專利名稱：一種苯并氮氧雜卓類抗生素及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于抗生素領(lǐng)域，具體涉及一種苯并氮氧雜卓類抗生素及其制備方法。
背景技術(shù)：
自1929年發(fā)現(xiàn)醫(yī)用抗生素青霉素(penicillin)、1958年發(fā)現(xiàn)農(nóng)用抗生素滅瘟素S(Blasticidin-S)以來，迄今全世界已發(fā)現(xiàn)4000多種抗生素，在人畜疾病防控及農(nóng)業(yè)有害生物防治方面發(fā)揮了重要的作用，推動(dòng)了人類文明和科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步。任何一種抗生素隨著被推廣使用，其靶標(biāo)病原菌很快就會(huì)產(chǎn)生明顯的抗藥性，因此迫切需要不斷研究開發(fā)出新的抗生素，特別是具有全新分子結(jié)構(gòu)的抗生素。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種苯并氮氧雜卓類抗生素，其化學(xué)分子式為CltlH11NO3，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下式(I)所示:
權(quán)利要求
1.一種苯并氮氧雜卓類抗生素,其化學(xué)分子式為CltlH11NO13,其化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下式(I)所示:
2.一種制備上述權(quán)利要求1所述的式(I)的苯并氮氧雜卓類抗生素的生物合成方法，其特征在于包括如下步驟: 步驟一:發(fā)酵 (1)發(fā)酵菌種:發(fā)酵菌株是在中國山東半島農(nóng)藥污染地區(qū)采集土樣，在實(shí)驗(yàn)室分離培養(yǎng)獲得，鑒定為雅加達(dá)鏈霉菌(Sereptomyces djakartensis);該菌株已在中國微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心保藏，保藏日期為2012年11月13日，保藏登記號(hào)為CGMCCN0.6817 ； (2)斜面培養(yǎng):采用淀粉酪素培養(yǎng)基于IXlO5帕下滅菌30min，接菌后28-32°C培養(yǎng)4-5d ;所述淀粉酪素培養(yǎng)基由如下組分組成:可溶性淀粉10.0g，磷酸氫二鉀2.0g，硝酸鉀,2.0g,氯化鈉2.0g,酪蛋白0.3g，7水硫酸鎂0.05g,碳酸鈣0.02g, 7水硫酸亞鐵0.0lg,瓊脂,20.0g 蒸餾水 1000ml, PH 值 7.2-7.4 ； (3)種子培養(yǎng):將種子培養(yǎng)基分裝于250ml三角瓶，每瓶20-100ml，于IX IO5帕下滅菌30min ;用無菌水將斜面上孢子洗下制成孢子懸浮液，使其濃度為I X IO6-X IO7個(gè)/ml ；每瓶加0.5-2.0ml孢子懸浮液，置于轉(zhuǎn)速為150-180r/min的搖床上，28_32°C培養(yǎng)24_36h ；所述種子培養(yǎng)基由如下組分組成:小米10_30g加蒸懼水IOOOml煮沸15min后濾去米粒，加入葡萄糖15-30g，氯化鈉2-5g，蛋白胨2-10g，碳酸鈣0.2-0.8g，硫酸銨0.5-2.5g，PH值,7.2-7.4 ； (4)液體發(fā)酵:將發(fā)酵培養(yǎng)基分裝于250ml三角瓶，每瓶20-100ml，于IX IO5帕下滅菌30min ;接種量10% (V/V)，置于轉(zhuǎn)速為150_240r/min的搖床上，28_32°C培養(yǎng)4_6d ;所述發(fā)酵培養(yǎng)基為小米10_30g加蒸餾水IOOOml煮沸15min后濾去米粒，加入葡萄糖15_30g，氯化鈉 2-5g，蛋白胨 2-10g，碳酸鈣 0.5-2.5g，硫酸銨 l_3g，PH 值 7.2-7.4 ； 步驟二:抗生素的分離 (1)將步驟一制得的發(fā)酵液經(jīng)100-200目篩網(wǎng)過濾后，用HH)大孔吸附樹脂吸附，甲醇-水梯度洗脫； (2)將甲醇洗脫液濃縮后進(jìn)行硅膠柱層析，以乙酸乙酯/甲醇(v/v) ,9: 1,8: 2,7: 3,6: 4和純甲醇依次洗脫，收集以乙酸乙酯/甲醇(v/v)9: I的流分，濃縮后放置過夜，析出抗生素粗結(jié)晶； (3)將上述粗結(jié)晶用制備高效液相色譜純化，得到式(I)所示的苯并氮氧雜卓抗生素純品。
3.一種制備權(quán)利要求1所述的式(I)所示的苯并氮氧雜卓類抗生素的化學(xué)合成方法，其特征在于:
4.一種制備權(quán)利要求1所述的式(I)所示的苯并氮氧雜卓類抗生素的化學(xué)合成方法，其特征在于:
5.一種制備權(quán)利要求1所述的式(I)所示的苯并氮氧雜卓類抗生素的化學(xué)合成方法，其特征在于:
6.一種制備權(quán)利要求1所述的式(I)所示的苯并氮氧雜卓類抗生素的化學(xué)合成方法，其特征在于:
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的式(I)所示的苯并氮氧雜卓類抗生素抑制人畜病原細(xì)菌的用途，所述人畜病原細(xì)菌為枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)、糞腸球菌(E.faecalis)、肺炎鏈球菌(Streptococcus pneumoniae)、豬鏈球菌(Swine streptococcal)、結(jié)核分枝桿菌(Mycobacterium tuberculosis)、乳酸乳桿菌(Bacteriumlactis)、牛分枝桿菌(Mycobacterium bovis)、臘狀芽抱桿菌(Bacillus cereus)、大腸埃氏菌(Escherichiacoil)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)或耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(Methici11 in-resistant Staphylococcus aureus，MRSA)。
8.根據(jù)權(quán)利要求7的用途，所述人畜病原細(xì)菌為枯草芽孢桿菌(Bacillussubtilis)、金黃色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)或耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(Methici11 in-resistant Staphylococcus aureus，MRSA)。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的式(I)所示的苯并氮氧雜卓類抗生素抑制農(nóng)作物病原細(xì)菌的用途，所述農(nóng)作物病原細(xì)菌為白菜軟腐病菌(Erwina carotovora)、稻白葉枯黃單胞桿菌(Xanthomanas oryzae pv.0ryzal (Ishiyama) Dye)、棉角斑病菌(Xanthomonascampestris pv.malv acearum(E.F.Smith)Dowson)Λ 柑橘潰痕病菌(XanthomonasCampestris pv.citri)、柑橘黃梢病菌(Candidatus liberobacter asiaticus)、青枯假單胞桿菌(Pseudomonas solanacearum)、黃瓜角斑病病菌(Pseudomonas syringaepv.lachrymans)、馬鈴薯環(huán)腐病菌(Clavibactermichiganensissubsp.sepedonicus)或稱猴桃潰痕病菌(Pseudomonas syringae Pv.actinidiae)。
10.根據(jù)權(quán)利要求9的用途，所述農(nóng)作物病原細(xì)菌為白菜軟腐病菌(Erwinacarotovora)、水稻白葉枯病菌(Xanthomanas oryzaepv.0ryzal (Ishiyama)Dye)或稱猴桃潰痕病菌(Pseudomonas syringae Pv.actinidiae)。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種苯并氮氧雜卓類抗生素，其化學(xué)分子式為C10H11NO3，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下式(I)所示式(I)進(jìn)一步地，本發(fā)明涉及制備該化合物的生物合成方法以及四種化學(xué)合成方法。進(jìn)一步地，本發(fā)明還涉及該化合物抑制多種人畜病原細(xì)菌和農(nóng)作物病原細(xì)菌的用途。該化合物是國內(nèi)外未報(bào)道過的新化合物，具有全新的苯并氮氧雜卓分子結(jié)構(gòu)。其可以通過微生物發(fā)酵制備，也可以通過人工化學(xué)合成制備。
文檔編號(hào)C12R1/465GK103086996SQ20131002844
公開日2013年5月8日 申請(qǐng)日期2013年1月25日 優(yōu)先權(quán)日2013年1月25日
發(fā)明者吳文君, 張繼文, 魏少鵬, 張文娟 申請(qǐng)人:西北農(nóng)林科技大學(xué)農(nóng)藥研究所