專利名稱：熒光標記聚乳酸納米微球的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域的產(chǎn)品及方法，具體是一種熒光標記的聚乳酸 (PLA)納米微球及其制備方法。
背景技術(shù)：
隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)、分子生物學(xué)和各種先進熒光檢測儀器及技術(shù)的應(yīng)用，熒光標記作為一種非放射性的標記技術(shù)已應(yīng)用于生命科學(xué)的各個研究領(lǐng)域，并取得了迅速的發(fā)展。熒光標記具有非放射性、操作簡便、高穩(wěn)定性、高靈敏度和高選擇性等特點，且熒光標記染料種類多、方法靈活，可應(yīng)用于多種生物大分子及藥物的標記。經(jīng)過對現(xiàn)有技術(shù)的檢索發(fā)現(xiàn)， 制備具有熒光標記性質(zhì)的納米粒子，一般采用共價化學(xué)合成的方法，將熒光基團以側(cè)鏈或者主鏈的形式引入到聚合物中。但是現(xiàn)有技術(shù)，不僅合成過程繁瑣，產(chǎn)物產(chǎn)率低，成本較高， 并且過程中多利用一些污染比較嚴重的化學(xué)試劑，因此在各種高性能熒光標記納米材料的設(shè)計與合成上遇到了瓶頸。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明針對現(xiàn)有技術(shù)存在的上述不足，提供一種熒光標記的PLA納米微球及其制備方法，制備工藝簡單，所得的納米粒子具有穩(wěn)定的熒光性質(zhì)以及良好的生物相容性。本發(fā)明的主要技術(shù)步驟如下
1)將聚乳酸納米微球懸浮分散于蒸餾水中，形成混合液A；
2)將熒光染料溶于甲基丙烯酸縮水甘油酯，形成混合液B；
3)磁力攪拌下，將混合液B與混合液A混合；
4)升溫至60士2°C，加入引發(fā)劑，繼續(xù)攪拌6士0.5h，得到熒光標記的PLA納米微球懸浮
液；
5)將所述熒光標記的PLA納米微球懸浮液置于透析袋，重蒸水透析48h，取透析純化的熒光標記的PLA納米微球懸浮液；
6)將所述透析純化的熒光標記的PLA納米微球懸浮液干燥，得熒光標記的PLA微球。本發(fā)明工藝簡單、合理，所得的納米粒子具有穩(wěn)定的熒光性質(zhì)以及良好的生物相容性。另，本發(fā)明所述聚乳酸納米微球的平均粒徑為100 500 nm。適用的藥物載體尺寸通常在上述粒徑范圍。本發(fā)明所述熒光染料為羅丹明B，其結(jié)構(gòu)式如下
權(quán)利要求
1.熒光標記聚乳酸納米微球的制備方法，包括以下步驟1)將聚乳酸納米微球懸浮分散于蒸餾水中，形成混合液A；2)將熒光染料溶于甲基丙烯酸縮水甘油酯，形成混合液B；3)磁力攪拌下，將混合液B與混合液A混合；4)升溫至60士2°C，加入引發(fā)劑，繼續(xù)攪拌6士0.5h，得到熒光標記的PLA納米微球懸浮液；5)將所述熒光標記的PLA納米微球懸浮液置于透析袋，重蒸水透析48h，取透析純化的熒光標記的PLA納米微球懸浮液；6)將所述透析純化的熒光標記的PLA納米微球懸浮液干燥，得熒光標記的PLA微球。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述熒光標記聚乳酸納米微球的制備方法，其特征在于所述聚乳酸納米微球的平均粒徑為100 500 nm。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述熒光標記聚乳酸納米微球的制備方法，其特征在于所述熒光染料為羅丹明B。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述熒光標記聚乳酸納米微球的制備方法，其特征在于所述引發(fā)劑是由過硫酸銨與抗壞血酸鈉組成的氧化-還原引發(fā)體系，過硫酸銨與抗壞血酸鈉的混合質(zhì)量比為2 3。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述熒光標記聚乳酸納米微球的制備方法，其特征在于所述干燥為冷凍干燥。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述熒光標記聚乳酸納米微球的制備方法，其特征在于所述步驟3) 中，混合液B與混合液A混合時，其中的熒光染料和聚乳酸納米微球的混合質(zhì)量比為1 1000 2000。
7.根據(jù)權(quán)利要求1或6所述熒光標記聚乳酸納米微球的制備方法，其特征在于所述步驟1)中，聚乳酸納米微球與蒸餾水的混合質(zhì)量比為1 2 1000。
8.根據(jù)權(quán)利要求1或7所述熒光標記聚乳酸納米微球的制備方法，其特征在于所述步驟2)中熒光染料與甲基丙烯酸縮水甘油酯的混合質(zhì)量比為1 1000。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述熒光標記聚乳酸納米微球的制備方法，其特征在于所述引發(fā)劑與甲基丙烯酸縮水甘油酯的用量質(zhì)量比為1 200。
全文摘要
熒光標記聚乳酸納米微球的制備方法，涉及涉及生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明利用一種與水溶性熒光化合物高結(jié)合的功能單體，在PLA微球表面發(fā)生接枝共聚合，而將PLA微球得以熒光標記。本發(fā)明制備工藝簡單，制得的納米微球具有穩(wěn)定的熒光性質(zhì)，并且具有良好的生物相容性。
文檔編號B01J13/14GK102489232SQ20111041401
公開日2012年6月13日 申請日期2011年12月13日 優(yōu)先權(quán)日2011年12月13日
發(fā)明者朱愛萍, 栗鳳娟 申請人:揚州大學(xué)