專利名稱：一種霉菌毒素凈化柱及霉菌毒素凈化方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種霉菌毒素凈化柱，以及利用該霉菌毒素凈化柱對樣品 中霉菌毒素進行凈化的方法。(二) 背景技術對食品及飼料提取液中的霉菌毒素進行凈化是為了后續(xù)程序中準確 檢測食品、飼料中污染和殘留的霉菌毒素，目前進行這種凈化所采用的各 種凈化柱及凈化方法存在處理時間長，應用范圍有限，成本較高，凈化效 果并不理想等缺點。(三) 發(fā)明內容本發(fā)明目的是提供一種價格低廉、能夠同時凈化多種類的霉菌毒素， 且凈化效果理想的凈化柱，以及利用該霉菌毒素凈化柱對樣品中霉菌毒素 進行凈化的方法。本發(fā)明釆用的技術方案是一種霉菌毒素凈化柱，主要包括柱體、裝填在柱體內的填料和設置在 填料上下兩端的篩板，其特征在于所述填料分層裝填，自上而下依次為 助濾劑、中性氧化鋁、硅膠，填料粒度為5 100 ja m。具體的，所述填料質量組成為助濾劑5~50%、中性氧化鋁5 90%、 珪膠5~90%。所述助濾劑為本領域常用助濾劑，如硅藻土助濾劑或珍珠巖助濾劑 等，本發(fā)明優(yōu)選為硅藻土助濾劑，所述硅藻土助濾劑優(yōu)選為Celite545、Celite-hyflosuper-cell或ZX-616等。優(yōu)選的，所述柱體容積為0.1 1000mL，內徑為1 50mL。 優(yōu)選的所述篩才反厚度為0.5 5mm,直徑與柱體內徑匹配，所述的篩板孔的孔徑，特別是下端篩板孔的孔徑小于填料粒徑，通常篩板孔的孔徑為卜100/im。本發(fā)明優(yōu)選所述的填料質量組成為硅藻土助濾劑10%、中性氧化 鋁20 60%、硅膠30 70%。本發(fā)明還涉及一種霉菌毒素凈化柱的霉菌毒素凈化方法，所述方法如下以極性有機容劑為洗脫液對含有霉菌毒素的提取液進行洗脫，分離出霉菌毒素，所述的極性有機溶劑為甲醇、乙腈或乙酸乙酯。所述的極性有機溶劑優(yōu)選為乙腈。所述的含有霉菌毒素的提取液的獲得用乙腈體積濃度10 20°/。的水溶液，提取樣品中霉菌毒素，得到含有霉菌毒素的提取液。整個過程中，液體流速最好控制在不超過4ml/min。本發(fā)明的有益效果主要體現在1. 采用本發(fā)明的霉菌毒素凈化柱，洗脫分離，能夠快速地對食品和飼料 的提取液進行凈化分離，整個操作過程不超過20分鐘；2. 本發(fā)明采用不同的填料配置適用于不同基質的樣品、不同種類的霉菌 毒素(樣品為玉米粉、花生醬、稻谷時硅膠減少，氧化鋁增加)，適 用范圍廣，凈化效果好，滿足對不同種類的樣品、不同種類的霉菌毒 素的分析要求；3. 本發(fā)明使用的填料為常見化學物質，性質穩(wěn)定，成本低廉，易于制造 和保存，使用方便快捷。(四) 附圖il明

圖1為本發(fā)明實施例1涉及的霉菌毒素凈化柱結構側視圖。圖2為本發(fā)明實施例1涉及的霉菌毒素凈化柱結構俯視圖。圖3為實施例1進行凈化處理后樣品分析的色譜圖。圖4為實施例4凈化效果比較的色譜圖；A:未經凈化柱處理，B:經過凈化柱處理。
具體實施方式
下面結合具體實施例對本發(fā)明進行進一步描述，但本發(fā)明的保護范圍 并不僅限于此本發(fā)明霉菌毒素凈化柱結構參見圖1 2,凈化柱整體外形類似注射器 桶，其由柱體l、上篩板2、下篩板3和置于上下篩板之間的填料4， 5， 6構成。柱體容積為6cc,填料2.5g，粒度范圍在5~100微米。上篩板1 和下篩板2的厚度為2毫米，其上的網孔結構物理化學性質穩(wěn)定，能夠 起過濾和阻隔作用，防止填料出來，阻止大粒徑物質進入。本發(fā)明霉菌毒 素凈化柱的作用機理是利用復合填料的吸附、過濾(成鹽作用、氫鍵、配 位作用等)，對雜質選擇性地吸附、保留，在凈化過程中利用適當的洗脫 溶劑將少部分被吸附目標分析物洗脫下來。實施例1: 待檢物花生醬； 霉菌毒素類型黃曲霉毒素；凈化柱填料配置填料2.5g,其中硅膠(青島海浪硅膠干燥劑廠)1.35g，中性氧化鋁(鄭州英諾色譜實驗技術有限公司)0.9g，助濾劑(硅藻土 ZX-616,北京朗潔普道過濾4支術/>司)0.25g; 凈化方法包括下列步驟第一步，制備上樣液，用20ml乙腈/水(v/v: 10/90)混合液分兩次提取花生醬中的目標分析物，合并提取液；第二步，上樣，取4是:取液2ml加至凈化柱中，收集流出液；第三步，以曱醇為洗脫液進行洗脫，用4ml乙腈流過凈化柱，負壓下抽干，收集流出液；分析物回收率目標分析物為17種霉菌毒素，采用液質聯用儀檢測，色 譜圖見圖3。 85 101%,相對標準偏差小于5%。實施例2: 4寺4企物稻谷；霉菌毒素類型黃曲霉毒素，單端孢霉烯族類；凈化柱填料配置填料2.5g,其中硅膠0.9g，中性氧化鋁1.35g，助濾劑 (硅藻土 Celite545，默克化工技術(上海)公司)0.25g; 凈化方法包括下列步驟第一步，制備上樣液，用20ml乙腈/水(v/v: 16/84)混合液分兩次提取 稻谷中的分析物，合并提取液；第二步，上樣，取提取液2ml加至凈化柱中，收集流出液；第三步，以乙腈為洗脫液進行洗脫，用4ml乙腈流過凈化柱，負壓下抽干，收集流出液；分析物回收率90~105%,相對標準偏差小于5%。 實施例3:4寺才企物玉米4分；霉菌毒素污染類型單端孢霉烯族類；凈化柱填料配置填料2.5g,其中硅膠1.8g,中性氧化鋁0.45g,助濾劑 (Celite-hyflosuper-cell，默克化工技術(上海)公司)0.25g; 凈化方法包括下列步驟第一步，制備上樣液，用20ml乙腈/水(v/v: 20/80)混合液分兩次提取 玉米中的分析物，合并提取液；第二步，上樣，取4是耳又液2ml加至凈化柱中，收集流出液；第三步，以乙酸乙酯為洗脫液進行洗脫，用4ml乙腈流過凈化柱，負壓下吸干，收集流出液；分析物回收率82 98%,相對標準偏差小于5%。實施例4:效果驗證 待斗全物稻谷；霉菌毒素類型黃曲霉毒素，單端孢霉烯族類；取同一樣品，A為不經過本專利凈化柱處理，直接進樣色譜分離；B 為經本專利凈化柱處理后再進樣色譜分離，凈化柱填料配置與凈化方法按 照實施例2實施。在該實施例中，經過凈化柱處理，雜質吸附在凈化柱上，分析物隨著 流出液流出。凈化柱處理效果參見圖4，未經凈化柱處理的樣品因雜質干 擾而看不到明顯的色譜峰。
權利要求
1. 一種霉菌毒素凈化柱，主要包括柱體、裝填在柱體內的填料和設置在填料上下兩端的篩板，其特征在于所述填料分層裝填，自上而下依次為助濾劑、中性氧化鋁和硅膠，填料粒徑為5～100μm。
2. 如權利要求1所述的霉菌毒素凈化柱，其特征在于所述填料質量組成 為助濾劑5 50%、中性氧化鋁5~90%、硅膠5~卯％。
3. 如權利要求1所述的霉菌毒素凈化柱，其特征在于所述助濾劑為硅藻 土助濾劑。
4. 如權利要求3所述的助濾劑，其特征在于所述的硅藻土助濾劑為 Celite545、 Celite-hyflosuper-cell或ZX-616。
5. 如權利要求1~4之一所述的霉菌毒素凈化柱，其特征在于所述柱體容 積為0.1 1000mL,內徑為1 50mL。
6. 如權利要求1~4之一所述的霉菌毒素凈化柱，其特征在于所述篩板厚 度為0.5 5mm，篩板孔的孔徑小于填料粒徑。
7. 如權利要求1所述的霉菌毒素凈化柱，其特征在于所述的填料質量組 成為硅藻土助濾劑10%、中性氧化鋁20 60%、硅膠30~70%。
8. —種利用權利要求1所述霉菌毒素凈化柱的霉菌毒素凈化方法，所述 方法是以極性有機容劑為洗脫液對含有霉菌毒素的提取液進行洗脫， 分離出霉菌毒素，所述的極性有機溶劑為曱醇、乙腈或乙酸乙酯。
9. 如權利要求8所述的方法，其特征在于所述的極性有機容劑為乙腈。
10. 如權利要求8所述的方法，其特征在于所述的含有霉菌毒素的提取液 是用乙腈體積濃度10 20%的水溶液，^是耳又樣品中霉菌毒素，得到含有 霉菌毒素的提取液。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種裝有復合填料的霉菌毒素凈化柱及其凈化方法。該凈化柱主要包括柱體、裝填在柱體內的填料和設置在填料上下兩端的篩板，所述填料分層裝填，自上而下依次為硅藻土助濾劑、中性氧化鋁和硅膠，填料粒徑為5～100μm。本發(fā)明的凈化方法利用吸附劑填料的吸附作用原理，利用填料可以對流過的提取液中的雜質進行選擇性吸附，再利用洗脫劑沖洗凈化柱，收集上樣流出液和洗脫液。使雜質吸附在柱上，達到去除雜質的效果。本發(fā)明的霉菌毒素凈化柱及其凈化方法的優(yōu)點在于凈化柱成本低廉，制造方便，且能根據需要改變填料配比；凈化方法速度快，適用范圍廣，操作方便，凈化效果好。
文檔編號B01D15/22GK101239254SQ200810061119
公開日2008年8月13日 申請日期2008年3月12日 優(yōu)先權日2008年3月12日
發(fā)明者任一平, 靚 馮, 徐小民, 潘紅鋒, 蔡增軒, 文 謝, 韓見龍 申請人:浙江省疾病預防控制中心