專利名稱：用于液相色譜分離系統(tǒng)中色譜柱的串聯(lián)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及液相色譜分離系統(tǒng)中色譜柱之間的連接，具體地說是用于液 相色譜色譜柱的串聯(lián)以增加色譜柱柱長的方法，利用該方法可以有效地將 兩根或多根色譜柱串聯(lián)以增加柱長，提高柱效。
背景技術(shù)：
高效液相色譜(HPLC)作為分析手段，其優(yōu)越性明顯，如適用范圍
廣，分離效率高，流動相和分析柱使用方式及填料選擇方便等特點(diǎn)。色譜
柱是HPLC分離過程中的核心，而反相色譜柱其分析能力強(qiáng)，常作為分析 柱的首選。隨著蛋白質(zhì)組學(xué)的發(fā)展，對于蛋白肽段等的分析需要更高效的 分析手段。在shot-gim技術(shù)中，常常先將蛋白酶解成肽段，作為全組織的 蛋白提取物，其蛋白數(shù)已有成千上萬個，酶解成肽段之后，待分析的肽段 還要增加幾十倍達(dá)到幾萬，幾十萬，甚至幾百萬。目前一般都采用反相柱 對其分離分析，但是對如此復(fù)雜的樣品進(jìn)行分析，要求柱效很高。目前增 加柱效的方法主要有減小柱填料顆粒直徑，減小柱內(nèi)徑，減小填料孔徑以 及增加色譜柱柱長等等。其中，減小柱填料顆粒直徑和孔徑時對篩板要求 增加，色譜柱反壓增大且容易堵塞色譜柱，成本很大；減小柱內(nèi)徑時流速 也會相應(yīng)降低，這樣就需要更小死體積的檢測池，要求很高；而增加柱長 則是一種很方便的方法，其不需要改變分離檢測系統(tǒng)中的其他配置。目前 增加柱長采用的方法為填充更加長的色譜柱，但是填充更長的色譜柱時需 要非常高壓力來壓實(shí)填料，這樣一般的裝柱儀器達(dá)不到要求，即使能達(dá)到 要求的儀器，其色譜柱的柱管及其連接處也很難滿足高壓的要求。
目前國外有人報道[文獻(xiàn)1 J. Chromatogr.A2006， 1109, 191-196.]對內(nèi)徑 為4.6 mm的色譜柱之間采用金屬連接管和兩個金屬連接頭進(jìn)行連接，該方 法可以增加柱長，但是會引入較大死體積，且連接處在高壓力條件下可能 出現(xiàn)漏液等問題；并且這種方法非常不適合目前在蛋白柱樣品分析時采用 的微柱連接，因?yàn)榻档椭鶅?nèi)徑時流速也降低，引入死體積過大時會大大降 低柱效，有時會比單根分析柱的柱效低。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種用于液相色譜分離系統(tǒng)中色譜柱的串聯(lián)方 法，其可以有效地增加色譜柱柱長，在保證最小柱連接時死體積的情況下， 極大提高柱效。
為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為
用于液相色譜分離系統(tǒng)中色譜柱的串聯(lián)方法，具體步驟如下
31) 在主體色譜柱與被接色譜柱的連接端分別對應(yīng)的設(shè)有一個金屬或 PEEK連接頭；
2) 在主體色譜柱和被接色譜柱連接端的端面分別設(shè)置一個篩板，用與
連接頭相匹配的、金屬或PEEK材料的二通將主體色譜柱與被接色譜柱串 接為一體，通過二通與連接頭上相對應(yīng)的內(nèi)外螺紋將色譜柱與二通鎖緊。
在主體色譜柱與被接色譜柱的連接端端頭外側(cè)最好分別設(shè)置一嵌環(huán)， 連接頭置于嵌環(huán)的內(nèi)側(cè)。
所述主體色譜柱與被接色譜柱可為相同或不同內(nèi)徑的色譜柱；其內(nèi)可 填裝有相同或不同的色譜填料；其柱長可相同也可不相同。
本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn)
1. 提高柱效。目前越來越多的復(fù)雜樣品需要分析，而高效液相色譜則 作為最常用的高效的分析方法。然而目前色譜柱市場上很難提供單根柱效 很高的填充柱，所以很難對其分析，目前一般的作法是采用二維的分析方 法，但是這樣會需要更多的儀器配置，增加成本。本發(fā)明采用一個金屬或
者PEEK材料的二通和兩個色譜柱中常用的篩板將兩根或著多根色譜柱串 聯(lián)以增加柱長；串聯(lián)形成的色譜柱提高了單根色譜柱的柱效和分析能力， 為復(fù)雜樣品的分析提供更強(qiáng)大能力的分析柱。
2. 簡單明了。發(fā)明方法原理簡單，通過二通的連接很方便，該方法可 以很便捷地將兩根或多根色譜柱串聯(lián)起來，以提高色譜柱分析能力。
3. 連接時的死體積小。本發(fā)明在二通兩端都使用篩板，可以有效減少 柱連接時的死體積，并防止色譜柱中的填料被沖出。
4. 使用方便。本發(fā)明串聯(lián)的色譜柱可以方便拆卸，并且拆卸后可重新 安裝使用，亦可更換一根或單根新柱用于串聯(lián)。
5. 應(yīng)用效果好。本發(fā)明可為蛋白組學(xué)等復(fù)雜樣品分析領(lǐng)域提供高效的 分析色譜柱。在實(shí)際應(yīng)用中，如蛋白質(zhì)酶解肽段的分析，通過串聯(lián)柱在小 于7個小時的時間內(nèi)的分析結(jié)果可以與大于20小時的二維分析結(jié)果相媲 美，有著廣泛的應(yīng)用前景。
圖1為本發(fā)明方法采用的各個部件間串聯(lián)的分解示意圖； 圖2為采用本發(fā)明串聯(lián)后的分析色譜柱結(jié)構(gòu)示意圖； 圖中標(biāo)號l為篩板，2為二通，3為金屬或PEEK連接頭(1/16或1/32)， A為主體色譜柱(1/16或1/32)， B為被接色譜柱(1/16或1/32)。
具體實(shí)施例方式
下面通過實(shí)例進(jìn)一步描述本發(fā)明，但不限于本實(shí)例。 實(shí)施例l 二根色譜柱的串聯(lián)
如圖l、圖2所示，用于液相色譜柱的串聯(lián)以增加色譜柱柱長的方法， 包括二通2 (金屬或PEEK材料)，兩個篩板l，與二通內(nèi)的螺紋可緊密相 連的金屬或PEEK連接頭3; —個二通加上兩個篩板l，可以將兩根色譜柱
4緊密相連，且可以耐受高壓。 具g操作過程如下
本例采用外徑為1/16，內(nèi)徑為300 pm的色譜柱A， B; A柱長為5 cm， B柱長為10cm; —個用于色譜柱連接的金屬二通2，其中間孔體積約為13 納升；兩個與二通螺紋匹配的1/16金屬連接頭；以及兩個可置于二通內(nèi)的 3 fim篩板。
a. 首先將一個金屬連接頭3穿套入主體色譜柱A的連接端，并將一個 篩板1放置于其端面上，然后通過金屬連接頭3與一個用于色譜柱連接的 二通2螺合，并將金屬連接頭3與二通2用扳手?jǐn)Q緊達(dá)到緊密相連；
b. 將另一個金屬連接頭3穿套入被接色譜柱B的連接端，并將一個篩 板1放置于其端面上，并通過被接色譜柱B上的金屬連接頭3與上述a步 驟中所用的二通2另一端相螺合，并用扳手?jǐn)Q緊。
依次將多根色譜柱，重復(fù)上述過程，可以便捷的將兩根以上的色譜柱 串接為一體，形成一完整的所需分析色譜柱，可有效地增加分析色譜柱柱 長，提高高效液相色譜的單次分析能力。
權(quán)利要求
1. 用于液相色譜分離系統(tǒng)中色譜柱的串聯(lián)方法，其特征在于1)在主體色譜柱(A)與被接色譜柱(B)的連接端分別對應(yīng)的設(shè)有一個金屬或PEEK連接頭(3)；2)在主體色譜柱(A)和被接色譜柱(B)連接端的端面分別設(shè)置一個篩板(1)，用與連接頭(3)相匹配的、金屬或PEEK材料的二通(2)將主體色譜柱(A)與被接色譜柱(B)串接為一體，通過二通(2)與連接頭(3)上相對應(yīng)的內(nèi)外螺紋將色譜柱與二通(2)鎖緊。
2. 按照權(quán)利要求l所述的串聯(lián)方法，其特征在于在主體色譜柱(A) 與被接色譜柱(B)的連接端端頭外側(cè)分別設(shè)置有一嵌環(huán)，連接頭(3)置 于嵌環(huán)的內(nèi)側(cè)。
3. 按照權(quán)利要求1所述的串聯(lián)方法，其特征在于所述主體色譜柱(A) 與被接色譜柱(B)為相同或不同內(nèi)徑的色譜柱。
4. 按照權(quán)利要求1所述的串聯(lián)方法，其特征在于所述主體色譜柱(A) 與被接色譜柱(B)內(nèi)填裝有相同或不同的色譜填料。
5. 按照權(quán)利要求1所述的串聯(lián)方法，其特征在于所述主體色譜柱(A)與被接色譜柱(B)可為相同或不同長度。
全文摘要
本發(fā)明涉及液相色譜分離系統(tǒng)中色譜柱之間的連接，具體地說是用于液相色譜分離系統(tǒng)中色譜柱的串聯(lián)方法，1)在主體色譜柱與被接色譜柱的連接端分別對應(yīng)的設(shè)有一個金屬或PEEK連接頭；2)在主體色譜柱和被接色譜柱連接端的端面分別設(shè)置一個篩板，用與連接頭相匹配的、金屬或PEEK材料的二通將主體色譜柱與被接色譜柱串接為一體，通過二通與連接頭上相對應(yīng)的內(nèi)外螺紋將色譜柱與二通鎖緊。本發(fā)明方法原理簡單，通過二通的連接很方便的增加柱長，提高色譜柱分析能力。在二通的兩端都使用篩板，可以有效減少柱連接的死體積，增加串聯(lián)柱的柱效；并防止色譜柱中的填料被沖洗出來；拆卸后可重復(fù)安裝。
文檔編號B01D15/22GK101462011SQ20071015902
公開日2009年6月24日 申請日期2007年12月19日 優(yōu)先權(quán)日2007年12月19日
發(fā)明者喬曉強(qiáng), 張麗華, 張玉奎, 張維冰, 朱貴杰, 振 梁, 陶定銀 申請人:中國科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所