專利名稱：抗同種動物免疫球蛋白m的抗體的獲得方法及用該抗體檢測早期感染的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及到一種抗同種動物免疫球蛋白M的抗體的獲得方法、以及用獲得抗體來檢測動物早期病原感染情況的檢測方法。
背景技術(shù)：
目前，動物被病原感染后早期抗體的檢測方法是首先獲得抗體，其方法是直接利用特定病原刺激動物使它產(chǎn)生針對這種病原的免疫球蛋白M——簡稱IgM，再以該免疫球蛋白M作為抗原研制出抗這種免疫球蛋白M的抗體，就得到所需的抗體；在此基礎(chǔ)上，再通過免疫標記技術(shù)的原理建立酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測方法——又稱ELISA檢測方法，或者通過免疫層析技術(shù)的原理建立金標免疫分析檢測方法——又稱GLISA檢測方法，就可檢測出動物被病原早期感染的情況。其原理是以被檢病原包被酶標板建立ELISA方法，以研制的抗某特定病原免疫球蛋白M的抗體為介導(dǎo)，檢測特定病原感染動物后產(chǎn)生特異性的早期免疫球蛋白M抗體。上述方法的缺點是獲得抗體時需要直接使用病原刺激動物，這極有可能造成病原的擴散，危險性很高；并且，操作中針對某特定病原的免疫球蛋白M抗體由于產(chǎn)生時間短、產(chǎn)量低而很難提純，這對研制抗抗體影響較大，不僅影響工作質(zhì)量，實驗過程也比較復(fù)雜。

發(fā)明內(nèi)容
針對上述問題，本發(fā)明將提供一種無需直接使用病原就可獲得用于檢測動物早期病原感染的抗體的方法——即抗同種動物免疫球蛋白M的抗體的獲得方法，在此基礎(chǔ)上，本發(fā)明同時提供一種用所得的抗體檢測動物早期病原感染的檢測方法。
本發(fā)明采用的具體技術(shù)方案是所述的抗同種動物免疫球蛋白M的抗體的獲得方法，主要包括如下步聚(一)利用待檢測的同一種動物的免疫球蛋白M作為抗原，去免疫選用的另一種動物使它產(chǎn)生針對待檢測動物免疫球蛋白M的抗體。(二)從步驟(一)所得的抗體中獲得具有型的特異性、并與待檢測動物的其它免疫球蛋白無交叉反應(yīng)的抗體，就得到所需的抗體。
在此基礎(chǔ)上，本發(fā)明所述的利用上面所得到的抗體來檢測動物早期病原感染的檢測方法，其主要步驟是在得到所需的抗體的基礎(chǔ)上，再利用免疫標記技術(shù)或免疫層析技術(shù)的原理建立檢測方法，就可檢測出動物早期病原感染的情況。
上述的利用免疫標記技術(shù)的原理建立的檢測方法是以所得的抗體為介導(dǎo)，建立以免疫標記技術(shù)為基礎(chǔ)的檢測方法。例如，可以建立酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測方法。
上述的利用免疫層析技術(shù)的原理建立的檢測方法是以所得的抗體為介導(dǎo)，建立以免疫層析技術(shù)為基礎(chǔ)的檢測方法。例如，可以建立金標免疫分析檢測方法。
本發(fā)明的主要原理及優(yōu)點進一步解釋如下利用待檢測的同一種動物——如豬的免疫球蛋白M作為抗原，去免疫另一種選定的動物——如老鼠，使老鼠產(chǎn)生抗該種動物——如豬的免疫球蛋白M的抗體，這種抗體既可以是單抗，也可以是多抗，并且這種抗豬免疫球蛋白M的抗體必須具有只與豬的免疫球蛋白M特異性反應(yīng)、且與豬的其它球蛋白無交叉反應(yīng)的特性，這樣方能滿足對該種動物——豬進行早期感染檢測的要求。這種方法的優(yōu)點是由于利用的是同一種動物的免疫球蛋白M，因而這種物質(zhì)獲取十分方便、簡單。
在獲得了所需的抗體的基礎(chǔ)上，在檢測載體——如酶標板或試紙條上包被好病原或病原某特定基因表達產(chǎn)物，再以所得的抗體為介導(dǎo)，通過免疫標記技術(shù)的原理建立ELISA檢測方法、或者利用免疫層析技術(shù)的原理建立GLISA檢測方法，就可檢測出動物早期病原感染的情況。需要說明的是，本發(fā)明所述的利用免疫標記技術(shù)原理建立的ELISA檢測方法、或者利用免疫層析技術(shù)的原理建立的GLISA檢測方法都是本領(lǐng)域中的技術(shù)人員常用的、成熟的檢測方法，故本發(fā)明中不再作詳細的描述。
例如通過對豬免疫球蛋白M的研究，我們制備出抗豬IgM的單抗，用豬瘟病原包被酶標板后，以獲得的單抗為介導(dǎo)建立ELISA檢測方法，對豬瘟疫苗免疫豬后(由于豬瘟是國家一類動物傳染病，實驗過程無法獲得病原感染早期樣品，通過疫苗免疫可以達到同樣效果)進行早期監(jiān)測，結(jié)果比市售試劑盒早3～4天發(fā)現(xiàn)了免疫陽性動物。如果利用此法對新出現(xiàn)疾病進行檢測，只要發(fā)現(xiàn)病原就可以對早期感染動物進行檢測；比如非典，只要獲得該病的病原則可以通過此方法來檢測早期感染人群。
本發(fā)明的優(yōu)點是方法建立簡單，避免了直接利用病原去免疫動物而極可能發(fā)生的病原擴散的情況，比其它的早期感染產(chǎn)生的抗體檢測方法更安全；并且，利用本發(fā)明所述的方法可比其它的非早期感染檢測方法提早3～4天發(fā)現(xiàn)感染動物，因而具有極好的社會效益。
權(quán)利要求
1.抗同種動物免疫球蛋白M的抗體的獲得方法，其特征在于主要包括如下步聚(一)利用待檢測的同一種動物的免疫球蛋白M作為抗原，去免疫選用的另一種動物使它產(chǎn)生針對待檢測動物免疫球蛋白M的抗體。(二)從步驟(一)所得的抗體中獲得具有型的特異性、并與待檢測動物的其它免疫球蛋白無交叉反應(yīng)的抗體，就得到所需的抗體。
2.一種利用權(quán)利要求1所得的抗體來檢測動物早期病原感染的檢測方法，其特征在于在得到所需的抗體的基礎(chǔ)上，利用免疫標記技術(shù)或免疫層析技術(shù)的原理建立檢測方法，就可檢測出動物早期病原感染的情況。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的檢測方法，其特征在于所述的利用免疫標記技術(shù)的原理建立的檢測方法是以所得的抗體為介導(dǎo)，建立以免疫標記技術(shù)為基礎(chǔ)的檢測方法。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的檢測方法，其特征在于所述的利用免疫層析技術(shù)的原理建立的檢測方法是以所得的抗體為介導(dǎo)，建立以免疫層析技術(shù)為基礎(chǔ)的檢測方法。
全文摘要
本發(fā)明公開了抗同種動物免疫球蛋白M的抗體的獲得方法，主要包括如下步聚(一)利用待檢測的同一種動物的免疫球蛋白M作為抗原，去免疫選用的另一種動物使它產(chǎn)生針對待檢測動物免疫球蛋白M的抗體。(二)從步驟(一)所得的抗體中獲得具有型的特異性、并與待檢測動物的其它免疫球蛋白無交叉反應(yīng)的抗體，就得到所需的抗體。還公開了利用上面所得到的抗體來檢測動物早期病原感染的檢測方法，其主要步驟是利用所得到的抗體為介導(dǎo)，再利用免疫標記技術(shù)或免疫層析技術(shù)的原理建立檢測方法，就可檢測出動物早期病原感染的情況。本發(fā)明的優(yōu)點是方法建立簡單、安全，不會發(fā)生病原擴散的情況，并且可比其它檢測方法提早3～4天發(fā)現(xiàn)感染動物。
文檔編號G01N33/53GK1760207SQ20051004151
公開日2006年4月19日 申請日期2005年8月13日 優(yōu)先權(quán)日2005年8月13日
發(fā)明者陳飛, 袁克, 秦愛建, 肖國平, 姚永華, 戴先禮, 柯家法 申請人:陳飛, 袁克