專利名稱：層析顆粒介質(zhì)的制備方法
技術(shù)領域：
本發(fā)明涉及制備層析分離介質(zhì)的方法，特別是制備層析顆粒的聚合反應方法。
背景技術(shù)：
用于層析技術(shù)的多聚物顆?？赏ㄟ^雙相懸浮聚合反應合成。如美國專利4,340,483,48711824和6,423,666。具體方法是在雙相懸浮系統(tǒng)的連續(xù)相中，懸浮液相形成的液滴為單體混合物，其由一種或多種可聚合的單體及交聯(lián)劑組成并在液滴中聚合。如單體混合物由水溶性的單體及水溶性的交聯(lián)劑組成時，至少部分與水不溶的有機液體被用作懸浮反應的連續(xù)相。相反，為懸浮相為非溶于水的單體及非溶于水的交聯(lián)劑組成的混合物。水則作為懸浮聚合反應的連續(xù)相。而可聚合的單體可帶有各種特殊的功能基團，如可離子化的化學基團可用作離子交換樹脂，帶不同長度的烴鏈(碳氫鏈)用于疏水作應和反相層析樹脂。可聚合的單體也可帶有反應基團，并在填充顆粒形成后衍生成各種特性，如美國專利U.S.Pat.No.4,340,483所使用的甘氨酰甲基丙烯酸甲脂中的環(huán)氧基團。多聚物顆粒的硬度決定于交聯(lián)劑在單體混合物中的相對濃度。為美國專利U.S.Pat.No.4,340,483所描述交聯(lián)劑占總單體混合物的克分子比可從0.3到0.97。對于像蛋白，核酸等類大分子很難擴散到用此方法合成的多聚物內(nèi)。故大分子只能與多聚物表面的功能基團結(jié)合。因此，用以上方法合成的多聚物層析介質(zhì)常表現(xiàn)出低載量，低溶質(zhì)擴散性，低生產(chǎn)率。

發(fā)明內(nèi)容
為了克服現(xiàn)有技術(shù)的不足之處，本發(fā)明提供了一種利用二步聚合反應法制備層析顆粒介質(zhì)的方法。
第一步，介質(zhì)單體混合物中的介質(zhì)單體和交聯(lián)劑在雙相懸浮系統(tǒng)中聚合成顆粒。交聯(lián)劑相對于介質(zhì)單體混合物的相對克分子比為0.5到1.0。由于在介質(zhì)單體混合物中含有大量的交聯(lián)劑，而且由于立體構(gòu)象的限制，大部分交聯(lián)劑中只有其中一個反應基團(如雙鍵)能參與聚合反應，而留下第二個沒反應的自由的反應基團。多聚物顆粒被收集并清洗。
第二步，上述帶有大量自由反應基團的(如雙鍵)顆粒懸浮在帶功能基團的單體溶液中并通過聚合反應使多聚物的自由反應基團與功能單體一起聚合，所使用的功能單體的一端可共價地連接著各種不同的功能基團。功能單體即可為水溶性或非水溶性單體。由于功能單體為小分子化合物，容易擴散進多聚物的內(nèi)部并與其沒反應或自由的反應基團一起聚合。
本發(fā)明方法最大的優(yōu)勢是可通過控制起始劑的濃度及聚合反應的溫度有效地控制功能單體的聚合反應，而且水溶性及非水溶性的單體均可用于第二步的聚合反應。經(jīng)第二步聚合反應后，功能單體聚合成長鏈狀，高密度的功能基團并共價性地連接在多聚物表面形成一層厚的結(jié)合層，為溶質(zhì)的結(jié)合提供大量的結(jié)合位點，從而提高了層析介質(zhì)的載量和生產(chǎn)率。
因此，一方面，本發(fā)明還提供了一種制備具通透性孔的層析分離介質(zhì)的方法，該方法包括(a)形成由水溶液液滴及有機連續(xù)相組成的懸浮系統(tǒng)，所述的水溶液由介質(zhì)單體混合物溶于水組成，所述的介質(zhì)單體混合物由水溶性的可聚合的化合物與水溶性至少擁有二個反應基團的交聯(lián)劑組成，所述的介質(zhì)單體混物在水溶液中的重量百分比濃度為2％至50％。交聯(lián)劑占總介質(zhì)單體混合物的克分子比為0.5至1.0，聽述的有機連續(xù)相為至少部分不混溶于水的有機溶劑；(b)所述的液滴由可聚合的化合物和交聯(lián)劑組成，并通過聚合反應形成帶通透性孔的固體孔顆粒，所述的交聯(lián)劑至少帶一個自由反應基團；(c)清洗固體多孔顆粒以去除有機溶劑和未聚合的水溶性可聚合化合物以及水溶性交聯(lián)劑；(d)使功能單體與固體多孔顆粒中至少一個交聯(lián)劑上自由反應基團反應。在具體應用中，反應基團是雙鍵。
在另一方面，本發(fā)明提供了一種制備具通透性孔的層析分離介質(zhì)的方法，該法包括(a)形成由有機溶液液滴及水為連續(xù)相組成的懸浮系統(tǒng)，有機溶液由介質(zhì)單體混合物溶于至少部分不混溶于水的有機溶劑成，所述的介質(zhì)單體混合物由非水溶性的可聚合的化合物與非水溶性至少擁有二個反應基團的交聯(lián)劑組成，介質(zhì)單體混合物在有機溶液中的重量百分比濃度為2％至50％，交聯(lián)劑占總介質(zhì)單位混合物的克分子比為0.5至1.0；(b)所述的液滴由可聚合的化合物和交聯(lián)劑組成，并通過聚合反應形成具通透性孔的固體多孔顆粒，交聯(lián)劑擁有至少一個自由反基團；(c)清洗固體多孔顆粒以去除水及未聚合的非水溶性可聚合化合物以及非水溶性交聯(lián)劑；(d)使功能單體與固體多孔顆粒中至少一個交聯(lián)劑上自由反應基團反應。
本方法具體實施方案中，交聯(lián)劑的反應基團為雙鍵，在一些實施例中，顆粒內(nèi)通透性孔的平均直徑是0.1微米或小于0.1微米，在另一些實施例中，顆粒內(nèi)通透性孔的平均直徑為0.1微米至0.5微米，或大于0.5微米，在一些實施例中，交聯(lián)劑占介質(zhì)單體混合物的克分子比為大約0.7到0.9。
具體實施例方式
除非另外說明，下面使用的所有科技術(shù)語和本領域內(nèi)的通用術(shù)語具有同樣的意義。本文中所引用的所有專利、文章等都可以在參考文獻中找到全文。如果本文中的術(shù)語和所引用的文章中不一樣，以本申請的術(shù)語為準。
本發(fā)明的顆粒經(jīng)二步聚合反應方法合成。本發(fā)明的顆粒為不溶于水及許多有機溶劑的固體，并作為層析柱中的填充材料用作層析分離介質(zhì)仍保持固體狀態(tài)。本顆?？上衿渌麑游鲋鶅?nèi)的固體顆粒填充材料一樣使用。
聚合反應步驟的第一步需要一個雙相懸浮體系包括有機相和水相，如有機相為連續(xù)相，水相則被分散在有機相中，溶于水相中的水溶性可聚合的化合物及水深性交聯(lián)劑混合物經(jīng)聚合后形成顆粒。如水相為連續(xù)相，有機相則被分散在水相中，溶于有機相中的非水溶性可聚合化合物及非水溶性交聯(lián)劑混合物經(jīng)聚合后形成顆粒。
如上描述，介質(zhì)單體混合物既可為由水溶性可聚合化合物和水溶性交聯(lián)劑組成的混合物，或為由非水溶性可聚合化合物和非水溶性交聯(lián)劑組成的混合物，介質(zhì)單體混合物的重量百分比濃度為2％至大約50％，在一些實施例中，介質(zhì)單體混合物的重要百分比濃度為約20％至約40％。交聯(lián)劑占介質(zhì)單體混合物的克分子比可以為0.5至1.0，優(yōu)選為0.7至0.9，更優(yōu)選為0.75至0.85(如0.75)。
可聚合化合物通常是單體其聚合后形成顆粒的多聚物介質(zhì)，形成多聚物顆粒使用的可聚合化合物包括乙烯基，烯丙基和異丁烯基化合物，水溶性的化合物包括乙烯乙脂，乙烯醇，乙烯丙二醇，乙烯吡咯啉酮，丙烯酰胺，甲基丙烯酰胺，羥乙基甲基丙烯酸酯，羥丙基甲基丙烯酸酯，羥丙基丙烯酰胺，非水溶性化合物包括苯乙烯，羥基苯乙烯，羥甲基苯乙烯，羥基酚基，甲基丙烯酰胺，丙烯酸縮水甘油酯和甲基丙烯酸酯。
可用于本發(fā)明的交聯(lián)劑擁有至少二個反應基團(如二個雙鍵)，并與可聚合化學物反應中直到交聯(lián)作用。任何雙功能交聯(lián)劑均可使用。水溶性的交聯(lián)劑為雙丙烯酰胺，如N，N’-亞甲雙丙烯酰胺和哌嗪雙丙烯酰胺，非水溶性的交聯(lián)劑為雙丙烯脂，異丁烯脂或雙乙烯基類，如丙烯基甲基丙烯酸酯，雙丙烯基醚亞乙基雙丙烯酸酯，亞乙基雙甲丙烯酸酯，1，3-二丙烯氧基-2-丙醇和二乙烯基苯。
經(jīng)聚合反應及交聯(lián)后所形成顆粒中孔的直徑?jīng)Q定于多聚物的疏水性及介質(zhì)單體溶劑的極性。在一些具體表現(xiàn)，孔的平均直徑為0.1微米或小于0.1微米?？椎拇笮∫部赏ㄟ^在介質(zhì)單體溶劑中加入孔誘發(fā)劑進一步控制。
當使用孔誘性劑時，用的量并不苛刻，其最佳使用量可根據(jù)使用的誘發(fā)劑而改變。在每個實例中，其最佳用量本領域技術(shù)人員能很容易地在通過常規(guī)實驗來決定。適用于水相中介質(zhì)單體混合物的孔誘發(fā)劑包括(但不局限于)乙二醇，聚乙二醇，聚氧乙烯，多糖類如葡聚糖，和極性溶劑。極性溶劑包括常用于化學合成或高分子化學和一些已知技術(shù)。極性溶劑可以是醇，酮，四氫呋喃，二甲基甲酰胺，二乙基砜，甲基吡咯啉酮以及它們的混合物。適用于有機相中介質(zhì)單體混合物的孔誘發(fā)劑包括(但不局限于)甲苯，已烷，四氯乙烯或它們的混合物。這類孔誘發(fā)劑也可用作有機相中介質(zhì)單體混合物的有機溶劑。
用于水溶性介質(zhì)單體及交聯(lián)劑懸浮聚合反應的有機連續(xù)相中的有機溶液為至少部分不混溶于水的有機溶液，并對水相中的介質(zhì)單體混合物不起化學作用。任何符合上述性質(zhì)的廣泛的有機溶液均可使用。此類溶液包括開鏈碳化合物溶液，芳香族溶液及其他化學類型，其中石蠟族(鏈烷)和異鏈烷烴類溶液最佳。同樣，任何至少部分不混溶于水并能溶解非水溶性單體混合物的有機溶劑均可用于以水為連續(xù)相的有機懸浮相，此類有機溶劑如甲苯，乙烷，四氯乙稀或它們的混合物。
為使懸浮系統(tǒng)穩(wěn)定，可在連續(xù)相中加入懸浮劑或乳化劑，任何能溶于連續(xù)相中非離子形懸浮劑或乳化劑均可使用，如山梨聚糖的衍生物，乙氧基烷基酸類和聚乙氧基醚類。
聚合反應與常規(guī)的懸浮聚合反應步驟一樣，單體以分散形式懸浮于連續(xù)相中，聚合反應的起始劑或催化劑溶于介質(zhì)單體混合相中，現(xiàn)有技術(shù)中公知的聚合反應起始劑均可用于發(fā)明，如能產(chǎn)生自由基的起始劑，起始劑的濃度(占介質(zhì)單體混合液的百分比濃度)為約0.1％至約2％，最好是0.8至1.2％，適用于水溶性單體的起始劑包括(但不局限于)過硫酸銨/四甲基乙二胺(TEMED)，2.2’-偶氮基雙(2-氨丙基)鹽酸鹽，2，2’-偶氮雙(N，N’-二亞甲基異丁基胺)，4.4’-偶氮雙(4-氰基戊酸)，適用于非水溶性單體的引發(fā)劑包括(但不局限于)，2，2’-偶氮雙(2.4-二甲基戊腈)，2，2’-偶氮雙異丁腈，二甲基2，2’-偶氮雙異丁脂，1，1’-偶氮雙(1-環(huán)已烷羰基腈)，和2，2’-偶氮雙(2-甲基丁腈)。
介質(zhì)單體混合相與連續(xù)相分別配制，然后經(jīng)攪拌混合直至平衡，懸浮相液滴的大小可通過控制攪拌的方法，力度和乳化劑的用量。本發(fā)明中，液滴的大小并沒有限制，例如懸浮液滴可以為20微米至200微米。一旦懸浮系統(tǒng)形成后，通過增加溫度及吹入氮氣至聚合反應完成。
聚合反應完成后，顆粒經(jīng)收集，清洗以去除懸浮溶劑及沒參加反應的化合物。
本發(fā)明的第二步，以上帶大量沒參與反應或自由反應基團(如雙鍵)被懸浮在功能單體溶液當中，功能單體以共價鍵形式連接著不同的功能基團，功能單體既可為水溶性或非水溶性單體。
功能單體可為已知的，用于層析分離技術(shù)上作為吸附劑任何單體(如親和，疏水相互作用，離子交換等。)此類單體包括(但不限于)非離子型單體，離子型單體，親水單體，疏水單體和易反應單體。易反應單體是指單體上擁有特殊的功能基團可通過與其它分子發(fā)生化學反應并使其不可逆地連接到多聚物鏈上，用于本發(fā)明的功能單體包括鏈烴化合物，芳香族化合物或雜環(huán)化合物，但它們必須擁有可聚合反應的基團(如雙鍵)。舉例如，丙烯基，烯丙基，乙烯基化合物或類似化合物。
更明確地說，陰離子型的單體用作形成陰離子性的吸附劑(如陽離子交換介質(zhì))。用于陽離子交換介質(zhì)的功能基團(如連接在乙烯基單體上的)包括羧基(如丙烯酸)，磺酸基，(如丙烯酰胺基甲基丙磺酸，乙烯磺酸，和烯丙氧羥丙基磺酸)或磷酸基團(如，N-磷酸乙基丙烯酰胺)。
陽離子型的單體用作形成陽離子性的吸附劑包括以下功能基團，如氨基(如二乙氨乙基異丁烯酰胺，三甲氨乙基異丁烯酰胺，二烯丙基二甲基氯化胺，和烯丙基二甲氨)。
疏水型單體用于形成疏水作應吸附劑包括辛基丙烯酰胺，辛基異丁烯酰胺，苯基丙烯酰胺和丁基丙烯酰胺。
活性單體用于親和層析上形成預活化基團(這些預活性基團可進一步與新需配基結(jié)合)。包括脫水甘油丙烯酸酯，脫水甘油甲基丙烯酸酯，丙烯基脫水甘油醚，丙烯醛，丙烯酰胺基丁醛，二甲基乙縮醛，丙烯酸酐，丙烯酰氯N-丙烯酰琥珀酰亞胺和丙烯氯甲酸酯。
功能單體在溶劑中的重量百分比濃度為2％至80％。在具體應用中可以是20％至60％，溶劑可為水，水和有機溶液混合液或有機溶液，聚合反應所用的引發(fā)劑或催化劑加入到單體溶液中，起始劑的濃度可從0.2％至5％。前面所討論過的引發(fā)劑均可用于功能單體與多聚物顆粒中保留的反應基團(如沒參加聚合反應的雙鍵)發(fā)生聚合反應。多聚物顆粒與功能單體溶液混合并通過攪拌使懸浮液穩(wěn)定。顆粒在功能單體溶液中的體積百分比為10％至80％，最好是30％至60％(V/V)懸浮液經(jīng)加溫并吹進氮氣至聚合反應完成。
實施例以下將通過實施例進一步非限定性地說明本發(fā)明。
實施例一 用水溶性單體及水溶性交聯(lián)劑制備層析顆粒用水溶性單體及水溶性交聯(lián)劑制備層析顆粒描述如下第一步，制備帶雙鍵的基礎顆粒用以下化合物配制水溶液。
水 22.5毫升甲基吡咯啉酮 7.5毫升N，N’-亞甲基雙丙烯酰胺 4.5克羥丙基異丁烯酯 1.5毫升4.4’-偶氮雙(4-氰戊酸) 30毫克(水溶液用65℃溶解所有單體后加入起始劑)亞甲基雙丙烯酰胺和羥丙基異丁烯脂的總和占總?cè)芤旱闹亓堪俜直葹?1.0％。交聯(lián)劑占總單體的克分子比為0.75。溶液與由200毫升isoparH和2毫升sp-80組成的有機溶液混合。在65℃下用250rpm攪拌10分鐘吹入氮氣。聚合反應可在15分鐘內(nèi)發(fā)生，溫度因反應的放熱而在25分鐘內(nèi)增加至75℃。20分鐘后停止吹入氮氣，并保持攪拌二小時，合成的顆粒經(jīng)回收，甲醇清洗及55℃干燥。
第二步，制備用于陽離子交換介質(zhì)的層析顆粒。
用來自第一步的基礎顆粒制備陽離子交換介質(zhì)，其由以下化合物組成水 100毫升丙烯酸鈉 8克干燥基礎顆粒 4克(水合狀態(tài)約為25毫升)過硫酸銨 500毫克NNN’N’-四甲基乙二胺 1毫升丙烯酸鈉占總?cè)芤旱闹亓堪俜直葷舛葹?％，基礎顆粒占總?cè)芤旱闹亓堪俜直葹?％，溶液在室溫下用80rpm攪拌15分鐘，吹入氮氣，聚合反應大約在5分鐘內(nèi)開始，并在10分鐘內(nèi)溫度升至30℃，15分鐘后停止氮氣并繼續(xù)攪拌2小時，反應后的顆粒回收并清洗。
制備用于疏水反應介質(zhì)的層析顆粒。
用來自第一步的基礎顆粒制備疏水反應介質(zhì)，由以下化合物組成甲基吡咯啉酮 100毫升丁基丙烯酰胺 4克干燥基礎顆粒 4克2.2’-偶氮雙(2-甲基丁腈) 400毫克丁基丙烯酰胺占總?cè)芤旱闹亓堪俜直葷舛葹?％，基礎顆粒占總?cè)芤旱闹亓堪俜直葹?％，溶液在85℃下用80rpm攪拌15分鐘，吹入氮氣。聚合反應大約在5分鐘內(nèi)開始，并在10分鐘內(nèi)溫度到達89℃，15分鐘后停止氮氣并繼續(xù)攪拌2小時，反應后的顆?；厥詹⑶逑?。
實施例二 用非水溶性單體及非水溶性交聯(lián)劑制備層析顆粒。
用非水溶性單體及非水溶性交聯(lián)劑制備層析顆粒描述如下第一步，制備帶雙鍵的基礎顆粒用以下化合物配制有機溶液甲苯 10毫升二乙烯基苯 7毫升苯乙烯 2.4毫升2.2’-偶氮雙異丁腈 40毫克二乙烯基苯和苯乙稀的總和占總?cè)芤旱闹亓堪俜直葹?3％，交聯(lián)劑占總單體的克分子比為0.75。溶液與由150毫升水，7克PA-18(聚乙烯醇)和2毫升油酸鈉組成的水溶液混合，在65℃下用300rpm攪拌10分鐘，吹入氮氣20分鐘，并保持攪拌6小時，合成的顆粒經(jīng)回收，甲醇清洗并55℃干燥。
第二步，制備具環(huán)氧基活性基團的層析顆粒。
用來自第一步的基礎顆粒制備具環(huán)氧基活性基團的介質(zhì)，由以下化合物組成甲基吡咯啉酮 100毫升縮水甘油醚10毫升干燥基礎顆粒 6克2.2’-偶氮雙(2-甲基丁腈) 400毫克縮水甘油醚占總?cè)芤旱闹亓堪俜直葷舛葹?0％，基礎顆粒占總?cè)芤旱闹亓堪俜直葹?％，溶液在85℃下用80rpm攪拌15分鐘，吹入氮氣。聚合反應在15分鐘內(nèi)開始。30分鐘后停止氮氣并繼續(xù)攪拌2小時，反應后的顆?；厥詹⑶逑?。
制備用于陰離子交換介質(zhì)的層析顆粒。
用來自第一步的基礎顆粒制備陰離子交換介質(zhì)，由以下化合物組成甲基吡咯啉酮 50毫升水50毫升二乙氨乙基異丁烯酰胺 10毫升干燥基礎顆粒 6克4’4-偶氮雙(4-氰基戊酸) 400毫克二乙氨乙基異丁烯酰胺占總?cè)芤旱闹亓堪俜直葷舛葹?％，基礎顆粒占總?cè)芤旱闹亓堪俜直葹?％，溶液在85℃下用80rpm攪拌15分鐘吹入氮氣。聚合反應在15分鐘開始，30分鐘后停止氮氣并繼續(xù)攪拌2小時，反應后的顆?；厥詹⑶逑?。
權(quán)利要求
1.一種制備具通透性孔的層析分離介質(zhì)的方法，其包括一下步驟(a)形成由水溶液液滴有機連續(xù)相組成的懸浮系統(tǒng)，該水溶液由介質(zhì)單體混合物溶于水組成，介質(zhì)單體混合物包括水溶性的可聚合化合物與水溶性至少擁有二個雙鍵的交聯(lián)劑，介質(zhì)單體混合物在水溶液中的重量百分比濃度為2％到50％，交聯(lián)劑占總介質(zhì)單體混合物的克分子比為0.5至1.0，有機連續(xù)相為至少部分不混溶于水的有機溶劑；(b)液滴由可聚合的化合物和交聯(lián)劑組成，并通過聚合反應形成帶通透性孔的固體多孔顆粒，該交聯(lián)劑至少帶有一個自由雙鍵；(c)清洗固體多孔顆粒以除去有機溶劑，未聚合的水溶性可聚合化合物以及水溶性交聯(lián)劑；(d)使功能單體與固體多孔顆粒中至少一個交聯(lián)劑上的自由雙鍵反應。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中固體顆粒內(nèi)通透性孔的平均直徑為小于等于0.1微米。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中介質(zhì)單體混合物含有孔誘發(fā)劑。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其中孔誘發(fā)劑選自乙二醇，聚乙二醇，聚氧乙烯，多糖和極性溶劑。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其中極性溶劑選自醇、丙酮及它們的混合物。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中交聯(lián)劑占總介質(zhì)單體混合物的克分子比為0.7至0.9。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中介質(zhì)單體混合物在水溶液中的重量百分比濃度為20％至40％。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中聚合化合物為乙烯基，烯丙基，丙烯基和異丁烯基化合物。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其中聚合化合物選自乙烯乙脂，乙烯醇，乙烯丙二醇，乙烯吡咯啉酮，丙烯酰胺，甲基丙烯酰胺，羥乙基甲基丙烯酸酯，羥丙基甲基丙烯酸酯，羥丙基丙烯酰胺。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中交聯(lián)劑是雙丙烯酰胺。
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的方法，其中所述交聯(lián)劑是N，N’-亞甲雙丙烯酰胺或哌嗪雙丙烯酰胺。
12.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中有機溶劑是石蠟族液體和異鏈烷烴類液體。
13.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中有機溶劑中還包含溶于有機溶劑的乳化劑。
14.根據(jù)權(quán)利要求13所述的方法，其中乳化劑選自山梨聚糖的衍生物，乙氧烷基酚和聚乙氧基醚。
15.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中介質(zhì)單體混合物還包含一種聚合反應起始劑。
16.根據(jù)權(quán)利要求15所述的方法，其中聚合反應起始劑包括過硫酸銨/四甲基乙二胺(TEMED)，2，2’-偶氮雙(2-氨基丙烷)鹽酸鹽，2，2’-偶氮雙(N，N’-二亞甲基異丁基丙烯酰胺)和4，4’-偶氮雙(4-氰基戊酸)。
17.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中功能單體含有陰離子功能基團，其包括羧基，磺酸基和磷酸基。
18.根據(jù)權(quán)利要求17所述的方法，其中，陰離子功能基團是丙烯酸。
19.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中功能單體含有陽離子功能基團，其包括二乙氨乙基異丁烯酰胺，三甲氨乙基異丁烯酰胺，二烯丙基二甲基氯化胺和烯丙基二甲氨。
20.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中功能單體含有疏水功能基團，包括辛基丙烯酰胺，辛基異丁烯酰胺，苯基丙烯酰胺和丁基丙烯酰胺。
21.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中功能單體選自甘油酰丙烯酸酯，甘油酰甲基丙烯酸酯，丙烯基甘油酰醚，丙烯醛，丙烯酰胺基丁醛，二甲基乙縮醛，丙烯酸酐，丙烯酰氯，N-丙烯酰琥珀酰亞胺和烯丙基氯甲酸酯。
22.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中功能單體溶于溶劑中，該溶劑是水，水溶液和有機溶劑混合液，或有機溶劑。
23.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中功能單體溶于溶液中，溶液還含有一種聚合反應起始劑。
24.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法制備的顆粒狀層析分離介質(zhì)。
25.一種制備具通透性孔的層析分離介質(zhì)的方法，該方法包括一下步驟(a)形成由有機溶液液滴及水為連續(xù)相組成的懸浮系統(tǒng)，所述的有機溶液由介質(zhì)單體混合物溶于至少部分不混溶于水的有機溶劑組成。所述的介質(zhì)單體混合物由非水溶性的可聚合化合物和非水溶性至少擁有二個雙鍵的交聯(lián)劑組成，所述的介質(zhì)單體混合物在有機溶液中的重量百分比濃度為2％至50％，交聯(lián)劑占總介質(zhì)單體混合物的克分子比為0.5至1.0；(b)所述的液滴由可聚合的化合物和交聯(lián)劑組成，并通過聚合反應形成帶通透性孔的固體多孔顆粒，所述的交聯(lián)劑至少帶有一個自由雙鍵；(c)清洗固體多孔顆粒以去除水和未聚合的非水溶性可聚合化合物以及非水溶性交聯(lián)劑；(d)功能單體與固體多孔顆粒中至少一個交聯(lián)劑上的自由雙鍵反應。
26.根據(jù)權(quán)利要求25所述的方法，其中所述的固體顆粒內(nèi)通透性孔的平均直徑小于等于0.1微米。
27.根據(jù)權(quán)利要求25所述的方法，其中所述的介質(zhì)單體混合物含有孔誘發(fā)劑。
28.根據(jù)權(quán)利要求27所述的方法，其中所述的孔誘發(fā)劑選自甲苯，己烷，甲氯乙烯或它們的混合物。
29.根據(jù)權(quán)利要求25所述的方法，其中交聯(lián)劑占總介質(zhì)單體混合物的克分子比為0.7至0.9。
30.根據(jù)權(quán)利要求25所述的方法，其中介質(zhì)單體混合物在有機溶液中的重量百分比濃度為20％至40％。
31.根據(jù)權(quán)利要求25所述的方法，其中所述的可聚合化合物選自乙烯基，烯丙基，丙烯基和異丁烯基化合物。
32.根據(jù)權(quán)利要求30所述的方法，其中所述的可聚合化合物選自苯乙烯，羥苯乙烯，羥甲基苯乙烯，羥酚基甲基丙烯甲酰胺，甲基丙烯酸甘油酯和甲基丙烯酸酯。
33.根據(jù)權(quán)利要求25所述的方法，其中所述的交聯(lián)劑是雙丙烯酯，雙異丁烯酯或雙乙烯基。
34.根據(jù)權(quán)利要求33所述的方法，其中所述的交聯(lián)劑包括烯丙基甲基丙烯酸酯，二烯丙基醚，亞乙基二丙烯酸酯，亞乙基二甲基丙烯酸酯，1，3-二烯丙氧基-2-丙醇和二乙烯基苯。
35.根據(jù)權(quán)利要求25所述的方法，其中有機溶劑包括甲苯，乙烷，甲氯乙烯，或它們的混合物。
36.根據(jù)權(quán)利要求25所述的方法，其中介質(zhì)單位混合物還包含一種聚合反應起始劑。
37.根據(jù)權(quán)利要求36所述的方法，其中聚合反應起始劑選自包括2，2’-偶氮雙(2，4-二甲基戊腈)，2，2’-偶氮雙異丁基腈，二甲基2，2’-偶氮雙異丁脂，1，1’-偶氮雙(1-環(huán)己烷羰基腈)和2，2’-偶氮雙(2-甲基丁腈)。
38.根據(jù)權(quán)利要求25所述的方法，其中功能單體含有陰離子功能基團，其包括羧基，磺酸基和磷酸基。
39.根據(jù)權(quán)利要求25所述的方法，其中功能單體含有陽離子功能基團，其包括二乙氨乙基異丁烯酰胺，三甲氨乙基異丁烯酰胺，二烯丙基二甲基氯化胺和烯丙基二甲氨。
40.根據(jù)權(quán)利要求25所述的方法，其中功能單體含有疏水功能基團包括辛基丙烯酰胺，辛基異丁烯酰胺，苯基烯酰胺和丁基丙烯胺。
41.根據(jù)權(quán)利要求25所述的方法，其中功能單體選自縮水甘油丙烯酸脂，甲基丙烯酸酯，烯丙基縮水甘油醚，丙烯醛，丙烯酰胺基丁醛，二甲基乙縮醛，丙烯酸酐，丙烯酰氯和烯丙基二甲基胺。
42.根據(jù)權(quán)利要求25所述的方法，其中功能單體溶于溶液中，該溶液的溶劑為水，水溶液和有機溶劑混合液或有機溶劑。
43.根據(jù)權(quán)利要求25所述的方法，其中功能單體溶于溶液中，該溶液還含有一種聚合反應起始劑。
44.根據(jù)權(quán)利要求25所述的方法制備顆粒狀的層析分離介質(zhì)。
全文摘要
本發(fā)明涉及利用二步聚合反應制備層析顆粒的方法。該方法包括介質(zhì)單體混合物中的介質(zhì)單體及交聯(lián)劑溶解于被懸浮在連續(xù)相中的液體液滴中，并聚合成顆粒。該顆粒內(nèi)含有大量擁有至少一個未反應或如雙鍵的自由反應基團的交聯(lián)劑。所述的顆粒被懸浮在功能單體的溶液中，顆粒上自由反應基團與功能單體反應形成具有功能基團的層析顆粒。
文檔編號B01J20/26GK1689695SQ20041003884
公開日2005年11月2日 申請日期2004年4月30日 優(yōu)先權(quán)日2004年4月30日
發(fā)明者廖佳明, 姜濤 申請人:北京高潤通生物技術(shù)有限公司