專利名稱:牛x精子分離方法及其分離裝置的制作方法
當前,為提高奶牛的繁殖率,迅速建立母畜繁殖群,增加牛奶及其奶制品的產(chǎn)量,奶牛繁殖的性別控制已成為畜牧業(yè)中主要研究的課題了。由于性別決定的主要因素是性染色體,含X染色體的卵子與含Y或X染色體的精子結(jié)合決定子代性別,所以在控制子代性別方面采取了一些相應的措施,如調(diào)節(jié)飼料、改變母牛生殖道的PH值、掌握人工授精時間等。但是,由于這些措施在目前暫無充分的理論依據(jù),故未能達到預期的效果。為了能在人工授精時控制胎畜的性別,必須使精液中X精子與Y精子分離。本發(fā)明者曾針對牛精子性別預測方法和鑒別方法進行了研究(見遼寧畜牧獸醫(yī)1985年第1期和第3期),提出了簡便易行的鑒別方法,并利用電泳法進行了分離牛X及Y精子的初步研究,自行設(shè)計的電泳裝置雖然取得了較為滿意的分離效果,在陽極側(cè)的精液中X精子占90.36%,但因分離出的X精子活力較差,故影響了該裝置的推廣應用。
本發(fā)明的目的是提供一種牛X精子的分離方法及其分離裝置,該方法可采用鮮精液或冷凍精液進行分離,分離率高。特別是該方法所使用的分離裝置操作簡便,所用時間短,分離出的X精子活力好。
本發(fā)明的目的是這樣實現(xiàn)的首先將鮮精液裝在分離裝置的電泳池中,接通直流電源,在電壓為3V、電流為40~100μA的條件下,通電1小時后,收集陽極處的精液,即分離出X精子。該方法所用的分離裝置的結(jié)構(gòu)是放置在電泳平臺上的電泳池兩端各套有一螺旋形電極,電極外周纏有經(jīng)支持液浸濕的藥用紗布卷,兩電極分別與直流電源的正、負極相接,電泳池采用可導電的網(wǎng)眼形半透膜袋。
由于本發(fā)明的分離方法,采用的電泳池的結(jié)構(gòu)不僅可防止精液與電極直接接觸,而且能維持精子的能量來源,不影響精子的運動軌跡,因此,精子的分離率高,分離后的精子活力好。該分離裝置結(jié)構(gòu)簡單,容易操作,分離時間短,便于攜帶,特別適于鮮精液的分離,故極易推廣應用。
以下結(jié)合附圖和實施例對本發(fā)明作進一步描述。
圖1是本發(fā)明分離裝置一種具體結(jié)構(gòu)的示意圖。
圖2是圖1的A向視圖。
根據(jù)圖1~2詳細說明本發(fā)明的分離方法及其分離裝置的具體結(jié)構(gòu)。該分離裝置可封裝在一個容器中。其電泳平臺6上放置一兩端各套有一螺旋形金屬鈦絲電極2、5的電泳池4。分別與直流電源9正、負極相接的電極2、5的外周纏有經(jīng)支持液浸濕的藥用紗布卷1。該支持液選用可保持滲壓,能維持精子能量來源的溶液。本實施例采用濃度為2.9%的檸檬酸鈉溶液作為支持液。電泳池4采用可導電的網(wǎng)眼形半透膜袋。操作時,取鮮精液4毫升(取自黑龍江省佳木斯國營農(nóng)場總局畜牧獸醫(yī)總站的黑白花種公牛,牛號991),原液活力0.8,密度13億,X精子所占比例為53.05%。將鮮精液直接置于上述的分離裝置中的電泳池內(nèi),接通電壓為3V的直流電源9和照明燈10的電源,調(diào)整電阻箱8使通過的電流為80μA。保持電泳池溫度(溫度計3顯示為37℃),在電流表7的指示為80μA的條件下,通電1小時,斷電后收集陽極處的精液得1.1毫升。再將該精液加稀釋液3.9毫升,按常規(guī)方法制備成冷凍精液顆粒。取出一棵冷凍顆粒,檢查活力及X精子所占比例為活力0.6,X精子占總精子的89.14%,采用本發(fā)明的方法分離精液中的X精子,在同樣條件下,經(jīng)十次實驗所得結(jié)果的平均值可達91.79±6.4,活力為0.68±0.18。如果采用冷凍后的精液分離X精子,應優(yōu)先選用原料組分體積比為乳糖∶蛋黃∶丙三醇=15∶4∶1的稀釋液,稀釋比為1∶3即可進行分離。
權(quán)利要求
1.一種牛X精子分離方法,其特征是將鮮精液或冷凍精液,置于分離裝置中,接通直流電源,在電壓為3V、電流為40~100μA的條件下,通電1小時后,收集陽極處的精液,即分離出X精子。
2.一種根據(jù)權(quán)利要求1所述方法用的分離裝置,其特征是放置在電泳平臺上的電泳池兩端各套有一螺旋形電極,電極外周纏有經(jīng)支持液浸濕的藥用紗布卷,兩電極分別與直流電源的正、負極相接,電泳池采用可導電的網(wǎng)眼形半透膜袋。
全文摘要
本發(fā)明提供一種牛X精子分離方法及其分離裝置。該方法可采用鮮精液或冷凍精液進行分離,所用分離裝置是由兩端套有電極的電泳池和電極外周纏有經(jīng)支持液浸濕的藥用紗布卷構(gòu)成。接通直流電源1小時后,收集陽極處的精液,即分離出X精子。這種分離方法分離率高,特別是該方法使用的分離裝置操作簡便,所用時間短,分離出的X精子活力好。
文檔編號B01D57/02GK1048168SQ89105110
公開日1991年1月2日 申請日期1989年6月19日 優(yōu)先權(quán)日1989年6月19日
發(fā)明者蘇鐘浦 申請人:中國醫(yī)科大學