專利名稱：一種hplc法分析分離酒石酸福莫特羅中間體的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬涉及一種高效液相色譜法，尤其是一種分析分離酒石酸福莫特羅中 間體及其對(duì)映異構(gòu)體的高效液相色譜法。
背景技術(shù)：
酒石酸福莫特羅為一種平喘藥，主要用于緩解支氣管哮喘、慢性支氣管炎、 喘息性支氣管炎及肺氣腫所致呼吸困難，中間體的分子式為C17H21NO，化學(xué)名 為(R)-4-甲氧基-a-甲基-N-(芐萄苯乙胺，結(jié)構(gòu)式為
該分子中含1個(gè)手性碳原子，在通過(guò)定向合成目標(biāo)化合物酒石酸福莫特羅的過(guò)程 中需要控制其對(duì)映異構(gòu)體的含量。
對(duì)于酒石酸福莫特羅中間體的對(duì)映異構(gòu)體雜質(zhì)，在藥物合成過(guò)程當(dāng)中是需要 進(jìn)行質(zhì)量控制的。含手性碳原子的對(duì)映異構(gòu)體的分離一直是手性藥物合成和制劑 過(guò)程中質(zhì)量控制的難點(diǎn)，實(shí)現(xiàn)酒石酸福莫特羅中間體及其對(duì)映異構(gòu)體的分離在酒 石酸福莫特羅藥物的合成和制劑過(guò)程的質(zhì)量控制方面具有現(xiàn)實(shí)意義。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種分析分離酒石酸福莫特羅中間體及其對(duì)映異構(gòu) 體雜質(zhì)的高效液相色譜方法，從而實(shí)現(xiàn)酒石酸福莫特羅中間體與其對(duì)映異構(gòu)體雜 質(zhì)的分離測(cè)定。
申請(qǐng)人發(fā)現(xiàn)，以纖維素類手性柱，以加入一定比例胺的正相混合溶劑為流動(dòng) 相低溫條件下，可以將酒石酸福莫特羅中間體及其對(duì)映異構(gòu)體進(jìn)行有效分離，從 而可以準(zhǔn)確控制酒石酸福莫特羅中間體的質(zhì)量。本發(fā)明的方法能簡(jiǎn)單、快速、準(zhǔn)確地分析分離酒石酸福莫特羅中間體及其對(duì)映異構(gòu)體雜質(zhì)。
進(jìn)一步地，選用纖維素類手性柱OJ-H (DACEL250mmx4.6mm， 5pm)，可 以獲得更好的分析分離效果。OJ-H (DACEL250mmx4.6mm， 5pm)纖維素類手
性柱是以對(duì)甲苯基甲酸酯鍵合纖維素為填料。
進(jìn)一步地，本發(fā)明的正相溶劑選用正己烷和無(wú)水乙醇的混合溶劑。
本發(fā)明的方法中的流動(dòng)相選用體積比為90 : 10 95 : 5正己烷和無(wú)水乙醇的
混合溶劑。
本發(fā)明的方法中的流動(dòng)相中的胺選用二乙胺。
本發(fā)明的方法中的低溫是指9-15X:。
本發(fā)明所述的分析分離方法，可按照以下方法實(shí)現(xiàn)
(1) 取酒石酸福莫特羅樣品適量，用無(wú)水乙醇溶解樣品，配制成每lmL含 酒石酸福莫特羅0.1mg 0.5mg的樣品溶液。
(2) 設(shè)置流動(dòng)相流速為0.4 1.2mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為270-278 nm，最佳檢測(cè) 波長(zhǎng)為275nm，色譜柱柱溫箱為9-12°C ，色譜柱柱溫的最佳溫度為10°C。
(3) 取(l)的樣品溶液2-50pL注入液相色譜儀，完成酒石酸福莫特羅中間體 及其對(duì)映異構(gòu)體的分析與分離。
其中
高效液相色譜儀島津LC-10ATv; ， SPD-M10Av; ， SCL-10Av/ ， DGU-12A; 色譜柱OJ-H (DACEL4.6mmx250mm， 5pm)纖維素手性色譜柱； 流動(dòng)相正己烷-無(wú)水乙醇-二乙胺==95 : 5 : 0.1; 檢測(cè)波長(zhǎng)275nm; 流速1.0mL/min;
柱溫10°C; 進(jìn)樣體積10|iL。
本發(fā)明采用纖維素類OJ-H (DACEL4.6mmx250mm， 5|am)手性色譜柱，能 夠有效的分析分離酒石酸福莫特羅及其對(duì)映異構(gòu)體(雜質(zhì))；選擇流動(dòng)相溶解樣 品，確保了溶液的穩(wěn)定性；選擇進(jìn)樣體積10pL，柱溫為室溫，提高了色譜峰的 對(duì)稱性。本發(fā)明解決了含酒石酸福莫特羅中間體及其對(duì)映異構(gòu)體的原料及制劑的 分析與分離問(wèn)題，從而確保了酒石酸福莫特羅中間體及其制劑的質(zhì)量可控。


圖1實(shí)施例1，正己烷-無(wú)水乙醇-二乙胺=95 : 5 : 0.1，柱溫l(TC的HPLC圖； 圖2實(shí)施例2，正己烷-無(wú)水乙醇-二乙胺=90 : 10 : 0.1，柱溫l(TC的HPLC圖； 圖3實(shí)施例3，正己烷-無(wú)水乙醇-二乙胺二95 : 5 : 0.4，柱溫9。C的HPLC圖； 圖4實(shí)施例4，正己烷-無(wú)水乙醇-二乙胺=95 : 5 : 0.1，柱溫12。C的HPLC圖。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例l儀器與條件高效液相色譜儀島津LC-10ATv; ， SPD-M10Av; ， SCL-10A甲，DGU-12A; 色譜柱OJ-H (DACEL4.6mmx250mm， 5pm);流動(dòng)相正己垸-無(wú)水乙醇_二乙胺=95 : 5 : 0.1;流速1.0mL/min;柱溫10°C; 進(jìn)樣體積10pL。檢測(cè)波長(zhǎng)275nm;實(shí)驗(yàn)步驟分別稱取酒石酸福莫特羅中間體及其對(duì)映異構(gòu)體各5mg，置于25mL容量瓶 中，加無(wú)水乙醇溶解并稀釋置刻度，搖勻，作為混合樣品溶液。并分別稱取酒石 酸福莫特羅中間體及其對(duì)映異構(gòu)體各5mg，分別置于2個(gè)25mL容量瓶中，加無(wú) 水乙醇溶解并稀釋置刻度，搖勻，作為定性對(duì)照溶液。分別取各對(duì)照溶液和混合樣品溶液，按上述條件進(jìn)行高效液相色譜分析，記 錄色譜圖。結(jié)果見(jiàn)附圖l，圖中1號(hào)峰為酒石酸福莫特羅中間體，2號(hào)峰為異構(gòu) 體，可以看出在該條件下酒石酸福莫特羅中間體主峰可以和異構(gòu)體完全分離開(kāi) 來(lái)，且酒石酸福莫特羅中間體主峰在15.65min左右。實(shí)施例2儀器與條件高效液相色譜儀島津LC-10AT甲，SPD-M10Av; ， SCL-10Av; ， DGU-12A; 色譜柱OJ-H (DACEL4.6腿x250匪，5nm);流動(dòng)相正己烷-無(wú)水乙醇-二乙胺=90 : io : o.i;流速1.0mL/min;檢測(cè)波長(zhǎng)275nm;柱溫10°C; 進(jìn)樣體積10pL。實(shí)驗(yàn)步驟分別稱取酒石酸福莫特羅中間體及其對(duì)映異構(gòu)體各5mg，置于25mL容量瓶 中，加無(wú)水乙醇溶解并稀釋置刻度，搖勻，作為混合樣品溶液。并分別稱取酒石 酸福莫特羅中間體及其對(duì)映異構(gòu)體各5mg，分別置于2個(gè)25mL容量瓶中，加無(wú) 水乙醇溶解并稀釋置刻度，搖勻，作為定性對(duì)照溶液。分別取各對(duì)照溶液和混合樣品溶液，按上述條件進(jìn)行高效液相色譜分析，記 錄色譜圖。結(jié)果見(jiàn)附圖l，圖中1號(hào)峰為酒石酸福莫特羅中間體，2號(hào)峰為異構(gòu) 體，可以看出在該條件下酒石酸福莫特羅主峰可以和異構(gòu)體完全分離開(kāi)來(lái)，且酒 石酸福莫特羅中間體主峰在12.25min左右。實(shí)施例3儀器與條件高效液相色譜儀島津LC-10ATv/ ， SPD-M10Avp， SCL-10Av/ ， DGU-12A; 色譜柱OJ陽(yáng)H (DACEL4.6mmx250mm， 5pm);流動(dòng)相正己烷-無(wú)水乙醇_二乙胺=95 : 5 : 0.4;流速1.0mL/min; 檢測(cè)波長(zhǎng)275nm; 柱溫9°C; 進(jìn)樣體積l(HlL。實(shí)驗(yàn)步驟分別稱取酒石酸福莫特羅中間體及其對(duì)映異構(gòu)體各5mg，置于25mL容量瓶 中，加無(wú)水乙醇溶解并稀釋置刻度，搖勻，作為混合樣品溶液。并分別稱取酒石 酸福莫特羅中間體及其對(duì)映異構(gòu)體各5mg，分別置于2個(gè)25mL容量瓶中，加無(wú) 水乙醇溶解并稀釋置刻度，搖勻，作為定性對(duì)照溶液。分別取各對(duì)照溶液和混合樣品溶液，按上述條件進(jìn)行高效液相色譜分析，記 錄色譜圖。結(jié)果見(jiàn)附圖l，圖中1號(hào)峰為酒石酸福莫特羅中間體，2號(hào)峰為異構(gòu) 體，可以看出在該條件下酒石酸福莫特羅主峰可以和異構(gòu)體完全分離開(kāi)來(lái)，且酒 石酸福莫特羅中間體主峰在17.10min左右。實(shí)施例4儀器與條件高效液相色譜儀島津LC-10AT甲，SPD-M10Ayp， SCL-10Avp， DGU-12A; 色譜柱OJ-H (DACEL4.6mmx250mm， 5nm);流動(dòng)相正己垸-無(wú)水乙醇_二乙胺=95 : 5 : 0.1;流速1.0mL/min; 檢測(cè)波長(zhǎng)275nm;柱溫12°C; 進(jìn)樣體積10pL。實(shí)驗(yàn)步驟分別稱取酒石酸福莫特羅中間體及其對(duì)映異構(gòu)體各5mg，置于25mL容量瓶 中，加無(wú)水乙醇溶解并稀釋置刻度，搖勻，作為混合樣品溶液。并分別稱取酒石 酸福莫特羅中間體及其對(duì)映異構(gòu)體各5mg，分別置于2個(gè)25mL容量瓶中，加無(wú) 水乙醇溶解并稀釋置刻度，搖勻，作為定性對(duì)照溶液。分別取各對(duì)照溶液和混合樣品溶液，按上述條件進(jìn)行高效液相色譜分析，記 錄色譜圖。結(jié)果見(jiàn)附圖l，圖中1號(hào)峰為酒石酸福莫特羅中間體，2號(hào)峰為異構(gòu) 體，可以看出在該條件下酒石酸福莫特羅主峰可以和異構(gòu)體完全分離開(kāi)來(lái)，且酒 石酸福莫特羅中間體主峰在16.58min左右。
權(quán)利要求
1. 一種分離酒石酸福莫特羅中間體及其對(duì)映異構(gòu)體的HPLC方法，其特征在于采用以纖維素類手性柱，以含有胺的正相混合溶劑為流動(dòng)相，在低溫條件下進(jìn)行分離。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述纖維素類手性柱為OJ-H(DACEL250mmx4.6mm， 5pm)。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于采用正相色譜法。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述的正相混合溶劑為正己烷和無(wú) 水乙醇的混合溶劑。
5. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于所述的正己烷和無(wú)水乙醇的體積比 為95 : 5~90 : 10。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述的胺為二乙胺。
7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于所述的二乙胺的加入量為 O.lo/o~0.5%。
8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述的低溫為9'C-15'C。
9. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于包括以下步驟(1) 取酒石酸福莫特羅中間體樣品適量，用無(wú)水乙醇溶解樣品，得到lmL含 酒石酸福莫特羅中間體0.1mg 0.5mg的樣品溶液。(2) 設(shè)置流動(dòng)相流速為0.4 1.2mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為275nm，色譜柱柱溫箱 為9 15°C。(3) 取步驟(l)的樣品溶液2-50pL注入液相色譜儀，記錄色譜圖。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種HPLC法分析分離酒石酸福莫特羅中間體及其對(duì)映異構(gòu)體的測(cè)定方法，采用纖維素類手性柱，以加入一定比例胺的正相混合溶劑為流動(dòng)相的正相色譜法低溫條件下進(jìn)行分離，用該方法可以快速的分離分析酒石酸福莫特羅中間體以及含酒石酸福莫特羅中間體制劑的對(duì)映異構(gòu)體雜質(zhì)。
文檔編號(hào)B01J20/281GK101531602SQ200810101628
公開(kāi)日2009年9月16日 申請(qǐng)日期2008年3月10日 優(yōu)先權(quán)日2008年3月10日
發(fā)明者牟淑慧 申請(qǐng)人:北京德眾萬(wàn)全醫(yī)藥科技有限公司