專利名稱：一種新的環(huán)維黃楊星d純化方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥原料藥的純化方法。
背景技術(shù)：
環(huán)維黃楊星D是心血管疾病藥物黃楊寧的有效成分。2010版中國藥典雖然規(guī)定環(huán)維黃楊星D原料含量不得少于99%，但由于藥典收載的環(huán)維黃楊星D的含量測定采用的是非水滴定。而該方法只能測定總生物堿含量。同時由 于環(huán)維黃楊星D與其他黃楊生物堿結(jié)構(gòu)相似，色譜行為相近，分離不易，純化困難。因此目前市售的環(huán)維黃楊星D原料的實際含量僅為55 85%。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種新的環(huán)維黃楊星D純化方法。本發(fā)明的技術(shù)解決方案以孔徑在10_20nm的介孔硅膠為載體，采用接枝共聚方法制備介孔硅膠表面印跡固定相。將此固定相用于環(huán)維黃楊星D的分離純化。本發(fā)明公開了包括介孔硅膠的制備方法、介孔硅膠表面印跡固定相的制備方法以及基于介孔硅膠表面印跡固定相的新的環(huán)維黃楊星純化方法。介孔硅膠的制備方法—室溫下，稱取適量三嵌段聚合物P123和氯化銨，加入去離子水、乙醇和濃鹽酸的混合溶液中，室溫攪拌使之完全溶解得到澄清透明溶液；——將適量1，3，5_三甲苯滴加到上述反應液中，在35°C攪拌10小時；—在劇烈攪拌下，滴加四乙氧基硅烷到上述反應液中，35°C繼續(xù)攪拌15分鐘。-將上述反應液轉(zhuǎn)移至不銹鋼聚四氟反應爸中，35°C靜置水熱反應24小時后再
90°C反應24小時；—趁熱過濾，分別用乙醇、去離子水充分洗滌，90°C常壓干燥10小時；——550°C高溫煅燒6小時除去模板劑。介孔硅膠表面印跡的制備方法—介孔硅膠的活化。將介孔硅膠置于濃鹽酸和去離子水混合溶液中，125°C回流12小時，用去離子水洗至中性，100°C真空干燥24小時?！榭坠枘z的衍生化。稱取適量上述活化后的介孔硅膠，加入乙醇，去離子水，攪拌，滴加Y_(甲基丙烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷，氮氣保護下50°C反應24小時。冷卻后過濾，分別用乙醇、去離子水洗滌，室溫真空干燥24小時。-介孔娃膠表面印跡固定相的合成。取一定量干燥后的環(huán)維黃楊星D對照品、
甲基丙烯酸、乙二醇二甲基丙烯酸酯溶解于氯仿中，氮氣保護下攪拌30分鐘，加入適量引發(fā)劑偶氮二異丁腈超聲使溶解，通氮氣5分鐘備用。稱取適量上述衍生化后的介孔硅膠，加入上述混合溶液，氮氣保護下攪拌15分鐘后50°C引發(fā)聚合8小時。反應結(jié)束后，過濾，將所得的介孔硅膠表面印跡固定相在索氏提取器中用甲醇乙酸=4I的混合溶劑反復提取48小時以除去環(huán)維黃楊星D模板分子，最后用甲醇洗滌，50°C真空干燥24小時即得。環(huán)維黃楊星D純化方法采用勻漿裝柱法將上述介孔硅膠表面印跡固定相填充于不銹鋼色譜柱(50_X4.6mm，1. D.)。采用高效液相色譜儀，運用蒸發(fā)光散射檢測器，采用梯度洗脫。甲醇中醋酸體積百分數(shù)在10分鐘內(nèi)由0%變?yōu)?.5%。環(huán)維黃楊星D原料藥溶于甲醇后泵入色譜柱，梯度洗脫進行分離純化，分段收集再濃縮、結(jié)晶、烘干即得高純度的環(huán)維黃楊星D。本發(fā)明的優(yōu)點在于純化環(huán)維黃楊星D的過程簡單，分離效能好，純化得到的環(huán)維黃楊星D純度可達90%以上，易于實現(xiàn)商品化。


圖1是本發(fā)明所用固定相的載體——介孔硅膠的掃描電鏡圖片圖2是本發(fā)明所用固定相的載體一介孔硅膠的N2吸附-解吸附3是本發(fā)明所用固定相的載體——介孔硅膠的孔徑分布曲線圖4是本發(fā)明所用固定相的載體——介孔硅膠進行衍生化后的紅外譜5是本發(fā)明用于純化環(huán)維黃楊星D的色譜6是本發(fā)明用于純化環(huán)維黃楊星D，環(huán)維黃楊星D純度檢查色譜圖
具體實施例方式實施例1介孔硅膠的制備室溫下，稱取P1230. 5021g、氯化銨0. 24g置于50ml圓底燒瓶，依次加入去離子水15ml、乙醇2ml和濃鹽酸3ml，攪拌使之混合均勻得到澄清透明溶液。劇烈攪拌下滴加1，3，5-三甲苯450ul，35°C攪拌10小時。滴加四乙氧基硅烷1150ul至上述反應液中，35°C劇烈攪拌15分鐘。將反應液轉(zhuǎn)移至不銹鋼聚四氟反應釜中于35°C靜置24小時，再將溫度升至90°C靜置24小時。趁熱過濾，再分別用乙醇、去離子水充分洗滌，90°C常壓干燥10小時，550°C高溫煅燒6小時除去模板劑即得，該材料具有球形形貌，見圖1。其氮氣吸附-解吸附圖譜見圖2，具有典型的IV曲線，證明其具有介孔。其孔徑分布曲線見圖3，證明其孔徑集中分布在10nm，BJH法計算得到的平均孔徑為14. 7nm。實施例2介孔硅膠表面印跡的制備稱取介孔硅膠4. 05g，置于250ml圓底燒瓶中，加入體積比1:1的濃鹽酸和去離子水的混合溶液200ml，125°C回流12小時，用去離子水洗至中性，100°C真空干燥24小時得到活化的介孔硅膠。稱取活化后的介孔硅膠3. 02g，置于IOOml三頸瓶中，加入去離子水25ml和乙醇25ml，攪拌，滴加Y _(甲基丙烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷5. 5ml。氮氣保護下50°C反應24小時。冷卻后過濾，分別用乙醇、去離子水洗滌，室溫真空干燥24小時即得衍生化后的介孔硅膠。紅外表征結(jié)果見圖4，由圖可知，衍生化后的硅膠在1701CHT1出現(xiàn)羰基峰，在1361cm—1出現(xiàn)雙鍵吸收峰，證明Y_(甲基丙烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷成功接枝到活化后的介孔娃膠表面。稱取干燥后的環(huán)維黃楊星D對照品190mg置于250ml三頸瓶中，依次加入氯仿80ml、甲基丙烯酸170ul、乙二醇二甲基丙烯酸酯1. 5ml，氮氣保護下攪拌30分鐘，加入引發(fā)劑偶氮二異丁腈20mg超聲使溶解，通氮氣5分鐘備用。稱取上述衍生化后的介孔硅膠2g置于另一 250ml三頸瓶中，加入上述混合溶液，氮氣保護下，室溫攪拌15分鐘后50°C引發(fā)聚合8小時。反應結(jié)束后，過濾，將所得產(chǎn)物在索氏提取器中用甲醇乙酸=4 I的混合溶劑反復提取48小時以除去環(huán)維黃楊星D模板分子，最后用甲醇洗滌，50°C真空干燥24小時即得介孔硅膠表面印跡固定相。實施例3取實施例2制備的表面印跡介孔硅膠，采用勻漿法填裝于不銹鋼柱管 (50mmX 4. 6mm,1. D.),裝柱壓力為35MPa,并米用此自制柱進行環(huán)維黃楊星D分離純化試驗(見圖5)。純化后的樣品通過檢測證實純度由65%提升到98% (見圖6)。
權(quán)利要求
1.一種新的環(huán)維黃楊星D純化方法，其特征在于環(huán)維黃楊星D的純化過程采用了以介孔硅膠為載體，并以環(huán)維黃楊星D為模板分子的表面印跡固定相。
2.按權(quán)利要求1所述的介孔硅膠，其結(jié)構(gòu)特征在于介孔硅膠的孔徑在10-20nm之間。
3.按權(quán)利要求1所述的介孔硅膠，其結(jié)構(gòu)特征在于介孔硅膠是球形顆粒。
4.按權(quán)利要求1所屬的介孔硅膠的制備方法，其特征在于采取了如下步驟 —室溫下，稱取適量三嵌段聚合物P123和氯化銨，加入去離子水、乙醇和濃鹽酸的混合溶液中，室溫攪拌使完全溶解得到澄清透明溶液； ——將適量1，3，5_三甲苯滴加到上述反應液中，在35°C攪拌10小時； ——在劇烈攪拌下，滴加適量四乙氧基硅烷到上述反應液中，35°C繼續(xù)攪拌15分鐘。
—將上述反應液轉(zhuǎn)移至不銹鋼聚四氟反應釜中，35 °C靜置水熱反應24小時后再90°C反應24小時； —趁熱過濾，分別用乙醇、去離子水充分洗滌，90°C常壓干燥10小時； ——550°C高溫煅燒6小時除去模板劑。
5.按權(quán)利要求1所屬的介孔硅膠表面印跡固定相的制備方法，其特征在于采取了如下步驟 —介孔硅膠的活化。將介孔硅膠置于濃鹽酸和去離子水混合溶液中，125°C回流12小時,用去離子水洗至中性，100°C真空干燥24小時。
——介孔硅膠的衍生化。稱取適量上述活化后的介孔硅膠，加入乙醇，去離子水，攪拌。滴加Υ_(甲基丙烯酰氧)丙基三甲氧基硅烷，氮氣保護下50°C反應24小時。冷卻后過濾，分別用乙醇、去離子水洗滌，室溫真空干燥24小時。
——介孔硅膠表面印跡固定相的合成。取一定量干燥后的環(huán)維黃楊星D對照品、甲基丙烯酸、乙二醇二甲基丙烯酸酯溶解于氯仿中，氮氣保護下攪拌30分鐘，加入適量引發(fā)劑偶氮二異丁腈超聲使溶解，通氮氣5分鐘備用。稱取適量上述衍生化的介孔硅膠，加入上述混合溶液，氮氣保護下攪拌15分鐘后50°C引發(fā)聚合8小時。反應結(jié)束后，過濾，將所得的介孔硅膠表面印跡固定相在索氏提取器中用甲醇乙酸=4 I的混合溶劑反復提取48小時以除去環(huán)維黃楊星D模板分子，最后用甲醇洗滌，50°C真空干燥24小時即得。
6.按權(quán)利要求1所述的新的環(huán)維黃楊星D純化方法。其特征在于采用勻漿裝柱法將權(quán)利要求5中的介孔硅膠表面印跡固定相填充于不銹鋼色譜柱(50mmX4. 6mm)。將色譜柱裝于高效液相色譜儀，運用蒸發(fā)光散射檢測器，采用梯度洗脫。流動相甲醇中醋酸體積百分數(shù)在10分鐘內(nèi)由0%變?yōu)镺. 5%。將環(huán)維黃楊星D原料藥溶于甲醇后泵入色譜柱，梯度洗脫進行分離純化，分段收集再濃縮、結(jié)晶、烘干即得高純度的環(huán)維黃楊星D。
7.權(quán)利要求1至5中任一項的介孔硅膠表面印跡固定相用于純化環(huán)維黃楊星D。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種新的環(huán)維黃楊星D純化方法。采用介孔硅膠表面分子印跡固定相作為填料。所說的介孔硅膠主要由四乙氧基硅烷、模板劑、酸、鹽、共溶劑和1，3，5-三甲苯經(jīng)溶膠-凝膠法一步共縮聚制得。該介孔硅膠具有較大的孔徑(10-20nm)。所說的表面印跡主要以該介孔硅膠為載體，采用接枝共聚方法合成得到以環(huán)維黃楊星D為模板分子的介孔硅膠表面印跡固定相。將該介孔硅膠表面分子印跡固定相填入色譜柱中，用于環(huán)維黃楊星D原料藥的純化，可得到高純度的環(huán)維黃楊星D。
文檔編號B01J20/30GK102993260SQ201110268310
公開日2013年3月27日 申請日期2011年9月13日 優(yōu)先權(quán)日2011年9月13日
發(fā)明者狄斌, 藍娟, 蘇夢翔 申請人:中國藥科大學