利用濕藻生物質(zhì)微波加熱一步法制取生物柴油的方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及生物質(zhì)能利用技術(shù)，旨在提供利用濕藻生物質(zhì)微波加熱一步法制取生物柴油的方法。該利用濕藻生物質(zhì)微波加熱一步法制取生物柴油的方法，包括步驟：取微藻液體過濾或離心后，得到固體含水量為40～90%的濕藻生物質(zhì)；將濕藻生物質(zhì)、氯仿、甲醇和濃硫酸放入微波消解罐密封后，進(jìn)行微波處理，然后將藻液離心提取并提純，即得到生物柴油產(chǎn)品。本發(fā)明省掉了傳統(tǒng)濕藻干燥脫水和研磨制粉的巨大能耗，簡化了傳統(tǒng)油脂萃取和酯交換兩步法制取生物柴油的復(fù)雜工藝流程；另外，在微波加熱條件下，濕藻細(xì)胞壁高效破碎，細(xì)胞破壁后的油脂擴(kuò)散速度是未破壁前滲透穿壁速度的152倍。
【專利說明】利用濕藻生物質(zhì)微波加熱一步法制取生物柴油的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明是關(guān)于生物質(zhì)能利用技術(shù)，特別涉及利用濕藻生物質(zhì)微波加熱一步法制取生物柴油的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]藻類是一種數(shù)量巨大的生物質(zhì)能源，據(jù)估計地球上每年通過光合作用可生產(chǎn)
1.46 X IO11噸生物質(zhì)，其中40%應(yīng)歸功于藻類光合作用。微藻種質(zhì)資源豐富，含有較高的蛋白質(zhì)、油脂和可溶性多糖等成分，沒有葉、莖、根，不產(chǎn)生木質(zhì)纖維素類難降解生物質(zhì)，不與傳統(tǒng)農(nóng)業(yè)爭地，不因收獲而破壞生態(tài)系統(tǒng)。由于微藻轉(zhuǎn)化太陽能為生物質(zhì)能的量子效率高達(dá)2-10%，而陸生植物的量子效率都小于1%，并且微藻生長速率極快，每天生物質(zhì)的增長量可達(dá)到1-3倍，故利用微藻生物質(zhì)轉(zhuǎn)化制取生物柴油具有突出優(yōu)勢。微藻生物柴油的熱值可高達(dá)41MJ/kg，與傳統(tǒng)石化柴油的熱值相當(dāng)，大約是燃料乙醇熱值的1.4倍，因此能夠替代應(yīng)用于航空航天和重型交通工具等必需的高熱值柴油燃料，故開發(fā)微藻能源對發(fā)展低碳經(jīng)濟(jì)和節(jié)能減排具有重要意義實驗部分。
[0003]目前微藻制油的主要方法有溶劑萃取/酯交換(Kumariet al.，2011)、超臨界萃取和酯交換(Cheng et al.，2011)、閃速熱裂解(Miao et al.，2004)、水熱反應(yīng)(Brownet al.,2 010)等方法。傳統(tǒng)的溶劑萃取和酯交換兩步法往往使用干藻粉，對于濕藻生物質(zhì)的脫水烘干和磨制成粉需要消耗巨大能量。脫水約占微藻制油總能耗的84%(Patil etal.，2012)。而且傳統(tǒng)兩步法制油工藝復(fù)雜往往需要反應(yīng)0.5~1.5小時左右。Johnson etal (2009)等采用傳統(tǒng)加熱方法利用濕藻生物質(zhì)一步法制取生物柴油，但其最終生物柴油的含量在生物油中僅為7.76%，所以制油效率不高。曾有學(xué)者采用微波方法轉(zhuǎn)化蓖麻油進(jìn)行酯交換制取生物柴油，表明微波加熱相比傳統(tǒng)加熱有明顯優(yōu)勢:制油的熱力學(xué)效率從70%提高到94%,反應(yīng)時間從3小時縮減為I小時(Yuan et al.，2009)。
[0004]有文獻(xiàn)對比了許多破碎微藻細(xì)胞壁的方法，包括滲透壓沖擊、高溫高壓( 1250C，1.5Mpa)、微波、超聲波、珠攪拌等，證實微波是制取微藻生物柴油的一種高效節(jié)能方法(Lee et al.，2010)。據(jù)報道利用微波加熱處理干藻生物質(zhì)一步法制取生物柴油，采用堿性催化劑(氧化銀strontium oxide),在5分鐘內(nèi)大約99.9%的甘油三酯轉(zhuǎn)化成生物柴油(Koberg et al.，2011),但是使用干藻粉需要預(yù)先的脫水干燥消耗了巨大能量。Patilet al.(2011)等采用微波加熱對干藻粉生物質(zhì)進(jìn)行甲醇萃取和酯交換的一步法制取生物柴油，但是沒有深入分析微藻細(xì)胞的破壁效率以及生物柴油產(chǎn)量等指標(biāo)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的主要目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)中的不足，提供直接使用濕藻在微波加熱條件下一步法制取生物柴油、能夠省掉傳統(tǒng)濕藻干燥脫水和研磨制粉的巨大能耗，而且簡化了傳統(tǒng)油脂萃取和酯交換兩步法制取生物柴油的復(fù)雜工藝流程的方法。為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明的解決方案是:[0006]提供利用濕藻生物質(zhì)微波加熱一步法制取生物柴油的方法，具體包括下述步驟:
[0007](I)取微藻液體，采用過濾(抽濾、壓濾)或離心方法使微藻液體脫除水分，得到固體含水量為40~90%的濕藻生物質(zhì)；
[0008](2)稱取I~100g步驟(1)中制得的濕藻生物質(zhì)放入離心管內(nèi)，加入4~100ml氯仿和4~100ml甲醇，將離心管放在均質(zhì)機上震動20~40s，然后將離心管內(nèi)的藻液倒入微波消解罐內(nèi)，再向微波消解罐內(nèi)加入0.2~5ml的濃度為98%的濃硫酸，將微波消解罐密封后放入微波爐中進(jìn)行微波處理；
[0009](3)微波處理的方法為:將微波爐的功率設(shè)定為500~lOOOw，處理40~80s，當(dāng)微波消解罐的溫度達(dá)到60~90攝氏度后，將微波爐的功率降低為400~600w，并恒溫保持2~60min ;微波處理結(jié)束后，冷卻微波消解罐10~20min，使微波消解罐的溫度降低到25~30攝氏度，然后將微波消解罐中的藻液倒到藻液收集瓶中，再向微波消解罐內(nèi)兩次加入4~100ml的氯仿，依次分別提取殘余的藻液，倒入藻液收集瓶中；
[0010](4)向藻液收集瓶中加入15~300ml的去離子水,在4000rpm下離心5min分層，下層為油相，中間為藻渣，上層為水相；用移液槍取出下層油相，再向藻液收集瓶中兩次加入10~200ml的去離子水，使殘余的甲醇和甘油溶解于水，依次分別再在4000rpm下離心5min分層，再分別用移液槍提取下層的油相；
[0011](5)使用烘箱烘干步驟(4)中提取出的油相中的氯仿，油相中剩余的即為生物油，稱取得到的生物油重量；將生物油倒入玻璃瓶中，再向玻璃瓶中添加I~100ml的正己烷，靜置30分鐘后，用移液槍取出上層的溶解了生物柴油的正己烷液相，棄置下層的固體不溶物(包含色素等雜質(zhì))，將取出的上層液相在50~70攝氏度下蒸發(fā)回收正己烷，剩余油相即為能用作汽車發(fā)動機燃料的生物柴油產(chǎn)品。
[0012]作為進(jìn)一步的改進(jìn)`，所述步驟(1)中的微藻液體是生物質(zhì)密度為I~10g/L的微藻液體，包括從自然環(huán)境中篩選得到的天然藻種、物理化學(xué)誘變得到的藻種突變體、經(jīng)過基因改良得到的轉(zhuǎn)基因藻種。
[0013]作為進(jìn)一步的改進(jìn)，所述步驟(1)中的微藻液體的藻種采用藻細(xì)胞干重的油脂含量為10%~70%的藻種，包括綠藻(包括小球藻、微擬球藻和葡萄藻)、硅藻(包括菱板藻、角毛藻和褐指藻)、藍(lán)藻(螺旋藻、微囊藻和魚腥藻)。
[0014]作為進(jìn)一步的改進(jìn)，所述步驟(3)中微波處理的頻率為2450MHz或者915MHz。
[0015]作為進(jìn)一步的改進(jìn)，所述微波消解罐采用容量為50~300ml的消解罐，在步驟(3)中，進(jìn)行微波處理的密封的微波消解罐數(shù)量為4~10個。
[0016]作為進(jìn)一步的改進(jìn)，所述步驟(2)中，向離心管中加入的氯仿與甲醇的體積比為1:1。
[0017]作為進(jìn)一步的改進(jìn)，所述步驟(5)中制得的生物油中含有C14~C22的脂肪酸甲酯，且占生物油總量的50~80%。
[0018]作為進(jìn)一步的改進(jìn)，所述步驟(5)中制得的生物柴油產(chǎn)品，通過在生物柴油產(chǎn)品中加入濃度為3.8~4.3mg/ml的內(nèi)標(biāo)樣C19:0的脂肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)品，能采用氣相色譜儀或者色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀進(jìn)行定量分析成分。
[0019]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是:
[0020]使用濕藻微波加熱一步法制取生物柴油明顯優(yōu)于傳統(tǒng)使用干藻粉的兩步法制油，其制油動力學(xué)速率提高到傳統(tǒng)兩步方法的大約6倍，而制油熱力學(xué)效率提高到傳統(tǒng)方法的大約1.3倍；且省掉了傳統(tǒng)濕藻干燥脫水和研磨制粉的巨大能耗，簡化了傳統(tǒng)油脂萃取和酯交換兩步法制取生物柴油的復(fù)雜工藝流程；另外，在微波加熱條件下，濕藻細(xì)胞壁高效破碎，細(xì)胞破壁后的油脂擴(kuò)散速度是未破壁前滲透穿壁速度的152倍。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0021]圖1為本發(fā)明的工藝流程圖。
【具體實施方式】
[0022]下面結(jié)合附圖與【具體實施方式】對本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)描述:
[0023]如圖1所示的利用濕藻生物質(zhì)微波加熱一步法制取生物柴油的方法，具體包括下述步驟:
[0024](I)取人工開放池塘或密閉式反應(yīng)器養(yǎng)殖的生物質(zhì)密度為I~10g/L的微藻液體，包括從自然環(huán)境中篩選得到的天然藻種、物理化學(xué)誘變得到的藻種突變體、經(jīng)過基因改良得到的轉(zhuǎn)基因藻種，采用抽濾、壓濾等過濾方法或者離心方法，使微藻液體脫除水分，得到固體含水量為40~90%的濕藻生物質(zhì)。微藻液體的藻種采用藻細(xì)胞干重的油脂含量為10%~70%的微藻種類，包括小球藻、微擬球藻和葡萄藻等綠藻，菱板藻、角毛藻和褐指藻等硅藻，螺旋藻、微囊藻和魚腥藻等藍(lán)藻。
[0025](2)稱取I~100g步驟(1)中制得的濕藻生物質(zhì)放入離心管內(nèi)，加入4~100ml氯仿和4~100ml甲醇，且氯仿與甲醇的體積比為1:1，將離心管放在均質(zhì)機上震動20~40s，然后將離心管內(nèi)的藻液倒入容量為50~300ml的微波消解罐內(nèi)，再向微波消解罐內(nèi)加入0.2~5ml的濃度為98%的濃硫酸，將微波消解罐密封后放入微波爐中進(jìn)行微波處理。這里使用氯仿與甲醇的混合物作為微藻細(xì)胞內(nèi)油脂的萃取溶劑，甲醇同時作為酯交換制取生物柴油的反應(yīng)試劑，而濃硫酸作為酯交換反應(yīng)的催化劑。
[0026](3)微波處理的方法為:將`微波爐的功率設(shè)定為500~1000?，微波處理的頻率為2450MHz或者915MHz，處理40~80s，當(dāng)微波消解罐的溫度達(dá)到60~90攝氏度后，將微波爐的功率降低為400~600w，并恒溫保持2~60min ;且進(jìn)行微波處理的密封的微波消解罐數(shù)量為4~10個。微波處理結(jié)束后，冷卻微波消解罐10~20min，使微波消解罐的溫度降低到25~30攝氏度，然后將微波消解罐中的藻液倒到藻液收集瓶中，再向微波消解罐內(nèi)兩次加入4~100ml的氯仿，依次分別提取殘余的藻液，倒入藻液收集瓶中。
[0027](4)向藻液收集瓶中加入15~300ml的去離子水，在4000rpm下離心5min分層，下層為油相，中間為藻渣，上層為水相；用移液槍取出下層油相，再向藻液收集瓶中兩次加入10~200ml的去離子水，使殘余的甲醇和甘油溶解于水，依次分別再在4000rpm下離心5min分層，再分別用移液槍提取下層的油相。
[0028](5)使用烘箱烘干步驟(4)中提取出的油相中的氯仿，油相中剩余的即為生物油，稱取得到的生物油重量。生物油中含有C14~C22的脂肪酸甲酯，且占生物油總量的50~80%。將生物油倒入玻璃瓶中，再向玻璃瓶中添加I~100ml的正己烷，靜置30分鐘后，用移液槍取出上層的溶解生物柴油的正己烷液相，棄置下層的固體不溶物，固體不溶物包含色素等雜質(zhì)。將取出的上層液相在50~70攝氏度蒸發(fā)回收正己烷，得到的剩余油相即為可用作汽車發(fā)動機燃料的生物柴油產(chǎn)品。
[0029]對于制得的生物柴油產(chǎn)品，通過在生物柴油產(chǎn)品中加入濃度為3.8~4.3mg/ml的內(nèi)標(biāo)樣C19:0的脂肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)品，便能采用氣相色譜儀或者色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀進(jìn)行定量分析成分。
[0030]下面的實施例可以使本專業(yè)的專業(yè)技術(shù)人員更全面地理解本發(fā)明，但不以任何方式限制本發(fā)明。本發(fā)明實施例中所采用的各種微藻液體，皆為普遍的常見藻種，均已被公開的專利和各類論文使用。
[0031]實施例1
[0032]取生物質(zhì)密度為lg/L的菱板藻液體，藻細(xì)胞干重的油脂含量為40%，采用抽濾方法使微藻液體脫水后得到固體含水量為60%的濕藻生物質(zhì)。稱取Ig濕藻生物質(zhì)放入離心管內(nèi)，加入4ml氯仿和4ml甲醇，在均質(zhì)機上震動20s。然后倒入4個微波消解罐內(nèi)，每個消解罐的容量為50ml。再向消解罐內(nèi)加入0.2ml濃度為98%的濃硫酸，密封消解罐后放入微波爐，微波處理的頻率為2450MHz。設(shè)定微波功率為500w處理40s，當(dāng)微波消解罐的溫度達(dá)到60攝氏度后，降低微波爐功率為400w保持恒溫60min。微波處理后冷卻lOmin，使消解罐溫度降低到30攝氏度，然后將微波消解罐中的藻液倒到藻液收集瓶中。再向微波消解罐內(nèi)兩次加入4ml的氯仿，依次分別提取殘余的藻液，倒入藻液收集瓶中。在藻液收集瓶中加入15ml的去離子水，在4000rpm下離心5min分層，下層為油相，中間為藻渣，上層為水相。用移液槍取出下層油相，再兩次加入IOml的去離子水，將殘余的甲醇和甘油溶解于水。再次在4000rpm下離心5min分層，用移液槍提取下層的油相。使用烘箱烘干油相中的氯仿，稱取剩余的生物油重量。制得的生物油中含有C14~C22的脂肪酸甲酯，且占生物油總量的65%。向盛放生物油的玻璃瓶中添加Iml的正己烷，靜置30分鐘后，用移液槍取出上層的溶解生物柴油的正己烷液相，棄置下層的固體不溶物，固體不溶物包含色素等雜質(zhì)。將取出的上層液相在60攝氏度下，蒸發(fā)回收正己烷，得到的剩余油相即可用作汽車發(fā)動機燃料的生物柴油產(chǎn)品。通過在生物柴油產(chǎn)品中加入濃度為3.8mg/ml的內(nèi)標(biāo)樣C19:0的脂肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)品，采用氣相色譜儀進(jìn)行定量分析成分。
[0033]在本實施例中，將菱板藻替換成角毛藻和褐指藻，也能得到可用作汽車發(fā)動機燃料的生物柴油產(chǎn)品。
[0034]實施例2
[0035]取生物質(zhì)密度為5g/L的小球藻液體，藻細(xì)胞干重的油脂含量為70%，采用離心方法使微藻液體脫水后得到固體含水量為40%的濕藻生物質(zhì)。稱取約50g濕藻生物質(zhì)放入離心管內(nèi)，加入50ml氯仿和50ml甲醇，在均質(zhì)機上震動30s。然后倒入7個微波消解罐內(nèi)，每個消解罐的容量為170ml。再向消解罐內(nèi)加入2.5ml濃度為98%的濃硫酸，密封消解罐后放入微波爐中，微波處理的頻率為2450MHz。設(shè)定微波功率為800w處理60s，當(dāng)微波消解罐的溫度達(dá)到80攝氏度后，降低微波爐功率為500w保持恒溫30min。微波處理后冷卻15min，使消解罐溫度降低到28攝氏度，然后將微波消解罐中的藻液倒到藻液收集瓶中。再向微波消解罐內(nèi)兩次加入50ml的氯仿，依次分別提取殘余的藻液，倒入藻液收集瓶中。在藻液收集瓶中加入150ml的去離子水，在4000rpm下離心5min分層，下層為油相，中間為藻渣，上層為水相。用移液槍取出下層油相，再兩次加入100ml的去離子水，將殘余的甲醇和甘油溶解于水。并再兩次分別在4000rpm下離心5min分層，用移液槍提取下層的油相。使用烘箱烘干油相中的氯仿，稱取剩余的生物油重量。生物油中含有C14~C22的脂肪酸甲酯，且占生物油總量的80%。向盛放生物油的玻璃瓶中添加50ml的正己烷，靜置30分鐘后，用移液槍取出上層的溶解生物柴油的正己烷液相，棄置下層的固體不溶物，固體不溶物包含色素等雜質(zhì)。將取出的上層液相在70攝氏度蒸發(fā)回收正己烷，得到的剩余油相即可用作汽車發(fā)動機燃料的生物柴油產(chǎn)品。通過在生物柴油產(chǎn)品中加入濃度為4.0mg/ml的內(nèi)標(biāo)樣C19:0的脂肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)品，采用氣相色譜儀進(jìn)行定量分析成分。
[0036]在本實施例中，將小球藻替換成微擬球藻和葡萄藻，也能得到可用作汽車發(fā)動機燃料的生物柴油產(chǎn)品。
[0037]實施例3
[0038]取生物質(zhì)密度為10g/L的螺旋藻液體，藻細(xì)胞干重的油脂含量為10%，采用壓濾方法使微藻液體脫水后得到固體含水量為90%的濕藻生物質(zhì)。稱取100g濕藻生物質(zhì)放入離心管內(nèi)，加入100ml氯仿和100ml甲醇，在均質(zhì)機上震動40s。然后倒入10個微波消解罐內(nèi)，每個消解罐的容量為300ml。再向消解罐內(nèi)加入5ml濃度為98%的濃硫酸，密封消解罐后放入微波爐中，微波處理的頻率為915MHz。設(shè)定微波功率為1000w處理80s，當(dāng)微波消解罐的溫度達(dá)到90攝氏度后，降低微波爐功率為600w保持恒溫2min。微波處理后冷卻20min，使消解罐溫度降低到25攝氏度，然后將微波消解罐中的藻液倒到藻液收集瓶中。再向微波消解罐內(nèi)兩次加入100ml的氯仿，依次分別提取殘余的藻液，倒入藻液收集瓶中。在藻液收集瓶中加入300ml的去離子水，在4000rpm下離心5min分層，下層為油相，中間為藻渣，上層為水相。用移液槍取出下層油相，再兩次加入200ml的去離子水，將殘余的甲醇和甘油溶解于水。再次在4000rpm下離心5min分層，用移液槍提取下層的油相。使用烘箱烘干油相中的氯仿，稱取剩余的生物油重量。生物油中含有C14~C22的脂肪酸甲酯，且占生物油總量的50%。向盛放生物油的玻璃瓶中添加100ml的正己烷，靜置30分鐘后，用移液槍取出上層的溶解生物柴油的正己烷液相，棄置下層的固體不溶物，固體不溶物包含色素等雜質(zhì)。將取出的上層液相在50攝氏度蒸發(fā)回收正己烷，得到的剩余油相即可用作汽車發(fā)動機燃料的生物柴油產(chǎn)品。通過在生物柴`油產(chǎn)品中加入濃度為4.3mg/ml的內(nèi)標(biāo)樣C19:0的脂肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)品，采用色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀進(jìn)行定量分析成分。
[0039]在本實施例中，將螺旋藻替換成微囊藻和魚腥藻，也能得到可用作汽車發(fā)動機燃料的生物柴油產(chǎn)品。
[0040]最后，需要注意的是，以上列舉的僅是本發(fā)明的具體實施例。顯然，本發(fā)明不限于以上實施例，還可以有很多變形。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員能從本發(fā)明公開的內(nèi)容中直接導(dǎo)出或聯(lián)想到的所有變形，均應(yīng)認(rèn)為是本發(fā)明的保護(hù)范圍。
【權(quán)利要求】
1.利用濕藻生物質(zhì)微波加熱一步法制取生物柴油的方法，其特征在于，具體包括下述步驟: (1)取微藻液體，采用過濾或離心方法使微藻液體脫除水分，得到固體含水量為40~.90%的濕藻生物質(zhì)； (2)稱取I~100g步驟(1)中制得的濕藻生物質(zhì)放入離心管內(nèi)，加入4~100ml氯仿和4~100ml甲醇，將離心管放在均質(zhì)機上震動20~40s，然后將離心管內(nèi)的藻液倒入微波消解罐內(nèi)，再向微波消解罐內(nèi)加入0.2~5ml的濃度為98%的濃硫酸，將微波消解罐密封后放入微波爐中進(jìn)行微波處理； (3)微波處理的方法為:將微波爐的功率設(shè)定為500~1000?，處理40~80s，當(dāng)微波消解罐的溫度達(dá)到60~90攝氏度后，將微波爐的功率降低為400~600w，并恒溫保持2~.60min ;微波處理結(jié)束后，冷卻微波消解罐10~20min，使微波消解罐的溫度降低到25~30攝氏度，然后將微波消解罐中的藻液倒到藻液收集瓶中，再向微波消解罐內(nèi)兩次加入4~.100ml的氯仿，依次分別提取殘余的藻液，倒入藻液收集瓶中； (4)向藻液收集瓶中加入15~300ml的去離子水,在4000rpm下離心5min分層,下層為油相，中間為藻渣，上層為水相；用移液槍取出下層油相，再向藻液收集瓶中兩次加入10~.200ml的去離子水,使殘余的甲醇和甘油溶解于水,依次分別再在4000rpm下離心5min分層，再分別用移液槍提取下層的油相； (5)使用烘箱烘干步驟(4)中提取出的油相中的氯仿，油相中剩余的即為生物油，稱取得到的生物油重量；將生物油倒入玻璃瓶中，再向玻璃瓶中添加I~100ml的正己烷，靜置.30分鐘后，用移液槍取出上層的溶解了生物柴油的正己烷液相，棄置下層的固體不溶物，將取出的上層液相在50~70攝氏度下蒸發(fā)回收正己烷，剩余油相即為能用作汽車發(fā)動機燃料的生物柴油產(chǎn)品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用濕藻生物質(zhì)微波加熱一步法制取生物柴油的方法，其特征在于，所述步驟(1)中的微藻液體是生物質(zhì)密度為I~10g/L的微藻液體，包括從自然環(huán)境中篩選得到的天然藻種、物理化學(xué)誘變得到的藻種突變體、經(jīng)過基因改良得到的轉(zhuǎn)基因藻種。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用濕藻生物質(zhì)微波加熱一步法制取生物柴油的方法，其特征在于，所述步驟(1)中的微藻液體的藻種采用藻細(xì)胞干重的油脂含量為10%~70%的藻種，包括綠藻、硅藻、藍(lán)藻。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用濕藻生物質(zhì)微波加熱一步法制取生物柴油的方法，其特征在于，所述步驟(3)中微波處理的頻率為2450MHz或者915MHz。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用濕藻生物質(zhì)微波加熱一步法制取生物柴油的方法，其特征在于，所述微波消解罐采用容量為50~300ml的消解罐，在步驟(3)中，進(jìn)行微波處理的密封的微波消解罐數(shù)量為4~10個。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用濕藻生物質(zhì)微波加熱一步法制取生物柴油的方法，其特征在于，所述步驟(2)中，向離心管中加入的氯仿與甲醇的體積比為1:1。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用濕藻生物質(zhì)微波加熱一步法制取生物柴油的方法，其特征在于，所述步驟(5)中制 得的生物油中含有C14~C22的脂肪酸甲酯，且占生物油總量的.50 ~80%ο
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用濕藻生物質(zhì)微波加熱一步法制取生物柴油的方法，其特征在于，所述步驟(5)中制得的生物柴油產(chǎn)品，通過在生物柴油產(chǎn)品中加入濃度為3.8~.4.3mg/ml的內(nèi)標(biāo)樣C19:0的脂肪酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)品，能采用氣相色譜儀或者色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀進(jìn)行定量分析成 分。
【文檔編號】C10L1/02GK103756777SQ201410026841
【公開日】2014年4月30日 申請日期:2014年1月21日 優(yōu)先權(quán)日:2013年1月22日
【發(fā)明者】程軍, 岑可法, 周俊虎, 王智化, 楊衛(wèi)娟, 張彥威, 劉建忠, 黃鎮(zhèn)宇, 周志軍 申請人:浙江大學(xué)