專(zhuān)利名稱(chēng)：食品中亞硝酸鹽和硝酸鹽的定量檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種食品中亞硝酸鹽和硝酸鹽的定量檢測(cè)方法，屬于食品的一種檢驗(yàn)方法。
背景技術(shù)：
亞硝酸鹽和硝酸鹽屬于食品的一種發(fā)色劑，食品在加工生產(chǎn)過(guò)程中，食品中的硝酸鹽被腸道中的細(xì)菌還原成亞硝酸鹽，當(dāng)在人體中的攝入量過(guò)多時(shí)，使血液中二價(jià)鐵的紅血蛋白變成三價(jià)鐵的血紅蛋白，使人體失去攜氧功能而窒息，同時(shí)亞硝酸鹽還能與胺類(lèi)化合物形成亞硝胺，具有強(qiáng)烈的致癌作用。在食品檢測(cè)中將亞硝酸鹽和硝酸鹽列為強(qiáng)制檢驗(yàn)項(xiàng)目。其次，在我國(guó)部分地區(qū)，由于水質(zhì)的原因，水中的亞硝酸鹽和硝酸鹽含量較高，當(dāng)?shù)厝藗兊纳眢w健康狀況受到影響，因此，進(jìn)行食品中亞硝酸鹽和硝酸鹽的檢驗(yàn)已成為質(zhì)量安全保證的關(guān)注要點(diǎn)。
目前在食品中硝酸鹽和亞硝酸鹽檢測(cè)的方法有很多種，如定性的液體試劑法和固體試劑法；定量的試劑盒法、極譜法、色譜法、分光光度法等。但每種方法的適用性不同，色譜、分光光度法、極譜法需要配備貴重的檢測(cè)設(shè)備，試劑盒法屬于快速法耗材費(fèi)用較高，不同的檢測(cè)方法適用范圍有限，方法之間交叉太大，尋求一種既經(jīng)濟(jì)且準(zhǔn)確性高的方法非常有必要。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種實(shí)用性廣泛，可以檢測(cè)不同種類(lèi)食品中的亞硝酸鹽和硝酸鹽的方法，本發(fā)明的方法不僅節(jié)約時(shí)間，且節(jié)約成本，同時(shí)提高工作效率和檢驗(yàn)結(jié)果，是一種準(zhǔn)確性高的食品中亞硝酸鹽和硝酸鹽的定量檢測(cè)方法。
本發(fā)明的檢測(cè)原理為將樣品用亞鐵氰化鉀和乙酸鋅沉淀蛋白去脂肪，搖勻，過(guò)濾，分別取等體積的濾液，一份濾液在酸性條件下加磺胺和萘乙二胺鹽酸鹽，在波長(zhǎng)538nm處測(cè)量，測(cè)定樣品中本身含有的亞硝酸根(NO2-)，通過(guò)換算計(jì)算出樣品中的亞硝酸鹽；另一份濾液通過(guò)鎘柱，使濾液中的硝酸根離子(NO3-)還原為亞硝酸離子(NO2-)，然后同上進(jìn)行顯色，測(cè)量樣品中原有的亞硝酸離子(NO2-)和硝酸離子(NO3-)還原生成的亞硝酸離子(NO2-)的總量，由二者之差計(jì)算硝酸離子(NO3-)含量，進(jìn)而計(jì)算出樣品中的硝酸鹽含量。
在本發(fā)明的檢測(cè)方法中，所用試劑除注明者外，均為分析純，水為去離子水，不含亞硝酸鹽及硝酸鹽；飽和硼砂溶液0.25mol/L(即106±0.1g/L)亞鐵氰化鉀溶液，1mol/L(即220±0.1g/L)乙酸鋅溶液。
在本發(fā)明的檢測(cè)方法中，所用的顯色溶液溶液I2g/L的磺胺溶液；溶液II1g/L萘乙二胺鹽酸鹽溶液，避光貯存，冰箱保存；溶液III鹽酸水溶液，其中鹽酸∶水為445∶555(體積比)。
在本發(fā)明的檢測(cè)方法中，使用的鹽酸-氨水緩沖溶液為pH 9.60～9.70(其產(chǎn)生的作用，除控制溶液的pH外，還可緩解鎘對(duì)亞硝酸根的還原)，用精密的pH計(jì)調(diào)PH值為9.60～9.70；所使用的EDTA溶液為335g/L的二水乙二胺四乙酸二鈉(Na2C10H14N2O32H2O)。
在本發(fā)明的檢測(cè)方法中，使用的儀器設(shè)備為分析天平感量0.001g、0.0001g；電熱恒溫水浴鍋溫度可調(diào)；刮勺末端用聚四氯乙烯包裹；高速組織搗碎機(jī)1000-12000r/min；分光光度計(jì)；濾紙無(wú)亞硝酸離子(NO2-)。
在本發(fā)明的檢測(cè)方法中，請(qǐng)?zhí)貏e注意對(duì)于顏色較深的樣品，須經(jīng)過(guò)脫色處理，否則樣品本身的顏色影響吸光度的測(cè)定；由于鎘是有害元素，在處理鎘粒時(shí)，不要用手直接接觸(處理時(shí)，可以帶上橡膠手套等，可以采用鑷子等工具夾取)，同時(shí)注意不要弄到皮膚上，一旦接觸立即用大量清水沖洗。
在本發(fā)明的檢測(cè)方法中，其中沒(méi)有特定提及的物質(zhì)濃度、所使用物質(zhì)的體積、容器的體積、所使用的儀器、所使用的時(shí)間等一些參數(shù)，都是本領(lǐng)域所熟知的，或者屬于本領(lǐng)域技術(shù)人員按照常規(guī)知識(shí)可確定的。
本發(fā)明的技術(shù)方案包括如下步驟1.樣品的制備根據(jù)種類(lèi)不同，在制備樣品時(shí)略有不同，基本原則都是無(wú)論哪種種類(lèi)，都是將待測(cè)樣品用搗碎機(jī)充分搗碎混勻來(lái)制備的1.1.新鮮果蔬先將新鮮水果、蔬菜洗凈，涼(就是將水自然瀝干)去表面水分，用四分法取可食部分，切碎，按比例加入一定量水(蕃茄、桔子等多汁樣品可不加水)，用高速搗碎機(jī)制成均漿，但在稱(chēng)試樣時(shí)應(yīng)扣除水量。加水量的比例一般為切碎所得物質(zhì)重量的1倍或兩倍重量，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以很容易地按照常規(guī)技術(shù)確定加水量。
1.4.冷凍罐頭及醬制品罐頭及醬制品應(yīng)全部倒出，制成均漿備用。冷凍制品應(yīng)先在密閉容器中解凍，混勻，分取一部分備用。
1.5.添加果料制品(如果粒酸奶、橙汁等)將待測(cè)樣品用搗碎機(jī)充分搗碎混勻，備用。
1.4.乳粉及嬰幼兒食品取有代表性樣品將其混勻，備用其中代表性樣品是指所取樣品能夠代表整體待測(cè)樣品的特性及均勻性和樣品的一致性，在檢測(cè)中我們是取小部分檢測(cè)，用其結(jié)果代表整批樣品，所以取樣要有代表性，這是通常取樣的一般性要求。
2.樣品的分析2.1.制備無(wú)色清亮濾液按照試樣中亞硝酸鹽和硝酸鹽含量的大小，準(zhǔn)確稱(chēng)取制備的樣品(均漿的)10-30g(精確到0.0001g)放入燒杯中，加入5±0.1mL飽和硼砂溶液和100±1mL(70-80℃)熱水；置沸水浴中加熱15min～20min，并用磁力攪拌器連續(xù)攪拌。取出后冷卻到室溫，再加入10±0.1mL亞鐵氰化鉀溶液，10±0.1mL乙酸鋅溶液和脫色劑，每次加入后均充分搖勻。然后定量轉(zhuǎn)入容量瓶中，用水定容。用濾紙過(guò)濾，得到無(wú)色清亮濾液。
2.2.亞硝酸鹽含量的測(cè)定用移液管吸取一定量上述無(wú)色清亮濾液置于適量容積的容量瓶中，用約三倍的水稀釋。加入適量的溶液III和適量的溶液I混勻，置于室溫下避光處，再加入適量的溶液II，混勻，5～10min后用水定容，于15min～20min內(nèi)，在分光光度計(jì)上，用1cm光徑吸收池，以零管調(diào)零，于波長(zhǎng)538nm測(cè)其吸光度。通過(guò)亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)求出樣品的濃度。同時(shí)做空白試驗(yàn)，即不加樣品，其它步驟同樣品檢測(cè)一致。
在該亞硝酸鹽含量測(cè)定中，優(yōu)選地，無(wú)色清亮濾液∶稀釋用水∶溶液III∶溶液I∶溶液II的體積比為20∶60∶6∶5∶2。
2.3.硝酸鹽含量的測(cè)定2.3.1將無(wú)色清亮的濾液用過(guò)鎘柱還原用移液管吸取一定量的無(wú)色清亮濾液置于適量容積的容量瓶中，加氨緩沖液，倒入鎘柱頂部的貯液杯中，以小于6mL/min的流速過(guò)柱。洗提液(過(guò)柱后的液體)接入容量瓶中。
當(dāng)貯液杯快要排空時(shí)，用水沖洗小燒杯，再倒入貯液杯中。沖洗水流完后，再用水重復(fù)一次。當(dāng)?shù)诙螞_洗水快流完時(shí)，將貯液杯裝滿(mǎn)水，以最大流速(即為將硝酸鹽還原裝置中的止水夾開(kāi)關(guān)打到最大)過(guò)柱，得到洗提液。
當(dāng)容量瓶中的洗提液接近容量瓶容積時(shí)，取出容量瓶，用水定容，混勻。同時(shí)作空白實(shí)驗(yàn)，(即用實(shí)驗(yàn)用水代替無(wú)色清涼濾液，加氨緩溶液進(jìn)行過(guò)柱，得到空白的洗提液)。
在該步驟中，無(wú)色清亮濾液∶氨緩沖液一般為20∶5，但氨緩溶液可多加，直到與濾液混合后，澄清為止。
2.3.2測(cè)定移取一定量的洗提液加入于適量容量瓶中，加入適量的溶液III和適量的溶液I混勻，置于室溫下避光處，再加入適量的溶液II，混勻，5～10min后用水定容，于15～20min內(nèi)，在分光光度計(jì)上測(cè)定，通過(guò)亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)求出樣品的濃度。同時(shí)做空白試驗(yàn)，即從得到的空白的洗提液中吸取一定量的體積進(jìn)行顯色，進(jìn)行空白測(cè)試。
在該步測(cè)定中，優(yōu)選地，洗提液∶溶液III∶溶液I∶溶液II的體積比為20∶6∶5∶2。
3.計(jì)算亞硝酸鹽的含量和硝酸鹽含量3.1亞硝酸鹽的含量3.1.1樣品中 C1-無(wú)色清亮濾液的吸光度，通過(guò)亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的回歸方程計(jì)算出的NO2-的濃度，μg/mL；
m-樣品的質(zhì)量，g；V1-所取無(wú)色清亮濾液的體積，mL；3.1.2.樣品中以亞硝酸鈉表示亞硝酸鹽含量W(NaNO2)＝1.5×W(NO2-)---------------------------(2)式中W(NO2-)-樣品中亞硝酸根的含量，mg/kg；W(NaNO2)-樣品中以亞硝酸鈉表示的亞硝酸鹽的含量，mg/kg；上述兩種計(jì)算公式中，測(cè)定結(jié)果應(yīng)準(zhǔn)確至0.1mg/kg。
3.2.硝酸鹽含量3.2.1樣品中 式中C2-洗提液的吸光度，通過(guò)回歸方程計(jì)算出的亞硝酸根離子的濃度，μg/ml；m-樣品的質(zhì)量，g；V2-所取洗提液的體積，mL；W(NO2-)-根據(jù)式(1)計(jì)算出的亞硝酸根含量；若不考慮柱的還原能力，則可認(rèn)為r＝100。
3.2.2樣品中以硝酸鈉表示硝酸鹽含量W(NaNO3)＝1.371×W(NO3-)--------------------(4)式中W(NO3-)-樣品中硝酸根的含量，mg/kg；W(NaNO3)-樣品中以硝酸鈉計(jì)的硝酸鹽的含量，mg/kg。
上述兩種計(jì)算公式中，測(cè)定結(jié)果應(yīng)準(zhǔn)確至0.1mg/kg。
在本發(fā)明的檢測(cè)方法中，在硝酸鹽含量測(cè)定中使用的鎘柱，例如可按照如下方法制備得到在用于盛裝鍍銅鎘粒的玻璃柱的底部裝上幾厘米(優(yōu)選2～3厘米)高的玻璃纖維。在玻璃柱中裝入水，排凈氣泡。將鍍銅鎘粒盡快地裝入玻璃柱，使其暴露于空氣的時(shí)間盡量短。鍍銅鎘粒的高度應(yīng)在15～20cm的范圍內(nèi)。其中，鎘粒可通過(guò)用鋅棒制備或直接購(gòu)買(mǎi)鍍銅鎘粒(例如，可購(gòu)自黑龍江省哈爾濱市盛搏科技有限公司)。
在本發(fā)明的檢測(cè)方法中，亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)是按照如下方法制備的1).首先制備亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液稱(chēng)取在115±5℃下烘至恒重的亞硝酸鈉(純度為分析純，優(yōu)選高于分析純)0.1500g，于1000ml容量瓶中，加水溶解后定容。該溶液為標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，含亞硝酸離子(NO2-)10μg/ml，使用時(shí)現(xiàn)配。于1000ml容量瓶中，吸取10mL上述溶液和20ml緩沖溶液，用水定容。1毫升此標(biāo)準(zhǔn)溶液含1.00μg的NO2-。
2).曲線(xiàn)制作分別移取(或用滴定管移出)0、2、4、6、8、10、12、16、20mL亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液于九個(gè)100ml容量瓶中(可根據(jù)樣品含量不同增加標(biāo)準(zhǔn)溶液個(gè)數(shù))。在每個(gè)容量瓶中加水，使其體積達(dá)到60ml。
在每個(gè)容量瓶中加入6mL溶液III和5.0mL溶液I混勻，置于室溫下避光處，再加入2mL溶液II，混勻，5min后用水定容，在15min內(nèi)，在分光光度計(jì)上，用1cm光徑吸收池，以零管調(diào)零，于波長(zhǎng)538nm測(cè)其吸光度，根據(jù)對(duì)應(yīng)的濃度與吸光度值繪制亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
在本發(fā)明的檢測(cè)方法中，所使用的鎘柱是按照如下方法制備的1).配制硝酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液-相當(dāng)于硝酸鹽的濃度為0.0045g/L將硝酸鉀(KNO3)在110℃～120℃的范圍內(nèi)干燥至恒重。冷卻后稱(chēng)取1.4680g(準(zhǔn)確至0.0001g)，溶于1000mL的容量瓶中，用水定容。
在使用當(dāng)天，與1000mL的容量瓶中，取5.00±0.015ml上述溶液和20±0.1ml緩沖溶液，用水定容。1ml的該標(biāo)準(zhǔn)溶液含有4.50μg的NO3-。
2).新制備柱的處理以不大于6mL/min的流量將由700～800ml水、220～230ml硝酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液、20±0.030mL緩沖溶液和20±1ml EDTA溶液組成的混合溶液通過(guò)剛裝好鎘粒的玻璃柱，接著用50±5ml水以不大于6ml/min的流速?zèng)_洗該柱。
對(duì)于按照本發(fā)明制備的鎘柱，在使用中，優(yōu)選地需要按時(shí)檢查柱的還原能力，這種檢查每天至少要進(jìn)行兩次，一般在開(kāi)始時(shí)和一系列測(cè)定之后進(jìn)行檢查，檢查方法如下用移液管將20±0.030mL的硝酸鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液移入還原柱頂部的貯液杯中，再立即向該貯液杯中添加5±0.1ml緩沖溶液。用一個(gè)100ml的容量瓶收集洗提液。洗提液的流量不應(yīng)超過(guò)6ml/min。(空白試驗(yàn)中用水過(guò)柱)在貯液杯將要排空時(shí)，用約15ml水沖洗杯壁。沖洗水流完后，再用15ml水重復(fù)沖洗。當(dāng)?shù)诙螞_洗水也流完后，將貯液杯灌滿(mǎn)水，并使水以最大流量流過(guò)柱子。
當(dāng)容量瓶中的洗提液接近100ml時(shí)，從柱子下取出容量瓶，用水定容至刻度，混合均勻。
移取10ml洗提液于100ml容量瓶中，加水至60mL(左右)。然后按上述亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)制作中給容量瓶中加水，使其體積達(dá)到60mL之后的步驟開(kāi)始同2.3.2操作。于波長(zhǎng)538nm測(cè)其吸光度，通過(guò)回歸方程計(jì)算硝酸鉀標(biāo)準(zhǔn)使用液經(jīng)過(guò)過(guò)鎘柱還原后，洗提液所對(duì)應(yīng)的NO2-的含量，與理論值NO2-的含量為0.067μg/mL時(shí)還原能力為100％進(jìn)行比較，求出此時(shí)的還原力的百分率。還原力在95％～105％時(shí)符合要求，方可進(jìn)行樣品的測(cè)定如果所述鎘柱的還原能力小于95％或大于105％，柱子就需要再生，按如下步驟進(jìn)行再生在100mL水中加入約5ml EDTA溶液和2mL 0.1mol/L鹽酸溶液。以10ml/min左右的速度過(guò)柱。當(dāng)貯液杯中混合液排空后，按順序用25ml水、25ml鹽酸和25ml水沖洗柱子。檢查柱子的還原能力，如低于95％或高于105％，要重復(fù)再生。
本發(fā)明的方法具有很好的重復(fù)性在本發(fā)明的測(cè)定方法中，由同一分析人員在短時(shí)間間隔內(nèi)測(cè)定的兩個(gè)亞硝酸鹽結(jié)果之間的差值，不應(yīng)超過(guò)1mg/kg；由同一分析人員在短時(shí)間間隔內(nèi)測(cè)定的兩個(gè)硝酸鹽結(jié)果之間的差值，在硝酸鹽含量小于30mg/kg時(shí)，不應(yīng)超過(guò)3mg/kg；在硝酸鹽含量大于30mg/kg時(shí)，不應(yīng)超過(guò)結(jié)果平均值的10％。
本發(fā)明的檢測(cè)方法也具有很好的重現(xiàn)性由不同實(shí)驗(yàn)室的兩個(gè)分析人員對(duì)同一樣品測(cè)得的兩個(gè)硝酸鹽結(jié)果之差，在硝酸鹽含量小于30mg/kg時(shí)，差值不應(yīng)超過(guò)8mg/kg；在硝酸鹽含量大于或等于30mg/kg時(shí)，該差值不應(yīng)超過(guò)結(jié)果平均值的25％。


圖1為本發(fā)明所述的鎘柱還原裝置圖。
圖2為亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)示意圖；具體曲線(xiàn)制作的依據(jù)說(shuō)明書(shū)中亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)的制作，曲線(xiàn)作好后要求曲線(xiàn)的相關(guān)系數(shù)r大于等于0.9990，方可符合要求。
實(shí)施方式實(shí)施例1按照所述產(chǎn)品中是否有色素干擾的不同進(jìn)行分別按照本發(fā)明的方法處理，得到樣品本身所含有的亞硝酸鹽和硝酸鹽的含量，檢測(cè)對(duì)比結(jié)果如下

通過(guò)對(duì)以上表內(nèi)的結(jié)果得知，對(duì)于產(chǎn)品中無(wú)色素的食品，經(jīng)過(guò)脫色處理后，結(jié)果差異很小，而產(chǎn)品中富含色素的食品，在樣品處理中人為添加脫色劑，消除色素對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響，結(jié)果有明顯的差異，經(jīng)過(guò)脫色處理后，結(jié)果偏低。
實(shí)驗(yàn)例2按照本發(fā)明的方法進(jìn)行樣品的平行檢測(cè)，結(jié)果如下


通過(guò)用此方法進(jìn)行平行檢測(cè)，同一樣品的重復(fù)性檢測(cè)結(jié)果符合方法的允許差，即亞硝酸鹽結(jié)果不超過(guò)1mg/kg，硝酸鹽結(jié)果在硝酸鹽含量小于30mg/kg時(shí)，兩次測(cè)定之差不超過(guò)3mg/kg。方法的重復(fù)性好。
權(quán)利要求
1.一種檢測(cè)食品中亞硝酸鹽和硝酸鹽的定量檢測(cè)方法，其特征在于，所述方法包括如下三個(gè)步驟(1).樣品的制備；(2).樣品的分析；(3).計(jì)算亞硝酸鹽的含量和硝酸鹽含量；其中，步驟2樣品的分析包括亞硝酸鹽含量的測(cè)定和硝酸鹽含量的測(cè)定。
2.權(quán)利要求1的定量檢測(cè)方法，其特征在于，其中步驟1樣品的制備通常無(wú)論是種類(lèi)相同或不同，基本原則都是將待測(cè)樣品用搗碎機(jī)充分搗碎混勻來(lái)制備的，具體可分為以下幾類(lèi)1.1.新鮮果蔬先將新鮮水果、蔬菜洗凈，涼去表面水分，用四分法取可食部分，切碎，按比例加入一定量的水-多汁樣品可不加水，用高速搗碎機(jī)制成均漿，但在稱(chēng)試樣時(shí)應(yīng)扣除水量；1.2.冷凍罐頭及醬制品罐頭及醬制品應(yīng)全部倒出，制成均漿備用；冷凍制品應(yīng)先在密閉容器中解凍，混勻，分取一部分備用；1.3.添加果料制品將待測(cè)樣品用搗碎機(jī)充分搗碎混勻；1.4.乳粉及嬰幼兒食品取有代表性樣品將其混勻，備用。
3.權(quán)利要求1的定量檢測(cè)方法，其特征在于，其中步驟2樣品的分析包括如下步驟2.1.制備無(wú)色清亮濾液按照試樣中亞硝酸鹽和硝酸鹽含量的大小，準(zhǔn)確稱(chēng)取制備的樣品10-30g放入燒杯中，加入5±0.1mL飽和硼砂溶液和100±1mL熱水；置沸水浴中加熱，并用磁力攪拌器連續(xù)攪拌，取出后冷卻到室溫，再加入10±0.1mL亞鐵氰化鉀溶液，10±0.1mL乙酸鋅溶液和脫色劑，每次加入后均充分搖勻，然后定量轉(zhuǎn)入容量瓶中，用水定容，用濾紙過(guò)濾，得到無(wú)色清亮濾液；2.2.亞硝酸鹽含量的測(cè)定用移液管吸取一定量上述無(wú)色清亮濾液置于適量容積的容量瓶中，用水稀釋?zhuān)患尤脒m量的溶液III和適量的溶液I混勻，置于室溫下避光處，再加入適量的溶液II，混勻，用水定容，于15min～20min內(nèi)，在分光光度計(jì)上，于波長(zhǎng)538nm測(cè)其吸光度；通過(guò)亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)求出樣品的濃度；同時(shí)做空白試驗(yàn)，即不加樣品，其它步驟同樣品檢測(cè)一致；在該亞硝酸鹽含量測(cè)定中，無(wú)色清亮濾液∶稀釋用水∶溶液III∶溶液I∶溶液II的體積比為20∶60∶6∶5∶2；2.3.硝酸鹽含量的測(cè)定2.3.1將無(wú)色清亮的濾液用過(guò)鎘柱還原用移液管吸取一定量的無(wú)色清亮濾液置于適量容積的容量瓶中，加氨緩沖液，倒入鎘柱頂部的貯液杯中，以小于6mL/min的流速過(guò)柱；洗提液-過(guò)柱后的液體接入容量瓶中；當(dāng)貯液杯快要排空時(shí)，用水沖洗小燒杯，再倒入貯液杯中；沖洗水流完后，再用水重復(fù)一次；當(dāng)?shù)诙螞_洗水快流完時(shí)，將貯液杯裝滿(mǎn)水，以最大流速過(guò)柱，得到洗提液；當(dāng)容量瓶中的洗提液接近容量瓶容積時(shí)，取出容量瓶，用水定容，混勻；同時(shí)作空白實(shí)驗(yàn)；在該步驟中，無(wú)色清亮濾液∶氨緩沖液一般為20∶5，但氨緩溶液可多加，直到與濾液混合后，澄清為止；2.3.2測(cè)定移取一定量的洗提液加入于適量容量瓶中，加入適量的溶液III鹽酸水溶液和適量的溶液I磺胺溶液混勻，置于室溫下避光處，再加入適量的溶液II萘乙二胺鹽酸鹽溶液，混勻，用水定容，于15～20min內(nèi)，在分光光度計(jì)上測(cè)定，通過(guò)亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)求出樣品的濃度；同時(shí)做空白試驗(yàn)；在該步測(cè)定中，洗提液∶溶液III∶溶液I∶溶液II的體積比為20∶6∶5∶2。
4.權(quán)利要求1的定量檢測(cè)方法，其特征在于，其中步驟3計(jì)算亞硝酸鹽的含量和硝酸鹽含量是按照如下方法計(jì)算的3.1亞硝酸鹽的含量3.1.1樣品中 C1-無(wú)色清亮濾液的吸光度，通過(guò)亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的回歸方程計(jì)算出的NO2-的濃度，μg/mL；m-樣品的質(zhì)量，g；V1-所取無(wú)色清亮濾液的體積，mL；3.1.2.樣品中以亞硝酸鈉表示的亞硝酸鹽含量W(NaNO2)＝1.5×W(NO2-)---------------------(2)式中W(NO2-)-樣品中亞硝酸根的含量，mg/kg；W(NaNO2)-樣品中以亞硝酸鈉表示的亞硝酸鹽的含量，mg/kg；上述兩種計(jì)算公式中，測(cè)定結(jié)果應(yīng)準(zhǔn)確至0.1mg/kg；3.2.硝酸鹽含量3.2.1樣品中 式中C2-洗提液的吸光度，通過(guò)回歸方程計(jì)算出的亞硝酸根離子的濃度，μg/ml；m-樣品的質(zhì)量，g；V2-所取洗提液的體積，mL；W(NO2-)-根據(jù)式(1)計(jì)算出的亞硝酸根含量；若不考慮柱的還原能力，則可認(rèn)為r＝100；3.2.2樣品中以硝酸鈉表示的硝酸鹽含量W(NaNO3)＝1.371×W(NO3-)-------------(4)式中W(NO3-)-樣品中硝酸根的含量，mg/kg；W(NaNO3)-樣品中以硝酸鈉計(jì)的硝酸鹽的含量，mg/kg；上述兩種計(jì)算公式中，測(cè)定結(jié)果應(yīng)準(zhǔn)確至0.1mg/kg。
5.權(quán)利要求2-4中任一項(xiàng)所述的定量檢測(cè)方法，其特征在于，其中步驟2的2.1中，熱水的溫度為70-80℃，沸水浴中加熱時(shí)間為15-20min；步驟2.2中，稀釋無(wú)色清亮濾液的水量為3倍的無(wú)色清亮濾液體積量。
6.權(quán)利要求2-4中任一項(xiàng)所述的定量檢測(cè)方法，其特征在于，其中溶液I磺胺水溶液為2g/L；溶液II萘乙二胺鹽酸鹽溶液為1g/L，避光貯存，冰箱保存；溶液III鹽酸水溶液，其中按體積比，鹽酸∶水為445∶555。
7.權(quán)利要求2-4中任一項(xiàng)所述的定量檢測(cè)方法，其特征在于，其中使用的鹽酸-氨水緩沖溶液為pH 9.60～9.70，所使用的EDTA溶液為335g/L的二水乙二胺四乙酸二鈉。
8.權(quán)利要求3所述的量檢測(cè)方法，其特征在于，其中亞鐵氰化鉀溶液的濃度為106±0.1g/L，乙酸鋅溶液的濃度為220±0.1g/L。
全文摘要
本發(fā)明涉及檢測(cè)不同種類(lèi)食品中的亞硝酸鹽和硝酸鹽的方法，本發(fā)明的方法不僅節(jié)約時(shí)間，且節(jié)約成本，同時(shí)提高工作效率和檢驗(yàn)結(jié)果，是一種準(zhǔn)確性高的食品中亞硝酸鹽和硝酸鹽的定量檢測(cè)方法。
文檔編號(hào)G06F19/00GK101059429SQ20071008538
公開(kāi)日2007年10月24日 申請(qǐng)日期2007年3月2日 優(yōu)先權(quán)日2007年3月2日
發(fā)明者張秀梅, 李翠枝 申請(qǐng)人:內(nèi)蒙古伊利實(shí)業(yè)集團(tuán)股份有限公司