一種微納米管及其制備方法與應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種微納米管及其制備方法與應(yīng)用。所述微納米管的制備方法包括如下步驟：(1)將多孔道模板依次浸入到帶正電的大分子溶液和帶負(fù)電的大分子溶液中進(jìn)行吸附至少2次，在所述多孔道模板上得到靜電層層組裝的微納米管外壁支架；(2)將經(jīng)步驟(1)處理后的多孔道模板依次浸入到帶負(fù)電的次氮基三乙酸修飾的大分子溶液和具有絡(luò)合能力的金屬鹽溶液中進(jìn)行吸附，在所述多孔道模板上得到功能化的微納米管；(3)去除所述多孔道模板，即得到所述微納米管。本發(fā)明可以選擇性的功能化微納米管的內(nèi)外壁，這樣微納米管的內(nèi)外壁都可以用來引導(dǎo)微管的運(yùn)動。本發(fā)明微納米管不但可以作為軌道控制微管的運(yùn)動，還能同時(shí)作為貨物運(yùn)輸?shù)耐ǖ馈?br> 【專利說明】一種微納米管及其制備方法與應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001 ] 本發(fā)明涉及一種微納米管及其制備方法與應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]驅(qū)動蛋白(kinesin)能利用ATP水解所釋放的能量驅(qū)動自身及所攜帶的貨物分子沿微管運(yùn)動的一類馬達(dá)蛋白，與細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)運(yùn)輸有關(guān)。它的一端有ATP催化位點(diǎn)和與微管結(jié)合的位點(diǎn)，另一端則負(fù)責(zé)連接運(yùn)輸?shù)摹柏浳铩?。微管是?qū)動蛋白運(yùn)輸貨物的軌道。在真核細(xì)胞內(nèi)，驅(qū)動蛋白沿微管的負(fù)極向正極運(yùn)動。
[0003]驅(qū)動蛋白kinesin可以高效率的將ATP水解能轉(zhuǎn)化為機(jī)械能，轉(zhuǎn)換率高達(dá)50%，是人類設(shè)計(jì)機(jī)器轉(zhuǎn)化率的兩倍，而且這些納米級的分子馬達(dá)能夠以很高的速度負(fù)載比自身重幾千倍的物質(zhì)?；谝陨系忍攸c(diǎn)，在仿生體系的設(shè)計(jì)中，這些分子馬達(dá)有很大的應(yīng)用潛力。例如可以利用馬達(dá)-微管系統(tǒng)在體外實(shí)現(xiàn)微納米級水平上的物質(zhì)運(yùn)輸，該體系還可用于分子篩選或者作為傳感器，實(shí)現(xiàn)對外界微小變化的敏感響應(yīng)。體外重建驅(qū)動蛋白一微管體系有兩種模型，一種是滑動模型，即將驅(qū)動蛋白固定在基底上，微管在基底驅(qū)動蛋白的驅(qū)動下運(yùn)動；另一種是珠動模型，即將微管固定在基底，驅(qū)動蛋白沿基底固定的微管運(yùn)動。在滑動模型中，由于驅(qū)動蛋白是隨機(jī)的鋪在基底上的，因而微管在基地的運(yùn)動也是雜亂無章的。微管體外的這一無序運(yùn)動極大地限制這一體系在構(gòu)筑納米級器械的應(yīng)用。近年來，人們做了大量的嘗試來控制微管的運(yùn)動由無序向有方向性的運(yùn)動。如利用光刻技術(shù)在基底刻蝕出微納米級軌道來控制微管的運(yùn)動，或者利用流體場作用引導(dǎo)微管的運(yùn)動。但上述方法都存在一定的缺陷。如用軌道刻蝕法工藝復(fù)雜，對軌道要求有精密計(jì)算，同時(shí)又無法避免微管脫軌的問題，而流體場又要求有不斷的流體供給等等。另外，以往在基底固定驅(qū)動蛋白(kinesin)，是通過簡單的物理吸附實(shí)現(xiàn)的。這樣的固定方法對驅(qū)動蛋白的微管結(jié)合端和貨物結(jié)合端沒有選擇性，這樣不僅僅是貨物結(jié)合端，驅(qū)動蛋白的微管結(jié)合端也可能被基底固定，不利于驅(qū)動蛋白完全發(fā)揮推進(jìn)微管運(yùn)動的功能。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的是提供一種微納米管及其制備方法與應(yīng)用，本發(fā)明提供的微納米管可定向固定驅(qū)動蛋白并能用于控制微管運(yùn)動方向，同時(shí)能夠作為一種微納米級貨物運(yùn)輸?shù)倪\(yùn)輸通道。
[0005]本發(fā)明所提供的微納米管的制備方法，包括如下步驟:
[0006](I)將多孔道模板依次浸入到帶正電的大分子溶液和帶負(fù)電的大分子溶液中進(jìn)行吸附至少2次，在所述多孔道模板上得到靜電層層組裝的微納米管外壁支架；
[0007](2)將經(jīng)步驟(I)處理后的多孔道模板依次浸入到次氮基三乙酸修飾的大分子溶液和具有絡(luò)合能力的金屬鹽溶液中進(jìn)行吸附，在所述多孔道模板上得到功能化的微納米管；
[0008](3)去除所述多孔道模板，即得到所述微納米管；[0009]所述帶正電的大分子溶液、所述帶負(fù)電的大分子溶液和所述次氮基三乙酸修飾的大分子溶液中的大分子均為聚電解質(zhì)、蛋白質(zhì)或多糖，
[0010]所述聚電解質(zhì)具體為PAH (聚烯丙基氯化銨)、DSS (葡聚糖硫酸酯)、PSS(聚苯乙烯磺酸鈉)；
[0011]所述蛋白質(zhì)具體為血紅蛋白、細(xì)胞色素C、過氧化氫酶，牛血清蛋白；
[0012]所述多糖具體為CHI (殼聚糖)、ALG (海藻酸鈉)。
[0013]上述的制備方法中，所述帶正電的大分子溶液、所述帶負(fù)電的大分子溶液和所述次氮基三乙酸修飾的大分子溶液中均含有氯化鈉，所述氯化鈉的濃度可為0.1?0.5M，具體可為0.3M ;
[0014]所述帶正電的大分子溶液中所述大分子的濃度可為I?5mg/mL,具體可為2mg/mL ；
[0015]所述帶負(fù)電的大分子溶液中所述大分子的濃度可為I?5mg/mL，具體可為2mg/mL ；
[0016]所述次氮基三乙酸修飾的大分子溶液中所述大分子的濃度可為I?5mg/mL。
[0017]上述的制備方法中，所述多孔道模板可為聚碳酸酯模板或三氧化二鋁模板，孔徑為0.2?5微米，長度為10?100微米，模板內(nèi)壁孔通道可以是圓筒形也可以是圓錐筒形、多方體形及其它通道形狀。
[0018]上述的制備方法中，若多孔道模板用聚碳酸酯，則去除模板的溶劑可以是N，N-二甲基甲酰胺、二氯甲烷等其他能溶解聚碳酸酯的溶劑；若多孔道模板用三氧化二鋁模板，則去除模板的溶劑可以為氫氧化鈉溶液(濃度為0.1?2M)、硫酸(濃度為0.1?2M)等能溶
解三氧化二鋁的溶液。
[0019]上述的制備方法中，所述金屬鹽溶液中的金屬離子為鎳離子、銅離子或鋅離子；
[0020]所述金屬鹽溶液的濃度可為0.05?0.2M,具體可為0.2M。
[0021]上述的制備方法中，步驟(I)中，所述吸附的時(shí)間可為5?60分鐘，如40分鐘；
[0022]步驟⑵中，在所述次氮基三乙酸修飾的大分子溶液進(jìn)行吸附的時(shí)間可為5?60分鐘，如20分鐘，在所述金屬鹽溶液中進(jìn)行吸附的時(shí)間可為0.5?4小時(shí)，如2小時(shí)。
[0023]本發(fā)明進(jìn)一步提供了由上述方法制備得到的微納米管，其長度為10?100微米、厚度(壁厚)為5?200納米、直徑為0.2?5微米，如制備得到的長度為23微米、厚度為80納米以及直徑為3微米的微納米管。
[0024]本發(fā)明提供的微納米管可用于控制微管的運(yùn)動。
[0025]本發(fā)明提供的微納米管經(jīng)驅(qū)動蛋白修飾，此時(shí)驅(qū)動蛋白會特異并定向地被固定在上述微納米管的內(nèi)壁上，引入微管后，由于微納米管內(nèi)外的驅(qū)動蛋白存在濃度差，微管接觸到微納米管后就會被內(nèi)壁高濃度的驅(qū)動蛋白的牽引下沿著微納米管的內(nèi)壁做一維直線運(yùn)動。優(yōu)選驅(qū)動蛋白為外源質(zhì)粒在大腸桿菌中轉(zhuǎn)化和表達(dá)的驅(qū)動蛋白；所述驅(qū)動蛋白溶液的濃度為10?100 μ g/ml。
[0026]優(yōu)選地，所述微納米管內(nèi)壁經(jīng)酪蛋白溶液預(yù)修飾后，再經(jīng)驅(qū)動蛋白溶液修飾。微納米管固定驅(qū)動蛋白有特異吸附和物理吸附兩種形式。酪蛋白預(yù)修飾可以促進(jìn)微納米管內(nèi)壁對驅(qū)動蛋白的物理吸附，且酪蛋白作為緩沖層有助于保持驅(qū)動蛋白的生物活性；所述酪蛋白的濃度優(yōu)選為0.2?lmg/ml。[0027]本方法還提供了利用所述微納米管控制微管運(yùn)動的方法，包括如下步驟:
[0028](I)將所述微納米管與驅(qū)動蛋白進(jìn)行混合孵育，得到驅(qū)動蛋白修飾的微納米管；
[0029](2)配制含有除氧劑和ATP的微管溶液，將所述微管溶液與所述驅(qū)動蛋白修飾的微納米管進(jìn)行混合，在所述微納米管內(nèi)外驅(qū)動蛋白濃度差的驅(qū)動下，引導(dǎo)微管在所述微納米管內(nèi)部直線運(yùn)動，從而實(shí)現(xiàn)控制微管的運(yùn)動；
[0030]所述除氧劑由葡糖糖、葡萄糖氧化酶、過氧化氫酶和β -巰基乙醇組成；
[0031]所述微管溶液中，所述ATP的濃度為0.5?3mM，如0.5mM，所述微管的濃度為I?20 μ g/mL,如4 μ g/mL,所述葡萄糖的濃度為10?20mM,如IOmM,所述葡萄糖氧化酶的濃度為10?20 μ g/mL,如10 μ g/mL,所述過氧化氫酶的濃度為4?8 μ g/mL,如8 μ g/mL,所述β -巰基乙醇的質(zhì)量百分含量為0.5?1%，如0.5%。
[0032]本發(fā)明提供的微納米管可作為微納米級貨物運(yùn)輸?shù)倪\(yùn)輸通道。
[0033]本發(fā)明提供了一種運(yùn)輸體系，包括所述微納米管、連接在微納米管上的驅(qū)動蛋白、微管、除氧劑和ATP。
[0034]本發(fā)明進(jìn)一步提供了利用所述微納米管實(shí)現(xiàn)微納米級貨物運(yùn)輸?shù)姆椒?，包括如下步驟:
[0035](I)將所述微納米管與驅(qū)動蛋白進(jìn)行混合孵育，得到驅(qū)動蛋白修飾的微納米管；
[0036](2)將微管與微納米級貨物進(jìn)行混合孵育；然后加入除氧劑和ΑΤΡ，得到微管-貨物溶液；
[0037]所述除氧劑由葡糖糖、葡萄糖氧化酶、過氧化氫酶和β -巰基乙醇組成；
[0038](3)將所述微管-貨物溶液與所述驅(qū)動蛋白修飾的微納米管進(jìn)行混合，在微納米管內(nèi)外驅(qū)動蛋白濃度差的驅(qū)動下，連接在微管的貨物隨微管進(jìn)入微納米管中，并在管內(nèi)壁固定的驅(qū)動蛋白的驅(qū)動下，以微納米管為通道穿出微納米管，實(shí)現(xiàn)物質(zhì)運(yùn)輸。
[0039]所述除氧劑的組成如下:10?20mM的葡萄糖、10?20 μ g/mL的葡萄糖氧化酶、4-8 μ g/mL的過氧化氫酶和0.5?Iwt %的β -巰基乙醇，如IOmM的葡萄糖、10 μ g/mL的葡萄糖氧化酶、4 μ g/mL的過氧化氫酶和0.5wt%的β -巰基乙醇。
[0040]本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn):
[0041](I)本發(fā)明提供的制備微納米管的方法，操作簡單，成本低廉；
[0042](2)本發(fā)明提供的微納米管的壁材多樣，能利用多種具有生物兼容性的材料作為壁材；
[0043](3)微納米管的尺寸及壁厚可依模板及組裝層數(shù)的改變而方便調(diào)節(jié)；
[0044](4)引入了 NTA的金屬配合物來特異的固定驅(qū)動蛋白的貨物結(jié)合端，使驅(qū)動蛋白的微管結(jié)合端完全的裸露出來，保證了固定在微納米管壁上的驅(qū)動蛋白的活性，并使驅(qū)動蛋白可以完全被利用；
[0045](5)可以選擇性的功能化微納米管的內(nèi)外壁，這樣微納米管的內(nèi)外壁都可以用來引導(dǎo)微管的運(yùn)動。
[0046](6)微納米管不但可以作為軌道控制微管的運(yùn)動，還能同時(shí)作為貨物運(yùn)輸?shù)耐ǖ?。【專利附圖】

【附圖說明】
[0047]圖1為本發(fā)明實(shí)施例1制備的微納米管的掃描電鏡、透射電鏡及共聚焦圖片。[0048]圖2為本發(fā)明利用實(shí)施例1制備的微納米管進(jìn)行控制微管運(yùn)動方向?qū)嵗墓簿劢箞D。
【具體實(shí)施方式】
[0049]下述實(shí)施例中所使用的實(shí)驗(yàn)方法如無特殊說明，均為常規(guī)方法。
[0050]下述實(shí)施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑得到。
[0051]實(shí)施例1、制備微納米管
[0052](I)以孔徑為3 μ m、厚度為23 μ m的聚碳酸酯為模板，以PAH (聚烯丙基氯化銨)、DSS (葡聚糖硫酸酯)為壁材制備微納米管支架，步驟如下:
[0053]首先，將模板浸入到含有2mg/ml PAH和0.3M NaCl的溶液中吸附20分鐘，用只含
0.3M NaCl的溶液洗3次，得到了孔表面吸附了 PAH的模板；然后將上述得到的模板再浸入到含2mg/ml DSS和0.3M NaCl的溶液中吸附20分鐘，用只含0.3M NaCl的溶液洗3次，得到在PAH膜表面吸附了 DSS膜的模板；重復(fù)上述兩個(gè)吸附過程29次，再將模板浸入到含有2mg/ml PAH和0.3M NaCl的溶液中吸附20分鐘，得到內(nèi)表面帶正電的微納米管支架。
[0054](2)用N1-NTA功能化微納米管內(nèi)表面，步驟如下:
[0055]將⑴得到的微納米管浸入到含2mg/ml NH2-NTA (N α，N α - 二(羧甲基)-L-賴氨酸)修飾的ALG(海藻酸鈉)的NaCl (0.3Μ)溶液中吸附20分鐘，然后用只含0.3Μ NaCl的溶液洗3次，再浸入到0.2Μ的NiCl2中吸附2小時(shí)，完成微納米管的功能化，這樣處理的微納米管可以在特異的在內(nèi)壁與驅(qū)動蛋白的貨物端反應(yīng)，而驅(qū)動蛋白與微管作用的一端則可以裸露在外端驅(qū)動微管運(yùn)動。
[0056](3)將⑵得到的功能化的微納米管浸入到二氯甲烷中，去除模板，得到無模板支撐的單分散的可以特異的固定驅(qū)動蛋白貨物端的微納米管。
[0057]本實(shí)施例制備的微納米管的掃描電鏡、透射電鏡及共聚焦圖片如圖1所示，由該圖可知，本實(shí)施例制備的微納米管的長度為23微米，壁厚為80納米，直徑為3微米。
[0058]實(shí)施例2、制備微納米管
[0059](I)以孔徑為0.4 μ m、厚度為60 μ m的三氧化二鋁為模板，以CHI (殼聚糖)、ALG為壁材制備微納米管支架，步驟如下:
[0060]首先，將模板浸入到含有2mg/ml CHI和0.3M NaCl的溶液中吸附20分鐘，用只含
0.3M NaCl的溶液洗3次，得到了孔表面吸附了 CHI的模板；然后將上述步驟得到的模板再浸入到含2mg/ml ALG和0.3M NaCl的溶液中吸附20分鐘，用只含0.3M NaCl的溶液洗3次，得到在CHI膜表面吸附了 ALG膜的模板；重復(fù)上述兩個(gè)吸附過程4次，再將模板浸入到含有2mg/ml CHI和0.3M NaCl的溶液中吸附20分鐘，得到內(nèi)表面帶正電的微納米管支架。
[0061](2)用Zn-NTA功能化微納米管內(nèi)表面，步驟如下:
[0062]將(I)得到的微納米管浸入到含2mg/ml NH2-NTA修飾的ALG的NaCl (0.3M)溶液中吸附20min，然后用只含0.3M NaCl的溶液洗3次，再浸入到0.2M的ZnSO4中吸附2小時(shí)，完成微納米管的功能化，這樣處理的微納米管可以在特異的在內(nèi)壁與驅(qū)動蛋白的貨物端反應(yīng)，而驅(qū)動蛋白與微管作用的一端則可以裸露在外端驅(qū)動微管運(yùn)動。
[0063](3)將⑵得到的功能化的微納米管浸入到N，N_二甲基亞甲砜中，去除模板，得到無模板支撐的單分散的可以特異的固定驅(qū)動蛋白貨物端的微納米管。[0064]本實(shí)施例制備的微納米管的長度為23微米、壁厚為80納米、直徑為3微米。
[0065]實(shí)施例3、利用微納米管控制微管的運(yùn)動
[0066](I)將實(shí)施例1制備的微納米管分散液(溶劑為BRB80緩沖溶液)與60 μ g/ml的驅(qū)動蛋白水溶液混合孵育30分鐘；
[0067](2)配制含除氧劑和ATP的微管溶液，其中，微管濃度為4 μ g/ml，除氧劑的組成如下:10mM的葡萄糖、10μ g/mL的葡萄糖氧化酶、4 μ g/mL的過氧化氫酶和0.5重量％的β -巰基乙醇，ATP的濃為0.5mM。
[0068]為便于觀察，微管由羅丹明標(biāo)記的微管蛋白和未標(biāo)記的微管蛋白以1:4的比例混合后聚合而成。
[0069](3)將該微管溶液與(2)的溶液混合，注入用載玻片及雙面膠制成的流體池中，用激光共聚焦顯微鏡觀察微管沿微納米管內(nèi)壁的運(yùn)動形態(tài)。
[0070]顯微鏡配有60Xoil物鏡，掃描圖像如圖2所示，其中顯出的白色線狀物表示微管，白色管狀物表示微納米管。從圖2中可以看出，在管內(nèi)驅(qū)動蛋白的牽引下，微管很好地沿著微納米管的內(nèi)壁做直線運(yùn)動。
[0071]實(shí)施例4、利用微納米管控制微管的運(yùn)動
[0072]孔徑3 μ m、厚度23 μ m的聚碳酸酯為模板，NH2-NTA修飾的PAH為功能層，PAH和PSS(聚苯乙烯磺酸鈉)為微納米管支撐壁材，制備外壁功能化的微納米管。
[0073](I)先將模板浸入到含2mg/ml NH2-NTA修飾的PAH的NaCl (0.3M)溶液中吸附20分鐘，然后用只含0.3M NaCl的溶液洗3次，然后將上述步驟得到的模板再浸入到含2mg/mlPSS和0.3M NaCl的溶液中吸附20分鐘，用只含0.3M NaCl的溶液洗3次，再將模板浸入到含有2mg/ml PAH和0.3M NaCl的溶液中吸附20分鐘，用只含0.3M NaCl的溶液洗3次，重復(fù)上述兩個(gè)吸附過程29次，得到外表面功能化的微納米管。
[0074](2)將帶模板的微納米管浸入的二氯甲烷中，除去模板，得到單分散的微納米管。再將該微納米管浸入到0.2M的CuCl2中，吸附2小時(shí)。
[0075](3)將上述微納米管與驅(qū)動蛋白溶液混合孵育30分。
[0076](4)制備含除氧劑和ATP的微管溶液，微管濃度為4 μ g/ml，除氧劑的組成如下:IOmM的葡萄糖、10 μ g/mL的葡萄糖氧化酶、4 μ g/mL的過氧化氫酶和0.5重量％的β -巰基乙醇，ATP的濃度為0.5禮。為便于觀察，微管由羅丹明標(biāo)記的微管蛋白和未標(biāo)記的微管蛋白以1:4的比例混合后聚合而成。
[0077](5)將(3)和(4)的溶液混合，注入流體池中，用共聚焦顯微鏡觀察微管沿微納米管外壁線性運(yùn)動的情況。
[0078]結(jié)果表明，在固定在微納米管外壁的驅(qū)動蛋白的牽引下，微管很好地沿著微納米管的外壁直線前進(jìn)。
[0079]實(shí)施例5、微納米管作為貨物運(yùn)輸通道
[0080](I)將實(shí)施例1制備的微納米管分散液(溶劑為BRB80緩沖溶液)與60 μ g/ml的驅(qū)動蛋白水溶液混合孵育30分；
[0081](2)微膠囊與貨物載體微管溶液混合孵育:將微膠囊和微管按1:50的比例(摩爾比)混合，在冰上孵育30分；
[0082]制備流體液:將⑵和(3)溶液混合，并加入除氧劑和ATP，除氧劑的組成如下:IOmM的葡萄糖、10 μ g/mL的葡萄糖氧化酶、4 μ g/mL的過氧化氫酶和0.5重量％的β -巰基乙醇，ATP的濃度為0.5mM。
[0083]將混合液注入用載玻片及雙面膠制成的流體池中，用激光共聚焦顯微鏡觀察負(fù)載膠囊的微管在微納米管中的運(yùn)動形態(tài)。
[0084]在管內(nèi)驅(qū)動蛋白的牽引下，微管可以負(fù)載著膠囊沿著組裝的微納米管的內(nèi)壁平滑前進(jìn)，實(shí)現(xiàn)體外利用驅(qū)動蛋白-微管這一體系的微納米級貨物運(yùn)輸。
【權(quán)利要求】
1.一種微納米管的制備方法，包括如下步驟: (1)將多孔道模板依次浸入到帶正電的大分子溶液和帶負(fù)電的大分子溶液中進(jìn)行吸附至少2次，在所述多孔道模板上得到靜電層層組裝的微納米管外壁支架； (2)將經(jīng)步驟(1)處理后的多孔道模板依次浸入到帶負(fù)電的次氮基三乙酸修飾的大分子溶液和具有絡(luò)合能力的金屬鹽溶液中進(jìn)行吸附，在所述多孔道模板上得到功能化的微納米管； (3)去除所述多孔道模板，即得到所述微納米管； 所述帶正電的大分子溶液、所述帶負(fù)電的大分子溶液和所述帶負(fù)電的次氮基三乙酸修飾的大分子溶液中的大分子均為聚電解質(zhì)、蛋白質(zhì)或多糖。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于:所述帶正電的大分子溶液、所述帶負(fù)電的大分子溶液和所述次氮基三乙酸修飾的大分子溶液中均含有氯化鈉，所述氯化鈉的濃度為0.1~0.5M ; 所述帶正電的大分子溶液中所述大分子的濃度為I~5mg/mL ； 所述帶負(fù)電的大分子溶液中所述大分子的濃度為I~5mg/mL ； 所述次氮基三乙酸修飾的大分子溶液中所述大分子的濃度為I~5mg/mL。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的制備方法，其特征在于:所述多孔道模板為聚碳酸酯模板或三氧化二鋁模板。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的制備方法，其特征在于:所述金屬鹽溶液中的金屬離子為鎳離子、銅離子或鋅離子； 所述金屬鹽溶液的濃度為0.05~0.2M。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)所述的制備方法，其特征在于:步驟(1)中，所述吸附的時(shí)間為5~60分鐘； 步驟(2)中，在所述帶負(fù)電的次氮基三乙酸修飾的大分子溶液進(jìn)行吸附的時(shí)間為5~60分鐘,在所述金屬鹽溶液中進(jìn)行吸附的時(shí)間為0.5~4小時(shí)。
6.權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述方法制備的微納米管。
7.權(quán)利要求6所述微納米管在控制微管運(yùn)動中的應(yīng)用。
8.利用權(quán)利要求6所述微納米管控制微管運(yùn)動的方法，包括如下步驟: (1)將所述微納米管與驅(qū)動蛋白進(jìn)行混合孵育，得到驅(qū)動蛋白修飾的微納米管； (2)配制含有除氧劑和ATP的微管溶液，將所述微管溶液與所述驅(qū)動蛋白修飾的微納米管進(jìn)行混合，即實(shí)現(xiàn)對微管的運(yùn)動的控制； 所述除氧劑由葡糖糖、葡萄糖氧化酶、過氧化氫酶和巰基乙醇組成； 所述微管溶液中，所述ATP的濃度為0.5~3mM，所述微管的濃度為I~20 μ g/mL，所述葡萄糖的濃度為10~20mM，所述葡萄糖氧化酶的濃度為10~20 μ g/mL，所述過氧化氫酶的濃度為4~Syg/mL，所述β -巰基乙醇的質(zhì)量百分含量為0.5~1%。
9.權(quán)利要求6所述微納米管在作為微納米級貨物運(yùn)輸?shù)倪\(yùn)輸通道中的應(yīng)用。
10.利用權(quán)利要求6所述微納米管實(shí)現(xiàn)微納米級貨物運(yùn)輸?shù)姆椒?，包括如下步驟: (1)將所述微納米管與驅(qū)動蛋白進(jìn)行混合孵育，得到驅(qū)動蛋白修飾的微納米管； (2)將微管與微納米級貨物進(jìn)行混合孵育；然后加入除氧劑和ΑΤΡ，得到微管-貨物溶液；所述除氧劑由葡糖糖、葡萄糖氧化酶、過氧化氫酶和β-巰基乙醇組成； (3)將所述微管-貨物溶液與所述驅(qū)動蛋白修飾的微納米管進(jìn)行混合，即實(shí)現(xiàn)對所述微納米級貨物的運(yùn)輸 。
【文檔編號】B81B1/00GK104016299SQ201410261053
【公開日】2014年9月3日 申請日期:2014年6月12日 優(yōu)先權(quán)日:2014年6月12日
【發(fā)明者】李峻柏, 李潔齡, 賈怡, 董偉光, 馮熙云 申請人:中國科學(xué)院化學(xué)研究所