一種含阿霉素的抗腫瘤膠束的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種含阿霉素的抗腫瘤膠束的制備方法，包括：利用原子轉(zhuǎn)移自由基聚合方法聚合丙烯酸，得到聚丙烯酸；聚丙烯酸利用葉酸分子進(jìn)行修飾；利用開環(huán)聚合方法聚合谷氨酸芐酯羧酸酐，得到聚谷氨酸芐酯；聚谷氨酸芐酯通過腙鍵接枝阿霉素；將聚丙烯酸和聚谷氨酸芐酯通過點(diǎn)擊化學(xué)方法進(jìn)行鍵連，得到嵌段共聚物；將嵌段聚合物分別溶解于四氫呋喃后，移入透析袋中，用純水透析，透析液用濾膜過濾；過濾后的溶液進(jìn)行冷凍干燥，得到載藥膠束。該藥物載體膠束具有核殼雙層結(jié)構(gòu)，外層為親水性聚丙烯酸，內(nèi)層為藥物分子包裹層。該材料具有以下優(yōu)點(diǎn)：屬于納米微粒；可實(shí)現(xiàn)藥物對(duì)癌細(xì)胞靶向傳遞以及癌細(xì)胞內(nèi)pH敏感性釋放；載藥量大；穩(wěn)定性好；其靶向功能可有效減小藥物對(duì)正常組織器官毒副作用。
【專利說明】一種含阿霉素的抗腫瘤膠束的制備方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種含阿霉素的抗腫瘤膠束的制備方法，特別是涉及一種具有癌癥細(xì) 胞靶向性的嵌段高分子材料藥物載體膠束的制備方法。屬于高分子化學(xué)及聚合物技術(shù)領(lǐng) 域。

【背景技術(shù)】
[0002] 癌癥已成為危害人類健康的最主要疾病，治療癌癥的重要手段之一是藥物治療， 然而許多抗癌藥物存在著難溶于水、穩(wěn)定性差等缺陷。如喜樹堿、紫杉醇、阿霉素、5-氟尿嘧 啶等都因溶解度差而難以被生物體很好地利用，解決其水溶性問題是這類藥物制劑臨床 應(yīng)用的關(guān)健。此外，腫瘤治療和診斷藥物其作用大多是非選擇性的，一些正常組織器官常有 較多分布，治療劑量下對(duì)正常組織器官毒副作用大。故解決如何增溶難溶性抗癌藥物以及 增加藥物穩(wěn)定性、提高對(duì)癌細(xì)胞的選擇性迫在眉睫。因此，尋找一種可靠的靶向藥物載體是 解決以上兩個(gè)問題的關(guān)鍵。
[0003] 高分子膠束藥物載體一般采用的都為線性高分子膠束。Bae課題組開展的研 究工作最為引人注目，其在所發(fā)表的研究論文中指出，以腙鍵將Dox鍵連到聚合物主鏈 上，并利用癌細(xì)胞微環(huán)境中PH呈弱酸性使腙鍵斷裂，實(shí)現(xiàn)了 Dox的靶點(diǎn)釋放。而且， Bae 于 2005 年在 Molecular BioSystems 雜志上發(fā)表的一篇論文（Bae Y, Jang W-D, Nishiyama N, Fukushima S, Kataoka K. #〇/ 2005; 1 (3): 242-250.),首次 同時(shí)將Fol和Dox分別鍵連到PEG以及PASP (聚天冬氨酸）上，從而兼具藥物的靶向傳遞 以及靶點(diǎn)釋放多功能性，流式細(xì)胞實(shí)驗(yàn)（FCM)表明細(xì)胞對(duì)聚合物膠束的攝入量較不含F(xiàn)ol 的聚合物膠束有明顯增加。Gong Shaoqin課題組也從事了相似的研究。其以聚馬來酸 -E-己內(nèi)酯無規(guī)共聚物為內(nèi)核，PEG為殼，制備了聚合物納米膠束。以腙鍵連接Dox，并利用 Fol修飾了 PEG端基，制備了 pH敏感型靶向載藥膠束，測試了細(xì)胞攝入量以及細(xì)胞毒性，證 明在酸性條件下Dox由于腙鍵的斷裂而快速釋放（Yang X，Grailer JJ, Pilla S, Steeber DA, Gong S. 收ate ^6? 2010; 21(3): 496-504.)。
[0004] 盡管線性聚合物膠束作為水難溶性藥物的載體，在遞藥過程中已顯示出巨大的優(yōu) 勢和潛力，但仍然存在膠束穩(wěn)定性差、增溶效果不明顯、藥物釋放率低的問題。目前聚合物 膠束的載藥量通常只能達(dá)到5%左右，要獲得更高的載藥量很困難。研究發(fā)現(xiàn)，聚合物通過 化學(xué)鍵連接藥物單體，可達(dá)到較高的載藥量。而線性嵌段共聚物負(fù)載能力往往偏低，但如果 過多鍵連藥物分子其膠束結(jié)構(gòu)又不穩(wěn)定。而星型聚合物可以克服這個(gè)不足。
[0005] 上海交通大學(xué)顏德岳（Liu J, Pang Y, Huang W, Huang X，Meng L, Zhu X，Zhou Y, Yan D. 2011; 12(5): 1567-1577.)合成了樹枝狀聚憐酸醋-聚 乳酸嵌段共聚物應(yīng)用于藥物載體研究，包裹Dox后對(duì)海拉細(xì)胞有明顯抑制作用。另一具有 代表性的研究是中國科技大學(xué)劉世勇，利用功能化P-環(huán)糊精制備了用Fol和Dox修飾的聚 馬來酸酐星型聚合物，同時(shí)鍵連了對(duì)磁共振效應(yīng)敏感的釓元素，在小鼠實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，聚合物 膠束在肝、腎部位的聚集有明顯加強(qiáng)（Liu T, Li X，Qian Y, Hu X，Liu S. 2012; 33(8): 2521-2531. )〇
[0006] 但是，由于星型聚合物中聚合物結(jié)構(gòu)較為復(fù)雜，所制備的藥物載體出現(xiàn)生物相容 性差，藥物包載能力下降，dendrimer表面藥物分子水溶性降低等問題。此外，dendrimer結(jié) 構(gòu)復(fù)雜，合成成本較高。這些問題都限制了星型聚合物納米載藥系統(tǒng)的應(yīng)用。因此，不論是 性聚合物還是普通星型聚合物藥物載體，并不能同時(shí)具備：藥物靶向性，高藥物負(fù)載能力， 膠束結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，靶點(diǎn)釋放的PH敏感性，生物相容性高這幾項(xiàng)對(duì)聚合物藥物載體系統(tǒng)的臨床 應(yīng)用起至關(guān)重要作用的性能。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明的目的是建立一種含阿霉素的抗腫瘤膠束的制備方法，該藥物載體膠束具 有以下優(yōu)點(diǎn)：屬于納米微粒；可實(shí)現(xiàn)藥物對(duì)癌細(xì)胞靶向傳遞以及癌細(xì)胞內(nèi)PH敏感性釋放； 載藥量大；穩(wěn)定性好；其靶向功能可有效減小藥物對(duì)正常組織器官毒副作用。
[0008] 該膠束是一種具有親水性和疏水性嵌段的星型嵌段聚合物；可以將阿霉素鍵連與 嵌段聚合物之上；高分子材料具有兩條親水鏈段，一條疏水鏈段：高分子材料其親水段為 聚丙烯酸，通過葉酸進(jìn)行修飾。疏水段為聚谷氨酸，通過腙鍵接枝阿霉素；高分子的膠束結(jié) 構(gòu)具有核殼雙層結(jié)構(gòu)，外層為親水性聚丙烯酸，內(nèi)層為藥物分子包裹層。
[0009] 所述的嵌段聚合物為以下結(jié)構(gòu)式中的聚合物：

【權(quán)利要求】
1. 一種含阿霉素的抗腫瘤膠束，其結(jié)構(gòu)特征在于：所述的高分子材料是由兩條親水性 的聚丙烯酸鏈段和一條疏水性的聚谷氨酸芐酯鏈段偶聯(lián)而成的ab2型共聚物。
2. -種制備權(quán)利要求1所述的含阿霉素的抗腫瘤膠束的方法是通過如下步驟進(jìn)行的： 1) 用于引發(fā)丙烯酸單體的疊氮小分子引發(fā)劑的合成； 2) 利用葉酸小分子進(jìn)行NHS活化，制備葉酸-NHS分子； 3) 利用步驟1)所制備的疊氮小分子引發(fā)劑，引發(fā)丙烯酸小分子進(jìn)行原子轉(zhuǎn)移自由基聚 合，得到聚丙烯酸，同時(shí)利用葉酸-NHS分子修飾聚丙烯酸； 4) 雙臂炔端基聚谷氨酸芐酯的合成； 5) 利用阿霉素分子對(duì)聚谷氨酸芐酯進(jìn)行接枝，該反應(yīng)是利用腙鍵進(jìn)行連接； 6) 利用點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng)合成星型嵌段共聚物； 7) 用透析法制備聚合物納米膠束。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種含阿霉素的抗腫瘤膠束，其特征在于上述方法中步驟1) 所合成疊氮小分子引發(fā)劑所使用的溶劑是丙酮、丁酮、二氧六環(huán)、乙腈中的任一種。
4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種含阿霉素的抗腫瘤膠束，其特征還在于上述方法中步驟 4)所使用的聚合單體為谷氨酸芐酯羧酸酐。
5. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種含阿霉素的抗腫瘤膠束，其特征還在于上述方法中步驟 6)所進(jìn)行的聚合物偶合反應(yīng)須采用Huisgen 1，3-偶極環(huán)加成反應(yīng)。
6. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種含阿霉素的抗腫瘤膠束，其特征還在于上述方法中需采 用以下小分子引發(fā)劑： 1) 2-氯代疊氮乙氧基乙烷 2. N-胺乙基3, 5-二乙炔氧基苯胺。
7. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的含阿霉素的抗腫瘤膠束，其特征還在于：該高分子材料是由 葉酸修飾的聚丙烯酸鏈段和阿霉素接枝的聚谷氨酸通過偶聯(lián)所形成的星型嵌段共聚物。
8. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的含阿霉素的抗腫瘤膠束，其特征還在于：所述的高分子膠束 具有核殼雙層結(jié)構(gòu)，外層為親水性聚丙烯酸，內(nèi)層為藥物分子包裹層。
【文檔編號(hào)】B82Y5/00GK104415010SQ201310389647
【公開日】2015年3月18日 申請(qǐng)日期:2013年8月30日 優(yōu)先權(quán)日:2013年8月30日
【發(fā)明者】不公告發(fā)明人 申請(qǐng)人:成都市綠科華通科技有限公司