更優(yōu)選在3-4之間。
利用該第三流動(dòng)相，含有那可汀的第五麻醉生物堿從制備色譜柱10上洗脫。第六種麻醉生物堿罌粟堿也可以洗脫下來(lái)。一旦那可汀從制備色譜柱10上脫離，就可以經(jīng)一加熱應(yīng)用程序(未顯示)將該洗脫液進(jìn)行蒸發(fā)濃縮。
在非限制性的來(lái)源于粗的未加工的生物堿溶液如印度來(lái)源的那可汀的例子中，沉淀濃縮的那可汀部分的努力不能提供必須的純度以及商品所需的回收率。因此，采取了附加的純化步驟將那可汀萃取進(jìn)一種有機(jī)溶劑中。不幸地是，和可待因或蒂巴因不同，反萃取導(dǎo)致小但顯著的收率損失。因此有機(jī)溶劑被蒸發(fā)掉并將酸溶液加入到萃取的那可汀中。在蒸發(fā)層析部分后，那可汀的濃度優(yōu)選為約2克/升(0.267盎司/加侖)至約8克/升(1.068盎司/加侖)，更優(yōu)選濃度范圍為約6克/升(0.801盎司/加侖)至約7克/升(0.935盎司/加侖)。濃度高于8克/升(1.068盎司/加侖)會(huì)導(dǎo)致焦油沉淀中帶有一些那可汀。用于萃取的pH范圍優(yōu)選為約3.0-5.0，更優(yōu)選為約3.0-4.1。如果pH值低于3.9，可能需要比優(yōu)選的萃取次數(shù)如兩次更多的步驟，當(dāng)pH大于4.1時(shí)會(huì)生成明顯的乳狀液。有機(jī)溶劑優(yōu)選甲苯，然而其它如乙酸乙酯、氯仿、異丁醇和己烷等溶劑也適用。在萃取步驟中，有機(jī)溶劑對(duì)水溶液的比率優(yōu)選為約0.5-3.0，和更優(yōu)選在約0.9-1.2之間。比率低于0.5的有機(jī)溶劑的使用會(huì)導(dǎo)致需要更多的萃取步驟，而比率高于3.0的有機(jī)溶劑的使用會(huì)稀釋那可汀并使得附加回收量變少。在萃取中使用的堿優(yōu)選250毫克/毫升(33.4盎司/加侖)的氫氧化鈉。該堿溶液的使用量范圍從約50毫克/毫升(6.68盎司/加侖)至750毫克/毫升(100.0盎司/加侖)，更優(yōu)選使用量范圍從約150毫克/毫升(20.0盎司/加侖)至350毫克/毫升(46.7盎司/加侖)。然而其它堿如但不局限于氫氧化銨或氫氧化鉀也可使用。較高的堿濃度會(huì)導(dǎo)致pH調(diào)節(jié)的減弱而容易引起過(guò)調(diào)節(jié)，而較低的堿濃度會(huì)導(dǎo)致那可汀更大的稀釋。萃取步驟中的攪拌時(shí)間優(yōu)選至少一分鐘，這樣較長(zhǎng)的時(shí)間可以確保更好的質(zhì)量傳遞，一分鐘以下的攪拌時(shí)間會(huì)有不完全質(zhì)量傳遞的風(fēng)險(xiǎn)。靜置時(shí)間優(yōu)選至少10分鐘，依賴(lài)于乳狀液存在量所需的靜置時(shí)間可能會(huì)較長(zhǎng)。
然后將甲苯層的那可汀與pH值優(yōu)選為1.0-3.5，更優(yōu)選2.5-3.2，的酸溶液混合。蒸發(fā)混合物以去掉甲苯。接著通過(guò)一種苛性堿溶液將那可汀的pH值調(diào)至約3.5-5.5和優(yōu)選約4.0-4.5來(lái)沉淀出那可汀。來(lái)源于粗的未加工的生物堿溶液如印度來(lái)源的那可汀的濃度范圍優(yōu)選為約2克/升(0.267盎司/加侖)至約10克/升(1.34盎司/加侖)，更優(yōu)選濃度范圍為約4克/升(0.534盎司/加侖)至約8克/升(1.07盎司/加侖)。那可汀濃度高于10克/升(1.34盎司/加侖)時(shí)會(huì)需要較低的pH條件以保證其溶解度，而那可汀的濃度低于2克/升(0.267盎司/加侖)時(shí)會(huì)導(dǎo)致固體中那可汀較低的回收率。初始pH值優(yōu)選為約1.0-3.0，更優(yōu)選為約1.6-2.2。初始pH值低于1.0時(shí)會(huì)使得那可汀更多地溶解于溶液中。高于3.0的初始pH值也可以使用，但是這樣會(huì)存在極大的可能性即所有的那可汀均不溶在溶液中，這樣會(huì)抑制所有的生物堿不能被轉(zhuǎn)移進(jìn)沉淀步驟中?？梢允褂盟岖@得該初始pH值，醋酸或鹽酸等酸適用，還可以使用其它的有機(jī)酸或無(wú)機(jī)酸。
然后將沉淀出的那可汀從苛性堿溶液中分離出來(lái)并進(jìn)行洗滌。分離可經(jīng)任一種適合的方法如使用離心機(jī)或過(guò)濾器進(jìn)行(未顯示)?？列詨A溶液優(yōu)選包括氫氧化鈉，然而其它多種苛性堿溶液包括但不局限于氫氧化鉀、氫氧化銨和堿金屬碳酸鹽也可以使用。在優(yōu)選的技術(shù)方案中，氫氧化鈉存在的范圍為約5重量％至約50重量％，優(yōu)選約25重量％。使用的堿濃度優(yōu)選為約100克/升(13.35盎司/加侖)至約500克/升(66.76盎司/加侖)，更優(yōu)選200(13.35盎司/加侖)-300克/升(40.46盎司/加侖)。溶液最終的pH值優(yōu)選為約4.0-12.0，更優(yōu)選為約4.9-5.2。
如果需要也可以類(lèi)似的步驟分離和純化罌粟堿，通常有顯著量的罌粟堿從那可汀中分離出。當(dāng)最終的pH值大于等于5.0時(shí)，從那可汀中分離出罌粟堿的效率較低。
達(dá)到最終的pH值后，優(yōu)選將那可汀漿液冷卻至至少室溫的條件，該條件優(yōu)選為小于25攝氏度(77華氏度)和大于0攝氏度(32華氏度)。高于25攝氏度(77華氏度)會(huì)導(dǎo)致那可汀更大的溶解性，較低的溫度提供的溶解性更低，而低于0攝氏度(32華氏度)會(huì)造成那可汀漿液的凍結(jié)。
從粗的生物堿溶液中去除任一殘留的色素和其它雜質(zhì)的最后的洗滌劑或第四流動(dòng)相優(yōu)選為有機(jī)溶劑。說(shuō)明性的但非局限性的例子包括乙腈、甲醇和異丙醇等有機(jī)溶劑。溶液優(yōu)選為含有50體積％的乙腈和50體積％的水溶液的混合液。乙腈溶液的pH值約為2-5，優(yōu)選為3-4。這是一種反沖過(guò)程，其中最后的洗滌液或第四流動(dòng)相是經(jīng)由前述的液體供給裝置31供應(yīng)到第四液體導(dǎo)管58的。最后的洗滌液或第四流動(dòng)相從制備色譜柱10上脫離時(shí)帶走了雜質(zhì)和色素，其通過(guò)內(nèi)部導(dǎo)管54經(jīng)流體入口52進(jìn)入液體槽用于回收，隨后可重復(fù)利用該粗的生物堿。這防止了雜質(zhì)和色素粘在制備色譜柱10上，從而利于對(duì)固定相介質(zhì)13的重新利用，這也是本發(fā)明的一個(gè)顯著特點(diǎn)。
最后的洗滌后，重復(fù)前述的第三、第四和第五步，其中包括用酸性溶液沖洗制備色譜柱10的介質(zhì)室11，從粗的來(lái)源制備生物堿溶液和隨后將該新的生物堿溶液加載到制備色譜柱10的介質(zhì)室11中，接著將各種流動(dòng)相加進(jìn)制備色譜柱10后從制備色譜柱10的流體出口64收集洗脫液。需要第二次穿過(guò)制備色譜柱的任何麻醉生物堿被定義為各自濃縮和純化的每一特定類(lèi)型的麻醉生物堿的第二產(chǎn)出(crop)。
在重復(fù)前述的第三、第四和第五步多次后，制備色譜柱10在去除雜質(zhì)的有效性方面的優(yōu)勢(shì)會(huì)減弱，不是高壓就是損失。固定相介質(zhì)13必須隨后從制備色譜柱10上移走和拆除。這可以通過(guò)轉(zhuǎn)動(dòng)水壓開(kāi)關(guān)24來(lái)移走加在活塞12上的液壓。接著位于制備色譜柱10底部的法蘭(未顯示)被移開(kāi)，在制備色譜柱10的底部9的下面放置了一個(gè)容器(未顯示)，水壓開(kāi)關(guān)接著又被打回并從水壓貯存池28中抽出流體使之回到流體室15中。這驅(qū)動(dòng)活塞1 2往下運(yùn)動(dòng)，這樣固定相介質(zhì)13被推出制備色譜柱10進(jìn)入容器中。接著將法蘭重新裝好并將活塞人工地舉回圖3所示的位置，這樣整個(gè)過(guò)程可以經(jīng)由轉(zhuǎn)化漏斗34裝入新的固定相介質(zhì)13而重新開(kāi)始。
用各種粗的來(lái)源的麻醉生物堿進(jìn)行了試驗(yàn)，下面的表1列出了粗的來(lái)源、所需的麻醉生物堿、粗的生物堿溶液和純化的麻醉生物堿的面積百分?jǐn)?shù)(面積％)，以及純化的麻醉生物堿的產(chǎn)量百分?jǐn)?shù)和移走或清除的色素百分?jǐn)?shù)。表1證實(shí)了使用本方法提高了從粗的生物堿溶液到純化的麻醉生物堿組分的純度。在某些例子中，蒂巴因的額外產(chǎn)率是在少量的回收物中獲得，這需要將之作為第二產(chǎn)出進(jìn)行額外的純化。整個(gè)過(guò)程的收率損失基本上等于在色素清除或減少方面的產(chǎn)率。最后的洗滌或第四流動(dòng)相恢復(fù)了存在于粗的生物堿溶液中的大部分色素和大量的雜質(zhì)。
表1

實(shí)施例1土耳其濃縮的罌粟草(CPS)被用作粗的來(lái)源。使用的粗的生物堿溶液包括89.0面積％的嗎啡、5.4面積％的可待因和0.6面積％的東罌粟堿。試驗(yàn)?zāi)康氖腔厥崭弋a(chǎn)率的嗎啡和可待因。使用的固定相介質(zhì)13是具有C8鏈、優(yōu)選具有120埃(0.47微英寸)孔的20微米(787.4微英寸)的球狀顆粒的硅石。有關(guān)使用的制備色譜柱10的細(xì)節(jié)如前所述。用于回收嗎啡和可待因的流動(dòng)相是一種包括水的水溶液，該水溶液的pH值經(jīng)另外的醋酸調(diào)節(jié)至3-4之間。通過(guò)一種含有50％的乙腈和50％的pH3-4經(jīng)稀釋的醋酸的溶液從固定相介質(zhì)13中去掉色素和雜質(zhì)。初始流動(dòng)相的流動(dòng)方向是從頂部到底部，而色素和雜質(zhì)的移動(dòng)是從底部到頂部(前述的反沖過(guò)程)。試驗(yàn)1和試驗(yàn)2的結(jié)果詳細(xì)地列于下面的表2中表2

試驗(yàn)1的結(jié)果提供了近99％的嗎啡產(chǎn)量和極少的可待因。試驗(yàn)1中使用了1∶13.9的上樣比例，該值是由固定相介質(zhì)13的量除以粗的生物堿溶液的量得出的。作為對(duì)照，試驗(yàn)2允許11.9％的可待因隨嗎啡洗脫。試驗(yàn)2中由固定相介質(zhì)13的量除以粗的生物堿的量得出的上樣比例為1∶11.7，其中上樣比例的差別可能是導(dǎo)致結(jié)果不同的一個(gè)因素。
實(shí)施例2塔斯馬尼亞濃縮的罌粟草(CPS)被用作粗的來(lái)源，使用的粗的生物堿溶液包括95.8面積％的蒂巴因、0.9面積％的東罌粟堿、0.6面積％的可待因和0.4面積％的10-羥基蒂巴因。試驗(yàn)的目的是回收高產(chǎn)量的蒂巴因和少于0.10面積％的任一種東罌粟堿、可待因和10-羥基蒂巴因。使用的是具有碳8(C8)配基(ligand)的固定相介質(zhì)13、優(yōu)選具有120埃(0.47微英寸)孔的20微米(787.4微英寸)的球狀顆粒的硅石。有關(guān)使用的制備色譜柱10的細(xì)節(jié)如前所述。用于初始蒂巴因回收的流動(dòng)相和雜質(zhì)的洗脫液是一種包括水的水溶液，該水溶液的pH值經(jīng)另外的醋酸調(diào)節(jié)至3至4之間。使用包含10-12％的乙腈溶液和包含88-90％水的水溶液的流動(dòng)相來(lái)回收蒂巴因。通過(guò)一種含有50％的乙腈和50％的pH3-4經(jīng)稀釋的醋酸的溶液從固定相介質(zhì)13中去掉色素和雜質(zhì)。開(kāi)始兩種流動(dòng)相的流動(dòng)方向是從頂部到底部，而色素和雜質(zhì)的移動(dòng)是從底部到頂部(前述的反沖過(guò)程)。試驗(yàn)3和試驗(yàn)4的結(jié)果詳細(xì)地列于下面的表3中表3

試驗(yàn)3的結(jié)果降低了每一種雜質(zhì)的水平在0.10面積％之下。在試驗(yàn)4中，殘留的10-羥基蒂巴因高達(dá)0.28％。試驗(yàn)3和試驗(yàn)4的上樣比例即固定相介質(zhì)13的量比粗的生物堿溶液的量的比值幾乎相同，然而，試驗(yàn)4中首次的蒂巴因收集量不充分。含有10-羥基蒂巴因的該組分由于含有該雜質(zhì)而與其它蒂巴因組分保持分離，在第二產(chǎn)出回收時(shí)對(duì)之進(jìn)行進(jìn)一步的純化。相對(duì)于試驗(yàn)3的首次洗脫體積，試驗(yàn)4的首次洗脫體積為0.22，而試驗(yàn)3為0.44。試驗(yàn)3使用了更多乙腈，這獲得了更多的蒂巴因回收量。
實(shí)施例3澳大利亞濃縮的罌粟草(CPS)被用作粗的來(lái)源，使用的粗的生物堿溶液包括96.5面積％的嗎啡和2.0面積％的東罌粟堿。試驗(yàn)的目的是回收高產(chǎn)量的含有極少量或不含東罌粟堿的嗎啡。使用的是具有C8配基的固定相介質(zhì)13、優(yōu)選具有120埃(0.47微英寸)孔的20微米(787.4微英寸)的球狀顆粒的硅石。有關(guān)使用的制備色譜柱10的細(xì)節(jié)如前所述。用于嗎啡和可待因回收的流動(dòng)相是一種水溶液，該水溶液的pH值經(jīng)另外的醋酸調(diào)節(jié)至3至4之間。通過(guò)一種含有50％的乙腈和50％的pH3-4的稀釋的醋酸的溶液從固定相介質(zhì)13中去掉色素和雜質(zhì)。初始流動(dòng)相的流動(dòng)方向是從頂部到底部，而色素和雜質(zhì)的移動(dòng)是從底部到頂部(前述的反沖過(guò)程)。試驗(yàn)5和試驗(yàn)6的結(jié)果詳細(xì)地列于下面的表3中表4

試驗(yàn)5把嗎啡中的東罌粟堿完全移走，而試驗(yàn)6并沒(méi)有將嗎啡與東罌粟堿完全分開(kāi)。試驗(yàn)5使用了1∶7.3的上樣比例，該值是由固定相介質(zhì)13的量除以粗的生物堿溶液的量得出的。作為對(duì)照，試驗(yàn)6中由固定相介質(zhì)13的量除以粗的生物堿的量得出的上樣比例為1∶5.4，其中上樣比例的差別可能是導(dǎo)致結(jié)果不同的一個(gè)因素。在試驗(yàn)5和試驗(yàn)6中粗的生物堿溶液被加進(jìn)制備色譜柱10時(shí)收集嗎啡。由于需要更多量的粗的生物堿溶液遞送給制備色譜柱10，故試驗(yàn)6需要更大的洗脫體積。在試驗(yàn)5和試驗(yàn)6中，對(duì)于色素和雜質(zhì)組分來(lái)說(shuō)僅有少量的收率損失。
實(shí)施例4法國(guó)濃縮的罌粟草(CPS)被用作粗的來(lái)源，使用的粗的生物堿溶液包括73.1面積％的蒂巴因、13.4面積％的東罌粟堿、6.7面積％的嗎啡和1.0面積％的可待因。試驗(yàn)的目的是分別回收高產(chǎn)量和純度的嗎啡、東罌粟堿和蒂巴因。使用的是具有C8配基的固定相介質(zhì)13、優(yōu)選具有120埃(0.47微英寸)孔的20微米(787.4微英寸)的球狀顆粒的硅石。有關(guān)使用的制備色譜柱10的細(xì)節(jié)如前所述。用于嗎啡和東罌粟堿回收的流動(dòng)相是一種包括水的水溶液，該水溶液的pH值經(jīng)另外的醋酸調(diào)節(jié)至3至4之間。使用包含10-12％的乙腈溶液以及包含88-90％水的水溶液的流動(dòng)相來(lái)回收蒂巴因。通過(guò)一種含有50％的乙腈和50％的pH3-4的稀釋的醋酸的溶液從固定相介質(zhì)13中去掉色素和雜質(zhì)。開(kāi)始兩種流動(dòng)相的流動(dòng)方向是從頂部到底部，而色素和雜質(zhì)的移動(dòng)是從底部到頂部(前述的反沖過(guò)程)。試驗(yàn)7和試驗(yàn)8的結(jié)果詳細(xì)地列于下面的表5中表5


試驗(yàn)7和試驗(yàn)8使用了較小的上樣比例即固定相介質(zhì)13的量與粗的生物堿溶液的量的比值，同時(shí)粗的生物堿溶液具有較低的pH值。然而，經(jīng)過(guò)對(duì)組分單獨(dú)收集的改良，試驗(yàn)7獲得了較好的純度和產(chǎn)量結(jié)果。而且，試驗(yàn)7使用了較大的洗脫體積從而提高嗎啡的回收量至近99％。殘留的嗎啡隨可待因在下一組分洗脫。試驗(yàn)7還使用了較大的洗脫體積用于嗎啡/可待因組分，從而改善了東罌粟堿的純度從85.5面積％至94.3面積％。殘余的東罌粟堿隨蒂巴因在東罌粟堿/蒂巴因組分中洗脫，該組分可作為第二產(chǎn)出被進(jìn)一步純化。由于延長(zhǎng)了蒂巴因的開(kāi)始收集，試驗(yàn)7中獲得的蒂巴因純度較高，這使得該特定試驗(yàn)中的東罌粟堿的面積百分?jǐn)?shù)降至0.2％以下。
實(shí)施例5含有97.3面積％的可待因和0.21面積％的嗎啡的組合物被用作粗的來(lái)源，其目的是將色素和雜質(zhì)從高回收量的可待因中去除。使用的是具有C8配基的固定相介質(zhì)13、優(yōu)選具有120埃(0.47微英寸)孔的50微米(1968.5微英寸)的球狀顆粒的硅石。有關(guān)使用的制備色譜柱10的細(xì)節(jié)如前所述。用于可待因回收的流動(dòng)相是一種包括水的水溶液。通過(guò)使用一種含有90％的甲醇和10％的水的溶液從固定相介質(zhì)13中移走色素。初始流動(dòng)相的流動(dòng)方向是從頂部到底部，而色素和雜質(zhì)的移動(dòng)是從底部到頂部(前述的反沖過(guò)程)。試驗(yàn)9和試驗(yàn)10的結(jié)果詳細(xì)地列于下面的表6中表6

*在分光光度計(jì)中在400納米(15.75微英寸)UV時(shí)測(cè)定在試驗(yàn)9和試驗(yàn)10中，可待因是由嗎啡合成的。如前所述，反應(yīng)產(chǎn)物需要額外的純化來(lái)去除雜質(zhì)和色素。在所用洗脫體積相同的情況下，試驗(yàn)9回收了98.9％的產(chǎn)量，試驗(yàn)10回收了43.6％的產(chǎn)量。試驗(yàn)10中回收量較低的一個(gè)可能的原因是該試驗(yàn)中用于粗的生物堿溶液的pH為8.5，要較高于試驗(yàn)9中粗的生物堿溶液3.6的pH值。該原因是可信的，因?yàn)樵谳^高的pH時(shí)，大部分可待因作為可待因生物堿存在，而后者比可待因硫酸鹽更穩(wěn)定。
雖然本發(fā)明優(yōu)選的技術(shù)方案和使用的方法已經(jīng)在前面說(shuō)明書(shū)中盡可能詳細(xì)地描述了，但是可以理解對(duì)本發(fā)明可以在不超出附帶權(quán)利要求請(qǐng)求保護(hù)的范圍內(nèi)進(jìn)行修改，當(dāng)修改方式落入了本發(fā)明所要求的保護(hù)范圍之內(nèi)時(shí)，由本領(lǐng)域技術(shù)人員對(duì)本發(fā)明所做的修改方式仍屬于本發(fā)明并將被認(rèn)為侵犯了本發(fā)明。
權(quán)利要求
1.一種分離至少一種麻醉生物堿的方法，包括將固定相介質(zhì)加載到色譜柱上；添加粗的麻醉生物堿溶液至色譜柱上；在色譜柱上應(yīng)用至少一種流動(dòng)相；和從色譜柱上回收至少一種麻醉生物堿洗脫液。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其中當(dāng)固定相介質(zhì)加載到色譜柱上時(shí)，固定相介質(zhì)懸浮于溶液中。
3.如權(quán)利要求2所述的方法，其中溶液選自乙腈、水、甲醇、乙醇和異丙醇。
4.如權(quán)利要求1所述的方法，其中固定相介質(zhì)選自硅石、鈦氧化物、鋯氧化物和聚合物顆粒。
5.如權(quán)利要求1所述的方法，其中固定相介質(zhì)包括的成分選自苯基基團(tuán)、氰基基團(tuán)或具有2至30個(gè)碳原子的碳鏈。
6.如權(quán)利要求4所述的方法，其中固定相介質(zhì)包括的成分選自苯基基團(tuán)、氰基基團(tuán)或具有2至30個(gè)碳原子的碳鏈。
7.如權(quán)利要求1所述的方法，其中固定相介質(zhì)包括至少0.255千克(8.99盎司)的固定相介質(zhì)。
8.如權(quán)利要求1所述的方法，其中固定相介質(zhì)包括至少一種粒徑為約1微米(39.4微英寸)至約200微米(7874微英寸)的顆粒。
9.如權(quán)利要求1所述的方法，其中固定相介質(zhì)包括至少一種粒徑為約20微米(787.4微英寸)至約50微米(1968.5微英寸)的顆粒。
10.如權(quán)利要求1所述的方法，其中固定相介質(zhì)包括至少一種具有一個(gè)孔的顆粒，其中至少的一個(gè)孔的大小為約30埃(0.12微英寸)至約1000埃(3.94微英寸)。
11.如權(quán)利要求1所述的方法，其中固定相介質(zhì)包括至少一種顆粒，其中該顆粒表面積為約100平方米/克(3,407平方碼/盎司)至約1000平方米/克(33,488平方碼/盎司)。
12.如權(quán)利要求1所述的方法，其中在固定相介質(zhì)加載后和粗的生物堿溶液添加到色譜柱上前，進(jìn)一步包括將溶液從固定相介質(zhì)上移走。
13.如權(quán)利要求1所述的方法，其中在固定相介質(zhì)加載后和粗的生物堿溶液添加到色譜柱上前，進(jìn)一步包括擠壓固定相介質(zhì)形成壓實(shí)的基質(zhì)；和用一種酸溶液沖洗壓實(shí)的固定相介質(zhì)基質(zhì)。
14.如權(quán)利要求13所述的方法，其中酸溶液選自醋酸、甲酸、草酸、琥珀酸、乳酸和酒石酸。
15.如權(quán)利要求1所述的方法，其中粗的麻醉生物堿溶液包括溶于酸溶液的麻醉生物堿。
16.如權(quán)利要求15所述的方法，其中酸溶液選自醋酸、甲酸、草酸、琥珀酸、乳酸和酒石酸。
17.如權(quán)利要求1所述的方法，進(jìn)一步包括過(guò)濾粗的生物堿溶液。
18.如權(quán)利要求1所述的方法，進(jìn)一步包括在粗的生物堿溶液中加入一種試劑。
19.如權(quán)利要求18所述的方法，其中所述試劑選自三乙胺，四丁胺硫酸氫鹽、十二烷基硫酸鈉、庚烷磺酸鈉和硫酸銨。
20.如權(quán)利要求18所述的方法，其中所述試劑是粗的麻醉生物堿溶液的0.5-5.0體積百分?jǐn)?shù)。
21.如權(quán)利要求18所述的方法，其中所述試劑是粗的麻醉生物堿溶液的2.0-2.5體積百分?jǐn)?shù)。
22.如權(quán)利要求18所述的方法，其中粗的麻醉生物堿溶液的pH范圍為約3.0-3.5。
23.如權(quán)利要求1所述的方法，其中固定相介質(zhì)的量比粗的生物堿溶液的量得到的上樣比例范圍約為1∶1-1∶1000。
24.如權(quán)利要求1所述的方法，其中固定相介質(zhì)的量比粗的生物堿溶液的量得到的上樣比例范圍約為1∶3-1∶40。
25.如權(quán)利要求1所述的方法，其中固定相介質(zhì)的量比粗的生物堿溶液的量得到的上樣比例范圍約為1∶10-1∶30。
26.如權(quán)利要求1所述的方法，其中固定相介質(zhì)加載進(jìn)色譜柱時(shí)包括加載了至少0.255千克(8.995盎司)的固定相介質(zhì)。
27.如權(quán)利要求1所述的方法，其中粗的麻醉生物堿溶液添加到色譜柱時(shí)包括添加了至少0.255克(0.009盎司)的粗的麻醉生物堿溶液。
28.如權(quán)利要求1所述的方法，其中粗的麻醉生物堿溶液添加到色譜柱時(shí)包括添加了至少6.38克(0.225盎司)的粗的麻醉生物堿溶液。
29.如權(quán)利要求1所述的方法，其中粗的麻醉生物堿溶液添加到色譜柱時(shí)包括添加了至少8.50克(0.300盎司)的粗的麻醉生物堿溶液。
30.如權(quán)利要求1所述的方法，其中從色譜柱上回收至少一種麻醉生物堿洗脫液包括回收了至少0.255克(0.009盎司)的至少一種麻醉生物堿洗脫液。
31.如權(quán)利要求1所述的方法，其中從色譜柱上回收至少一種麻醉生物堿洗脫液包括回收了至少6.38克(0.225盎司)的至少一種麻醉生物堿洗脫液。
32.如權(quán)利要求1所述的方法，其中從色譜柱上回收至少一種麻醉生物堿洗脫液包括回收了至少8.50克(0.300盎司)的至少一種麻醉生物堿洗脫液。
33.如權(quán)利要求1所述的方法，其中從色譜柱上回收至少一種麻醉生物堿洗脫液包括回收了至少一升(0.264加侖)的至少一種麻醉生物堿洗脫液。
34.一種分離至少一種麻醉生物堿的方法，包括將至少0.255千克(8.995盎司)的固定相介質(zhì)加載到色譜柱上；添加至少0.255克(0.009盎司)的粗的麻醉生物堿至色譜柱上；在色譜柱上應(yīng)用至少一種流動(dòng)相；和從色譜柱上回收至少0.255克(0.009盎司)的至少一種麻醉生物堿洗脫液。
35.一種分離至少一種麻醉生物堿的方法，包括將至少0.255千克(8.995盎司)的固定相介質(zhì)加載到色譜柱上；添加至少6.38克(0.225盎司)的粗的麻醉生物堿至色譜柱上；在色譜柱上應(yīng)用至少一種流動(dòng)相；和從色譜柱上回收至少6.38克(0.225盎司)的至少一種麻醉生物堿洗脫液。
36.一種分離至少一種麻醉生物堿的方法，包括將至少0.255千克(8.995盎司)的固定相介質(zhì)加載到色譜柱上；添加至少8.50克(0.300盎司)的粗的麻醉生物堿至色譜柱上；在色譜柱上應(yīng)用至少一種流動(dòng)相；和從色譜柱上回收至少8.50克(0.300盎司)的至少一種麻醉生物堿洗脫液。
37.一種分離至少一種麻醉生物堿的方法，包括將至少0.255千克(8.995盎司)的固定相介質(zhì)加載到色譜柱上；添加至少0.255克(0.009盎司)的粗的麻醉生物堿至色譜柱上；在色譜柱上應(yīng)用至少一種流動(dòng)相；和從色譜柱上回收至少一升(0.264加侖)的至少一種麻醉生物堿洗脫液。
38.如權(quán)利要求1所述的方法，其中至少一種流動(dòng)相包括一種酸溶液和麻醉生物堿洗脫液包含嗎啡。
39.如權(quán)利要求38所述的方法，其中酸溶液選自醋酸、甲酸、草酸、琥珀酸、乳酸和酒石酸。
40.如權(quán)利要求38所述的方法，其中酸溶液的pH范圍約為2-5。
41.如權(quán)利要求38所述的方法，進(jìn)一步包括在嗎啡洗脫液中加入一種苛性堿溶液以沉淀嗎啡；和從苛性堿溶液中分離出沉淀的嗎啡。
42.如權(quán)利要求41所述的方法，其中苛性堿溶液選自氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化銨和堿金屬碳酸鹽。
43.如權(quán)利要求41所述的方法，其中苛性堿溶液加入嗎啡洗脫液中將pH調(diào)至約8-10之間。
44.如權(quán)利要求1所述的方法，其中至少一種流動(dòng)相包括一種酸溶液和麻醉生物堿洗脫液包含可待因。
45.如權(quán)利要求44所述的方法，其中酸溶液選自醋酸、甲酸、草酸、琥珀酸、乳酸和酒石酸。
46.如權(quán)利要求44所述的方法，其中酸溶液的pH范圍約為2-5。
47.如權(quán)利要求44所述的方法，進(jìn)一步包括將可待因洗脫液進(jìn)行蒸發(fā)濃縮；用有機(jī)溶劑對(duì)濃縮的可待因洗脫液進(jìn)行至少一次萃取；用酸溶液進(jìn)行至少一次反萃??；在濃縮的可待因洗脫液中加入一種苛性堿溶液沉淀出可待因；和從苛性堿溶液中分離出沉淀的可待因。
48.如權(quán)利要求47所述的方法，其中在可待因洗脫液中的可待因的濃度范圍為約2克/升(0.267盎司/加侖)至約30克/升(4.0盎司/加侖)。
49.如權(quán)利要求47所述的方法，其中在可待因洗脫液中的可待因的濃度范圍為約15克/升(2.0盎司/加侖)至約25克/升(3.34盎司/加侖)。
50.如權(quán)利要求47所述的方法，其中用一種有機(jī)溶劑對(duì)濃縮的可待因洗脫液進(jìn)行的至少一種萃取是在pH至少為10時(shí)進(jìn)行的。
51.如權(quán)利要求47所述的方法，其中用一種有機(jī)溶劑對(duì)濃縮的可待因洗脫液進(jìn)行的至少一種萃取是在pH至少為11.5時(shí)進(jìn)行的。
52.如權(quán)利要求47所述的方法，其中有機(jī)溶劑選自甲苯、乙酸乙酯、氯仿、異丁醇和己烷。
53.如權(quán)利要求47所述的方法，其中用一種有機(jī)溶劑對(duì)濃縮的可待因洗脫液進(jìn)行的至少一種萃取中包括有機(jī)溶劑對(duì)水溶液的比率范圍為約0.5-3.0。
54.如權(quán)利要求47所述的方法，其中用一種有機(jī)溶劑對(duì)濃縮的可待因洗脫液進(jìn)行的至少一種萃取中包括有機(jī)溶劑對(duì)水溶液的比率范圍為約0.8-1.2。
55.如權(quán)利要求47所述的方法，其中用一種有機(jī)溶劑對(duì)濃縮的可待因洗脫液進(jìn)行的至少一種萃取中包括加入了一種堿。
56.如權(quán)利要求55所述的方法，其中堿選自氫氧化鈉、氫氧化銨和氫氧化鉀。
57.如權(quán)利要求47所述的方法，其中堿包括約50毫克/毫升(6.68盎司/加侖)至750毫克/毫升(100.0盎司/加侖)的氫氧化鈉。
58.如權(quán)利要求47所述的方法，其中堿包括約150毫克/毫升(20.0盎司/加侖)至350毫克/毫升(46.7盎司/加侖)的氫氧化鈉。
59.如權(quán)利要求47所述的方法，其中用一種有機(jī)溶劑對(duì)濃縮的可待因洗脫液進(jìn)行的至少一種萃取中包括攪拌預(yù)定長(zhǎng)的時(shí)間和隨后使溶液靜置預(yù)定長(zhǎng)的時(shí)間。
60.如權(quán)利要求59所述的方法，其中在用有機(jī)溶劑萃取濃縮的可待因洗脫液期間用于攪拌的預(yù)定長(zhǎng)的時(shí)間是至少一分鐘以及用于靜置的時(shí)間是至少一分鐘。
61.如權(quán)利要求47所述的方法，其中用酸溶液進(jìn)行的至少一次反萃取中包括有機(jī)溶劑對(duì)水溶液的比率范圍約為1.0-3.0。
62.如權(quán)利要求47所述的方法，其中用酸溶液進(jìn)行的至少一次反萃取中包括有機(jī)溶劑對(duì)水溶液的比率范圍約為1.6-2.4。
63.如權(quán)利要求47所述的方法，其中用酸溶液進(jìn)行的至少一次反萃取包含pH低于5.0。
64.如權(quán)利要求47所述的方法，其中用酸溶液進(jìn)行的至少一次反萃取包含pH低于3.5。
65.如權(quán)利要求47所述的方法，其中酸溶液選自醋酸、甲酸、鹽酸和磷酸。
66.如權(quán)利要求47所述的方法，其中用酸溶液進(jìn)行的至少一次反萃取包括攪拌預(yù)定長(zhǎng)的時(shí)間和隨后使溶液靜置預(yù)定長(zhǎng)的時(shí)間。
67.如權(quán)利要求66所述的方法，其中在用有機(jī)溶劑萃取濃縮的可待因洗脫液期間用于攪拌的預(yù)定長(zhǎng)的時(shí)間是至少一分鐘以及用于靜置的時(shí)間是至少一分鐘。
68.一種分離至少一種麻醉生物堿的方法，包括將固定相介質(zhì)加載到色譜柱上；添加粗的麻醉生物堿至色譜柱上；在色譜柱上應(yīng)用至少一種流動(dòng)相；從色譜柱上回收嗎啡和可待因；將嗎啡轉(zhuǎn)化成合成的可待因；將合成的可待因加到色譜柱上；和從色譜柱上回收合成的可待因。
69.如權(quán)利要求68所述的方法，進(jìn)一步包括在可待因和合成的可待因中加入苛性堿溶液以沉淀可待因；和從苛性堿溶液中分離出可待因。
70.如權(quán)利要求69所述的方法，其中苛性堿溶液選自氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化銨和堿金屬碳酸鹽。
71.如權(quán)利要求1所述的方法，其中至少一種流動(dòng)相包括酸溶液和麻醉生物堿洗脫液包含東罌粟堿。
72.如權(quán)利要求71所述的方法，其中酸溶液選自醋酸、甲酸、草酸、琥珀酸、乳酸和酒石酸。
73.如權(quán)利要求71所述的方法，其中酸溶液的pH范圍約為2-5。
74.如權(quán)利要求71所述的方法，進(jìn)一步包括在東罌粟堿洗脫液中加入苛性堿溶液以沉淀可待因；和從苛性堿溶液中分離出東罌粟堿。
75.如權(quán)利要求74所述的方法，其中加入東罌粟堿洗脫液中的苛性堿溶液將pH值調(diào)至約8-10之間。
76.如權(quán)利要求74所述的方法，其中苛性堿溶液選自氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化銨和堿金屬碳酸鹽。
77.如權(quán)利要求1所述的方法，其中至少一種流動(dòng)相包括一種溶劑和麻醉生物堿洗脫液包含蒂巴因。
78.如權(quán)利要求77所述的方法，其中溶劑選自乙腈、甲醇和異丙醇。
79.如權(quán)利要求77所述的方法，其中溶劑的pH范圍約為2-5。
80.如權(quán)利要求77所述的方法，進(jìn)一步包括將包括醋酸鹽溶液的蒂巴因洗脫液進(jìn)行蒸發(fā)以濃縮蒂巴因洗脫液；在濃縮的蒂巴因洗脫液中加入苛性堿溶液沉淀出蒂巴因；和從苛性堿溶液中分離出沉淀的蒂巴因。
81.如權(quán)利要求80所述的方法，其中苛性堿溶液加入蒂巴因洗脫液中將pH調(diào)至9以上。
82.如權(quán)利要求81所述的方法，其中苛性堿溶液選自氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化銨和堿金屬碳酸鹽。
83.如權(quán)利要求77所述的方法，進(jìn)一步包括將蒂巴因洗脫液進(jìn)行蒸發(fā)濃縮；用有機(jī)溶劑對(duì)濃縮的蒂巴因洗脫液進(jìn)行至少一次萃?。挥盟崛芤哼M(jìn)行至少一次反萃??；在濃縮的蒂巴因洗脫液中加入一種苛性堿溶液沉淀出蒂巴因；和從苛性堿溶液中分離出沉淀的蒂巴因。
84.如權(quán)利要求83所述的方法，其中在蒂巴因洗脫液中的蒂巴因的濃度范圍為約1克/升(0.134盎司/加侖)至約8克/升(1.07盎司/加侖)。
85.如權(quán)利要求83所述的方法，其中在蒂巴因洗脫液中的蒂巴因的濃度范圍為約3克/升(0.40盎司/加侖)至約4克/升(0.534盎司/加侖)。
86.如權(quán)利要求83所述的方法，其中用一種有機(jī)溶劑對(duì)濃縮的蒂巴因洗脫液進(jìn)行的至少一種萃取是在pH約為5-11時(shí)進(jìn)行的。
87.如權(quán)利要求83所述的方法，其中用一種有機(jī)溶劑對(duì)濃縮的蒂巴因洗脫液進(jìn)行的至少一種萃取是在pH約為6-7時(shí)進(jìn)行的。
88.如權(quán)利要求83所述的方法，其中有機(jī)溶劑選自甲苯、乙酸乙酯、氯仿、異丁醇和己烷。
89.如權(quán)利要求83所述的方法，其中用一種有機(jī)溶劑對(duì)濃縮的蒂巴因洗脫液進(jìn)行的至少一種萃取中包括有機(jī)溶劑對(duì)水溶液的比率范圍為約0.5-3.0。
90.如權(quán)利要求83所述的方法，其中用一種有機(jī)溶劑對(duì)濃縮的蒂巴因洗脫液進(jìn)行的至少一種萃取中包括有機(jī)溶劑對(duì)水溶液的比率范圍為約0.9-1.2。
91.如權(quán)利要求83所述的方法，其中用一種有機(jī)溶劑對(duì)濃縮的蒂巴因洗脫液進(jìn)行的至少一種萃取中包括加入了一種堿。
92.如權(quán)利要求83所述的方法，其中堿選自氫氧化鈉、氫氧化銨和氫氧化鉀。
93.如權(quán)利要求83所述的方法，其中堿包括約50毫克/毫升(6.68盎司/加侖)至750毫克/毫升(100.0盎司/加侖)的氫氧化鈉。
94.如權(quán)利要求83所述的方法，其中堿包括約150毫克/毫升(20.0盎司/加侖)至350毫克/毫升(46.7盎司/加侖)的氫氧化鈉。
95.如權(quán)利要求83所述的方法，其中用一種有機(jī)溶劑對(duì)濃縮的蒂巴因洗脫液進(jìn)行的至少一種萃取中包括攪拌預(yù)定長(zhǎng)的時(shí)間和隨后使溶液靜置預(yù)定長(zhǎng)的時(shí)間。
96.如權(quán)利要求95所述的方法，其中在用有機(jī)溶劑萃取濃縮的蒂巴因洗脫液期間用于攪拌的預(yù)定長(zhǎng)的時(shí)間是至少一分鐘以及用于靜置的時(shí)間是至少十分鐘。
97.如權(quán)利要求83所述的方法，其中用酸溶液進(jìn)行的至少一次反萃取中包括有機(jī)溶劑對(duì)水溶液的比率范圍約為1.0-5.0。
98.如權(quán)利要求83所述的方法，其中用酸溶液進(jìn)行的至少一次反萃取中包括有機(jī)溶劑對(duì)水溶液的比率范圍約為2.0-3.0。
99.如權(quán)利要求83所述的方法，其中用酸溶液進(jìn)行的至少一次反萃取是在pH約為2.5-4.0時(shí)完成的。
100.如權(quán)利要求83所述的方法，其中用酸溶液進(jìn)行的至少一次反萃取是在pH約為3.0-3.5時(shí)完成的。
101.如權(quán)利要求83所述的方法，其中酸溶液選自醋酸、甲酸和草酸。
102.如權(quán)利要求83所述的方法，其中用酸溶液進(jìn)行的至少一次反萃取包括攪拌預(yù)定長(zhǎng)的時(shí)間和隨后使溶液靜置預(yù)定長(zhǎng)的時(shí)間。
103.如權(quán)利要求102所述的方法，其中用于攪拌的預(yù)定長(zhǎng)的時(shí)間是至少一分鐘以及用于靜置的時(shí)間是至少一分鐘。
104.如權(quán)利要求83所述的方法，其中在濃縮的蒂巴因洗脫液中加入苛性堿溶液以沉淀蒂巴因步驟中，蒂巴因洗脫液的濃度范圍為約1克/升(0.13盎司/加侖)至約20克/升(2.67盎司/加侖)。
105.如權(quán)利要求83所述的方法，其中在濃縮的蒂巴因洗脫液中加入苛性堿溶液以沉淀蒂巴因步驟中，蒂巴因洗脫液的濃度范圍為約2克/升(0.27盎司/加侖)至約6克/升(0.80盎司/加侖)。
106.如權(quán)利要求83所述的方法，其中在濃縮的蒂巴因洗脫液中加入苛性堿溶液以沉淀蒂巴因中進(jìn)一步包括加入一種有機(jī)溶劑。
107.如權(quán)利要求106所述的方法，其中有機(jī)溶劑選自乙醇、異丙醇和甲醇。
108.如權(quán)利要求106所述的方法，其中有機(jī)溶劑的濃度范圍約為5體積％至約20體積％。
109.如權(quán)利要求106所述的方法，其中有機(jī)溶劑的濃度范圍約為8體積％至約12體積％。
110.如權(quán)利要求83所述的方法，其中苛性堿溶液選自氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化銨和堿金屬碳酸鹽。
111.如權(quán)利要求83所述的方法，其中苛性堿溶液加入蒂巴因洗脫液中將pH調(diào)至大于等于10。
112.如權(quán)利要求83所述的方法，其中在蒂巴因洗脫液中加入苛性堿溶液調(diào)節(jié)pH，在溫度約為20攝氏度(68華氏度)至約80攝氏度(176華氏度)是pH被調(diào)至至少為10。
113.如權(quán)利要求83所述的方法，其中在蒂巴因洗脫液中加入苛性堿溶液調(diào)節(jié)pH，在溫度約為50攝氏度(122華氏度)至約60攝氏度(140華氏度)是pH被調(diào)至至少為10。
114.如權(quán)利要求83所述的方法，其中苛性堿溶液的濃度約為100克/升(13.35盎司/加侖)至約500克/升(66.76盎司/加侖)。
115.如權(quán)利要求83所述的方法，其中苛性堿溶液的濃度約為200克/升(13.35盎司/加侖)至約300克/升(40.06盎司/加侖)。
116.如權(quán)利要求83所述的方法，其中從苛性堿溶液中分離出沉淀的蒂巴因是在最終溫度低于25攝氏度(77華氏度)時(shí)進(jìn)行的。
117.如權(quán)利要求1所述的方法，其中至少一種流動(dòng)相包括一種溶劑和麻醉生物堿洗脫液包括那可汀。
118.如權(quán)利要求117所述的方法，其中溶劑選自乙腈、甲醇和異丙醇。
119.如權(quán)利要求117所述的方法，其中溶劑的pH約為2-5。
120.如權(quán)利要求117所述的方法，進(jìn)一步包括蒸發(fā)含有醋酸鹽的那可汀洗脫液以濃縮那可汀洗脫液；在濃縮的那可汀洗脫液中加入一種苛性堿溶液沉淀出那可?。缓蛷目列詨A溶液中分離出沉淀的那可汀。
121.如權(quán)利要求120所述的方法，其中苛性堿溶液加入那可汀中將pH調(diào)至約為3.5-5.5。
122.如權(quán)利要求120所述的方法，其中苛性堿溶液選自氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化銨和堿金屬碳酸鹽。
123.如權(quán)利要求117所述的方法，進(jìn)一步包括蒸發(fā)含有醋酸鹽的那可汀洗脫液以濃縮那可汀洗脫液；用有機(jī)溶劑至少一次萃取濃縮的那可汀洗脫液；在濃縮的那可汀洗脫液中加入一種苛性堿溶液沉淀出那可?。缓蛷目列詨A溶液中分離出沉淀的那可汀。
124.如權(quán)利要求123所述的方法，其中在那可汀洗脫液中的那可汀的濃度范圍為約2克/升(0.27盎司/加侖)至約8克/升(1.07盎司/加侖)。
125.如權(quán)利要求123所述的方法，其中在那可汀洗脫液中的那可汀的濃度范圍為約6克/升(0.80盎司/加侖)至約7克/升(0.94盎司/加侖)。
126.如權(quán)利要求123所述的方法，其中用一種酸溶液對(duì)濃縮的那可汀洗脫液進(jìn)行的至少一種萃取是在pH約為3.0-5.0時(shí)進(jìn)行的。
127.如權(quán)利要求123所述的方法，其中用一種酸溶液對(duì)濃縮的那可汀洗脫液進(jìn)行的至少一種萃取是在pH約為3.9-4.1時(shí)進(jìn)行的。
128.如權(quán)利要求123所述的方法，其中有機(jī)溶劑選自甲苯、乙酸乙酯、氯仿、異丁醇和己烷。
129.如權(quán)利要求123所述的方法，其中用一種酸溶液對(duì)濃縮的那可汀洗脫液進(jìn)行的至少一種萃取包括有機(jī)溶劑對(duì)水溶液的比率范圍為約0.5-3.0。
130.如權(quán)利要求123所述的方法，其中用一種酸溶液對(duì)濃縮的那可汀洗脫液進(jìn)行的至少一種萃取包括有機(jī)溶劑對(duì)水溶液的比率范圍為約0.9-1.2。
131.如權(quán)利要求123所述的方法，其中用一種酸溶液對(duì)濃縮的那可汀洗脫液進(jìn)行的至少一種萃取包括加入了一種堿。
132.如權(quán)利要求131所述的方法，其中堿選自氫氧化鈉、氫氧化銨和氫氧化鉀。
133.如權(quán)利要求131所述的方法，其中堿包括約50毫克/毫升(6.68盎司/加侖)至750毫克/毫升(100.0盎司/加侖)的氫氧化鈉。
134.如權(quán)利要求131所述的方法，其中堿包括約150毫克/毫升(20.0盎司/加侖)至350毫克/毫升(46.7盎司/加侖)的氫氧化鈉。
135.如權(quán)利要求123所述的方法，其中用一種有機(jī)溶劑對(duì)濃縮的那可汀洗脫液進(jìn)行的至少一種萃取中包括攪拌預(yù)定長(zhǎng)的時(shí)間和隨后使溶液靜置預(yù)定長(zhǎng)的時(shí)間。
136.如權(quán)利要求135所述的方法，其中在用有機(jī)溶劑至少一次萃取濃縮的那可汀洗脫液期間用于攪拌的預(yù)定長(zhǎng)的時(shí)間是至少一分鐘，和在至少一次萃取濃縮的那可汀洗脫液期間用于靜置的時(shí)間是至少十分鐘。
137.如權(quán)利要求123所述的方法，其中在濃縮的那可汀洗脫液中加入苛性堿溶液以沉淀那可汀步驟中，那可汀洗脫液的濃度范圍為約2克/升(0.27盎司/加侖)至約10克/升(1.34盎司/加侖)。
138.如權(quán)利要求123所述的方法，其中在濃縮的那可汀洗脫液中加入苛性堿溶液以沉淀那可汀步驟中，那可汀洗脫液的濃度范圍為約4克/升(0.53盎司/加侖)至約8克/升(1.07盎司/加侖)。
139.如權(quán)利要求123所述的方法，其中在濃縮的那可汀洗脫液中加入苛性堿溶液以沉淀那可汀之前包括加入一種酸溶液。
140.如權(quán)利要求123所述的方法，其中酸溶液包括選自醋酸、鹽酸、有機(jī)酸和無(wú)機(jī)酸中的一種酸。
141.如權(quán)利要求123所述的方法，在接近加入酸溶液之時(shí)體系的pH約為1.0-3.5。
142.如權(quán)利要求123所述的方法，在接近加入酸溶液之時(shí)體系的pH約為2.5-3.2。
143.如權(quán)利要求123所述的方法，其中苛性堿溶液選自氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化銨和堿金屬碳酸鹽。
144.如權(quán)利要求123所述的方法，其中在濃縮的那可汀洗脫液中加入苛性堿溶液調(diào)節(jié)pH至約4.0-12.0。
145.如權(quán)利要求123所述的方法，其中在濃縮的那可汀洗脫液中加入苛性堿溶液調(diào)節(jié)pH至約4.9-5.2。
146.如權(quán)利要求123所述的方法，其中苛性堿溶液的濃度范圍約為100克/升(13.35盎司/加侖)至約500克/升(66.76盎司/加侖)。
147.如權(quán)利要求123所述的方法，其中苛性堿溶液的濃度范圍約為200克/升(13.35盎司/加侖)至約300克/升(40.06盎司/加侖)。
148.如權(quán)利要求123所述的方法，其中從苛性堿溶液中分離出沉淀的蒂巴因是在最終溫度低于25攝氏度(77華氏度)時(shí)進(jìn)行的。
149.如權(quán)利要求1所述的方法，其中至少一種流動(dòng)相包括一種溶劑和麻醉生物堿洗脫液包括罌粟堿。
150.如權(quán)利要求150所述的方法，其中溶劑選自乙腈、甲醇和異丙醇。
151.如權(quán)利要求1所述的方法，進(jìn)一步包括在將所有的麻醉生物堿回收后重新利用固定相介質(zhì)，可通過(guò)應(yīng)用另一種流動(dòng)相至制備色譜柱將雜質(zhì)帶出到制備色譜柱的上部進(jìn)行。
152.一種分離至少一種麻醉生物堿的方法，包括添加粗的麻醉生物堿至包含固定相介質(zhì)的色譜柱上；在色譜柱上加入酸溶液；從色譜柱上回收嗎啡洗脫液、可待因洗脫液和隨后的東罌粟堿洗脫液；將至少一種有機(jī)溶劑加到色譜柱上；和從色譜柱上回收蒂巴因洗脫液和隨后的那可汀洗脫液。
153.一種分離至少一種麻醉生物堿的方法，包括添加粗的麻醉生物堿至包含固定相介質(zhì)的色譜柱上；在色譜柱上加入一種酸溶液，酸溶液的pH約為2-5；從色譜柱上回收嗎啡洗脫液；從色譜柱上回收可待因洗脫液；從色譜柱上回收東罌粟堿洗脫液；將pH約為2-5的第一有機(jī)溶劑加到色譜柱上；從色譜柱上回收蒂巴因洗脫液和那可汀洗脫液；將pH約為2-5的第二有機(jī)溶劑加到色譜柱上；從色譜柱上回收那可汀洗脫液。
154.一種分離至少一種麻醉生物堿的方法，包括添加粗的麻醉生物堿至包含壓實(shí)的固定相介質(zhì)的色譜柱上；在色譜柱上加入一種酸溶液，酸溶液的pH約為2-5；從色譜柱上回收嗎啡洗脫液；在嗎啡洗脫液中加入苛性堿溶液形成沉淀；從苛性堿溶液中分離出沉淀的嗎啡；從色譜柱上回收可待因洗脫液；蒸發(fā)濃縮可待因洗脫液；在濃縮的可待因洗脫液加入苛性堿溶液形成沉淀；從苛性堿溶液中分離出沉淀的可待因；從色譜柱上回收東罌粟堿洗脫液；在東罌粟堿洗脫液中加入苛性堿溶液形成沉淀；從苛性堿溶液中分離出沉淀的東罌粟堿；將第一有機(jī)溶劑加到色譜柱上；從色譜柱上回收蒂巴因洗脫液那可汀洗脫液；蒸發(fā)含有醋酸鹽溶液的蒂巴因洗脫液使之濃縮；在濃縮的蒂巴因洗脫液加入苛性堿溶液形成沉淀；從苛性堿溶液中分離出沉淀的蒂巴因；將第二有機(jī)溶劑加到色譜柱上；從色譜柱上回收那可汀洗脫液；蒸發(fā)含有醋酸鹽溶液的那可汀洗脫液使之濃縮；在濃縮的那可汀洗脫液加入苛性堿溶液形成沉淀；從苛性堿溶液中分離出沉淀的那可汀。
155.一種用于分離至少一種麻醉生物堿的系統(tǒng)，包括一個(gè)具有流體室和介質(zhì)室的色譜柱，其直徑至少為5厘米(1.97英寸)，并且具有一個(gè)入口和出口；包括一個(gè)具有上下兩面的平板的活塞和一根具有第一末端和第二末端的桿，其中桿的第二末端連接在平板的上面和活塞位于色譜柱中；和一個(gè)液壓供給裝置，它提供給流體室流體使得活塞往下運(yùn)動(dòng)并壓縮位于平板下表面和色譜柱底部之間的固定相介質(zhì)，其中粗的麻醉生物堿溶液從入口流入，接著也是在該色譜柱入口加入至少一種流動(dòng)相，其中至少一種麻醉生物堿隨后從色譜柱的出口洗脫。
156.如權(quán)利要求155所述的系統(tǒng)，其中液壓供給裝置包括與泵通過(guò)流體連通的活塞，其中泵與液壓貯存池通過(guò)流體連通。
157.一種用于分離至少一種麻醉生物堿的系統(tǒng)，包括一個(gè)具有流體室和介質(zhì)室的色譜柱，其直徑至少為5厘米(1.97英寸)，并且具有一個(gè)入口和出口；包括一個(gè)具有上下兩面的平板的活塞和一根具有第一末端和第二末端的桿，其中桿的第二末端連接在平板的上面和活塞位于色譜柱中；和一個(gè)液壓供給裝置，它提供給液壓體流體使得活塞往下運(yùn)動(dòng)并壓縮位于平板下表面和色譜柱底部之間的固定相介質(zhì)，其中粗的麻醉生物堿溶液從入口流入，接著也是在該色譜柱入口加入至少一種流動(dòng)相，其中至少一種麻醉生物堿隨后從色譜柱的出口洗脫。
158.一種用于分離至少一種麻醉生物堿的系統(tǒng)，包括一個(gè)具有流體室和介質(zhì)室的色譜柱，其直徑至少為5厘米(1.97英寸)，并且具有入口和出口；包括一個(gè)具有上下兩面的平板的活塞和一根具有第一末端和第二末端的桿，其中桿的第二末端連接在平板的上面和活塞位于色譜柱中；和一個(gè)液壓供給裝置，它提供給流體室流體使得活塞往下運(yùn)動(dòng)并壓縮位于平板下表面和色譜柱底部之間的至少0.255千克(8.995盎司)的固定相介質(zhì)，其中至少0.255克(0.009盎司)的粗的麻醉生物堿溶液從入口流入，接著也是在該色譜柱入口加入至少一種流動(dòng)相，其中至少0.255克(0.009盎司)的至少一種麻醉生物堿隨后從色譜柱的出口洗脫。
159.一種用于分離至少一種麻醉生物堿的系統(tǒng)，包括一個(gè)具有流體室和介質(zhì)室的色譜柱，其直徑至少為5厘米(1.97英寸)，并且具有入口和出口；包括一個(gè)具有上下兩面的平板的活塞和一根具有第一末端和第二末端的桿，其中桿的第二末端連接在平板的上面和活塞位于色譜柱中；和一個(gè)液壓供給裝置，它提供給流體室流體使得活塞往下運(yùn)動(dòng)并壓縮位于平板下表面和色譜柱底部之間的固定相介質(zhì)，其中至少0.255克(0.009盎司)的粗的麻醉生物堿溶液從入口流入，接著也是在該色譜柱入口加入至少一種流動(dòng)相，其中至少一升(0.264加侖)的至少一種麻醉生物堿隨后從色譜柱的出口洗脫。
160.一種用于分離至少一種麻醉生物堿的系統(tǒng)，包括一個(gè)具有流體室和介質(zhì)室的色譜柱，其直徑至少為5厘米(1.97英寸)，并且具有入口和出口；包括一個(gè)具有上下兩面的平板的活塞和一根具有第一末端和第二末端的桿，其中桿的第二末端連接在平板的上面和活塞位于色譜柱中；和一個(gè)液壓供給裝置，它提供給流體室流體使得活塞往下運(yùn)動(dòng)并壓縮位于平板下表面和色譜柱底部之間的固定相介質(zhì)，至少一種閥門(mén)裝置，它允許固定相介質(zhì)流入色譜柱的入口并在固定相介質(zhì)壓縮時(shí)移走流體，其中該閥門(mén)裝置在壓縮固定相介質(zhì)后能允許粗的麻醉生物堿溶液從色譜柱的入口流入，接著也是在該色譜柱入口加入至少一種流動(dòng)相，其中至少一種閥門(mén)裝置允許至少一種麻醉生物堿隨后從色譜柱的出口洗脫。
161.如權(quán)利要求160所述的系統(tǒng)，其中至少一種閥門(mén)裝置包括至少一種可選擇地允許流體通過(guò)的閥門(mén)。
162.如權(quán)利要求160所述的系統(tǒng)，進(jìn)一步包括一種檢測(cè)裝置用于確定從色譜柱的出口洗脫的麻醉生物堿的特定類(lèi)型。
163.一種分離至少一種麻醉生物堿的系統(tǒng)，包括一個(gè)具有流體室和介質(zhì)室的色譜柱，其直徑至少為5厘米(1.97英寸)，該色譜柱的入口與第一閥門(mén)通過(guò)流體連通，所述閥門(mén)與液體槽通過(guò)流體連通，色譜柱的出口與第二閥門(mén)與洗脫槽通過(guò)流體連通，和一個(gè)與第三閥門(mén)通過(guò)流體連通的流體沖洗孔，其中第三閥門(mén)與出口通過(guò)流體連通；包括一個(gè)具有上下面的平板的雙向活塞和一根具有第一末端和第二末端的桿，其中桿的第二末端連接在平板的上面，活塞位于色譜柱中用于壓縮位于平板下表面和色譜柱底部之間的固定相介質(zhì)；和一個(gè)水泵，它提供給雙向活塞流體使得雙向活塞往下運(yùn)動(dòng)并壓縮固定相介質(zhì)，其中流體是在固定相介質(zhì)壓縮后經(jīng)沖洗孔從色譜柱的出口通過(guò)第三閥門(mén)釋放的，因此粗的麻醉生物堿溶液可以從液體槽遞送到色譜柱的入口，接著當(dāng)?shù)谝婚y門(mén)開(kāi)啟時(shí)至少一種流動(dòng)相遞送到入口和至少一種麻醉生物堿從色譜柱的出口回收，并在第二閥門(mén)開(kāi)啟時(shí)進(jìn)入洗脫槽中。
全文摘要
用于分離至少一種麻醉生物堿的裝置和方法，其中包括將固定相介質(zhì)加載到高性能制備液相色譜柱上，添加粗的麻醉生物堿溶液至色譜柱上，在色譜柱上應(yīng)用一種流動(dòng)相，和從色譜柱上回收麻醉生物堿洗脫液。生物堿洗脫液被收集并被相互分離開(kāi)來(lái)處理。每一種分離的生物堿具有足夠的回收量和純度。
文檔編號(hào)B01D15/20GK1639166SQ03804869
公開(kāi)日2005年7月13日 申請(qǐng)日期2003年2月18日 優(yōu)先權(quán)日2002年2月28日
發(fā)明者恩里科·A·安托尼尼 申請(qǐng)人:馬林克羅特公司