專利名稱:環(huán)維黃楊星d原料藥及其制劑中環(huán)維黃楊星d含量的色譜的測(cè)定方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及環(huán)維黃楊星D原料藥及其各種制劑(如黃楊寧片、黃楊寧滴丸、黃楊寧粉針等)中環(huán)維黃楊星D含量的高效液相色譜測(cè)定法和環(huán)維黃楊星D中雜質(zhì)檢查的高效液相色譜法。特別是涉及采用高效液相色譜法,并且采用蒸發(fā)光散射檢測(cè)器(ELSD)檢測(cè)。
背景技術(shù):
黃楊科植物小葉黃楊Buxus mincrophylla Sieb.et Zucc.var.sinica Rehd.et Wils.及其同屬全株植物,經(jīng)提取及精制所得的生物堿,若其主成分環(huán)維黃楊星D含量大于70%,即為環(huán)維黃楊星D原料藥,也叫黃楊寧。
目前對(duì)環(huán)維黃楊星D的原料或者由環(huán)維黃楊星D原料制成的制劑的常用測(cè)定方法如下黃楊寧主成分環(huán)維黃楊星D和其它成分均為生物堿,所以《中國(guó)藥典》2000年版一部153頁(yè)所載的非水滴定法是測(cè)定生物堿的經(jīng)典方法,該方法簡(jiǎn)便,但專屬性差,即只要是生物堿都能檢測(cè)出來,所以得到的結(jié)果是生物堿的總堿量,即環(huán)維黃楊星D和其它成分的總量,而環(huán)維黃楊星D只是其中的一種生物堿,采用這種檢測(cè)方法并不能準(zhǔn)確測(cè)定環(huán)維黃楊星D的真實(shí)含量。
以黃楊寧為原藥生產(chǎn)的制劑黃楊寧片,其《中國(guó)藥典》2000年版一部575頁(yè)所載的方法是酸性染料比色法,該方法操作繁瑣,而且專屬性差,即只要是生物堿都能檢測(cè)出來,所以得到的結(jié)果是生物堿的總堿量,即環(huán)維黃楊星D和其有關(guān)物質(zhì)的總量,而環(huán)維黃楊星D只是其中的一種生物堿,采用這種檢測(cè)方法也不能準(zhǔn)確測(cè)定環(huán)維黃楊星D的真實(shí)含量。
以黃楊寧為原藥生產(chǎn)的制劑黃楊寧滴丸、黃楊寧粉針目前也采用酸性染料比色法測(cè)定其所含環(huán)維黃楊星D的含量,即測(cè)得的也是生物堿總堿量,不能準(zhǔn)確測(cè)定其中環(huán)維黃楊星D的含量。
因?yàn)樯鲜鰷y(cè)定方法存在專屬性差的缺點(diǎn),故許多科研人員積極尋找專屬性強(qiáng)的測(cè)定方法,特別是高效液相法,如柱前衍生化高效液相色譜法、末端吸收高效液相色譜法、高效液相-質(zhì)譜法等,但這些方法均存在這樣那樣的缺點(diǎn)。
采用柱前衍生化高效液相色譜法測(cè)定環(huán)維黃楊星D的含量,需要在進(jìn)樣前通過化學(xué)反應(yīng)使環(huán)維黃楊星D生成新的化合物,通過測(cè)定此新的化合物的含量再折算成環(huán)維黃楊星D的含量,所以是間接測(cè)定方法,此方法操作繁瑣,且衍生化試劑均采用異氰酸苯酯或1-異氰酸萘酯,異氰酸苯酯和1-異氰酸萘酯是有害的液體,被用作催淚劑,其具有刺激性、感光性,對(duì)光和濕敏感,必須充氮后貯藏保存,常規(guī)保存易失效,長(zhǎng)期使用對(duì)人體有很大的傷害,故不適宜用來作為衍生化試劑測(cè)定環(huán)維黃楊星D的含量。
申請(qǐng)?zhí)?00310106142.8,公開號(hào)CN 1540339A的發(fā)明專利采用末端吸收高效液相色譜法測(cè)定環(huán)維黃楊星D的含量,但此方法采用氨丙基硅烷鍵合硅膠為填充劑,通用性不強(qiáng);而且使用的是末端吸收210nm進(jìn)行檢測(cè),選擇性不強(qiáng),故對(duì)黃楊寧片、黃楊寧滴丸和黃楊寧粉針中的環(huán)維黃楊星D進(jìn)行測(cè)量時(shí),前處理操作繁瑣。
此外也有文獻(xiàn)采用高效液相一質(zhì)譜法,此法精密度較差,費(fèi)用較貴,目前人們基本不采用此法作為環(huán)維黃楊星D的測(cè)定方法。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種專屬性強(qiáng);操作簡(jiǎn)單、省時(shí);毒副作用??;通用性強(qiáng);適用性廣的環(huán)維黃楊星D原料藥及其各種制劑中環(huán)維黃楊星D含量的高效液相色譜測(cè)定法和環(huán)維黃楊星D中雜質(zhì)檢查的高效液相色譜測(cè)定方法。
本發(fā)明克服了《中國(guó)藥典》2000年版一部153頁(yè)測(cè)定環(huán)維黃楊星D所載的非水滴定法所存在的缺點(diǎn),具有專屬性強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn),在測(cè)定時(shí)能準(zhǔn)確測(cè)定環(huán)維黃楊星D的真實(shí)含量,并能對(duì)有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行測(cè)定。
本發(fā)明克服了《中國(guó)藥典》2000年版一部575頁(yè)所載的黃楊寧片的酸性染料比色法所存在的缺點(diǎn),具有專屬性強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn),在測(cè)定時(shí)能準(zhǔn)確測(cè)定環(huán)維黃楊星D的真實(shí)含量,并能對(duì)有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行測(cè)定,且本發(fā)明操作方法簡(jiǎn)便。
本發(fā)明也克服了目前采用酸性染料比色法測(cè)定黃楊寧滴丸、黃楊寧粉針?biāo)h(huán)維黃楊星D的含量存在的缺點(diǎn),具有專屬性強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn),在測(cè)定時(shí)能準(zhǔn)確測(cè)定環(huán)維黃楊星D的真實(shí)含量,并能對(duì)有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行測(cè)定,且本發(fā)明操作方法簡(jiǎn)便。
本發(fā)明測(cè)定方法克服了采用柱前衍生化高效液相色譜法測(cè)定環(huán)維黃楊星D的所存在的缺點(diǎn),采用直接進(jìn)樣法測(cè)定環(huán)維黃楊星D的含量,方法簡(jiǎn)單,且不需要使用對(duì)人體有較大傷害的衍生化試劑。
本發(fā)明也克服了申請(qǐng)?zhí)?00310106141.3,公開號(hào)CN 1540338A的發(fā)明專利采用末端吸收高效液相色譜法測(cè)定環(huán)維黃楊星D的含量的缺點(diǎn),本發(fā)明采用常用的十八烷基硅烷鍵合硅膠或辛烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑,通用性強(qiáng);而且本發(fā)明采用流動(dòng)相直接溶解樣品進(jìn)樣,操作簡(jiǎn)單。
本發(fā)明的目的可以通過下列措施來實(shí)現(xiàn)采用高效液相色譜儀,色譜條件中固定相采用十八烷基硅烷鍵合硅膠或辛烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;流動(dòng)相采用甲酸(甲酸銨)緩沖液-甲醇體系、乙酸(乙酸銨)緩沖液-甲醇體系、甲酸(甲酸銨)緩沖液-乙腈體系或乙酸(乙酸銨)緩沖液-乙腈體系;采用蒸發(fā)光散射檢測(cè)器(ELSD)檢測(cè),漂移管溫度20~150℃;氣體流速0.1L/min~6.0L/min。
本發(fā)明所述的環(huán)維黃楊星D含量的高效液相色譜測(cè)定法和環(huán)維黃楊星D中雜質(zhì)檢查的高效液相色譜法中,固定相采用十八烷基硅烷鍵合硅膠或辛烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;流動(dòng)相采用甲酸(甲酸銨)緩沖液-甲醇體系、乙酸(乙酸銨)緩沖液-甲醇體系、甲酸(甲酸銨)緩沖液-乙腈體系。
最佳的本發(fā)明所述的環(huán)維黃楊星D含量的高效液相色譜測(cè)定法和環(huán)維黃楊星D中雜質(zhì)檢查的高效液相色譜法中,固定相采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;流動(dòng)相采用甲酸(甲酸銨)緩沖液-甲醇體系、乙酸(乙酸銨)緩沖液-甲醇體系。
本發(fā)明所述的流動(dòng)相甲酸(甲酸銨)緩沖液-甲醇體系、乙酸(乙酸銨)緩沖液-甲醇體系采用下述方法配置流動(dòng)相甲酸銨緩沖液(取甲酸0.5~50ml,加水800ml左右,加甲酸銨調(diào)pH值至2.3~6.0,加水至1000ml)-甲醇或乙腈(體積比為35~89∶65~11)為流動(dòng)相或乙酸銨緩沖液(取乙酸0.5~50ml,加水800ml左右,加乙酸銨調(diào)pH值至2.3~6.0,加水至1000ml)-甲醇或乙腈(體積比為35~89∶65~11)為流動(dòng)相。
優(yōu)選的本發(fā)明所述的流動(dòng)相甲酸(甲酸銨)緩沖液-甲醇體系采用下述方法配置流動(dòng)相甲酸銨緩沖液(取甲酸2~35ml,加水800ml左右,加甲酸銨調(diào)pH值至2.7~5.5,加水至1000ml)-甲醇或乙腈(體積比為50~74∶50~26)為流動(dòng)相或乙酸銨緩沖液(取甲酸2~35ml,加水800ml左右,加乙酸銨調(diào)pH值至2.7~5.5,加水至1000ml)-甲醇或乙腈(體積比為50~74∶50~26)為流動(dòng)相。
最佳的本發(fā)明所述的流動(dòng)相甲酸(甲酸銨)緩沖液-甲醇體系采用下述方法配置流動(dòng)相甲酸銨緩沖液(取甲酸5~20ml,加水800ml左右,加甲酸銨調(diào)pH值至3.0~5.0,加水至1000ml)-甲醇或乙腈(體積比為55~69∶45~31)為流動(dòng)相或乙酸銨緩沖液(取乙酸5~20ml,加水800ml左右,加乙酸銨調(diào)pH值至3.0~5.0,加水至1000ml)-甲醇或乙腈(體積比為55~69∶45~31)為流動(dòng)相。
本發(fā)明中所述的流動(dòng)相緩沖液的配置,所取試劑、試液和水成比例增加或減少以及配置順序改變,不影響本發(fā)明保護(hù)范圍。
本發(fā)明所述的環(huán)維黃楊星D含量的高效液相色譜測(cè)定法和環(huán)維黃楊星D中雜質(zhì)檢查的高效液相色譜法中,采用分流進(jìn)樣法漂移管溫度為20~100℃,氣體流速0.1L/min~4.0L/min。
優(yōu)選的本發(fā)明所述的環(huán)維黃楊星D含量的高效液相色譜測(cè)定法和環(huán)維黃楊星D中雜質(zhì)檢查的高效液相色譜法中,采用分流進(jìn)樣法漂移管溫度為30~80℃,氣體流速0.3L/min~3.0L/min。
最佳的本發(fā)明所述的環(huán)維黃楊星D含量的高效液相色譜測(cè)定法和環(huán)維黃楊星D中雜質(zhì)檢查的高效液相色譜法中,采用分流進(jìn)樣法漂移管溫度為40~70℃,氣體流速0.5L/min~2.0L/min。
本發(fā)明所述的環(huán)維黃楊星D含量的高效液相色譜測(cè)定法和環(huán)維黃楊星D中雜質(zhì)檢查的高效液相色譜法中,采用不分流進(jìn)樣法漂移管溫度為70~150℃,氣體流速0.1L/min~6.0L/min。
優(yōu)選的本發(fā)明所述的環(huán)維黃楊星D含量的高效液相色譜測(cè)定法和環(huán)維黃楊星D中雜質(zhì)檢查的高效液相色譜法中,采用不分流進(jìn)樣法漂移管溫度為80~140℃,氣體流速1.0L/min~4.5L/min。
最佳的本發(fā)明所述的環(huán)維黃楊星D含量的高效液相色譜測(cè)定法和環(huán)維黃楊星D中雜質(zhì)檢查的高效液相色譜法中,采用不分流進(jìn)樣法漂移管溫度為90~120℃,氣體流速1.5L/min~3.5L/min。
本發(fā)明所述的環(huán)維黃楊星D含量的高效液相色譜測(cè)定法和環(huán)維黃楊星D中雜質(zhì)檢查的高效液相色譜法中,環(huán)維黃楊星D原料藥及其各種制劑直接用流動(dòng)相溶解,過濾,進(jìn)高效液相色譜儀。
本發(fā)明中所述的以環(huán)維黃楊星D原料藥制成的制劑可以制成藥劑學(xué)上任何一種形式,包括針劑和口服制劑。其中針劑包括注射液、滴注液、粉針劑;口服制劑包括顆粒劑、片劑、沖劑、散劑、口服液、糖衣片劑、薄膜衣片劑、腸溶衣片劑、膠囊劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑、口含劑、顆粒劑、丸劑、膏劑、丹劑、噴霧劑、滴丸劑、崩解劑、口崩片、微丸等。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)本發(fā)明采用高效液相色譜技術(shù),蒸發(fā)光散射檢測(cè)器(ELSD)檢測(cè),測(cè)定環(huán)維黃楊星D原料藥及其各種制劑(如黃楊寧片、黃楊寧滴丸、黃楊寧粉針等)中環(huán)維黃楊星D的含量。專屬性強(qiáng);操作簡(jiǎn)單、省時(shí);毒副作用??;通用性強(qiáng);適用性廣的環(huán)維黃楊星D原料藥及其各種制劑中環(huán)維黃楊星D含量的高效液相色譜測(cè)定法和環(huán)維黃楊星D中雜質(zhì)檢查的高效液相色譜測(cè)定方法。
下面給出環(huán)維黃楊星D原料藥色譜圖、環(huán)維黃楊星D對(duì)照品純度檢查圖、精制環(huán)維黃楊星D原料純度檢查色譜圖、黃楊寧滴丸含量測(cè)定色譜圖、黃楊寧片劑含量測(cè)定色譜圖、黃楊寧粉針含量測(cè)定色譜圖,旨在進(jìn)一步說明本發(fā)明,但并非對(duì)本發(fā)明限制。
圖一為環(huán)維黃楊星D原料藥色譜二為環(huán)維黃楊星D對(duì)照品純度檢查三為精制環(huán)維黃楊星D原料純度檢查四為黃楊寧滴丸含量測(cè)定色譜五為黃楊寧片劑含量測(cè)定色譜六為黃楊寧粉針含量測(cè)定色譜圖具體實(shí)施方式
以下通過實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說明。
色譜柱采用迪馬公司產(chǎn)品[Diamonsil(鉆石)C18 5μm,250×4.6mm]實(shí)施例一環(huán)維黃楊星D原料藥市購(gòu)(由河南龍都制藥廠生產(chǎn))色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性 固定相用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;甲酸銨緩沖液(取甲酸銨15.0g,加甲酸10ml,加水使溶解并稀釋至1000ml)-甲醇(體積比為62∶38)為流動(dòng)相;流速為0.8ml/min;蒸發(fā)光散射檢測(cè)器漂移管溫度為100℃,氣體流速為2.7L/min;柱溫為30℃;供試品溶液色譜圖中,環(huán)維黃楊星D峰與其它生物堿峰均應(yīng)達(dá)到基線分離;理論塔板數(shù)按環(huán)維黃楊星D峰計(jì)算,應(yīng)不低于2000。
對(duì)照品溶液的制備 取經(jīng)用五氧化二磷為干燥劑,60℃恒溫減壓干燥至恒重的環(huán)維黃楊星D對(duì)照品5mg,精密稱定,置25ml容量瓶中,加流動(dòng)相適量,超聲使溶解,并稀釋至刻度,搖勻,即得。
供試品溶液的制備 精密稱取環(huán)維黃楊星D原料藥9mg,置25ml容量瓶中,加流動(dòng)相適量,超聲使溶解,并稀釋至刻度,搖勻,過0.45μm微孔濾膜,即得。
測(cè)定法 分別精密吸取對(duì)照品溶液10μl、20μl,供試品溶液20μl,注入高效液相色譜儀,根據(jù)色譜圖的峰面積及樣品、對(duì)照品的進(jìn)樣量(μg),以外標(biāo)兩點(diǎn)法進(jìn)行計(jì)算,即得,計(jì)算公式如下對(duì)照品回歸方程Y=k×X+b(k,b為常數(shù))樣品含量C=100%×[25×(Y-b)]/(20×k×W)Y樣品的峰面積值W樣品的稱樣量(mg)C環(huán)維黃楊星D原料藥中環(huán)維黃楊星D的含量(%)供試品色譜圖見圖一,結(jié)果示含量為91.12%。
實(shí)施例二(環(huán)維黃楊星D對(duì)照品純度檢查)環(huán)維黃楊星D對(duì)照品(購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢查所,批號(hào)888-200001)色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性 固定相用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;甲酸銨緩沖液(取甲酸銨15.0g,加甲酸10ml,加水使溶解并稀釋至1000ml)-甲醇(體積比為62∶38)為流動(dòng)相;流速為0.8ml/min;蒸發(fā)光散射檢測(cè)器漂移管溫度為100℃,氣體流速為2.7L/min;柱溫為30℃;供試品溶液色譜圖中,環(huán)維黃楊星D峰與其它生物堿峰均應(yīng)達(dá)到基線分離;理論塔板數(shù)按環(huán)維黃楊星D峰計(jì)算,應(yīng)不低于2000。
供試品溶液的制備 取環(huán)維黃楊星D對(duì)照品10mg,精密稱定,置5ml容量瓶中,加流動(dòng)相適量,超聲使溶解,并稀釋至刻度,搖勻,作為環(huán)維黃楊星D對(duì)照品高濃度樣品H;精密吸取1ml,置10ml量瓶中,加流動(dòng)相稀釋至刻度,搖勻,作為環(huán)維黃楊星D對(duì)照品低濃度樣品L。
考察樣品L的專屬性、精密度和線性,結(jié)果均良好。
采用自身對(duì)照法對(duì)上述樣品的有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)取上述樣品H和L各20ul,分別注入高效液相色譜儀中,按下式計(jì)算有關(guān)雜質(zhì)的含量樣品中的雜質(zhì)%=100%×(H色譜圖中除主峰以外的所有雜質(zhì)峰面積之和)×10÷L色譜圖主峰的峰面積,計(jì)算得環(huán)維黃楊星D對(duì)照品中的雜質(zhì)含量為3.93%。H色譜圖見附圖二。
實(shí)施例三(精制環(huán)維黃楊星D原料純度檢查)精制環(huán)維黃楊星D原料(由河南省康利醫(yī)藥技術(shù)開發(fā)有限公司提供)色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性 固定相用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;甲酸銨緩沖液(取甲酸銨15.0g,加甲酸10ml,加水使溶解并稀釋至1000ml)-甲醇(體積比為63∶37)為流動(dòng)相;流速為0.8ml/min;蒸發(fā)光散射檢測(cè)器漂移管溫度為100℃,氣體流速為2.7L/min;柱溫為30℃;供試品溶液色譜圖中,環(huán)維黃楊星D峰與其它生物堿峰均應(yīng)達(dá)到基線分離;理論塔板數(shù)按環(huán)維黃楊星D峰計(jì)算,應(yīng)不低于2000。
供試品溶液的制備 取精制環(huán)維黃楊星D原料10mg,精密稱定,置2ml容量瓶中,加流動(dòng)相適量,超聲使溶解,并稀釋至刻度,搖勻,作為精制環(huán)維黃楊星D原料高濃度樣品H1;精密吸取1ml,置100ml量瓶中,加流動(dòng)相稀釋至刻度,搖勻,作為精制環(huán)維黃楊星D原料低濃度樣品L1。
考察樣品L1的專屬性、精密度和線性,結(jié)果均良好。
采用自身對(duì)照法對(duì)上述樣品的有關(guān)物質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)取上述樣品H1和L1各20ul,分別注入高效液相色譜儀中,按下式計(jì)算有關(guān)雜質(zhì)的含量樣品中的雜質(zhì)%=100%×(H1色譜圖中除主峰以外的所有雜質(zhì)峰面積之和)÷L1色譜圖主峰的峰面積,計(jì)算得精制環(huán)維黃楊星D原料中的雜質(zhì)含量為0.38%。H1色譜圖見附圖三。
實(shí)施例四黃楊寧滴丸(由天津天士力制藥股份有限公司提供)色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性 固定相用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;甲酸銨緩沖液(取甲酸銨15.0g,加甲酸10ml,加水使溶解并稀釋至1000ml)-甲醇(體積比為60∶40)為流動(dòng)相;流速為0.8ml/min;蒸發(fā)光散射檢測(cè)器漂移管溫度為100℃,氣體流速為2.7L/min;柱溫為30℃;供試品溶液色譜圖中,環(huán)維黃楊星D峰與其它生物堿峰均應(yīng)達(dá)到基線分離;理論塔板數(shù)按環(huán)維黃楊星D峰計(jì)算,應(yīng)不低于2000。
對(duì)照品溶液的制備 取經(jīng)用五氧化二磷為干燥劑,60℃恒溫減壓干燥至恒重的環(huán)維黃楊星D對(duì)照品4mg,精密稱定,置25ml容量瓶中,加流動(dòng)相適量,超聲使溶解,并稀釋至刻度,搖勻,即得。
供試品溶液的制備 取黃楊寧滴丸20粒,精密稱定,研細(xì),精密稱取適量(約相當(dāng)于環(huán)維黃楊星D 1.5mg),置10ml容量瓶中,加流動(dòng)相適量,超聲使溶解,并稀釋至刻度,搖勻,過0.45μm微孔濾膜,即得。
測(cè)定法 分別精密吸取對(duì)照品溶液10μl、20μl,供試品溶液20μl,注入高效液相色譜儀,供試品色譜圖見圖四,測(cè)量環(huán)維黃楊星D峰面積,按外標(biāo)兩點(diǎn)法以峰面積計(jì)算含量,結(jié)果示含量為標(biāo)示量的95.1%。
含量均勻度 取黃楊寧滴丸10粒,分別置5ml量瓶中,加流動(dòng)相適量,超聲使溶解,并稀釋至刻度,搖勻,過0.45μm微孔濾膜,得供試品溶液。照含量測(cè)定項(xiàng)下的方法測(cè)定,按外標(biāo)兩點(diǎn)法以峰面積計(jì)算含量,得每粒的含量,比較即得含量均勻度。
實(shí)施例五黃楊寧片(市售,由中國(guó)陜西海姆普德制藥有限公司生產(chǎn))色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性 固定相用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;乙酸銨緩沖液(取乙酸銨15.0g,加乙酸10ml,加水使溶解并稀釋至1000ml)-甲醇(體積比為62∶38為流動(dòng)相;流速為0.8ml/min;蒸發(fā)光散射檢測(cè)器漂移管溫度為100℃,氣體流速為2.7L/min;柱溫為30℃;供試品溶液色譜圖中,環(huán)維黃楊星D峰與其它生物堿峰均應(yīng)達(dá)到基線分離;理論塔板數(shù)按環(huán)維黃楊星D峰計(jì)算,應(yīng)不低于2000。
對(duì)照品溶液的制備 取經(jīng)用五氧化二磷為干燥劑,60℃恒溫減壓干燥至恒重的環(huán)維黃楊星D對(duì)照品4mg,精密稱定,置25ml容量瓶中,加流動(dòng)相適量,超聲使溶解,并稀釋至刻度,搖勻,即得。
供試品溶液的制備 取黃楊寧片20片,精密稱定,研細(xì),精密稱取適量(約相當(dāng)于環(huán)維黃楊星D 1.5mg),置10ml容量瓶中,加流動(dòng)相適量,超聲使溶解,并稀釋至刻度,搖勻,過0.45μm微孔濾膜,即得。
測(cè)定法 分別精密吸取對(duì)照品溶液10μl、20μl,供試品溶液20μl,注入高效液相色譜儀,供試品色譜圖見圖五,測(cè)量環(huán)維黃楊星D峰面積,按外標(biāo)兩點(diǎn)法以峰面積計(jì)算含量。
含量均勻度 取黃楊寧片10片,分別置5ml量瓶中,加流動(dòng)相適量,超聲使溶解,并稀釋至刻度,搖勻,過0.45μm微孔濾膜,得供試品溶液。照含量測(cè)定項(xiàng)下的方法測(cè)定,按外標(biāo)兩點(diǎn)法以峰面積計(jì)算含量,得每粒的含量,比較即得含量均勻度。
實(shí)施例六黃楊寧粉針(由河南省康利醫(yī)藥技術(shù)開發(fā)有限公司提供)色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性 固定相用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;甲酸銨緩沖液(取甲酸銨15.0g,加甲酸10ml,加水使溶解并稀釋至1000ml)-甲醇(體積比為62∶38)為流動(dòng)相;流速為0.8ml/min;蒸發(fā)光散射檢測(cè)器漂移管溫度為100℃,氣體流速為2.7L/min;柱溫為30℃;供試品溶液色譜圖中,環(huán)維黃楊星D峰與其它生物堿峰均應(yīng)達(dá)到基線分離;理論塔板數(shù)按環(huán)維黃楊星D峰計(jì)算,應(yīng)不低于2000。
對(duì)照品溶液的制備 取經(jīng)用五氧化二磷為干燥劑,60℃恒溫減壓干燥至恒重的環(huán)維黃楊星D對(duì)照品4mg,精密稱定,置25ml容量瓶中,加流動(dòng)相適量,超聲使溶解,并稀釋至刻度,搖勻,即得。
供試品溶液的制備 取黃楊寧粉針適量(約相當(dāng)于環(huán)維黃楊星D 1.5mg),精密稱定,置10ml容量瓶中,加流動(dòng)相適量,超聲使溶解,并稀釋至刻度,搖勻,過0.45μm微孔濾膜,即得。
測(cè)定法 分別精密吸取對(duì)照品溶液10μl、20μl,供試品溶液20μl,注入高效液相色譜儀,供試品色譜圖見圖六,測(cè)量環(huán)維黃楊星D峰面積,按外標(biāo)兩點(diǎn)法以峰面積計(jì)算含量。
以下實(shí)施例七~實(shí)施例十均采用迪馬公司色譜柱Kromasil C8 5μm,250×4.6mm。
實(shí)施例七環(huán)維黃楊星D原料藥市購(gòu)(由河南龍都制藥廠生產(chǎn))色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性 固定相用辛烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;甲酸銨緩沖液(取甲酸銨15.0g,加甲酸10ml,加水使溶解并稀釋至1000ml)-甲醇(體積比為62∶38)為流動(dòng)相;流速為0.8ml/min;SEDEX蒸發(fā)光散射檢測(cè)器漂移管溫度為35℃,氣體流速為1.0L/min;柱溫為30℃;供試品溶液色譜圖中,環(huán)維黃楊星D峰與其它生物堿峰均應(yīng)達(dá)到基線分離;理論塔板數(shù)按環(huán)維黃楊星D峰計(jì)算,應(yīng)不低于2000。
對(duì)照品溶液的制備 取經(jīng)用五氧化二磷為干燥劑,60℃恒溫減壓干燥至恒重的環(huán)維黃楊星D對(duì)照品5mg,精密稱定,置25ml容量瓶中,加流動(dòng)相適量,超聲使溶解,并稀釋至刻度,搖勻,即得。
供試品溶液的制備 精密稱取環(huán)維黃楊星D原料藥9mg,置25ml容量瓶中,加流動(dòng)相適量,超聲使溶解,并稀釋至刻度,搖勻,過0.45μm微孔濾膜,即得。
測(cè)定法 分別精密吸取對(duì)照品溶液10μl、20μl,供試品溶液20μl,注入高效液相色譜儀,根據(jù)色譜圖的峰面積及樣品、對(duì)照品的進(jìn)樣量(μg),以外標(biāo)兩點(diǎn)法進(jìn)行計(jì)算,即得,計(jì)算公式如下對(duì)照品回歸方程Y=k×X+b(k,b為常數(shù))樣品含量C=100%×[25×(Y-b)]/(20×k×W)Y樣品的峰面積值W樣品的稱樣量(mg)C環(huán)維黃楊星D原料藥中環(huán)維黃楊星D的含量(%)實(shí)施例八環(huán)維黃楊星D原料藥市購(gòu)(由河南龍都制藥廠生產(chǎn))
色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性 固定相用辛烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;乙酸銨緩沖液(取乙酸銨18.0g,加乙酸10ml,加水使溶解并稀釋至1000ml)-甲醇(體積比為62∶38)為流動(dòng)相;流速為0.8ml/min;SEDEX蒸發(fā)光散射檢測(cè)器漂移管溫度為75℃,氣體流速為2.0L/min;柱溫為30℃;供試品溶液色譜圖中,環(huán)維黃楊星D峰與其它生物堿峰均應(yīng)達(dá)到基線分離;理論塔板數(shù)按環(huán)維黃楊星D峰計(jì)算,應(yīng)不低于2000。
對(duì)照品溶液的制備 取經(jīng)用五氧化二磷為干燥劑,60℃恒溫減壓干燥至恒重的環(huán)維黃楊星D對(duì)照品5mg,精密稱定,置25ml容量瓶中,加流動(dòng)相適量,超聲使溶解,并稀釋至刻度,搖勻,即得。
供試品溶液的制備 精密稱取環(huán)維黃楊星D原料藥9mg,置25ml容量瓶中,加流動(dòng)相適量,超聲使溶解,并稀釋至刻度,搖勻,過0.45μm微孔濾膜,即得。
測(cè)定法 分別精密吸取對(duì)照品溶液10μl、20μl,供試品溶液20μl,注入高效液相色譜儀,根據(jù)色譜圖的峰面積及樣品、對(duì)照品的進(jìn)樣量(μg),以外標(biāo)兩點(diǎn)法進(jìn)行計(jì)算,即得。
實(shí)施例九環(huán)維黃楊星D原料藥市購(gòu)(由河南龍都制藥廠生產(chǎn))色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性 固定相用辛烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;乙酸銨緩沖液(取乙酸銨18.0g,加乙酸10ml,加水使溶解并稀釋至1000ml)-乙腈(體積比為68∶32)為流動(dòng)相;流速為0.8ml/min;蒸發(fā)光散射檢測(cè)器漂移管溫度為90℃,氣體流速為2.0L/min;柱溫為30℃;供試品溶液色譜圖中,環(huán)維黃楊星D峰與其它生物堿峰均應(yīng)達(dá)到基線分離;理論塔板數(shù)按環(huán)維黃楊星D峰計(jì)算,應(yīng)不低于2000。
對(duì)照品溶液的制備 取經(jīng)用五氧化二磷為干燥劑,60℃恒溫減壓干燥至恒重的環(huán)維黃楊星D對(duì)照品5mg,精密稱定,置25ml容量瓶中,加流動(dòng)相適量,超聲使溶解,并稀釋至刻度,搖勻,即得。
供試品溶液的制備 精密稱取環(huán)維黃楊星D原料藥9mg,置25ml容量瓶中,加流動(dòng)相適量,超聲使溶解,并稀釋至刻度,搖勻,過0.45μm微孔濾膜,即得。
測(cè)定法 分別精密吸取對(duì)照品溶液10μl、20μl,供試品溶液20μl,注入高效液相色譜儀,根據(jù)色譜圖的峰面積及樣品、對(duì)照品的進(jìn)樣量(μg),以外標(biāo)兩點(diǎn)法進(jìn)行計(jì)算,即得。
實(shí)施例十環(huán)維黃楊星D原料藥市購(gòu)(由河南龍都制藥廠生產(chǎn))色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性 固定相用辛烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;甲酸銨緩沖液(取甲酸銨15.0g,加甲酸8ml,加水使溶解并稀釋至1000ml)-乙腈(體積比為68∶32)為流動(dòng)相;流速為0.8ml/min;SEDEX蒸發(fā)光散射檢測(cè)器漂移管溫度為50℃,氣體流速為1.5L/min;柱溫為30℃;供試品溶液色譜圖中,環(huán)維黃楊星D峰與其它生物堿峰均應(yīng)達(dá)到基線分離;理論塔板數(shù)按環(huán)維黃楊星D峰計(jì)算,應(yīng)不低于2000。
對(duì)照品溶液的制備 取經(jīng)用五氧化二磷為干燥劑,60℃恒溫減壓干燥至恒重的環(huán)維黃楊星D對(duì)照品5mg,精密稱定,置25ml容量瓶中,加流動(dòng)相適量,超聲使溶解,并稀釋至刻度,搖勻,即得。
供試品溶液的制備 精密稱取環(huán)維黃楊星D原料藥9mg,置25ml容量瓶中,加流動(dòng)相適量,超聲使溶解,并稀釋至刻度,搖勻,過0.45μm微孔濾膜,即得。
測(cè)定法 分別精密吸取對(duì)照品溶液10μl、20μl,供試品溶液20μl,注入高效液相色譜儀,根據(jù)色譜圖的峰面積及樣品、對(duì)照品的進(jìn)樣量(μg),以外標(biāo)兩點(diǎn)法進(jìn)行計(jì)算,即得。
以下實(shí)施例十一~實(shí)施例十四均采用迪馬公司產(chǎn)品[Diamonsil(鉆石)C18 5μm,250×4.6mm]實(shí)施例十一環(huán)維黃楊星D原料藥市購(gòu)(由河南龍都制藥廠生產(chǎn))色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性 固定相用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;乙酸銨緩沖液(取乙酸2ml,加水800ml左右,用乙酸銨調(diào)pH值至5.5,加水使溶解并稀釋至1000ml)-甲醇或乙腈(體積比為50∶50)為流動(dòng)相;流速為0.5ml/min;蒸發(fā)光散射檢測(cè)器漂移管溫度為80℃,氣體流速為1.5L/min;柱溫為30℃;供試品溶液色譜圖中,環(huán)維黃楊星D峰與其它生物堿峰均應(yīng)達(dá)到基線分離;理論塔板數(shù)按環(huán)維黃楊星D峰計(jì)算,應(yīng)不低于2000。
對(duì)照品溶液的制備 取經(jīng)用五氧化二磷為干燥劑,60℃恒溫減壓干燥至恒重的環(huán)維黃楊星D對(duì)照品5mg,精密稱定,置25ml容量瓶中,加流動(dòng)相適量,超聲使溶解,并稀釋至刻度,搖勻,即得。
供試品溶液的制備 精密稱取環(huán)維黃楊星D原料藥9mg,置25ml容量瓶中,加流動(dòng)相適量,超聲使溶解,并稀釋至刻度,搖勻,過0.45μm微孔濾膜,即得。
測(cè)定法 分別精密吸取對(duì)照品溶液10μl、20μl,供試品溶液20μl,注入高效液相色譜儀,根據(jù)色譜圖的峰面積及樣品、對(duì)照品的進(jìn)樣量(μg),以外標(biāo)兩點(diǎn)法進(jìn)行計(jì)算,即得。
實(shí)施例十二環(huán)維黃楊星D原料藥市購(gòu)(由河南龍都制藥廠生產(chǎn))色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性 固定相用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;乙酸銨緩沖液(取乙酸35ml,加水800ml左右,用乙酸銨調(diào)pH值至2.7,加水使溶解并稀釋至1000ml)-甲醇或乙腈(體積比為74∶26)為流動(dòng)相;流速為0.5ml/min;蒸發(fā)光散射檢測(cè)器漂移管溫度為80℃,氣體流速為1.5L/min;柱溫為30℃;供試品溶液色譜圖中,環(huán)維黃楊星D峰與其它生物堿峰均應(yīng)達(dá)到基線分離;理論塔板數(shù)按環(huán)維黃楊星D峰計(jì)算,應(yīng)不低于2000。
對(duì)照品溶液的制備 取經(jīng)用五氧化二磷為干燥劑,60℃恒溫減壓干燥至恒重的環(huán)維黃楊星D對(duì)照品5mg,精密稱定,置25ml容量瓶中,加流動(dòng)相適量,超聲使溶解,并稀釋至刻度,搖勻,即得。
供試品溶液的制備 精密稱取環(huán)維黃楊星D原料藥9mg,置25ml容量瓶中,加流動(dòng)相適量,超聲使溶解,并稀釋至刻度,搖勻,過0.45μm微孔濾膜,即得。
測(cè)定法 分別精密吸取對(duì)照品溶液10μl、20μl,供試品溶液20μl,注入高效液相色譜儀,根據(jù)色譜圖的峰面積及樣品、對(duì)照品的進(jìn)樣量(μg),以外標(biāo)兩點(diǎn)法進(jìn)行計(jì)算,即得。
實(shí)施例十三環(huán)維黃楊星D原料藥市購(gòu)(由河南龍都制藥廠生產(chǎn))色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性 固定相用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;甲酸銨緩沖液(取甲酸5ml,加水800ml左右,用甲酸銨調(diào)pH值至5.0,加水使溶解并稀釋至1000ml)-甲醇或乙腈(體積比為55∶45)為流動(dòng)相;流速為1.0ml/min;蒸發(fā)光散射檢測(cè)器漂移管溫度為120℃,氣體流速為3.5L/min;柱溫為40℃;供試品溶液色譜圖中,環(huán)維黃楊星D峰與其它生物堿峰均應(yīng)達(dá)到基線分離;理論塔板數(shù)按環(huán)維黃楊星D峰計(jì)算,應(yīng)不低于2000。
對(duì)照品溶液的制備 取經(jīng)用五氧化二磷為干燥劑,60℃恒溫減壓干燥至恒重的環(huán)維黃楊星D對(duì)照品5mg,精密稱定,置25ml容量瓶中,加流動(dòng)相適量,超聲使溶解,并稀釋至刻度,搖勻,即得。
供試品溶液的制備 精密稱取環(huán)維黃楊星D原料藥9mg,置25ml容量瓶中,加流動(dòng)相適量,超聲使溶解,并稀釋至刻度,搖勻,過0.45μm微孔濾膜,即得。
測(cè)定法 分別精密吸取對(duì)照品溶液10μl、20μl,供試品溶液20μl,注入高效液相色譜儀,根據(jù)色譜圖的峰面積及樣品、對(duì)照品的進(jìn)樣量(μg),以外標(biāo)兩點(diǎn)法進(jìn)行計(jì)算,即得。
實(shí)施例十四環(huán)維黃楊星D原料藥市購(gòu)(由河南龍都制藥廠生產(chǎn))色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性 固定相用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;甲酸銨緩沖液(取甲酸20ml,加水800ml左右,用甲酸銨調(diào)pH值至3.0,加水使溶解并稀釋至1000ml)-甲醇或乙腈(體積比為69∶31)為流動(dòng)相;流速為1.0ml/min;蒸發(fā)光散射檢測(cè)器漂移管溫度為120℃,氣體流速為3.5L/min;柱溫為40℃;供試品溶液色譜圖中,環(huán)維黃楊星D峰與其它生物堿峰均應(yīng)達(dá)到基線分離;理論塔板數(shù)按環(huán)維黃楊星D峰計(jì)算,應(yīng)不低于2000。
對(duì)照品溶液的制備 取經(jīng)用五氧化二磷為干燥劑,60℃恒溫減壓干燥至恒重的環(huán)維黃楊星D對(duì)照品5mg,精密稱定,置25ml容量瓶中,加流動(dòng)相適量,超聲使溶解,并稀釋至刻度,搖勻,即得。
供試品溶液的制備 精密稱取環(huán)維黃楊星D原料藥9mg,置25ml容量瓶中,加流動(dòng)相適量,超聲使溶解,并稀釋至刻度,搖勻,過0.45μm微孔濾膜,即得。
測(cè)定法 分別精密吸取對(duì)照品溶液10μl、20μl,供試品溶液20μl,注入高效液相色譜儀,根據(jù)色譜圖的峰面積及樣品、對(duì)照品的進(jìn)樣量(μg),以外標(biāo)兩點(diǎn)法進(jìn)行計(jì)算,即得。
實(shí)施例十五環(huán)維黃楊星D原料藥市購(gòu)(由河南龍都制藥廠生產(chǎn))色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性 固定相用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;乙酸銨緩沖液(取乙酸2ml,加水800ml左右,用乙酸銨調(diào)pH值至5.5,加水使溶解并稀釋至1000ml)-甲醇或乙腈(體積比為50∶50)為流動(dòng)相;流速為0.5ml/min;蒸發(fā)光散射檢測(cè)器分流進(jìn)樣,漂移管溫度為30℃,氣體流速為0.8L/min;柱溫為30℃;供試品溶液色譜圖中,環(huán)維黃楊星D峰與其它生物堿峰均應(yīng)達(dá)到基線分離;理論塔板數(shù)按環(huán)維黃楊星D峰計(jì)算,應(yīng)不低于2000。
對(duì)照品溶液的制備 取經(jīng)用五氧化二磷為干燥劑,60℃恒溫減壓干燥至恒重的環(huán)維黃楊星D對(duì)照品5mg,精密稱定,置25ml容量瓶中,加流動(dòng)相適量,超聲使溶解,并稀釋至刻度,搖勻,即得。
供試品溶液的制備 精密稱取環(huán)維黃楊星D原料藥9mg,置25ml容量瓶中,加流動(dòng)相適量,超聲使溶解,并稀釋至刻度,搖勻,過0.45μm微孔濾膜,即得。
測(cè)定法 分別精密吸取對(duì)照品溶液10μl、20μl,供試品溶液20μl,注入高效液相色譜儀,根據(jù)色譜圖的峰面積及樣品、對(duì)照品的進(jìn)樣量(μg),以外標(biāo)兩點(diǎn)法進(jìn)行計(jì)算,即得。
實(shí)施例十六環(huán)維黃楊星D原料藥市購(gòu)(由河南龍都制藥廠生產(chǎn))色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性 固定相用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;乙酸銨緩沖液(取乙酸35ml,加水800ml左右,用乙酸銨調(diào)pH值至2.7,加水使溶解并稀釋至1000ml)-甲醇或乙腈(體積比為74∶26)為流動(dòng)相;流速為0.5ml/min;蒸發(fā)光散射檢測(cè)器分流進(jìn)樣,漂移管溫度為30℃,氣體流速為0.8L/min;柱溫為30℃;供試品溶液色譜圖中,環(huán)維黃楊星D峰與其它生物堿峰均應(yīng)達(dá)到基線分離;理論塔板數(shù)按環(huán)維黃楊星D峰計(jì)算,應(yīng)不低于2000。
對(duì)照品溶液的制備 取經(jīng)用五氧化二磷為干燥劑,60℃恒溫減壓干燥至恒重的環(huán)維黃楊星D對(duì)照品5mg,精密稱定,置25ml容量瓶中,加流動(dòng)相適量,超聲使溶解,并稀釋至刻度,搖勻,即得。
供試品溶液的制備 精密稱取環(huán)維黃楊星D原料藥9mg,置25ml容量瓶中,加流動(dòng)相適量,超聲使溶解,并稀釋至刻度,搖勻,過0.45μm微孔濾膜,即得。
測(cè)定法 分別精密吸取對(duì)照品溶液10μl、20μl,供試品溶液20μl,注入高效液相色譜儀,根據(jù)色譜圖的峰面積及樣品、對(duì)照品的進(jìn)樣量(μg),以外標(biāo)兩點(diǎn)法進(jìn)行計(jì)算,即得。
實(shí)施例十七環(huán)維黃楊星D原料藥市購(gòu)(由河南龍都制藥廠生產(chǎn))色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性 固定相用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;甲酸銨緩沖液(取甲酸5ml,加水800ml左右,用甲酸銨調(diào)pH值至5.0,加水使溶解并稀釋至1000ml)-甲醇或乙腈(體積比為55∶45)為流動(dòng)相;流速為1.0ml/min;蒸發(fā)光散射檢測(cè)器分流進(jìn)樣,漂移管溫度為80℃,氣體流速為2.0L/min;柱溫為40℃;供試品溶液色譜圖中,環(huán)維黃楊星D峰與其它生物堿峰均應(yīng)達(dá)到基線分離;理論塔板數(shù)按環(huán)維黃楊星D峰計(jì)算,應(yīng)不低于2000。
對(duì)照品溶液的制備 取經(jīng)用五氧化二磷為干燥劑,60℃恒溫減壓干燥至恒重的環(huán)維黃楊星D對(duì)照品5mg,精密稱定,置25ml容量瓶中,加流動(dòng)相適量,超聲使溶解,并稀釋至刻度,搖勻,即得。
供試品溶液的制備 精密稱取環(huán)維黃楊星D原料藥9mg,置25ml容量瓶中,加流動(dòng)相適量,超聲使溶解,并稀釋至刻度,搖勻,過0.45μm微孔濾膜,即得。
測(cè)定法 分別精密吸取對(duì)照品溶液10μl、20μl,供試品溶液20μl,注入高效液相色譜儀,根據(jù)色譜圖的峰面積及樣品、對(duì)照品的進(jìn)樣量(μg),以外標(biāo)兩點(diǎn)法進(jìn)行計(jì)算,即得。
實(shí)施例十八環(huán)維黃楊星D原料藥市購(gòu)(由河南龍都制藥廠生產(chǎn))色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性 固定相用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;甲酸銨緩沖液(取甲酸20ml,加水800ml左右,用甲酸銨調(diào)pH值至3.0,加水使溶解并稀釋至1000ml)-甲醇或乙腈(體積比為69∶31)為流動(dòng)相;流速為1.0ml/min;蒸發(fā)光散射檢測(cè)器分流進(jìn)樣,漂移管溫度為80℃,氣體流速為2.0L/min;柱溫為40℃;供試品溶液色譜圖中,環(huán)維黃楊星D峰與其它生物堿峰均應(yīng)達(dá)到基線分離;理論塔板數(shù)按環(huán)維黃楊星D峰計(jì)算,應(yīng)不低于2000。
對(duì)照品溶液的制備 取經(jīng)用五氧化二磷為干燥劑,60℃恒溫減壓干燥至恒重的環(huán)維黃楊星D對(duì)照品5mg,精密稱定,置25ml容量瓶中,加流動(dòng)相適量,超聲使溶解,并稀釋至刻度,搖勻,即得。
供試品溶液的制備 精密稱取環(huán)維黃楊星D原料藥9mg,置25ml容量瓶中,加流動(dòng)相適量,超聲使溶解,并稀釋至刻度,搖勻,過0.45μm微孔濾膜,即得。
測(cè)定法 分別精密吸取對(duì)照品溶液10μl、20μl,供試品溶液20μl,注入高效液相色譜儀,根據(jù)色譜圖的峰面積及樣品、對(duì)照品的進(jìn)樣量(μg),以外標(biāo)兩點(diǎn)法進(jìn)行計(jì)算,即得。
權(quán)利要求
1.一種環(huán)維黃楊星D原料藥及其各種制劑中環(huán)維黃楊星D含量的高效液相色譜測(cè)定法和環(huán)維黃楊星D中雜質(zhì)檢查的高效液相色譜法,其特征在于其色譜條件中固定相采用十八烷基硅烷鍵合硅膠或辛烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;流動(dòng)相采用甲酸(甲酸銨)緩沖液-甲醇體系、乙酸(乙酸銨)緩沖液-甲醇體系、甲酸(甲酸銨)緩沖液-乙腈體系或乙酸(乙酸銨)緩沖液-乙腈體系;采用蒸發(fā)光散射檢測(cè)器(ELSD)檢測(cè),漂移管溫度20~150℃;氣體流速0.1L/min~6.0L/min。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的環(huán)維黃楊星D原料藥及其各種制劑中環(huán)維黃楊星D含量的高效液相色譜測(cè)定法和環(huán)維黃楊星D中雜質(zhì)檢查的高效液相色譜法,其特征在于其色譜條件中固定相采用十八烷基硅烷鍵合硅膠或辛烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;流動(dòng)相采用甲酸(甲酸銨)緩沖液-甲醇體系、乙酸(乙酸銨)緩沖液-甲醇體系、甲酸(甲酸銨)緩沖液-乙腈體系。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的環(huán)維黃楊星D原料藥及其各種制劑中環(huán)維黃楊星D含量的高效液相色譜測(cè)定法和環(huán)維黃楊星D中雜質(zhì)檢查的高效液相色譜法,其特征在于其色譜條件中固定相采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;流動(dòng)相采用甲酸(甲酸銨)緩沖液-甲醇體系、乙酸(乙酸銨)緩沖液-甲醇體系。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的環(huán)維黃楊星D原料藥及其各種制劑中環(huán)維黃楊星D含量的高效液相色譜測(cè)定法和環(huán)維黃楊星D中雜質(zhì)檢查的高效液相色譜法,其特征在于其色譜條件中甲酸銨緩沖液(取甲酸0.5~50ml,加水800ml左右,加甲酸銨調(diào)pH值至2.3~6.0,加水至1000ml)-甲醇或乙腈(體積比為35~89∶65~11)為流動(dòng)相或乙酸銨緩沖液(取乙酸0.5~50ml,加水800ml左右,加乙酸銨調(diào)pH值至2.3~6.0,加水至1000ml)-甲醇或乙腈(體積比為35~89∶65~11)為流動(dòng)相。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的環(huán)維黃楊星D原料藥及其各種制劑中環(huán)維黃楊星D含量的高效液相+色譜測(cè)定法和環(huán)維黃楊星D中雜質(zhì)檢查的高效液相色譜法,其特征在于其色譜條件中甲酸銨緩沖液(取甲酸2~35ml,加水800ml左右,加甲酸銨調(diào)pH值至2.7~5.5,加水至1000ml)-甲醇或乙腈(體積比為50~74∶50~26)為流動(dòng)相或乙酸銨緩沖液(取甲酸2~35ml,加水800ml左右,加乙酸銨調(diào)pH值至2.7~5.5,加水至1000ml)-甲醇或乙腈(體積比為50~74∶50~26)為流動(dòng)相。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的環(huán)維黃楊星D原料藥及其各種制劑中環(huán)維黃楊星D含量的高效液相色譜測(cè)定法和環(huán)維黃楊星D中雜質(zhì)檢查的高效液相色譜法,其特征在于其色譜條件中甲酸銨緩沖液(取甲酸5~20ml,加水00ml左右,加甲酸銨調(diào)pH值至3.0~5.0,加水至1000ml)-甲醇或乙腈(體積比為55~69∶45~31)為流動(dòng)相或乙酸銨緩沖液(取乙酸5~20ml,加水800ml左右,加乙酸銨調(diào)pH值至3.0~5.0,加水至1000ml)-甲醇或乙腈(體積比為55~69∶45~31)為流動(dòng)相。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的環(huán)維黃楊星D原料藥及其各種制劑中環(huán)維黃楊星D含量的高效液相色譜測(cè)定法和環(huán)維黃楊星D中雜質(zhì)檢查的高效液相色譜法,其特征在采用分流進(jìn)樣法漂移管溫度為20~100℃,氣體流速0.1L/min~4.0L/min。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的環(huán)維黃楊星D原料藥及其各種制劑中環(huán)維黃楊星D含量的高效液相色譜測(cè)定法和環(huán)維黃楊星D中雜質(zhì)檢查的高效液相色譜法,其特征在采用分流進(jìn)樣法漂移管溫度為30~80℃,氣體流速0.3L/min~3.0L/min。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的環(huán)維黃楊星D原料藥及其各種制劑中環(huán)維黃楊星D含量的高效液相色譜測(cè)定法和環(huán)維黃楊星D中雜質(zhì)檢查的高效液相色譜法,其特征在采用分流進(jìn)樣法漂移管溫度為40~70℃,氣體流速0.5L/min~2.0L/min。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的環(huán)維黃楊星D原料藥及其各種制劑中環(huán)維黃楊星D含量的高效液相色譜測(cè)定法和環(huán)維黃楊星D中雜質(zhì)檢查的高效液相色譜法,其特征在采用不分流進(jìn)樣法漂移管溫度為70~150℃,氣體流速0.1L/min~6.0L/min。
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的環(huán)維黃楊星D原料藥及其各種制劑中環(huán)維黃楊星D含量的高效液相色譜測(cè)定法和環(huán)維黃楊星D中雜質(zhì)檢查的高效液相色譜法,其特征在采用不分流進(jìn)樣法漂移管溫度為80~140℃,氣體流速1.0L/min~4.5L/min。
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的環(huán)維黃楊星D原料藥及其各種制劑中環(huán)維黃楊星D含量的高效液相色譜測(cè)定法和環(huán)維黃楊星D中雜質(zhì)檢查的高效液相色譜法,其特征在采用不分流進(jìn)樣法漂移管溫度為90~120℃,氣體流速1.5L/min~3.5L/min。
13.根據(jù)權(quán)利要求1所述的環(huán)維黃楊星D原料藥及其各種制劑中環(huán)維黃楊星D含量的高效液相色譜測(cè)定法和環(huán)維黃楊星D中雜質(zhì)檢查的高效液相色譜法,其特征在于環(huán)維黃楊星D原料藥及其各種制劑直接用流動(dòng)相溶解,過濾,進(jìn)高效液相色譜儀。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種環(huán)維黃楊星D原料藥及其各種制劑(如黃楊寧片、黃楊寧滴丸、黃楊寧粉針等)中環(huán)維黃楊星D含量的高效液相色譜測(cè)定法和環(huán)維黃楊星D中雜質(zhì)檢查的高效液相色譜法。該方法色譜條件中固定相用十八烷基硅烷鍵合硅膠或辛烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;流動(dòng)相采用甲酸(甲酸銨)緩沖液-甲醇體系、乙酸(乙酸銨)緩沖液-甲醇體系、甲酸(甲酸銨)緩沖液-乙腈體系或乙酸(乙酸銨)緩沖液-乙腈體系;使用蒸發(fā)光散射檢測(cè)器(ELSD)檢測(cè),漂移管溫度;漂移管溫度20~150℃;氣體流速0.1L/min~6.0L/min,分流或不分流進(jìn)樣。該方法操作簡(jiǎn)單、省時(shí);專屬性強(qiáng);適用性廣,能很好地將環(huán)維黃楊星D原料藥中與環(huán)維黃楊星D結(jié)構(gòu)相似的幾種生物堿有效地分開,從而能準(zhǔn)確地測(cè)定它們各自的含量。利用該方法還可以檢測(cè)環(huán)維黃楊星D中的雜質(zhì)。利用該方法還可以測(cè)定黃楊寧片、黃楊寧滴丸、黃楊寧粉針等中環(huán)維黃楊星D的含量均勻度,很好地滿足藥典含量及含量均勻度測(cè)定的要求。
文檔編號(hào)G01N30/06GK1786706SQ200410093888
公開日2006年6月14日 申請(qǐng)日期2004年12月10日 優(yōu)先權(quán)日2004年12月10日
發(fā)明者李偉, 魏峰 申請(qǐng)人:天津天士力制藥股份有限公司