本技術(shù)涉及蛋白透析復(fù)性,具體涉及一種大規(guī)模包涵體蛋白透析復(fù)性裝置。
背景技術(shù):
1、利用大腸桿菌原核表達目的蛋白是工業(yè)上大規(guī)模制備重組蛋白的手段之一,其優(yōu)點是能夠在較短的時間內(nèi)獲得基因表達產(chǎn)物,而且所需的成本相對比較低廉,操作方法也相對簡便,同時,可以表達的蛋白數(shù)量也比較大。但是,由于蛋白表達速率過快以及缺乏后期蛋白修飾,會引起蛋白在大腸桿菌內(nèi)部的異常折疊,將疏水核暴露在外,從而形成不溶的包含體蛋白。為了獲得具有正確結(jié)構(gòu)、可溶且具有活性的蛋白,就需要利用高濃度的鹽酸胍或者尿素溶液等變性劑對不溶的包涵體蛋白進行變性溶解,之后再通過透析或者稀釋的方法,將蛋白溶解液中變性劑的濃度降低,使變性的蛋白緩慢地形成正確的空間折疊,最終變成可水溶的以及具有生物活性的目的蛋白。
2、傳統(tǒng)裝置的基本結(jié)構(gòu)均是在透析袋內(nèi)放置待復(fù)性蛋白液,然后將透析袋浸入透析外液當(dāng)中,通過持續(xù)不斷地更換透析外液,降低透析外液中鹽酸胍或者尿素的濃度,從而達到降低蛋白液中變性劑的濃度,從而實現(xiàn)蛋白復(fù)性,但是由于蛋白復(fù)性對蛋白液中蛋白濃度有一定的要求,達不到要求會使蛋白大量沉淀從而導(dǎo)致復(fù)性失敗;此外傳統(tǒng)的透析復(fù)性方法還存在處理量小,操作繁瑣,透析過程的條件難以把控,持續(xù)不斷地更換透析外液還會大大增加溶液的用量導(dǎo)致成本增加等問題。
技術(shù)實現(xiàn)思路
1、因此,本實用新型要解決的技術(shù)問題在于克服現(xiàn)有技術(shù)中的處理量小,操作繁瑣,透析過程的條件難以把控,持續(xù)不斷地更換透析外液還會大大增加溶液的用量導(dǎo)致成本增加等缺陷,從而提供一種大規(guī)模包涵體蛋白透析復(fù)性裝置。
2、一種大規(guī)模包涵體蛋白透析復(fù)性裝置包括透析裝置和換液裝置;
3、所述透析裝置包括復(fù)性液腔、透析膜、蛋白液腔、復(fù)性液出口和復(fù)性液入口;透析膜的一側(cè)與復(fù)性液腔連接,透析膜的另一側(cè)與蛋白液腔連接;
4、所述換液裝置包括第一復(fù)性液容器、第二復(fù)性液容器和動力設(shè)備,第一復(fù)性液容器通過第一軟管與動力設(shè)備連接,第二復(fù)性液容器通過第二軟管與動力設(shè)備連接;
5、所述復(fù)性液腔的表面設(shè)置有復(fù)性液出口和復(fù)性液入口,且復(fù)性液出口設(shè)置在復(fù)性液入口的上方;
6、所述動力設(shè)備通過第三軟管與復(fù)性液入口連接,第二復(fù)性液容器通過硬管與復(fù)性液出口連接。
7、進一步地,所述透析膜的一側(cè)與復(fù)性液腔通過密封膠條連接,透析膜的另一側(cè)與蛋白液腔通過密封膠條連接。
8、進一步地,所述第一復(fù)性液容器為不含變性劑的復(fù)性液容器,第二復(fù)性液容器為含變性劑的復(fù)性液容器。
9、進一步地,所述動力設(shè)備為二元梯度泵。
10、進一步地,所述復(fù)性液腔和蛋白液腔的容積均為250毫升。
11、進一步地,所述第一復(fù)性液容器和第二復(fù)性液容器的容積均為2升。
12、本實用新型的有益效果為:
13、本實用新型提供的大規(guī)模包涵體蛋白透析復(fù)性裝置,通過復(fù)性液腔、蛋白液腔、第一復(fù)性液容器和第二復(fù)性液容器之間使用不同的軟管和硬管進行溶液的輸送,將變性劑的濃度降低,使得含有變性劑的蛋白液逐漸變成可水溶的以及具有生物活性的目的蛋白,減少了各種溶液用量的使用,同時也減少了成本。本實用新型提供的技術(shù)方案中,復(fù)性液腔、蛋白液腔、第一復(fù)性液容器和第二復(fù)性液容器的容積較大,蛋白透析過程處理量大。本實用新型提供的技術(shù)方案中,在復(fù)性液腔和蛋白液腔之間采用透析膜來減小變性劑的濃度,以及使用二元梯度泵預(yù)先設(shè)定溶液比例混合,使操作過程簡便,同時也滿足了透析過程的條件。本實用新型提供的技術(shù)方案中,可采用通過多組透析裝置并聯(lián)后與換液裝置連接的方式對裝置進行擴展。實現(xiàn)同時進行多種蛋白的復(fù)性,提高生產(chǎn)效率。
1.一種大規(guī)模包涵體蛋白透析復(fù)性裝置,其特征在于,所述包涵體蛋白透析復(fù)性裝置包括:透析裝置和換液裝置;
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種大規(guī)模包涵體蛋白透析復(fù)性裝置,其特征在于,所述透析膜(2)的一側(cè)與復(fù)性液腔(1)通過密封膠條(6)連接,透析膜(2)的另一側(cè)與蛋白液腔(3)通過密封膠條(6)連接。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種大規(guī)模包涵體蛋白透析復(fù)性裝置,其特征在于,所述第一復(fù)性液容器(7)為不含變性劑的復(fù)性液容器,第二復(fù)性液容器(8)為含變性劑的復(fù)性液容器。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種大規(guī)模包涵體蛋白透析復(fù)性裝置,其特征在于,所述動力設(shè)備(9)為二元梯度泵。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種大規(guī)模包涵體蛋白透析復(fù)性裝置,其特征在于,所述復(fù)性液腔(1)和蛋白液腔(3)的容積均為250毫升。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種大規(guī)模包涵體蛋白透析復(fù)性裝置,其特征在于,所述第一復(fù)性液容器(7)和第二復(fù)性液容器(8)的容積均為2升。