專利名稱:致病性細(xì)菌免疫檢測芯片的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本實(shí)用新型涉及一種用于檢測糞便、土壤、水、食品、發(fā)酵材料等以及水、環(huán)境中致病性細(xì)菌的致病性細(xì)菌免疫檢測芯片。
背景技術(shù):
致病性細(xì)菌盡管種類繁多但各種屬間在形態(tài)結(jié)構(gòu)等各有其特點(diǎn),一般可經(jīng)過不同染色方法和或通過顯微鏡可以得到鑒定。目前細(xì)菌檢驗(yàn)有生化培養(yǎng)方法該方法優(yōu)點(diǎn)是檢測到的細(xì)菌結(jié)果可靠,缺點(diǎn)是檢測所化時(shí)間很長,在細(xì)菌培養(yǎng)過程中可能會有些菌之間會會發(fā)生抑制而影響檢測結(jié)果可靠性,探針標(biāo)記的免疫方法;檢測結(jié)果可靠,缺點(diǎn)是探針標(biāo)記較貴而且一種探針只能檢測一種細(xì)菌,工作量大;pcr基因擴(kuò)增可以對一些特殊細(xì)菌有針對性檢測但需設(shè)計(jì)引物,不但費(fèi)時(shí)而且較貴同時(shí)還會出現(xiàn)假陽性。如腸道致病菌大腸桿菌0157、0139型霍亂、傷寒、痢疾等感染引發(fā)的傳染性疾病。目前國內(nèi)外在分子水平上對腸道致病菌的檢測是先培養(yǎng)篩選,然后用基因擴(kuò)增的方法經(jīng)凝膠電泳分析進(jìn)行快速檢測?;蛩缴贤ㄟ^檢測目的基因如rfbE、flicH7等特異性序列來檢測鑒定大腸桿菌0157H7;通過檢測目的基因如ctxA、Hly、TcpA毒力基因等來檢測0139型霍亂弧菌。但是,這些裝置存在假陽性高、費(fèi)時(shí)費(fèi)力等技術(shù)缺陷。
發(fā)明內(nèi)容
本實(shí)用新型在于提出一種快速、準(zhǔn)確的用于對糞便、土壤、水、植物種子、食品、發(fā)酵材料中的致病性細(xì)菌進(jìn)行檢測的致病性細(xì)菌免疫檢測芯片,本實(shí)用新型可實(shí)現(xiàn)高通量檢測。
本實(shí)用新型采用如下技術(shù)方案本實(shí)用新型所述產(chǎn)品是一種致病性細(xì)菌免疫檢測芯片,包括載體,在載體上設(shè)置通過氨基或醛基的化學(xué)基團(tuán)固定互不相同的細(xì)菌抗體探針,且細(xì)菌抗體探針按陣列排列在載體上。
與現(xiàn)有技術(shù)相比,本實(shí)用新型具有如下優(yōu)點(diǎn)本實(shí)用新型利用活細(xì)菌表面完整的抗原或受體,可以特異地與修飾在固相載體(使用的載體可以是聚苯乙烯,纖維膜,玻璃,微孔板,PVDF膜中的一種,載體的表面經(jīng)過化學(xué)修飾,可以用戊二醛修飾法,聚賴氨酸修飾法,多糖修飾法,BSA-NHS修飾法,水凝膠修飾法其中的一種)。表面的抗體結(jié)合的原理,將對被檢測的樣本作出評價(jià)。本實(shí)用新型可對樣品可直接檢測,不需要進(jìn)行預(yù)處理、分離、培養(yǎng),同時(shí)檢測一個(gè)樣品中各種細(xì)菌,不需分別對每一種細(xì)菌進(jìn)行分離,只需將樣品上清液加到修飾有抗體的載體上,孵育10-50分鐘,即可根據(jù)各點(diǎn)所對應(yīng)的抗體上結(jié)合的細(xì)菌而判定細(xì)菌種類,對樣品含細(xì)菌情況作出正確評價(jià)。利用本實(shí)用新型得到的結(jié)果不僅可以檢測樣品中有無細(xì)菌而且還可以同時(shí)報(bào)告出樣品中含有多少種細(xì)菌,不需要再進(jìn)行菌種鑒定,結(jié)果可靠而且省時(shí)省力,檢測速度快,并可實(shí)現(xiàn)高通量檢測。
圖1是本實(shí)用新型結(jié)構(gòu)示意圖。
具體實(shí)施方式
本實(shí)用新型所述產(chǎn)品是一種致病性細(xì)菌免疫檢測芯片,包括載體1,在載體上設(shè)置通過氨基或醛基的化學(xué)基團(tuán)固定互不相同的細(xì)菌抗體探針2,且細(xì)菌抗體探針2按陣列排列在載體上。
權(quán)利要求1.一種致病性細(xì)菌免疫檢測芯片,包括載體(1),其特征在于在載體上設(shè)置通過氨基或醛基的化學(xué)基團(tuán)固定互不相同的細(xì)菌抗體探針(2),且細(xì)菌抗體探針(2)按陣列排列在載體上。
專利摘要本實(shí)用新型所述產(chǎn)品是一種致病性細(xì)菌免疫檢測芯片,包括載體,在載體上設(shè)置通過氨基或醛基的化學(xué)基團(tuán)固定互不相同的細(xì)菌抗體探針,且細(xì)菌抗體探針按陣列排列在載體上。本實(shí)用新型可對樣品可直接檢測,不需要進(jìn)行預(yù)處理、分離、培養(yǎng),同時(shí)檢測一個(gè)樣品中各種細(xì)菌,不需分別對每一種細(xì)菌進(jìn)行分離,只需將樣品上清液加到修飾有抗體的載體上,孵育10-50分鐘,即可根據(jù)各點(diǎn)所對應(yīng)的抗體上結(jié)合的細(xì)菌而判定細(xì)菌種類,對樣品含細(xì)菌情況作出正確評價(jià)。利用本實(shí)用新型得到的結(jié)果不僅可以檢測樣品中有無細(xì)菌而且還可以同時(shí)報(bào)告出樣品中含有多少種細(xì)菌,不需要再進(jìn)行菌種鑒定,結(jié)果可靠而且省時(shí)省力,檢測速度快,并可實(shí)現(xiàn)高通量檢測。
文檔編號G01N33/531GK2733357SQ20042008062
公開日2005年10月12日 申請日期2004年10月29日 優(yōu)先權(quán)日2004年10月29日
發(fā)明者唐祖明, 陸祖宏, 郁穎蕾, 史智揚(yáng) 申請人:東南大學(xué)