專利名稱：一種鼠疫菌f1抗體膠體金檢測(cè)試紙條的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物檢測(cè)領(lǐng)域，具體涉及一種鼠疫菌F1抗體檢測(cè)試紙條及其應(yīng)用。
背景技術(shù)：
對(duì)于鼠疫菌F1抗體的檢測(cè)，目前常用的方法有間接血凝法(PHA)和酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)。但以上方法均存在著操作復(fù)雜，時(shí)間長(zhǎng)，需要儀器設(shè)備、需要專業(yè)人員在有條件的實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行等，不適于基層單位和邊遠(yuǎn)地區(qū)，不適合流調(diào)和反恐的需要。

發(fā)明內(nèi)容
(一)、要解決的技術(shù)問題本發(fā)明的目的是提供一種方便、快捷地，用于檢測(cè)鼠疫菌F1抗體的試紙條，以克服現(xiàn)有技術(shù)操作復(fù)雜、繁瑣、時(shí)間長(zhǎng)、需要儀器、設(shè)備、標(biāo)本需要冷藏等不足。
(二)、技術(shù)方案本發(fā)明提供了一種檢測(cè)試紙條，它包含(1)包被鼠疫菌F1抗原和抗鼠疫菌F1多克隆抗體二條帶的硝酸纖維膜；(2)含有膠體金標(biāo)記的鼠疫菌＝F1抗原的玻璃纖維膜。
優(yōu)選的本發(fā)明所述試紙條，它還包含(1)反應(yīng)支持物；(2)吸水墊；(3)金標(biāo)抗原保護(hù)膜。
其中反應(yīng)支持物優(yōu)選PVC板；吸水墊優(yōu)選濾油紙；金標(biāo)抗原保護(hù)膜同時(shí)具有吸水功能，優(yōu)選用聚脂膜、玻璃纖維或?yàn)V紙纖維。
本發(fā)明還公開了所述試紙條在檢測(cè)鼠疫菌F1抗體中的應(yīng)用。
本發(fā)明的技術(shù)方案是采用純化的鼠疫菌F1抗原和抗鼠疫菌F1多克隆抗體分別固相于硝酸纖維膜上(NC膜)，結(jié)合膠體金標(biāo)記的鼠疫菌F1抗原，應(yīng)用膜層析雙抗原夾心法的原理檢測(cè)血清中的鼠疫菌F1抗體。
(三)、有益效果用本發(fā)明的試紙條檢測(cè)鼠疫菌F1抗體方便、快速、簡(jiǎn)捷，不需特殊儀器設(shè)備，不需專業(yè)培訓(xùn)，結(jié)果清晰易辨，操作簡(jiǎn)單，易于推廣，適合基層，適合于大批量檢測(cè)，適合流行病學(xué)調(diào)查，適合生物反恐的需要，對(duì)血清中的鼠疫菌F1抗體檢測(cè)提供了一個(gè)好的方法。


圖1A本發(fā)明試紙條的正面示意圖；B本發(fā)明試紙條的側(cè)面示意圖；其中，1吸水墊；2硝酸纖維膜(T包被鼠疫菌F1抗原的條帶；C包被抗鼠疫菌F1的多克隆抗體的質(zhì)控條帶)；3含有膠體金標(biāo)記鼠疫菌F1抗原的玻璃纖維膜；4金標(biāo)抗原保護(hù)膜；5反應(yīng)支持物。
圖2檢測(cè)結(jié)果示意圖；其中，從左至右依次為T、C兩條線顯色為陽(yáng)性；C一條線顯色為陰性；T、C兩條線均未顯色為無效。
具體實(shí)施例方式
通過下面給出的本發(fā)明的具體實(shí)施例和實(shí)驗(yàn)例可以進(jìn)一步清楚地理解本發(fā)明，但不是對(duì)本發(fā)明的限定。
實(shí)施例1 鼠疫菌F1抗體檢測(cè)試紙條(參見圖1)反應(yīng)支持物為6.5cm×0.4cm PCV板；吸水墊為2cm×0.4cm的濾油紙；1.8cm×0.4cm的硝酸纖維膜依次包被抗鼠疫菌F1抗原的多克隆抗體、鼠疫菌F1抗原；含有0.4cm×0.4cm膠體金標(biāo)記的鼠疫菌F1抗原的玻璃纖維膜；金標(biāo)抗原保護(hù)膜為2.7cm×0.4cm的聚脂膜；即形成了鼠疫菌F1抗體檢測(cè)試紙條。
實(shí)施例2 鼠疫菌F1抗體檢測(cè)試紙條(參見圖1)反應(yīng)支持物為6.5cm×0.4cm PCV板；吸水墊為2cm×0.4cm的濾油紙；1.8cm×0.4cm的硝酸纖維膜依次包被抗鼠疫菌F1抗原的多克隆抗體、鼠疫菌F1抗原；含有0.4cm×0.4cm膠體金標(biāo)記的鼠疫菌F1抗原的玻璃纖維膜；金標(biāo)抗原保護(hù)膜為2.7cm×0.4cm的玻璃纖維；即形成了鼠疫菌F1抗體檢測(cè)試紙條。
實(shí)施例3 鼠疫菌F1抗體檢測(cè)試紙條(參見圖1)反應(yīng)支持物為6.5cm×0.4cm PCV板；吸水墊為2cm×0.4cm的濾油紙；1.8cm×0.4cm的硝酸纖維膜依次包被抗鼠疫菌F1抗原的多克隆抗體、鼠疫菌F1抗原；含有0.4cm×0.4cm膠體金標(biāo)記的鼠疫菌F1抗原的玻璃纖維膜；金標(biāo)抗原保護(hù)膜為2.7cm×0.4cm的濾紙纖維；即形成了鼠疫菌F1抗體檢測(cè)試紙條。
實(shí)施例4 檢測(cè)方法(參見圖2)1∶20稀釋的血清樣本150μl，用滴管加入實(shí)施例1試紙條“4”處，樣品中的液體吸起上行，10-15分鐘判讀結(jié)果如含有鼠疫菌F1抗體，則與試紙條上膠體金標(biāo)記的鼠疫菌F1抗原形成相應(yīng)的復(fù)合物，上行與包被在硝酸纖維膜上的鼠疫菌F1抗原結(jié)合，形成紅色線條，即在“T”處形成紅色條帶。
無論是否含有相對(duì)應(yīng)的抗體，膠體金標(biāo)記鼠疫菌F1抗原，繼續(xù)向上爬行與包被在膜上的抗鼠疫菌F1多克隆抗體形成紅色沉淀線，即在“C”處形成紅色條帶。此線是質(zhì)控線，如膠體金失效，此線就不會(huì)出現(xiàn)，說明試紙條失效。
陽(yáng)性結(jié)果會(huì)出現(xiàn)2條紅色沉淀線，陰性結(jié)果出現(xiàn)1條紅色沉淀線，如不出現(xiàn)線條說明試紙條失效。
實(shí)驗(yàn)例1 臨床檢測(cè)結(jié)果經(jīng)檢測(cè)254例人和鼠血清標(biāo)本，與目前常用的間接血凝法(PHA，T1a)和酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA，T1b)比較，試紙條法(T2)靈敏度分別為93％、96％，特異度100％。結(jié)果見下表。
間接血凝法(T1a)和ELISA法(T1b)與試紙條法(T2)對(duì)比實(shí)驗(yàn)統(tǒng)計(jì)表

權(quán)利要求
1.一種檢測(cè)試紙條，其特征在于，它包含(1)包被鼠疫菌F1抗原和抗鼠疫菌F1多克隆抗體二條帶的硝酸纖維膜；(2)含有膠體金標(biāo)記鼠疫菌F1抗原的玻璃纖維膜。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述試紙條，它還包含(1)反應(yīng)支持物；(2)吸水墊；(3)金標(biāo)抗原保護(hù)膜。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述試紙條，其中反應(yīng)支持物選用PVC板。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述試紙條，其中吸水墊選用濾油紙。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述試紙條，其中金標(biāo)抗原保護(hù)膜選用聚脂膜、玻璃纖維或?yàn)V紙纖維。
6.權(quán)利要求1-5之任一所述試紙條在檢測(cè)鼠疫菌F1抗體中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種能檢測(cè)鼠疫菌F1抗體的快速檢測(cè)試紙條。它是在硝酸纖維膜(NC膜)上，包被鼠疫菌F1抗原及抗鼠疫菌F1多克隆抗體，結(jié)合膠體金標(biāo)記的鼠疫菌F1抗原，應(yīng)用膜層析雙抗原夾心法，檢測(cè)人和易感動(dòng)物血清標(biāo)本中鼠疫菌F1抗體水平。應(yīng)用本發(fā)明試紙條檢測(cè)，操作簡(jiǎn)單，特異準(zhǔn)確，且方便快捷，10－15分鐘判讀結(jié)果，不需特殊儀器設(shè)備，也不需專業(yè)培訓(xùn)，適合醫(yī)院等基層單位，適合大規(guī)模的流行病學(xué)調(diào)查，適合生物反恐的需要。
文檔編號(hào)G01N33/544GK1963510SQ20051008685
公開日2007年5月16日 申請(qǐng)日期2005年11月10日 優(yōu)先權(quán)日2005年11月10日
發(fā)明者劉明 申請(qǐng)人:北京莊笛浩禾生物醫(yī)學(xué)科技有限公司