專利名稱：一種飼用腸溶微丸酶的生產(chǎn)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及飼料添加劑，特別指飼用腸溶微丸酶的生產(chǎn)方法。
背景技術(shù)：
酶，其本質(zhì)是蛋白質(zhì)，蛋白質(zhì)在酸、熱等條件下容易變性，而酶蛋白變性后其空間結(jié)果發(fā)生改變。但酶蛋白要發(fā)生其催化功能必須在其特定的空間條件下才能發(fā)生其催化效果，故變性的酶蛋白就不具有其本身所具有的特定功能一催化生化反應(yīng)了。目前市場(chǎng)上所有的酶制劑絕大部分都是簡(jiǎn)單的包埋處理后的產(chǎn)品，當(dāng)然還有一部分包膜的產(chǎn)品，但這種包膜的產(chǎn)品只是用于部分隔熱，以消除飼料加工過(guò)程中的高溫高濕對(duì)酶活性的影響。在畜禽的體內(nèi)，特別是豬，由于食糜在胃中停留的時(shí)間在兩小時(shí)左右，其強(qiáng)酸性(pH2.0-3.0)環(huán)境會(huì)使很多的酶蛋白變性，從而降低酶的生物效價(jià)。如某種酸性纖維素酶用pH為2.5的緩沖液處理2小時(shí)，其酶活的損失達(dá)到86％，很大程度降低了纖維素酶的生物學(xué)效價(jià)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是針對(duì)背景技術(shù)中存在的缺點(diǎn)和問(wèn)題加以改進(jìn)，提供一種能夠使酶制劑順利通過(guò)胃的強(qiáng)酸環(huán)境，而到達(dá)小腸后迅速崩解發(fā)生作用，從而降低酶活性的損失，提高酶制劑的生物效價(jià)的腸溶微丸酶的生產(chǎn)方法。
本發(fā)明的生產(chǎn)方法包括以下步驟1)將液態(tài)酶和玉米淀粉以3∶5的比例混合均勻；2)將混合好的液態(tài)酶和玉米淀粉送入低溫顆粒搖擺機(jī)進(jìn)行搖擺造粒；3)再將成型后的顆粒使用球形拋丸機(jī)拋圓；
4)將拋圓后的光滑小丸用離心振動(dòng)篩分選出30-100目的小丸；5)將分選出的小丸用50℃低溫循環(huán)烘箱將小丸烘干；6)準(zhǔn)備腸溶包衣膜材將樹脂2和樹脂3號(hào)用1∶1的比例配好，再取95％的酒精溶液，將配好的樹脂與酒精溶液按1∶20的比例混合；7)用旋流流化床包衣機(jī)對(duì)小丸進(jìn)行包膜取小丸1份、腸溶包衣膜材2份，用包衣機(jī)把腸溶包衣膜材均勻噴灑到小丸，干燥后即為腸溶微丸酶成品。
本發(fā)明所述的微丸酶包括中性木聚糖酶、酸性木取糖酶、酸性纖維素酶、中溫α-淀粉酶、中性蛋酶等酶制劑。
利用本發(fā)明處理深層液態(tài)發(fā)酵生產(chǎn)的纖維素酶，可提高纖維素酶兩小時(shí)對(duì)pH＝2.5的酸性緩沖液的耐受性55.4％，即通過(guò)此技術(shù)處理的酶制劑的生物效價(jià)提高55.4％，這將很大的減少酶制劑在使用過(guò)程中的浪費(fèi)，產(chǎn)生巨大的經(jīng)濟(jì)、社會(huì)效益。
本發(fā)明相對(duì)顆粒酶而言通過(guò)試驗(yàn)后得出以下優(yōu)點(diǎn)和效果(一)溶出時(shí)間的試驗(yàn)準(zhǔn)確稱取1.000g腸溶的纖維素酶和木聚糖酶，分別溶解在40mL 0.1mol/L的pH＝5.50和pH＝6.80的檸檬酸-磷酸鹽緩沖液，磁力攪拌10、15、20、25、30、60分鐘后按本公司企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定纖維素酶和木聚糖酶酶活力。
在pH＝5.50條件下腸溶纖維素酶不同攪拌時(shí)間下的相對(duì)酶活力的試驗(yàn)結(jié)果

在pH＝6.80條件下腸溶纖維素酶不同攪拌時(shí)間下的相對(duì)酶活力的試驗(yàn)結(jié)果

在pH＝5.50條件下腸溶木聚糖酶不同攪拌時(shí)間下的相對(duì)酶活力的試驗(yàn)結(jié)果

在pH＝6.80條件下腸溶木聚糖酶不同攪拌時(shí)間下的相對(duì)酶活力的試驗(yàn)結(jié)果

該結(jié)果說(shuō)明，該腸溶的纖維素酶和木聚糖酶在pH＝5.50時(shí)能在30分鐘內(nèi)完全溶出，在十分鐘內(nèi)也有50％以上的溶出，而在pH＝6.80的情況下只需10分鐘就能完全溶出，這說(shuō)明，在畜禽的消化道中，當(dāng)腸溶纖維素酶和木聚糖酶到達(dá)小腸段，能在較短的時(shí)間內(nèi)完全溶出而發(fā)揮其功效。
(二)酸耐受性試驗(yàn)分別取1.000g腸溶的纖維素酶和木聚糖酶樣品，分別用pH為2.5、3.0、3.5、4.0、4.5、5.0、5.5、6.0、6.5、7.0的10mL檸檬酸-磷酸鹽緩沖液于37℃下振蕩2小時(shí)后，再用pH＝6.80的緩沖液磁力攪拌10-15分鐘后定溶至100mL，然后在纖維素酶和木聚糖酶的最適條件下檢測(cè)酶活力。同時(shí)，用相同的處理方法檢測(cè)顆粒狀的纖維素酶和木聚糖酶的樣品的酶活。
腸溶纖維素酶和顆粒酶處理后相對(duì)酶活的試驗(yàn)結(jié)果

腸溶木聚糖酶和顆粒酶處理后相對(duì)酶活的試驗(yàn)結(jié)果

從以上的結(jié)果可以看出，經(jīng)過(guò)特殊加工工藝生產(chǎn)的腸溶酶，很大程度的提高了纖維素酶和木聚糖酶對(duì)酸的耐受性，尤其是對(duì)強(qiáng)酸性的如pH＝2.5時(shí)的耐受性，纖維素酶提高了55.4％，木聚糖酶提高了53％，而且腸溶酶的失活都在7％一下。因此，腸溶酶對(duì)于減少纖維素酶和木聚糖酶在畜禽消化道的前端如胃中失活有很好的效果。
(三)高溫高濕耐受性試驗(yàn)準(zhǔn)確稱取腸溶纖維素酶和木聚糖酶各1.000g于70℃、80℃、85℃、90℃、95℃、100℃下在恒溫水浴震蕩器中震蕩處理10分鐘，然后用pH6.80緩沖液磁力攪拌10-15分鐘后，測(cè)其活力。同時(shí)且顆粒狀纖維素酶和木聚糖酶各1.000g作同樣處理(相對(duì)酶活＝處理后剩余酶活/處理前酶活)腸溶纖維素酶和顆粒狀纖維素酶處理后相對(duì)酶活的試驗(yàn)結(jié)果

腸溶木聚糖酶酶和顆粒狀木聚糖酶處理后相對(duì)酶活的試驗(yàn)結(jié)果

從以上結(jié)果可以看出，腸溶纖維素酶在85℃時(shí)高溫高濕的耐受性達(dá)到了94.1％，相對(duì)于顆粒酶耐受性提高了17.5％，腸溶木聚糖酶則提高了19.3％，但同時(shí)也可以看出，該腸溶酶在100℃沒(méi)有很多程度的提高其高溫高濕的耐受性。
具體實(shí)施例方式
中性木聚糖酶腸溶小丸的制作工藝如下取40000IU/mL的中性木聚糖酶發(fā)酵液600mL和950克玉米淀粉和50克的微晶纖維素酶充分混合后，使用搖擺式顆粒機(jī)進(jìn)行制丸，然后使用球形拋丸機(jī)將丸拋成光滑且有一定強(qiáng)度的小丸，制成小丸后低溫烘干。取中性木聚糖酶小丸1份用旋流流化床噴兩份樹脂2號(hào)和樹脂3號(hào)(1∶1)的5％的酒精溶液后干燥。
酸性木聚糖酶腸溶小丸的制作方法如下取30000IU/mL的酸性木聚糖酶發(fā)酵液600mL和950克玉米淀粉和50克的微晶纖維素充分混合后，使用搖擺式顆粒機(jī)進(jìn)行制丸，然后使用球形拋丸機(jī)將丸拋成光滑且有一定強(qiáng)度的小丸，制成小丸后低溫烘干。取酸性木聚糖酶小丸1份用旋流流化床噴兩份樹脂2號(hào)和樹脂3號(hào)(1∶1)的5％的酒精溶液后干燥。
酸性纖維素酶腸溶小丸的制作方法取1800IU/mL的酸性木聚糖酶發(fā)酵液600mL和950克玉米淀粉和50克的微晶纖維素酶充分混合后，使用搖擺式顆粒機(jī)進(jìn)行制丸，然后使用球形拋丸機(jī)將丸拋成光滑且有一定強(qiáng)度的小丸，制成小丸后低溫烘干。取酸性纖維素酶小丸1份用旋流流化床噴兩份樹脂2號(hào)和樹脂3號(hào)(1∶1)的5％的酒精溶液后干燥。
中性蛋白酶腸溶小丸的制作方法取高濃縮的中性蛋白酶50、玉米淀粉10、微晶纖維素10、30％聚乙二醇水溶液30充分混合后，使用搖擺式顆粒機(jī)進(jìn)行制丸，然后使用球形拋丸機(jī)將丸拋成光滑且有一定強(qiáng)度的小丸，制成小丸后低溫烘干。取中性蛋白酶小丸1份用旋流流化床噴兩份樹脂2號(hào)和樹脂3號(hào)(1∶1)的5％的酒精溶液后干燥。
中溫α-淀粉酶腸溶小丸的制作方法取高濃縮的中溫α-淀粉酶50、玉米淀粉10、微晶纖維素10、30％聚乙二醇水溶液30充分混合后，使用搖擺式顆粒機(jī)進(jìn)行制丸，然后使用球形拋丸機(jī)將丸拋成光滑且有一定強(qiáng)度的小丸，制成小丸后低溫烘干。取中溫α-淀粉酶小丸1份用旋流流化床噴兩份樹脂2號(hào)和樹脂3號(hào)(1∶1)的5％的酒精溶液后干燥。
本發(fā)明上述各工藝制出的是小丸屬于單酶，該小丸具有在強(qiáng)酸條件下不崩解而在PH＝5.0以上以及一定的離子濃度條件下迅速崩解的特性。
本發(fā)明還可以制作成腸溶微丸復(fù)合酶，其各原料的重量份的組成是0-40％；酸性木聚糖酶腸溶小丸0-40％；酸性纖維素酶腸溶小丸0-60％；中溫α-淀粉酶腸溶小丸0-20％中性蛋白酶腸溶小丸0-20％，玉米淀粉空白小丸0-60％。豬胃的pH值為1.5-3.5，而營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化吸收的主要場(chǎng)所-小腸的pH值為5.0-6.5。
用本發(fā)明制作的復(fù)合酶制劑亦能順利通過(guò)胃的強(qiáng)酸環(huán)境，而到達(dá)小腸后迅速崩解發(fā)生作用，故可降低酶活性的損失，提高酶制劑的生物效價(jià)。
權(quán)利要求
1.一種飼用腸溶微丸酶的生產(chǎn)方法，其特征在于它包括下列步驟1)將液態(tài)酶和玉米淀粉以3∶5的比例混合均勻；2)將混合好的液態(tài)酶和玉米淀粉送入低溫顆粒搖擺機(jī)進(jìn)行搖擺造粒；3)再將成型后的顆粒使用球形拋丸機(jī)拋光；4)將拋光后的光滑小丸用離心振動(dòng)篩分選出30-100目的小丸；5)將分選出的小丸用50℃低溫循環(huán)烘箱將小丸烘干；6)準(zhǔn)備腸溶包衣膜材將樹脂2和樹脂3號(hào)用1∶1的比例配好，再取95％的酒精溶液，將配好的樹脂與酒精溶液按1∶20的比例混合；7)用旋流流化床包衣機(jī)對(duì)小丸進(jìn)行包膜取小丸1份、樹脂溶液2份，用包衣機(jī)把樹脂溶液噴灑小丸，干燥后即為腸溶微丸酶成品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種飼用腸溶微丸酶的生產(chǎn)方法，其特征在于所述的微丸酶包括中性木聚糖酶、酸性木取糖酶、酸性纖維素酶、中溫α-淀粉酶、中性蛋白酶等酶制劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及飲料添加劑，特別指飼用腸溶微丸酶的生產(chǎn)方法。本發(fā)明的生產(chǎn)方法包括將液態(tài)酶和玉米淀粉以3∶5的比例混合均勻；將混合好的液態(tài)酶和玉米淀粉送入低溫顆粒搖擺機(jī)進(jìn)行搖擺造粒；再將成型后的顆粒使用球形拋丸機(jī)拋光；將拋光后的光滑小丸用離心振動(dòng)篩分選出30－100目的小丸；將分選出的小丸用50℃低溫循環(huán)烘箱將小丸烘干；準(zhǔn)備腸溶包衣膜材將樹脂2和樹脂3號(hào)用不著1的比例配好，再取5％的酒精溶液，將配好的樹脂與酒精溶液按1∶20的比例混合；用旋流流化床包衣機(jī)對(duì)小丸進(jìn)行包膜取小丸1份、樹脂溶液2份，用包衣機(jī)把樹脂溶液噴灑小丸，干燥后即為腸溶微丸酶成品。本發(fā)明可提高兩小時(shí)對(duì)pH＝2.5的酸性緩沖液的耐受性55.4％。
文檔編號(hào)B01J8/00GK1817173SQ20051013667
公開日2006年8月16日 申請(qǐng)日期2005年12月28日 優(yōu)先權(quán)日2005年12月28日
發(fā)明者周利芬 申請(qǐng)人:湖南尤特爾生化有限公司