專(zhuān)利名稱(chēng)：用于治療內(nèi)毒素血癥的內(nèi)毒素吸附材料的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物分離和生物醫(yī)學(xué)工程領(lǐng)域，特別涉及到一種用于治療內(nèi)毒素血癥的內(nèi)毒 素吸附材料及其制備方法。
背景技術(shù)：
內(nèi)毒素是革蘭氏陰性菌細(xì)胞壁的成分之一，是一種脂多糖和微量蛋白復(fù)合物。內(nèi)毒素血 癥是由于血液中細(xì)菌或病灶內(nèi)細(xì)菌釋放出大量細(xì)菌內(nèi)毒素至血液，或輸入大量?jī)?nèi)毒素污染的 液體而引起的一種病癥。內(nèi)毒素進(jìn)入血液后引起一系列反應(yīng)，最終導(dǎo)致器官壞死，不可逆休 克和死亡。據(jù)報(bào)告，美國(guó)每年約有十萬(wàn)病人死于革蘭氏陰性菌感染，臨床尚無(wú)有效的治療方法。目前許多藥物已用于內(nèi)毒素血癥的治療?？咕卦谥委煾腥拘约膊≈邪l(fā)揮著重要作用， 但若用于治療內(nèi)毒素血癥，可使內(nèi)毒素水平升高8倍?？寡装Y因子類(lèi)，抗內(nèi)毒素單克隆抗體 類(lèi)，抗腫瘤壞死因子(TNF)單克隆抗體類(lèi)，這些藥物價(jià)格昂貴以及可能引起過(guò)敏反應(yīng)，在臨 床上使用受限。由于內(nèi)毒素常以大分子聚合物形式存在，分子量約為106D，細(xì)胞因子分子量 約為12-17kD，常規(guī)的血液透析及腹膜透析療法對(duì)排除內(nèi)毒素、細(xì)胞因子無(wú)效。血液凈化療法對(duì)一些重大疑難性病癥有著獨(dú)特療效，是臨床不可缺少的重要手段，許多 吸附材料已應(yīng)用于血液凈化，從而除去血液中的有毒成份或致病物質(zhì)，達(dá)到凈化血液，緩解 和治療疾病的目的，如活性碳，大孔樹(shù)脂等。但活性碳、大孔樹(shù)脂對(duì)內(nèi)毒素沒(méi)有吸附選擇性， 在去除內(nèi)毒素的同時(shí)也去除了血液中不少蛋白質(zhì)，且血液相容性很差，效果也不明顯。固定 化多粘菌素B (Polymyxin B)凝膠雖有著較強(qiáng)的內(nèi)毒素吸附力，但蛋白損失量也是很明顯的， 其價(jià)格昂貴，且配基脫落后具有神經(jīng)毒性和腎毒性，因此并不適合從靜脈注射液中去除內(nèi)毒 素(中國(guó)專(zhuān)利，200410024717.6)。免疫吸附材料雖不影響血液中其它成分的水平，清除效 率高，但抗體的來(lái)源、制備純化等非常困難，且價(jià)格昂貴，當(dāng)抗體游離出材料表面，會(huì)引起 一系列免疫反應(yīng)。為解決現(xiàn)有吸附材料存在的問(wèn)題，應(yīng)主要從以下兩方面入手(1)分析內(nèi)毒素的結(jié)構(gòu)特 點(diǎn)以及與其它分子可能存在的相互作用方式，通過(guò)一定的合成手段，使吸附材料對(duì)內(nèi)毒素具
有多種作用方式，從而具有較高的選擇性；(2)采用廉價(jià)、易得的基質(zhì)和化合物合成吸附劑， 從而降低成本。發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是要解決現(xiàn)有內(nèi)毒素吸附材料存在的不足(1)吸附能力較弱，選擇性較 低；(2)制備成本較高，并提供一種價(jià)格低廉，對(duì)內(nèi)毒素具有較高選擇性和較大吸附能力的 吸附材料及其制備方法。本發(fā)明的構(gòu)思是(1)內(nèi)毒素分子類(lèi)脂A部分含有脂肪鏈，能夠與疏水基團(tuán)產(chǎn)生吸附作 用；(2)內(nèi)毒素分子類(lèi)脂A部分含有磷酸基團(tuán)，pKa為1.4，生理?xiàng)l件下帶負(fù)電，可以與陽(yáng)離 子基團(tuán)產(chǎn)生吸附作用；(3)半胱氨酸分子含有氨基、羧基、巰基三個(gè)活性基團(tuán)，作為間隔臂 末端分子可同時(shí)偶聯(lián)疏水、陽(yáng)離子兩種基團(tuán)，通過(guò)兩種基團(tuán)與內(nèi)毒素的吸附作用，實(shí)現(xiàn)提高 吸附劑對(duì)內(nèi)毒素的吸附量和選擇性，減少對(duì)血液中其它有益成分非特異性吸附的目的。本發(fā)明的技術(shù)方案是-一種用于治療內(nèi)毒素血癥的內(nèi)毒素吸附材料，其特征在于內(nèi)毒素吸附材料的組成包括載 體和功能基，以及連接載體和功能基的間隔臂分子三部分，其分子結(jié)構(gòu)示意如下CH2CHCH2—N: OH其中黑色圓球表示瓊脂糖凝膠；載體為表面含有羥基的瓊脂糖凝膠；間隔臂分子末端含有氨基和羧基兩個(gè)不同的官能團(tuán)； 功能基由季胺鹽陽(yáng)離子和疏水分子兩個(gè)基團(tuán)組成。 所述間隔臂末端分子為半胱氨酸。所述功能基團(tuán)的季胺鹽陽(yáng)離子為2， 3-環(huán)氧丙基三甲基氯化銨；所述功能基團(tuán)的疏水分 子為磺胺甲氧噠嗪。所述內(nèi)毒素吸附材料的制備方法，其特征在于該方法包括活化、偶聯(lián)間隔臂、偶聯(lián)功能 基三個(gè)步驟第一步瓊脂糖凝膠的活化反應(yīng)將瓊脂糖凝膠分散于同體積的丙酮中，加入N，N'羰基二咪唑作偶聯(lián)劑，用量為偶聯(lián)劑瓊脂糖為1:5-10 (w/v)， 20-4(TC下震蕩反應(yīng)1-2小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后抽濾，并用丙酮反復(fù)沖
洗，將殘留的偶聯(lián)劑沖洗掉，即得活化了的瓊脂糖凝膠。 第二步偶聯(lián)間隔臂將第一步所得活化了的瓊脂糖凝膠分散于相同體積的丙酮中，加入3, 3' -二氨丙基亞胺， 用量為3，3'-二氨丙基亞胺瓊脂糖的體積比為1:5-10， 20-40'C下震蕩反應(yīng)2-3小時(shí)。反應(yīng) 結(jié)束后抽濾，用去離子水沖洗，然后置于相同瓊脂糖凝膠體積的pH 3.9， 2-(N-嗎啉基)乙磺 酸水溶液中，加入溴乙酸，用量為溴乙酸瓊脂糖為1.0-1.2:10 (w/v)，調(diào)pH4.5-7.5，加 入1_(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽作縮合劑，加入量為1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽瓊脂糖為0.6-0.8:10 (w/v)， 20-40'C， 150轉(zhuǎn)/分鐘的搖床中反應(yīng)2_4 小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后抽濾，使用大量去離子水沖洗凝膠；將該凝膠置于相同體積0.1M ， pH8.0 的磷酸緩沖液中，加入半胱氨酸，加入量為半胱氨酸瓊脂糖為1.0-1.5:10(w/v), 20-40°C， 150轉(zhuǎn)/分鐘的搖床中反應(yīng)2-4小時(shí)。反應(yīng)完畢后抽濾，用去離子水反復(fù)沖洗凝膠，即得偶聯(lián) 了間隔臂的載體。第三步偶聯(lián)功能基首先用瓊脂糖凝膠表面半胱氨酸的氨基與2， 3-環(huán)氧丙基三甲基氯化銨反應(yīng)。將偶聯(lián)了 半胱氨酸的瓊脂糖凝膠置于相同體積的去離子水中，加入2， 3-環(huán)氧丙基三甲基氯化銨，加 入量為2， 3-環(huán)氧丙基三甲基氯化銨瓊脂糖為1.0-1.3:10 (w/v)， 30-70。C下振蕩反應(yīng)2_3 小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后抽濾，并用去離子水反復(fù)清洗，得偶聯(lián)了 2， 3-環(huán)氧丙基三甲基氯化銨的 瓊脂糖凝膠。進(jìn)一步用瓊脂糖凝膠表面半胱氨酸的羧基與磺胺甲氧噠嗪反應(yīng)。將偶聯(lián)了 2， 3-環(huán)氧丙 基三甲基氯化銨的瓊脂糖凝膠分散到相同體積N,N-二甲基甲酰胺中，加入磺胺甲氧噠嗪，加 入量為磺胺甲氧噠嗪瓊脂糖為0.8-1.2:10 (w/v)，加入1-羥基苯并三唑、苯并三氮唑 -N,N，N',N'-四甲基脲六氟磷酸、二異丙基乙胺作縮合劑，加入量分別為l-羥基苯并三唑 瓊脂糖為0.2-0.4:10 (w/v)，苯并三氮唑-N， N， N', N'-四甲基脲六氟磷酸瓊脂糖為 0.4-0.6:10 (w/v)， 二異丙基乙胺瓊脂糖的體積比為0. 2-0. 4:10，溫度20-40°C, 150轉(zhuǎn)/ 分的搖床中反應(yīng)12-14小時(shí)。反應(yīng)完畢后抽濾，依次用DMF和去離子水清洗凝膠，即得目標(biāo) 吸附劑。所述的內(nèi)毒素吸附材料的用途，其特征在于吸附材料經(jīng)除菌、除熱源處理后，在室溫下， 將吸附材料裝入灌流柱，含內(nèi)毒素的血漿以10ml/min的流速灌流2-3小時(shí)；或?qū)⑽讲牧霞?入到含內(nèi)毒素的血漿中，靜態(tài)吸附2-3小時(shí)；其中吸附材料:血漿的體積比為1:3-10。選擇此技術(shù)方案的原因是
瓊脂糖凝膠親水性強(qiáng)，理化性質(zhì)穩(wěn)定，不受細(xì)菌和酶的作用，具有疏松的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，活 化后性質(zhì)穩(wěn)定，可用來(lái)作為吸附材料的載體。內(nèi)毒素內(nèi)毒素類(lèi)脂A部分同時(shí)含有磷酸基團(tuán)和 脂肪鏈，能夠與陽(yáng)離子基團(tuán)和疏水基團(tuán)產(chǎn)生吸附作用。間隔臂的末端分子為半胱氨酸，含氨 基、羧基和巰基三個(gè)官能團(tuán)，通過(guò)化學(xué)反應(yīng)可同時(shí)偶聯(lián)疏水、陽(yáng)離子兩種基團(tuán)。吸附材料與血漿體積比為1:3-10，此比例過(guò)小則血漿中的內(nèi)毒素去除率不高，此比例過(guò) 大則吸附材料沒(méi)有達(dá)到吸附飽和，浪費(fèi)了吸附材料。本發(fā)明的主要優(yōu)點(diǎn)是(1) 由于使用了瓊脂糖凝膠為載體，因此吸附材料理化性質(zhì)穩(wěn)定，且具有較好的血液相 容性。瓊脂糖凝膠具有大量可利用的官能團(tuán)，可提高配基的固定化密度。(2) 由于間隔臂分子末端含有氨基和羧基兩個(gè)官能團(tuán)，因此可將兩種與內(nèi)毒素相互作用的基團(tuán)陽(yáng)離子基團(tuán)和疏水基團(tuán)同時(shí)偶聯(lián)到載體表面，從而提高了吸附材料對(duì)內(nèi)毒素的吸附選擇性。(3) 由于所涉及到的參與化學(xué)反應(yīng)的分子來(lái)源廣泛廉價(jià)，反應(yīng)條件溫和，因此吸附材料 制作成本低廉。附表說(shuō)明表1是人血漿中的主要蛋白質(zhì)和內(nèi)毒素濃度在吸附前后的變化。取含內(nèi)毒素的人血漿進(jìn)行體外的模擬治療實(shí)驗(yàn)。吸附條件為取2ml吸附材料裝入層析柱，恒流泵控制流速10ml/min， 用10ml含內(nèi)毒素的人血漿室溫灌流2小時(shí)，取上清測(cè)各成分濃度。表中列出了吸附前后血漿 中內(nèi)毒素、白蛋白、球蛋白、總蛋白濃度，以及各成分的去除率。數(shù)據(jù)表明該吸附材料對(duì)人 血漿中的內(nèi)毒素有著較高的去除率，但對(duì)總蛋白的去除率較低，低于7%。表2是血漿中內(nèi)毒素的清除率與吸附材料體積的關(guān)系，分別取吸附材料lml、 1. 5ml、 3ml、 5ml置于50ml帶塞三角瓶，各加入15ml內(nèi)毒素初濃度為5. 08EU/ml血漿，37°C, 150轉(zhuǎn)/分 鐘的搖床中震蕩2.5小時(shí)，分別測(cè)上清液中內(nèi)毒素濃度，計(jì)算對(duì)內(nèi)毒素的清除率。數(shù)據(jù)表明 在一定血漿體系下，吸附材料用量對(duì)內(nèi)毒素去除率有著較大的影響。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例l:吸附材料的制備第一步瓊脂糖凝膠的活化反應(yīng)
取瓊脂糖凝膠100mL，用去離子水抽濾4-5次除去凝膠中的防腐劑，依次以5倍凝膠體 積的30%、 70%、 100% (v/v)的丙酮水溶液清洗凝膠，然后把洗好的凝膠置于100ml丙酮中， 加入10g N，N'羰基二咪唑(CDI)，在3(TC、 150轉(zhuǎn)/分鐘搖床中反應(yīng)2小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后抽 濾，用5倍凝膠體積的丙酮反復(fù)清洗已活化的凝膠，得活化了的瓊脂糖凝膠。第二步偶聯(lián)間隔臂將100ml活化了的瓊脂糖凝膠置于100ml的丙酮中，加入10mL的雙氨基試劑(二氨基二 丙基亞胺)，在30'C， 150轉(zhuǎn)/分的搖床中反應(yīng)2小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后抽濾，用5倍凝膠體積的 去離子水反復(fù)清洗反應(yīng)后的凝膠，然后置于100m12-(N-嗎啉基)乙磺酸水溶液(pH3.9)中， 加入12g溴乙酸，調(diào)pH 4. 5，加入6g 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDC HC1) 作縮合劑，在30'C， 150轉(zhuǎn)/分鐘的搖床中反應(yīng)2小時(shí)。反應(yīng)完畢后抽濾，用5倍凝膠體積的 去離子水沖洗凝膠；將該凝膠置于100ml O.IM磷酸緩沖液中(pH8.0)，加入10g半胱氨酸， 3(TC， 150轉(zhuǎn)/分鐘的搖床中反應(yīng)2小時(shí)。反應(yīng)完畢后抽濾，用5倍凝膠體積的去離子水沖洗 凝膠，即得偶聯(lián)了間隔臂的載體。第三步偶聯(lián)功能基首先用瓊脂糖凝膠表面半胱氨酸的氨基與2， 3-環(huán)氧丙基三甲基氯化銨反應(yīng)。將100ml 偶聯(lián)了半胱氨酸的瓊脂糖凝膠置于100ml的去離子水中，加入13g 2， 3-環(huán)氧丙基三甲基氯 化銨，70。C下攪拌反應(yīng)3小時(shí)。反應(yīng)結(jié)束后，過(guò)濾出載體，并用5倍凝膠體積的去離子水反 復(fù)清洗，得偶聯(lián)了2， 3-環(huán)氧丙基三甲基氯化銨的瓊脂糖凝膠。進(jìn)一步用瓊脂糖凝膠表面半胱氨酸的羧基與磺胺甲氧噠嗪反應(yīng)。將100ml偶聯(lián)了 2， 3-環(huán)氧丙基三甲基氯化銨的瓊脂糖凝膠分散到100ml N，N-二甲基甲酰胺(DMF)中，加入9g磺 胺甲氧噠嗪，加入2g 1-羥基苯并三唑(HOBt)， 4g苯并三氮唑-N,N,N，，N'-四甲基脲六氟磷 酸(HBTU) ， 2ml二異丙基乙胺(DIEA)作縮合劑，在溫度30°C, 150轉(zhuǎn)/分的搖床中反應(yīng)14 小時(shí)。反應(yīng)完畢后抽濾，依次用DMF和去離子水清洗凝膠，即得目標(biāo)吸附劑。實(shí)施例2:吸附材料、器皿的去熱源處理實(shí)驗(yàn)所接觸到的玻璃儀器于300'C干烤3小時(shí)去除熱源。塑料器皿于30%仏02過(guò)夜浸泡， 然后用無(wú)熱源水沖洗，晾干。所制備的吸附材料首先在1.5M NaOH溶液中過(guò)夜浸泡，然后置 于灌流柱，經(jīng)0.2M NaOH(含20y。乙醇)2ml/min淋洗1小時(shí)，最后分別用生理鹽水、無(wú)熱源 水淋洗以2ml/min淋洗l小時(shí)，即得除菌、除熱源的吸附材料。 實(shí)施例3:動(dòng)態(tài)吸附去除人血漿體系中的內(nèi)毒素.取2ml吸附材料裝入層析柱，室溫下恒流泵控制流速10ml/min，用10ml含內(nèi)毒素的人 血漿灌流2小時(shí)，取上清測(cè)各成分濃度。(表l)實(shí)施例4:靜態(tài)吸附去除人血漿體系中的內(nèi)毒素分別取吸附材料lml、 1.5ml、 3ml、 5ml，各加入15ml內(nèi)毒素初濃度為5. 08EU/ml血漿， 在37t:， 150轉(zhuǎn)/分鐘的搖床中震蕩2.5小時(shí)，靜置，測(cè)上清液中內(nèi)毒素濃度，計(jì)算對(duì)內(nèi)毒素 的清除率。附表表l:人血漿中的內(nèi)毒素和主要蛋白質(zhì)濃度在fe附前后的變化吸附前 吸附后 吸附率(%) 白蛋白 37.4g/L 34. lg/L 8.83 球蛋白20.5g/L 20g/L 2.44 總蛋白57.9g/L 5 4. lg/L 6.57內(nèi)毒素5.08EU/ml 2.22EU/ml 56.31表2:血漿中內(nèi)毒素的清除率與吸附材料體積的關(guān)系吸附材料 吸附后內(nèi)毒素濃度 吸附率體積 (EU/ml) (%)lml 3.03 40.291.5ml 2.69 46.993ml 2. 18 57.095ml1.70 66.509
權(quán)利要求
1.一種用于治療內(nèi)毒素血癥的內(nèi)毒素吸附材料，其特征在于內(nèi)毒素吸附材料的組成包括載體和功能基，以及連接載體和功能基的間隔臂分子三部分，其分子結(jié)構(gòu)示意如下其中黑色圓球表示瓊脂糖凝膠；載體為表面含有羥基的瓊脂糖凝膠；間隔臂分子末端含有氨基和羧基兩個(gè)不同的官能團(tuán)；功能基由季胺鹽陽(yáng)離子和疏水分子兩個(gè)基團(tuán)組成。
1. 一種用于治療內(nèi)毒素血癥的內(nèi)毒素吸附材料，其特征在于內(nèi)毒素吸附材料的組成包括 載體和功能基，以及連接載體和功能基的間隔臂分子三部分，其分子結(jié)構(gòu)示意如下OH其中黑色圓球表示瓊脂糖凝膠；載體為表面含有羥基的瓊脂糖凝膠；間隔臂分子末端含有氨基和羧基兩個(gè)不同的官能團(tuán)； 功能基由季胺鹽陽(yáng)離子和疏水分子兩個(gè)基團(tuán)組成。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的內(nèi)毒素吸附材料，其特征在于所述間隔臂末端分子為半胱氨酸。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的內(nèi)毒素吸附材料，其特征在于所述功能基團(tuán)的季胺鹽陽(yáng)離子為 2， 3-環(huán)氧丙基三甲基氯化銨；所述功能基團(tuán)的疏水分子為磺胺甲氧噠嗪。
4. 如權(quán)利要求l所述的內(nèi)毒素吸附材料的制備方法，其特征在于該方法包括活化、偶聯(lián) 間隔臂、偶聯(lián)功能基三個(gè)步驟-第一步瓊脂糖凝膠的活化反應(yīng)將瓊脂糖凝膠分散于同體積的丙酮中，加入N,N'羰基二咪唑作偶聯(lián)劑，用量為偶聯(lián)劑 瓊脂糖為1:5-10 (w/v)， 20-4CTC下震蕩反應(yīng)1-2小時(shí)；反應(yīng)結(jié)束后抽濾，并用丙酮反復(fù)沖 洗，將殘留的偶聯(lián)劑沖洗掉，即得活化了的瓊脂糖凝膠；第二步偶聯(lián)間隔臂將第一步所得活化了的瓊脂糖凝膠分散于相同體積的丙酮中，加入3， 3' -二氮丙基亞胺， 用量為3,3'-二氨丙基亞胺瓊脂糖的體積比為1:5-10， 20-40'C下震蕩反應(yīng)2-3小時(shí)；反應(yīng) 結(jié)束后抽濾，用去離子水沖洗，然后置于相同瓊脂糖凝膠體積的pH 3.9， 2-(N-嗎啉基)乙磺 酸水溶液中，加入溴乙酸，用量為溴乙酸瓊脂糖為1.0-1.2:10 (w/v)，調(diào)pH4.5-7.5，加 入1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽作縮合劑，加入量為1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽瓊脂糖為0. 6-0. 8:10 (w/v)， 20-40'C， 150轉(zhuǎn)/分鐘的搖床中反應(yīng)2-4 小時(shí)；反應(yīng)結(jié)束后抽濾，使用大量去離子水沖洗凝膠；將該凝膠置于相同體積O. 1M ， pH8.0的磷酸緩沖液中，加入半胱氨酸，加入量為半胱氨酸瓊脂糖為1.0-1.5:10 (w/v), 20-40 °C， 150轉(zhuǎn)/分鐘的搖床中反應(yīng)2-4小時(shí)；反應(yīng)完畢后抽濾，用去離子水反復(fù)沖洗凝膠，即得 偶聯(lián)了間隔臂的載體； 第三步偶聯(lián)功能基首先用瓊脂糖凝膠表面半胱氨酸的氨基與2， 3-環(huán)氧丙基三甲基氯化銨反應(yīng)；將偶聯(lián)了 半胱氨酸的瓊脂糖凝膠置于相同體積的去離子水中，加入2， 3-環(huán)氧丙基三甲基氯化銨，加 入量為2， 3-環(huán)氧丙基三甲基氯化銨瓊脂糖為1.0-1.3:10 (w/v)， 30-70。C下振蕩反應(yīng)2-3 小時(shí)；反應(yīng)結(jié)束后抽濾，并用去離子水反復(fù)清洗，得偶聯(lián)了 2, 3-環(huán)氧丙基三甲基氯化銨的 瓊脂糖凝膠；進(jìn)一步用瓊脂糖凝膠表面半胱氨酸的羧基與磺胺甲氧噠嗪反應(yīng)；將偶聯(lián)了 2， 3-環(huán)氧丙 基三甲基氯化銨的瓊脂糖凝膠分散到相同體積N，N-二甲基甲酰胺中，加入磺胺甲氧噠嗪，加 入量為磺胺甲氧噠嗪瓊脂糖為0.8-1.2:10 (w/v)，加入1-羥基苯并三唑、苯并三氮唑 -N，N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸、二異丙基乙胺作縮合劑，加入量分別為l-羥基苯并三唑 瓊脂糖為0.2-0.4:10 (w/v)，苯并三氮唑-N， N, N'， N'-四甲基脲六氟磷酸瓊脂糖為 0.4-0.6:10 (w/v)， 二異丙基乙胺瓊脂糖的體積比為0. 2-0. 4:10，溫度20-40°C, 150轉(zhuǎn)/ 分的搖床中反應(yīng)12-14小時(shí)；反應(yīng)完畢后抽濾，依次用DMF和去離子水清洗凝膠，即得目標(biāo) 吸附劑。
5.如權(quán)利要求l所述的內(nèi)毒素吸附材料的用途，其特征在于吸附材料經(jīng)除菌、除熱源處 理后，在室溫下，將吸附材料裝入灌流柱，含內(nèi)毒素的血漿以10ml/min的流速灌流2-3小時(shí)； 或?qū)⑽讲牧霞尤氲胶瑑?nèi)毒素的血漿中，靜態(tài)吸附2-3小時(shí)；其中吸附材料:血漿的體積比為 1:3-10。
全文摘要
本發(fā)明涉及生物分離和生物醫(yī)學(xué)工程領(lǐng)域中，用于治療內(nèi)毒素血癥的內(nèi)毒素吸附材料。該吸附材料是以瓊脂糖凝膠為載體，經(jīng)活化反應(yīng)偶聯(lián)間隔臂分子，然后偶聯(lián)季胺鹽陽(yáng)離子和疏水分子兩個(gè)基團(tuán)作為功能基制得。本吸附材料同時(shí)偶聯(lián)兩類(lèi)與內(nèi)毒素相互作用的基團(tuán)，從而提高了吸附材料對(duì)內(nèi)毒素的吸附選擇性。吸附材料理化性質(zhì)穩(wěn)定，且具有較好的血液相容性，可用來(lái)清除血漿中的內(nèi)毒素，從而治療內(nèi)毒素血癥。吸附材料制備過(guò)程簡(jiǎn)便、制作成本低廉，屬于新型內(nèi)毒素吸附材料。
文檔編號(hào)B01J20/22GK101157018SQ20071001250
公開(kāi)日2008年4月9日 申請(qǐng)日期2007年8月17日 優(yōu)先權(quán)日2007年8月17日
發(fā)明者張小銳, 賈凌云 申請(qǐng)人:大連理工大學(xué)