專利名稱：一種快速分析粉末大豆磷脂成分的方法
技術領域：
本發(fā)明涉及產品分析檢測領域，尤其涉及對現(xiàn)有粉末大豆磷脂成分的分析方法進行改進和創(chuàng)新，達到快速、簡便、低成本地分析粉末大豆磷脂成分的目的。
背景技術：
常規(guī)定磷法只能分析粉末大豆磷脂樣品中總磷脂含量，不能確定粉末大豆磷脂樣品中各磷脂成分(卵磷脂、腦磷脂、肌醇磷脂)及其含量。
國外通常采用高效液相色譜或核磁共振31P-NMR法對粉末大豆磷脂成分進行分析，但這兩種儀器價格昂貴，普通實驗室不具備。所以對粉末大豆磷脂成分進行分析，一直是困擾生產廠家的難題。
普通實驗室通常采用薄層層析法對粉末大豆磷脂成分進行分析。其方法是采用20cm×20cm的薄層層析板，將粉末大豆磷脂用溶劑溶解，然后與各磷脂標準品溶液在同一直線處點樣、展開(各點相距2～3cm)。用碘蒸汽顯色。將粉末大豆磷脂各磷脂成分的斑點與各標準品斑點進行比較，從而確定粉末大豆磷脂的成分，進而確定其含量。該方法需要用到純的標準品，而這些用于分析檢測的純標準品價格極貴，也很不穩(wěn)定，難以保存，幾乎是一次性使用。其次，20cm×20cm的薄層層析板用于分析需要耗費很長時間，而且展開劑的用量太大，造成很大的浪費和環(huán)境污染。

發(fā)明內容
根據(jù)現(xiàn)有粉末大豆磷脂成分分析方法所存在的上述缺點，本發(fā)明所要解決的粉末大豆磷脂成分分析方案是要提供一種高效展開劑，使粉末大豆磷脂各磷脂成分在很小的薄層層析板上得到快速分離。其次，采用顯色劑組合顯色法確定各磷脂成分，不用價格昂貴的標準品。
為此，本發(fā)明的技術方案是采用2.5cm×7.5cm的載玻片制成的硅膠板作為薄層層析板，點樣后用高效展開劑展開，采用幾種顯色劑進行組合顯色。具體方法是稱取適量粉末大豆磷脂，用溶劑溶解配制成一定濃度。在距薄板下端0.5～1cm處點樣。將已點樣的薄層層析板放入到裝有展開劑的層析缸中，當展開劑上升到薄層層析板高度的4/5處，取出薄層層析板。將上述薄層層析板在室溫下放置幾分鐘，待溶劑揮發(fā)后，用顯色劑1噴在薄板上，卵磷脂斑點會顯示橙色，而其它磷脂斑點不顯色。用顯色劑2噴在薄板上，在烘箱中加熱幾分鐘，腦磷脂斑點會顯示粉紅色。對上述兩種顯色劑不顯色，而對碘蒸氣顯色的斑點即為肌醇磷脂。若要進行定量分析，可采用定磷分析法計算各磷脂的含量。
采用本發(fā)明方法對粉末大豆磷脂成分進行分析，所需時間僅為20cm×20cm大薄層層析板的1/5，展開劑用量減少了80％。進行定量分析時其結果與用20cm×20cm的大薄層層析板分析結果相同。
本發(fā)明所用展開劑如下展開劑為氯仿、甲醇、乙酸乙酯和水的混合物。其中氯仿含量為20～30％，甲醇含量為50～70％，乙酸乙酯含量為5～10％，水的含量為5～15％，(重量比)。調節(jié)pH至2～5。
本發(fā)明所用顯色劑如下1.顯色劑1將醋酸、硝酸鉍、碘化鉀溶于水中，其中醋酸含量控制在0.5～5％。硝酸鉍的含量控制在1～10％，碘化鉀的含量控制在3～10％(重量比)。
2.顯色劑2將茚三酮溶于醇中配成0.1～1％的溶液。在此溶液中加入濃度為5～15％醋酸水溶液。醋酸水溶液的加入量控制在3～15％(重量比)。
具體實施例方式
1粉末大豆磷脂成分的定性分析用毛細管蘸取粉末大豆磷脂的氯仿濃溶液，在距薄層層析板底部約0.5～1cm處點樣。將點樣后的薄層層析板放入裝有展開劑的燒杯中。燒杯上部用塑料薄膜封口，使溶劑不能揮發(fā)出來。待展開劑上升到薄層層析板高度的4/5處時，取出薄層層析板。將此薄層層析板在室溫下放置幾分鐘，待溶劑揮發(fā)后，用顯色劑1噴在薄板上，卵磷脂斑點會顯示橙色，而其它磷脂斑點不顯色。然后用顯色劑2噴在薄板上，在烘箱中加熱幾分鐘，腦磷脂斑點會顯示粉紅色。對上述兩種顯色劑不顯色，而對碘蒸汽顯棕色的斑點即為肌醇磷脂。
具體實施例方式
2粉末大豆磷脂成分的定量分析準確稱取30mg粉末大豆磷脂，用氯仿溶解，制成1％的粉末大豆磷脂氯仿溶液。用微量注射器吸取10μl此溶液，在距薄層層析板底部約0.5～1cm處點樣。將點樣后的薄層層析板放入裝有展開劑的燒杯中，燒杯上部用塑料薄膜封口，使溶劑不能揮發(fā)出來。待展開劑上升到薄層層析板高度的4/5處時，取出薄層層析板。將上述薄層層析板在室溫下放置幾分鐘，待溶劑揮發(fā)后，用顯色劑進行組合顯色，采用定磷分析法計算各磷脂的含量。
權利要求
1.一種快速分析粉末大豆磷脂成分的方法。其特征是用一種高效展開劑，使粉末大豆磷脂成分在2.5cm×7.5cm的載玻片制成的硅膠薄層層析板上得到快速完全展開和分離，然后用顯色劑1和顯色劑2進行組合顯色，以確定粉末大豆磷脂中含有何種磷脂成分。整個分析過程不需用標準品。
2.根據(jù)權利要求1所述的快速分析粉末大豆磷脂成分的方法，其特征是高效展開劑是氯仿、甲醇、乙酸乙酯和水的混合物。其中氯仿含量為20～30％，甲醇含量為50～70％，乙酸乙酯含量為5～10％，水的含量為5～15％，(重量比)。調節(jié)pH至2～5。
3.根據(jù)權利要求1所述的快速分析粉末大豆磷脂成分的方法，其特征是顯色劑1是醋酸、硝酸鉍、碘化鉀混合水溶液，其中醋酸含量為0.5～5％，硝酸鉍的含量為1～10％，碘化鉀的含量為3～10％(重量比)。
4.根據(jù)權利要求1所述的快速分析粉末大豆磷脂成分的方法，其特征是顯色劑2是0.1～1％的茚三酮醇溶液中加入濃度為5～15％醋酸水溶液。醋酸水溶液的加入量為3～15％(重量比)。
全文摘要
一種快速分析粉末大豆磷脂成分的方法。是采用2.5cm×7.5cm的載玻片制成的硅膠板作為薄層層析板，用一種高效展開劑，使粉末大豆磷脂成分在2.5cm×7.5cm的載玻片薄層層析板上得到快速展開和分離。然后用幾種顯色劑進行組合顯色，不需要用價格昂貴的標準品，即可確定粉末大豆磷脂成分及含量。所需時間僅為20cm×20cm薄層層析板的1/5，展開劑用量僅為5～10ml。
文檔編號G01N30/95GK1611937SQ200310111969
公開日2005年5月4日 申請日期2003年10月31日 優(yōu)先權日2003年10月31日
發(fā)明者李衛(wèi) 申請人:李衛(wèi)