專利名稱：具有用于調節(jié)施加試劑的屏障的測定裝置的制作方法
目錄表為了方便起見，提供下面的目錄表發(fā)明背景概述附圖簡述說明定義I、屏障控制的測定裝置A、方法的原理B、本發(fā)明裝置所共有的組件1、層析介質2、吸收體3、其它一些載帶流體的部件4、過濾用多孔物質5、可相對(opposable)的組件6、基本上不能滲透流體的屏障7、被標記的組份C、采用垂直/橫向流動的測定裝置1、采用垂直/橫向流動的基本測定裝置2、具有鄰接屏障的涂藥器的、一個組件的測定裝置3、在第一可相對的組件上具有涂藥器的、兩個組件的裝置4、在第二可相對的組件上具有涂藥器的、兩個組件的裝置5、具有過濾用多孔物質以便去除顆粒狀物質的裝置a、在引入再溶解的被標記的特異性結合對后在流體路線中具有過濾用多孔物質的裝置b、在引入再溶解的被標記的特異性結合對前在流體路線中具有過濾用多孔物質的裝置6、用于萃取拭子的裝置7、用于競爭性免疫測定的裝置D、各向異性流動的裝置E、采用被分析物直接吸收到層析介質的裝置II、順序免疫層析法III、放大了的免疫層析法A、銀放大的原理B、采用銀放大的裝置1、具有裝在第二可相對的組件上的涂藥器中的銀鹽的裝置2、具有兩個區(qū)段的涂藥器以便提供清洗的裝置3、具有基板和插入件的裝置IV、酶免疫層析法A、酶標記的原理1、酶和底物的選擇2、酶和特異性結合對成員的耦合B、適用于酶免疫層析法的裝置例1——表明沒有與對于賈第蟲呈陰性的樣品反應的例子例2——表明對賈第蟲呈陽性的檢測的試驗例3——用于鏈球菌A的測定裝置例4——用于酶免疫層析法的裝置本發(fā)明的優(yōu)點發(fā)明背景本發(fā)明針對用于確定樣品特性的檢驗裝置、成套的外殼、以及裝有該檢驗裝置和外殼的試劑盒，并針對采用該檢驗裝置和外殼確定樣品特性的方法。
在許多用于檢測和/或確定被分析物的分析系統(tǒng)中，特別是在用于檢測和/或確定生物學上感興趣的被分析物的許多分析系統(tǒng)中，有層析測定系統(tǒng)。常常采用這樣的一些系統(tǒng)測定的那些被分析物中有(1)荷爾蒙，例如，人類絨毛膜促性腺激素(hCG)，常被測定為人受孕的一種標志；(2)抗原，特別是對細菌、病毒及原生動物的病原體(例如鏈球菌、肝炎病毒及賈第蟲)特異性的抗原；(3)抗體，特別是因病原體傳染所導致的抗體，例如，對于細菌幽門螺桿細菌(Helicobacter pylori)以及對于人類免疫缺乏病毒(HIV)的抗體；(4)其它一些蛋白質，例如，血紅蛋白，常在測定便潛血時測定這些蛋白質，便潛血是一些胃腸病癥(例如，結腸癌)的一種早期指示；(5)酶，例如，天冬氨酸轉氨酶、乳酸脫氫酶、堿性磷酸酯酶、和谷氨酸脫氫酶，常作為生理功能和組織損傷的標志而被測定；(6)藥物，包括治療用藥物，例如，抗生素、鎮(zhèn)靜劑和抗驚厥劑，還包括濫用的非法藥物，例如，柯卡因、海洛因及大麻；(7)環(huán)境污染物，例如，殺蟲劑和芳香烴；以及(8)維生素。
醫(yī)生和醫(yī)療技術人員常采用這樣的一些層析系統(tǒng)，用于在室內快速診斷和治療監(jiān)控各種各樣的病癥。越來越多的病人自己在家中使用它們來監(jiān)控這樣的一些病癥。
在最重要的這樣一些系統(tǒng)中，有“薄層”系統(tǒng)，在“薄層”系統(tǒng)中，溶劑橫穿過一種薄的、平的吸收介質?？捎眠@樣的一些薄層系統(tǒng)進行的最重要的檢測中，有免疫測定，免疫測定依賴于抗原或不全抗原和一種相應抗體之間的特異性相互作用。相當長的一段時間以來就已知道采用免疫測定作為檢驗有臨床重要性的一些分子的存在和/或量的一種方法。早在1956年，J.M.Singer就報道了采用一種基于免疫的膠乳凝集試驗用于檢測與風濕性關節(jié)炎有關的一種因子(Singer等人，Am.J.Med.22888-892(1956))。
在用于免疫測定的那些層析技術中，有一種方法叫作免疫層析法(immunochromatography)。一般說來，這種技術采用一種顯示試劑(disclosing reagent)或粒子，這種試劑或粒子已經與待測定的分子的一種抗體耦合，形成一種共軛物。然后，將這種共軛物與某種樣品混合，而且，如果在這種樣品中有待測定分子的話，則與上述顯示試劑耦合了的那些抗體與待測定的分子結合，由此，指明有待測定的分子存在?？梢酝ㄟ^顏色、磁性質、放射性、與另外的分子的特異反應性、或者其它物理或化學性質來鑒別上述顯示試劑。所采用的特異性反應隨被測定分子的性質和要待檢樣品的性質而變化。
免疫層析測定根據要檢測的抗原——抗體配合物的性質和產生該配合物所要求的那些反應的順序分為兩個主要類別“夾層(sandwich)”免疫層析測定和“競爭性”免疫層析測定。要檢測的抗原本身可以是一種抗體，例如，在對于幽門螺桿細菌特異性抗體的血清學測定中。在這樣一些情況下，要檢測的抗體可與一種特異性抗原結合?；蛘咭部刹捎脤⒌谝豢贵w結合到要檢測的被分析物上的一種被標記的第二抗體，來間接檢測要檢測的抗原。
一般說來，夾層免疫層析方法要求把可能含有要測定的被分析物的樣品與被分析物的抗體混合。這些抗體是可動的，并且一般與一種標記物或一種顯示試劑耦合，例如，已染色的膠乳、一種膠體金屬溶膠或一種放射性同位素。然后，把這種混合物施加給一種層析介質，這種層析介質含有固定了的感興趣的被分析物抗體的條帶或區(qū)域。所述層析介質常常是類似于測桿的長條形狀。當要測定的分子和被標記的抗體的配合物到達層析介質中的固定抗體的區(qū)域時，就發(fā)生結合，而且，結合了的被標記抗體就定位在所述區(qū)域。這表明存在有要測定的分子。這種技術可用來獲得定量或半定量的結果。
Grubb等人的美國專利USP 4,168,146和Tom等人的美國專利USP4,366,241中，都說明了在試驗條上所進行的夾層免疫測定的一些例子，在此引用這兩篇專利作為參考。
在競爭性免疫測定中，標記物一般是一種被標記的被分析物或被分析物的類似物，這種被標記的被分析物或被分析物的類似物與存在于樣品中的任何未被標記的被分析物競爭，以和抗體結合。競爭性免疫測定一般用于檢測諸如不全抗原那樣的被分析物，每種不全抗原都是單價的，并且只能結合一個抗體分子。Deutsch等人的美國專利USP 4,235,601、Liotta的美國專利USP 4,442,204以及Buechler等人的美國專利USP 5,208,535都公開了一些競爭性免疫測定裝置的例子，此處引用所有這些文獻作為參考。
目前可資利用的那些采用試驗條的層析技術盡管有效，但還是有許多缺點。許多樣品(例如糞便樣品)包含可能堵塞層析介質孔的顆粒狀物質，這大大妨礙了免疫層析過程。其它一些樣品(例如血液)含有細胞和帶顏色的組份，使得難于識別檢驗結果。既使樣品不產生干擾，用現有的層析檢驗裝置也常常難以把樣品施加給層析介質，以便使樣品向前均勻穿過層析介質，從而保證該樣品到達以一種均勻、直線的方式出現結合的區(qū)域。由于待測定樣品的性質或待進行測定的性質，目前可資利用的那些試驗條中還有其它一些問題。在目前可資利用的許多試驗條中，樣品從施加點到經過固相上的特異性俘獲帶的通道的通過時間常導致在獲得結果時所不希望有的時間延遲。此外，貴重的樣品和試劑可能會損失在通往俘獲區(qū)域途徑中的那些組件的死角里。另外，目前可資利用的那些免疫層析試驗條構造不適于進行酶免疫測定，因為這樣的一些構造一般在試驗條上留下活性酶的本底(background)，這在加入底物時可在試驗條中產生強的本底，并可干擾檢測被分析物，特別是在低濃度的情況下更是如此。
采用目前可資利用的那些構造，也不能進行清洗步驟，而該清洗步驟又常常是必需的，以便改善靈敏度并減弱本底。在裝置中進行預培養(yǎng)步驟也是困難的，且在許多情況下還是不可能的。此外，還需要對于大量抗原的一種有效測定，例如，衣原體沙眼脂多糖(LPS)抗原，該抗原與在試驗條中通常作為固相用的那些材料強有力地且非特異性地結合。
目前可資利用的那些用于免疫層析的裝置和技術有樣品制備和產生廢物這樣的一些其它問題。由感染了的血液和血液成份所傳播的疾病(例如，艾滋病和肝炎)的更加流行使這些問題更加嚴重。幾乎不可能給層析介質直接施加樣品(例如糞便)或取樣裝置(例如，一個咽喉拭子)。在樣品可被施加到層析介質前，通常需要幾種萃取和預處理反應。通常由醫(yī)生或技術人員在幾個諸如試管或需要用轉移裝置(例如，移液管)的去除微粒(microfuge)管那樣的小容器中進行試驗來進行這些反應。然后，這些裝置的每一個都被污染了，并且必須用專門的預防措施來處理，以便使工作者或可能不小心而接觸了上述廢棄物的人不受污染。對于目前可資醫(yī)生或技術人員利用的那些層析裝置，還有另外的限制，這就是它們不能進行雙向和兩維的層析法。長久以來就已知道這些技術是強有力的分析工具，但是，相對于簡單的單向層析法來說，它們的復雜性已使得難于把它們在醫(yī)生辦公室或臨床實驗室中應用于試驗條裝置。
因此，需要一種改進的能處理廣泛范圍的層析測定的測定裝置。這樣的一種裝置應該能處理所有類型的免疫測定，這包括夾層和免疫測定，以及采用層析法的其它類型的測定。這樣的一種裝置應該能直接容納一種可能被污染過的樣品或一個樣品制備裝置，以便不再需要萃取容器和轉移裝置。這樣的一種裝置優(yōu)選為一個試驗條形式，還應該能對帶色的樣品或含有顆粒狀物質的樣品進行免疫層析測定而不會有干擾，并且能把樣品均勻平坦地傳送到層析介質，以便改善試驗的準確性和精度。此外，這樣一種改進的試驗條當在臨床實驗室或醫(yī)生辦公室使用時，應該能進行雙向或兩維層析法。而且，這樣的一種試驗條應該使進行測定所經歷的時間耗費最少，并且使死體積最少，以便最為經濟地使用樣品和試劑。最后，這樣的所改進的試驗條應該為酶免疫測定提供較弱的本底。
概述我已開發(fā)出一種滿足了這些需要的測定裝置，并且為生物學上感興趣的那些被分析物提供了改進的、重復性更好的測定，同時使測定簡化。這種裝置能進行所有類型的免疫測定，包括夾層免疫測定和競爭性免疫測定。這種裝置還能進行放大了的免疫測定，在這種免疫測定中，通過酶反應或使用銀來放大信號，以便放大由金標記物所產生的信號。這種裝置還能用來測定直接與層析介質結合的被分析物，例如，脂多糖。
本發(fā)明的測定裝置可由一個組件構成，但最好由兩個或更多個可相對(opposable)的組件構成。當由兩個或更多個可相對的組件構成時，測定裝置利用壓力把流體從一個可相對的組件轉移到另一個可相對的組件，并且還驅使流體穿過層析介質和諸如過濾用多孔物質那樣的部件。采用壓力不僅加速該裝置的操作，而且使得在單個裝置內能進行其它一些步驟(例如萃取步驟)以便去除干擾性顆粒狀物質組份。通過用連接器，例如在每個可相對的組件上的一些連鎖部件，把那些可相對的組件放置在一起來產生壓力。最好施加一個預定大小的壓力，以便保證測定方法每個步驟性能最優(yōu)化。
具有兩個或更多個可相對的組件的裝置可另外帶有一個插入件，用于施加試劑。這種構造在進行放大了的免疫測定時特別有用。
另外，該裝置能進行其它類型的特異性結合測定，例如(1)基于特異性結合蛋白質或糖蛋白的親和性的測定，例如，基于植物凝血素、荷爾蒙受體、或對于它們的特異性配位體的病毒受體的親和性的那些測定；(2)基于一些酶對于它們相應的底物或抑制劑的親和性的測定；或者(3)按照Watson——Crick堿基配對規(guī)則，基于核酸(DNA或RNA)片段對于一種互補的核酸片段的親和性的測定。
適于進行夾層免疫測定的、一種基本的單個組件形式的、本發(fā)明的一種裝置包括(1)一種層析介質，這種層析介質具有一個第一端、一個第二端、以及第一和第二表面，并且在一個檢測區(qū)域中具有對于固定到那里的被分析物的一種特異性結合對；(2)至少一個與上述第一和第二端中的至少一個可操作地接觸(operable contact)的吸收體；以及(3)一個鄰接上述層析介質的第一表面的、基本上不能滲透流體的屏障(barrier)，屏障至少有一個孔貫穿其中，用于把液體施加給上述層析介質，所述屏障至少部分地阻擋把液體施加給上述層析介質。
上述層析介質、吸收體、屏障和孔這樣成形，使得通過上述至少一個吸收體穿過上述層析介質抽取施加給所述屏障的液體，從而使一種被分析物和用于該被分析物的檢測試劑能在上述層析介質上的所述檢測區(qū)域處形成一種三元配合物。
這種裝置可用于檢測被分析物的方法中，這種方法包括(1)使樣品與用于上述被分析物的某種被標記的檢測試劑的水溶液混合，以形成一種含有所述樣品和上述被標記的檢測試劑的溶液；(2)把上述含有所述樣品和上述被標記的檢測試劑的溶液施加給測定裝置的所述孔；(3)使得上述含有所述樣品和上述用于所述被分析物的被標記的檢測試劑的溶液能夠流過至少所述層析介質包括上述檢測區(qū)域的那個部分；以及(4)通過觀察和/或測定在上述檢測區(qū)域處所結合的所述被標記的檢測試劑來檢測和/或確定在上述檢驗樣品中的所述被分析物。
一種類似的一個組件的裝置包括一個另外的部件，即一個鄰接屏障的涂藥器(applicator)。這個涂藥器含有用于被分析物的一種被標記的檢測試劑。檢測試劑為這樣的形式，即向涂藥器中加入含水液體后它可以再溶解。該涂藥器這樣定位，使得上述屏障位于該涂藥器和層析介質之間，并使得在再溶解特異性結合對之后穿過上述孔抽取施加到該涂藥器上的樣品，而且，然后通過上述至少一個吸收體穿過所述層析介質抽取所述施加給該涂器的樣品，從而使上述被分析物和用于該被分析物的所述檢測試劑可在上述層析介質中的檢測區(qū)域處形成三元配合物。類似的工作原理用于包括一個組件和包括兩個組件的本發(fā)明的其它裝置。可按照需要，改變上述那些步驟的順序，以便使得上述樣品和其它一些試劑，例如，用于上述被分析物的被標記的特異性結合對，能被施加給所述層析介質并遷移穿過所述層析介質。
一種基本的、兩個組件形式的裝置包括(1)一個第一可相對的組件，該組件包括(a)一種層析介質，這種層析介質具有一個第一端、一個第二端、以及第一和第二表面，并且在一個檢測區(qū)域中具有對于固定在其中的被分析物的一種特異性結合對；(b)與上述層析介質的第一和第二端中的至少一個可操作地接觸的至少一個吸收體；以及(c)一個鄰接上述層析介質的第一表面的、基本上不能滲透流體的屏障，此屏障有一個孔，用于把液體施加給所述層析介質，該屏障至少部分地阻擋把液體施加給所述層析介質；以及(2)一個第二可相對的組件，以便把至少一種反應物直接或間接地通過上述孔施加給所述層析介質。所述第一和第二可相對的組件這樣成形，使得把該第一和第二可相對的組件相對即導致該第二可相對的組件把至少一種反應物通過上述孔直接或間接地施加給所述層析介質。
這樣一種兩個組件的測定裝置的一種更完善的改型包括(1)一個第一可相對的組件，該組件包括(a)一種層析介質，這種層析介質具有一個第一端、一個第二端、以及第一和第二表面，并且在一個檢測區(qū)域中具有對于固定在其上的被分析物的一種特異性結合對；(b)至少一個與上述層析介質的第一和第二端中的至少一個可操作地接觸的吸收體；(c)一個鄰接上述層析介質的第一表面的、基本上不能滲透流體的屏障，該屏障有一個孔，用于把液體施加給所述層析介質，所述屏障至少部分地阻擋把液體施加給上述層析介質；以及(d)一個鄰接上述屏障的涂藥器，這個涂藥器含有用于被分析物的被標記的檢測試劑，檢測試劑具有這樣的形式經向涂藥器加入含水液體可被再溶解；以及(2)一個包括一個樣品制備區(qū)域的第二可相對的組件。
涂藥器這樣定位，使得屏障位于該涂藥器和層析介質之間，并使得在再溶解檢測試劑后，穿過孔抽取施加給該涂藥器的含水液體，而且，然后，通過至少一個吸收體穿過上述層析介質抽取所述施加給該涂藥器的含水液體，從而使在上述層析介質上的檢測區(qū)域處，被分析物和被標記的檢測試劑形成一種三元配合物。第一和第二可相對的組件這樣成形，使得把該第一和第二可相對的組件相對即導致樣品制備區(qū)域與所述涂藥器接觸，從而使在該樣品制備區(qū)域中的樣品施加到所述涂藥器，以再溶解上述可再溶解的檢測試劑，并通過上述層析介質進行層析處理。
在一種類似的裝置中，把涂藥器轉移給第二可相對的組件，樣品施加給這個第二可相對的組件。
本發(fā)明的兩個組件的裝置的另一種改型裝有過濾用多孔物質，用于去除與第一可相對的組件上的基本上不能滲透流體的屏障鄰接的顆粒狀物質，并且具有一個涂藥器，這個涂藥器含有用于在第二可相對的組件上的被分析物的一種可再溶解的被標記的特異性結合對。在一種可供選擇的結構中，該涂藥器可位于第一可相對的組件上，而且，過濾用多孔物質這樣定位，使得施加到第一可相對的組件的樣品在到達所述涂藥器之前穿過上述過濾用多孔物質。
上述裝置的另一種改型裝有一個鄰接涂藥器的第一部分的基本上不能滲透流體的第二屏障以及一個分配膜，這個分配膜鄰接該第二屏障，并與不鄰接的該涂藥器的第二部分可操作地接觸，從而使流體可圍繞該第二屏障從所述分配膜流到上述涂藥器中。在裝置的這種改型中，第二可相對的組件包括一個用于含有檢驗樣品的一個拭子(swab)的插座(receptacle)。
在適于容納一個在第二可相對的組件上的一個拭子的、上述裝置的另一種改型中，第一可相對的組件包括一個鄰接基本上不能滲透流體的第一屏障的分配膜，以便把流體引導到在基本上不能滲透流體的第一屏障中的第一孔，該第一可相對的組件還包括一個鄰接上述分配膜的中央部分的、基本上不能滲透流體的第二屏障、一個涂藥器以及一個表面屏障，這個涂藥器含有可以再溶解形式的對于被分析物的一種被標記的特異性結合對，并定位于鄰接屏障膜，從而使流體能從這個涂藥器圍繞上述第二屏障流到所述基本上不能滲透流體的第二屏障并不直接鄰接的上述分配膜的部分，表面屏障中有一個第二孔貫穿其中，用于把液體施加給上述涂藥器。
本發(fā)明的、適于進行夾層免疫測定的、一種兩個組件的裝置的另一種改型采用各向異性流動。這種裝置包括(1)一個第一可相對的組件，該組件包括(a)一種層析介質，這種層析介質具有一個第一端、一個第二端、以及第一和第二表面，并在其中獨立、離散且不重疊的區(qū)域中固定有(i)對于被分析物的一種特異性結合對的檢測區(qū)域；和(ii)一個被分析物或被分析物類似物的對照區(qū)域；上述檢測區(qū)域位于離開所述層析介質端點處的一點和所述層析介質的第一端之間，而所述對照區(qū)域位于離開上述層析介質的端點處的一點和所述層析介質的第二端之間；(b)一個與所述層析介質的第二端可操作地接觸的吸收體；(c)一個鄰接上述層析介質的第一表面的、基本上不能滲透流體的第一屏障，所述第一屏障有一個面積實際上比所述層析介質的面積小的第一施加面，第一施加面位于離開上述層析介質的端點處的某處，上述第一屏障至少部分地阻擋把液體施加給所述層析介質；(d)一個鄰接上述第一屏障的涂藥器，這個涂藥器含有對于被分析物的一種被標記的特異性結合對，所述特異性結合對具有這樣的形式，即通過向涂藥器加入一種含水液體而可再溶解，該涂藥器這樣定位使得在上述第一施加而把液體施加給所述層析介質；以及(e)一個鄰接上述涂藥器的、基本上不能滲透流體的第二屏障，這個第二屏障這樣定位，以便至少部分地阻擋把液體施加給該涂藥器，并使得能穿過一個第二施加面把液體施加給該涂藥器，這個第二施加面實際上比所述層析介質的面積小，并且定位在距上述層析介質的第二端比距所述層析介質的第一端更近；以及(2)一個包括一個樣品制備區(qū)域的第二可相對的組件。
在這種裝置中，第一和第二可相對的組件這樣成型，使得把該第一和第二可相對的組件相對即導致樣品制備區(qū)域與第二屏障接觸，并與第二施加面接觸，從而使在該樣品制備區(qū)域中的樣品穿過該第二施加面施加給涂藥器，并基本上橫過該涂藥器的整個長度，以把所述樣品和再溶解的被標記的特異性結合對穿過上述第一施加面施加給層析介質。
本發(fā)明的一種測定裝置的另一種改型適于對被分析物進行免疫測定，例如，對直接與層析介質結合的脂多糖進行免疫測定。這樣的一種裝置可包括(1)一個第一可相對的組件，該組件包括(a)一種層析介質，這種層析介質具有一個第一端、一個第二端、以及第一和第二表面，所述層析介質對被分析物所具有的親和性足以把被分析物從含有該被分析物的含水溶液中固定到這種層析介質上；(b)一個與上述層析介質的第一端可操作地接觸的涂藥器，這個涂藥器含有對于上述被分析物的一種被標記的特異性結合對，所述特異性結合對具有這樣的形式，即通過給涂藥器加入一種含水液體而可以再溶解；(c)一個與上述層析介質的第二端可操作地接觸的吸收體；以及(d)一個鄰接上述層析介質的第一表面的，基本上不能滲透流體的屏障，這個屏障有一個孔用于把液體施加給所述層析介質，所述屏障至少部分地阻擋把液體施加給所述層析介質；以及(2)一個包括一個樣品制備區(qū)域的第二可相對的組件。
在這種裝置中，第一和第二可相對的組件這樣成形，使得把該第一和第二可相對的組件相對即導致樣品制備區(qū)域與屏障接觸，從而使得在該樣品制備區(qū)域中的樣品施加給層析介質，并且使在檢驗樣品中的被分析物至少在孔附近固定在所述層析介質上。
本發(fā)明的測定裝置還有另一種改型特別適用于進行順序免疫測定(sequential immunoassay)，其中，在開始標記步驟前完成俘獲步驟(capture step)。這樣的一種裝置可包括(1)一個第一可相對的組件，該組件包括(a)一種層析介質，這種層析介質具有一個第一端、一個第二端、以及第一和第二表面，并且在一個檢測區(qū)域中具有固定在其上的一種特異性結合對；(b)一個與上述層析介質的第一端可操作地接觸的樣品制備區(qū)域；(c)一個與上述層析介質的第二端可操作地接觸的第一吸收體；以及(d)一個鄰接上述層析介質的第一表面的、基本上不能滲透流體的屏障，這個屏障有一個孔用于把液體施加給所述層析介質，所述屏障至少部分地阻擋把液體施加給上述層析介質；以及(2)一個第二可相對的組件，該組件包括(a)一個涂藥器，這個涂藥器含有對于被分析物的一種被標記的特異性結合對，所述特異性結合對具有這樣的形式，即通過給所述涂藥器加入一種含水液體而可以再溶解；該涂藥器這樣定位，使得當把所述第一和第二可相對的組件相對時，該涂藥器與上述屏障接觸，從而使再溶解的被標記的特異性結合對穿過上述屏障中的孔施加給所述層析介質；以及(b)第二和第三吸收體，它們這樣定位，使得當把上述第一和第二可相對的組件相對時，該第二吸收體和第三吸收體與上述層析介質的一些部分可操作地接觸，從而使該第二和第三吸收體從所述層析介質中去除流體。
本發(fā)明的測定裝置的另一種改型適于進行其中用銀放大一種金標記物的免疫測定。這樣的一種裝置可包括(1)一個第一可相對的組件，該組件包括(a)一種層析介質，這種層析介質具有一個第一端、一個第二端、以及第一和第二表面，并且在一個檢測區(qū)域中具有對于固定在其上的被分析物的一種特異性結合對；(b)一個與上述層析介質的第二端可操作地接觸的吸收體；(c)一個與上述層析介質的第一端可操作地接觸的導體；(d)一個共軛物區(qū)域，這個共軛物區(qū)域含有對于用一種金溶膠標記的上述被分析物的一種特異性結合對，所述特異性結合對具有這樣的形式，即通過給所述共軛物區(qū)加入一種含水液體而可以再溶解；這個共軛物區(qū)域與上述導體直接接觸，并與上述層析介質的第一端間接接觸；(e)一個用于施加一種檢驗樣品的樣品制備區(qū)域，這個樣品制備區(qū)域與上述共軛物區(qū)域直接接觸，上述導體、共軛物區(qū)域及樣品制備區(qū)域這樣定位，使得該共軛物區(qū)域接通所述樣品制備區(qū)域和上述導體；以及(f)一個鄰接上述層析介質的第一表面的、基本上不能滲透流體的屏障，此屏障有一個孔用于把液體施加給上述層析介質，該屏障至少部分地阻擋把液體施加給所述層析介質；以及(2)一個第二可相對的組件，該組件包括(a)一個涂藥器，這個涂藥器含有通過給涂藥器加入一種含水液體而可以再溶解形式的(A)一種可溶解的銀鹽，和(B)一種還原劑，該涂藥器這樣定位，使得當把上述第一和第二可相對的組件相對時，該涂藥器與上述屏障接觸，從而使被再溶解的銀鹽和還原劑穿過上述屏障中的孔施加給所述層析介質；以及(b)第二和第三吸收體，該第二和第三吸收體這樣定位，使得當把上述第一和第二可相對的組件相對時，該第二吸收體和第三吸收體與上述層析介質的一些部分可操作地接觸，從而使該第二和第三吸收體從所述層析介質中去除流體。
在一種類似的裝置中，第二可相對的組件包括含有兩個區(qū)段的一個涂藥器，第一區(qū)段用于容納一種含水液體，而第二區(qū)段含有可以再溶解形式的一種可溶解的銀鹽和一種還原劑。在這種裝置中，所述涂藥器這樣定位，使得當把第一和第二可相對的組件相對時，該涂藥器的第一區(qū)段與上述屏障中的孔直接接觸，而該涂藥器的第二區(qū)段與所述孔間接接觸，從而使所述含水液體首先施加給層析介質，以便提供清洗，隨后，把含水的銀鹽和上述還原劑施加給所述層析介質。
本發(fā)明適于進行銀放大的免疫測定的測定裝置的另一種改型裝有一個基板(base panel)和一個插入件(insert)。這種裝置可包括(1)一個基板，這個基板包括(a)一個第一可相對的組件，這個組件包括(i)一種層析介質，這種層析介質具有一個第一端、一個第二端以及第一和第二表面，并且在一個檢測區(qū)域中具有對于固定在其上的被分析物的一種特異性結合對；(ii)一個共軛物區(qū)域，這個共軛物區(qū)域含有通過向該共軛物區(qū)加入一種含水液體而可以再溶解形式的對于用一種金溶膠標記的上述被分析物的一種特異性結合對，該共軛物區(qū)域與上述層析介質的第一端可操作地接觸；(iii)一個與上述共軛物區(qū)域可接觸地接觸的導體，該共軛物區(qū)域接通上述層析介質的第一端和所述導體；以及(iv)一個鄰接上述層析介質的第一表面的、基本上不能滲透流體的屏障，這個屏障有一個孔用于把液體施加以所述層析介質，該屏障至少部分地阻擋把液體施加給所述層析介質；(b)一個第二可相對的組件，該組件包括(i)一個用于含有某種檢驗樣品的一個拭子的第一插座；(ii)一個用于給上述拭子添加至少一種萃取試劑的井(well)；以及(iii)一個與上述插座和井分開的第一吸收體；以及(c)一個第二插座，這個第二插座用于穩(wěn)固插入件，避免插入件表面的相對運動以及上述第一和第二可相對的組件的相對運動；以及(2)一個插入件，此插入件包括(a)一個涂藥器，這個涂藥器含有通過給涂藥器加入一種含水液體而可以再溶解形式的(A)一種可溶解的銀鹽，和(B)一種還原劑；(b)一個第二吸收體；(c)一個第三吸收體；以及(d)一個用于插入到上述基板的第二插座中的凸出物(protrusion)。
第一和第二可相對的組件這樣成形，使得當把它們相對時，使第一吸收體與層析介質的一部分接觸，并使插座與導體接觸。插入件這樣成形，使得當把凸出物插入基板的第二插座中時，涂藥器與孔可操作地接觸，以便把該涂藥器的所含之物穿過所述孔施加給上述層析介質，而且，第二和第三吸收體各自都與所述層析介質的一部分可操作地接觸，以便從所述層析介質中抽取流體。
一種類似的裝置可進行酶放大的免疫測定。在這種裝置中，插入件的涂藥器含有可以再溶解形式的用于一種酶標記物的底物，這種酶標記物與對于被分析物的一種特異性結合對結合。該酶標記物通過催化涉及所述底物的一種反應來產生一種不溶解的可檢測的產物。
本發(fā)明的測定裝置的其它一些改型適于進行競爭性免疫測定。一般說來，適于進行競爭性免疫測定的改型包括(1)一種層析介質，這種層析介質具有一個第一端、一個第二端以及第一和第二表面，并在一個檢測區(qū)域中具有固定在其上的一種輔助的特異性結合對(Secondary specific binding partner)，這種輔助的特異性結合對能夠結合對被分析物缺少親和性的一對特異性結合對的一個成員；(2)至少一個與上述層析介質的第一和第二端中的至少一個可操作地接觸的吸收體；(3)一個鄰接上述層析介質的第一表面的、基本上不能滲透流體的屏障，該屏障至少有一個孔用于把液體施加給所述層析介質，所述屏障至少部分地阻擋把液體施加給所述層析介質；以及(4)一個鄰接上述屏障的親和性膜，該親和性膜含有對于固定到其上的被分析物的一種特異性結合對。上述層析介質、吸收體、屏障、孔和親和性膜這樣成形，使得通過上述至少一個吸收體穿過所述層析介質抽取施加到親和性膜的液體，從而，如果樣品中有被分析物的話，一種被標記的檢測試劑結合在上述層析介質中的檢測區(qū)域處。
可通過包括一個第二組件來使這種裝置完善，這個第二組件包括一個涂藥器，該涂藥器含有通過向涂藥器中加入一種含水流體而可以再溶解形式的一種被分析物的類似物，這種被分析物的類似物包括被分析物，該被分析物與對于此被分析物缺少親和性的特異性結合對的一個成員共價結合，并且可被該特異性結合對結合，所述被分析物的類似物用一種可檢測的標記物標記。
附圖簡述參照下面的說明、所附的權利要求書及附圖將會更好地了解本發(fā)明的這些和其它特征、情況及優(yōu)點，其中

圖1畫出了本發(fā)明的一種基本的單個組件的測定裝置的側視圖；圖2畫出了裝有鄰接屏障的涂藥器的一種單個組件的裝置的側視圖；圖3A是本發(fā)明的一種兩個組件的測定裝置的圖，顯示了各個獨立的組件；在第一個組件上有層析介質、屏障、和涂藥器，在第二個組件上有一個樣品制備裝置；圖3B畫出了圖3A的兩個組件的測定裝置的第一個組件的側視圖，示出了屏障、孔和涂藥器；圖4A是本發(fā)明的一種兩個組件的測定裝置圖，這種測定裝置在第一個組件上具有層析介質、屏障和孔在第二個組件上有一個涂藥器；圖4B是穿過圖4A的兩個組件的測定裝置的第一個組件的線B——B’的剖面圖，顯示了屏障和孔；圖5A是本發(fā)明的一種兩個組件的測定裝置的圖，這種測定裝置在第一個組件上具有層析介質、屏障、孔和過濾用多孔物質膜，而在第二組件上有一個涂藥器；圖5B是穿過圖5A的兩個組件的測定裝置的第一個組件的線C——C’的剖面圖，顯示了屏障、孔和過濾用多孔物質膜；圖6A是本發(fā)明的另一種兩個組件的測定裝置的圖，這種測定裝置在第一個組件上具有層析介質、屏障、孔、涂藥器和過濾用多孔物質膜，而在第二個組件上具有一個樣品制備區(qū)域；圖6B是穿過圖6A的兩個組件的測定裝置的第一個組件的線D——D’的剖面圖，顯示了屏障、孔、涂藥器和過濾用多孔物質膜；圖7A是本發(fā)明的、適于在一個拭子上的樣品的、另一種兩個組件的測定裝置的圖，這種測定裝置在第一個組件上具有層析介質、一個第一屏障、一個孔、一個涂藥器、一個第二屏障、和一個分配膜，而在第二個組件上具有用于拭子的插座；圖7B是穿過圖7A的兩個組件的測定裝置的第一個組件的E——E’線的剖面圖，顯示了第一屏障、孔、涂藥器、第二屏障和分配膜；圖8A是本發(fā)明的、適于采用在一個拭子上的樣品進行夾層免疫測定的一種兩個組件的測定裝置的圖，這種測定裝置具有一個涂藥器，該涂藥器鄰接一個屏障膜并含有對于被分析物的可再溶解的、被標記的特異性結合對；圖8B是沿著線F——F’、穿過圖8A的兩個組件的測定裝置的第一個組件和層析介質的剖面圖，顯示了層析介質、第一屏障和孔、分配膜、第二屏障、涂藥器以及表面屏障和孔；圖9A是本發(fā)明的、適于進行競爭性免疫測定的、一種兩個組件的測定裝置的圖，這種測定裝置裝有層析介質、一個屏障、一個孔和一個親和性膜；圖9B是沿著圖9A的兩個組件的測定裝置的第一個組件的線G——G’的剖面圖，顯示了層析介質、屏障、孔和親和性膜的細節(jié)；圖10A是本發(fā)明的、在幾個部件中采用各向異性流動的、一種兩個組件的測定裝置的圖，這種測定裝置裝有兩個屏障、一個涂藥器和一種層析介質；圖10B是沿著圖10A的兩個組件的測定裝置的第一個組件的一個側視圖的線H——H’的剖面圖，顯示了層析介質、兩個屏障和涂藥器的細節(jié)；圖11A是本發(fā)明的一種兩個組件的測定裝置的圖，這種測定裝置適于測定直接與層析介質直接結合的被分析物，例如，脂多糖；圖11B是沿著圖10A的兩個組件的測定裝置的第一個組件的線I——I’的剖面圖，顯示了層析介質、涂藥器、吸收體、屏障和孔的細節(jié)；圖12A是本發(fā)明的、適于順序測定某種被分析物的、一種兩個組件的測定裝置的圖，在這種測定裝置中，在進行標記步驟之前，進行待測定的抗原的固定抗體的俘獲；圖12B是沿著圖12A的兩個組件的測定裝置的第一個組件的線J——J’的剖面圖，顯示了層析介質、涂藥器、吸收體、屏障和孔的細節(jié)；圖13A是本發(fā)明的、適于進行被分析物的一種放大了的測定的、一種兩個組件的測定裝置的圖，在這種測定裝置中，通過用金標記來檢測所述被分析物，并且用銀來放大金標記物的信號；圖13B是沿著圖13A的兩個組件的測定裝置的第一個組件的線K——K’的剖面圖，顯示了層析介質、與所述層析介質直接或間接接觸的那些部件、屏障和孔的細節(jié)；圖14A是本發(fā)明的、適于采用銀放大進行被分析物測定的、一種兩個組件的測定裝置的圖，在這種測定裝置中，在銀放大步驟前，提供清洗；圖14B是沿著圖14A的兩個組件的測定裝置的第一個組件的L——L’線的剖面圖，顯示了層析介質、與所述層析介質直接或間接接觸的那些部件、屏障和孔的細節(jié)；圖15A是本發(fā)明的一種測定裝置的圖，這種測定裝置采用了一種兩個組件的基板和一個插入件，并且適于采用一種金標記物對被分析物進行銀放大的測定；圖15B是沿著圖15A的測定裝置的基板的第一個組件的M——M’線的剖面圖，顯示了層析介質、與所述層析介質直接或間接接觸的那些部件、屏障和孔的細節(jié)；圖16A是本發(fā)明的一種測定裝置的圖，這種測定裝置采用了一種兩個組件的基板和一個插入件，并且適于采用一種酶標記的抗體來進行酶免疫測定，且采用一種形成某種不溶解的產物的底物；圖16B是沿著圖15A的測定裝置的基板的第一個組件的線N——N’的剖面圖，顯示了層析介質、與所述層析介質直接或間接接觸的那些部件、屏障和孔的細節(jié)；圖17A是本發(fā)明的一種測定裝置的圖，這種測定裝置采用了一種兩個組件的基板和一個適于酶免疫層析法的插入件，并且在該裝置的基板的第一個組件上裝有對于用一種酶標記的被分析物的一種特異性結合對；圖17B是沿著16A的測定裝置的基板的第一個組件的線O——O’的剖面圖，顯示了層析介質、與所述層析介質直接或間接接觸的那些部件、屏障和孔的細節(jié)；以及圖18是圖7A和7B所示的裝置的一種簡化了的改型的剖面圖，且這種簡化了的改型裝置用于檢測下面實施例2中的寄生蟲賈第蟲。
說明定義在本公開文本的范圍內，如無另外指明，則按如下定義下述術語特異性結合對一對分子的一個成員，這對分子借助特異性的非共價相互作用而互相作用，這些相互作用取決于所涉及的那些分子的三維結構。一些特異性結合對的典型配對包括抗原——抗體、不全抗原——抗體、荷爾蒙——受體、核酸鏈——互補的核酸鏈、底物——酶、抑制劑——酶、碳水化合物——植物凝血素、生物素——抗生物素蛋白以及病毒——細胞受體?？刹僮鞯亟佑|兩個固體組件當以這樣一種方式直接或間接接觸時叫作可操作地接觸，即一種含水液體可通過毛細管作用或其他作用可從兩個組件之一基本上不間斷地流到另一個組件。“直接接觸”是指兩個部件進行直接的物理接觸，例如，邊對邊或正面對背面的接觸。一般來說，當兩個組件直接接觸時，它們有約0.5mm到約3mm的搭接部分重疊。不過，可用一些對接的邊來放置這些組件?！伴g接接觸”是指兩個組件沒有直接接觸，但用一個或多個導體接通。有限容積當一個吸收體在其所的裝置中進行正常測定期間，被容納的液體飽和時，該吸收體具有有限容積。此時，該吸收體能釋放附加的所吸收的液體(additional liquid absorbed)，并至少部分變得有傳導性。被分析物術語“被分析物”包括待測定的實際分子以及該分子的一些類似物和衍生物，后一種情況是在這樣的一些類似物和衍生物以一種實際上等效于被分析物本身的方式與用于測定的另一種分子結合時的情況。抗體術語“抗體”包括適宜特異性的完整抗體分子和抗體碎片(包括Fab、F(ab’)和F(ab’)2碎片)以及化學改性的完整抗體分子和抗體碎片，包括通過體外亞單元的重新結合所組成的混合抗體。輔助的特異性結合對當一對特異性結合對相互作用時，與這對特異性結合對的一個成員結合的另一種特異性結合對就叫作輔助的特異性結合對。例如，一對特異性結合對可包括賈第蟲抗原和兔抗賈第蟲抗體。在這種情況下，輔助的特異性抗體可以是山羊抗兔IgG抗體。輔助的特異性結合對可以對于它所結合的一種抗體特異性結合對的種、類或子類有特異性?；蛘弋斈切┨禺愋越Y合對中的一個用生物素標記時，輔助的特異性結合對可包括與抗生物素蛋白共軛的一種分子。I、屏障控制的測定裝置本發(fā)明的一個方面是可用于免疫測定和其它依賴于特異性結合相互作用的一些測定的屏障控制的測定裝置。本發(fā)明的裝置特別適用的兩種類型的測定是夾層免疫測定和競爭性免疫測定。A、方法的原理本發(fā)明的所有裝置都具有層析介質，一個基本上不能滲透流體的屏障鄰接這種層析介質。該屏障至少部分地阻擋把液體施加給所述層析介質。所述屏障有一個孔貫穿其中，用于把液體施加到所述層析介質。一般來說，所述孔實際上小于上述屏障；它的形狀最好是一條線或狹縫。
在某些情況下，打算使流體在測定步驟進行過程期間通過孔施加給層析介質。當層析介質的兩端都結合有吸收體時就是這種情況。在另外一些情況下，液體可通過層析介質端部之一并通過孔進入所述層析介質。在所有情況下，打算使液體能在一個近似垂直于層析介質平面的方向上從上述孔流入所述層析介質。這種并非在一個層析介質平面內的流動是本發(fā)明的測定裝置的一個特性。這些流動特性導致在本發(fā)明的裝置中更有效的流動以及更有效地利用試劑。
盡管本發(fā)明的基本原理可用于一種單個組件的測定裝置，一般來說，最好還是用來構造那些包含兩個或更多可相對的組件的測定裝置，這些可相對的組件用一個合葉(hinge)連接，并可用諸如鎖扣那樣的一些連接器固定。這使得能給組件施加壓力，以便驅動流體從一個組件到另一個組件，并加快流速。在另外一些情況下，裝置包括兩個可相對的組件，其中一個組件具有一個定位插入件的插座。這種構造特別適用于酶免疫層析測定及涉及信號放大的那些測定，例如，用銀放大的金溶膠標記的測定。B、本發(fā)明裝置所共有的組件有大量的組件對于本發(fā)明的測定裝置是共同的，為方便起見，這里作些討論。1、層析介質層析介質為一個條。一般來說，這個條基本上是平面形狀的，盡管并不要求在所有的應用中都是這樣。它一般是矩形形狀，具有第一和第二端以及第一和第二表面。本發(fā)明書從頭至尾，術語“第一端”是指液體首先施加給層析介質的那端，而術語“第二端”是指所述層析介質的對面的那個端點。施加在層析介質的第一端處或其附近的液體可以是，但并非必須是一種樣品或一種被處理過的樣品。層析介質由適用作被分析物及被分析物——抗體共軛物的薄層層析法的介質的材料構成，例如，硝化纖維、耐綸、人造纖維、纖維素、紙或二氧化硅?？砂凑招枰獙游鼋橘|進行預處理或進行改性。層析介質一般是半透明的，從而可從每一側都能見到在其上所呈現的帶顏色的區(qū)域。2、吸收體在本發(fā)明的許多裝置中，吸收體與層析介質的一端或兩端可操作地接觸。吸收體可由任何吸水材料制成，該材料會足夠地保持一種含水液體，以使液體能穿過層析介質被抽取，并聚集在所述吸收體中。典型的材料包括但并不限于濾紙。3、其它一些載帶流體的部件如下所述，在本發(fā)明的一些特定的裝置中，其它一些載帶流體的部件也可用作樣品制備區(qū)域、涂藥器、分配膜和/或導體。用親水性介質制備這些部件，這種介質使一些含水流體通過，而基本上不會吸收它們。這種材料在本領域中眾所周知。在某些情況下，這些部件可在其中裝有一個干燥形式的組件，這個組件可通過給其加入一種含水液體而可以再溶解。4、過濾用多孔物質本發(fā)明的某些裝置至少裝有一種過濾用多孔物質的部件，以便去除存在于糞便物質或其它一些樣品中的那些顆粒狀物質組份?？梢赃x擇地，過濾用多孔物質可去除孔隙度為0.22μm或0.45μm的整個細胞或細菌。選擇適當的過濾用多孔物質材料對于一個本領域普通技術人員來說是熟知的；可采用各種多孔或微孔材料，這些材料包括包某些干酪用的那種紗布、紙、棉花、纖維素、硝化纖維或適當性能的醋酸纖維素。5、可相對的組件本發(fā)明的測定裝置的許多實施方案均包括兩個可相對的組件。這些可相對的組件的主體最好用疊層紙板制成，該疊層紙板足以防潮，以便在進行所述裝置所的測定時含有所涉及的那些液體。還可采用一些其它基于纖維素的材料，例如，紙板或固態(tài)漂白的亞硫酸酯(SBS)?？梢赃x擇地，可相對的組件的主體可由防潮的塑料制成。一種合適的塑料是聚碳酸酯塑料，例如，LexanSM。
最好用一種由某種不能滲透含水液體的材料制成的合葉來連接那些可相對的組件，例如，可與用于第一和第二可相對的組件的材料相容地連接的或與該材料相同的某種塑料。6、基本上不能滲透流體的屏障本發(fā)明的所有裝置都裝有至少一個基本上不能滲透流體的屏障。這種基本上不能滲透流體的屏障可由塑料、紙板或紙制成，例如由一種具有粘合劑的背襯的紙條制成。一般來說，基本上不能滲透流體的屏障比那些可相對的組件薄?；旧喜荒軡B透流體的屏障只需在測定期間基本上不能滲透流體，一般約一分鐘到約十分鐘。7、被標記的組份對于打算用于進行夾層免疫測定的那些測定裝置，被標記的組份一般是對于被分析物的一種被標記的特異性結合對。標記物最好是一種可目視檢測的標記物，例如，一種膠體金屬標記物。膠體金屬標記物優(yōu)選是金、銀、青銅、鐵或錫；最好是金。在“Immunocy to chemistryModern methods and applications”(J.M.Polak和S.Van Noorden，eds.，Wright，Bristol，England，1986，ch.8，pp.115～145，)中，在J.DeMey的“The Preparation and Use of GoldProbes”中說明了制備金標記的抗體和抗原，此處引用這篇文獻作為參考。用膠體金標記的抗體可從市場上買到，例如，從Missouri的St.Louis的Sigma化學公司可買到。
也可以選用其它膠體標記物，例如，一種膠體硫標記物或一種染料——二氧化硅標記物。在一個比較不可取的、可供選擇的例子中，可目視檢測的標記物可以是一種膠體膠乳標記物。還可以采用其它一些標記物，例如，一種放射性標記物。
本發(fā)明的一個特定的實施方案采用了一些酶標記的組份。下面討論這些內容。C、采用垂直/橫向流動的測定裝置1、采用垂直/橫向流動的基本測定裝置本發(fā)明的、在一個單個組件中采用垂直/橫向流動的一種裝置包括(1)一種層析介質，這種層析介質具有一個第一端、一個第二端以及第一和第二表面，并且在一個檢測區(qū)域中具有對于固定到其上的被分析物的一種特異性結合對；(2)至少一個與上述第一和第二端中的至少一個可操作地接觸的吸收體；以及(3)一個鄰接上述層析介質的第一表面的、基本上不能滲透流體的屏障，屏障至少有一個孔貫穿其中，用于把液體施加給所述層析介質，所述屏障至少部分地阻擋把液體施加給所述層析介質。
在這種裝置中，上述層析介質、吸收體、屏障和孔這樣成形，使得通過上述至少一個吸收體穿過所述層析介質抽取施加給上述屏障的液體，從而使一種被分析物和用于這種被分析物的一種檢測試劑可在所述層析介質上的檢測區(qū)域處形成一種三元配合物。
一般說來，測定裝置包括至少兩個吸收體，一個吸收體與層析介質的第一端可操作地接觸，一個與所述層析介質的第二端可操作地接觸。檢測區(qū)域最好實際上小于上述層析介質的面積，而所述層析介質最好還包括固定到那里的被分析物或被分析物類似物的一個對照區(qū)域，這個對照區(qū)域的面積實際上比上述層析介質小，并且不與所述檢測區(qū)域重疊。在這種結構中，對于孔和那些吸收體而言，這樣定位所述對照和檢測區(qū)域，使得該檢測區(qū)域在所述孔和上述那些吸收體中之一之間，而該對照區(qū)域是在所述孔和另一個吸收體之間。
一般說來，測定裝置還包括一個鄰接層析介質的第二表面的、基本上透明的襯底，即鄰接不與屏障和孔鄰接的那個表面的、基本上透明的襯底。這就使得能觀察所述層析介質、結合到那里的用于檢測被分析物的那些試劑的帶或區(qū)。所述屏障和在該裝置的使用者視線中的其它一些組件也可用透明材料制作。
在一種優(yōu)選的結構中，孔的面積實際上小于屏障，而且對于層析介質這樣定位該屏障，使液體只能穿過上述孔進入鄰接該屏障的所述層析介質的區(qū)域。
一般說來，層析介質和至少一個吸收體基本上是平面形狀的，且屏障位于基本上平行于所述層析介質平面的一個第二平面中。
圖1中畫出了一種基本的、單個組件的裝置。裝置10有一種平面層析介質12，層析介質12有一個第一端14、一個第二端16、以及第一表面18和第二表面20。層析介質12在一個檢測區(qū)域22中具有對于固定在其上的被分析物的一種特異性結合對，檢測區(qū)域22實際上比層析介質12的面積小。層析介質12最好還包括固定到那里的被分析物或被分析物的類似物的一個對照區(qū)域24，對照區(qū)域24的面積比層析介質12實際上要小，并且不與檢測區(qū)域22重疊。
裝置10還有一個第一吸收體26和一個第二吸收體28，第一吸收體與層析介質12的第一端14可操作地接觸，而第二吸收體28與層析介質12的第二端16可操作地接觸。
裝置10還有一個鄰接層析介質12第一表面18的、基本上不能滲透流體的屏障30。屏障30有一個孔32貫穿其中，用于把液體施加給層析介質12?？?2的面積實際上小于屏障30，從而使液體可只穿過孔32進入鄰接屏障30的層析介質12的區(qū)域。
層析介質12和吸收體26及28最好實際上在一個平面內，而屏障30最好位于一個基本上平行于由層析介質10以及吸收體26和28所確定的平面的第二平面中。對照區(qū)域24和檢測區(qū)域22關于孔32和吸收體26及28這樣定位，使得檢測區(qū)域22在孔32和所述吸收體中的一個之間，而對照區(qū)域24是在孔32和所述吸收體中的另一個之間。在這種裝置中，在層析介質12中的流動關于穿過屏障30中的孔32所施加的流體是各向同性的。
測定裝置10還可包括一個鄰接層析介質12的第二表面20的、基本上透明的襯底34。
在工作時，要被測定的樣品與對于要被測定被分析物的一種被標記的特異性結合對的一種含水溶液混合，以便形成一種含有所述樣品和被標記的特異性結合對的溶液。把該含有上述樣品和被標記的特異性結合對的溶液施加給孔32，并使所述含有上述樣品和被標記的特異性結合對的溶液能至少穿過包括檢測區(qū)域22及對照區(qū)域24(如果有的話)的層析介質12的那個部分流動。然后，通過觀察和/或測定在檢測區(qū)域22中的上述被標記的特異性結合對來檢測和/或確定上述被分析物。對于該被分析物的所述被標記的特異性結合對，與在對照區(qū)域24中的該被分析物或類似物結合，表明試驗進行得正確。從孔32到對照區(qū)域22和檢測區(qū)域34的流動方向不同，這是本發(fā)明的測定裝置的一個特征。這樣，含有上述樣品和被標記的特異性結合對的同樣流體并不與檢測區(qū)域22和對照區(qū)域24這兩者接觸。
用于這種測定裝置的典型的樣品體積是5μl到100μl，更典型地，是10μl到40μl。一般說來，在約30秒到約5分鐘的范圍，在層析介質中出現流動，這取決于所述層析介質的尺寸和制作所述層析介質的材料，更典型地在約1分鐘到2分鐘的范圍內。測定一般在室溫進行，但如果需要的話，且如果試劑足夠穩(wěn)定，可在升高了的溫度37℃進行測定，以便加速層析和反應。如果需要的話，還可在低至約4℃的較低溫度進行測定，以增強所用試劑的穩(wěn)定性。2、具有鄰接屏障的涂藥器的、一個組件的測定裝置本發(fā)明的測定裝置的一種進一步的發(fā)展是一種具有鄰接屏障的涂藥器的、一個組件的測定裝置。該涂藥器含有通過向涂藥器加入一種含水液體而可以再溶解形式的對于被分析物的一種被標記的特異性結合對。這樣就不需要制備樣品和一種被標記的特異性結合對的一種單獨的溶液、并把該溶液施加給所述裝置。
這種裝置包括(1)一種平面形的層析介質，這種層析介質具有一個第一端、一個第二端以及頂面和底面，并且如上所述，在一個檢測區(qū)域中具有對于固定在其上的被分析物的一種特異性結合對；(2)至少一個與上述層析介質的那些端點中的至少一個可操作地接觸的吸收體；(3)一個鄰接上述層析介質的第一表面的、基本上不能滲透流體的屏障，屏障有一個孔貫穿其中，用于如上所述把液體施加給所述層析介質；以及(4)一個鄰接所述屏障的涂藥器，這個涂藥器含有通過向涂藥器加入一種含水液體而可以再溶解形式的對于被分析物的一種被標記的特異性結合對。
涂藥器這樣定位，使得屏障位于該涂藥器和層析介質之間，并且使得在再溶解特異性結合對之后穿過孔抽取施加給該涂藥器的一種樣品，且然后通過那些吸收體穿過上述層析介質抽取施加給該涂藥器的那種樣品，從而使被分析物和對于該被分析物的上述被標記的特異性結合對在所述層析介質上的檢測區(qū)域處形成一種三元配合物。這種三元配合物是夾層免疫測定的特征。
當采用上述裝置時，這種裝置最好包括一個在層析介質上的對照區(qū)域、一個第二吸收體，從而使在所述層析介質兩端都有吸收體，且該裝置最好還包括一個鄰接層析介質的第二表面的、基本上透明的襯底，即鄰接不與屏障鄰接的那個表面的、基本上透明的襯底。
圖2畫出了這種裝置。裝置40有一種平面層析介質42，層析介質42具有一個第一端44和一個第二端46以及第一表面48和第二表面50。層析介質42在一個檢測區(qū)域52中具有對于被固定了的被分析物的一種特異性結合對，并且最好還具有一個對照區(qū)域54。該裝置有一個第一吸收體56和一個第二吸收體58，第一吸收體56與層析介質42的第一端44可操作地接觸，而第二吸收體58與層析介質42的第二端46可操作地接觸。
上述裝置還具有鄰接層析介質42的第一表面48的、基本上不能滲透流體的屏障60。屏障60有一個孔62貫穿其中，用于把液體施加給層析介質42。如上所述，孔62的面積實際上比屏障60小。
裝置40還有一個鄰接屏障60的涂藥器64。涂藥器64含有通過向涂藥器64加入一種含水液體而可以再溶解形式的一種被標記的特異性結合對。涂藥器64這樣定位，使得屏障60在涂藥器64和層析介質42之間。在再溶解上述特異性結合對后，穿過孔62抽取施加給涂藥器64的一種樣品，并且，然后通過第一和第二吸收體56和58穿過層析介質42抽取樣品。這種結構使得在上述樣品中的被分析物和對于該被分析物的被標記的特異性結合對能在層析介質42上的檢測區(qū)域52處形成一種三元配合物。這種結構還使對于上述被分析物的所述被標記的特異性結合對能在對照區(qū)域54中與該被分析物或被分析物的類似物結合，以便表明測定進行得正確。
上述裝置還有一個鄰接層析介質42的第二表面50的基本上透明的襯底66。
在使用時，把樣品施加涂藥器64，并使該樣品能在涂藥器64中再溶解被標記的特異性結合對，以便形成含有一種樣品和所述被再溶解的被標記的特異性結合對的一種溶液。然后，使這種含有所述樣品和被再溶解的被標記的特異性結合對的溶液能穿過孔62且之后至少流過包括檢測區(qū)域52和區(qū)域54(如果有的話)的層析介質42的一部分。然后，通過觀察在檢測區(qū)域52和/或對照區(qū)域54處有一些可視的帶，進行檢測和/或確定上述被分析物。3、在第一可相對的組件上具有涂藥器的、兩個組件的裝置本發(fā)明的裝置的進一步的發(fā)展是一種至少具有兩個組件的裝置，用一種合葉來連接第一和第二可相對的組件。
至少裝有兩個可相對的組件的裝置的實施方案包括(1)一個第一可相對的組件，該組件包括(a)一種層析介質，這種層析介質具有一個第一端、一個第二端以及第一和第二表面，并在一個檢測區(qū)域中具有對于固定在其上的被分析物的一種特異性結合對；(b)至少一個與上述層析介質的第一和第二端中的至少一個可操作地接觸的吸收體；以及(c)一個鄰接上述層析介質的第一表面的、基本上不能滲透流體的屏障，此屏障有一個孔用于把液體施加給所述層析介質，該屏障至少部分地阻擋把液體施加給所述層析介質；以及(2)一個可相對的第二組件，以便穿過上述孔把至少一種反應物直接或間接地施加給所述層析介質。
在這種裝置中，第一和第二可相對的組件這樣成形，使得把該第一和第二可相對的組件相對即導致所述第二可相對的組件把至少一種反應物穿過上述孔施加給層析介質。
最好能使第一和第二可相對的組件保持相對，從而使壓力便于把至少一種反應物穿過上述孔施加給層析介質。
在本發(fā)明的、采用兩個可相對的組件的裝置的一個優(yōu)選實施方案中，第一可相對的組件具有一種層析介質、一個屏障以及一個含有對于被分析物的一種特異性結合對的涂藥器。第二可相對的組件具有一個樣品制備區(qū)域，樣品施加給這個樣品制備區(qū)域。這種裝置還具有使所述這些可相對的組件相對并向那里施加壓力的裝置。該壓力足以使流體從一個可相對的組件沿一個基本上垂直該可相對的組件的方向轉移到另一個可相對的組件，從而使被轉移的流體施加給上述屏障或基本上平行于該屏障的另一個部件。所施加的壓力大大增加了流體轉移的速率和效率，并使在含有流體的部件中留有試劑的任何死角最少。
這種裝置包括(1)一個第一可相對的組件，該組件包括一種層析介質，至少一個吸收體、一個具有一個貫穿孔的基本上不能滲透流體的屏障、以及一個鄰接該屏障的涂藥器；以及(2)包括一個樣品制備區(qū)域的、一個第二可相對的組件。
第一和第二可相對的組件這樣成形，使得把該第一和第二可相對的組件相對即導致樣品制備區(qū)域與涂藥器接觸，從而使在該樣品制備區(qū)域中的樣品施加給所述涂藥器，用于再溶解可再溶解的特異性結合對，并穿過層析介質進行層析。
這個樣品制備區(qū)域可至少含有一種用于處理樣品的試劑?？纱嬖谟谠摌悠分苽鋮^(qū)域中的那種試劑或那些試劑隨要被施加給該樣品制備區(qū)域中的樣品以及待測定的被分析物而變化。它們可包括但并不限于調節(jié)pH值的一些酸或堿、穩(wěn)定pH值的一些緩沖劑、螯合金屬的一些螯合劑(例如，EDTA或EGTA)、溶解動物細胞的細胞膜或細菌細胞壁的一些水解酶、以釋放被分析物、酶的一些底物或輔酶等。一種特別有用的萃取試劑是亞硝酸鈉和乙酸的一種混合物，以便產生亞硝酸。亞硝酸鈉可以干燥的形式存在于上述樣品制備區(qū)域中，而乙酸可在加入樣品后加入所述樣品制備區(qū)域。
圖3A和3B中畫出了這種裝置。圖3A中示出了兩個組件的構造，而圖3B中示出了沿著線A——A’的第一個組件的剖面，示出了屏障和孔的細節(jié)。裝置70具有用一個合葉76連接起來的一個第一可相對的組件72和一個第二可相對的組件74。第一和第二可相對的組件72和74最好還包括確?？上鄬Φ慕M件72和74相對固定的一些連接器。這些連接器可包括鎖扣，例如，當使第一可相對的組件72和第二可相對的組件74相對時嚙合在一起的鎖扣78和80。為了防止樣品或試劑滲漏，圍繞第一和第二可相對的組件72和74的周邊安置一個密封隆起物或密封墊82。
第一可相對的組件72包括一種平面層析介質84，層析介質84具有一個第一端86和一個第二端88，以及第一表面90和第二表面92。層析介質84包括一個檢測區(qū)域94，而且最好還包括一個對照區(qū)域96。第一可相對的組件72包括一個第一吸收體98和一個第二吸收體100，第一吸收體98和層析介質84的第一端86可操作地接觸，而第二吸收體100與層析介質84的第二端88可操作地接觸。
裝置70具有一個鄰接層析介質84的、基本上不能滲透流體的屏障102。屏障102有一個孔104貫穿其中，用于把流體施加給層析介質84。
第一可相對的組件72還包括一個鄰接屏障102的涂藥器106。涂藥器106以含有可再溶解形式的對于被分析物的一種被標記的特異性結合對。涂藥器106這樣定位，使得屏障102是在涂藥器106和層析介質84之間。
第一可相對的組件72還包括一個孔108，以便使得能觀察層析介質84。
第二可相對的組件74包括一個樣品制備區(qū)域110，樣品制備區(qū)域110可至少含有一種用于在把樣品施加給涂藥器106之前處理該樣品的試劑?？捎刹僮髡咴跇悠分苽鋮^(qū)域110上放置樣品，或可選擇地，放置一種取樣裝置，例如，一個咽喉拭子或一個多微孔的過濾器；如果需要的話，可加入一些其它試劑。
在工作時，把一種樣品施加給樣品制備區(qū)域110。如果需要的話，可在樣品制備區(qū)域110中培養(yǎng)該樣品，從而使至少一種用于處理該樣品的試劑能與此樣品反應，以便產生一種被處理過的樣品。然后，使第一和第二可相對的組件72和74相對，從而使上述樣品從樣品制備區(qū)域110轉移到涂藥器106。然后，使得被轉移給涂藥器106的樣品能在涂藥器106中再溶解被標記的特異性結合對，并且如同在上述單個組件的裝置中那樣進行被分析物的層析和檢測。4、在第二可相對的組件上具有涂藥器的、兩個組件的裝置本發(fā)明的另一種兩個組件的裝置類似于圖3中所畫出的裝置，但在第二可相對的組件上有涂藥器。該涂藥器以可以再溶解的形式含有對于被分析物的被標記的特異性結合對，并且還可含有一種或多種用于處理樣品的試劑。
這種裝置包括(1)一個第一可相對的組件，該組件包括一種平面層析介質，這種層析介質具有一個第一端、一個第二端以及第一和第二表面，并且如上所述具有對于固定在其上的被分析物的一種特異性結合對，該組件還包括至少一個與所述層析介質的那些端點中的至少一個可操作地接觸的吸收體，而且，該組件還包括一個鄰接上述層析介質的第一表面的、基本上不能滲透流體的屏障，屏障有一個孔貫穿其中，如上所述，用于把液體施加給上述層析介質；以及(2)一個第二可相對的組件，這個組件包括一個用于向其施加樣品的涂藥器，這個涂藥器含有通過加入一種含水液體而可以再溶解形式的對于被分析物的一種被標記的特異性結合對。
圖4A和4B中畫出了這種裝置。圖4A中示出了兩個組件的構造，而圖4B中示出了沿第一個組件B——B’線的一個剖面，顯示了屏障和孔的細節(jié)。裝置120具有用一個合葉126連接的一個第一可相對的組件122和第二可相對的組件124。第一和第二可相對的組件122和124最好還包括鎖扣128和130，以及一個密封隆起物或密封墊132，當把第一和第二可相對的組件122和124相對時，鎖扣128和130嚙合。
第一可相對的組件包括一種平面層析介質134，層析介質134具有一個第一端136、一個第二端138以及第一個和第二表面140和142。層析介質134在一個檢測區(qū)域144中具有對于固定在其上的被分析物的一種特異性結合對，檢測區(qū)域144實際上比層析介質134的面積小，而且，層析介質134最好還有一個被分析物或被分析物的類似物的對照區(qū)域146。
第一可相對的組件122還有一個第一吸收體148和一個第二吸收體150，第一吸收體148與層析介質134的第一端136可操作地接觸，而第二吸收體150與層析介質134的第二端138可操作地接觸。第一可相對的組件122還有一個鄰接層析介質134第一表面140的、基本上不能滲透流體的屏障152。屏障152有一個孔154貫穿其中，用于把液體施加給層析介質134?？?54的面積實際上比屏障152小，從而使液體只能穿過孔154進入鄰接屏障152的層析介質134的那個區(qū)域。所述層析介質以及吸收體148和150基本上是平面形狀的，而屏障152位于一個第二平面內，這個第二平面基本上平行于由層析介質134以及吸收體148和150所確定的平面。對照區(qū)域146和檢測區(qū)域144關于孔154以及吸收體148和150這樣定位，使得檢測區(qū)域144在孔154和所述那些吸收體中的一個之間，而對照區(qū)域146是在孔154和所述那些吸收體的另一個之間。第一可相對的組件122還包括一個窗口156，用于觀察至少一部分層析介質134。
第二可相對的組件124有一個涂藥器158，樣品施加給涂藥器158，而涂藥器158含有對于被分析物的一種可再溶解的被標記的特異性結合對。涂藥器156還可至少含有一種用于處理干燥形態(tài)樣品的試劑。
在使用時，樣品施加給涂藥器156，以便可再溶解對于被分析物的被標記的特異性結合對。如果需要的話，可在涂藥器156中培養(yǎng)所述樣品，以確保用于處理樣品的任何試劑與該樣品反應。然后，使第一和第二可相對的組件132和134相對，從而使上述樣品和被再溶解的被標記的特異性結合對能穿過孔154施加給層析介質134。如上所述，通過觀察結合在層析介質134上的檢測區(qū)域144處的被標記的特異性結合對，來對被分析物進行層析和檢測。5、具有過濾用多孔物質以去除題粒狀物質的裝置a、在引入被再溶解的被標記的特異性結合對后在流體路線中具有過濾用多孔物質的裝置本發(fā)明的裝置的幾種改型裝有一種過濾用多孔物質，以便從樣品中去除顆粒狀物質，例如，從用來檢測便潛血的糞便樣品中去除糞便物質，這種便潛血是胃腸疾病的一種指示。一種這樣的裝置在引入被再溶解的特異性結合對后把過濾用多孔物質放置在流體路線中。這種裝置在含有可再溶解形式的被標記的特異性結合對的第二可相對的組件上具有一個涂藥器。
這種含有一種過濾用多孔物質的裝置的改型包括(1)一個第一可相對的組件，該組件包括一種平面層析介質，這種層析介質具有一個第一端、一個第二端以及第一和第二表面，并且具有對于固定在其上的被分析物的一種特異性結合對，該組件還包括至少一個與所述層析介質的那些端點中的一個可操作地接觸的吸收體，該組件還包括一個鄰接上述層析介質的第一表面的、基本上不能滲透流體的屏障，屏障有一個孔貫穿其中，用于把液體施加給所述層析介質，且該組件還包括一種過濾用多孔物質，該過濾用多孔物質鄰接上述屏障，用于去除顆粒狀物質；以及(2)一個第二可相對的組件，此組件包括一個涂藥器，用于向其中施加樣品。
在這種裝置中，層析介質、屏障、和過濾用多孔物質這樣定位，使得所述屏障在上述過濾用多孔物質和所述層析介質之間。第一和第二可相對的組件這樣成形，使得把該第一和第二可相對的組件相對即導致涂藥器與上述過濾用多孔物質接觸，從而使在該涂藥器中的樣品和被再溶解的被標記的特異性結合對施加給所述過濾用多孔物質，且然后穿過孔到上述屏障施加給所述層析介質，用于層析法。
圖5A和5B中畫出了這種裝置。圖5A中示出了兩個組件的構造，而圖5B中示出了沿著第一個組件線C——C’的一個剖面，顯示了屏障、孔、和過濾用多孔物質膜的細節(jié)。裝置170包括用一個合葉176連接的一個第一可相對的組件172和一個第二可相對的組件174。第一和第二可相對的組件172和174最好還包括鎖扣178和180以及一個密封隆起物或密封墊182，當使第一和第二可相對的組件172和174相對時，鎖扣178和180嚙合在一起。
第一可相對的組件172包括一種平面層析介質184，層析介質184具有一個第一端186、一個第二端188以及第一表面190和第二表面192。層析介質184和一個檢測區(qū)域194中具有對于被固定于其中的被分析物的一種特異性結合時，檢測區(qū)域194實際上比層析介質184的面積小，而且，層析介質184最好具有一個對照區(qū)域196，對照區(qū)域196含有固定在層析介質184上的被分析物或被分析物的類似物。第一可相對的組件172還包括一個第一吸收體198和一個第二吸收體200，第一吸收體198與層析介質184的第一端186可操作地接觸，而第二吸收體200與層析介質184的第二端188可操作地接觸。
第一可相對的組件172還包括一個鄰接層析介質184的第一表面190的、基本上不能滲透流體的屏障202。屏障202有一個孔204貫穿其中，用于把液體施加給層析介質184?？?04的面積實際上比屏障202小，從而使液體只能穿過孔204進入鄰接屏障202的層析介質184的那個區(qū)域。
第一可相對的組件172還包括一種鄰接屏障202的過濾用多孔物質206，用于去除顆粒狀物質。
第一可相對的組件172還包括一個窗口208，用于觀察至少一部分層析介質184。
第二可相對的組件174包括一個涂藥器210，涂藥器210含有可再溶解形式的一種被標記的特異性結合對。涂藥器210還可含有至少一種用于處理樣品的試劑。
在工作時，使第一和第二可相對的組件172和174相對即導致涂藥器210與過濾用多孔物質206接觸，從而使在涂藥器210中的樣品和被再溶解的被標記的特異性結合對施加給過濾用多孔物質206，而且，在穿過過濾用多孔物質206之后，穿過孔204，并到達層析介質184上，用于如上所述對被分析物進行層析和檢測。b、在引入被再溶解的被標記的特異性結合對前在流體路線中具有過濾用多孔物質的裝置如果顆粒狀物質干擾被標記的特異性結合對的再溶解或干擾被標記的特異性結合對與被分析物的反應，這種改型可能特別有用。
這種改型包括(1)一個第一可相對的組件，該組件包括(a)一種平面層析介質，這種平面層析介質具有一個第一端、一個第二端以及第一和第二表面，并且如上所述具有對于固定在其上的被分析物的一種特異性結合對；(b)至少一個與上述層析介質的那些端點中的至少一個可操作地接觸的吸收體；(c)一個鄰接上述層析介質的第一表面的、基本上不能滲透流體的屏障，該屏障有一個孔貫穿其中，用于如上所述把液體施加給上述層析介質；(d)一個鄰接上述屏障的涂藥器，該涂藥器含有可以再溶解形式的對于被分析物的一種被標記的特異性結合對；以及(e)一種過濾用多孔物質，這種過濾用多孔物質鄰接上述涂藥器，用于去除顆粒狀物質；以及(2)一個包括一個樣品制備區(qū)域的第二可相對的組件。
屏障、涂藥器和過濾用多孔物質這樣定位，使得涂藥器位于該屏障和所述過濾用多孔物質之間，且使該屏障最靠近層析介質定位。第一和第二可相對的組件這樣成形，使得把該第一和第二可相對的組件相對即導致樣品制備區(qū)域與所述過濾用多孔物質接觸，從而將樣品施加給該過濾用多孔物質，被過濾的樣品施加給上述涂藥器，以便在該涂藥器中再溶解被標記的特異性結合對，以形成一種被過濾過的樣品和被標記的特異性結合對的溶液，而且，該被過濾過的樣品和被標記的特異性結合對的溶液穿過上述屏障中的孔施加給層析介質。
圖6A和6B中畫出了這種改型。圖6A中示出了兩個組件的構造，而圖6B中示出了沿第一個組件線D——D’的剖面，顯示了屏障、孔、涂藥器和過濾用多孔物質膜的細節(jié)。裝置220具有用一個合葉226連接的一個第一可相對的組件222和一個第二可相對的組件224。第一和第二可相對的組件222和224最好還包括鎖扣228和230，當使第一可相對的組件222和第二可相對的組件224相對時，鎖扣228和230可嚙合在一起。圍繞第一和第二可相對的組件222和224的周邊，定位一個密封隆起物或密封墊232。第一可相對的組件222有一種層析介質234，層析介質234具有第一和第二端236和238、一個第一表面240以及一個第二表面242。層析介質234有一個檢測區(qū)域244，而且，最好有一個不與檢測區(qū)域244重疊的對照區(qū)域246。該第一可相對的組件還包括一個第一吸收體248和一個第二吸收體250，第一吸收體248與層析介質234的第一端236可操作地接觸，而第二吸收體250與層析介質234的第二端238可操作地接觸。
第一可相對的組件222還包括一個鄰接層析介質234的第一表面240的、基本上不能滲透流體的屏障252，屏障252有一個孔254貫穿其中，用于把液體施加給層析介質234?？?54的面積實際上比屏障252小，從而使液體只能穿過孔254能進入層析介質254。
第一可相對的組件222還包括一個鄰接屏障252的涂藥器256。該涂藥器含有可以再溶解形式的對于被分析物的一種被標記的特異性結合對。該第一可相對的組件還包括一種過濾用多孔物質258，用于去除鄰接涂藥器256的顆粒狀物質。過濾用多孔物質258、涂藥器256、以及屏障252和孔254這樣安置，使得轉移到第一可相對的組件222的液體首先施加給過濾用多孔物質258，然后施加給涂藥器256，并且，最后施加給屏障252中的孔254，用于轉移給層析介質234。
第一可相對的組件222最好還包括一個鄰接層析介質234的第二表面242的窗口260。
第二可相對的組件224包括一個樣品制備區(qū)域262，樣品制備區(qū)域262可至少含有一種用于處理樣品的試劑。
在工作時，如果原意的話，樣品轉移給第二可相對的組件進行培養(yǎng)，且然后使第一和第二可相對的組件222和224相對?；旧先缟纤?，在層析介質234的檢測區(qū)域244處對被分析物進行層析和檢測。6、用于萃取一個拭子的裝置本發(fā)明的測定裝置的另一種改型適于萃取一個拭子。在許多情況下，生物樣品是在拭子上獲取的，并且不在萃取容器中進行多次萃取是難以從拭子中萃取樣品的。進行這樣的多次萃取不僅實際上耗時費力，而且導致產生大量必須處理的廢物。由于通過分泌物所傳播的諸如艾滋病和肝炎那樣的疾病的增加，這已成為一個日益嚴重的問題。
本發(fā)明的適于萃取拭子的、并適于測定包含在拭子中的被分析物的裝置可包括(1)一個第一可相對的組件，該組件包括(a)一種平面層析介質，這種平面層析介質具有一個第一端、一個第二端以及第一和第二表面，并且如上所述具有對于固定在其上的的被分析物的一種特異性結合對；(b)至少一個與上述層析介質的那些端點中的一個可操作地接觸的吸收體；(c)一個鄰接上述層析介質的第一表面的、基本上不能滲透流體的第一屏障，屏障有一個孔貫穿其中(如上所述)，用于把液體施加給上述層析介質；(d)一個鄰接上述第一屏障的涂藥器，這個涂藥器以含有通過向涂藥器加入含水液體而可以再溶解形式的對于被分析物的一種被標記的特異性結合對；(e)一個鄰接上述涂藥器的中央部分的、基本上不能滲透流體的第二屏障；以及(f)一個分配膜，該分配膜鄰接第二屏障，并與上述涂藥器的這樣一個部分可操作地接觸，即上述第二屏障并不鄰接的部分，從而使流體可只圍繞上述第二屏障從所述分配膜流到上述涂藥器；以及(2)一個第二可相對的組件，該組件包括一個用于含有檢驗樣品的一個拭子的插座。
第一和第二可相對的組件這樣成形，使得把該第一和第二可相對的組件相對即導致插在插座中的拭子與分配膜接觸，從而使在拭子中的樣品施加給分配膜，而且，然后在繞過第二屏障并穿過涂藥器后，穿過在第一屏障中的孔施加給層析介質。
圖7A和7B示出了一種適于萃取拭子的裝置。圖7A顯示了兩個組件的構造，而圖7B顯示了沿著第一個組件線E——E’的剖面，示出了第一屏障、孔、涂藥器、第二屏障和分配膜的細節(jié)。裝置264包括用一個合葉267連接起來的一個第一可相對的組件265和一個第二可相對的組件266。第一和第二可相對的組件265和266最好還包括鎖扣268和269，以便把這些可相對的組件保持在一起。當第一和第二可相對的組件265和266相對時密封墊270環(huán)繞著它們，以便防止樣品或試劑漏出。密封墊270可有一個開口271，以便容納拭子的窄端，例如，一根木棍或木釘。
第一可相對的組件265有一種層析介質272，層析介質272具有一個第一端273和一個第二端274以及一個第一表面275和一個第二表面276。如上所述，層析介質272帶有一個檢測區(qū)域277和一個對照區(qū)域278。第一可相對的組件265還有一個第一吸收體279和一個第二吸收體280，第一吸收體279與層析介質272的第一端273可操作地接觸，而第二吸收體280與層析介質272的第二端274可操作地接觸。
第一可相對的組件265還包括一個鄰接層析介質272的第一表面275的、基本上不能滲透流體的第一屏障281，第一屏障281有一個孔282貫穿其中，如上所述，用于把液體施加給層析介質272。
第一可相對的組件265還包括一個鄰接第一屏障281的涂藥器283。涂藥器283含有可以再溶解形式的對于被分析物的一種被標記的特異性結合對。此外，第一可相對的組件265還具有一個鄰接涂藥器283的中央部分的、基本上不能滲透流體的第二屏障284。一個分配膜285鄰接第二屏障284，并與涂藥器283中第二屏障284所不鄰接的那個部分可操作地接觸。流體可只圍繞第二屏障284從分配膜285流到涂藥器283。可以選擇地，可省略分配膜285，從而使流體直接施加給第二屏障284，并且圍繞第二屏障284流到涂藥器283。
第一可相對的組件265還包括一個窗口286，以便使得能觀察層析介質272。
第二可相對的組件266包括一個插座287，插座287用于含有檢驗樣品的拭子288。使第一和第二可相對的組件265和266相對即導致在插座286中的拭子288與分配膜285可操作地接觸。在拭子288中的樣品施加給分配膜285，而且，然后，在繞過第二屏障284且穿過涂藥器283后，穿過第一屏障281中的孔282施加給層析介質272。在使用時，拭子288插入在第二可相對的組件266中的插座286中。如果需要的話，可把一種萃取試劑或一些試劑加入到在插座286中的拭子288里。在這種情況下，插座286設計成能容納萃取試劑，并把它們施加給拭子288。然后，使第一和第二可相對的組件265和266相對，如此，如上所述，在拭子288中的樣品施加給分配膜285。
本發(fā)明的適于萃取拭子、并適于測定該拭子中所含的被分析物的另一種裝置可包括(1)一個第一可相對的組件，該組件包括(a)一種層析介質，這種層析介質具有一個第一端、一個第二端以及第一和第二表面，并如上所述具有對于固定在其上的上述被分析物的一種特異性結合對；(b)至少一個與上述層析介質的那些端點中的一個可操作地接觸的吸收體；(c)一個鄰接上述層析介質的第一表面的、基本上不能滲透流體的第一屏障，屏障有一個第一孔貫穿其中，用于把液體施加給上述層析介質；(d)一個鄰接上述基本上不能滲透流體的第一屏障的分配膜，以引導流體到在所述基本上不能滲透流體的第一屏障中的第一孔；(e)一個鄰接上述分配膜的中央部分的基本上不能滲透流體的第二屏障；(f)一個含有可以再溶解形式的對于上述被分析物的特異性結合對的、并鄰接上述屏障膜的涂藥器，從而使流體可從該涂藥器圍繞上述第二屏障流到分配膜上、基本上不能滲透流體的第二屏障所不直接鄰接的部分；以及(g)一個表面屏障，這個表面屏障有一個第二孔貫穿其中，用于把液體施加給上述涂藥器；以及(2)一個第二可相對的組件，該組件包括一個用于含有檢驗樣品的拭子的插座。
第一和第二可相對的組件這樣成形，使得把該第一和第二可相對的組件相對即導致插在插座中的拭子與表面屏障及第二孔接觸，從而使在拭子中的樣品施加給涂藥器，而且，在繞過第二屏障并穿過分配膜后，穿過第一屏障中的孔施加給層析介質。
圖8A和圖8B中示出了這種裝置。圖8A示出了兩個組件的構造，而圖8B示出了沿著第一個組件線F——F’的剖面，顯示了第一屏障、孔、涂藥器、第二屏障及分配膜的細節(jié)。裝置290包括用一個合葉293連接的一個第一可相對的組件291和一個第二可相對的組件292。第一和第二可相對的組件291和292最好包括鎖扣295和296，以把這些可相對的組件保持在一起。當第一和第二可相對的組件291和292相對時，一個密封墊297環(huán)繞它們，以便防止?jié)B漏樣品和試劑。密封墊297可有一個開口298，以容納拭子的窄端，例如，一根木棍或木釘。
第一可相對的組件291具有層析介質299，層析介質299具有一個第一端300、一個第二端301、一個第一表面302和一個第二表面303。如上所述，層析介質299帶有一個檢測區(qū)域304和一個對照區(qū)域305。第一可相對的組件291還有一個與層析介質299的第二端300可操作地接觸的吸收體306。
第一可相對的組件291還包括一個鄰接層析介質299的第一表面302的、基本上不能滲透流體的第一屏障307，屏障307有一個第一孔308貫穿其中，如上所述，用于把液體施加給層析介質299。
第一可相對的組件291還包括一個鄰接基本上不能滲透流體的第一屏障307的分配膜309，以便把流體引導到第一屏障307中的第一孔308?；旧喜荒軡B透流體的第二屏障310鄰接分配膜309的中央部分。第一可相對的組件291還包括一個涂藥器311，涂藥器311含有可以再溶解形式的對于被分析物的一種特異性結合對，并鄰接第二屏障310定位。流體可從涂藥器311出發(fā)圍繞第二屏障310流到分配膜309中、基本上不滲透流體的第二屏障310所不直接鄰接的部分。此外，第一可相對的組件291有一個表面屏障312，表面屏障312有一個第二孔313貫穿其中，用于把液體施加給涂藥器311。表面屏障312最好基本上與第一可相對的組件291的所述表面設置得平齊；即在表面屏障312下面的那些部件位于第一可相對的組件291的內部。第一可相對的組件291還包括一個或多個出口314，用于卸出壓力。
第一可相對的組件291還包括一個窗口315，以便能觀察層析介質299。
第二可相對的組件292包括一個插座316，且最好還包括一個井317，插座316用于含有檢驗樣品的拭子，井317用于給該拭子添加一種或多種試劑。
使第一和第二可相對的組件291和292相對即導致在插座316中的拭子與表面屏障312和第二孔313接觸。在拭子中的樣品施加給涂藥器311，而且，然后，在繞過第二屏障310并穿過分配膜309后，施加給層析介質299。在使用時，拭子288插入在第二可相對的組件292中的插座316中，并且，如果需要的話，可給井317加入萃取試劑或一些試劑。然后，使第一和第二可相對的組件291和292相對，以進行測定，并讀出結果。7、用于競爭性免疫測定的裝置本發(fā)明的那些裝置可用于競爭性免疫測定以及夾層免疫測定。
一般說來，競爭性免疫測定用于一些單價的被分析物。這些單價的被分析物一般是不全抗原，但同樣的原理可用來測定任何單價的被分析物，例如，一種這樣的普通多價抗原，在此抗原上另外的結合抗體的部位被封閉或改性?？杀粶y定的被分析物有茶堿、異羥基洋地黃毒甙、雙異丙吡胺、利多卡因、普魯卡因酰胺、萘心安、奎尼丁、氨基羥丁基卡那霉素、青霉素和其它一些β——內酰胺抗菌素、氯霉素、慶大霉素、卡那霉素、乙基西梭霉素硫酸鹽、妥布霉素、三環(huán)抗抑郁藥、乙琥胺柴浪丁、苯巴比妥、安安、苯妥英、脫氧苯比妥、丙戊酸、撲熱息痛、乙酰水揚酸、布洛芬、氨甲喋呤，一些濫用的藥物，例如，嗎啡、可待因、柯卡因、芬太尼、3-甲基芬太尼、苯異丙胺、麥角酸、二乙酰胺、苯環(huán)哌啶和海洛英以及它們的一些代謝物、DNP、1-取代的-4-羥基-2-硝基苯、4-取代的2-硝基-三烷基苯胺鹽，以及一些環(huán)境污染物，例如，苯、甲苯、二甲苯、乙苯、氯丹、DDT及其代謝物、2，4-D、2，4，5-T和阿特拉津。
適于進行這些免疫測定的特異性結合對包括但并不限于一些抗體和一些特異性結合蛋白。后者的一個例子是從嗜脂肪芽孢桿菌分離的青霉素結合蛋白(PBP)。
本發(fā)明的裝置不像先前的許多適于進行競爭性免疫測定的裝置那樣，而是具有這樣的優(yōu)點，在樣品中存在被分析物就會給出一個陽性的或可檢測的結果，例如，在裝置的檢測區(qū)域中的一條帶色的線。一般說來，在競爭性免疫測定中，一個可檢測的信號的顯影表明一個陰性的結果(沒有被分析物存在)。這樣，在所觀察到的結果和檢測之間存在一種相反的關系。本發(fā)明的裝置，在被分析物濃度和可檢測的信號之間產生一種直接關系，不太可能產生那些虛假的陰性結果。這些裝置還具有一個擴展了的動力范圍(dynamic range)。
在本發(fā)明的一種競爭性免疫測定的裝置中，被標記的組份是一種被分析物的類似物，不是一種抗被分析物抗體，就像典型地進行夾層免疫測定的裝置那樣。該被分析物的類似物包括一種與一對特異性結合對的一個成員共價結合的被分析物。該對特異性結合對的那個成員對于被分析物缺少親和性，并且可被在檢測區(qū)域中固定到層析介質上的一種輔助的特異性結合對結合。這個系統(tǒng)的競爭性方面源于采用了一種親和性膜，該親和性膜已經在其上固定了一種用于所述被分析物的特異性結合對。這樣，在檢測樣品中的被分析物(如果有的話)，就與上述被標記的被分析物的類似物競爭，以所述親和性膜結合，從而在沒有被分析物的情況下，所有或幾乎所有上述被標記的被分析物的類似物由在所述親和性膜上的上述特異性結合對結合，而且沒有該被標記的被分析物的類似物到達層析介質。如果所述檢驗樣品中有被分析物的話，至少某些上述被標記的被分析物的類似物不能與在親和性介質上的上述特異性結合對結合，這是因為在所述檢驗樣品中的末被標記的被分析物和所述被分析物的類似物之間有競爭。因此，至少某些所述被標記的被分析物的類似物到達上述層析介質，并且被在檢測區(qū)域中的上述輔助的特異性結合對結合。在上述檢驗樣品中的被分析物的濃度越大，則到達上述層析介質的被標記的被分析物的類似物的量就越大。
一種用于這樣的競爭性免疫測定的合適的裝置包括(1)一個第一可相對的組件，該組件包括(a)一種平面層析介質，這種平面層析介質具有一個第一端、一個第二端以及第一和第二表面，并且在檢測區(qū)域中具有固定在其上的輔助的特異性結合對，這個檢測區(qū)域實際上比上述層析介質的面積小，該輔助的特異性結合對能夠結合對被分析物缺少親和性的一對特異性結合對的一個成員；(b)至少一個與上述層析介質的那些端點中的一個可操作地接觸的吸收體；(c)一個鄰接上述層析介質的頂表面的、基本上不能滲透流體的屏障，屏障有一個孔貫穿其中，用于把液體施加給上述層析介質，所述孔的面積實際上比上述屏障小，從而使液體只能穿過所述孔進入上述層析介質；以及(d)一個鄰接上述屏障的親和性膜，該親和性膜含有對于固定到那里的上述被分析物的特異性結合對；以及(2)一個包括一個涂藥器的第二可相對的組件，這個涂藥器含有通過向涂藥器加入一種含水液體而可以再溶解形式的一種被分析物的類似物，這種被分析物的類似物包含與這樣一對特異性結合對的一個成員共價結合的被分析物，這種特異性結合對對所述被分析物缺少親和性，并且可被上述特異性結合對結合，所述被分析物的類似物用一種可檢測的標記物標記。
層析介質、吸收體、屏障和孔這樣成形，使得檢測區(qū)域位于所述孔和上述層析介質的第一端之間。第一和第二可相對的組件這樣成形，使得把該第一和第二可相對的組件相對即導致涂藥器與親和性膜接觸，以便把樣品和被再溶解的被分析物的類似物施加給親和性膜，而且，然后穿過上述孔施加給所述層析介質。
層析介質還可包括這樣的特異性結合對一個成員的對照區(qū)域，所述特異性結合對對被分析物或對特異性結合對缺少親和性，而涂藥器還包括一種結合在上述對照區(qū)域中的所述那對特異性結合對的那個成員的化合物，所述這對特異性結合對的這個成員用一種與標記被分析物的類似物的標記物可區(qū)分開的可檢測的第二種標記物標記。所述對照區(qū)域位于上述孔和層析介質的第二端之間。如果包括一個對照區(qū)域，最好采用第一和第二吸收體，從而使足夠的樣品施加給該對照區(qū)域。
圖9A和9B中畫出了用于采用一種被標記的被分析物的類似物進行競爭性免疫測定的、一種合適的兩個組件的裝置。圖9A中示出了兩個組件的構造，而圖9B中示出了沿著第一個組件線G——G’的剖面，顯示了層析介質、屏障、孔和親和性膜的細節(jié)。裝置320包括用一個合葉326連接起來的第一和第二可相對的組件322和324。第一和第二可相對的組件322和324具有用于嚙合的鎖扣32 8和3 30，并且具有一個環(huán)繞第一和第二可相對的組件322和324的周邊的密封墊或隆起物322，以便防止樣品或試劑滲漏。第一可相對的組件322還包括層析介質334，層析介質334具有第一和第二端336和338，以及第一和第二表面340和342。層析介質334包括一個檢測區(qū)域344，且最好包括一個對照區(qū)域346。該第一可相對的組件還包括一個第一吸收體348以及一個第二吸收體350，第一吸收體348與上述層析介質的第一端336可操作地接觸，并且安置得距檢測區(qū)域344比距對照區(qū)域346更近，而第二吸收體350與層析介質334的第二端338可操作地接觸，并且距對照區(qū)域346比距檢測區(qū)域344更近。
第一可相對的組件322還包括一個鄰接層析介質334的第一表面340的、基本上不能滲透流體的屏障352，屏障352有一個孔354貫穿其中，如上所述，用于把液體施加給層析介質334。檢測區(qū)域位于孔354和層析介質334的第一端336之間。如果有的話，對照區(qū)域346位于孔354和層析介質334的第二端338之間。
第一可相對的組件322還包括一個鄰接屏障352的親和性膜356。親和性膜356含有一種對于固定到那里的被分析物的特異性結合對，從而使在檢驗樣品中的被標記的被分析物的類似物和游離的被分析物可與在親和性膜356中的所述特異性結合對競爭。
第一可相對的組件還包括一個窗口358，用于觀察層析介質334。
第二可相對的組件324包括一個涂藥器360，涂藥器360含有可以再溶解形式的一種被標記的被分析物的類似物。如果在層析介質334上有對照區(qū)域346，則涂藥器360還包括一種用一種可區(qū)分的第二標記物標記的、可結合的第二組份。
在使用時，樣品施加給涂藥器360，以再溶解被標記的被分析物的類似物，而且，如果有的話，再溶解第二種可結合的組份。然后，使第一和第二可相對的組件322和324相對，把樣品和再溶解的被標記的被分析物的類似物施加給親和性膜356。如果在檢驗樣品中沒有被分析物，那么，所有被分析物的類似物結合到親和性膜356，沒有一點到達層析介質334上的檢測區(qū)域344。如果上述檢驗樣品中有被分析物，它就與被標記的被分析物的類似物競爭在親和性膜356上的特異性結合對，這樣，某些被標記的被分析物的類似物到達層析介質334上的檢測區(qū)域344，并在那里結合，給出一種可檢測的信號。如果在上述層析介質上有對照區(qū)域346，而且把一種可結合的第二種物質施加給涂藥器，那么，該可結合的第二種物質與它的可區(qū)分的標記物一起結合到對照區(qū)域346，以指明測定已正確地進行。D、各向異性流動的裝置前述所有的裝置在每一部件中都采用各向同性的分離流動；也就是說，液體施加給部件的中央，并相同地或基本上相同地在兩個方向上向外流動。不過，并非要求這樣，還能這樣構造本發(fā)明的測定裝置，即其中，在一個或多個上述那些部件中的流動并非從該部件的中央向兩個方向相同地流動，或者，可以選擇地，并非從該部件的兩端向中央流動，而是從該部件的一端向另一端流動。這可以使得能特別有效地利用試劑，特別是那些可再溶解的試劑，對于這些試劑，希望使液體穿過整個部件流動，以促進完全的再溶解。
本發(fā)明的、采用這樣的各向異性的流動的一種裝置適于進行夾層免疫測定。這種裝置包括(1)一個第一可相對的組件，該組件包括(a)一種層析介質，這種層析介質具有一個第一端、一個第二端以及第一和第二表面，并且在一些獨立的、離散的且不重疊的區(qū)域中，在其上固定有下述這些區(qū)域，每個區(qū)域的面積實際上小于上述層析介質的面積(i)對于被分析物的一種特異性結合對的檢測區(qū)域；以及(ii)一個被分析物或被分析物的類似物的對照區(qū)域，上述檢測區(qū)域位于離開所述層析介質端點的一點和所述層析介質的第一端之間，而上述對照區(qū)域位于離開所述層析介質端點的一點和所述層析介質的第二端之間；(b)一個與上述層析介質的第一端可操作地接觸的吸收體；(c)一個鄰接上述層析介質的第一表面的、基本上不能滲透流體的第一屏障，且這樣定位這個第一屏障，使得液體可只穿過一個第一施加面施加給上述層析介質，該第一施加面實際上比所述層析介質的面積小，并位于離開所述層析介質的端點的一個部位；(d)一個鄰接上述第一屏障的涂藥器，該涂藥器含有可以再溶解形式的對于被分析物的一種被標記的特異性結合對，該涂藥器延伸過上述屏障，以便在所述第一施加面把液體施加給上述層析介質；以及(e)一個鄰接上述涂藥器的、基本上不能滲透流體的第二屏障，且這樣定位該第二屏障，使得液體只能穿過第二施加面施加給所述涂藥器，該第二施加面實際上小于上述層析介質的面積，并鄰接所述層析介質的第二端安置；以及(2)一個包括一個第二施加區(qū)域的第二可相對的組件。
這樣成形第一和第二可相對的組件，使得把該第一和第二可相對的組件相對即導致樣品制備區(qū)域與第二屏障接觸，并與上述第二樣品施加面接觸。這樣，在上述樣品制備區(qū)域中的樣品穿過所述第二施加面施加給涂藥器。所述樣品實際上橫穿過上述涂藥器的整個長度，以把該樣品和被再溶解的被標記的特異性結合對穿過上述第一施加面施加給層析介質。
圖10A和10B中畫出了適于夾層免疫測定的、這樣的一種各向異性流動的裝置。圖10A中示出了兩個組件的構造，而圖10B中示出沿第一個組件線H——H’的剖面，顯示了層析介質、第一屏障、涂藥器以及第二屏障的細節(jié)。裝置307包括用一個合葉376連接起來的第一和第二可相對的組件372和374。第一和第二可相對的組件372和374具有鎖扣378和380，并且被一個密封墊382環(huán)繞。第一可相對的組件372包括一種層析介質384，層析介質384具有第一和第二端386和388，以及第一和第二表面390和392。層析介質384在離散、不重疊的區(qū)域中在其上固定有一個檢測區(qū)域394，并且最好固定有一個對照區(qū)域396。檢測區(qū)域394含有對于被分析物的一種特異性結合對。對照區(qū)域396含有上述被分析物或被分析物的類似物。檢測區(qū)域394位于離開層析介質384的端點的一點397和層析介質384的第一端386之間，而對照區(qū)域396位于點397和層析介質384的第二端388之間。一般來說，離開層析介質384的端點的那點397是層析介質384的中點，而檢測區(qū)域394和對照區(qū)域396距所述層析介質的這個中點等距離。不過，并非一定需要這樣。
第一可相對的組件372還包括一個與層析介質384的第一端386可操作地接觸的第一吸收體398，而且，如果有對照區(qū)域的話，一個第二吸收體400可與層析介質384的第二端388可操作地接觸。不過，這個第二吸收體并非一定需要，且無需在所有的應用中都有。
第一可相對的組件372還包括一個鄰接層析介質384的第一表面390的、基本上不能滲透流體的第一屏障402。第一屏障402這樣定位，使流體可只能通過一個第一施加面404施加給層析介質384，第一施加面404實際上比層析介質384的面積小。第一施加面404位于點397處。一般說來，第一施加面404位于層析介質384的中點處。第一可相對的組件372還包括一個鄰接第一屏障402的涂藥器406，涂藥器406延伸過第一屏障402，以在第一施加面404處把液體施加給層析介質384。涂藥器406含有可再溶解形式的對于被分析物的一種被標記的特異性結合對。
第一可相對的組件372還包括一個鄰接涂藥器406的、基本上不能滲透流體的第二屏障408。液體只能通過一個第二施加面410施加給涂藥器406，第二施加面410實際上比層析介質384的面積小，其位置鄰接層析介質384的第二端388。第一可相對的組件372還包括一個窗口412，以便觀察層析介質384。
第二可相對的組件374包括一個樣品制備區(qū)域414，樣品制備區(qū)域414可至少含有一種用于處理樣品的試劑。
在使用時，把一種樣品施加給第二可相對的組件374上的樣品制備區(qū)域414。然后，使第一和第二可相對的組件372和374相對，從而使檢驗樣品穿過第二施加面410轉移給涂藥器406。之后，轉移給涂藥器406的樣品再溶解在涂藥器406中的被標記的特異性結合對，而且，然后實際上橫過涂藥器406的整個長度，以把所述樣品和被再溶解的被標記的特異性結合對穿過第一施加面404施加給層析介質384。然后，如上所述，對被分析物進行層析和檢測。注意在上述層析介質本身中的流動實際上是各向同性的，但在大量的部件中流動不是各向同性的。E、采用將被分析物直接吸到層析介質的裝置某些抗原與通常用作免疫測定中的固相的一些材料(例如，耐綸)結合強烈且是非特異性的結合。這些抗原是疏水性的，例如，衣原體沙眼脂多糖(LPS)抗原和其它一些配合物脂類。這樣的一些抗原可通過本發(fā)明的測定裝置與層析介質結合，然后用合適的被標記的特異性結合對來檢測，例如，用對于該抗原的一種被標記的抗體來檢測。這是單個抗體的免疫測定，而不是一種夾層免疫測定。實際上，上述層析介質本身在一種通常的夾層免疫測定中取代了第一抗體的位置。
本發(fā)明的、適于進行其中涉及在層析介質上直接固定被分析物的測定的測定裝置包括(1)一個第一可相對的組件，該組件包括(a)一種平面層析介質，這種平面層析介質具有第一和第二端以及第一和第二表面，這種層析介質對被分析物所具有的親和性足以把該被分析物從含有此被分析物的一種含水溶液中固定到所述層析介質上；(b)一個與上述層析介質的第一端可操作地接觸的涂藥器，這個涂藥器含有通過向涂藥器中加入一種含水液體而可以再溶解形式的對于上述被分析物的一種被標記的特異性結合對；(c)一個與上述層析介質的第二端可操作地接觸的吸收體；以及(d)一個鄰接上述層析介質的第一表面的、基本上不能滲透流體的屏障，這個屏障有一個孔貫穿其中，用于把液體施加給上述層析介質，所述孔的面積實際上比上述屏障小，從而使液體可只通過所述孔進入由上述屏障所覆蓋的上述層析介質區(qū)域中；以及(2)一個包括一個樣品制備區(qū)域的第二可相對的組件。
在這種裝置中，第一和第二可相對的組件這樣成形，使得把該第一和第二可相對的組件相對即導致樣品制備區(qū)域與屏障接觸，從而使在該樣品制備區(qū)域中的樣品施加給層析介質。在檢驗樣品中的被分析物在所述孔附近固定在上述層析介質上。在這種裝置中，不像先前那些本發(fā)明的裝置，而是在所述層析介質本身中的流動是從該介質的一端到另一端，而不是由離開該介質的端部的一點到每一端。
如果抗原是脂多糖，則層析介質本身可以是耐綸。
圖11 A和11B中畫出了一種適于涉及被分析物與層析介質結合的測定裝置。圖11A示出了該裝置的兩個組件的構造，而圖11B示出了沿著第一個組件線I——I’的一個剖面，顯示了層析介質、涂藥器、屏障和孔的細節(jié)。測定裝置420具有用一個合葉426連接起來的第一和第二可相對的組件422和424。該第一和第二可相對的組件包含鎖扣428和430，而當第一和第二可相對的組件422和424相對時，一個密封墊432環(huán)繞它們。第一可相對的組件422具有層析介質434，層析介質434具有一個第一端436和一個第二端438。層析介質434具有一個第一表面440和一個第二表面442。第一可相對的組件422還包括一個涂藥器444和一個吸收體446，涂藥器444與層析介質434的第一端436可操作地接觸，而吸收體446與層析介質434的第二端438可操作地接觸。第一可相對的組件422還包括一個鄰接上述層析介質的第一表面442的、基本上不能滲透流體的屏障448，屏障448有一個孔450貫穿其中用于把液體施加給層析介質434。該第一可相對的組件最好還包括一個鄰接層析介質434的第二表面444的窗口452，用于觀察層析介質434。
第二可相對的組件424包括一個樣品制備區(qū)域454。
在使用時，把樣品施加給第二可相對的組件424的樣品制備區(qū)域454，而把一種含水液體通過再溶解的被標記的特異性結合對加給涂藥器444。然后，使第一和第二可相對的組件422和424相對，從而使檢驗樣品穿過屏障448的孔450施加給層析介質434。之后，使得在上述樣品中的任何被分析物能在所述孔附近與層析介質434結合。使得再溶解的被標記的特異性結合對能穿過層析介質434從第一端436朝向第二端438遷移。所述被標記的特異性結合對可與和層析介質434結合的被分析物反應，以便檢測。在這種情況下，實際上通過被分析物在屏障448中的孔450的附近與層析介質434結合來形成檢測區(qū)域。II、順序免疫層析法在某些應用中，特別是在某些血清學測定中，總是希望在標記步驟之前有俘獲步驟，即利用對于固定在固體載體上的被分析物的一種特異性結合對。例如，在一種用于檢測對于在人類血清中的幽門螺桿細菌的IgG抗體的免疫層析測定中，血清流過固定在固相層析介質上的幽門螺桿細菌抗原帶。在血清中的特異性IgG結合固定了的抗原。在抽取含有非特異性的IgG的血清后，然后使得用一種可檢測的標記物(例如，一種可視染料(共軛物))標記的抗人類IgG能遷移通過抗原區(qū)域，而任何被結合的IgG用上述可檢測的標記物標記。
通常的一步線型層析測定并不適于順序型測定，除非在該方法中帶有耗時且不便的清洗步驟。如果不帶有這樣的一種清洗步驟，大過量的對幽門螺桿細菌非特異的人類IgG將與共軛物反應。這會在層析介質中留下強的標記物本底，并且在它能有機會與結合到被固定的幽門螺桿細菌抗原的抗幽門螺桿細菌抗體反應前，這會耗盡上述共軛物。
希望有一種能進行順序免疫測定的層析測定裝置，從而首先能使要被檢測的抗體與固定在層析介質上的相應的被分析物的反應進行得完全。然后，在一個第二步驟中，施加被標記的共軛物，以檢測被分析物，例如，抗幽門螺桿細菌抗體。
一種適于進行順序免疫測定的裝置包括(1)一個第一可相對的組件，該組件包括(a)一種如上所述的平面層析介質，這種層析介質在一個檢測區(qū)域中具有對于固定在其上的被分析物的一種特異性結合對，這個檢測區(qū)域實際上比所述層析介質的面積小；(b)一個與上述層析介質的第一端可操作地接觸的樣品制備區(qū)域；(c)一個與上述層析介質的第二端可操作地接觸的第一吸收體；(d)一個鄰接上述層析介質的第一表面的、基本上不能滲透流體的屏障，屏障有一個孔貫穿其中用于把流體施加給上述層析介質，所述孔的面積實際上比所述屏障小，從而使液體只能通過所述孔進入上述層析介質中為所述屏障所覆蓋的區(qū)域中；以及(2)一個第二可相對的組件，該組件包括(a)一個含有可再溶解形式的對于被分析物的一種特異性結合對的涂藥器，這樣定位該涂藥器，使得當把第一和第二可相對的組件相對時，該涂藥器與上述屏障接觸，從而使對于上述被分析物的再溶解的被標記的特異性結合對穿過所述屏障中的孔施加給上述層析介質；以及(b)第二和第三吸收體，這樣定位該第二和第三吸收體，使得當把上述第一和第二可相對的組件相對時，該第二吸收體與在上述屏障和所述層析介質的第一端之間的上述層析介質的一部分可操作地接觸，而該第三吸收體與在上述屏障和所述層析介質的第二端之間的上述層析介質的一部分可操作地接觸，從而使該第二和第三吸收體可從上述層析介質中去除流體。
因此，當使第一和第二可相對的組件相對時，流體的流動是在兩個方向上沿著層析介質從屏障中的孔向外流到第二和第三吸收體。
一般說來，測定裝置還如上所述包括一個鄰接層析介質的第二表面的基本上透明的襯底。
如上所述，樣品制備區(qū)域可至少含有一種試劑，用于在將樣品施加給層析介質前處理所述樣品。不像其中樣品制備區(qū)域在第二可相對的組件上的本發(fā)明上述其它那些裝置那樣，在這種裝置中，無需使第一和第二可相對的組件相對，即可使樣品施加給層析介質。這樣，相應調整任何用于處理樣品的試劑的濃度。
層析介質還可包括一個固定在所述層析介質上的被分析物或被分析物的類似物的對照區(qū)域，該對照區(qū)域的面積實際上比所述層析介質小，并且不與檢測區(qū)域重疊。當所述層析介質包含一個檢測區(qū)域和一個對照區(qū)域時，該檢測區(qū)域定位在上述孔和所述層析介質的第一端之間。該對照區(qū)域定位在所述孔和上述層析介質的第二端之間。上述檢測區(qū)域最好定位在所述孔和第二吸收體所接觸的所述層析介質的那個部分之間，而上述對照區(qū)域最好定位在所述孔和第三吸收體所接觸的所述層析介質的那個部分之間，以確保足夠量的被再溶解的被標記的特異性結合對到達上述檢測和對照區(qū)域。
圖12A和12B中畫出了這種裝置。圖12A示出了該裝置的兩個組件的構造，而圖12B示出了沿著第一個組件線J——J’的一個剖面，顯示了層析介質、涂藥器、第一吸收吸體、屏障及孔的細節(jié)。測定裝置460具有用一個合葉466連接起來的一個第一可相對的組件462和一個第二可相對的組件464。該第一和第二可相對的組件包含鎖扣468和470，當使第一和第二可相對的組件462和464相對時有一個密封墊472環(huán)繞它們。第一可相對的組件462包括一種基本上平面形狀的層析介質474，層析介質474具有一個第一端476、一個第二端478、以及第一和第二表面480和482。所述層析介質還包括一個檢測區(qū)域484，而且，可任選地，還包括一個對照區(qū)域486，檢測區(qū)域484含有對于被分析物的一種被標記的特異性結合對，而對照區(qū)域486含有被固定了的被分析物。
第一可相對的組件462還包括一個與層析介質474的第一端476可操作地接觸的樣品制備區(qū)域488。如上所述，樣品制備區(qū)域488可至少含有一種用于處理樣品的試劑。第一可相對的組件462還包括一個與層析介質474的第二端478可操作地接觸的第一吸收體490。
第一可相對的組件462還包括一個鄰接層析介質474的第一表面480的、基本上不能滲透流體的屏障492。屏障492有一個孔494貫穿其間，用于把液體施加給層析介質474。孔494的面積實際上小于屏障492的面積，從而使液體只通過孔494進入層析介質474由屏障492覆蓋的區(qū)域中。不過，在這種裝置中，液體還可在第一端476從樣品制備區(qū)域488進入層析介質474。
第一可相對的組件還包括一個鄰接層析介質474的第二表面482的窗口496，用于觀察層析介質474。
第二可相對的組件464包括一個涂藥器498，涂藥器498含有可以再溶解形式的對于被分析物的一種特異性結合對。這樣定位涂藥器498，使得當把第一和第二可相對的組件462和464相對時，涂藥器498與屏障492接觸，從而使被再溶解的被標記的特異性結合對穿過屏障492中的孔494施加給層析介質474。第二可相對的組件464還包括第二和第三吸收體500和502，第二和第三吸收體500和502這樣定位，使得當把第一和第二可相對的組件462和464相對時，第二吸收體500與在屏障492和層析介質474的第一端476之間的層析介質474的一部分504可操作地接觸，而第三吸收體502與在屏障492和層析介質474的第二端478之間的層析介質474的一部分506相對地接觸。這使得第二和第三吸收體500和502能從層析介質474中去除流體。
在使用時，樣品施加給樣品制備區(qū)域480，并使得該樣品能遷移通過包括檢測區(qū)域476的層析介質474。然后，把含水液體加給在第二可相對的組件464上的涂藥器488，以便再溶解對于被分析物的被標記的特異性結合對。然后，使第一和第二可相對的組件462和464相對，以把被再溶解的被標記的特異性結合對施加給屏障484中的孔486。同時，把第二和第三吸收體490和492施加給層析介質466以便從層析介質466中去除流體。如果檢測樣品中有被分析物的話，那么，在檢測區(qū)域476中形成一種三元配合物，用于檢測該被分析物。III、放大的免疫層析法本發(fā)明的另一個方面是一種用于進行放大的免疫層析的裝置。這樣的一種裝置取決于用銀染色的膠體金的放大。A、銀放大的原理可以用銀來放大膠體金，該膠體金作為一種用于參與一種特異性結合反應的一種化合物的標記物，即作為一種特異性結合對，例如，一種抗原、不全抗原、抗體或抗體碎片。金可催化一種可溶解的銀鹽還原為金屬銀，產生一些圍繞金標記的銀殼層，從而使得可見到更大的區(qū)域。這放大了結合在處于檢測區(qū)域處的三元配合物中的信號。可溶解的銀鹽最好是乳酸鹽。還原劑一般是一種醌，例如，氫醌。B、采用銀放大的裝置本發(fā)明具有兩種類型的采用銀放大的裝置。第一種類型的裝置包括一種金溶膠標記的特異性結合對，這種特異性結合對以可再溶解的形式裝在鄰接一個樣品制備區(qū)域的第一可相對的組件上。在這種裝置中，第二可相對的組件包括一個含有一種可溶解的銀鹽和一種還原劑的涂藥器。第二種類型的裝置特別適于確定在拭子上的某種樣品中的一種被分析物。在這種裝置中，所述拭子插入第二可相對的組件，并且通過一個定位在該裝置中的插入件來提供可溶解的銀鹽和還原劑。1、具有裝在第二可相對的組件上的涂藥器中的銀鹽的裝置一種采用銀放大的前述裝置包括在位于第二可相對的組件中的涂藥器上的一種可溶解的銀鹽和一種還原劑。這種裝置包括(1)一個第一可相對的組件，該組件包括(a)一種平面層析介質，這種層析介質具有一個第一端、一個第二端以及頂表面和底表面，并且如上所述，在一個檢測區(qū)域中具有對于固定在其上的被分析物的一種特異性結合對；(b)一個與上述層析介質的第二端可操作地接觸的吸收體；(c)一個與上述層析介質的第一端可操作地接觸的導體；(d)一個共軛物區(qū)域，這個共軛物區(qū)域以通過給共軛物區(qū)域加入一種含水液體而可以再溶解的形式含有對于用一種金溶膠標記的被分析物的一種特異性結合對，該共軛物區(qū)域與上述導體直接接觸，并且與上述層析介質的第一端間接接觸；(e)一個用于施加某種檢驗樣品的樣品制備區(qū)域，這個樣品制備區(qū)域與上述共軛物區(qū)域直接接觸，所述導體、共軛物區(qū)域及樣品制備區(qū)域這樣定位，使得該共軛物區(qū)域接通所述樣品制備區(qū)域和所述導體；以及(f)一個鄰接上述層析介質的第二表面的、基本上不能滲透流體的屏障，且有一個孔貫穿這個屏障，用于把液體施加給上述層析介質；以及(2)一個第二可相對的組件，該組件包括(a)一個涂藥器，這個涂藥器以通過給其加入一種含水液體而可以再溶解的形式含有(i)一種可溶解的銀鹽，和(ii)一種還原劑，這樣定位該涂藥器，使得當把所述第一和第二可相對的組件相對時，該涂藥器與上述屏障接觸，從而使再溶解的銀鹽和還原劑穿過上述屏障中的孔施加給所述層析介質；以及(b)第二和第三吸收體，這樣定位被第二和第三吸收體，使得當把上述第一和第二可相對的組件相對時，該第二吸收體與在上述屏障和所述層析介質的第一端之間的所述層析介質的一部分可操作地接觸，而該第三吸收體與在上述屏障和所述層析介質的第二端之間的所述層析介質的一部分可操作地接觸，從而使該第二和第三吸收體從所述層析介質中去除流體。
圖13A和13B中畫出了這種裝置。圖13A中示出了該裝置的兩個組件的構造，而圖13B示出了沿著第一個組件線K——K’的一個剖面，顯示了層析介質、導體、共軛物區(qū)域、樣品制備區(qū)域、第一吸收體、屏障和孔的細節(jié)。裝置520具有用一個合葉526連接起來的一個第一可相對的組件522和一個第二可相對的組件524。第一和第二可相對的組件522和524具有諸如鎖扣528和530那樣的連接器，以便當把它們放置得相對時卡住所述這些組件，而且，當把第一和第二可相對的組件522和524相對時，有一個密封墊532環(huán)繞它們。
第一可相對的組件522具有一種層析介質534。層析介質534具有第一和第二端536和538、以及第一和第二表面540和542。層析介質534還具有一個檢測區(qū)域544，檢測區(qū)域544實際上比層析介質534的面積小。該檢測區(qū)域包括一種對于固定在其上的被分析物的特異性結合對。
第一可相對的組件522還包括一個吸收體546和一個導體548，吸收體546與層析介質534的第二端538可操作地接觸，而導體548與層析介質534的第一端536可操作地接觸。
第一可相對的組件522還包括一個共軛物區(qū)域550，共軛物區(qū)域550以通過向其中加入一種含水液體而可以再溶解的形式含有對于用一種金溶膠標記的被分析物的一種特異性結合對。共軛物區(qū)域550與導體548直接接觸，并與層析介質534的第一端536間接接觸。
第一可相對的組件522還包括一個用于施加某種檢驗樣品的樣品制備區(qū)域552。樣品制備區(qū)域552與共軛物區(qū)域550直接接觸。導體548、共軛物區(qū)域550、及樣品制備區(qū)域552這樣定位在第一可相對的組件522上，使得共軛物區(qū)域550接通樣品制備區(qū)域552和導體548。
第一可相對的組件522還包括一個鄰接層析介質534的第一表面540的、基本上不能滲透流體的屏障554。有一個孔556貫穿屏障554，用于把液體施加給層析介質534?？?56的面積實際上比屏障554小，從而使液體可在由屏障554覆蓋的區(qū)域中只穿過孔556進入層析介質534。不過，液體還可穿過導體548進入層析介質534。
第一可相對的組件522還包括一個鄰接層析介質534的第二表面542的窗口558，用于觀察層析介質534。
第二可相對的組件524包括一個含有一個放大器區(qū)域562的涂藥器560。放大器區(qū)域562以通過給涂藥器560加入含水液體而可再溶解的形式含有(1)一種可溶解的銀鹽，以及(2)一種還原劑。這樣定位涂藥器560，使得當把第一和第二可相對的組件522和524相對時，涂藥器560與屏障554接觸，從而使在放大器區(qū)域562中的上述再溶解的銀鹽及所述還原劑穿過屏障554中的孔556施加給層析介質534。第二可相對的組件524還包括第二和第三吸收體564和566。這樣定位第二和第三吸收體564和566，使得當把第一和第二可相對的組件522和524相對時，第二吸收體564與在屏障554和層析介質534的第一端536之間的層析介質534的一部分568可操作地接觸，而第三吸收體566與在屏障554和所述層析介質的第二端538之間的層析介質534的一部分570可操作地接觸。這樣，第二和第三吸收體564和566從所述層析介質中去除流體。
在使用時，樣品施加給裝置520的樣品制備區(qū)域552。使得該樣品能穿過共軛物區(qū)域550流動，以便可再溶解在共軛物區(qū)域550中的被標記的特異性結合對。然后，使所述樣品和被再溶解的被標記的特異性結合對能穿過導體548進入層析介質534，并能至少流過包括檢測區(qū)域544的層析介質534的一部分。之后，給在第二可相對的組件524上的涂藥器560加入一種含水液體，以便可再溶解在放大器區(qū)域562中的可溶解的銀鹽和還原劑。然后，使第一和第二可相對的組件522和524相對，以便能把所述被再溶解的銀鹽和上述還原劑穿過屏障554中的孔556施加給層析介質534，并能使第二和第三吸收體564和566與層析介質534的部分568和570可操作地接觸，以便從層析介質534中抽取流體。之后，使上述被再溶解的銀鹽和所述還原劑能至少穿過包括檢測區(qū)域544的層析介質534的一部分流動，以便圍繞上述被標記的特異性結合對的金標記物中的金沉積銀。這樣，在檢測區(qū)域544處所結合的任何三元配合物都結合有銀，以便放大信號。2、具有兩個區(qū)段的涂藥器以便提供清洗的裝置本發(fā)明的、采用了銀放大由金溶膠產生的信號的、一種測定裝置的另一種改型具有一種包括兩個區(qū)段的涂藥器，以便在把含水的銀鹽和還原劑施加給層析介質之前，為所述層析介質提供清洗。
這種裝置包括(1)一個第一可相對的組件，該組件包括(a)一種層析介質，這種層析介質具有一個第一端、一個第二端、第一和第二表面以及一個檢測區(qū)域，如上所述，該檢測區(qū)域具有對于被分析物的一種特異性結合對；(b)一個與上述層析介質的第二端可操作地接觸的吸收體；(c)一個與上述層析介質的第一端可操作地接觸的導體；(d)一個共軛物區(qū)域，這個共軛物區(qū)域以通過給其中加入一種含水液體而可以再溶解的形式含有對于用一種金溶膠標記的被分析物的一種特異性結合對，該共軛物區(qū)域與上述導體直接接觸，而與所述層析介質的第一端間接接觸；(e)一個用于施加一種檢驗樣品的樣品制備區(qū)域，這個樣品制備區(qū)域與上述共軛物區(qū)域直接接觸，這樣定位上述導體、共軛物區(qū)域及樣品制備區(qū)域，使得該共軛物區(qū)域接通所述樣品制備區(qū)域和上述導體；以及(f)一個鄰接上述層析介質的頂表面的、基本上不能滲透流體的屏障，且如上所述，有一個孔貫穿該屏障，所述孔的面積實際上比上述屏障?。灰约?2)一個第二可相對的組件，該組件包括(a)一個包括兩個區(qū)段的涂藥器(i)一個用于容納含水液體的第一區(qū)段；以及(ii)一個以可以再溶解的形式含有一種可溶解的銀鹽和一種還原劑的第二區(qū)段；以及(b)第二和第三吸收體。
這樣定位涂藥器，使得當把第一和第二可相對的組件相對時，該涂藥器的第一區(qū)段與屏障中的孔直接接觸，而該涂藥器的第二區(qū)段與所述孔間接接觸，從而使含水液體首先施加給層析介質，以便提供清洗，隨后使含水的銀鹽和還原劑施加給所述層析介質。這樣定位第二和第三吸收體，使得當把上述第一和第二可相對的組件相對時，該第二吸收體與在上述屏障和所述層析介質的第一端之間的所述層析介質的一部分可操作地接觸，而該第三吸收體與在上述屏障和所述層析介質的第二端之間的所述層析介質的一部分可操作地接觸，從而使該第二和第三吸收體從所述層析介質中去除流體。
圖14A和14B中畫出了這種裝置。圖14A示出了該裝置的兩個組件的構造，而圖14B示出了沿著第一個組件線L——L’的一個剖面，顯示了層析介質、與所述層析介質直接或間接接觸的那些部件、屏障和孔的細節(jié)。層析測定裝置580具有用一個合葉586連接起來的一個第一可相對的組件582和一個第二可相對的組件586。第一和第二可相對的組件具有諸如鎖扣588和590那樣的連接器，以便把所述那些可相對的組件保持在一起。當把第一和第二可相對的組件582和584相對時，一個密封墊592環(huán)繞它們。
第一可相對的組件582具有一種層析介質594，層析介質594具有第一和第二端596和598、以及第一和第二表面600和602。層析介質594具有對于固定在其上的被分析物的特異性結合對的一個檢測區(qū)域604。檢測區(qū)域604的面積實際上比層析介質594小。
第一可相對的組件582還包括一個吸收體606和一個導體608，吸收體606與層析介質594的第二端598可操作地接觸，而導體608與層析介質594的第一端596可操作地接觸。第一可相對的組件582還包括一個共軛物區(qū)域610，共軛物區(qū)域610以可以再溶解的形式含有對于用一種金溶膠標記的被分析物的一種特異性結合對。共軛物區(qū)域610與導體608直接接觸，并與層析介質594的第一端596間接接觸。
第一可相對的組件582還包括一個用于施加某種檢驗樣品的樣品制備區(qū)域612。樣品制備區(qū)域612與共軛物區(qū)域610直接接觸。樣品制備區(qū)域612可至少含有一種用于處理樣品的試劑。這樣定位導體608、共軛物區(qū)域610及樣品制備區(qū)域612，使得共軛物區(qū)域610接通樣品制備區(qū)域612和導體608。
第一可相對的組件582還包括一個鄰接層析介質594的第一表面600的、基本上不能滲透流體的屏障614。有一個孔616貫穿屏障614，用于把液體施加給層析介質594。孔616的面積實際上比屏障614小，從而使液體可只穿過孔616進入層析介質594鄰接屏障614的那個部分。
第一可相對的組件582還包括一個鄰接層析介質594的第二表面602的窗口618，用于觀察層析介質594。
第二可相對的組件584包括一個涂藥器620，涂藥器620包括兩個區(qū)段(1)一個用于容納含水流體的第一區(qū)段622；和(2)一個以可以再溶解的形式含有一種可溶解的銀鹽和一種還原劑的第二區(qū)段624。這樣定位涂藥器620，使得當把第一和第二可相對的組件582和584相對時，涂藥器620的第一區(qū)段622與屏障614中的孔616直接接觸，而涂藥器620的第二區(qū)段624與孔616間接接觸，從而使上述含水液體首先施加給層析介質594，以便提供清洗，隨后，使再溶解的銀鹽和所述還原劑施加給層析介質594。第二可相對的組件584還包括一個第二吸收體626和一個第三吸收體628。這樣定位第二和第三吸收體626和628，使得當把第一和第二可相對的組件582和584相對時，第二吸收體626與在屏障614和層析介質594的第一端596之間的所述層析介質的一部分630可操作地接觸，而第三吸收體628與在屏障614和層析介質594的第二端598之間的所述層析介質的一部分632可操作地接觸。這使得第二和第三吸收體626和628能從層析介質594中去除流體。
在使用時，樣品施加給裝置580的樣品制備區(qū)域610。使得該樣品能穿過共軛物區(qū)域608流動，以便可在共軛物區(qū)域608中再溶解對于被分析物的被標記的特異性結合對。然后，使得所述樣品和再溶解的被標記的特異性結合對能穿過導體606進入層析介質592，并能至少穿過包括檢測區(qū)域602的層析介質592的一部分流動。這在存在于檢驗樣品中的任何被分析物和在檢測區(qū)域602處被固定的特異性結合對之間形成一種二元配合物。之后，把一種含水液體加給涂藥器616的第一和第二區(qū)段618和620。這可在涂藥器616的第二區(qū)段620中再溶解上述可溶解的銀鹽及所述還原劑。隨后，使第一和第二可相對的組件582和584相對，以便把在涂藥器616的第一區(qū)段618中的上述含水液體作為一種洗滌劑穿過孔614施加給層析介質592，隨后，把上述再溶解的銀鹽和所述還原劑施加給層析介質592。這還使第二和第三吸收體622和624與層析介質592的部分626和628相對地接觸，以便從層析介質592中抽取流體。然后，使上述被再溶解的銀鹽和所述還原劑能至少穿過包括檢測區(qū)域602的層析介質592的一部分流動，以使銀圍繞增強信號的金標記物的金而沉積。3、具有基板和插入件的裝置適用于進行放大了的免疫層析的本發(fā)明的另一種裝置分成兩個可分離件一個基板和一個插入件。該插入件包括一個用于施加可溶解銀鹽和還原劑的涂藥器。
這裝置包括(1)一個基板，這個基板包括(a)一個第一可相對的組件，該組件包括(i)一種具有一個第一端、一個第二端、以及第一和第二表面的平面層析介質，而且如上所述此介質在一個檢測區(qū)域中具有對于固定在其上的被分析物的某種特異性結合對；(ii)一個以可以再溶解的形式含有對于用金溶膠標記的被分析物的某種特異性結合對的共軛物區(qū)域，此共軛物區(qū)域與上述層析介質的第一端可操作地接觸；(iii)一個與上述共軛物區(qū)域可操作地接觸的導體；該共軛物區(qū)域接觸到上述層析介質的第一端和所述導體；(iv)一個鄰接上述層析介質的第一表面的、基本上不能滲透流體的屏障，且如上所述有一個孔貫穿該屏障，用于把液體施加到上述層析介質；(b)一個第二可相對的組件，該組件包括(i)一個用于包含有某種檢驗樣品的拭子的插座；(ii)一個用于給上述拭子添加至少一種萃取試劑的井；以及(iii)與上述插座和井分開的一個第一吸收體；和(c)一個插座，用于使插入件穩(wěn)定，避免插入件的表面相對運動和上述第一和第二可相對的組件的相對運動；以及(2)一個插入件，該插入件包括(a)一個以可再溶解的形式含有某種可溶解的銀鹽及還原劑的涂藥器；(b)一個第二吸收體；(c)一個第三吸收體；以及(d)用于插入上述基板的插座的凸出物。
這樣成形基板的第一和第二可相對的組件，以便當使它們相對時，使第一吸收體與在屏障和層析介質的第二端之間的所述層析介質的一部分接觸，而且插座與導體接觸。插入件這樣成形，使得當插入件的凸出物插進基板的插座時，涂藥器與孔可操作地接觸，第二吸收體與在上述屏障和層析介質的第一端之間的所述層析介質的一部分可操作地接觸，并且第三吸收體與在上述屏障和層析介質第二端之間的所述層析介質的一部分可操作地接觸。
用于保持插入件的插座可以在基板的第一或第二可相對的組件中。它也可以位于基板的第一和第二可相對的組件之間，如在上述兩個組件裝置中那樣，一般用一個合葉連接該第一和第二可相對的組件。
圖15A和15B中示出了裝有一個基板和一個插入件的裝置。圖15A示出了與插入件在一起的基板的兩個組件的配置情況，而圖15B示出了沿基板的第一個組件的M——M’線的剖面，顯示了層析介質、與所述層析介質直接或間接接觸的那些部件、屏障及孔的細節(jié)。裝置640包括一個基板642和一個插入件644?；?42包括用合葉650連接的一個第一可相對的組件646和一個第二可相對的組件648。
基板642的第一可相對的組件646包括一種層析介質656。層析介質656有第一和第二端658和660、以及第一和第二表面662和664。層析介質656還包括有一個檢測區(qū)域666，如上所述，檢測區(qū)域666包含對于固定到那里的被分析物的某種特異性結合對。
基板642的第一可相對的組件646包括一個共軛物區(qū)域668，共軛物區(qū)域668以可以再溶解的形式含有對于用一種金溶膠標記的被分析物的特異性結合對。共軛物區(qū)域668與層析介質656的第一端658可操作地接觸?；?42的第一可相對的組件646還包括與共軛物區(qū)域668可操作地接觸的導體670。共軛物區(qū)域668接通層析介質658的第一端和導體670。
第一可相對的組件646還包括一個基本上不能滲透流體的屏障672，屏障672鄰接層析介質656的第一表面662，而且有一個孔674貫穿屏障672，用于給層析介質656施加液體?？?74的面積實際上小于屏障672，從而使液體只穿過孔674就能進入層析介質656鄰接屏障672的那個區(qū)域。
基板642的第一可相對的組件646還包括一個用于觀察層析介質656的窗口676。
基板642的第二可相對的組件648包括用于含有某種檢驗樣品的拭子的一個第一插座678、一個用于給所述拭子添加至少一種萃取試劑的井680以及一個與插座678和井680分開的第一吸收體682?；?42的第一和第二可相對的組件646和648這樣成形，以便當使它們相對時，使第一吸收體682與在屏障672和層析介質656的第二端660之間的所述層析介質的一部分684接觸，并使第一插座678與導體670接觸?；?42還包括一個用于插入件644的第二插座686?？捎靡粋€連接器688，例如一個可松開的標記物、一個VelcroTM搭扣或其它可逆向連接的搭扣，把第一和第二可相對的組件646和648保持在一起。
插入件644包括一個涂藥器690，涂藥器690以可再溶解的形式包括一種可溶解的銀鹽和一種還原劑。插入件644還包括一個第二吸收體692和一個第三吸收體694，還有一個用于插入基板642的第二插座686中的凸出物696。插入件644這樣成形，使得當凸出物696插進上述基板的第二插座686中時，涂藥器690與孔674可操作地接觸，以便穿過孔674給層析介質656施加涂藥器690的所含之物。第二吸收體692與在屏障672和層析介質656的第一端658之間的層析介質656的一部分698可操作地接觸。第三吸收體694與在屏障672和層析介質656的第二端660之間的所述層析介質的部分682可操作地接觸；也就是說，當第一和第二可相對的組件646和648在插入件644插入之前相對時，第三吸收體694與第一吸收體682位于相同位置。
通過把凸出物696以這樣一種方式插入第二插座686來插入插入件644，即插入件644的各表面以及基板642的第一和第二可相對的組件646和648保持穩(wěn)定，而無相對運動。
在使用時，含有某種檢驗樣品的拭子放在裝置640的基板642的第二可相對的組件648的第一插座678中。至少一種萃取試劑施加給井680，以便從所述拭子中萃取被分析物。然后使基板642的第一和第二可相對的組件646和648相對。上述在第一插座678中的拭子與導體670接觸，以便給導體670施加被萃取了的被分析物。之后，使得被萃取的樣品能夠穿過共軛物區(qū)域668流動，以便可再溶解其中被標記的特異性結合對。然后，使被萃取過的樣品和被再溶解的、被標記的特異性結合對能進入層析介質656，并至少穿過包括檢測區(qū)域666的層析介質656的一部分流動。之后，給插入件644的涂藥器688加入一種含水液體，以便再溶解可溶解的銀鹽和還原劑。把插入件644的凸出物696插進基板642的第二插座686，并這樣定位該插入件，使得涂藥器688與屏障中的孔674接觸，以便給層析介質656施加涂藥器686的所含之物到孔674。第二和第三吸收體692和694與層析介質656的一些部分接觸。然后，使上述被再溶解的可溶解的銀鹽和還原劑能至少穿過包括檢測區(qū)域666的層析介質656的一部分流動，以便放大用于檢測被分析物的信號。IV、酶免疫層析法通過特異性結合反應測定被分析物的一種強有力的技術是酶免疫層析法。在這種技術中，在某種特異性結合反應中的那些組份之一，例如，某種抗體、抗原或不全抗原，用一種酶來標記。通過給所述酶提供一種底物并觀察由所述酶催化的反應產生的一種可檢測的產物，來檢測在那種組份和它的特異性結合對之間的配合物。盡管原則上這是一種強有力的技術，但通常的免疫層析法并不適用于酶標記物，因為必須隨著酶的遷移加入酶底物。然后，試驗條中的殘余酶導致本底顏色顯影，這使得讀取結果如果不是不可能的話也極為困難。不過，如下所述，本發(fā)明的裝置可適于進行酶免疫層析。A、酶標記的原理在本領域中，酶標記的原理是人所共知且已在文獻中公開，例如，在P.Tijssen的“Practice and Theory of Enzymeimmunoassay”(Elsevier，Amsterdam，1985，pp.173-296)中，或在E.Harlow & V.Lane的“AntibodiesA LaboratoryManual”(Cold Spring Harbor，New York，1988，pp.592-599)中，此處引入這兩篇文獻作為參考。本領域中所熟知的因素有酶和底物的選擇以及用于把特異性結合對耦合到所述酶的方法。1、酶和底物的選擇大量性質為人熟知的酶用于酶免疫層析法。對于這些酶的每一種，至少可使用一種底物。優(yōu)選地，底物是這樣一種物質，它由于酶所催化的反應而產生一種不溶解產物。這樣一種不溶解產物可在檢測區(qū)域附著于層析介質，以便能夠檢測。
在這些酶當中，對酶免疫層析法特別有用的是辣根過氧物酶和堿性磷酸酯酶。對于辣根過氧化物酶，適合的底物來自一些不溶解產物，這些不溶解產物包括4-氯-1-萘酚、3-氨基-9-乙基咔唑和二氨基聯苯胺(3，3’，4，4’-四氨基聯二苯)。在有鈷或鎳離子的情況下可使用二氨基聯苯胺。對于堿性磷酸酯酶，產生某種不溶解產物的一種合適的底物是溴氯吲哚基磷酸鹽-氮四唑的一種混合物。本領域中還知道一些其它的適用于免疫層析法的酶和底物。2、酶和特異性結合對成員的耦合在進行免疫層析法時，涉及到被分析物的一對特異性結合對的至少一個成員共價耦合到用來產生可檢測的產物的酶。一般地，如果被分析物是一種抗原或不全抗原，特異性地結合該抗原或不全抗原的一種抗體共價地與酶耦合。不過，還可進行免疫層析法以便檢測一些抗體，在這種情況下，所述抗體特異性地結合的一種抗原或不全抗原與酶耦合。一些用于使抗體與酶耦合的試劑有高碘酸鈉、戊二醛、p-苯醌、N，N’-O亞苯基二馬來酰亞胺、雙-琥珀酸N-羥基琥珀酸酯、碳化二亞胺、甲代亞苯基2，4-二異氰酸酯、4，4’-二氟-3，3’-二硝基苯砜、4-(N-馬來酰亞氨基甲基)-環(huán)己烷-1-羧酸N-羥基琥珀酰亞胺酯、m-馬來酰亞氨基苯甲?；?N-羥基琥珀酰亞胺酯、p-甲?；郊姿岬腘-羥基琥珀酰亞胺酯以及N-琥珀酰亞氨基-3-(2-吡啶基聯硫基)丙酸。本領域中已知其它一些適用于共軛的試劑。
在本領域中，眾所周知抗原和不全抗原對于包括酶的一些蛋白質的共軛，并且，例如在P.Tijssen的上述文獻的第279至296頁中有說明。
簡而言之，可通過混合過的酐反應、與一種水溶性的碳化二亞胺的反應、或與N-羥基琥珀酰亞胺的反應，可以耦合含有羧基團或可被羰化的不全抗原或抗原?？赏ㄟ^一些反應來完成羧化作用，例如，用一些鹵代酯的氧或氮取代基的烷基取代化，隨后是酯的水解，或者是在一些類固醇的羥基或酮基上形成半琥珀酸酯或羧甲基肟。
具有氨基或可還原為氨基的硝基的不全抗原或抗原可轉化為某些重氮鹽，并且可與用于某些芳香胺的具有堿性pH值的一些蛋白質反應?？赏ㄟ^各種方法使具有某些脂肪胺的不全抗原或抗原與某些蛋白質共軛，這些方法包括與某些碳化二亞胺反應、與同型二官能試劑甲代亞苯基2，4-二異氰酸酯反應或與馬來酰亞胺化合物反應。脂肪胺還可通過下述方法轉化為芳香胺，所述方法是與p-硝基苯甲酰氯反應，隨后還原為p-氨基苯甲酰胺，然后，在重氮化后，p-氨基苯甲酰胺與某些蛋白質耦合。還可用某些雙官能酯，例如，二甲基庚二亞氨酸酯、二甲基己二亞氨酸酯或二甲基辛二亞氨酸酯，使含有氨基的不全抗原或抗原與包括某些酶在內的一些蛋白質耦合。
含有硫羥的不全抗原或抗原可與具有馬來酰亞胺的蛋白質共軛，例如，與具有4-(N-馬來酰亞氨基甲基)-環(huán)己烷-1-羧酸N-羥基琥珀酰亞胺酯的蛋白質共軛。
對于具有羥基的不全抗原或抗原，乙醇官能團可轉化為半琥珀酸，這引入了可用于共軛的羧基?？梢赃x擇地，雙官能試劑癸二酰二氯將醇轉化為酰氯，酰氯然后與酶反應。
酚可以用重氮化了的p-氨基苯甲酸活化，p-氨基苯甲酸引入羧基，而且，然后通過混合酐反應與蛋白質反應?？赏ㄟ^形成p-硝基苯苷隨后把硝基還原為氨基以及重氮化作用的共軛來活化糖。其它一些方法包括通過與高碘酸的反應使糖的連位二醇裂解為醛，隨后通過用硼氫化鈉進行還原性烷基化與胺耦合?？梢赃x擇地，含有羥基的不全抗原或抗原可在通過與碳酰氯反應而轉化為氯甲酸酯后被共軛。
對于具有醛基或酮基的不全抗原或抗原，可通過形成O-羧甲基肟來引入羧基。還可用p-肼基苯甲酸來衍生酮基，以產生羧基。含有某些醛的不全抗原或抗原可通過形成席夫(Schiff)堿來直接共軛，席夫堿通過與還原劑(例如，硼氫化鈉)反應被穩(wěn)定。前面所述是概述，而本領域中，一些其它耦合方法是眾所周知的，而且可用于特異性抗原或不全抗原。B、適用于酶免疫層析法的裝置本發(fā)明的免疫層析裝置的幾種變型都適合用于酶免疫層析法。在這樣的裝置中，把對于被分析物的酶標記的特異性結合對加到檢驗樣品中，并使得該對于被分析物的酶標記的特異性結合對能穿過層析介質遷移。在該裝置中，一個插入件以可再溶解的形式包含用于酶標記物的一種底物。
這種裝置包括(1)一個基板，這個基板包括(a)一個第一可相對的組件，該組件包括(i)一種平面層析介質，該介質具有一個第一端、一個第二端、以及第一和第二表面，并如上所述在一個檢測區(qū)域中具有對于固定在其上的被分析物的一種特異性結合對；(ii)一個與上述層析介質的第一端可操作地接觸的導體；以及(iii)一個鄰接上述層析介質的第一表面的、基本上不能滲透流體的屏障，而且有一個孔貫穿該屏障，用于給所述層析介質施加液體，所述孔的面積實際上小于上述屏障；(b)包括一個第一吸收體的一個第二可相對的組件，這樣成形所述第一和第二可相對的組件，以便當使它們相對時，使所述第一吸收體與在上述屏障和層析介質的第二端之間的所述層析介質的一部分可操作地接觸；以及(c)一個用于插入一個插入件凸出物的插座，以保持插入件的穩(wěn)定，避免插入件表面的相對運動和上述第一和第二可相對的組件的相對運動；(2)一個插入件，該插入件包括
(a)一個以可再溶解的形式含有一種用于某種酶標記物的底物的涂藥器，這種酶標記物與對于被分析物的一種特異性結合對結合，該酶標記物通過催化涉及所述底物的反應產生一種不溶解的、可檢測的產物；(b)一個第二吸收體；(c)一個第三吸收體；以及(d)用于插入上述基板的插座的一個凸出物。
插入件這樣成形，使得當凸出物插入基板的插座中時，涂藥器與孔可操作地接觸，以便通過所述孔將該孔的所含之物施加到層析介質，第二吸收體與在屏障和所述層析介質的第一端之間的所述層析介質的一部分可操作地接觸，而第三吸收體與在屏障和上述層析介質的第二端之間的所述層析介質的一部分可操作地接觸。
圖16A和16B中畫出了這種裝置。圖16A示出了與插入件在一起的基板的兩個組件的構造，而圖16B示出了沿著該基板的第一個組件的N-N’線的剖面，顯示了層析介質、直接或間接與該層析介質接觸的那些部件、屏障及孔的細節(jié)。測定裝置720包括一個基板722和一個插入件724?；?22包括由一個合葉730連接在一起的一個第一可相對的組件726和一個第二可相對的組件728。第一可相對的組件726具有一種層析介質736，層析介質736具有第一和第二端738和740、以及第一和第二表面742和742。層析介質736包括一個檢測區(qū)域746，在檢測區(qū)域746上固定有對于被分析物的特異性結合對。第一可相對的組件726還包括一個與層析介質736的第一端738可操作地接觸的導體748。第一可相對的組件726還包括一個鄰接層析介質736的第一表面742的、基本上不能滲透流體的屏障750。有一個孔752貫穿屏障750，用于給層析介質736施加液體?？?52的面積實際上小于屏障750。第一可相對的組件726還包括一個窗口754，以便使得能觀察上述層析介質。
第二可相對的組件728包括一個第一吸收體756。這樣成形第一和第二可相對的組件706和708，以便當使它們相對時，使第一吸收體756與在屏障750和層析介質736的第二端740之間的層析介質736的第一部分758可操作地接觸。基板702還包括一個插座760，以容納插入件724?？赏ㄟ^某種連接器762，例如，一個可松開的標記物、一個VelcroTM搭扣、或其它可逆向連接的搭扣，把第一和第二可相對的組件726和728保持在一起。
插入件724包括一個涂藥器764，涂藥器764以可再溶解的形式含有某種用于酶標記物的底物，所述酶標記物與對于被分析物的一種特異性結合對結合。插入件724還包括一個第二吸收體766和一個第三吸收體768以及一個用于插入基板722的插座760的凸出物770。這樣成形插入件724，使得當凸出物770插入基板722的插座760中時，涂藥器764與孔752可操作地接觸，以便穿過該孔將涂藥器764的所含之物施加給層析介質736。第二吸收體766與在屏障750和層析介質736的第一端738之間的層析介質736的第二部分772可操作地接觸。第三吸收體768與在屏障750和層析介質736的第二端740之間的層析介質736的第一部分758可操作地接觸。
在使用中，把對于被分析物的一種酶標記的特異性結合對加到某種含水檢驗樣品中。把含有樣品和酶標記物的溶液加到導體748。然后，使基板722的第一和第二可相對的組件726和728相對。使第一吸收體756與在屏障750和層析介質736的第二端740之間的層析介質736的部分758可操作地接觸。然后，使樣品——標記物溶液能進入層析介質736，并能至少穿過包括檢測區(qū)域746的層析介質736的一部分流動。把一種含水液體加到插入件724的涂藥器764，以便再溶解在涂藥器764上的底物?？梢栽诎焉鲜鰳悠贰獦擞浳锶芤菏┘咏o導體748之前，也可以在施加給導體748之后來做到這一點。然后，把插入件724的凸出物770插入基板722的插座760。把插入件724這樣定位，使得涂藥器764與屏障750中的孔752接觸。穿過孔752把涂藥器764的所含之物施加給層析介質736。把第二和第三吸收體放置得與層析介質736的部分772和758接觸，以便從層析介質736中抽取流體。然后，使再溶解的底物能至少穿過包括檢測區(qū)域746的層析介質736的那部分流動。酶標記物的酶催化這樣的反應，所述反應涉及上述底物并沉積不溶解產物作為標記物的信號。這使得能檢測結合到檢測區(qū)域746處的、被標記了的特異性結合對，以便檢測和/或確定被分析物。
本發(fā)明的適用于酶免疫層析法的測定裝置的另一種改型并不需要預混合用于施加給該裝置的某種樣品——酶溶液。在這種裝置中，基板的第一可相對的組件包括對于用酶標記的被分析物的一種特異性結合對。
這種裝置包括
(1)一個基板，這個基板包括(a)一個第一可相對的組件，該組件包括(i)一種平面層析介質，此介質具有一個第一端、一個第二端、以及第一和第二表面，并如上所述在一個檢測區(qū)域中具有對于固定在其上的被分析物的一種特異性結合對；(ii)一個以可以再溶解的形式含有用一種酶標記的被分析物的某種特異性結合對的共軛物區(qū)域，該共軛物區(qū)域與上述層析介質的第一端可操作地接觸；(iii)一個與上述共軛物區(qū)域可操作地接觸的導體，所述共軛物區(qū)域接通上述層析介質的第一端和所述導體；以及(iv)一個鄰接上述層析介質的第一表面的、基本上不能滲透流體的屏障，而且有一個孔貫穿該屏障，用于給所述層析介質施加液體，如上所述，所述孔的面積實際上小于上述屏障；(b)一個第二可相對的組件，該組件包括(i)一個用于含有檢驗樣品的拭子的第一插座；(ii)用于給上述拭子添加至少一種萃取試劑的一個井；和(iii)與上述第一插座和井分開的一個第一吸收體；以及(c)一個第二插座，用于使插入件穩(wěn)定，以避免插入件的表面以及上述第一和第二可相對的組件的相對運動；(2)一個插入件，該插入件包括(a)一個以可再溶解的形式包含用于一種酶標記物的某種底物的涂藥器，這種酶標記物與對于被分析物的一種特異性結合對結合，所述酶標記物通過催化涉及上述底物的反應產生一種不溶解的、可檢測的產物；(b)一個第二吸收體；(c)一個第三吸收體；和(d)一個用于插入上述基板第二插座的縫中的凸出物。
這樣成形第一和第二可相對的組件、以便當使它們相對時，使第一吸收體與在屏障和層析介質的第二端之間的所述層析介質的一部分接觸，并使第一插座與導體接觸。
這樣成形插入件，使得當把凸出物插入基板的第二插座時，涂藥器與孔可操作地接觸，以便穿過該孔給層析介質施加該涂藥器所含之物。第二吸收體與在屏障和層析介質的第一端之間的所述層析介質的一部分可操作地接觸。第三吸收體與在屏障和層析介質的第二端之間的所述層析介質的一部分可操作地接觸。
圖17A和17B畫出了這種裝置。圖17A示出了與插入件在一起的基板的兩個組件的構造，而圖17B示出了沿所述基板的第一個組件的O——O’線的剖面，顯示了層析介質、與所述層析介質直接或間接接觸的那些部件、屏障以及孔的細節(jié)。測定裝置780有一個基板782和一個插入件784?；?82包括用一個合葉790連接在一起的一個第一可相對的組件786和一個第二可相對的組件788?？赏ㄟ^一個連接器792，例如，一個可松開的標記物、一個VelcroTM搭扣或其它可逆向連接的搭扣，把第一和第二可相對的組件786和788保持在一起。
第一可相對的組件786上有層析介質794。層析介質794有第一和第二端796和798、一個第一表面800、以及一個第二表面802。層析介質794上還有一個檢測區(qū)域804，并有一種對于被分析物的特異性結合對固定于其上。第一可相對的部件還包括一個共軛物區(qū)域806，共軛物區(qū)域806以可以再溶解的形式含有對于用一種酶標記的被分析物的一種特異性結合對。共軛物區(qū)域806與層析介質794的第一端796可操作地接觸。第一可相對的組件786還包括一個與共軛物區(qū)域806可操作地接觸的一個導體808。共軛物區(qū)域806接通層析介質794的第一端796和導體808。第一可相對的組件786還包括一個鄰接層析介質794的第一表面800的、基本上不能滲透流體的屏障810。有一個孔812貫穿屏障810，用于給層析介質794施加液體?？?12的面積實際上小于屏障810。第一可相對的組件786還包括一個窗口814，用于觀察層析介質794。
第二可相對的組件788包括一個第一插座816、一個井818、以及一個第一吸收體820，第一插座816用于含有檢驗樣品的拭子，井808用于給所述拭子添加至少一種萃取試劑，而第一吸收體820與第一插座816和井818分開。
基板782還包括一個第二插座822，用于保持插入件784的穩(wěn)定，避免第一和第二可相對的組件786和788以及插入件784的相對運動。
第一和第二可相對的組件786和788這樣成形，以便當使它們相對時，使第一吸收體820與在屏障810和層析介質794的第二端798之間的層析介質794的一部分824接觸。使用于保持拭子的第一插座816與導體808接觸。
插入件784包括一個涂藥器826，涂藥器826以可再溶解的形式含有一種用于某種酶標記物的底物，這種酶標記物與對于被分析物的一種特異性結合對結合。這種酶標記物通過催化涉及上述底物的某種反應產生一種不溶解的、可檢測的產物。
插入件784還包括一個第二吸收體828、一個第三吸收體830以及一個用于插入基板782的第二插座822的凸出物832。這樣成形插入件784，使得當凸出物832插入基板782的第二插座822中時，涂藥器826與屏障810中的孔812可操作地接觸。穿過孔812，涂藥器826的所含之物施加到層析介質794。第二吸收體828與在屏障792和層析介質794的第一端796之間的層析介質794的一部分834可操作地接觸。第三吸收體830與在屏障812和層析介質794的第二端798之間的層析介質794的部分824可操作地接觸。
在使用中，含有檢驗樣品的拭子插入基板782的第二可相對的組件788的第一插座816中。至少一種萃取試劑施加到井818，以便從所述拭子中萃取被分析物。使第一和第二可相對的組件786和788相對，從而使在第一插座816中的上述拭子與導體808接觸，以便給導體808施加被萃取的被分析物。第一吸收體820與在屏障810和層析介質794的第二端798之間的所述層析介質的部分824接觸。然后，使得被萃取的樣品能夠穿過共軛物區(qū)域806流動，以便可再溶解在共軛物區(qū)域806中的被標記的特異性結合對，并且使得被萃取的樣品和被再溶解的被標記的特異性結合對能進入層析介質794，并能至少穿過包括檢測區(qū)域804的層析介質794的一部分流動。
把一種含水液體加到插入件784的涂藥器826，以便可再溶解上述底物?？稍谑沟谝缓偷诙上鄬Φ慕M件786和788相對之前，也可在此之后加入這種含水液體。
然后，使插入件784的凸出物832插入基板782的第二插座822。這樣定位插入件784，使得涂藥器826與屏障810中的孔812接觸，以便穿過孔810給層析介質794施加涂藥器826的所含之物。第二和第三吸收體828和830與層析介質794的部分834和824接觸，以便從層析介質794中抽取流體。然后，使被再溶解的底物能至少穿過包括檢測區(qū)域804的層析介質794的部分流動，從而形成一個可檢測的信號，該信號用于檢測被分析物。
通過下面的實施例子說明本發(fā)明。這些實施例子只是用于說明性的目的，而并不以任何方式構成對本發(fā)明范圍的限制。
實施例實施例1表明沒有與對于賈第蟲呈陰性的樣品反應的例子進行這樣的實驗，以表明對于糞便寄生蟲賈第蟲呈陰性的樣品不會與含有組裝在本發(fā)明的測定裝置中抗賈第蟲抗體線的試驗條反應，即一種呈陰性的對照物。在這種裝置中，5μm的硝基纖維素用于層析介質(試驗條)，而兩條抗賈第蟲抗體線(從澳大利亞的Cellabs得到)定位在所指定的試驗條上。該試驗條的長度為0.75英寸。此試驗條的寬度是0.25英寸。在所述試驗條的每一端上放置長度為0.375英寸的吸收體(Ahlstrom 270，Ahlstrom Filtration，Holly，Springs，PA)。用一種密封的標記物覆蓋上述試驗條暴露的表面，在上述兩條抗體線之間的某個位置留下一個約1/16英寸的縫隙或狹縫，用于第一屏障252和第一屏障252中的孔254。
在上面圖3A和3B中所示的一種兩個組件的測定裝置的一種簡化改型中，放置了試驗條和密封的標記物，但沒有密封墊82以及吸收體98和100。在層析介質(試驗條)84和密封的標記物(屏障)102的頂部上，放置一個用具有粉紅色的膠體金染料(40nm，EY實驗室，San，Mateo，CA)標記的抗賈第蟲抗體的共軛物墊(涂藥器)106。在該裝置的右邊的板中，放置一個樣品墊(樣品制備區(qū)域)110。該樣品墊由聚酯材料制成。
把一個對于賈第蟲呈陰性的糞便樣品放到樣品墊上并關閉外殼。通過窗口立刻觀察到淡粉色的液體從中央施加帶在兩個方向上散布開來。在30分鐘的一段觀察期間，根本沒有結果線顯影。因此，一種陰性的樣品給出一個陰性結果。
實施例2表明對賈第蟲呈陽性的檢測的試驗制備一種簡化了的測定裝置。這種裝置基本上類似于上面圖7A和7B所示的裝置，但有下述變化(1)省略了分配膜285；(2)在第二個組件上，用一個樣品制備區(qū)域(樣品墊)替代用于拭子286的插座288；(3)省略了連接器(鎖扣)268和269、密封墊270、和容納拭子的窄端開口271；以及(4)277和27 8兩者都是抗賈第蟲抗體的線，而278不是一個對照區(qū)域，即一條被分析物或被分析物類似物的線。在這種裝置中，在第一屏障281中的孔282的寬度約為1/16英寸。
圖18中示出了這種裝置的剖面圖。裝置840有第一和第二可相對的組件841和842。第一可相對的組件841有一種層析介質843，層析介質843有一個第一端844和一個第二端845、以及第一和第二表面846和847。層析介質843上有第一和第二檢測區(qū)域848和849。第一可相對的組件841有一個窗口850，用于觀察層析介質843。一個具有一個孔852的第一屏障851鄰接層析介質843的第一表面846。所述第一可相對的組件還包括一個鄰接第一屏障851的涂藥器853以及一個鄰接涂藥器853的中央部分的一個第二屏障854。第二可相對的組件842有一個樣品墊855。
把對于賈第蟲呈陽性的一種糞便樣品加到裝置840的第二可相對的組件842上的樣品墊855上，并關閉裝置840，以便把所述樣品施加到層析介質843。在一分鐘內，通過窗口清楚可見兩條結果線。在試驗結束時，一打開裝置840，就觀察到涂藥器853(共軛物墊)已經完全清除了粉色的共軛物。換言之，所述測定裝置已完全從上述墊上移動并清除了所述共軛物。
實施例3用于鏈球菌A的測定裝置按照本發(fā)明構成用于鏈球菌A的測定裝置。這種裝置是圖8A和8B所示測定裝置的一種簡化了的改型，但沒有密封墊297和開口298。測定裝置290的第一可相對的組件291包括一種其中具有俘獲抗體304作為檢測區(qū)域和一個對照區(qū)域305的硝基纖維素層析介質299。俘獲抗體是抗鏈球菌A抗體(Binax，Portland，ME)。對照線是抗兔IgG(Binax)。給層析介質299的背面襯托一個透明塑料襯底315，以便能觀察所述層析介質。在層析介質299的一端，定位一個吸收體306。用一個第一屏障膜307覆蓋層析介質299，第一屏障膜307包含一個約1/16英寸寬的、構成第一孔308的狹縫。一個用作分配膜309的傳導膜放置得鄰接第一屏障膜307，而一個第二屏障膜310放置得鄰接傳導膜309，這樣定位第二屏障膜310，使得流動可圍繞第二屏障膜310的端點到達傳導膜309。一個用作涂藥器311的共軛物墊鄰接第二屏障膜310。涂藥器311在上述那些端點處與傳導膜309接觸。一個構成表面屏障312的不可滲透的標記物覆蓋共軛物墊311。不可滲透的標記物312有一個孔為第二孔313，而且樣品穿過第二孔313，不可滲透的標記物312還有兩個定位在層析介質293的相對端部處的出口314。
測定裝置290的第二個組件292有一個用于插拭子的插座316，由覆蓋第二組件292的不可滲透的標記物形成所述拭子。第二組件292還包括真空形成的井317，用于給上述拭子添加萃取試劑。插座316和井317位于第二組件292的表面下方，而上述不可滲透的標記物是在第二組件292的所述表面上。
在使用中，把一些生濃鏈球菌A的生物體(ATCC 12385)加到一個滌綸拭子上。把這個拭子插入到測定裝置290的第二可相對的組件292上的插座316中。當完全插入時，所述拭子的頭部從第二組件292的表面稍微凸出。給井317加萃取溶液(四滴萃取試劑A(2M亞硝酸鈉，5％的吐溫20))，隨后加四滴萃取試劑B(0.25M的乙酸，5％的吐溫20)，從而通過毛細管現象把細菌和細菌萃取物帶給上述拭子的頭部。萃取一分鐘后，通過把第一組件291折疊到第二組件292上來關閉所述裝置，由此，使上述拭子的頭部與表面屏障312和第二孔313接觸。萃取物遷移到共軛物墊311的端部，圍繞第二屏障膜310，并到達分配膜309。在通過第一個孔308和第一屏障膜307把混合物施加到硝基纖維素層析介質299之前，分配膜309用來混合共軛物和萃取物。在第一個孔308的對照線的一側上沒有吸收體確保了大多數混合物可通過抗鏈球菌A抗體的俘獲線，吸收體306在該俘獲線外。這種裝置在不到3分鐘的整個檢驗時間內，可靠地檢測了1×104個生物體。呈陰性的那些樣品所給出的結果在至少20分鐘的一段時間一致保持呈陰性。
實施例4用于酶免疫層析法的裝置采用按上面圖16A和16B構成的一種裝置，對于荷爾蒙人類絨膜促性腺激素進行酶免疫層析法，常把這種激素測定作為受孕試驗。在這種裝置中，涂藥器764并不含有用于酶標記物的可再溶解的底物；而是在檢驗過程期間加入所述底物。
在硝基纖維素層析介質736上固定一條抗-hCG抗體線作為檢測區(qū)域746。把單克隆抗-hCG抗體-堿性磷酸酯酶共軛物(Hybritech，SanDiego，CA)與尿(對hCG呈陽性或陰性)混合，并加到層析介質736的第一端738。把在陽性反應中給出某種沉淀物的酶底物(沉淀堿性磷酸酯酶底物，Hybritech，San Diego，CA)加到在插入件724上的涂藥器764，并且在5分鐘后，把插入件724放在裝置720中并關閉裝置720。當試驗品尿含有hCG時，在檢測區(qū)域746處顯影出一條被沉淀的底物的蘭色帶。
本發(fā)明的優(yōu)點本發(fā)明的層析測定裝置的優(yōu)點在于由可相對的組件構成。采用可相對的組件提供了巨大的通用性，因為它允許以大量不同的順序進行那些反應。這一點是可能的，因為采用這樣可相對的組件使得能把一些試劑準確地送給一個試驗條或其它反應組件的一些確定的區(qū)域。采用可相對的組件，還通過確保不會由于把一些試劑隔絕在裝置的一些死角而浪費掉這些試劑，從而以最少的試劑消耗量而提供了最佳性能。最后，采用可相對的組件，最佳地容納了可能被污染的血液樣品，每種這樣的可能被污染的血液樣品含有HIV或肝炎病毒。
此外，本發(fā)明的層析測定裝置使得能快速且準確地檢測那些具有臨床重要性的被分析物，例如，鏈球菌A和B抗原、用于測定便潛血的血紅蛋白、和對于幽門螺桿細菌的抗體、以及具有臨床重要性的不全抗原。裝置的構造，以及在一個孔中穿過一個屏障最終把樣品和/或一些試劑施加到層析介質，使得能更均勻地把所述樣品和試劑施加給層析介質，并且減少了否則會由顆粒狀物質或帶色的樣品所引入的干擾。這種構造還使得能采用一些過濾用多孔物質，以便在樣品到達層析介質前去除顆粒狀物質。以可以再溶解的形式采用膠體金屬標記物提供了標記的極快速的動力學。這還有助于分離污染物，并改進了測定的效能。
本發(fā)明的測定裝置還可用于連續(xù)免疫層析法或酶免疫層析法。在這些應用中，它們提供了較弱的本底和較高的靈敏度的優(yōu)點。類似地，本發(fā)明的測定裝置適于進行用銀放大以便增強膠體金標記物的、放大了的免疫測定法。
此外，本發(fā)明的測定裝置適于疏水性被分析物的測定，例如，由被分析物直接吸收到測定裝置的層析介質的脂多糖。
可直接在裝置中進行萃取生物樣品，例如，血液、唾液或糞便，減少必須處理的被污染的材料的量，并減少內科醫(yī)生、技術人員或公眾被這樣的被污染的材料偶然傳染的可能性。采用本發(fā)明的裝置的試驗方法有廣泛的、潛力很大的范圍，并且基本上沒有虛假的呈陰性，這種虛假的呈陰性可能會出現在其它一些對于高濃度的被分析物的試驗方法中。
盡管已經相當詳細地說明了本發(fā)明，并參考了它的某些優(yōu)選的改型，但其它一些改型和實施方案也是可能的。這些改型包括由此處所述的那些基本原理所決定的兩個組件或三個組件的裝置的其它一些構造，并采用穿過一種屏障中的一個孔控制施加至少一種試劑。這些改型包括各種構造的適于競爭性免疫測定以及夾層免疫測定的測定裝置。因此，由下面的權利要求書確定本發(fā)明的范圍。
權利要求
1.一種用于檢測和/或確定在某種檢驗樣品中的一種被分析物的測定裝置，包括(a)一種層析介質，這種層析介質具有一個第一端、一個第二端、以及第一和第二表面，并在一個檢測區(qū)域中具有對于固定到那里的所述被分析物的某種特異性結合對(specific binding partner)；(b)至少一個吸收體，該吸收體與上述層析介質的第一和第二端中的至少一個可操作地接觸；和(c)一個鄰接上述層析介質的第一表面的、基本上不能滲透流體的屏障，所述屏障至少有一個孔貫穿其中，用于把液體施加給上述層析介質，所述屏障至少部分地阻擋把液體施加給上述層析介質；上述層析介質、吸收體、屏障和孔這樣成形，使得施加給所述屏障的液體通過上述至少一個吸收體抽取穿過上述層析介質，從而被分析物和用于這種被分析物的檢測試劑可在上述層析介質上的所述檢測區(qū)域處形成一種三元配合物。
2.如權利要求1所述的測定裝置，包括至少兩個吸收體，一個吸收體與上述層析介質的第一端可操作地接觸，而一個吸收體與上述層析介質的第二端可操作地接觸。
3.如權利要求2所述的裝置，其中所述檢測區(qū)域實際上比所述層析介質的面積小，而且其中所述層析介質還包括一個固定到那里的被分析物或被分析物的類似物的對照區(qū)域，該對照區(qū)域的面積實際上比上述層析介質小，并且不與所述檢測區(qū)域重疊，所述對照和檢測區(qū)域關于上述孔和吸收體這樣定位，使得所述檢測區(qū)域在上述孔和上述吸收體中的一個之間，而所述對照區(qū)域在上述孔和另一個吸收體之間。
4.如權利要求1所述的測定裝置，還包括一個鄰接上述層析介質的底表面的基本上透明的襯底。
5.如權利要求1所述的測定裝置，其中所述孔的面積實際上比所述屏障小，而且其中所述屏障關于上述層析介質這樣定位，從而使液體只能通過所述孔進入鄰接上述屏障的所述層析介質的區(qū)域。
6.如權利要求1所述的測定裝置，其中所述層析介質和所述至少一個吸收體基本上是平面形狀的，且所述屏障位于基本上平行于所述層析介質平面的一個第二平面中。
7.一種用于檢測和/或確定在檢測樣品中的一種被分析物的檢驗試劑盒，該試劑盒在各獨立的容器中包括(a)權利要求1的測定裝置；以及(b)用于上述被分析物的被標記的檢測試劑的水溶液。
8.一種用于檢測和/或確定在含水樣品中的被分析物的方法，包括(a)使所述樣品與用于上述被分析物的被標記的檢測試劑的含水溶液混合，形成含有所述樣品和被標記的檢測試劑的溶液；(b)把含有上述樣品和被標記的檢測試劑的溶液施加到權利要求1的測定裝置的所述孔上；(c)使含有上述樣品和用于所述被分析物的被標記的檢測試劑的溶液至少流過包括所述檢測區(qū)域的上述層析介質的部分；以及(d)通過觀察和/或測定結合在上述檢測區(qū)域處的所述被標記的檢測試劑，檢測和/或確定在上述檢驗樣品中的所述被分析物。
9.一種用于檢測和/或確定在檢驗樣品中的被分析物的測定裝置，包括(a)一種層析介質，這種層析介質具有一個第一端、一個第二端、以及第一和第二表面，并在一個檢測區(qū)域中具有對于固定在其上的所述被分析物的某種特異性結合對；(b)至少一個吸收體，該吸收體與上述層析介質的第一和第二端中的至少一個可操作地接觸；(c)一個鄰接上述層析介質的第一表面的、基本上不能滲透流體的屏障，且所述屏障至少有一個孔，用于把液體施加給上述層析介質，所述屏障至少部分地阻擋把液體施加給上述層析介質；和(d)一個鄰接上述屏障的涂藥器，該涂藥器以通過給涂藥器加入一種含水液體而可以再溶解的形式含有用于上述被分析物的一種被標記的檢測試劑，這樣定位該涂藥器，使得上述屏障位于該涂藥器和所述層析介質之間，而且使得在再溶解上述特異性結合對后通過所述孔抽取施加給涂藥器的樣品，然后通過上述至少一個吸收體穿過上述層析介質抽取施加給該涂藥器的樣品，從而在上述層析介質上的所述檢測區(qū)域處，上述被分析物和用于此被分析物的檢測試劑可形成一種三元配合物。
10.權利要求9所述的測定裝置，包括至少兩個吸收體，一個吸收體與上述層析介質的第一端可操作地接觸，而一個吸收體與上述層析介質的第二端可操作地接觸，其中所述檢測區(qū)域實際上比上述層析介質的面積小，而且其中所述層析介質還包括一個固定到那里的被分析物或被分析物的類似物的對照區(qū)域，該對照區(qū)域的面積實際上比上述層析介質的面積小，并且不與所述檢測區(qū)域重疊，所述對照和檢測區(qū)域關于上述孔和所述吸收體這樣定位，從而使檢測區(qū)域在上述孔和上述那些吸收體中的一個之間，而所述對照區(qū)域在上述孔和另一個吸收體之間。
11.如權利要求9所述的測定裝置，其中用于所述被分析物的上述檢測試劑是對于該被分析物的一種被標記的特異性結合對。
12.如權利要求11所述的裝置，其中所述被標記的特異性結合對的標記物是一種可目視檢測的標記物。
13.一種用于檢測和/或測定在含水樣品中的一種被分析物的方法，包括(a)把所述樣品施加給權利要求9的測定裝置的涂藥器；(b)使得所述樣品再溶解上述被標記的檢測試劑，以在含有所述樣品和被再溶解的被標記的檢測試劑的涂藥器中形成一種溶液；(c)使含有上述樣品和被標記的檢測試劑的所述溶液能流過上述孔、且然后至少穿過包括所述檢測區(qū)域的上述層析介質的部分；(d)通過觀察和/或測定結合在上述檢測區(qū)域處的所述被標記的檢測試劑，檢測和/或確定在上述檢驗樣品中的所述被分析物。
14.一種用于檢測和/或確定在檢驗樣品中的一種被分析物的層析測定裝置，包括(a)一個第一可相對的組件，該組件包括(i)一種層析介質，這種層析介質具有一個第一端、一個第二端、以及第一和第二表面，并在一個檢測區(qū)域中具有對于固定在其上的所述被分析物的特異性結合對；(ii)至少一個吸收體，該吸收體與上述層析介質的第一和第二端中的至少一個可操作地接觸；和(iii)一個鄰接上述層析介質的第一表面的、基本上不能滲透流體的屏障，且該屏障有一個孔用于把液體施加給上述層析介質，所述屏障至少部分地阻擋把液體施加給上述層析介質；(b)一個第二可相對的組件，該組件穿過上述孔把至少一種反應物直接或間接地施加給上述層析介質，其中這樣成形所述第一和第二可相對的組件，使得把該第一和第二可相對的組件相對即導致第二可相對的組件穿過上述孔直接或間接地施加至少一種反應物給上述層析介質。
15.如權利要求14所述的測定裝置，其中可把所述第一和第二可相對的組件相對放置，使得壓力便于通過上述孔施加至少一種反應物給所述層析介質。
16.一種用于檢測和/或確定在檢驗樣品中的被分析物的層析測定裝置，包括(a)一個第一可相對的組件，該組件包括(i)一種層析介質，這種層析介質具有一個第一端、一個第二端、以及第一和第二表面，并在一個檢測區(qū)域中具有對于固定在其上的所述被分析物的某種特異性結合對；(ii)至少一個吸收體，該吸收體與上述層析介質的第一和第二端中的至少一個可操作地接觸；(iii)一個鄰接上述層析介質的第一表面的、基本上不能滲透流體的屏障，且所述屏障有一個孔，用于把液體施加給上述層析介質，所述屏障至少部分地阻擋把液體施加給上述層析介質；和(iv)一個鄰接所述屏障的涂藥器，該涂藥器以通過給涂藥器加入一種含水液體而可以再溶解的形式含有用于上述被分析物的一種被標記的檢驗試劑，這樣定位該涂藥器，使得上述屏障位于該涂藥器和所述層析介質之間，而且使得在再溶解上述檢測試劑后穿過所述孔抽取施加給該涂藥器的含水液體，且然后通過上述至少一個吸收體穿過上述層析介質抽取施加給涂藥器的含水液體，從而在上述層析介質上的所述檢測區(qū)域處，上述被分析物和用于此被分析物的檢測試劑可形成一種三元配合物；以及(b)一個第二可相對的組件，該組件包括一個樣品制備區(qū)域；其中這樣成形所述第一和第二可相對的組件，使得把所述第一和第二可相對的組件相對即導致上述樣品制備區(qū)域與所述涂藥器接觸，從而把在所述樣品制備區(qū)域中的樣品施加到上述涂藥器，用于再溶解上述可再溶解的檢測試劑，并穿過上述層析介質進行層析。
17.權利要求16的測定裝置，包括至少兩個吸收體，一個吸收體與上述層析介質的第一端可操作地接觸，而一個吸收體與上述層析介質的第二端可操作地接觸，其中上述檢測區(qū)域實際上小于所述層析介質的面積，而且其中所述層析介質還包括一個固定在其上的被分析物或被分析物的類似物的對照區(qū)域，該對照區(qū)域的面積實際上比上述層析介質的面積小，并且不與所述檢測區(qū)域重疊，所述對照和檢測區(qū)域關于上述孔和上述吸收體這樣定位，從而使該檢測區(qū)域在上述孔和上述那些吸收體中的一個之間，而所述對照區(qū)域是在上述孔和另一個吸收體之間。
18.如權利要求16所述的測定裝置，其中上述用于所述被分析物的檢測試劑是一種對于該被分析物的一種被標記的特異性結合對。
19.如權利要求18所述的測定裝置，其中上述被標記的特異性結合對的標記物是一種可目視檢測的標記物。
20.如權利要求16所述的測定裝置，其中上述樣品制備區(qū)域包含至少一種用于處理所述樣品的試劑。
21.一種用于檢測和/或確定在含水檢驗樣品中的一種被分析物的方法，包括(a)把樣品施加到權利要求16的測定裝置的樣品制備區(qū)域；(b)使第一和第二可相對的組件相對，從而使上述樣品從所述樣品制備區(qū)域轉移到涂藥器；(c)使被轉移到涂藥器的樣品再溶解在該涂藥器中的被標記的檢測試劑，以在含有所述被轉移的樣品和被再溶解的被標記的檢測試劑的涂藥器中形成一種溶液；(d)使上述含有上述樣品和被標記的檢測試劑的溶液穿過屏障中的孔進入層析介質，且然后至少流動穿過包括所述檢測區(qū)域的上述層析介質的部分；以及(e)通過觀察和/或測定在所述檢測區(qū)域處結合的上述被標記的檢測試劑來檢測和/或確定在某種檢驗樣品中的所述被分析物。
22.一種用于檢測和/或確定在含水檢驗樣品中的被分析物的方法，包括(a)把所述樣品施加到權利要求20的測定裝置的樣品制備區(qū)域；(b)在上述樣品制備區(qū)域中培養(yǎng)所述樣品，從而使至少一種用于處理所述樣品的試劑與所述樣品反應，以便產生一種被處理過的樣品；(c)使第一和第二可相對的組件相對，從而使所述被處理過的樣品從上述樣品制備區(qū)域轉移到涂藥器；(d)使得轉移到所述涂藥器的上述被處理過的樣品再溶解在該涂藥器中的被標記的檢測試劑，以在含有所述被轉移了的被處理過的樣品和再溶解的被標記的檢測試劑的涂藥器中形成一種溶液；(e)使含有上述被處理過的樣品和再溶解的被標記的檢測試劑的溶液穿過屏障中的孔進入層析介質，且然后至少流動穿過包括所述檢測區(qū)域的上述層析介質的部分；(f)通過觀察和/或測定在上述檢測區(qū)域中的所述被標記的檢測試劑來檢測和/或確定在所述檢驗樣品中的所述被分析物。
23.一種用于檢測和/或確定在檢驗樣品中的被分析物的層析裝置，包括(a)一個第一可相對的組件，該組件包括(i)一種層析介質，這種層析介質具有一個第一端、一個第二端、以及第一和第二表面，并具有對于固定在其上的所述被分析物的一種特異性結合對；(ii)至少一個吸收體，該吸收體與上述層析介質的第一和第二端中的至少一個可操作地接觸；和(iii)一個鄰接上述層析介質的第一表面的、基本上不能滲透流體的屏障，且該屏障有一個孔用于把液體施加給上述層析介質，所述屏障至少部分地阻擋把液體施加給上述層析介質；和(b)一個第二可相對的組件，該組件包括一個用于施加某種樣品到該處的涂藥器，該涂藥器以通過給涂藥器加入一種含水液體而可以再溶解的形式含有用于上述被分析物的一種被標記的檢測試劑；其中這樣成形所述第一和第二可相對的組件，使得把所述第一和第二可相對的組件相對即導致所述涂藥器與上述屏障可操作地接觸，從而使在所述涂藥器中的樣品和被再溶解的檢測試劑穿過上述屏障中的孔施加到上述層析介質，用于穿過所述層析介質進行層析。
24.權利要求23的測定裝置，包括至少兩個吸收體，一個吸收體與所述層析介質的第一端可操作地接觸，而一個吸收體與所述層析介質的第二端可操作地接觸，其中上述檢測區(qū)域實際上小于所述層析介質的面積，而其中所述層析介質還包括一個固定在其上的被分析物或被分析物的類似物的對照區(qū)域，該對照區(qū)域的面積實際上比上述層析介質的面積小，并且不與所述檢測區(qū)域重疊，所述對照和檢測區(qū)域關于上述孔和上述吸收體這樣定位，從而使該檢測區(qū)域在上述孔和上述那些吸收體中的一個之間，而所述對照區(qū)域是在上述孔和另一個吸收體之間。
25.如權利要求23的測定裝置，其中上述用于所述被分析物的檢測試劑是一種對于該被分析物的被標記的特異性結合對。
26.如權利要求24所述的測定裝置，其中上述被標記的特異性結合對的標記物是一種可目視檢測的標記物。
27.如權利要求23所述的測定裝置，其中所述涂藥器至少包含一種用于處理所述樣品的一種試劑。
28.如權利要求23所述的測定裝置，其中可把所述第一和第二可相對的組件相對放置，使得壓力便于穿過上述孔把所述樣品和被再溶解的檢測試劑施加給上述層析介質。
29.一種用于檢測和/或確定在含水檢驗樣品中的被分析物的方法，包括下述步驟(a)把所述樣品施加給權利要求23的測定裝置的涂藥器；(b)使上述樣品再溶解所述涂藥器中的被標記的檢測試劑，以在含有所述樣品和被再溶解的檢測試劑的上述涂藥器中形成一種溶液；(c)使第一和第二可相對的組件相對，從而使上述含有所述樣品和被再溶解的被標記的檢測試劑的溶液穿過屏障中的孔施加到層析介質；(d)使上述含有所述樣品和被標記的檢測試劑的溶液流動穿過包括所述檢測區(qū)域的上述層析介質的至少一部分；以及(e)通過觀察和/或測定在上述檢測區(qū)域處所結合的所述被標記的檢測試劑來檢測和/或確定在上述檢驗樣品中的所述被分析物。
30.一種用于檢測和/或確定在檢驗樣品中的被分析物的測定裝置，包括(a)一個第一可相對的組件，該組件包括(i)一種層析介質，這種層析介質具有一個第一端、一個第二端、以及第一和第二表面，并在一個檢測區(qū)域中具有對于固定在其上的所述被分析物的特異性結合對；(ii)至少一個吸收體，該吸收體與上述層析介質的第一和第二端中的至少一個可操作地接觸；和(iii)一個鄰接上述層析介質的第一表面的、基本上不能滲透流體的屏障，且所述屏障有一個孔，用于把液體施加給上述層析介質，所述屏障至少部分地阻攔把液體施加給上述層析介質；以及(iv)一種過濾用多孔物質，用于去除鄰接上述屏障的那些顆粒狀物質；上述層析介質、屏障和過濾用多孔物質這樣定位，使得所述屏障位于所述過濾用多孔物質和層析介質之間；以及(b)一個第二可相對的組件，該組件包括一個用于把樣品施加到其中的涂藥器，所述涂藥器以通過給涂藥器加入一種含水液體而可以再溶解的形式含有用于上述被分析物的一種被標記的檢測試劑，其中這樣成形上述第一和第二可相對的組件，使得把該第一和第二可相對的組件相對即導致上述涂藥器與所述過濾用多孔物質可操作地接觸，從而使在所述涂藥器中的上述樣品和被再溶解的被標記的檢測試劑施加到上述過濾用多孔物質，且然后穿過上述屏障中的孔到達上述層析介質，用于穿過所述層析介質進行層析。
31.如權利要求30所述的測定裝置，包括至少兩個吸收體，一個吸收體與上述層析介質的第一端可操作地接觸，而一個吸收體與上述層析介質的第二端可操作地接觸，其中所述檢測區(qū)域實際上比所述層析介質的面積小，而且其中所述層析介質還包括一個固定在其上的被分析物或被分析物的類似物的對照區(qū)域，該對照區(qū)域的面積實際上比上述層析介質的面積小，并且不與所述檢測區(qū)域重疊，所述對照和檢測區(qū)域關于上述孔和上述吸收體這樣定位，使得該檢測區(qū)域在上述孔和上述那些吸收體中的一個之間，而所述對照區(qū)域是在上述孔和另一個吸收體之間。
32.如權利要求30所述的測定裝置，其中上述用于所述被分析物的檢測試劑是一種對于該被分析物的被標記的特異性結合對。
33.如權利要求32所述的測定裝置，其中上述被標記的特異性結合對的標記物是一種可目視檢測的標記物。
34.如權利要求30所述的測定裝置，其中所述涂藥器至少含有一種用于處理上述樣品的試劑。
35.如權利要求30所述的測定裝置，其中所述過濾用多孔物質去除糞便物質。
36.如權利要求30所述的測定裝置，其中可把所述第一和第二可相對的組件相對放置，從而使壓力便于穿過上述孔把所述樣品和被再溶解的被標記的檢測試劑施加給所述層析介質。
37.一種用于檢測和/或確定在含水樣品中的被分析物的方法，包括下述步驟(a)施加所述樣品到權利要求30的測定裝置的涂藥器；(b)使所述樣品再溶解在上述涂藥器中的被標記的檢測試劑，以便在含有所述樣品和再溶解的被標記的檢測試劑的上述涂藥器中形成一種溶液；(c)使第一和第二可相對的組件相對，從而使上述含有所述樣品和再溶解的被標記的檢測試劑的溶液施加到過濾用多孔物質；(d)使上述含有所述樣品和被標記的檢測試劑的溶液通過上述過濾用多孔物質，以便形成一種過濾過的溶液；(e)使上述過濾過的溶液穿過屏障中的孔進入層析介質，并能至少流動穿過包括檢測區(qū)域的所述層析介質的那個部分；以及(f)通過觀察和/或測定在所述檢測區(qū)域處所結合的被標記的檢測試劑來檢測和/或確定在上述檢驗樣品中的所述被分析物。
38.一種用于檢測和/或確定在檢驗樣品中的一種被分析物的測定裝置，包括(a)一個第一可相對的組件，該組件包括(i)一種層析介質，這種層析介質具有一個第一端、一個第二端、以及第一和第二表面，并在一個檢測區(qū)域中具有對于固定在其上的所述被分析物的某種特異性結合對；(ii)至少一個吸收體，該吸收體與上述層析介質的第一和第二端中的至少一個可操作地接觸；(iii)一個鄰接上述層析介質的第一表面的、基本上不能滲透流體的屏障，且該屏障有一個孔，用于把液體施加給上述層析介質，所述屏障至少部分地阻擋把液體施加給上述層析介質；(iv)一個鄰接上述屏障的涂藥器，該涂藥器以通過給涂藥器加入一種含水液體而再溶解的形式含有對于上述被分析物的一種被標記的檢測試劑；和(v)一種過濾用多孔物質，用于去除鄰接上述涂藥器的顆粒狀物質，所述層析介質、屏障、涂藥器及過濾用多孔物質這樣定位，使得所述涂藥器位于上述過濾用多孔物質和所述層析介質之間；以及(b)一個包括一個樣品制備區(qū)域的第二可相的組件；其中這樣成形所述第一和第二可相對的組件，使得把該第一和第二可相對的組件相對即導致上述樣品制備區(qū)域與所述過濾用多孔物質可操作地接觸，從而使樣品施加到該過濾用多孔物質上，并且使被過濾的樣品和被標記的特異性結合對的溶液穿過上述屏障中的孔施加到所述層析介質。
39.權利要求38所述的測定裝置，包括至少兩個吸收體，一個吸收體與所述層析介質的第一端可操作地接觸，而一個吸收體與所述層析介質的第二端可操作地接觸，其中上述檢測區(qū)域實際上比所述層析介質的面積小，而且其中所述層析介質還包括一個固定在其上的被分析物或被分析物的類似物的對照區(qū)域，這個對照區(qū)域的面積實際上比上述層析介質的面積小，并且不與所述檢測區(qū)域重疊，所述對照和檢測區(qū)域關于上述孔和所述吸收體這樣定位，使得該檢測區(qū)域在上述孔和所述那些吸收體中的一個之間，而所述對照區(qū)域是在所述孔和另一個吸收體之間。
40.如權利要求38所述的測定裝置，其中所述用于上述被分析物的檢測試劑是一種對于該被分析物的被標記的特異性結合對。
41.如權利要求39所述的測定裝置，其中所述被標記的特異性結合對的標記物是一種可目視檢測的標記物。
42.如權利要求38所述的測定裝置，其中所述樣品制備區(qū)域至少包含一種用于處理所述樣品的試劑。
43.如權利要求38所述的測定裝置，其中所述過濾用多孔物質用于去除糞便物質。
44.如權利要求38所述的測定裝置，其中可把所述第一和第二可相對的組件相對放置，從而使壓力便于把上述被過濾的樣品和被標記的特異性結合對的溶液穿過所述孔施加給上述層析介質。
45.一種用于檢測和/或確定在含水檢驗樣品中的被分析物的方法，包括下述步驟(a)把所述樣品施加給權利要求38的測定裝置的樣品制備區(qū)域；(b)使第一和第二可相對的組件相對，從而使上述樣品從所述樣品制備區(qū)域轉移到過濾用多孔物質；(c)使所述轉移到上述過濾用多孔物質的樣品穿過該過濾用多孔物質，以便產生過濾過的樣品；(d)使所述過濾過的樣品進入涂藥器，以再溶解該涂藥器中被標記的檢測試劑，在涂藥器中形成一種含有上述過濾過的樣品和被再溶解的檢測試劑的溶液；(e)使所述含有上述過濾過的樣品和被再溶解的被標記的檢測試劑的溶液穿過屏障中的孔進入層析介質，并且能至少流動穿過包括檢測區(qū)域的所述層析介質的那個部分；以及(f)通過觀察和/或測定在上述檢測區(qū)域處所結合的被標記的檢測試劑來檢測和/或確定在上述檢驗樣品中的所述被分析物。
46.一種用于檢測和/或確定在含水檢驗樣品中的一種被分析物的方法，包括下述步驟(a)施加所述樣品給權利要求42的測定裝置的樣品制備區(qū)域；(b)在所述樣品制備區(qū)域中培養(yǎng)上述樣品，從而使得用于處理所述樣品的至少一種試劑可與該樣品反應而形成一種處理過的樣品；(c)使第一和第二可相對的組件相對，以將上述處理過的樣品從所述樣品制備區(qū)域轉移到過濾用多孔物質；(d)使上述轉移到過濾用多孔物質的處理過的樣品穿過所述過濾用多孔物質，產生一種過濾過的被處理過的樣品；(e)使上述過濾過的被處理過的樣品進入涂藥器，以再溶解在該涂藥器中的被標記的檢測試劑，在該涂藥器中形成一種含有上述過濾過的被處理過的樣品和被再溶解的被標記的檢測試劑的溶液；(f)使上述含有過濾過的被處理過的樣品和被再溶解的被標記的檢測試劑的溶液穿過屏障中的孔進入層析介質，并至少穿過包括檢測區(qū)域的所述層析介質的那個部分；和(g)通過觀察和/或測定在上述檢測區(qū)域處所結合的所述被標記的檢測試劑來檢測和/或確定在上述檢驗樣品中的所述被分析物。
47.一種用于檢測和/或確定在檢驗樣品中的一種被分析物的測定裝置，包括(a)一個第一可相對的組件，該組件包括(i)一種層析介質，這種層析介質具有一個第一端、一個第二端、以及第一和第二表面，并在一個檢測區(qū)域中具有對于固定在其上的上述被分析物的一種特異性結合對；(ii)至少一個吸收體，該吸收體與上述層析介質的第一和第二端中的至少一個可操作地接觸；(iii)一個鄰接上述層析介質的第一表面的、基本上不能滲透流體的第一屏障，該第一屏障有一個孔，用于把液體施加給上述層析介質，該第一屏障至少部分地阻擋把液體施加給上述層析介質；(iv)一個鄰接上述第一屏障的涂藥器，該涂藥器以通過給涂藥器加入一種含水液體而可以再溶解的形式含有用于上述被分析物的一種被標記的檢測試劑；(v)一個鄰接上述涂藥器的一個第一部分的、基本上不能滲透流體的第二屏障；以及(v)一個分配膜，該分配膜鄰接上述第二屏障，并且與上述涂藥器所不鄰接的一個第二部分可操作地接觸，從而使流體可圍繞上述第二屏障從所述分配膜流到涂藥器；以及(b)一個第二可相對的組件，該組件包括一個用于含有某種檢驗樣品的拭子的插座，其中這樣成形所述第一和第二可相對的組件，使得把該第一和第二可相對的組件相對即導致把樣品施加給上述分配膜，且然后施加給上述層析介質。
48.權利要求47的測定裝置，包括至少兩個吸收體，一個吸收體與上述層析介質的第一端可操作地接觸，而一個吸收體與所述層析介質第二端可操作地接觸，其中所述檢測區(qū)域實際上比所述層析介質的面積小，而且其中所述層析介質還包括一個固定在其上的被分析物或被分析物的類似物的對照區(qū)域，該對照區(qū)域的面積實際上比所述層析介質的面積小，并且不與上述檢測區(qū)域重疊，所述對照和檢測區(qū)域關于上述孔和所述吸收體這樣定位，使得該檢測區(qū)域在所述孔和上述那些吸收體中的一個之間，而該對照區(qū)域是在所述孔和另一個吸收體之間。
49.如權利要求47所述的測定裝置，其中所述用于上述被分析物的被標記的檢測試劑是一種對于該被分析物的被標記的特異性結合對。
50.如權利要求49所述的測定裝置，其中所述被標記的特異性結合對的標記物是一種可目視檢測的標記物。
51.如權利要求47所述的測定裝置，其中可把所述第一和第二可相對的組件相對放置，從而使壓力便于把所述樣品穿過上述孔施加給所述層析介質。
52.一種用于檢測和/或確定在含水檢驗樣品中的被分析物的方法，包括下述步驟(a)把含有上述檢驗樣品的拭子放入權利要求47的測定裝置的插座中；(b)使上述測定裝置的第一和第二可相對的組件相對，從而使上述檢驗樣品從所述拭子轉移到分配膜；(c)使所述樣品進入涂藥器，以再溶解涂藥器中的被標記的檢測試劑，從而在涂藥器中形成一種含有所述樣品和被再溶解的被標記的檢測試劑的溶液；(d)使上述含有所述樣品和被標記的檢測試劑的溶液進入層析介質，并且至少流動穿過包括檢測區(qū)域的所述層析介質的那個部分；以及(e)通過觀察和/或測定在上述檢測區(qū)域處所結合的所述被標記的檢測試劑來檢測和/或確定在上述檢驗樣品中的所述被分析物。
53.一種用于檢測和/或確定在檢驗樣品中的被分析物的測定裝置，包括(a)一種層析介質，這種層析介質具有一個第一端、一個第二端、以及第一和第二表面，并且在一個檢測區(qū)域中具有固定在其上的一種輔助的(Secondary)特異性結合對，該輔助的特異性結合對能結合對于上述被分析物缺少親和性的一對特異性結合對的一個成員；(b)至少一個吸收體，該吸收體與上述第一和第二端中的至少一個可操作地接觸；(c)一個鄰接上述層析介質的第一表面的、基本上不能滲透流體的屏障，該屏障具有至少一個孔，用于把液體施加給上述層析介質，所述屏障至少部分地阻擋把液體施加給所述層析介質；和(d)一個鄰接上述屏障的親和性膜，該親和性膜含有對于固定到那里的上述被分析物的一種特異性結合對，這樣成形上述層析介質、吸收體、屏障、孔和親和性膜，使得通過上述至少一個吸收體，抽取施加到上述親和性膜的液體穿過上述層析介質，從而如果上述樣品中有被分析物的話，一種被標記的檢測試劑結合在上述層析介質上的檢測區(qū)域處。
54.如權利要求53所述的測定裝置，其中可把所述第一和第二可相對的組件相對放置，從而使壓力便于把施加到上述親和性膜的所述液體穿過上述孔施加給所述層析介質。
55.一種用于檢測和/或確定在檢驗樣品中的一種被分析物的測定裝置，包括(a)一個第一可相對的組件，該組件包括(i)一種層析介質，這種層析介質具有一個第一端、一個第二端、以及第一和第二表面，并且在一個檢測區(qū)域中具有固定在其上的一種輔助的特異性結合對，這種輔助的特異性結合對能結合對上述被分析物缺少親和性的一對特異性結合對的一個成員；(ii)一個第一吸收體，該第一吸收體與上述層析介質的第一端可操作地接觸；(iii)一個第二吸收體，該第二吸收體與上述層析介質的第二端可操作地接觸；(iv)一個鄰接上述層析介質的第一表面的、基本上不能滲透流體的屏障，有一個孔貫穿該屏障，用于把液體施加給上述層析介質，所述孔的面積實際上小于上述屏障，從而使液體只能穿過所述孔進入上述層析介質；這樣成形所述層析介質、吸收體、屏障和孔，使得所述檢測區(qū)域位于上述孔和所述層析介質的第一端之間；以及(v)一個鄰接上述屏障的親和性膜，該親和性膜含有對于固定到那里的上述被分析物的一種特異性結合對；以及(b)一個第二可相對的組件，該組件包括一個涂藥器，該涂藥器以通過給涂藥器加入含水液體而可以再溶解的形式含有一種被分析物的類似物，該被分析物的類似物包括這樣的被分析物，這樣的被分析物共價結合到對于上述被分析物缺少親和性的一對特異性結合對的一個成員，并且能被該特異性結合對結合，用一種可檢測的標記物標記上述被分析物的類似物；其中這樣成形上述第一和第二可相對的組件，使得把該第一和第二可相對的組件相對即導致上述涂藥器與所述親和性膜可操作地接觸。
56.如權利要求55所述的測定裝置，其中所述可檢測的標記物是一種可目視檢測的標記物。
57.如權利要求55所述的測定裝置，其中可把所述第一和第二可相對的組件相對放置，從而使壓力便于把所述液體穿過上述孔施加給所述層析介質。
58.一種用于檢測和/或確定在含水檢驗樣品中的被分析物的方法，包括下述步驟(a)把所述樣品施加給權利要求55的測定裝置的涂藥器；(b)使上述樣品再溶解在所述涂藥器中的被分析物的類似物，以便在涂藥器中形成一種含有所述檢驗樣品和被再溶解的被標記的被分析物的類似物的溶液；(c)使第一和第二可相對的組件相對，從而使含有所述檢驗樣品和被再溶解的被分析物的類似物的所述溶液從上述涂藥器轉移到親和性膜；(d)使含有所述檢驗樣品和被再溶解的被分析物的類似物的上述溶液穿過所述親和性膜，且然后穿過屏障中的孔進入層析介質，并且至少流動穿過包括檢測區(qū)域的所述層析介質的一部分；以及(e)通過觀察和/或測定在上述檢測區(qū)域處所結合的所述被標記的被分析物的類似物來檢測和/或確定在上述檢驗樣品中的所述被分析物，其中所結合的被標記的被分析物的類似物的量直接與在上述檢驗樣品中的被分析物的濃度相關。
59.一種用于檢測和/或測定在檢驗樣品中的被分析物的測定裝置，包括(a)一個第一可相對的組件，該組件包括(i)一種層析介質，這種層析介質具有一個第一端和一個第二端、以及第一和第二表面，并且在一些獨立離散且不重疊的區(qū)域上固定有(A)一個對于所述被分析物的一種特異性結合對的檢測區(qū)域；和(B)一個被分析物或被分析物的類似物的對照區(qū)域；所述檢測區(qū)域位于離開上述層析介質的端點的一點和上述層析介質的第一端之間，而所述對照區(qū)域位于離開上述層析介質端點的一點和所述層析介質的第二端之間；(ii)一個與上述層析介質的第一端可操作地接觸的吸收體；(iii)一個鄰接上述層析介質的第一表面的、基本上不能滲透流體的第一屏障，且第一屏障有一個第一施加面，此第一施加面實際上比所述層析介質的面積小，并位于離開上述層析介質的端點的一個位置，所述第一屏障至少部分地阻擋把液體施加給上述層析介質；(iv)一個鄰接上述第一屏障的涂藥器，該涂藥器以通過給涂藥器加入一種含水液體而可以再溶解的形式含有對于上述被分析物的一種被標記的特異性結合對，該涂藥器的位置便于在上述第一施加面處把液體施加給所述層析介質；以及(v)一個鄰接上述涂藥器的、基本上不能滲透流體的第二屏障，第二屏障這樣定位，以至少部分地阻擋把液體施加給上述涂藥器，并使得能穿過一個第二施加面把液體施加給該涂藥器，所述第二施加面實際上比上述層析介質的面積小，而且位置距上述層析介質的第二端比距所述層析介質的第一端更近；以及(b)一個包括一個樣品制備區(qū)域的第二可相對的組件；其中這樣成形所述第一和第二可相對的組件，使得把該第一和第二可相對的組件相對即導致上述樣品制備區(qū)域與所述第二屏障接觸，并與上述第二施加面接觸，從而使在該樣品制備區(qū)域中的所述樣品穿過上述第二施加面施加給所述涂藥器，并且實際上橫過該涂藥器的整個長度，以穿過上述第一施加面把所述樣品和被再溶解的被標記的特異性結合對施加給上述層析介質。
60.如權利要求59所述的測定裝置，其中所述樣品制備區(qū)域至少包含一種用于處理上述樣品的試劑。
61.如權利要求59所述的測定裝置，其中可檢測的標記物是一種可目視檢測的標記物。
62.如權利要求59所述的測定裝置，其中可把所述第一和第二可相對的組件相對放置，從而使壓力便于把所述樣品穿過孔施加給所述層析介質。
63.一種用于檢測和/或確定在檢驗樣品中的被分析物的方法，包括(a)把所述樣品施加給權利要求59的測定裝置的樣品制備區(qū)域；(b)使第一和第二可相對的組件相對，從而使所述檢驗樣品穿過第二施加面轉移到涂藥器；(c)使轉移到該涂藥器的所述樣品在所述涂藥器中再溶解被標記的特異性結合對，以形成含有所述樣品和被再溶解的被標記的特異性結合對的一種溶液；(d)使含有所述樣品和被再溶解的被標記的特異性結合對的上述溶液進入層析介質；并且至少流動穿過包括檢測區(qū)域和對照區(qū)域的所述層析介質的那個部分；以及(e)通過觀察和/或測定在所述檢測區(qū)域處所結合的上述被標記的特異性結合對來檢測和/或確定在上述檢驗樣品中的所述被分析物。
64.一種用于檢測和/或確定在檢驗樣品中的被分析物的方法，包括(a)把所述樣品施加給權利要求60的測定裝置的樣品制備區(qū)域；(b)在所述樣品制備區(qū)域中培養(yǎng)上述樣品，從而使用于處理所述樣品的至少一種試劑可與該樣品反應，形成一種被處理過的樣品；(c)使第一和第二可相對的組件相對，從而使上述被處理過的樣品穿過第二施加面轉移到涂藥器；(d)使被轉移到該涂藥器的所述被處理過的樣品在該涂藥器中再溶解被標記的特異性結合對，以形成含有所述被處理過的樣品和被再溶解的被標記的特異性結合對的一種溶液；(e)使含有所述被處理過的樣品和被溶解的被標記的特異性結合對的上述溶液再進入層析介質，并且至少流動穿過包括檢測區(qū)域和對照區(qū)域的所述層析介質的那個部分；以及(f)通過觀察和/或測定在上述檢測區(qū)域處所結合的所述被標記的特異性結合對來檢測和/或確定在上述檢驗樣品中的所述被分析物。
65.一種用于檢測和/或確定在檢驗樣品中的被分析物的測定裝置，包括(a)一個第一可相對的組件，該組件包括(i)一種層析介質，這種層析介質具有一個第一端、一個第二端、以及第一和第二表面，這種層析介質對于上述被分析物具有足夠的親和性，以把所述被分析物自含有該被分析物的含水溶液中固定到所述層析介質上；(ii)一個與上述層析介質的第一端可操作地接觸的涂藥器，該涂藥器以通過給涂藥器加入含水溶液而可以再溶解的形式含有對于上述被分析物的一種被標記的特異性結合對；(iii)一個與上述層析介質的第二端可操作地接觸的吸收體；(iv)一個鄰接上述層析介質的第一表面的、基本上不能滲透流體的屏障，且該屏障有一個孔，用于把液體施加給上述層析介質，所述屏障至少部分地阻擋把液體施加給上述層析介質；以及(b)一個包括一個樣品制備區(qū)域的第二可相對的組件；其中這樣成形所述第一和第二可相對的組件，使得把該第一和第二可相對的組件相對即導致上述樣品制備區(qū)域與所述屏障接觸，從而使在所述樣品制備區(qū)域中的上述樣品施加給上述層析介質，而且還使在上述檢測樣品中的被分析物至少在所述孔附近固定在上述層析介質上。
66.如權利要求65所述的測定裝置，其中可檢測的標記物是一種可目視檢測的標記物。
67.如權利要求65所述的測定裝置，其中所述層析介質是耐綸。
68.如權利要求65所述的測定裝置，其中抗原是脂多糖。
69.如權利要求65所述的測定裝置，其中所述樣品制備區(qū)域至少包含一種用于處理所述被分析物的試劑。
70.如權利要求65所述的測定裝置，其中可把所述第一和第二可相對的組件相對放置，從而使壓力便于把所述樣品穿過上述孔施加給所述層析介質。
71.一種用于檢測和/或確定在檢驗樣品中的被分析物的方法，包括下述步驟(a)把一種含水液體施加給權利要求65的測定裝置的涂藥器，以再溶解被標記的特異性結合對；(b)把該檢驗樣品施加給樣品制備區(qū)域；(c)使第一和第二可相對的組件相對，從而使上述檢驗樣品穿過屏障中的孔施加給層析介質；(d)使(i)被分析物至少在上述孔附近與所述層析介質結合，以及(ii)被再溶解的被標記的特異性結合對遷移穿過所述層析介質從上述第一端到上述第二端，從而使所述被標記的特異性結合對與結合到上述層析介質的所述被分析物反應；以及(e)通過觀察和/或測定結合到上述層析介質的所述被標記的特異性結合對來檢測和/或確定在上述檢驗樣品中的所述被分析物。
72.一種用于檢測和/或確定在檢驗樣品中的被分析物的測定裝置，包括(a)一個第一可相對的組件，該組件包括(i)一種層析介質，這種層析介質具有一個第一端、一個第二端、以及第一和第二表面，并在一個檢測區(qū)域中具有固定在其上的一種特異性結合對；(ii)一個與上述層析介質的第一端可操作地接觸的樣品制備區(qū)域；(iii)一個與上述層析介質的第二端可操作地接觸的第一吸收體；以及(iv)一個鄰接上述層析介質的第一表面的、基本上不能滲透流體的屏障，且該屏障有一個孔，用于把液體施加給上述層析介質，所述屏障至少部分地阻擋把液體施加給所述層析介質；以及(b)一個第二可相對的組件，該組件包括(i)一個涂藥器，該涂藥器以通過給涂藥器加入一種含水液體而可以再溶解的形式含有對于所述被分析物的一種被標記的特異性結合對，這樣定位該涂藥器，使得當把上述第一和第二可相對的組件相對時，所述涂藥器與上述屏障接觸，從而使上述被再溶解的被標記的特異性結合對穿過所述屏障中的孔施加給上述層析介質；和(iii)第二和第三吸收體，這樣定位所述第二和第三吸收體，使得當把所述第一和第二可相對的組件相對時，該第二吸收體和第三吸收體與上述層析介質的一些部分可操作地接觸，從而使該第二和第三吸收體從所述層析介質中去除流體。
73.如權利要求72所述的測定裝置，其中標記物是一種可目視檢測的標記物。
74.如權利要求72所述的測定裝置，其中所述樣品制備區(qū)域包含至少一種用于處理所述樣品的試劑。
75.如權利要求72所述的測定裝置，其中所述層析介質還包括一個固定到那里的被分析物或被分析物的類似物的對照區(qū)域，該對照區(qū)域的范圍不與上述檢測區(qū)域重疊，該檢測區(qū)域定位在上述孔和層析介質的第一端之間，而所述對照區(qū)域定位在上述孔和層析介質的第二端之間。
76.如權利要求72所述的測定裝置，其中可把所述第一和第二可相對的組件相對放置，從而使壓力便于把上述被再溶解的被標記的特異性結合對穿過所述孔施加給上述層析介質。
77.一種用于檢測和/或確定在檢驗樣品中的被分析物的檢驗試劑盒，該試劑盒在一些獨立的容器中包括(a)權利要求72的測定裝置；以及(b)一種用于在涂藥器中再溶解被標記的特異性結合對的含水液體。
78.一種用于檢測和/或確定在含水檢驗樣品中的被分析物的方法，包括(a)把所述樣品施加給權利要求72的測定裝置的樣品制備區(qū)域；(b)使上述樣品至少流動穿過包括所述檢測區(qū)域的層析介質的那個部分；(c)給涂藥器中加入一種含水液體，以再溶解對于上述被分析物的、被標記的特異性結合對；(d)使第一和第二可相對的組件相對，以穿過屏障中的孔給上述層析介質施加所述被標記的特異性結合對，并使第二和第三吸收體與所述層析介質可操作地接觸，由所述層析介質中抽取流體；(e)使上述被再溶解的被標記的特異性結合對至少流動穿過包括所述檢測區(qū)域的上述層析介質的那個部分，以便如果上述檢驗樣品中有被分析物的話，在上述檢測區(qū)域處形成包括被標記的特異性結合對的一種三元配合物；和(f)通過觀察和/或測定在上述檢測區(qū)域處所結合的所述被標記的特異性結合對來檢測和/或確定在上述檢驗樣品中的所述被分析物。
79.一種用于檢測和/或確定在含水檢驗樣品中的被分析物的方法，包括下述步驟(a)施加所述樣品給權利要求74的測定裝置的樣品制備區(qū)域；(b)在上述樣品制備區(qū)域中培養(yǎng)所述樣品，從而使至少一種用于處理該樣品的試劑可與所述樣品反應，以便產生一種被處理過的樣品；(c)使所述被處理過的樣品至少流動穿過包括所述檢測區(qū)域的上述層析介質的那個部分；(d)給涂藥器加入一種含水液體，以再溶解對于上述被分析物的所述被標記的特異性結合對；(e)使第一和第二可相對的組件相對，以便穿過所述屏障中的孔給上述層析介質施加所述被再溶解的被標記的特異性結合對，并使第二和第三吸收體與上述層析介質可操作地接觸，從而由所述層析介質中抽取流體；(f)使上述被再溶解的被標記的特異性結合對至少流動穿過包括上述檢測區(qū)域的所述層析介質的那個部分，以便如果在上述檢驗樣品中有被分析物的話，在上述檢測區(qū)域處形成包括所述被標記的特異性結合對的一種三元配合物；和(g)通過觀察和/或測定在上述檢測區(qū)域處所結合的所述被標記的特異性結合對來檢測和/或確定在上述檢驗樣品中的所述被分析物。
80.一種用于檢測和/或確定在檢驗樣品中的被分析物的測定裝置，包括(a)一個第一可相對的組件，該組件包括(i)一種層析介質，這種層析介質具有一個第一端、一個第二端、以及第一和第二表面，并且在一個檢測區(qū)域中具有對于固定在其上的上述被分析物的一種特異性結合對；(ii)一個與上述層析介質的第二端可操作地接觸的吸收體；(iii)一個與上述層析介質的第一端可操作地接觸的導體；(iv)一個共軛物區(qū)域，該共軛物區(qū)域以通過給共軛物區(qū)域加入一種含水液體而可以再溶解的形式含有對于用一種金溶膠標記的被分析物的一種特異性結合對，該共軛物區(qū)域直接與上述導體接觸并間接與上述層析介質的第一端接觸；(v)一個用于施加某種檢驗樣品的樣品制備區(qū)域，該樣品制備區(qū)域與上述共軛物區(qū)域直接接觸，所述導體、共軛物區(qū)域及樣品制備區(qū)域這樣定位，使得所述共軛物區(qū)域接通上述樣品制備區(qū)域和導體；以及(vi)一個鄰接上述層析介質的第一表面的、基本上不能滲透流體的屏障，該屏障有一個孔，用于給上述層析介質施加液體，所述屏障至少部分地阻擋把液體施加給上述層析介質；以及(b)一個第二可相對的組件，該組件包括(i)一個涂藥器，該涂藥器以通過給涂藥器加入一種含水液體而可以再溶解的形式含有(1)一種可溶解的銀鹽，及(2)一種還原劑，這樣定位上述涂藥器，使得當把上述第一和第二可相對的組分相對時，該涂藥器與所述屏障接觸，從而使上述被再溶解的銀鹽及所述還原劑穿過所述屏障中的孔施加給上述層析介質；以及(ii)第二和第三吸收體，這樣定位該第二和第三吸收體，使得當把上述第一和第二可相對的組件相對時，所述第二吸收體和第三吸收體與上述層析介質的一些部分可操作地接觸，從而使該第二和第三吸收體從所述層析介質中去除流體。
81.如權利要求80所述的測定裝置，其中所述樣品制備區(qū)域至少含有一種用于處理樣品的試劑。
82.如權利要求80所述的測定裝置，其中所述可溶解的銀鹽是乳酸銀，而所述還原劑是一種醌。
83.如權利要求80所述的測定裝置，其中可把所述第一和第二可相對的組件相對放置，從而使壓力便于把上述被再溶解的銀鹽和上述還原劑穿過所述孔施加給上述層析介質。
84.一種用于檢測和/或確定在含水檢驗樣品中的被分析物的方法，包括下述步驟(a)把所述樣品施加給權利要求80的測定裝置的樣品制備區(qū)域；(b)使所述樣品穿過共軛物區(qū)域流動，以再溶解在該共軛區(qū)域中的被標記的特異性結合對；(c)使上述樣品和被再溶解的被標記的特異性結合對流動穿過所述導體進入層析介質，并至少流動穿過包括檢測區(qū)域的所述層析介質的一部分；(d)給涂藥器加入一種含水液體，以再溶解可溶解的銀鹽和還原劑；(e)使第一和第二可相對的組件相對，以便穿過屏障中的孔把被再溶解的銀鹽及所述還原劑施加給上述層析介質，并能使第二和第三吸收體與所述層析介質可操作地接觸，以便從所述層析介質中抽取流體；(f)使上述被再溶解的銀鹽和所述還原劑至少流動穿過包括檢測區(qū)域的所述層析介質的那個部分，從而使銀圍繞著在上述檢測區(qū)域處所結合的被標記的特異性結合對的金標記物中的金而沉積，以增強由所述標記物產生的信號；以及(g)通過觀察和/或測定在所述檢測區(qū)域處所結合的上述被標記的特異性結合對來檢測和/或確定在上述檢驗樣品中的所述被分析物。
85.一種用于檢測和/或確定在含水檢驗樣品中的一種被分析物的方法，包括(a)把所述樣品施加給權利要求81的測定裝置的樣品制備區(qū)域；(b)培養(yǎng)所述樣品制備區(qū)域中的上述樣品，從而使至少一種用于處理所述樣品的試劑與該樣品反應，以產生一種被處理過的樣品；(c)使上述被處理過的樣品流動穿過共軛物區(qū)域，以再溶解在該共軛物區(qū)域中的被標記的特異性結合對；(d)使上述被處理過的樣品和所述被再溶解的被標記的特異性結合對穿過導體進入層析介質，并至少流動穿過包括檢測區(qū)域的所述層析介質的那個部分；(e)給涂藥器加入一種含水液體，以再溶解可溶解的銀鹽和還原劑；(f)使第一和第二可相對的組件相對，以穿過屏障中的孔把上述被再溶解的銀鹽以及所述還原劑施加給上述層析介質，并使第二和第三吸收體與所述層析介質可操作地接觸，以從所述層析介質中抽取流體；(g)使上述被再溶解的銀鹽和還原劑至少流動穿過包括上述檢測區(qū)域的所述層析介質的那個部分，從而使銀圍繞在上述檢測區(qū)域處所結合的上述被標記的特異性結合對的金標記物中的金而沉積，以增強該標記物所產生的信號；以及(h)通過觀察和/或測定在上述檢測區(qū)域處所結合的所述被標記的特異性結合對來檢測和/或確定在上述檢驗樣品中的所述被分析物。
86.一種用于檢測和/或確定在檢驗樣品中的被分析物的測定裝置，包括(a)一個第一可相對的組件，該組件包括(i)一種層析介質，這種層析介質具有一個第一端、一個第二端、以及第一和第二表面，并且在一個檢測區(qū)域中具有對于固定在其上的所述被分析物的一種特異性結合對；(ii)一個與上述層析介質的第二端可操作地接觸的吸收體；(iii)一個與上述層析介質的第一端可操作地接觸的導體；(iv)一個共軛物區(qū)域，這個共軛物區(qū)域以通過給共軛物區(qū)域加入一種含水液體而可以再溶解的形式含有對于用一種金溶膠標記的上述被分析物的一種特異性結合對，該共軛物區(qū)域直接與上述導體接觸，并間接地與上述層析介質的第一端接觸；(v)一個用于施加某種檢驗樣品的樣品制備區(qū)域，該樣品制備區(qū)域直接與上述共軛物區(qū)域接觸，所述導體、共軛物區(qū)域及樣品制備區(qū)域這樣定位，使得所述共軛物區(qū)域接通上述樣品制備區(qū)域和導體；以及(vi)一個鄰接上述層析介質的第一表面的、基本上不能滲透流體的屏障，該屏障有一個孔，用于把液體施加給所述層析介質，所述屏障至少部分地阻擋把液體施加給上述層析介質；以及(b)一個第二可相對的組件，該組件包括(i)一個涂藥器，這個涂藥器包括兩個區(qū)段(A)一個用于容納含水液體的第一區(qū)段；和(B)一個第二區(qū)段，這個第二區(qū)段以通過給所述涂藥器的第二部分加入含水液體而可以再溶解的形式含有(1)一種可溶解的銀鹽，及(2)一種還原劑，這樣定位上述涂藥器，使得當把所述第一和第二可相對的組件相對時，上述涂藥器的第一區(qū)段與所述屏障中的孔直接接觸，而上述涂藥器的第二區(qū)段與所述孔間接接觸，從而使上述含水液體首先施加到所述層析介質，以便提供清洗，隨后，把上述含水的銀鹽和還原劑施加給所述層析介質；以及(ii)第二和第三吸收體，這樣定位該第二和第三吸收體，使得當把上述第一和第二可相對的組件相對時，該第二吸收體與在上述屏障和所述層析介質的第一端之間的所述層析介質的一部分可操作接觸，而該第三吸收體與在上述屏障和所述層析介質的第二端之間的所述層析介質的一部分可操作地接觸，從而使上述第二和第三吸收體從所述層析介質中去除流體。
87.如權利要求86所述的測定裝置，其中所述樣品制備區(qū)域至少包含一種用于處理所述樣品的試劑。
88.如權利要求86所述的測定裝置，其中所述可溶解的銀鹽是乳酸銀，而所述還原劑是一種醌。
89.如權利要求86所述的測定裝置，其中可把所述第一和第二可相對的組件相對放置，從而使壓力便于把液體穿過上述孔施加給上述層析介質。
90.一種用于檢測和/或確定在檢驗樣品中的被分析物的方法，包括下述步驟(a)把所述樣品施加給權利要求86的測定裝置的樣品制備區(qū)域；(b)使上述樣品流動穿過共軛物區(qū)域，以再溶解在該共軛區(qū)域中的被標記的特異性結合對；(c)使上述樣品和被再溶解的被標記的特異性結合對穿過導體進入層析介質，并且至少流動穿過包括檢測區(qū)域的所述層析介質的一部分；(d)給涂藥器的第一和第二區(qū)段加入一種含水液體，以便在該涂藥器的第二區(qū)段中再溶解可溶解的銀鹽和還原劑；(e)使第一和第二可相對的組件相對，以把在上述涂藥器的第一區(qū)段中的含水液體作為一種洗滌劑通過孔施加給上述層析介質，隨后把上述被再溶解的銀鹽和所述還原劑施加給所述層析介質，并且使第二和第三吸收體與所述層析介質可操作地接觸，以從所述層析介質中抽取流體；(f)使上述被再溶解的銀鹽和還原劑至少流動穿過包括檢測區(qū)域的所述層析介質的那個部分，從而使銀圍繞在所述檢測區(qū)域處所結合的上述被標記的特異性結合對的金標記物中的金而沉積，以增強由該標記物所產生的信號；和(g)通過觀察和/或測定在上述檢測區(qū)域所結合的所述被標記的特異性結合對來檢測和/或確定在上述檢驗樣品中的所述被分析物。
91.一種用于檢測和/或確定在含水檢驗樣品中的被分析物的方法，包括(a)施加所述樣品給權利要求87的測定裝置的樣品制備區(qū)域；(b)在該樣品制備區(qū)域中培養(yǎng)所述樣品，從而使至少一種用于處理所述樣品的試劑與該樣品反應，以便產生一種被處理過的樣品；(c)使所述被處理過的樣品流動穿過共軛物區(qū)域，以再溶解在該共軛物區(qū)域中的被標記的特異性結合對；(d)使所述被處理過的樣品和被再溶解的被標記的特異性結合對穿過導體進入層析介質，并且至少流動穿過包括上述檢測區(qū)域的所述層析介質的那個部分；(e)給涂藥器的第一和第二區(qū)段加入一種含水液體，以便在該涂藥器的第二區(qū)段中再溶解可溶解的銀鹽和還原劑；(f)使第一和第二可相對的組件相對，以把在上述涂藥器的第一區(qū)段中的所述含水液體穿過所述孔作為一種洗滌劑施加給所述層析介質，隨后把所述被再溶解的銀鹽和所述還原劑施加給上述層析介質，并使第二和第三吸收體與所述層析介質可操作地接觸，以便從所述層析介質中抽取流體；(g)使所述被再溶解的銀鹽和還原劑至少流動穿過包括上述檢測區(qū)域的所述層析介質的那個部分，從而使銀圍繞在所述檢測區(qū)域處所結合的上述被標記的特異性結合對的金標記物中的金而沉積，以增強由該標記物所產生的信號；和(h)通過觀察和/或測定在上述檢測區(qū)域處所結合的所述被標記的特異性結合對來檢測和/或確定在上述檢驗樣品中的所述被分析物。
92.一種用于檢測和/或確定在檢驗樣品中的被分析物的測定裝置，包括(a)一個基板，此基板包括(i)一個第一可相對的組件，該組件包括(A)一種層析介質，這種層析介質具有一個第一端、一個第二端、以及第一和第二表面，且在一個檢測區(qū)域中具有對于固定在其上的上述被分析物的一種特異性結合對；(B)一個共軛物區(qū)域，這個共軛物區(qū)域以通過給共軛物區(qū)域加入一種含水液體而可以再溶解的形式含有對于用一種金溶膠標記的上述被分析物的一種特異性結合對，該共軛物區(qū)域與上述層析介質的第一端可操作地接觸；(C)一個與上述共軛物區(qū)域可操作地接觸的導體，該共軛物區(qū)域接通上述層析介質的第一端和所述導體；以及(D)一個鄰接上述層析介質的第一表面的、基本上不能滲透流體的屏障，該屏障有一個孔，用于給上述層析介質施加流體，所述屏障至少部分地阻擋把液體施加給所述層析介質；(ii)一個第二可相對的組件，該組件包括(A)一個用于含有檢驗樣品的拭子的插座；(B)一個用于給所述拭子加至少一種試劑的井；和(C)一個與上述插座和井分開的第一吸收體；和(iii)一個第二插座，此第二插座用于使插入件穩(wěn)定，避免插入件的那些表面的相對運動以及上述第一和第二可相對的組件的相對運動；這樣成形上述基板的第一和第二可相對的組件，使得當把它們相對時，使上述第一吸收體與所述層析介質的一部分接觸，并使上述插座與所述導體接觸；以及(b)一個插入件，包括(i)一個涂藥器，此涂藥器以通過給涂藥器加入一種含水液體而可以再溶解的形式含有(1)一種可溶解的銀鹽，和(2)一種還原劑；(ii)一個第二吸收體；(iii)一個第三吸收體；以及(iv)一個用于插入上述基板的第二插座的凸出物；這樣成形所述插入件，使得當所述凸出物插入上述基板的第二插座中時，所述涂藥器與上述孔可操作地接觸，以使穿過所述孔把該涂藥器的所含之物施加給上述層析介質，而上述第二和第三吸收體每一個都與所述層析介質的一部分可操作地接觸，以便從所述層析介質中抽取流體。
93.如權利要求92所述的測定裝置，其中上述可溶解的銀鹽是乳酸銀，而所述還原劑是一種醌。
94.如權利要求92所述的測定裝置，其中可把所述第一和第二可相對的組件相對放置，以使壓力便于把所述液體穿過上述孔施加給所述層析介質。
95.一種用于檢測和/或確定在含水檢驗樣品中的被分析物的方法，包括下述步驟(a)把一個含有檢驗樣品的拭子放入權利要求92的測定裝置的第一插座中；(b)把至少一種萃取試劑施加給所述井，以便從上述拭子中萃取被分析物；(c)使第一和第二可相對的組件相對，從而使上述在插座中的拭子與導體接觸，以便用該導體施加被萃取過的被分析物，并且以便第一吸收體與層析介質的一部分接觸；(d)使被萃取過的樣品流動穿過共軛物區(qū)域，以再溶解在該共軛物區(qū)域中的被標記的特異性結合對；(e)使所述被萃取過的樣品和被再溶解的被標記的特異性結合對進入上述層析介質，并至少流動穿過包括檢測區(qū)域的所述層析介質的那個部分；(f)給插入件的涂藥器加入一種含水液體，以再溶解可溶解的銀鹽和還原劑；(g)把插入件的凸出物插入基板的第二插座，并定位該插入件，使上述涂藥器與屏障中的孔接觸，以便把該涂藥器的所含之物穿過所述孔施加給上述層析介質，并且使第二和第三吸收體與所述層析介質接觸，以從所述層析介質中抽取流體；(h)使上述被再溶解的銀鹽和還原劑至少流動穿過包括檢測區(qū)域的上述層析介質的那個部分，從而使銀圍繞在所述檢測區(qū)域處所結合的所述被標記的特異性結合對的金標記物中的金而沉積，以增強由該標記物所產生的信號；以及(i)通過觀察和/或測定在上述檢測區(qū)域處所結合的上述被標記的特異性結合對來檢測和/或確定在上述檢驗樣品中的所述被分析物。
96.一種用于檢測和/或確定在檢驗樣品中的被分析物的測定裝置，包括(a)一個基板，此基板包括(i)一個第一可相對的組件，該組件包括(A)一種層析介質，這種層析介質有一個第一端、一個第二端、以及第一和第二表面，并且在一個檢測區(qū)域中具有對于固定在其上的所述被分析物的一種特異性結合對，該檢測區(qū)域實際上比所述層析介質的面積小；(B)一個與上述層析介質的第一端可操作地接觸的導體；(C)一個鄰接上述層析介質的第一表面的、基本上不能滲透流體的屏障，該屏障有一個孔，用于把液體施加給上述層析介質，所述屏障至少部分地阻擋把液體施加給所述層析介質；(ii)一個第二可相對的組件，此組件包括一個第一吸收體，這樣成形所述第一和第二可相對的組件，使得當把它們相對時，使上述第一吸收體與所述層析介質的一部分可操作地接觸，和(iii)一個插座，此插座用于保持插入件穩(wěn)定，避免插入件的那些表面的相對運動以及上述第一和第二可相對的組件的相對運動；以及(b)一個插入件，此插入件包括(i)一個涂藥器，此涂藥器以通過給涂藥器加入一種含水液體而可以再溶解的形式含有一種用于某種酶標記物的底物，這種酶標記物與對于上述被分析物的一種特異性結合對結合，該酶標記物通過催化一種涉及所述底物的反應來產生一種不溶解的、可檢測的產物；(ii)一個第二吸收體；(iii)一個第三吸收體；以及(iv)一個用于插入上述基板的插座的凸出物；這樣成形所述插入件，使得當上述凸出物插入所述基板的插座中時，上述涂藥器與所述孔可操作地接觸，以便穿過所述孔把該涂藥器的所含之物施加給上述層析介質，而上述第二和第三吸收體每一個都與所述層析介質的一部分可操作地接觸，以便從所述層析介質中抽取流體。
97.如權利要求96所述的測定裝置，其中可把所述第一和第二可相對的組件相對放置，從而使壓力便于把所述涂藥器的所含之物穿過所述孔施加給上述層析介質。
98.一種用于檢測和/或確定在檢驗樣品中的被分析物的方法，包括下述步驟(a)向某種含水檢驗樣品加入對于所述被分析物的一種被標記的特異性結合對，該被標記的特異性結合對的標記物是一種催化產生一種不溶解的可檢測的產物的反應的酶，以便形成一種樣品——標記物溶液；(b)把所述樣品——標記物溶液施加給權利要求96的測定裝置的導體；(c)使第一和第二可相對的組件相對，以便使第一吸收體與層析介質的一部分可操作地接觸；(d)使上述樣品——標記物溶液進入上述層析介質，并至少流動穿過包括檢測區(qū)域的所述層析介質的那個部分；(e)給插入件的涂藥器加入一種含水液體，以再溶解底物；(f)把所述插入件的凸出物插入基板的插座，并定位該插入件，從而能使上述涂藥器與所述孔和屏障接觸，以便把該涂藥器的所含之物穿過所述孔施加給所述層析介質，并能使第二和第三吸收體放置得與所述層析介質接觸，以從所述層析介質中抽取流體；(g)使上述被再溶解的底物至少流動穿過上述包括檢測區(qū)域的層析介質的那個部分，從而使酶標記物的酶催化一種反應，這種反應涉及上述底物并沉積一種不溶解的產物作為上述標記物的一個信號；以及(h)通過觀察和/或測定在基于上述作為一種信號而被沉積的不溶解的產物的所述檢測區(qū)域處所結合的所述被標記的特異性結合對，檢測和/或確定在上述檢驗樣品中的所述被分析物。
99.一種用于檢測和/或確定在檢驗樣品中的被分析物的測定裝置，包括(a)一個基板，此基板包括(i)一個第一可相對的組件，該組件包括(A)一種層析介質，這種層析介質具有一個第一端、一個第二端、以及第一和第二表面，并具有對于固定在其上的所述被分析物的一種特異性結合對；(B)一個共軛物區(qū)域，這個共軛物區(qū)域以通過給共軛物區(qū)域加入一種含水流體而可以再溶解的形式包含對于用一種酶標記的上述被分析物的一種特異性結合對，該共軛物區(qū)域與上述層析介質的第一端可操作地接觸；(C)一個與上述共軛物區(qū)域可操作地接觸的導體；該共軛物區(qū)域接通上述層析介質的第一端和所述導體；以及(D)一個鄰接上述層析介質的第一表面的、基本上不能滲透流體的屏障，該屏障有一個孔，用于給上述層析介質施加液體，所述屏障至少部分地阻擋把液體施加給所述層析介質；(ii)一個第二可相對的組件，此組件包括(A)一個用于含有檢驗品的一個拭子的第一插座；(B)一個用于給所述拭子加入至少一種萃取試劑的井；以及(C)一個與上述井和所述插座分開的第一吸收體；以及(iii)一個用于使插入件穩(wěn)定，避免插入件的那些表面的相對運動以及所述第一和第二可相對的組件的相對運動的第二插座；這樣成形所述第一和第二可相對的組件，使得當把它們相對時，使得上述第一吸收體與所述層析介質的一部分接觸，并使得上述插座與所述導體接觸；以及(b)一個插入件，此插入件包括(i)一個涂藥器，這個涂藥器以通過給涂藥器加入一種含水液體而可以再溶解的形式含有用于一種酶標記物的底物，這種酶標記物與對于上述被分析物的一種特異性結合對結合，所述酶標記物通過催化涉及上述底物的一種反應來產生一種不溶解的可檢測的產物；(ii)一個第二吸收體；(iii)一個第三吸收體；以及(iv)一個用于插入上述基板的第二插座的凸出物；這樣成形所述凸出物，使得當該凸出物插入上述基板的第二插座中時，上述涂藥器與上述孔可操作地接觸，以把該涂藥器所含之物穿過所述孔施加給上述層析介質，且上述第二和第三吸收體的每一個都與上述層析介質的一部分可操作地接觸，以便從所述層析介質中抽取流體。
100.如權利要求99所述的測定裝置，其中可把所述第一和第二可相對的組件相對放置，從而使壓力便于把所述涂藥器的所含之物穿過上述孔施加給所述層析介質。
101.一種用于檢測和/或確定在檢驗樣品中的被分析物的方法，包括下述步驟(a)把一個含有檢驗樣品的拭子放入權利要求99的測定裝置的第一插座中；(b)給所述井施加至少一種萃取試劑，以便從所述拭子中萃取被分析物；(c)使第一和第二可相對的組件相對，從而使上述在第一插座中的拭子與導體接觸，以使所述被萃取過的被分析物施加給所述導體，且使第一吸收體與所述層析介質的一部分接觸；(d)使得被萃取過的樣品流動穿過共軛物區(qū)域，以再溶解在該共軛物區(qū)域中的被標記的特異性結合對；(e)使得所述被萃取過的樣品及被再溶解的被標記的特異性結合對進入所述層析介質，并至少流動穿過包括檢測區(qū)域的所述層析介質的那個部分；(f)給插入件的涂藥器加入一種含水液體，以再溶解底物；(g)把所述插入件的凸出物插入基板的第二插座并定位該插入件，從而使上述涂藥器與所述孔和屏障接觸，以把該涂藥器的所含之物穿過所述孔施加給上述層析介質，并能使第二和第三吸收體與所述層析介質接觸，以從所述層析介質中抽取流體；(h)使上述被再溶解的底物至少流動穿過包括檢測區(qū)域的上述層析介質的一部分，從而使酶標記物的酶催化一種反應，這種反應涉及所述底物，并沉積一種不溶解的產物，這種不溶解的產物是所述標記物的一種信號；以及(i)通過借助作為一種信號而沉積的上述不溶解的產物，觀察和/或測定在上述檢測區(qū)域處所結合的所述被標記的特異性結合對，檢測和/或確定在上述檢驗樣品中的所述被分析物。
102.一種用于檢測和/或確定在檢驗樣品中的被分析物的測定裝置，包括(a)一個第一可相對的組件，該組件包括(i)一種層析介質，這種層析介質具有一個第一端、一個第二端、以及第一和第二表面；并具有對于固定在其上的上述被分析物的一種特異性結合對；(ii)至少一個與上述層析介質的那些端子中的一個可操作地接觸的吸收體；(iii)一個鄰接上述層析介質的第一表面的、基本上不能滲透流體的第一屏障，且有一個第一孔貫穿所述屏障，用于把液體施加給所述層析介質；(iv)一個鄰接上述基本上不能滲透流體的第一屏障的分配膜，以把流體引導到在所述基本上不能滲透流體的第一屏障中的所述第一孔；(v)一個鄰接上述分配膜的中央部分的、基本上不能滲透流體的第二屏障；(vi)一個涂藥器，這個涂藥器以可以再溶解的形式含有對于所述被分析物的一種被標記的特異性結合對并鄰接上述分配膜定位，從而使流體可從上述涂藥器圍繞所述第二屏障流動到上述分配膜的這樣一個部分，所述基本上不能滲透流體的第二屏障并不直接鄰接所述分配膜的那個部分；以及(vii)一個表面屏障，有一個第二孔貫穿這個表面屏障，用于把液體施加給上述涂藥器；以及(b)一個第二可相對的組件，這個組件包括一個用于含有某種檢驗樣品的拭子的插座。
103.如權利要求102所述的測定裝置，其中所述被標記的特異性結合對的標記物是一種可目視檢測的標記物。
104.如權利要求102所述的測定裝置，其中可把所述第一和第二可相對的組件相對放置，從而使壓力便于把液體穿過所述孔施加給所述層析介質。
105.一種用于檢測和/或確定在檢驗樣品中的被分析物的檢驗試劑盒，此試劑盒在一些獨立的容器中包括(a)權利要求104的測定裝置；以及(b)至少一種用于從所述拭子中萃取被分析物的試劑。
106.一種用于檢測和/或確定在檢驗樣品中的被分析物的方法，包括下述步驟(a)把一個含有檢驗樣品的拭子放入權利要求104的測定裝置的插座中；(b)給在上述插座中的拭子施加至少一種萃取試劑，以便從所述拭子中萃取被分析物；(c)使第一和第二可相對的組件相對，以將上述被萃取過的被分析物施加到上述表面屏障中的所述第二孔，且然后在繞過所述第二屏障通過分配膜后施加給涂藥器和層析介質，由此再溶解在所述涂藥器中的被標記的特異性結合對；(d)使所述樣品和被再溶解的被標記的對于所述被分析物的特異性結合對至少流動穿過包括所述檢測區(qū)域的上述層析介質的那個部分；以及(e)通過觀察和/或測定在所述檢測區(qū)域處所結合的被標記的檢測試劑來檢測和/或確定在上述檢驗樣品中的所述被分析物。
全文摘要
一種用于檢測和/或確定在某種檢驗樣品中的一種被分析物的測定裝置，采用了包含一個孔的屏障，以便控制將試劑施加給該裝置的過程，以達到更好的結果再現性。最簡單形式的這種裝置包括(1)一種層析介質(12)，層析介質(12)具有一個第一端(14)，一個第二端(16)、以及第一和第二表面(18和20)，并在一個檢測區(qū)域中具有對于固定到那里的所述被分析物的一種特異性結合對(2)；至少一個與第一端(14)和第二端(16)中的至少一個有效接觸的吸收體(26)，以及(3)一個鄰接所述層析介質的第一表面的、基本上不能滲透流體的屏障(30)，屏障(30)至少有一個孔(32)貫穿其中，用于把液體施加給層析介質(12)，屏障(30)至少部分阻擋液體施加給層析介質(12)。所述裝置適于夾層或競爭性測定，并可用來進行放大了的測定，例如，那些采用銀放大或酶放大的測定?？梢詫λ鲅b置內的那些組件進行各種各樣的配置，并可加入諸如過濾用多孔物質那樣的一些組件。
文檔編號B01L3/00GK1142868SQ94194972
公開日1997年2月12日 申請日期1994年12月6日 優(yōu)先權日1993年12月7日
發(fā)明者H·M·昌德勒 申請人:史密絲克萊恩診斷公司