專利名稱：病毒性肝炎鑒別診斷生物芯片的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實(shí)用新型涉及一種甲(HAV)、乙(HBV)、丙(HCV)、丁(HDV)、戊(HEV)、庚(HGV)型肝炎病毒的鑒別診斷生物芯片。
各類肝炎病毒對(duì)人群健康的危害很大，可導(dǎo)致嚴(yán)重的肝硬化、甚至肝癌，臨床正確診斷鑒別尤為重要。目前這些病原體IgG、IgM抗體的檢測(cè)通常采用酶聯(lián)免疫吸附法，其需要離心機(jī)、孵育箱、酶標(biāo)儀等醫(yī)療設(shè)備，且操作過(guò)程復(fù)雜，每次只能檢測(cè)一種病原體的一種蛋白，該法檢測(cè)時(shí)需攢夠一定數(shù)量的病例才行，因此不能隨時(shí)隨地的進(jìn)行，檢測(cè)所需時(shí)間較長(zhǎng)。
本實(shí)用新型提供一種使用方便，操作簡(jiǎn)單，能即時(shí)、準(zhǔn)確、一次性的對(duì)甲(HAV)、乙(HBV)、丙(HCV)、丁(HDV)、戊(HEV)、庚(HGV)型多種肝炎病毒進(jìn)行鑒別診斷的生物芯片。
為實(shí)現(xiàn)上述目的，本實(shí)用新型采用的技術(shù)方案為一種病毒性肝炎鑒別診斷的生物芯片，其特殊之處在于所述芯片由至少一條特異性IgG抗體檢測(cè)裝置21、至少一條特異性IgM抗體檢測(cè)裝置22和一條HBs抗原檢測(cè)裝置23構(gòu)成；檢測(cè)裝置21、22、23由塑料板11，設(shè)置于塑料板11上的玻璃纖維加樣區(qū)1，與加樣區(qū)1相鄰的薄膜觀察區(qū)9和吸水紙10構(gòu)成；(a)所述一條IgG抗體檢測(cè)裝置21的加樣區(qū)1上含有親和層析后的金標(biāo)抗人IgG二抗，觀察區(qū)9的薄膜上設(shè)含有甲(HAV)、丙(HCV)、丁(HDV)、戊(HEV)、庚(HGV)的抗原的特異性IgG抗體檢測(cè)線2、4、5、6、7，和含HBc抗原的特異性IgG抗體檢測(cè)線3，觀察區(qū)9后的薄膜內(nèi)設(shè)置含有人IgG的對(duì)照線8；(b)所述一條IgM抗體檢測(cè)裝置22的加樣區(qū)1上含有親和層析后的金標(biāo)抗人IgM二抗，觀察區(qū)9的薄膜上設(shè)含有甲(HAV)、丙(HCV)、丁(HDV)、戊(HEV)、庚(HGV)的抗原的特異性IgM抗體檢測(cè)線15、17、18、19、20，和含HBc抗原的特異性IgM抗體檢測(cè)線16，觀察區(qū)9后的薄膜內(nèi)設(shè)置含有人IgM的對(duì)照線12；(c)所述一條HBs抗原檢測(cè)裝置23的加樣區(qū)1上含有金標(biāo)抗HBs的抗體，觀察區(qū)9的薄膜上設(shè)有含抗HBs抗體的HBs抗原檢測(cè)線13，觀察區(qū)9后的薄膜內(nèi)設(shè)置含有二抗的HBs抗原檢測(cè)對(duì)照線14。
上述IgG抗體檢測(cè)裝置和IgM抗體檢測(cè)裝置可為兩條、三條、四條、五條、六條，檢測(cè)裝置觀察區(qū)的薄膜含甲(HAV)、乙(HBV)、丙(HCV)、丁(HDV)、戊(HEV)、庚(HGV)的六種抗原的特異性抗體檢測(cè)線可任意組合；本實(shí)用新型還可采用如下技術(shù)方案一種病毒性肝炎鑒別診斷生物芯片，其特殊之處在于所述芯片由甲(HAV)、乙(HBV)、丙(HCV)、丁(HDV)、戊(HEV)、庚(HGV)的六條特異性IgG抗體檢測(cè)裝置，六條特異性IgM抗體檢測(cè)裝置和HBs抗原檢測(cè)裝置構(gòu)成；上述檢測(cè)裝置由塑料板11，設(shè)置于其上的玻璃纖維加樣區(qū)1，與加樣區(qū)1相鄰的薄膜觀察區(qū)9和吸水紙10構(gòu)成。
(a)所述單項(xiàng)IgG抗體檢測(cè)裝置的加樣區(qū)1玻璃纖維內(nèi)含有一種病原體相應(yīng)的特異性抗原的金標(biāo)抗原，觀察區(qū)9薄膜內(nèi)含有抗IgG二抗的IgG抗體檢測(cè)線24，含有相應(yīng)病毒的特異性抗原的對(duì)應(yīng)抗體的IgG抗體檢測(cè)對(duì)照線25；(b)所述單項(xiàng)IgM抗體檢測(cè)裝置的加樣區(qū)1玻璃纖維內(nèi)含有一種病原體相應(yīng)的特異性抗原的金標(biāo)抗原，觀察區(qū)9薄膜內(nèi)含有抗IgM二抗的IgM抗體檢測(cè)線26和含有相應(yīng)病毒的特異性抗原的對(duì)應(yīng)抗體的IgM抗體檢測(cè)對(duì)照線27；(c)所述HBs抗原檢測(cè)裝置的加樣區(qū)1上含有金標(biāo)抗HBs抗體，觀察區(qū)9的薄膜上設(shè)有含抗HBs抗體HBs抗原檢測(cè)線13，觀察區(qū)9后的薄膜內(nèi)設(shè)置含有二抗的HBs抗原檢測(cè)對(duì)照線14。
上述同一種病毒的兩種IgG、IgM的抗體檢測(cè)裝置可放于同一條抗體檢測(cè)裝置上，抗體檢測(cè)裝置的加樣區(qū)1玻璃纖維內(nèi)含有一種病原體相應(yīng)的特異性抗原的金標(biāo)抗原，觀察區(qū)9薄膜內(nèi)含有抗IgG二抗的IgG抗體檢測(cè)線24和含有抗IgM二抗的IgM抗體檢測(cè)線26，薄膜內(nèi)含有相應(yīng)的特異性抗原對(duì)應(yīng)抗體的IgG和IgM抗體檢測(cè)對(duì)照線28。
上述兩個(gè)技術(shù)方案的觀察區(qū)9的薄膜為硝酸纖維素膜或硝酸、醋酸纖維素混合膜。
本實(shí)用新型與現(xiàn)有技術(shù)相比，采用金標(biāo)蛋白技術(shù)，所以使用方便，操作簡(jiǎn)單，不需要任何設(shè)備，用肉眼能即時(shí)、準(zhǔn)確的觀察結(jié)果，可采用全血、血漿、血清等不同的標(biāo)本進(jìn)行診斷，檢測(cè)速度快，一次性可完成所有肝炎病毒的鑒別診斷，因而具有很高的臨床鑒別診斷價(jià)值。
以下結(jié)合附圖和具體實(shí)施例對(duì)本實(shí)用新型作進(jìn)一步詳細(xì)描述

圖1為本實(shí)用新型的第一種實(shí)施例的肝炎病毒的特異性IgG抗體檢測(cè)裝置剖示圖；圖2為本實(shí)用新型的第一種實(shí)施例的肝炎病毒的特異性IgM抗體檢測(cè)裝置剖示圖3為本實(shí)用新型的第一種實(shí)施例的HBV肝炎病毒的特異性HBs抗原檢測(cè)裝置剖示圖；圖4為本實(shí)用新型的第二種實(shí)施例的甲(HAV)型肝炎病毒的特異性IgG抗體檢測(cè)裝置剖示圖；圖5為本實(shí)用新型的第二種實(shí)施例的甲(HAV)型肝炎病毒的特異性IgM抗體檢測(cè)裝置剖示圖；圖6為本實(shí)用新型的第三種實(shí)施例的甲(HAV)型肝炎病毒的特異性IgG、IgM抗體檢測(cè)裝置剖示圖；參見(jiàn)附圖，其標(biāo)號(hào)說(shuō)明如下1-加樣區(qū)，2-甲(HAV)IgG抗體檢測(cè)線，3-乙(HBV)IgG抗體檢測(cè)線，4-丙(HCV)IgG抗體檢測(cè)線，5-丁(HDV)IgG抗體檢測(cè)線，6-戊(HEV)IgG抗體檢測(cè)線，7-庚(HGV)IgG抗體檢測(cè)線，8-含有IgG的IgG抗體檢測(cè)對(duì)照線，9-觀察區(qū)，10-級(jí)水紙，11-塑料板，12-含有IgM的IgM抗體檢測(cè)對(duì)照線，13-含有抗HBs抗體的HBs抗原檢測(cè)線，14-含有二抗的HBs抗原檢測(cè)對(duì)照線，15-甲(HAV)IgM抗體檢測(cè)線，16-乙(HBV)IgM抗體檢測(cè)線，17-丙(HCV)IgM抗體檢測(cè)線，18-丁(HDV)IgM抗體檢測(cè)線，19-戊(HEV)IgM抗體檢測(cè)線，20-庚(HGV)IgM抗體檢測(cè)線，21-IgG抗體檢測(cè)裝置，22--IgM抗體檢測(cè)裝置，23-HBs抗原檢測(cè)裝置，24-含有抗IgG二抗的IgG抗體檢測(cè)線，25-含有甲(HAV)特異性抗原對(duì)應(yīng)抗體的IgG抗體檢測(cè)對(duì)照線，26-含有抗IgM二抗的IgM抗體檢測(cè)線，27-含有甲(HAV)特異性抗原對(duì)應(yīng)抗體的IgM抗體檢測(cè)對(duì)照線，28-含有甲(HAV)特異性抗原對(duì)應(yīng)抗體的IgG和IgM抗體檢測(cè)對(duì)照線，參見(jiàn)圖1、圖2、圖3，本實(shí)用新型的第一種實(shí)施例如下，在塑料板11上的左端設(shè)置加樣區(qū)1其右端設(shè)置吸水紙10，中間為帶有薄膜的觀察區(qū)9，觀察區(qū)9的膜片采用硝酸纖維素膜或硝酸、醋酸纖維素混合膜。在加樣區(qū)1內(nèi)加入標(biāo)本，標(biāo)本可采用全血、血清或分泌物，其標(biāo)本與加樣區(qū)1內(nèi)的金標(biāo)二抗相混合，并沿著裝置的左端向右端層析至觀察區(qū)9。當(dāng)被檢樣本中含有上述甲(HAV)、乙(HBV的抗HBc抗體)、丙(HCV)、丁(HDV)、戊(HEV)、庚(HGV)六種病毒的特異性IgG或IgM抗體時(shí)，會(huì)與加樣區(qū)1內(nèi)的金標(biāo)抗IgG或IgM抗體結(jié)合，結(jié)合的復(fù)合物將沿著該裝置層析至觀察區(qū)9內(nèi)，將分別與觀察區(qū)9內(nèi)的六種IgG與IgM抗體檢測(cè)線上包被的相應(yīng)特異性抗原相結(jié)合，在觀察區(qū)內(nèi)形成肉眼可辯的紅色條帶，過(guò)量的復(fù)合物或未結(jié)合的金標(biāo)物會(huì)繼續(xù)層析，與對(duì)照線8或12上的IgG或IgM相結(jié)合形成紅色條帶，可肉眼觀察結(jié)果；若IgG抗體檢測(cè)裝置上2、3、4、5、6、7如出現(xiàn)紅色條帶，則表照上述6種病毒的IgG抗體陽(yáng)性，否則陰性；IgM抗體檢測(cè)裝置15、16、17、18、19、20如出現(xiàn)紅色條帶，則表明上述6種病原體的IgM抗體陽(yáng)性，否則陰性；HBs抗原檢測(cè)裝置13位置如出現(xiàn)紅色條帶，則表明HBs抗原檢測(cè)陽(yáng)性，否則陰性。強(qiáng)陽(yáng)性標(biāo)本在5～10分鐘出現(xiàn)結(jié)果，一般在25～30分鐘即可觀察結(jié)果，對(duì)照線也質(zhì)控線，在檢測(cè)時(shí)，對(duì)照線都應(yīng)形成紅色條帶，否則，此檢測(cè)裝置失效。
實(shí)施例1中的肝炎鑒別診斷芯片可分為IgG抗體檢測(cè)和IgM抗體檢測(cè)兩種檢測(cè)芯片，分別使用；其也應(yīng)屬于本實(shí)用新型的保護(hù)范圍。
上述IgG抗體檢測(cè)裝置和IgM抗體檢測(cè)裝置可為兩條、三條、四條、五條、六條，檢測(cè)裝置觀察區(qū)的薄膜含甲(HAV)、乙(HBV)、丙(HCV)、丁(HDV)、戊(HEV)、庚(HGV)的六種抗原的特異性抗體檢測(cè)線可任意組合。
上述肝炎鑒別診斷芯片也可有六種病原體中的任意兩種、三種、四種或五種組成一個(gè)新的IgG或IgM鑒別診斷芯片。檢測(cè)其IgG和/或IgM抗體。例如丙(HCV)和丁(HDV)型肝炎的組合。
參見(jiàn)圖4、圖5，為本實(shí)用新型第二種技術(shù)方案的實(shí)施方式該方式將檢測(cè)上述甲(HAV)、乙(HBV的抗HBc抗體)、丙(HCV)、丁(HDV)、戊(HEV)、庚(HGV)6種病毒IgG抗體分別檢測(cè)，圖4為甲(HAV)型肝炎病毒的特異性IgG抗體檢測(cè)裝置剖示圖，加樣區(qū)1內(nèi)分別含有金標(biāo)抗原，觀察區(qū)9上設(shè)有內(nèi)含抗人IgG二抗的特異性IgG抗體檢測(cè)線24和內(nèi)含甲(HAV)的相應(yīng)病原體的特異性抗原的抗體的檢測(cè)對(duì)照線25，其原理與實(shí)施例1中的IgG抗體檢測(cè)原理相同；上述甲(HAV)、乙(HBV的抗HBc抗體)、丙(HCV)、丁(HDV)、戊(HEV)、庚(HGV)6種病毒IgM抗體也可分別檢測(cè)，圖5為甲(HAV)型肝炎病毒的特異性IgM抗體檢測(cè)裝置剖示圖，加樣區(qū)1內(nèi)分別含有金標(biāo)抗原，觀察區(qū)9上設(shè)有內(nèi)含抗人IgM二抗的特異性IgM抗體檢測(cè)線26和內(nèi)含甲(HAV)的相應(yīng)病原體的特異性抗原的抗體的檢測(cè)對(duì)照線27，其原理與實(shí)施例1中的IgM抗體檢測(cè)原理相同。
參見(jiàn)圖6，為第二種技術(shù)方案的另一種實(shí)施方式該方式將每一種病原體的IgG與IgM檢測(cè)的在同一裝置，圖6為甲(HAV)型肝炎病毒的特異性IgG、IgM抗體檢測(cè)裝置剖示圖，加樣區(qū)1內(nèi)分別含有金標(biāo)抗原，觀察區(qū)9上設(shè)金標(biāo)抗人IgG二抗的特異性IgG檢測(cè)線24和設(shè)有含抗人IgM二抗的特異性IgM檢測(cè)線26和含甲(HAV)的相應(yīng)病原體特異性抗原的抗體的IgG和IgM抗體檢測(cè)對(duì)照線28，檢測(cè)原理同實(shí)施例1。
權(quán)利要求1.一種病毒性肝炎鑒別診斷生物芯片，其特征在于所述芯片由至少一條特異性IgG抗體檢測(cè)裝置(21)、至少一條特異性IgM抗體檢測(cè)裝置(22)和一條HBs抗原檢測(cè)裝置(23)構(gòu)成；檢測(cè)裝置(21、22、23)由塑料板(11)，設(shè)置于塑料板(11)上的玻璃纖維加樣區(qū)(1)，與加樣區(qū)(1)相鄰的薄膜觀察區(qū)(9)和吸水紙(10)構(gòu)成；(a)所述一條IgG抗體檢測(cè)裝置(21)的加樣區(qū)(1)上含有親和層析后的金標(biāo)抗人IgG二抗，觀察區(qū)(9)的薄膜上設(shè)含有甲(HAV)、丙(HCV)、丁(HDV)、戊(HEV)、庚(HGV)的抗原的特異性IgG抗體檢測(cè)線(2、4、5、6、7)，和含HBc抗原的特異性IgG抗體檢測(cè)線(3)，觀察區(qū)(9)的薄膜內(nèi)設(shè)置含有人IgG的對(duì)照線(8)；(b)所述一條IgM抗體檢測(cè)裝置(22)的加樣區(qū)(1)上含有親和層析后的金標(biāo)抗人IgM二抗，觀察區(qū)(9)的薄膜上設(shè)含有甲(HAV)、丙(HCV)、丁(HDV)、戊(HEV)、庚(HGV)的抗原的特異性IgM抗體檢測(cè)線(15、17、18、19、20)，和含HBc抗原的特異性IgM抗體檢測(cè)線(16)，觀察區(qū)(9)后的薄膜內(nèi)設(shè)置含有人IgM的對(duì)照線(12)；(c)所述一條HBs抗原檢測(cè)裝置(23)的加樣區(qū)1上含有金標(biāo)抗HBs的抗體，觀察區(qū)(9)的薄膜上設(shè)有含抗HBs抗體的HBs抗原檢測(cè)線(13)，觀察區(qū)(9)后的薄膜內(nèi)設(shè)置含有二抗的HBs抗原檢測(cè)對(duì)照線(14)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的病毒性肝炎鑒別診斷生物芯片，其特征在于所述IgG抗體檢測(cè)裝置和IgM抗體檢測(cè)裝置可分為兩條、三條、四條、五條、六條，檢測(cè)裝置觀察區(qū)的薄膜含甲(HAV)、乙(HBV)、丙(HCV)、丁(HDV)、戊(HEV)、庚(HGV)的六種抗原的特異性抗體檢測(cè)線可任意組合。
3.一種病毒性肝炎鑒別診斷生物芯片，其特征在于所述芯片由甲(HAV)、乙(HBV)、丙(HCV)、丁(HDV)、戊(HEV)、庚(HGV)的六條特異性IgG抗體檢測(cè)裝置，六條特異性IgM抗體檢測(cè)裝置和HBs抗原檢測(cè)裝置構(gòu)成；上述檢測(cè)裝置由塑料板(11)，設(shè)置于其上的玻璃纖維加樣區(qū)(1)，與加樣區(qū)(1)相鄰的薄膜觀察區(qū)(9)和吸水紙(10)構(gòu)成；(a)所述單項(xiàng)IgG抗體檢測(cè)裝置的加樣區(qū)(1)玻璃纖維內(nèi)含有一種病原體相應(yīng)的特異性抗原的金標(biāo)抗原，觀察區(qū)(9)薄膜內(nèi)含有抗IgG二抗的IgG抗體檢測(cè)線(24)，和含有相應(yīng)病毒的特異性抗原的對(duì)應(yīng)抗體的IgG抗體檢測(cè)對(duì)照線(25)；(b)所述單項(xiàng)IgM抗體檢測(cè)裝置的加樣區(qū)(1)玻璃纖維內(nèi)含有一種病原體相應(yīng)的特異性抗原的金標(biāo)抗原，觀察區(qū)(9)薄膜內(nèi)含有抗IgM二抗的IgM抗體檢測(cè)線(26)，和含有相應(yīng)病毒的特異性抗原的對(duì)應(yīng)抗體的IgM抗體檢測(cè)對(duì)照線(27)；(c)所述HBs抗原檢測(cè)裝置的加樣區(qū)(1)上含有金標(biāo)抗HBs抗體，觀察區(qū)(9)的薄膜上設(shè)有含抗HBs抗原的抗體HBs抗原檢測(cè)線(13)，觀察區(qū)(9)后設(shè)置含有二抗的HBs抗原檢測(cè)對(duì)照線(14)。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的病毒性肝炎鑒別診斷生物芯片，其特征在于所述同一種病毒的兩種IgG、IgM的抗體檢測(cè)裝置可放于同一條抗體檢測(cè)裝置上，抗體檢測(cè)裝置的加樣區(qū)1玻璃纖維內(nèi)含有一種病原體相應(yīng)的特異性抗原的金標(biāo)抗原，觀察區(qū)(9)后的薄膜內(nèi)含有抗IgG二抗的IgG抗體檢測(cè)線(24)和含有抗IgM二抗的IgM抗體檢測(cè)線(26)，對(duì)照線內(nèi)含有相應(yīng)的特異性抗原對(duì)應(yīng)抗體的IgG和IgM抗體檢測(cè)對(duì)照線(28)。
5.根據(jù)上述權(quán)利要求任意一項(xiàng)所述的病毒性肝炎鑒別診斷生物芯片，其特征在于觀察區(qū)(9)的薄膜為硝酸纖維素膜或硝酸、醋酸纖維素混合膜。
專利摘要本實(shí)用新型涉及一種甲、乙、丙、丁、戊、庚型肝炎病毒的鑒別診斷生物芯片。芯片由特異性IgG抗體檢測(cè)裝置、特異性IgM抗體檢測(cè)裝置和HBs抗原檢測(cè)裝置構(gòu)成;檢測(cè)裝置由塑料板,設(shè)置于塑料板上的玻璃纖維加樣區(qū),薄膜觀察區(qū)和吸水紙構(gòu)成;在玻璃纖維加樣區(qū)和薄膜觀察區(qū)分別設(shè)置抗原或抗體,利用金標(biāo)技術(shù)來(lái)鑒定肝炎病毒類型。其使用方便,可同時(shí)檢測(cè)多種病原體,用肉眼能即時(shí)準(zhǔn)確觀察結(jié)果。
文檔編號(hào)G01N33/576GK2438121SQ0022680
公開(kāi)日2001年7月4日 申請(qǐng)日期2000年9月18日 優(yōu)先權(quán)日2000年9月18日
發(fā)明者王冰, 王梅 申請(qǐng)人:王冰, 王梅