專利名稱：一種高效液相色譜系統(tǒng)共聚焦型激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)器的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實(shí)用新型涉及高效液相色譜系統(tǒng)的檢測(cè)器，特別是一種配置有新型檢測(cè)池的高效液相色譜系統(tǒng)共聚焦型激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)器。
背景技術(shù)：
熒光檢測(cè)作為一種高靈敏檢測(cè)技術(shù)在高效液相色譜(HPLC)系統(tǒng)中應(yīng)用比較廣泛。通過選擇激發(fā)或發(fā)射波長(zhǎng)以適應(yīng)不同的樣品，該技術(shù)的最低檢測(cè)限一般為10-8～10-9摩爾/升。隨著科技和社會(huì)的發(fā)展，目前的生物技術(shù)、環(huán)境和食品中對(duì)痕量組分分析的要求有時(shí)達(dá)到10-12摩爾/升甚至更低，傳統(tǒng)的熒光檢測(cè)器不能滿足要求。用激光為激發(fā)光源的激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)(Laser-Induced FluorescenceDetection，LIF-D)是目前靈敏度最高的檢測(cè)手段之一，近年來得到了快速發(fā)展。共聚焦型LIF-D具有結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、熒光收集效率高等優(yōu)點(diǎn)，在毛細(xì)管電泳檢測(cè)中應(yīng)用非常廣泛，但將其應(yīng)用于HPLC系統(tǒng)，需要設(shè)計(jì)專門的檢測(cè)池，目前報(bào)道的柱后檢測(cè)池包括無窗池、射流池、鞘流池。基于這些柱后檢測(cè)池的熒光檢測(cè)池除鞘流池外均是基于正交型光學(xué)結(jié)構(gòu)，盡管有報(bào)道鞘流池用于共聚焦光學(xué)結(jié)構(gòu)，但鞘流池制作過程復(fù)雜、操作煩瑣。
實(shí)用新型內(nèi)容本實(shí)用新型的目的在于提供一種高效液相色譜系統(tǒng)共聚焦型激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)器。該檢測(cè)器通過柱上檢測(cè)池或柱后檢測(cè)池可以和毛細(xì)管液相色譜及普通高效液相色譜系統(tǒng)在線聯(lián)用，主要適用于生物、環(huán)境、藥物和食品檢測(cè)等領(lǐng)域中的痕量組分檢測(cè)。
本實(shí)用新型的目的是通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)的本實(shí)用新型包括激發(fā)光源、光學(xué)平臺(tái)及檢測(cè)池，激發(fā)光源位于光學(xué)平臺(tái)的一側(cè)，檢測(cè)池固設(shè)在光學(xué)平臺(tái)上。
其中所述光學(xué)平臺(tái)內(nèi)由上至下同軸依次設(shè)有物鏡、分束鏡、濾光片、凸透鏡及光闌，光電轉(zhuǎn)化器件設(shè)置在光闌的下方，其中分束鏡與激發(fā)光源發(fā)出的平行光束成45°角；所述光電轉(zhuǎn)化器件可為光電倍增管、光電池、光電二極管或電荷耦合器件；所述激發(fā)光源可為半導(dǎo)體激光器、半導(dǎo)體泵浦固體激光器或氣體激光器；所述檢測(cè)池內(nèi)設(shè)有兩個(gè)液流管道，兩液流管道下方設(shè)有檢測(cè)窗，不銹鋼墊片壓在檢測(cè)窗上，在檢測(cè)池上還開有定位孔及固定孔；所述檢測(cè)池為柱后檢測(cè)池，兩個(gè)液流管道與激發(fā)光路在同一平面并相互成120°。
本實(shí)用新型的優(yōu)點(diǎn)與積極效果為本實(shí)用新型用于高效液相色譜，具有結(jié)構(gòu)緊湊、體積小、熒光收集效率高等優(yōu)點(diǎn)。同時(shí)，所研制的柱后檢測(cè)池的光學(xué)窗口為平面光窗，相對(duì)于橫截面為圓柱型的毛細(xì)管柱上檢測(cè)池具有更低的光學(xué)反射和散射，即光學(xué)背景小，有利于得到更低的檢測(cè)靈敏度。


圖1為本實(shí)用新型的整體結(jié)構(gòu)示意圖；圖2為本實(shí)用新型柱后檢測(cè)池的結(jié)構(gòu)示意圖；圖3為本實(shí)用新型激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)核黃素的色譜圖。
具體實(shí)施方式
以下結(jié)合附圖對(duì)本實(shí)用新型作進(jìn)一步詳述。
如圖1所示，本發(fā)明采用熒光收集光路和激發(fā)光路在檢測(cè)池9的同側(cè)且同軸的共聚焦光學(xué)結(jié)構(gòu)。包括激發(fā)光源1、光學(xué)平臺(tái)2及檢測(cè)池9，激發(fā)光源1位于光學(xué)平臺(tái)2的一側(cè)，檢測(cè)池9固設(shè)在光學(xué)平臺(tái)2上。光學(xué)平臺(tái)2內(nèi)由上至下同軸依次設(shè)有物鏡8、分束鏡3、濾光片4、凸透鏡5及光闌6，光電轉(zhuǎn)化器件7設(shè)置在光闌6的下方，其中分束鏡3與激發(fā)光源1發(fā)出的平行光束成45°角。光電轉(zhuǎn)化器件7可為光電倍增管(PMT)、光電池、光電二極管或電荷耦合器件(CCD)。激發(fā)光源1可為半導(dǎo)體激光器、半導(dǎo)體泵浦固體激光器或氣體激光器。
如圖2所示，檢測(cè)池9內(nèi)設(shè)有兩個(gè)液流管道11，兩液流管道11下方設(shè)有檢測(cè)窗10，不銹鋼墊片12壓在檢測(cè)窗10上，在檢測(cè)池9上還開有定位孔13及固定孔14，檢測(cè)池9通過定位孔13定位于光學(xué)平臺(tái)2上，并通過固定孔14固定在光學(xué)平臺(tái)2上。檢測(cè)池9為柱后檢測(cè)池，兩個(gè)液流管道11與激發(fā)光路在同一平面并相互成120°，檢測(cè)池9的材質(zhì)為不銹鋼或聚醚醚酮(PEEK)等惰性材料。該檢測(cè)池9主要適用于HPLC系統(tǒng)和流動(dòng)注射分析系統(tǒng)。
在檢測(cè)時(shí)，激發(fā)光源1發(fā)出的平行光束成45°照射到分束鏡3上，被反射、經(jīng)物鏡8、檢測(cè)窗10聚焦到檢測(cè)池9中。液體流過液流管道11時(shí)，若樣品中有熒光，被激發(fā)光路照射后，樣品發(fā)出的熒光由物鏡8收集、由凸鏡5聚焦，經(jīng)光闌6至光電轉(zhuǎn)化器件7被轉(zhuǎn)化為可供檢測(cè)的電信號(hào)。
如圖3所示，為本實(shí)用新型用于檢測(cè)核黃素。
測(cè)試條件HPLC系統(tǒng)液相色譜高壓輸液泵一臺(tái)，分離柱為4.6×150mm C18，5μ，(ZORBAX，HP)；流動(dòng)相水/甲醇(70/30)。柱后檢測(cè)池池體積7μL。
測(cè)試結(jié)果取信噪比為3，該LIF-D對(duì)核黃素的濃度檢測(cè)限為0.1μg/L。
權(quán)利要求1.一種高效液相色譜系統(tǒng)共聚焦型激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)器，其特征在于包括激發(fā)光源(1)、光學(xué)平臺(tái)(2)及檢測(cè)池(9)，激發(fā)光源(1)位于光學(xué)平臺(tái)(2)的一側(cè)，檢測(cè)池(9)固設(shè)在光學(xué)平臺(tái)(2)上。
2.按權(quán)利要求1所述的高效液相色譜系統(tǒng)共聚焦型激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)器，其特征在于所述光學(xué)平臺(tái)(2)內(nèi)由上至下同軸依次設(shè)有物鏡(8)、分束鏡(3)、濾光片(4)、凸透鏡(5)及光闌(6)，光電轉(zhuǎn)化器件(7)設(shè)置在光闌(6)的下方，其中分束鏡(3)與激發(fā)光源(1)發(fā)出的平行光束成45°角。
3.按權(quán)利要求2所述的高效液相色譜系統(tǒng)共聚焦型激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)器，其特征在于所述光電轉(zhuǎn)化器件(7)可為光電倍增管、光電池、光電二極管或電荷耦合器件。
4.按權(quán)利要求1或2所述的高效液相色譜系統(tǒng)共聚焦型激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)器，其特征在于所述激發(fā)光源(1)可為半導(dǎo)體激光器、半導(dǎo)體泵浦固體激光器或氣體激光器。
5.按權(quán)利要求1所述的高效液相色譜系統(tǒng)共聚焦型激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)器，其特征在于所述檢測(cè)池(9)內(nèi)設(shè)有兩個(gè)液流管道(11)，兩液流管道(11)下方設(shè)有檢測(cè)窗(10)，不銹鋼墊片(12)壓在檢測(cè)窗(10)上，在檢測(cè)池上還開有定位孔(13)及固定孔(14)。
6.按權(quán)利要求5所述的高效液相色譜系統(tǒng)共聚焦型激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)器，其特征在于所述檢測(cè)池(9)為柱后檢測(cè)池，兩個(gè)液流管道(11)與激發(fā)光路在同一平面并相互成120°。
專利摘要本實(shí)用新型涉及高效液相色譜系統(tǒng)的檢測(cè)器，特別是一種配置有新型檢測(cè)池的高效液相色譜系統(tǒng)共聚焦型激光誘導(dǎo)熒光檢測(cè)器，包括激發(fā)光源、光學(xué)平臺(tái)及檢測(cè)池，激發(fā)光源位于光學(xué)平臺(tái)的一側(cè)，檢測(cè)池固設(shè)在光學(xué)平臺(tái)上。所述光學(xué)平臺(tái)內(nèi)由上至下同軸依次設(shè)有物鏡、分束鏡、濾光片、凸透鏡及光闌，光電轉(zhuǎn)化器件設(shè)置在光闌的下方，其中分束鏡與激發(fā)光源發(fā)出的平行光束成45°角；所述檢測(cè)池內(nèi)設(shè)有兩個(gè)液流管道，兩液流管道下方設(shè)有檢測(cè)窗，不銹鋼墊片壓在檢測(cè)窗上，在檢測(cè)池上還開有定位孔及固定孔；所述檢測(cè)池為柱后檢測(cè)池，兩個(gè)液流管道與激發(fā)光路在同一平面并相互成120°。本實(shí)用新型具有結(jié)構(gòu)緊湊、體積小、熒光收集效率高等優(yōu)點(diǎn)。
文檔編號(hào)G01N21/64GK2793726SQ20052009102
公開日2006年7月5日 申請(qǐng)日期2005年5月27日 優(yōu)先權(quán)日2005年5月27日
發(fā)明者關(guān)亞風(fēng), 楊丙成 申請(qǐng)人:中國科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所