專利名稱：用于多元結(jié)合分析的寡核苷酸對(duì)的制作方法
與相關(guān)申請(qǐng)的交叉引用本申請(qǐng)與2004年4月18日提交的題目為“用于多元結(jié)合分析的寡核苷酸對(duì)”的美國(guó)專利申請(qǐng)No.10/419,020相關(guān)，其內(nèi)容在此以其全文引為參考。
背景技術(shù)：
下面的描述提供了與本發(fā)明相關(guān)的信息的概要，但并不表明任何提供的信息或引用的文獻(xiàn)是本發(fā)明的現(xiàn)有技術(shù)。
寡核苷酸雜交可廣泛地用于多種分析和診斷分析方法中，例如分析物的分類、檢測(cè)和鑒定。重要的是使非互補(bǔ)性的寡核苷酸在這樣的分析中彼此不發(fā)生交叉雜交。寡核苷酸的交叉雜交部分是由于不同核苷酸之間堿基堆積能量的可變性和寡核苷酸中核苷酸序列的變化。另一組影響寡核苷酸交叉雜交的參數(shù)是雜交反應(yīng)的條件。不幸的是，在基于寡核苷酸的分析、特別是在使用多個(gè)寡核苷酸對(duì)的分析中，這樣的非特異性交叉雜交是常見(jiàn)的問(wèn)題，是假陽(yáng)性或假陰性信號(hào)的主要原因。
其它對(duì)使用多個(gè)寡核苷酸的分析系統(tǒng)的設(shè)計(jì)和執(zhí)行帶來(lái)問(wèn)題的因素是需要基本上所有配對(duì)的寡核苷酸都具有基本上相同的熔點(diǎn)溫度Tm，所有配對(duì)的寡核苷酸以基本上相同的速率并在同樣的時(shí)間框架內(nèi)雜交，以及需要寡核苷酸在室溫下相對(duì)快速地雜交在一起而不發(fā)生顯著的交叉雜交。
所需要的是用于檢測(cè)多種分析物的基于寡核苷酸的分析系統(tǒng)，其中使用了一組寡核苷酸對(duì)，在不同的對(duì)之間沒(méi)有明顯的交叉雜交，從而不產(chǎn)生假陽(yáng)性或陰性信號(hào)。還需要這樣的基于寡核苷酸的分析系統(tǒng)，其中所有配對(duì)的寡核苷酸以基本上相同的速率雜交、具有基本上相同的Tm，而且其中互補(bǔ)的寡核苷酸對(duì)能夠在室溫相對(duì)快速地雜交在一起而不發(fā)生顯著的交叉雜交。不幸的是，到目前為止這樣的分析系統(tǒng)還沒(méi)有獲得。
發(fā)明簡(jiǎn)述本發(fā)明滿足了這些需要。本發(fā)明是用于分類、檢測(cè)和鑒定分析物的分析系統(tǒng)、試劑盒和方法。分析系統(tǒng)包括一對(duì)或多對(duì)互補(bǔ)的寡核苷酸，其中一對(duì)中的每個(gè)寡核苷酸與該對(duì)中的另一個(gè)寡核苷酸至少部分互補(bǔ)，并且寡核苷酸的系列經(jīng)過(guò)設(shè)計(jì)以最小化不同對(duì)之間的交叉雜交。在優(yōu)選情況下，不同的寡核苷酸對(duì)以基本上相同的速率雜交、具有基本上相同的Tm、在室溫下相對(duì)快速地雜交到一起而沒(méi)有可檢測(cè)到的交叉雜交。每個(gè)寡核苷酸對(duì)含有第一寡核苷酸和第二寡核苷酸。分析物結(jié)合試劑被連接到寡核苷酸對(duì)的第一寡核苷酸上。寡核苷酸對(duì)的第二寡核苷酸被固定到固相支持物上。在優(yōu)選實(shí)施方案中，寡核苷酸選自具有SEQ ID NOS1-188中的12個(gè)或以上連續(xù)核苷酸的序列組成。本發(fā)明還包括了產(chǎn)生用于分析系統(tǒng)、試劑盒和方法的互補(bǔ)寡核苷酸對(duì)的核酸序列的方法。
附圖簡(jiǎn)述本發(fā)明的這些特點(diǎn)、特色和優(yōu)點(diǎn)在參考了下面的描述、權(quán)利要求書和附圖后將變得更好理解，其中

圖1圖示了具有本發(fā)明特征的夾心分析流程圖。
序列表本發(fā)明隨附了一張軟盤，含有本文引用的核酸序列；軟盤上的信息在此引為參考。
發(fā)明描述下面的討論描述了本發(fā)明的實(shí)施方案和這些實(shí)施方案的幾種變化。然而，這些討論不應(yīng)該被當(dāng)作將本發(fā)明限制為這些特定的實(shí)施方案。本領(lǐng)域的專業(yè)技術(shù)人員也將會(huì)認(rèn)識(shí)到大量的其它實(shí)施方案。在本文描述的被稱為優(yōu)選的或特別優(yōu)選的所有實(shí)施方案中，這些實(shí)施方案并不是必需的，盡管它們可能是優(yōu)選的。
定義術(shù)語(yǔ)“核酸”和“多聚核苷酸”在本文中可以互換使用，包括了自然發(fā)生的或合成的雙鏈脫氧核糖核酸(在本文中后面稱為“DNA”)、單鏈DNA或核糖核酸(在本文中后面稱為“RNA”)。
本文使用的術(shù)語(yǔ)“寡核苷酸”是包含了天然的或修飾的單體、修飾的骨架或修飾的連接鍵的線性的寡聚物的核酸，包括脫氧核糖核苷、核糖核苷、它們的端基異構(gòu)體(anomeric form)、肽核酸(PNAs)等，它們能夠通過(guò)常規(guī)形式的單體-單體相互作用、例如Watson-Crick類型的堿基配對(duì)等方式，與寡核苷酸或多聚核苷酸進(jìn)行特異性結(jié)合。單體通常是通過(guò)磷酸二酯鍵或其類似物連接，從而形成大小范圍從幾個(gè)單體單位例如3-4個(gè)到幾十個(gè)單體單位的寡核苷酸。磷酸二酯鍵的類似物包括硫代磷酸酯、二硫代磷酸酯、磷酸苯胺酯(phosphoranilidate)、氨基磷酸酯等。替代的化學(xué)物質(zhì)，例如硫代磷酸酯、氨基磷酸酯以及那些同樣產(chǎn)生非天然骨架的基團(tuán)，只要產(chǎn)生的寡核苷酸的雜交效能不受到負(fù)面影響，也可以被使用。寡核苷酸可以通過(guò)多種方法合成，例如Ozaki等，Nucleic Acids Research，205205-5214(1992)；Agrawal等，Nucleic Acids Research，185419-5423(1990)等。
術(shù)語(yǔ)“互補(bǔ)的”或“互補(bǔ)性”是指多聚核苷酸通過(guò)堿基配對(duì)的自然結(jié)合。例如序列5′-AGT-3′與互補(bǔ)序列3′-TCA-5′結(jié)合。兩個(gè)單鏈分子之間的互補(bǔ)性可以是“部分的”，以至于只有一些核酸結(jié)合并形成雙鏈體，或者互補(bǔ)性也可以是“完全的”以至于在單鏈分子之間存在完全的互補(bǔ)性。核酸鏈之間的互補(bǔ)性程度對(duì)于核酸鏈之間雜交的效率和強(qiáng)度具有重要的影響。
核酸“雙鏈體”是通過(guò)DNA或RNA的互補(bǔ)鏈的堿基配對(duì)形成的，它們形成了反向平行的復(fù)合物，其中一條鏈的3′-末端定向結(jié)合到相對(duì)鏈的5′末端。這種堿基配對(duì)也包含了“核苷類似物”的配對(duì)，例如脫氧肌苷、具有2-氨基嘌呤堿基的核苷等也可以使用。在本文中使用的“核苷”包括天然的核苷、包括2′-脫氧和2′-羥基形式的核苷，例如在Kornberg和Baker，DNA Replication，2nd Ed.(Freeman，San Francisco，1992)中描述的那些?！邦愃莆铩痹谥负塑諘r(shí)包括具有修飾的堿基基團(tuán)和/或修飾的糖基團(tuán)的合成核苷，它們能夠進(jìn)行特異的雜交，例如Scheit，Nucleotide Analogs(John Wiley，New York，1980)；Uhlman和Peyman，Chemical Reviews，90543-584(1990)等中描述的那些。這些類似物包括被設(shè)計(jì)用來(lái)增強(qiáng)結(jié)合性質(zhì)、減少簡(jiǎn)并度、增加特異性等的合成核苷。術(shù)語(yǔ)“雜交化”或“雜交”其目的包括了在一定條件下混合至少兩種核酸分子，使得當(dāng)存在至少兩種互補(bǔ)的核酸序列時(shí)，它們將通過(guò)堿基配對(duì)形成雙鏈結(jié)構(gòu)。
本發(fā)明涉及用于分析物的分析系統(tǒng)。該分析系統(tǒng)包括一對(duì)或多對(duì)互補(bǔ)的寡核苷酸。每對(duì)互補(bǔ)的寡核苷酸含有第一寡核苷酸和第二寡核苷酸。分析物結(jié)合試劑被連接到寡核苷酸對(duì)的第一寡核苷酸上。在優(yōu)選實(shí)施方案中，每對(duì)的第一寡核苷酸上連接了不同的分析物結(jié)合試劑，每個(gè)不同的分析物結(jié)合試劑對(duì)一個(gè)或多個(gè)樣品中的不同分析物具有特異性。寡核苷酸對(duì)的第二寡核苷酸被固定到固相支持物上。
本發(fā)明的寡核苷酸被選擇為具有能夠使寡核苷酸與不同的寡核苷酸對(duì)的交叉雜交最小化的序列。每對(duì)互補(bǔ)的寡核苷酸一般含有相同總數(shù)量的核苷酸，或核苷酸的總數(shù)差別少于2到5個(gè)寡核苷酸，更典型的是差別為3個(gè)寡核苷酸或以下。每個(gè)寡核苷酸的鳥嘌呤和胞嘧啶含量，合稱為“GC含量”，一般在大約35％和大約65％之間，每個(gè)寡核苷酸更典型的GC含量在大約50％和大約60％之間。優(yōu)選情況下，每對(duì)互補(bǔ)的寡核苷酸在預(yù)先選定的雜交條件下具有基本上相同的Tm(熔點(diǎn)溫度)。本發(fā)明的寡核苷酸包括SEQ ID NO1-SEQ ID NO188，以及它們的變異體或一部分，其中SEQ ID NO1與SEQ ID NO2互補(bǔ)，SEQ ID NO3與SEQ ID NO4互補(bǔ)，SEQ ID NO5與SEQ ID NO6互補(bǔ)，以此類推。SEQ ID NOS1-188表示的寡核苷酸顯示在表1中。
含有上述序列的一部分的寡核苷酸一般從由下列序列組成的組中選擇具有SEQ ID NOS1-188中12個(gè)或更多連續(xù)的核苷酸的序列；具有SEQ ID NOS1-188中14個(gè)或更多連續(xù)的核苷酸的序列；具有SEQID NOS1-188中16個(gè)或更多連續(xù)的核苷酸的序列；具有SEQ IDNOS1-188中18個(gè)或更多連續(xù)的核苷酸的序列；具有SEQ ID NOS1-188中20個(gè)或更多連續(xù)的核苷酸的序列；具有SEQ ID NOS1-188中22個(gè)或更多連續(xù)的核苷酸的序列；具有SEQ ID NOS1-188中24個(gè)或更多連續(xù)的核苷酸的序列；具有SEQ ID NOS1-188中26個(gè)或更多連續(xù)的核苷酸的序列；具有SEQ ID NOS1-188中28個(gè)或更多連續(xù)的核苷酸的序列；以及與SEQ ID NOS1-188一致的序列。連續(xù)的核苷酸是指那些在多聚核苷酸鏈中一般通過(guò)磷酸二酯鍵直接連接在一起的核苷酸。此外，寡核苷酸還可以從由下列序列組成的組中選擇在SEQ IDNOS1-188的序列的任何核苷酸上具有1個(gè)核苷酸差異的序列；在SEQID NOS1-188的序列的任何2個(gè)或更少的核苷酸上具有2個(gè)或更少的核苷酸差異的寡核苷酸；在SEQ ID NOS1-188的序列的任何3個(gè)或更少的核苷酸上具有3個(gè)或更少的核苷酸差異的寡核苷酸；在SEQ IDNOS1-188的序列的任何4個(gè)或更少的核苷酸上具有4個(gè)或更少的核苷酸差異的寡核苷酸以及在SEQ ID NOS1-188的序列的任何5個(gè)或更少的核苷酸上具有5個(gè)或更少的核苷酸差異的寡核苷酸。可以選擇的分析系統(tǒng)使用SEQ ID NO1-188中的一個(gè)或更多寡核苷酸對(duì)或本文描述的其變異體；SEQ ID NO1-188中的10個(gè)寡核苷酸對(duì)或本文描述的其變異體；SEQ ID NO1-188中的10個(gè)或更多寡核苷酸對(duì)或本文描述的其變異體；SEQ ID NO1-188中的14個(gè)或更多寡核苷酸對(duì)或本文描述的其變異體；以及SEQ ID NO1-188中的所有寡核苷酸對(duì)或本文描述的其變異體。
在特定的實(shí)施方案中本發(fā)明是用于含有10和14對(duì)互補(bǔ)寡核苷酸的分析物的分析系統(tǒng)。每對(duì)互補(bǔ)的寡核苷酸含有第一寡核苷酸和第二寡核苷酸，其中第一寡核苷酸上連接有分析物結(jié)合試劑，第二寡核苷酸被固定到固相支持物上。寡核苷酸從一組序列中選擇，這些序列具有由下列序列組成的組中的12個(gè)或更多的連續(xù)的核苷酸SEQ IDNO11、SEQ ID NO57、SEQ ID NO59、SEQ ID NO.65、SEQ ID NO67、SEQ ID NO69、SEQ ID NO75、SEQ ID NO77、SEQ ID NO93、SEQID NO95、SEQ ID NO117、SEQ ID NO123、SEQ ID NO129、SEQ IDNO163、以及SEQ ID NO187和它們相應(yīng)的互補(bǔ)寡核苷酸，表示為SEQID NO12、SEQ ID NO58、SEQ ID NO60、SEQ ID NO.66、SEQ IDNO68、SEQ ID NO70、SEQ ID NO76、SEQ ID NO78、SEQ ID NO94、SEQ ID NO96、SEQ ID NO118、SEQ ID NO124、SEQ ID NO130、SEQ ID NO164和SEQ ID NO188。
在某些實(shí)施方案中，寡核苷酸還含有一個(gè)或多個(gè)接頭分子或接頭核酸序列，它們共價(jià)結(jié)合到具有SEQ ID NOS1-188序列或其一部分的寡核苷酸上。接頭分子或接頭核酸序列一般位于寡核苷酸的5’-端或3’-端，因此擴(kuò)展到超出了與寡核苷酸對(duì)中的另一個(gè)寡核苷酸進(jìn)行堿基配對(duì)的寡核苷酸的區(qū)域之外。當(dāng)存在接頭分子或接頭核酸序列時(shí)，一般將一對(duì)寡核苷酸中的第一寡核苷酸連接和結(jié)合到一個(gè)分析物結(jié)合試劑上，或?qū)⒁粚?duì)寡核苷酸中的第二寡核苷酸連接到固相支持物上。將寡核苷酸結(jié)合到不同固相支持物上的技術(shù)在本領(lǐng)域內(nèi)是眾所周知的，例如在Matson，R.等，Biopolymer Synthesis on Polypropylene SupportsOligonucleotide Arrays；Analytical Biochemistry 224，110-116(1995)；Milton，R.，美國(guó)專利No.6,146,833；Hermanson等，“ImmobilizedAffinity Ligand Techniques，”64-67頁(yè)(1992 Academic Press Inc.)中所描述的那些，其內(nèi)容以其全文引為參考。將寡核苷酸連接到蛋白和抗體上的方法在本領(lǐng)域內(nèi)也是眾所周知的，例如在Reddy等的美國(guó)專利No.5,648,213中所描述的那樣。
在優(yōu)選情況下，雜交反應(yīng)的條件被預(yù)先選擇以便在分析系統(tǒng)的寡核苷酸混合物中每個(gè)寡核苷酸只與其互補(bǔ)配對(duì)的寡核苷酸雜交。在本文中提到的只與其互補(bǔ)配對(duì)寡核苷酸雜交意味著交叉雜交不超過(guò)0.1％，在優(yōu)選情況下交叉雜交不超過(guò)0.01％。進(jìn)一步優(yōu)選在溫和反應(yīng)條件下來(lái)自不同對(duì)的寡核苷酸的交叉雜交不超過(guò)0.1％，優(yōu)選交叉雜交不超過(guò)0.01％。例如，這樣的溫和條件將包括在含有50-150mM NaCl的Tris鹽緩沖液的反應(yīng)混合物中于室溫保溫1小時(shí)。在這些條件下，本發(fā)明的寡核苷酸對(duì)雜交到一起，其交叉雜交不超過(guò)0.1％，在優(yōu)選情況下交叉雜交不超過(guò)0.01％。室溫一般被理解為包括一個(gè)大范圍的自然發(fā)生的或通過(guò)氣溫控制達(dá)到的室內(nèi)溫度，一般在大約華氏50度到大約華氏100度的范圍內(nèi)，更典型的是從大約華氏65度到大約華氏85度，最典型的是在大約華氏68度到大約華氏80度之間。
通過(guò)選擇核苷酸序列使得不同對(duì)的寡核苷酸具有非常低程度的互補(bǔ)性，可以使寡核苷酸對(duì)之間的交叉雜交得到部分最小化。此外，在優(yōu)選情況下當(dāng)將一個(gè)寡核苷酸的排列相對(duì)于另一個(gè)進(jìn)行移動(dòng)，包括引入間隙或形成環(huán)結(jié)構(gòu)，其中含有至少一些不與配對(duì)的寡核苷酸進(jìn)行堿基配對(duì)的核苷酸時(shí)，不同對(duì)的寡核苷酸具有非常低的互補(bǔ)性。
在分析系統(tǒng)中交叉雜交的測(cè)試使用一組SEQ ID NOS1-188中的第二寡核苷酸，以及連接了分析物結(jié)合試劑的單一的第一寡核苷酸。分析的進(jìn)行使用相對(duì)高濃度的單一分析物(濃度接近該分析系統(tǒng)的最大可測(cè)量量)，交叉雜交被檢測(cè)作為來(lái)自分析中任何其它的第二寡核苷酸位置的信號(hào)。通過(guò)估計(jì)對(duì)應(yīng)于交叉雜交信號(hào)的分析物的量(通過(guò)平行地分析的分析物的校正曲線確定)對(duì)交叉雜交進(jìn)行定量，它被表達(dá)為樣品中分析物量的百分?jǐn)?shù)。例如，分析一個(gè)含有10,000pg/ml單一分析物的樣品，在不同的寡核苷酸位置給出了相應(yīng)于1pg/ml該分析物的假陽(yáng)性信號(hào)(由于第一寡核苷酸與非互補(bǔ)的第二寡核苷酸的交叉雜交)，將表示交叉雜交為0.01％(1pg/ml除以10,000pg/ml乘以100％)。
此外還提供了包含第二寡核苷酸和結(jié)合了分析物結(jié)合試劑的互補(bǔ)的第一寡核苷酸的陣列，例如在預(yù)先選擇的雜交條件下通過(guò)第一和第二寡核苷酸的雜交分析物結(jié)合分子“自我裝配”形成的陣列。術(shù)語(yǔ)“自我裝配”意味著雜交將特定的寡核苷酸標(biāo)記的結(jié)合分子定位于陣列中特定的位置，從溶液中形成或裝配結(jié)合分子的陣列。
本發(fā)明還包括了產(chǎn)生適合使用于分析系統(tǒng)的的互補(bǔ)寡核苷酸對(duì)的核酸序列的方法。該方法包括下列步驟a)選擇一個(gè)或多個(gè)具有預(yù)先選擇的長(zhǎng)度和GC含量的第一序列，例如顯示于美國(guó)專利No.5,648,213中的序列，在優(yōu)選情況下GC含量至少為35％；b)產(chǎn)生具有大約相同的長(zhǎng)度、優(yōu)選為基本上相同的長(zhǎng)度和大約相同GC含量、優(yōu)選為基本上相同GC含量的隨機(jī)序列的文庫(kù)，作為一個(gè)或多個(gè)第一序列；c)從隨機(jī)序列文庫(kù)中選擇第二序列；d)舍棄部分第二寡核苷酸序列，其中對(duì)被舍棄的第二寡核苷酸的選擇是通過(guò)將第二序列與第一序列進(jìn)行比較，如果i)在兩個(gè)序列的任何比對(duì)中在任何8個(gè)堿基的窗口中有超過(guò)5個(gè)匹配或ii)第二序列含有超過(guò)4個(gè)連續(xù)的相同的堿基，則這樣的第二序列被否定和舍棄；e)將那些沒(méi)有被舍棄的第二序列加入到第一序列中；以及任選f)還可以重復(fù)步驟c)、d)和e)以形成序列的集合。方法還可以包含使用計(jì)算機(jī)算法的步驟，例如來(lái)自PremierBiosoft International，3786 Corina Way，Palo Alto，CA 94303-4504的NetPrimer 2.0，來(lái)分析每個(gè)保留的序列的潛在可能的二級(jí)結(jié)構(gòu)或自身互補(bǔ)性，其中具有明顯的預(yù)測(cè)的二級(jí)結(jié)構(gòu)或自身互補(bǔ)結(jié)構(gòu)的序列被否定。保留的序列一般在相對(duì)溫和的反應(yīng)條件下測(cè)試其交叉雜交，例如在室溫下在生理鹽條件下，使用能夠分辨互補(bǔ)的和非互補(bǔ)的配對(duì)的雜交并檢測(cè)0.1％或更低的交叉雜交的靈敏的結(jié)合分析方法。在保留的組中，顯示出與任何其它序列具有超過(guò)0.1％的交叉雜交的序列被否定。當(dāng)兩個(gè)序列的長(zhǎng)度差別為5個(gè)或更少的核苷酸，被認(rèn)為是具有大約相同的長(zhǎng)度。當(dāng)兩個(gè)序列的長(zhǎng)度差別是1個(gè)或0個(gè)核苷酸時(shí)，被認(rèn)為是具有基本上相同的長(zhǎng)度。當(dāng)兩個(gè)序列GC含量的差別不超過(guò)30％時(shí)被認(rèn)為是具有大約相同的GC含量，而當(dāng)差別不超過(guò)10％時(shí)被認(rèn)為是具有基本上相同的GC含量。
分析物結(jié)合試劑一般含有能夠與所需的分析物特異性結(jié)合的蛋白或多肽。在優(yōu)選情況下，分析物結(jié)合試劑是分析物的單克隆或多克隆抗體，或其抗原結(jié)合片段(例如Fab′、F(ab′)2)?？贵w或其抗原結(jié)合片段還可以被理解為包括了嵌合的、人源化的、重組的和其它這樣形式的抗體。分析物結(jié)合試劑包含了與靶分析物特異性結(jié)合的各種免疫反應(yīng)試劑(例如使用重組DNA技術(shù)產(chǎn)生的那些)的類似物和變異體。在本發(fā)明的范圍內(nèi)也考慮到了與抗體和抗原的結(jié)合具有可比性的特異性結(jié)合對(duì)的形成，它們是通過(guò)使用其它的特異性的基于蛋白、基于肽、基于核酸、基于糖或基于脂的結(jié)合系統(tǒng)形成的，例如受體蛋白或其片段與分析物配體、多聚核苷酸和多聚核苷酸結(jié)合對(duì)、多聚核苷酸核蛋白結(jié)合對(duì)、脂和蛋白結(jié)合對(duì)、酶和酶結(jié)合對(duì)、酶和底物結(jié)合對(duì)、酶和抑制劑結(jié)合對(duì)、酶和代謝物結(jié)合對(duì)、糖和蛋白結(jié)合對(duì)、糖和外源凝集素結(jié)合對(duì)、蛋白和藥物結(jié)合對(duì)等。其它在本發(fā)明的范圍內(nèi)被考慮到的是與所需的分析物特異性結(jié)合的基于化學(xué)的分子受體系統(tǒng)。
在圖1的實(shí)施方案中，分析系統(tǒng)使用了夾心分析方法。結(jié)合到第一寡核苷酸上的分析物結(jié)合試劑是特異性針對(duì)分析物的捕獲抗體。對(duì)于每對(duì)寡核苷酸而言，第一寡核苷酸與直接結(jié)合在固相支持物上的第二寡核苷酸雜交。通過(guò)與第二寡核苷酸的雜交，每對(duì)中的第一寡核苷酸被固定到固相支持物上。捕獲抗體特異性針對(duì)特定的分析物，該分析物通過(guò)與捕獲抗體的結(jié)合連接到固相支持物上。捕獲抗體一般對(duì)不同的分析物具有特異性，捕獲抗體在固相支持物上的空間位置由固相底物上每對(duì)中的第二寡核苷酸的位置所確定。分析物通過(guò)在其上結(jié)合有檢測(cè)基團(tuán)的第二抗體、術(shù)語(yǔ)稱為檢測(cè)抗體來(lái)檢測(cè)。在圖1所示的實(shí)施方案中，檢測(cè)基團(tuán)是熒光標(biāo)記PBXL-1(可以從Martek，6480 DobbinRoad，Columbia，Maryland 21045購(gòu)買到)?？梢杂米鰴z測(cè)基團(tuán)的熒光團(tuán)和熒光染料在本領(lǐng)域內(nèi)是眾所周知的。其它適用的檢測(cè)基團(tuán)包括例如基于酶法的檢測(cè)的底物、放射性標(biāo)記物等。其它檢測(cè)被結(jié)合的分析物的方法也被設(shè)想包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)，例如競(jìng)爭(zhēng)性分析方法和引物延伸分析方法。
在某些實(shí)施方案中，固相支持物包含了二維的平面，其中每個(gè)不同的寡核苷酸被結(jié)合到基本上是平的表面的不同的預(yù)定區(qū)域。固相支持物一般包括微陣列底物，包括但不限于平的顯微鏡載玻片；由硝酸纖維素、尼龍和PVDF制成的有伸縮性的膜；以及由玻璃、聚苯乙烯、聚丙烯和聚碳酸酯制成的微孔板。
在可選擇的實(shí)施方案中，固相支持物是珠子、顆粒、微粒等，術(shù)語(yǔ)珠子、顆粒和微粒在本文中可以互換使用。珠子的直徑一般在從大約0.04到大約50微米的范圍內(nèi)。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，珠子的大小在從大約0.1到大約20微米的范圍內(nèi)。珠子一般懸浮在液體中，以便它們的密度在大約0.5到大約2克/毫升之間的范圍內(nèi)。珠子懸浮液的大小和密度使得珠子能夠在大多數(shù)液體轉(zhuǎn)移器具中被當(dāng)作簡(jiǎn)單的液體，例如移液管、泵和某些閥。被用來(lái)制備珠子的材料和方法在本領(lǐng)域內(nèi)是眾所周知的。
一般來(lái)說(shuō)，通過(guò)分析系統(tǒng)檢測(cè)的分析物選自多肽或蛋白、糖、配體、核酸、脂類，包括但不限于抗體及其結(jié)合片段、激素、外源凝集素、受體、類固醇、細(xì)胞表面抗原、細(xì)胞因子、病毒抗原、細(xì)菌抗原、cDNA和濫用藥物。在優(yōu)選實(shí)施方案中，分析系統(tǒng)以試劑盒的形式提供，用于檢測(cè)一種或多種特定的分析物。
表1SEQ ID NO 15′-ATACTGACTGGCGATGCTGTCGAAGTAGCG-3′
SEQ ID NO 25′-CGCTACTTCGACAGCATCGCCAGTCAGTAT-3′SEQ ID NO 35′-AGTTAAATAGCTTGCAAAATACGTGGCCTT-3′SEQ ID NO 45′-AAGGCCACGTATTTTGCAAGCTATTTAACT-3′SEQ ID NO 55′-GAAGCCATACCAAACGACGAGCGTGACACC-3′SEQ ID NO 65′-GGTGTCACGCTCGTCGTTTGGTATGGCTTC-3′SEQ ID NO 75′-GCTTACCGAATACGGCTTGGAGAACCTATC-3′SEQ ID NO 85′-GATAGGTTCTCCAAGCCGTATTCGGTAAGC-3′SEQ ID NO 95′-GCGTGGTCCGCGATCTTCCTACGATTGATG-3′SEQ ID NO 105′-CATCAATCGTAGGAAGATCGCGGACCACGC-3′SEQ ID NO 115′-TTTGAGGTTTCGGAGCGTTCCGTGCATCGC-3′SEQ ID NO 125′-GCGATGCACGGAACGCTCCGAAACCTCAAA-3′SEQ ID NO 135′-AATCCTGTTGTGAGCCGACCAAGTGCCTCC-3′SEQ ID NO 145′-GGAGGCACTTGGTCGGCTCACAACAGGATT-3′SEQ ID NO 155′-GTATCTGACGCGTATGCCCAGGTTAGTGGC-3′SEQ ID NO 165′-GCCACTAACCTGGGCATACGCGTCAGATAC-3′SEQ ID NO 175′-CGGAGTCGTCCTCTGTAGGGATTTGCCCTT-3′SEQ ID NO 185′-AAGGGCAAATCCCTACAGAGGACGACTCCG-3′SEQ ID NO 195′-CAGGCTGTGGAGTGCTATTGTCATATGGGC-3′SEQ ID NO 205′-GCCCATATGACAATAGCACTCCACAGCCTG-3′SEQ ID NO 215′-TCTTCTCTCTGGTCTAAGGCATCGAGCGGA-3′SEQ ID NO 225′-TCCGCTCGATGCCTTAGACCAGAGAGAAGA-3′SEQ ID NO 235′-TGGCGTACTAGTGCTTAGGCGTACTGAAGC-3′SEQ ID NO 245′-GCTTCAGTACGCCTAAGCACTAGTACGCCA-3′SEQ ID NO 255′-TGCTGGCTTTACTGCGACGGTGACTCTCCT-3′SEQ ID NO 265′-AGGAGAGTCACCGTCGCAGTAAAGCCAGCA-3′SEQ ID NO 275′-CTATCAAAGCTGGTTCCAGGCGCTCCTGGA-3′SEQ ID NO 285′-TCCAGGAGCGCCTGGAACCAGCTTTGATAG-3′SEQ ID NO 295′-TGAGGCAAGTACATTAGTTCTCAGCCGGCG-3′SEQ ID NO 305′-CGCCGGCTGAGAACTAATGTACTTGCCTCA-3′SEQ ID NO 315′-GCTTGGGTTAGATTGTGTTTGCCGAGCCAA-3′
SEQ ID NO 325′-TTGGCTCGGCAAACACAATCTAACCCAAGC-3′SEQ ID NO 335′-CGTCCATTCCTATCGGGAGGTAACAGACTT-3′SEQ ID NO 345′-AAGTCTGTTACCTCCCGATAGGAATGGACG-3′SEQ ID NO 355′-CTAAGGAGTCCGAAGATGTACAATGGGTCG-3′SEQ ID NO 365′-CGACCCATTGTACATCTTCGGACTCCTTAG-3′SEQ ID NO 375′-AACTAGCCGCCTCCTGTCCCATGAATTCTA-3′SEQ ID NO 385′-TAGAATTCATGGGACAGGAGGCGGCTAGTT-3′SEQ ID NO 395′-AGCTTCTTGTAACGTTGAGTTGCAGGTCCG-3′SEQ ID NO 405′-CGGACCTGCAACTCAACGTTACAAGAAGCT-3′SEQ ID NO 4l5′-CACTGGATAATTGCGCCTTCCGTGCATGAA-3′SEQ ID NO 425′-TTCATGCACGGAAGGCGCAATTATCCAGTG-3′SEQ ID NO 435′-CCCGCGCAGAGCGTAGTTGTAATTTAGATC-3′SEQ ID NO 445′-GATCTAAATTACAACTACGCTCTGCGCGGG-3′SEQ ID NO 455′-CCTGGAAATAAGCAGCAGCACCAACTCTCA-3′SEQ ID NO 465′-TGAGAGTTGGTGCTGCTGCTTATTTCCAGG-3′SEQ ID NO 475′-GGCTCATGGTTCTTTGCTCAACCATAAGCC-3′SEQ ID NO 485′-GGCTTATGGTTGAGCAAAGAACCATGAGCC-3′SEQ ID NO 495′-CTTGCTCCTCACATGATGCGGAAACGCTAA-3′SEQ ID NO 505′-TTAGCGTTTCCGCATCATGTGAGGAGCAAG-3′SEQ ID NO 515′-ATCCTTCTGCACTTTCGCGTAGACATAGCC-3′SEQ ID NO 525′-GGCTATGTCTACGCGAAAGTGCAGAAGGAT-3′SEQ ID NO 535′-ATCGAACCCAAACTGAGGTTAAGAGCCGCT-3′SEQ ID NO 545′-AGCGGCTCTTAACCTCAGTTTGGGTTCGAT-3′SEQ ID NO 555′-AAGGACTGGACGTTGCATTCACAGTGGGTT-3′SEQ ID NO 565′-AACCCACTGTGAATGCAACGTCCAGTCCTT-3′SEQ ID NO 575′-CTCATGAAGGCCGTCGGGAAATTCCAAGTT-3′SEQ ID NO 585′-AACTTGGAATTTCCCGACGGCCTTCATGAG-3′SEQ ID NO 595′-TGGATTCCGTTATCACCATTTGGACCCTGC-3′SEQ ID NO 605′-GCAGGGTCCAAATGGTGATAACGGAATCCA-3′SEQ ID NO 615′-TAAGGGCTCTATCTACCACCTCCGACTTTC-3′
SEQ ID NO 625′-GAAAGTCGGAGGTGGTAGATAGAGCCCTTA-3′SEQ ID NO 635′-TACGCTCCCAGTGTGATCACCAAAGCTTAC-3′SEQ ID NO 645′-GTAAGCTTTGGTGATCACACTGGGAGCGTA-3′SEQ ID NO 655′-AGACTGAACTACCGGCGGTTGCACTACTAA-3′SEQ ID NO 665′-TTAGTAGTGCAACCGCCGGTAGTTCAGTCT-3′SEQ ID NO 675′-GCCAAACACGCCCAATCACTGTTACATGTC-3′SEQ ID NO 685′-GACATGTAACAGTGATTGGGCGTGTTTGGC-3′SEQ ID NO 695′-GCTTGACGTCTACCACCGTGAACATAAGGA-3′SEQ ID NO 705′-TCCTTATGTTCACGGTGGTAGACGTCAAGC-3′SEQ ID NO 715′-AAGAACCGTAATAGGCCCGGTTGGGAATTC-3′SEQ ID NO 725′-GAATTCCCAACCGGGCCTATTACGGTTCTT-3′SEQ ID NO 735′-CGGACTAACAAGACTCTTATAGCGTCTCGC-3′SEQ ID NO 745′-GCGAGACGCTATAAGAGTCTTGTTAGTCCG-3′SEQ ID NO 755′-TCGCCAACGTAGCTGTGCTACAGTTGATTC-3′SEQ ID NO 765′-GAATCAACTGTAGCACAGCTACGTTGGCGA-3′SEQ ID NO 775′-GCAGCGGCTAAACCTTGAGATCGAATGGAA-3′SEQ ID NO 785′-TTCCATTCGATCTCAAGGTTTAGCCGCTGC-3′SEQ ID NO 795′-GCAACCGTCAACGGTCTTAATGACACATCG-3′SEQ ID NO 805′-CGATGTGTCATTAAGACCGTTGACGGTTGC-3′SEQ ID NO 815′-GGGTAGAAACGGACGTTACCCATGATCTTG-3′SEQ ID NO 825′-CAAGATCATGGGTAACGTCCGTTTCTACCC-3′SEQ ID NO 835′-GGCGGCAACACCTACCTTCTAGATTGAAAC-3′SEQ ID NO 845′-GTTTCAATCTAGAAGGTAGGTGTTGCCGCC-3′SEQ ID NO 855′-CGCTAATAGTGGACCCTCTCATAGCTATGG-3′SEQ ID NO 865′-CCATAGCTATGAGAGGGTCCACTATTAGCG-3′SEQ ID NO 875′-CTGATGGAATCTACCACTGCTAAACGCAGC-3′SEQ ID NO 885′-GCTGCGTTTAGCAGTGGTAGATTCCATCAG-3′SEQ ID NO 895′-GCCTAGTCGGATGCTCGGATATCATACTAC-3′SEQ ID NO 905′-GTAGTATGATATCCGAGCATCCGACTAGGC-3′SEQ ID NO 915′-CTTTGAACGACATCTTAGTCTCGAACGCCG-3′
SEQ ID NO 925′-CGGCGTTCGAGACTAAGATGTCGTTCAAAG-3′SEQ ID NO 935′-TCGACATGCGCGTCATCTGATACTGCGGTC-3′SEQ ID NO 945′-GACCGCAGTATCAGATGACGCGCATGTCGA-3′SEQ ID NO 955′-GGTGGCCTCGTAAGGCGAGAATTAGGGTTG-3′SEQ ID NO 965′-CAACCCTAATTCTCGCCTTACGAGGCCACC-3′SEQ ID NO 975′-GGCTAGATAGGCGATTAGTCAGAGTGGACA-3′SEQ ID NO 985′-TGTCCACTCTGACTAATCGCCTATCTAGCC-3′SEQ ID NO 995′-CCTGGATAAGACGTTAACGTTACGGAGCCA-3′SEQ ID NO 1005′-TGGCTCCGTAACGTTAACGTCTTATCCAGG-3′SEQ ID NO 1015′-CAAACTGAGCTAGGCCTAACTGTGATGCAG-3′SEQ ID NO 1025′-CTGCATCACAGTTAGGCCTAGCTCAGTTTG-3′SEQ ID NO 1035′-CGCCTCGTGTGTTATAACGATGGGACTTTG-3′SEQ ID NO 1045′-CAAAGTCCCATCGTTATAACACACGAGGCG-3′SEQ ID NO 1055′-TGGTTTAGCCTTTCCGGCATCTGCTGTACA-3′SEQ ID NO 1065′-TGTACAGCAGATGCCGGAAAGGCTAAACCA-3′SEQ ID NO 1075′-CAACCTCTACCCAGAAACTCAAGTTTCGGC-3′SEQ ID NO 1085′-GCCGAAACTTGAGTTTCTGGGTAGAGGTTG-3′SEQ ID NO 1095′-CTCGTTTCTAGGTCACTGCGCAAAACGCTT-3′SEQ ID NO 1105′-AAGCGTTTTGCGCAGTGACCTAGAAACGAG-3′SEQ ID NO 1115′-TGCTCTTCTCGTGCCCGTTAAAGGATCGAT-3′SEQ ID NO 1125′-ATCGATCCTTTAACGGGCACGAGAAGAGCA-3′SEQ ID NO 1135′-CCCGGCAGGTATACAAAGCACTTCGTATAC-3′SEQ ID NO 1145′-GTATACGAAGTGCTTTGTATACCTGCCGGG-3′SEQ ID NO 1155′-GTAGAAGCCTGTGGTTAAAACTATGGCCCG-3′SEQ ID NO 1165′-CGGGCCATAGTTTTAACCACAGGCTTCTAC-3′
SEQ ID NO 1175′-CATCGGTCGAACCCGTGTCAACAAGATTCT-3′SEQ ID NO 1185′-AGAATCTTGTTGACACGGGTTCGACCGATG-3′SEQ ID NO 1195′-TGGAGGAGACTTGTCAGGATTTGCTCTGAG-3′SEQ ID NO 1205′-CTCAGAGCAAATCCTGACAAGTCTCCTCCA-3′SEQ ID NO 1215′-AGCCCAAGGAATAGTCAATACTTCCTCAGC-3′SEQ ID NO 1225′-GCTGAGGAAGTATTGACTATTCCTTGGGCT-3′SEQ ID NO 1235′-CAAAGGAAATGTTCGAGCCGCCAGACTAGA-3′SEQ ID NO 1245′-TCTAGTCTGGCGGCTCGAACATTTCCTTTG-3′SEQ ID NO 1255′-TCCTATTATGCCTGAATTCAGGCAGCCGAC-3′SEQ ID NO 1265′-GTCGGCTGCCTGAATTCAGGCATAATAGGA-3′SEQ ID NO 1275′-GCATGTGTAGATGGCCAGCCACTTATTAGG-3′SEQ ID NO 1285′-CCTAATAAGTGGCTGGCCATCTACACATGC-3′SEQ ID NO 1295′-CCTTTGGGTATTGCTCTGACCTGGTTATGC-3′SEQ ID NO 1305′-GCATAACCAGGTCAGAGCAATACCCAAAGG-3′SEQ ID NO 1315′-AGGCAGGTCCCTAGTCACAACTTAATCTGC-3′SEQ ID NO 1325′-GCAGATTAAGTTGTGACTAGGGACCTGCCT-3′SEQ ID NO 1335′-CCGACAGTACTTTACTCATTGTGGCGCAGT-3′SEQ ID NO 1345′-ACTGCGCCACAATGAGTAAAGTACTGTCGG-3′SEQ ID NO 1355′-AAGTGAAAGCATCTCCGCATGCATTGGCCA-3′SEQ ID NO 1365′-TGGCCAATGCATGCGGAGATGCTTTCACTT-3′SEQ ID NO 1375′-GCACGTACACGAGAAACGGGTATCTAAGCT-3′SEQ ID NO 1385′-AGCTTAGATACCCGTTTCTCGTGTACGTGC-3′SEQ ID NO 1395′-TCCAGCTGCAGACAAAGACCTATGCGTTAC-3′SEQ ID NO 1405′-GTAACGCATAGGTCTTTGTCTGCAGCTGGA-3′SEQ ID NO 1415′-ATCCGACTCATCTAGGTGCACCTCTATGTG-3′SEQ ID NO 1425′-CACATAGAGGTGCACCTAGATGAGTCGGAT-3′SEQ ID NO 1435′-CTGGACGACTTTCTAGATGCCCTGAGTTAC-3′SEQ ID NO 1445′-GTAACTCAGGGCATCTAGAAAGTCGTCCAG-3′SEQ ID NO 1455′-CTAAGACACATCCTATTATCCTGCCCGAGC-3′SEQ ID NO 1465′-GCTCGGGCAGGATAATAGGATGTGTCTTAG-3′SEQ ID NO 1475′-AGAATTGCGCACAAGAAGTCTCTGCGGCAA-3′SEQ ID NO 1485′-TTGCCGCAGAGACTTCTTGTGCGCAATTCT-3′SEQ ID NO 1495′-CCGAGCACTATAGGAGTTATAATCGAGGGG-3′SEQ ID NO 1505′-CCCCTCGATTATAACTCCTATAGTGCTCGG-3′SEQ ID NO 1515′-CTAGTTACCCACACTTAGTCACTTGCAGCG-3′SEQ ID NO 1525′-CGCTGCAAGTGACTAAGTGTGGGTAACTAG-3′SEQ ID NO 1535′-GCAAATCAGTAAAGATGGACAGGCCTACCC-3′SEQ ID NO 1545′-GGGTAGGCCTGTCCATCTTTACTGATTTGC-3′SEQ ID NO 1555′-ATGGTCGCATGATTTAGTACGGATGGCGTG-3′SEQ ID NO 1565′-CACGCCATCCGTACTAAATCATGCGACCAT-3′SEQ ID NO 1575′-AACATTCTTCTCGGGTTACAAACCGCGCGA-3′SEQ ID NO 1585′-TCGCGCGGTTTGTAACCCGAGAAGAATGTT-3′SEQ ID NO 1595′-GGCAAGACTCGTTCTGGGCTGCTTATTAGA-3′SEQ ID NO 1605′-TCTAATAAGCAGCCCAGAACGAGTCTTGCC-3′SEQ ID NO 1615′-CCATATCACGTGATGCCGGAATTGTCACGT-3′SEQ ID NO 1625′-ACGTGACAATTCCGGCATCACGTGATATGG-3′SEQ ID NO 1635′-TGCGATATACTCCATGCCTCTCTTGGCGGA-3′SEQ ID NO 1645′-TCCGCCAAGAGAGGCATGGAGTATATCGCA-3′SEQ ID NO 1655′-GTGTGCGCGCCTTCTAGAATACTCATAAGC-3′
SEQ ID NO 1665′-GCTTATGAGTATTCTAGAAGGCGCGCACAC-3′SEQ ID NO 1675′-CCAGCACAAACGCTGATCGTTGAAACGGAT-3′SEQ ID NO 1685′-ATCCGTTTCAACGATCAGCGTTTGTGCTGG-3′SEQ ID NO 1695′-AAGTGTGAGGTCGTTCACTTTCACACTGCC-3′SEQ ID NO 1705′-GGCAGTGTGAAAGTGAACGACCTCACACTT-3′SEQ ID NO 1715′-TAAATCAACGGCATTGGCGTCCGTTATCGC-3′SEQ ID NO 1725′-GCGATAACGGACGCCAATGCCGTTGATTTA-3′SEQ ID NO 1735′-TGCGCCCACACGTTACGATCTGTATAAAGC-3′SEQ ID NO 1745′-GCTTTATACAGATCGTAACGTGTGGGCGCA-3′SEQ ID NO 1755′-ATAATGCGTTTCCGGCCACCGCGTTATTAC-3′SEQ ID NO 1765′-GTAATAACGCGGTGGCCGGAAACGCATTAT-3′SEQ ID NO 1775′-TCAACGCGCGGTTTCTTGAGTAATTCAGCC-3′SEQ ID NO 1785′-GGCTGAATTACTCAAGAAACCGCGCGTTGA-3′SEQ ID NO 1795′-GCACCGGAGGTTTACATCATGCAGAAGTGT-3′SEQ ID NO 1805′-ACACTTCTGCATGATGTAAACCTCCGGTGC-3′SEQ ID NO 1815′-TGTCTCACTAGAGCTTCACCCATGCATGTG-3′SEQ ID NO 1825′-CACATGCATGGGTGAAGCTCTAGTGAGACA-3′SEQ ID NO 1835′-GCCAAACATAGTTGGAATCCTCGGGAGGAA-3′SEQ ID NO 1845′-TTCCTCCCGAGGATTCCAACTATGTTTGGC-3′SEQ ID NO 1855′-GCACTATAAACTTCCTAGCCTTCTCGTCGC-3′SEQ ID NO 1865′-GCGACGAGAAGGCTAGGAAGTTTATAGTGC-3′SEQ ID NO 1875′-GGTTTGCAAGAAGCAGAAGCCATTCCGACA-3′
SEQ ID NO 1885′-TGTCGGAATGGCTTCTGCTTCTTGCAAACC-3′在對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了描述之后，很顯然可以采取大量的修改和改編而不偏離本發(fā)明在此前提出的和此后的權(quán)利要求中描述的范圍和準(zhǔn)確含義。
盡管對(duì)本發(fā)明已經(jīng)進(jìn)行了相當(dāng)詳細(xì)的描述，并引用了其某些優(yōu)選的方案，但仍可能有其它的方案。因此，附加的權(quán)利要求的精神和范圍不應(yīng)該被局限于本文描述的優(yōu)選方案的描述。
在本說(shuō)明書、包括權(quán)利要求、摘要和圖表中公開(kāi)的所有特點(diǎn)，以及在公開(kāi)的任何方法或過(guò)程中的所有步驟，都可以被整合成任何的組合方式，除了那些至少某些這樣的特點(diǎn)和/或步驟是互不相容的組合之外。在本說(shuō)明書、包括權(quán)利要求、摘要和圖表中公開(kāi)的每種特點(diǎn)，除非特別陳述，都可以被其它服務(wù)于同樣的、相當(dāng)?shù)幕蛳嗨频哪康牡目商鎿Q的特點(diǎn)所代替。因此，除非特別陳述，每種被公開(kāi)的特點(diǎn)都僅僅是通用等同或相似特點(diǎn)的一個(gè)例子。
在權(quán)利要求中任何沒(méi)有明確地陳述用于執(zhí)行特定的功能的“方法”或用于執(zhí)行特定功能的“步驟”的要素，不應(yīng)該被解釋為35U.S.C.§112中定義的“方法”或“步驟”條款。
序列表<110>貝克曼考爾特公司(BECKMAN COULTER，INC.)<120>用于多元結(jié)合分析的寡核苷酸對(duì)(OLIGONUCLEOTIDE PAIRS FOR MULTIPLEXED BINDING ASSAYS)<130>SCT054331-47<140>
<141>
<150>US 10/149,020<151>2003-04-18<160>188<170>PatentIn Ver.2.1<210>1<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>1atactgactg gcgatgctgt cgaagtagcg 30<210>2<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>2cgctacttcg acagcatcgc cagtcagtat 30<210>3
<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>3agttaaatag cttgcaaaat acgtggcctt 30<210>4<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>4aaggccacgt attttgcaag ctatttaact 30<210>5<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>5gaagccatac caaacgacga gcgtgacacc 30<210>6<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>6ggtgtcacgc tcgtcgtttg gtatggcttc 30<210>7<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>7gcttaccgaa tacggcttgg agaacctatc 30<210>8<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>8gataggttct ccaagccgta ttcggtaagc 30<210>9<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>9gcgtggtccg cgatcttcct acgattgatg 30
<210>10<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>10catcaatcgt aggaagatcg cggaccacgc 30<210>11<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>11tttgaggttt cggagcgttc cgtgcatcgc 30<210>12<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>12gcgatgcacg gaacgctccg aaacctcaaa 30<210>13<211>30<212>DNA
<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>13aatcctgttg tgagccgacc aagtgcctcc 30<210>14<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>14ggaggcactt ggtcggctca caacaggatt 30<210>15<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>15gtatctgacg cgtatgccca ggttagtggc 30<210>16<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide
<400>16gccactaacc tgggcatacg cgtcagatac 30<210>17<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>17cggagtcgtc ctctgtaggg atttgccctt 30<210>18<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>18aagggcaaat ccctacagag gacgactccg 30<210>19<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>19caggctgtgg agtgctattg tcatatgggc 30
<210>20<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>20gcccatatga caatagcact ccacagcctg 30<210>21<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>21tcttctctct ggtctaaggc atcgagcgga 30<210>22<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>22tccgctcgat gccttagacc agagagaaga 30<210>23<211>30<212>DNA<213>Artificial Seauence
<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>23tggcgtacta gtgcttaggc gtactgaagc 30<210>24<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>24gcttcagtac gcctaagcac tagtacgcca 30<210>25<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>25tgctggcttt actgcgacgg tgactctcct 30<210>26<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>26
aggagagtca ccgtcgcagt aaagccagca 30<210>27<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>27ctatcaaagc tggttccagg cgctcctgga 30<210>28<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>28tccaggagcg cctggaacca gctttgatag 30<210>29<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>29tgaggcaagt acattagttc tcagccggcg 30<210>30<211>30
<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>30cgccggctga gaactaatgt acttgcctca 30<210>31<21l>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>31gcttgggtta gattgtgttt gccgagccaa 30<210>32<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>32ttggctcggc aaacacaatc taacccaagc 30<210>33<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSynthetic
oligonucleotide<400>33cgtccattcc tatcgggagg taacagactt 30<210>34<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>34aagtctgtta cctcccgata ggaatggacg 30<210>35<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>35ctaaggagtc cgaagatgta caatgggtcg 30<210>36<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>36cgacccattg tacatcttcg gactccttag 30
<210>37<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>37aactagccgc ctcctgtccc atgaattcta 30<210>38<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>38tagaattcat gggacaggag gcggctagtt 30<210>39<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>39agcttcttgt aacgttgagt tgcaggtccg 30<210>40<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence
<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>40cggacctgca actcaacgtt acaagaagct 30<210>41<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>41cactggataa ttgcgccttc cgtgcatgaa 30<210>42<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>42ttcatgcacg gaaggcgcaa ttatccagtg 30<210>43<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide
<400>43cccgcgcaga gcgtagttgt aatttagatc 30<210>44<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>44gatctaaatt acaactacgc tctgcgcggg 30<210>45<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>45cctggaaata agcagcagca ccaactctca 30<210>46<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>46tgagagttgg tgctgctgct tatttccagg 30<210>47
<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>47ggctcatggt tctttgctca accataagcc 30<210>48<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>48ggcttatggt tgagcaaaga accatgagcc 30<210>49<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>49cttgctcctc acatgatgcg gaaacgctaa 30<210>50<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>50ttagcgtttc cgcatcatgt gaggagcaag 30<210>51<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>51atccttctgc actttcgcgt agacatagcc 30<210>52<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>52ggctatgtct acgcgaaagt gcagaaggat 30<210>53<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>53atcgaaccca aactgaggtt aagagccgct 30
<210>54<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>54agcggctctt aacctcagtt tgggttcgat 30<210>55<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>55aaggactgga cgttgcattc acagtgggtt 30<210>56<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>56aacccactgt gaatgcaacg tccagtcctt 30<210>57<211>30<212>DNA
<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>57ctcatgaagg ccgtcgggaa attccaagtt 30<210>58<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>58aacttggaat ttcccgacgg ccttcatgag 30<210>59<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>59tggattccgt tatcaccatt tggaccctgc 30<210>60<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide
<400>60gcagggtcca aatggtgata acggaatcca 30<210>61<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>61taagggctct atctaccacc tccgactttc 30<210>62<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>62gaaagtcgga ggtggtagat agagccctta 30<210>63<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>63tacgctccca gtgtgatcac caaagcttac 30
<210>64<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>64gtaagctttg gtgatcacac tgggagcgta 30<210>65<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>65agactgaact accggcggtt gcactactaa 30<210>66<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>66ttagtagtgc aaccgccggt agttcagtct 30<210>67<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence
<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>67gccaaacacg cccaatcact gttacatgtc 30<210>68<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>68gacatgtaac agtgattggg cgtgtttggc 30<210>69<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequenee<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>69gcttgacgtc taccaccgtg aacataagga 30<210>70<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>70
tccttatgtt cacggtggta gacgtcaagc 30<210>71<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>71aagaaccgta ataggcccgg ttgggaattc 30<210>72<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>72gaattcccaa ccgggcctat tacggttctt 30<210>73<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>73cggactaaca agactcttat agcgtctcgc 30<210>74<211>30
<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>74gcgagacgct ataagagtct tgttagtccg 30<210>75<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>75tcgccaacgt agctgtgcta cagttgattc 30<210>76<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>76gaatcaactg tagcacagct acgttggcga 30<210>77<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSynthetic
oligonucleotide<400>77gcagcggcta aaccttgaga tcgaatggaa 30<210>78<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>78ttccattcga tctcaaggtt tagccgctgc 30<210>79<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>79gcaaccgtca acggtcttaa tgacacatcg 30<210>80<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>80cgatgtgtca ttaagaccgt tgacggttgc 30
<210>81<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>81gggtagaaac ggacgttacc catgatcttg 30<210>82<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>82caagatcatg ggtaacgtcc gtttctaccc 30<210>83<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>83ggcggcaaca cctaccttct agattgaaac 30<210>84<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence
<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>84gtttcaatct agaaggtagg tgttgccgcc 30<210>85<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>85cgctaatagt ggaccctctc atagctatgg 30<210>86<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>86ccatagctat gagagggtcc actattagcg 30<210>87<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide
<400>87ctgatggaat ctaccactgc taaacgcagc 30<210>88<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>88gctgcgttta gcagtggtag attccatcag 30<210>89<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>89gcctagtcgg atgctcggat atcatactac 30<210>90<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>90gtagtatgat atccgagcat ccgactaggc 30<210>91
<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>91ctttgaacga catcttagtc tcgaacgccg 30<210>92<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>92cggcgttcga gactaagatg tcgttcaaag 30<210>93<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>93tcgacatgcg cgtcatctga tactgcggtc 30<210>94<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>94gaccgcagta tcagatgacg cgcatgtcga 30<210>95<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>95ggtggcctcg taaggcgaga attagggttg 30<210>96<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>96caaccctaat tctcgcctta cgaggccacc 30<210>97<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>97ggctagatag gcgattagtc agagtggaca 30
<210>98<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>98tgtccactct gactaatcgc ctatctagcc 30<210>99<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>99cctggataag acgttaacgt tacggagcca 30<210>100<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>100tggctccgta acgttaacgt cttatccagg 30<210>101<211>30<212>DNA
<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>101caaactgagc taggcctaac tgtgatgcag 30<210>102<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>102ctgcatcaca gttaggccta gctcagtttg 30<210>103<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>103cgcctcgtgt gttataacga tgggactttg 30<210>104<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide
<400>104caaagtccca tcgttataac acacgaggcg 30<210>105<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>105tggtttagcc tttccggcat ctgctgtaca 30<210>106<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>106tgtacagcag atgccggaaa ggctaaacca 30<210>107<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>107caacctctac ccagaaactc aagtttcggc 30
<210>108<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>108gccgaaactt gagtttctgg gtagaggttg 30<210>109<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>109ctcgtttcta ggtcactgcg caaaacgctt 30<210>110<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>110aagcgttttg cgcagtgacc tagaaacgag 30<210>111<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence
<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>111tgctcttctc gtgcccgtta aaggatcgat 30<210>112<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>112atcgatcctt taacgggcac gagaagagca 30<210>113<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>113cccggcaggt atacaaagca cttcgtatac 30<210>114<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>114
gtatacgaag tgctttgtat acctgccggg 30<210>115<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>115gtagaagcct gtggttaaaa ctatggcccg 30<210>116<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>116cgggccatag ttttaaccac aggcttctac 30<210>117<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>117catcggtcga acccgtgtca acaagattct 30<210>118<211>30
<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>118agaatcttgt tgacacgggt tcgaccgatg 30<210>119<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>119tggaggagac ttgtcaggat ttgctctgag 30<210>120<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>120ctcagagcaa atcctgacaa gtctcctcca 30<210>121<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSynthetic
oligonucleotide<400>121agcccaagga atagtcaata cttcctcagc 30<210>122<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>122gctgaggaag tattgactat tccttgggct 30<210>123<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>123caaaggaaat gttcgagccg ccagactaga 30<210>124<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>124tctagtctgg cggctcgaac atttcctttg 30
<210>125<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>125tcctattatg cctgaattca ggcagccgac 30<210>126<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>126gtcggctgcc tgaattcagg cataatagga 30<210>127<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>127gcatgtgtag atggccagcc acttattagg 30<210>128<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence
<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>128cctaataagt ggctggccat ctacacatgc 30<210>129<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>129cctttgggta ttgctctgac ctggttatgc 30<210>130<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>130gcataaccag gtcagagcaa tacccaaagg 30<210>131<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide
<400>131aggcaggtcc ctagtcacaa cttaatctgc 30<210>132<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>132gcagattaag ttgtgactag ggacctgcct 30<210>133<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>133ccgacagtac tttactcatt gtggcgcagt 30<210>134<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>134actgcgccac aatgagtaaa gtactgtcgg 30<210>135
<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>135aagtgaaagc atctccgcat gcattggcca 30<210>136<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>136tggccaatgc atgcggagat gctttcactt 30<210>137<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>137gcacgtacac gagaaacggg tatctaagct 30<210>138<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>138agcttagata cccgtttctc gtgtacgtgc 30<210>139<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>139tccagctgca gacaaagacc tatgcgttac 30<210>140<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>140gtaacgcata ggtctttgtc tgcagctgga 30<210>141<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>141atccgactca tctaggtgca cctctatgtg 30
<210>142<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>142cacatagagg tgcacctaga tgagtcggat 30<210>143<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>143ctggacgact ttctagatgc cctgagttac 30<210>144<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>144gtaactcagg gcatctagaa agtcgtccag 30<210>145<211>30<212>DNA
<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>145ctaagacaca tcctattatc ctgcccgagc 30<210>146<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>146gctcgggcag gataatagga tgtgtcttag 30<210>147<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>147agaattgcgc acaagaagtc tctgcggcaa 30<210>148<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide
<400>148ttgccgcaga gacttcttgt gcgcaattct 30<210>149<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>149ccgagcacta taggagttat aatcgagggg 30<210>150<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>150cccctcgatt ataactccta tagtgctcgg 30<210>151<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>151ctagttaccc acacttagtc acttgcagcg 30
<210>152<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>152cgctgcaagt gactaagtgt gggtaactag 30<210>153<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>153gcaaatcagt aaagatggac aggcctaccc 30<210>154<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>154gggtaggcct gtccatcttt actgatttgc 30<210>155<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence
<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>155atggtcgcat gatttagtac ggatggcgtg 30<210>156<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>156cacgccatcc gtactaaatc atgcgaccat 30<210>157<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>157aacattcttc tcgggttaca aaccgcgcga 30<210>158<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>158
tcgcgcggtt tgtaacccga gaagaatgtt 30<210>159<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>159ggcaagactc gttctgggct gcttattaga 30<210>160<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>160tctaataagc agcccagaac gagtcttgcc 30<210>161<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>161ccatatcacg tgatgccgga attgtcacgt 30<210>162<211>30
<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>162acgtgacaat tccggcatca cgtgatatgg 30<210>163<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>163tgcgatatac tccatgcctc tcttggcgga 30<210>164<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>164tccgccaaga gaggcatgga gtatatcgca 30<210>165<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSynthetic
oligonucleotide<400>165gtgtgcgcgc cttctagaat actcataagc 30<210>166<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>166gcttatgagt attctagaag gcgcgcacac 30<210>167<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>167ccagcacaaa cgctgatcgt tgaaacggat 30<210>168<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>168atccgtttca acgatcagcg tttgtgctgg 30
<210>169<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>169aagtgtgagg tcgttcactt tcacactgcc 30<210>170<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>170ggcagtgtga aagtgaacga cctcacactt 30<210>171<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>171taaatcaacg gcattggcgt ccgttatcgc 30<210>172<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence
<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>172gcgataacgg acgccaatgc cgttgattta 30<210>173<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>173tgcgcccaca cgttacgatc tgtataaagc 30<210>174<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>174gctttataca gatcgtaacg tgtgggcgca 30<210>175<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide
<400>175ataatgcgtt tccggccacc gcgttattac 30<210>176<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>176gtaataacgc ggtggccgga aacgcattat 30<210>177<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>177tcaacgcgcg gtttcttgag taattcagcc 30<210>178<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>178ggctgaatta ctcaagaaac cgcgcgttga 30<210>179
<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>179gcaccggagg tttacatcat gcagaagtgt 30<210>180<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>180acacttctgc atgatgtaaa cctccggtgc 30<210>181<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>181tgtctcacta gagcttcacc catgcatgtg 30<210>182<21l>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>182cacatgcatg ggtgaagctc tagtgagaca 30<210>183<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>183gccaaacata gttggaatec tcgggaggaa 30<210>184<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>184ttcctcccga ggattccaac tatgtttggc 30<210>185<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>185gcactataaa cttcctagcc ttctcgtcgc 30
<210>186<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>186gcgacgagaa ggctaggaag tttatagtgc 30<210>187<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>187ggtttgcaag aagcagaagc cattccgaca 30<210>188<211>30<212>DNA<213>Artificial Sequence<220>
<223>Description of Artificial SequenceSyntheticoligonucleotide<400>188tgtcggaatg gcttctgctt cttgcaaacc 30
權(quán)利要求
1.一種分析物的分析系統(tǒng)，包括a)固相支持物；以及b)10對(duì)或更多對(duì)寡核苷酸，對(duì)中的每個(gè)寡核苷酸與對(duì)中的另一個(gè)寡核苷酸至少部分互補(bǔ)，每對(duì)都含有第一寡核苷酸和第二寡核苷酸，第一寡核苷酸在其上連接有分析物結(jié)合試劑，第二寡核苷酸被固定在固相支持物上，其中第一和第二寡核苷酸含有選自SEQ ID NOS1-188的寡核苷酸組的12個(gè)或更多的連續(xù)核苷酸。
2.權(quán)利要求1的分析系統(tǒng)，其中第一和第二寡核苷酸含有選自SEQ ID NOS1-188的寡核苷酸組的20個(gè)或更多的連續(xù)核苷酸。
3.權(quán)利要求1的分析系統(tǒng)，其中第一和第二寡核苷酸含有選自SEQ ID NOS1-188的寡核苷酸組的24個(gè)或更多的連續(xù)核苷酸。
4.權(quán)利要求1的分析系統(tǒng)，其中第一和第二寡核苷酸含有選自SEQ ID NOS1-188的寡核苷酸組的28個(gè)或更多的連續(xù)核苷酸。
5.權(quán)利要求1的分析系統(tǒng)，其中的10對(duì)或更多對(duì)寡核苷酸選自SEQ ID NOS1-188的序列。
6.權(quán)利要求1的分析系統(tǒng)，其中有12對(duì)或更多對(duì)寡核苷酸含有選自SEQ ID NOS1-188的寡核苷酸組的12個(gè)或更多的連續(xù)核苷酸。
7.權(quán)利要求1的分析系統(tǒng)，其中有14對(duì)或更多對(duì)寡核苷酸含有選自SEQ ID NOS1-188的寡核苷酸組的12個(gè)或更多的連續(xù)核苷酸。
8.權(quán)利要求1的分析系統(tǒng)，其中有15對(duì)寡核苷酸含有選自SEQ IDNOS1-188的寡核苷酸組的12個(gè)或更多的連續(xù)核苷酸。
9.權(quán)利要求1的分析系統(tǒng)，其中的寡核苷酸選自下列序列SEQ IDNO11、SEQ ID NO57、SEQ ID NO59、SEQ ID NO.65、SEQ ID NO67、SEQ ID NO69、SEQ ID NO75、SEQ ID NO77、SEQ ID NO93、SEQID NO95、SEQ ID NO117、SEQ ID NO123、SEQ ID NO129、SEQ IDNO163、SEQ ID NO187和它們的互補(bǔ)序列。
10.權(quán)利要求1的分析系統(tǒng)，其中每對(duì)的第一寡核苷酸上連接有不同的分析物結(jié)合試劑，每種不同的分析物結(jié)合試劑對(duì)一個(gè)或多個(gè)樣品中的不同的分析物具有特異性。
11.權(quán)利要求1的分析系統(tǒng)，其中來(lái)自一個(gè)或多個(gè)寡核苷酸對(duì)的一個(gè)或兩個(gè)寡核苷酸在其上還連接有接頭分子或接頭核酸序列。
12.權(quán)利要求11的分析系統(tǒng)，其中的接頭核酸序列被共價(jià)結(jié)合到一個(gè)或多個(gè)寡核苷酸對(duì)的一個(gè)寡核苷酸上，接頭核酸被共價(jià)結(jié)合到固相支持物上，接頭核酸將寡核苷酸連接到固相支持物上。
13.權(quán)利要求1的分析系統(tǒng)，其中的寡核苷酸對(duì)在室溫一起雜交，交叉雜交不超過(guò)0.1％。
14.權(quán)利要求1的分析系統(tǒng)，其中第一寡核苷酸的分析物結(jié)合試劑選自抗體及其抗原結(jié)合片段。
15.權(quán)利要求1的分析系統(tǒng)，其中每個(gè)不同的寡核苷酸被結(jié)合到固相支持物表面上不同的預(yù)定區(qū)域。
16.權(quán)利要求1的分析系統(tǒng)，其中的固相支持物是珠子。
17.權(quán)利要求1的分析系統(tǒng)，其中分析物選自多肽或蛋白、糖類、配體、核酸、脂類、類固醇、代謝物、濫用藥物、病毒抗原和細(xì)菌抗原。
18.權(quán)利要求14的分析系統(tǒng)，其中的分析物是選自抗體及其結(jié)合片段、激素、外源凝集素、受體、類固醇、細(xì)胞表面抗原、細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子、cDNA、mRNA、疾病標(biāo)記物和癌基因標(biāo)記物的蛋白或多肽。
19.權(quán)利要求1的分析系統(tǒng)，以試劑盒的形式提供，用于一種或多種特定分析物的檢測(cè)。
20.一種分析物的分析系統(tǒng)，含有一對(duì)或多對(duì)互補(bǔ)的寡核苷酸，每對(duì)互補(bǔ)的寡核苷酸含有第一寡核苷酸和第二寡核苷酸，第一寡核苷酸在其上連接有分析物，第二寡核苷酸被固定在固相支持物上，寡核苷酸選自具有下列序列中的12個(gè)或更多個(gè)連續(xù)核苷酸的序列SEQ IDNO11、SEQ ID NO57、SEQ ID NO59、SEQ ID NO.65、SEQ ID NO67、SEQ ID NO69、SEQ ID NO75、SEQ ID NO77、SEQ ID NO93、SEQID NO95、SEQ ID NO117、SEQ ID NO123、SEQ ID NO129、SEQ IDNO163、SEQ ID NO187以及它們的互補(bǔ)序列。
21.一種分析物的分析系統(tǒng)，含有至少10對(duì)互補(bǔ)的寡核苷酸，每對(duì)互補(bǔ)的寡核苷酸含有第一寡核苷酸和第二寡核苷酸，第一寡核苷酸在其上連接有分析物，第二寡核苷酸被固定在固相支持物上，寡核苷酸選自具有下列序列中的12個(gè)或更多個(gè)連續(xù)核苷酸的序列SEQ IDNO11、SEQ ID NO57、SEQ ID NO59、SEQ ID NO.65、SEQ ID NO67、SEQ ID NO69、SEQ ID NO75、SEQ ID NO77、SEQ ID NO93、SEQID NO95、SEQ ID NO117、SEQ ID NO123、SEQ ID NO129、SEQ IDNO163、SEQ ID NO187以及它們的互補(bǔ)序列。
22.一組寡核苷酸，具有選自具有SEQ ID NOS1-188中的12個(gè)或更多個(gè)連續(xù)核苷酸的序列的核酸序列。
23.一組一個(gè)或多個(gè)互補(bǔ)的寡核苷酸對(duì)，其核酸序列組成為選自具有SEQ ID NOS1-188中的12個(gè)或更多個(gè)連續(xù)核苷酸的序列中的一個(gè)或多個(gè)寡核苷酸。
24.一種檢測(cè)樣品中的分析物的方法，該方法包括下列步驟a)選擇一個(gè)或多個(gè)互補(bǔ)的寡核苷酸對(duì)，每對(duì)含有第一寡核苷酸和第二寡核苷酸，第一寡核苷酸在其上連接有分析物結(jié)合試劑，第二寡核苷酸被固定在固相支持物上，寡核苷酸對(duì)的第一寡核苷酸或第二寡核苷酸的核酸序列選自具有下列序列中的12個(gè)或更多個(gè)連續(xù)核苷酸的序列SEQ ID NO1、SEQ ID NO3、SEQ ID NO5、SEQ ID NO7、SEQ ID NO9、SEQ ID NO11、SEQ ID NO13、SEQ ID NO15、SEQ IDNO17、SEQ ID NO19、SEQ ID NO21、SEQ ID NO23、SEQ ID NO25、SEQ ID NO27、SEQ ID NO29、SEQ ID NO31、SEQ ID NO35、SEQID NO37、SEQ ID NO39、SEQ ID NO41、SEQ ID NO43、SEQ IDNO45、SEQ ID NO47、SEQ ID NO49、SEQ ID NO51、SEQ ID NO53、SEQ ID NO55、SEQ ID NO57、SEQ ID NO63、SEQ ID NO73、SEQID NO75、SEQ ID NO81、SEQ ID NO83、SEQ ID NO85、SEQ IDNO87、SEQ ID NO89、SEQ ID NO91、SEQ ID NO93、SEQ ID NO95、SEQ ID NO97、SEQ ID NO99、SEQ ID NO101、SEQ ID NO103、SEQID NO105、SEQ ID NO107、SEQ ID NO109、SEQ ID NO111、SEQ IDNO113、SEQ ID NO115、SEQ ID NO117、SEQ ID NO119、SEQ IDNO121、SEQ ID NO123、SEQ ID NO125、SEQ ID NO127、SEQ IDNO129、SEQ ID NO131、SEQ ID NO133、SEQ ID NO135、SEQ IDNO136、SEQ ID NO137、SEQ ID NO138、SEQ ID NO139、SEQ IDNO140、SEQ ID NO141、SEQ ID NO142、SEQ ID NO143、SEQ IDNO144、SEQ ID NO145、SEQ ID NO146、SEQ ID NO147、SEQ IDNO148、SEQ ID NO149、SEQ ID NO150、SEQ ID NO151、SEQ IDNO152、SEQ ID NO153、SEQ ID NO154、SEQ ID NO155、SEQ IDNO156、SEQ ID NO157、SEQ ID NO158、SEQ ID NO159、SEQ IDNO160、SEQ ID NO161、SEQ ID NO162、SEQ ID NO163、SEQ IDNO164、SEQ ID NO165、SEQ ID NO166、SEQ ID NO167、SEQ IDNO168、SEQ ID NO169、SEQ ID NO170、SEQ ID NO171、SEQ IDNO172、SEQ ID NO173、SEQ ID NO174、SEQ ID NO175、SEQ IDNO176、SEQ ID NO177、SEQ ID NO178、SEQ ID NO179、SEQ IDNO180、SEQ ID NO181、SEQ ID NO182、SEQ ID NO183、SEQ IDNO185、SEQ ID NO187以及與上述的一個(gè)或多個(gè)中的每個(gè)互補(bǔ)的寡核苷酸；b)提供含有一種或多種分析物的樣品；c)將一種或多種分析物與第一寡核苷酸在分析物結(jié)合試劑能夠結(jié)合它們相應(yīng)的分析物的條件下混合，并將一個(gè)或多個(gè)寡核苷酸對(duì)在便于互補(bǔ)的寡核苷酸進(jìn)行選擇性雜交以形成帶有被結(jié)合的分析物的雜交的寡核苷酸的條件下混合；以及d)檢測(cè)一種或多種被結(jié)合的分析物。
25.一種產(chǎn)生核酸序列集合的方法，包括下列步驟a)選擇具有選定的長(zhǎng)度和GC含量的第一核苷酸序列；b)產(chǎn)生具有與第一核苷酸序列大約相同的長(zhǎng)度和大約相同的GC含量的核苷酸序列文庫(kù)；c)從文庫(kù)中選擇第二序列以加入到集合中；d)確定選擇的第二寡核苷酸是否含有4個(gè)以上相同的連續(xù)堿基，如果有，將該選擇的第二序列舍棄；e)在步驟(d)之前或之后，確定選擇的第二寡核苷酸序列在與第一核苷酸序列比對(duì)時(shí)任何8個(gè)堿基的窗口中是否具有5個(gè)以上的配對(duì)，如果有，將該選擇的第二序列舍棄；以及f)如果在步驟(d)和(e)中沒(méi)有被舍棄，將該第二序列加入到集合中。
26.權(quán)利要求25的方法，含有至少另外一輪重復(fù)的步驟(c)、(d)、(e)和(f)。
27.權(quán)利要求25的方法，還包括測(cè)試集合中的序列的交叉雜交，并從集合中舍棄任何與集合中其它的序列發(fā)生超過(guò)0.1％的交叉雜交的序列的額外步驟。
28.權(quán)利要求25的方法，其中的產(chǎn)生步驟包括產(chǎn)生長(zhǎng)度的差別不超過(guò)5個(gè)核苷酸的核苷酸序列的文庫(kù)。
29.權(quán)利要求25的方法，其中的產(chǎn)生步驟包括產(chǎn)生具有基本上相同長(zhǎng)度的核苷酸序列的文庫(kù)。
30.權(quán)利要求29的方法，其中的產(chǎn)生步驟包括產(chǎn)生長(zhǎng)度的差別不超過(guò)1個(gè)核苷酸的核苷酸序列的文庫(kù)。
31.權(quán)利要求25的方法，其中的產(chǎn)生步驟包括產(chǎn)生GC含量的差別不超過(guò)30％的核苷酸序列的文庫(kù)。
32.權(quán)利要求25的方法，其中的產(chǎn)生步驟包括產(chǎn)生具有基本上相同的GC含量的核苷酸序列的文庫(kù)。
33.權(quán)利要求32的方法，其中的產(chǎn)生步驟包括產(chǎn)生GC含量的差別不超過(guò)10％的核苷酸序列的文庫(kù)。
34.一種分析物的分析系統(tǒng)，包括a)固相支持物；以及b)10對(duì)或更多對(duì)寡核苷酸，對(duì)中的每個(gè)寡核苷酸與對(duì)中的另一個(gè)寡核苷酸至少部分互補(bǔ)，每對(duì)都含有第一寡核苷酸和第二寡核苷酸，第一寡核苷酸在其上連接有分析物結(jié)合試劑，第二寡核苷酸被固定在固相支持物上，其中第一和第二寡核苷酸含有選自權(quán)利要求26的方法產(chǎn)生的集合的寡核苷酸組中的12個(gè)或更多個(gè)連續(xù)寡核苷酸。
35.通過(guò)權(quán)利要求26的方法產(chǎn)生的至少20個(gè)寡核苷酸的集合。
全文摘要
本發(fā)明是一種用于分析物的分類、檢測(cè)和鑒定的基于寡核苷酸的分析系統(tǒng)和試劑盒。系統(tǒng)使用了互補(bǔ)的寡核苷酸對(duì)，其中每對(duì)寡核苷酸中的一個(gè)寡核苷酸被固定到固相支持物上，另一個(gè)寡核苷酸在其上結(jié)合了分析物結(jié)合試劑。不同的寡核苷酸對(duì)以基本上相同的速率雜交，具有基本上相同的Tm，具有設(shè)計(jì)成使不同寡核苷酸對(duì)之間的交叉雜交最小化的核苷酸序列，并且在室溫下相對(duì)快速地雜交到一起而沒(méi)有可檢測(cè)的交叉雜交。
文檔編號(hào)G01N33/543GK1777684SQ200480010458
公開(kāi)日2006年5月24日 申請(qǐng)日期2004年4月16日 優(yōu)先權(quán)日2003年4月18日
發(fā)明者丹尼爾·A·基斯, 帕拉梅斯瓦蘭·梅達(dá)·雷迪, 雅基·S·博德納爾, 菲爾杜斯·法歐奎 申請(qǐng)人:貝克曼考爾特公司