單體8g，溶解于0.lmol/L,pH為7.4的PBS 20ml中，按終濃度5mmol/ L加入催化劑二價銅離子溶液、按終濃度5mmol/ L加入配體三(2-吡啶基甲基)胺(TPMA)，充分混合，形成澄清溶液；
(3)電誘發(fā)的原子轉(zhuǎn)移自由基聚合:以溴化后的酶電極為工作極，銀/氯化銀電極為參比電極，鉑絲電極為對電極，以前述澄清溶液為反應(yīng)液，構(gòu)建電化學體系；采用恒電位法在-0.15v條件下聚合30小時，由此在酶電極的表面獲得聚合的聚SBMA包被層。將包覆有聚SBMA的酶電極取出清洗，室溫晾干，得到本發(fā)明的PSBMA薄膜。
[0023]當本實施例的聚合時間達到30個小時時，所獲得的包覆有PSBMA薄膜的酶電極用酶聯(lián)免疫法測試，與未包覆有PSBMA薄膜的酶電極相比，其抗蛋白吸附效率為94% (參見圖
3)0
[0024]實施例3:
本實施例的薄膜按以下方法制備:
Cl)酶電極的溴化:先將酶電極置于0.2mol/L、pH=8的PBS中，將5ul BIBB溶于Iml二氯甲烷后，逐滴加入前述PBS中，以800轉(zhuǎn)/分攪拌I小時；取出溴化后的酶電極，以去離子水清洗，室溫晾干；
(2)聚合物單體溶液的制備:取SBMA單體lg，溶解于0.2mol/L、pH為8的PBS 20ml中，按終濃度5mmol/ L加入催化劑二價銅離子溶液、按終濃度lOmmol/ L加入配體BPY，充分混合，形成澄清溶液；
(3)電誘發(fā)的原子轉(zhuǎn)移自由基聚合:以溴化后的酶電極為工作極，銀/氯化銀電極為參比電極，鉑絲電極為對電極，以前述澄清溶液為反應(yīng)液，構(gòu)建電化學體系；采用恒電位法在-0.22v條件下聚合25小時，由此在酶電極的表面獲得聚合的聚SBMA包被層。將包覆有聚SBMA的酶電極取出清洗，室溫晾干，得到本發(fā)明的PSBMA薄膜。
[0025]當本實施例聚合時間達到25個小時，所獲得的包覆有PSBMA薄膜的酶電極用酶聯(lián)免疫法測試，與未包覆有PSBMA薄膜的酶電極相比，其抗蛋白吸附效率為97% (參見圖4)。
[0026]實施例4:
本實施例的薄膜按以下方法制備:
Cl)酶電極的溴化:先將酶電極置于0.2mol/L、pH=8的PBS中，將15ul BIBB溶于Iml二氯甲烷后，逐滴加入前述PBS中，以800轉(zhuǎn)/分攪拌I小時；取出溴化后的酶電極，以去離子水清洗，室溫晾干；
(2)聚合物單體溶液的制備:取聚羧酸甜菜堿甲基丙烯酸酯單體(CBMA)5g，溶解于
0.2mol/L、pH為8的PBS 20ml中，按終濃度30mmol/ L加入催化劑二價銅離子溶液、按終濃度eOmmol/ L加入配體TPMA，充分混合，形成澄清溶液；
(3)電誘發(fā)的原子轉(zhuǎn)移自由基聚合:以溴化后的酶電極為工作極，銀/氯化銀電極為參比電極，鉑絲電極為對電極，以前述澄清溶液為反應(yīng)液，構(gòu)建電化學體系；采用恒電位法在-0.65v條件下聚合32小時，由此在酶電極的表面獲得聚合的PCBMA包被層。將包覆有PCBMA的酶電極取出清洗，室溫晾干，得到本發(fā)明的PCBMA薄膜。
[0027]當本實施例的聚合時間達到32個小時，所獲得的包覆有PCBMA薄膜的酶電極用酶聯(lián)免疫法測試，與未包覆有PCBMA薄膜的酶電極相比，其抗蛋白吸附效率為99%(參見圖5)。
【主權(quán)項】
1.一種具有抗蛋白吸附作用的薄膜，其特征在于:所述薄膜為兩性離子單體的聚合物，所述薄膜包覆在酶電極的表面。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的薄膜，其特征在于:所述薄膜由所述兩性離子單體在所述酶電極的表面通過電誘發(fā)的原子轉(zhuǎn)移自由基聚合反應(yīng)聚合而成。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的薄膜，其特征在于:所述薄膜為聚磺酸甜菜堿甲基丙烯酸酯或聚羧酸甜菜堿甲基丙烯酸酯。
4.根據(jù)權(quán)利要求1至3所述的薄膜，其特征在于:所述薄膜的厚度為10-40納米。
5.一種制備權(quán)利要求1的具有抗蛋白吸附作用的薄膜的方法，其特征是，包括:將兩性離子單體與磷酸鹽緩沖液、催化劑和配體充分混合，形成澄清溶液；將酶電極置于弱堿性的緩沖液中，再加入溴化試劑對所述酶電極進行溴化反應(yīng)，將溴化后的酶電極置入所述澄清溶液中，并以溴化后的酶電極為工作極構(gòu)建電化學體系，采用恒電位法進行電誘發(fā)的原子轉(zhuǎn)移自由基聚合反應(yīng)，在酶電極的表面獲得聚合物薄膜包被層。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征是:所述兩性離子單體為磺酸甜菜堿甲基丙烯酸酯或羧酸甜菜堿甲基丙烯酸酯。
7.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的方法，其特征是:所述配體與催化劑的摩爾濃度比為I?2: I。
8.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的方法，其特征是:所述兩性離子單體在所述澄清溶液中的體積比濃度為5-40%。
9.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的方法，其特征是:所述弱堿性的緩沖液為磷酸鹽緩沖液。
10.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的方法，其特征是:所述催化劑為二價銅離子溶液。
11.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的方法，其特征是:所述溴化試劑為濃度為5-20ul/ml的二溴異丁酰溴溶液。
12.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的方法，其特征是:所述配體為三(2-吡啶基甲基)胺或聯(lián)吡啶。
13.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的方法，其特征是:所述磷酸鹽緩沖液的pH值為7.4?8。
14.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的方法，其特征是:采用所述恒電位法時所用的電壓為-0.15 ?-0.8vo
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種具有抗蛋白吸附作用的薄膜及其制備方法。本發(fā)明薄膜為兩性離子單體的聚合物，薄膜包覆在酶電極的表面。它是由兩性離子單體在酶電極的表面通過電誘發(fā)的原子轉(zhuǎn)移自由基聚合反應(yīng)聚合而成。本發(fā)明薄膜包覆在酶電極的表面，具有良好的抗蛋白吸附能力，同時，保證傳感器高靈敏度檢測；本發(fā)明完全利用電化學手段，過程簡單，可造作性強，時間短，可用于大規(guī)模制備；本發(fā)明薄膜的厚度可控制在10-40納米，通透性好；最多可減少99%的非特異性蛋白質(zhì)吸附。
【IPC分類】C25D9-02, C25B3-00
【公開號】CN104562126
【申請?zhí)枴緾N201410781051
【發(fā)明人】葉學松, 胡一川, 楊光
【申請人】浙江大學
【公開日】2015年4月29日
【申請日】2014年12月17日