專(zhuān)利名稱(chēng)：對(duì)乙酰氨基酚和鹽酸曲馬多制劑中雜質(zhì)的測(cè)定方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種對(duì)乙酰氨基酚和鹽酸曲馬多的復(fù)方制劑中的雜質(zhì)的檢測(cè)方法，具體涉及以HPLC法對(duì)含有對(duì)乙酰氨基酚和鹽酸曲馬多的復(fù)方制劑中有關(guān)物質(zhì)的檢測(cè)方法。
背景技術(shù)：
鹽酸曲馬多(tramadol hydrochloride)和對(duì)乙酰氨基酚(paracetamol)的復(fù)方制劑，于2001年8月在美國(guó)經(jīng)FDA批準(zhǔn)上市，用于急性疼痛的短期治療(5d)。臨床研究表明，與單一成分相比，該復(fù)方制劑治療疼痛更有效，且起效快，作用時(shí)間長(zhǎng)。
這兩種單方制劑中有關(guān)物質(zhì)檢查的HPLC方法已有較多報(bào)道，對(duì)復(fù)方制劑的含量測(cè)定也有一些研究，而關(guān)于有關(guān)物質(zhì)的測(cè)定方法僅有一篇報(bào)道，“復(fù)方鹽酸曲馬多片及有關(guān)物質(zhì)的HPLC測(cè)定”，該報(bào)道內(nèi)容主要側(cè)重于含量測(cè)定，卻沒(méi)有涉及對(duì)氨基酚的測(cè)定。而對(duì)氨基酚是對(duì)乙酰氨基酚的合成中間體及主要降解產(chǎn)物，毒性較大，嚴(yán)格控制其限量是化學(xué)分析工作中的重要環(huán)節(jié)。因此，提供一種對(duì)乙酰氨基酚和鹽酸曲馬多的復(fù)方制劑中對(duì)氨基酚的檢測(cè)方法，是有關(guān)方面所十分需要的。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種同時(shí)測(cè)定對(duì)乙酰氨基酚和鹽酸曲馬多復(fù)方制劑中已知雜質(zhì)和未知雜質(zhì)的測(cè)定方法，以克服上述現(xiàn)有技術(shù)中的缺陷。
本發(fā)明的方法包括如下步驟取供試品細(xì)粉適量，精密稱(chēng)定，加溶劑溶解并稀釋制成每1ml中含鹽酸曲馬多0.15～0.75mg的溶液，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液作為供試品溶液；精密將供試品溶液加溶劑稀釋20～500倍，作為自身對(duì)照溶液；另取對(duì)氨基酚對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加溶劑制成濃度為1.3～6.5μg/ml的溶液，作為對(duì)氨基酚對(duì)照溶液；對(duì)氨基酚對(duì)照溶液與自身對(duì)照溶液可分別配制，也可配在同一量瓶中。
所說(shuō)的溶劑選自水、甲醇水溶液或流動(dòng)相A；甲醇水溶液中，水與甲醇的體積比為78∶22～86∶14；所說(shuō)的流動(dòng)相A為pH4～5的醋酸-醋酸鈉緩沖液與甲醇的混合物，醋酸-醋酸鈉緩沖液與甲醇的體積比為78∶22～86∶14。
照高效液相色譜法，用十八烷基鍵合硅膠為填充劑；以pH為4～5的醋酸-醋酸鈉緩沖液與甲醇的混合物為流動(dòng)相A，甲醇為流動(dòng)相B，按下表進(jìn)行梯度洗脫，檢測(cè)波長(zhǎng)為260～280nm。理論板數(shù)按對(duì)乙酰氨基酚峰和鹽酸曲馬多峰計(jì)算均應(yīng)不低于2000，對(duì)氨基酚、對(duì)乙酰氨基酚及鹽酸曲馬多峰與相鄰峰的分離度均應(yīng)符合要求。醋酸-醋酸鈉緩沖液與甲醇的體積比為醋酸-醋酸鈉緩沖液∶甲醇＝78∶22～86∶14。
梯度洗脫表

表中時(shí)間和A、B比例均可適當(dāng)調(diào)節(jié)，使對(duì)氨基酚、對(duì)乙酰氨基酚和鹽酸曲馬多都有合適的保留時(shí)間及分離度。
精密量取相同體積的供試品溶液與對(duì)照溶液，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，供試品溶液的色譜圖中如有與對(duì)氨基酚保留時(shí)間一致的色譜峰，按外標(biāo)法計(jì)算對(duì)氨基酚的含量，其他雜質(zhì)峰面積的和與對(duì)照溶液色譜圖中對(duì)乙酰氨基酚峰和鹽酸曲馬多峰面積之和相比，按自身對(duì)照法計(jì)算。
采用本發(fā)明的方法，可以簡(jiǎn)便快速和準(zhǔn)確的檢測(cè)制劑中的對(duì)氨基酚的含量，其檢測(cè)誤差僅為0.4％，同時(shí)可檢測(cè)出其它未知雜質(zhì)的總量，能夠滿(mǎn)足有關(guān)方面的需要。


圖1為氨酚曲馬多口腔崩解片有關(guān)物質(zhì)對(duì)照?qǐng)D譜。
圖2為氨酚曲馬多口腔崩解片有關(guān)物質(zhì)圖譜。
圖3為氨酚曲馬多口腔崩解片有關(guān)物質(zhì)對(duì)氨基酚加樣回收?qǐng)D譜。
圖4為酸破壞圖譜。
圖5為堿破壞圖譜。
圖6為氧化破壞圖譜。
圖7為紫外破壞圖譜。
圖8為熱破壞圖譜。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1本發(fā)明在氨酚曲馬多口腔崩解片中的應(yīng)用制劑1325mg/37.5mg氨酚曲馬多口腔崩解片


有關(guān)物質(zhì)測(cè)定方法取氨酚曲馬多口腔崩解片10片，精密稱(chēng)定，研細(xì)，精密稱(chēng)取適量(約相當(dāng)于鹽酸曲馬多37.5mg)，置100ml量瓶中，加流動(dòng)相A(醋酸-醋酸鈉緩沖液(pH4.5)-甲醇(82∶18))超聲使溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液作為氨酚曲馬多口腔崩解片供試品溶液；另取對(duì)氨基酚對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加流動(dòng)相A(醋酸-醋酸鈉緩沖液(pH4.5)-甲醇(82∶18))制成每1ml中含325μg的溶液，作為對(duì)氨基酚對(duì)照品溶液；精密量取氨酚曲馬多口腔崩解片供試品溶液1ml，對(duì)氨基酚對(duì)照品溶液1ml，置同一100ml量瓶中，加流動(dòng)相A(醋酸-醋酸鈉緩沖液(pH4.5)-甲醇(82∶18))稀釋至刻度，作為對(duì)照溶液。照高效液相色譜法，用BDS HYPERSIL C18色譜柱；以醋酸-醋酸鈉緩沖液(pH4.5)-甲醇(82∶18)為流動(dòng)相A，甲醇為流動(dòng)相B，按下表進(jìn)行梯度洗脫，檢測(cè)波長(zhǎng)為271nm；流速1.0ml/min。
梯度洗脫表

取對(duì)照溶液20μl注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測(cè)靈敏度，使對(duì)乙酰氨基酚的峰高為滿(mǎn)量程的20％～25％；再精密量取氨酚曲馬多口腔崩解片供試品溶液與對(duì)照溶液各20μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，氨酚曲馬多口腔崩解片供試品溶液的色譜圖中如有與對(duì)氨基酚保留時(shí)間一致的色譜峰，其面積不得大于對(duì)照溶液中相應(yīng)峰的峰面積(0.1％)，其他雜質(zhì)峰面積的和，不得大于對(duì)照溶液色譜圖中對(duì)乙酰氨基酚與鹽酸曲馬多峰面積之和(1.0％)。
測(cè)定結(jié)果理論板數(shù)按對(duì)乙酰氨基酚峰計(jì)大于4000，按鹽酸曲馬多峰計(jì)大于70000，對(duì)氨基酚、對(duì)乙酰氨基酚及鹽酸曲馬多峰與相鄰峰的分離度均符合規(guī)定。檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)圖1和圖2，圖1為對(duì)照溶液色譜圖，圖中1為對(duì)乙酰氨基酚，2為鹽酸曲馬多，3為對(duì)氨基酚；圖2為供試品溶液色譜圖，圖中4為對(duì)乙酰氨基酚，5為鹽酸曲馬多。
三批樣品有關(guān)物質(zhì)

三批樣品有關(guān)物質(zhì)均符合規(guī)定。
實(shí)施例2制劑2
325mg/37.5mg氨酚曲馬多片

有關(guān)物質(zhì)測(cè)定方法取氨酚曲馬多片10片，精密稱(chēng)定，研細(xì)，精密稱(chēng)取適量(約相當(dāng)于鹽酸曲馬多15mg)，置100ml量瓶中，加溶劑(水-甲醇(78∶22))超聲使溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液作為氨酚曲馬多片供試品溶液；精密量取氨酚曲馬多片供試品溶液1ml，置100ml量瓶中，加溶劑(水-甲醇(78∶22))稀釋至刻度，作為對(duì)照溶液(1)；另取對(duì)氨基酚對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加溶劑(水-甲醇(78∶22))制成每1ml中含1.3μg的溶液，作為對(duì)照溶液(2)。照高效液相色譜法，用BDS HYPERSIL C18色譜柱；以醋酸-醋酸鈉緩沖液(pH4.0)-甲醇(78∶22)為流動(dòng)相A，甲醇為流動(dòng)相B，按下表進(jìn)行梯度洗脫，檢測(cè)波長(zhǎng)為271nm；流速1.0ml/min。
梯度洗脫表

取對(duì)照溶液(1)100μl注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測(cè)靈敏度，使對(duì)乙酰氨基酚的峰高為滿(mǎn)量程的20％～25％；再精密量取氨酚曲馬多片供試品溶液與對(duì)照溶液(1)、(2)各100μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，氨酚曲馬多片供試品溶液的色譜圖中如有與對(duì)氨基酚保留時(shí)間一致的色譜峰，其面積不得大于對(duì)照溶液(2)中相應(yīng)峰的峰面積(0.1％)，其他雜質(zhì)峰面積的和，不得大于對(duì)照溶液(1)主峰面積之和(1.0％)。
測(cè)定結(jié)果理論板數(shù)按對(duì)乙酰氨基酚峰計(jì)大于4000，按鹽酸曲馬多峰計(jì)大于50000，對(duì)氨基酚、對(duì)乙酰氨基酚及鹽酸曲馬多峰與相鄰峰的分離度均符合規(guī)定。
三批樣品有關(guān)物質(zhì)

三批樣品有關(guān)物質(zhì)均符合規(guī)定。
實(shí)施例3
制劑同實(shí)施例2有關(guān)物質(zhì)測(cè)定方法取氨酚曲馬多片10片，精密稱(chēng)定，研細(xì)，精密稱(chēng)取適量(約相當(dāng)于鹽酸曲馬多75mg)，置100ml量瓶中，加溶劑(水)超聲使溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液作為氨酚曲馬多片供試品溶液；精密量取氨酚曲馬多片供試品溶液1ml，置100ml量瓶中，加溶劑(水)稀釋至刻度，作為對(duì)照溶液(1)；另取對(duì)氨基酚對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加溶劑(水)制成每1ml中含6.5μg的溶液，作為對(duì)照溶液(2)。照高效液相色譜法，用BDSHYPERSIL C18色譜柱；以醋酸-醋酸鈉緩沖液(pH5.0)-甲醇(86∶14)為流動(dòng)相A，甲醇為流動(dòng)相B，按下表進(jìn)行梯度洗脫，檢測(cè)波長(zhǎng)為271nm；流速1.0ml/min。
梯度洗脫表

取對(duì)照溶液(1)10μl注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測(cè)靈敏度，使對(duì)乙酰氨基酚的峰高為滿(mǎn)量程的20％～25％；再精密量取氨酚曲馬多片供試品溶液與對(duì)照溶液(1)、(2)各10μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，氨酚曲馬多片供試品溶液的色譜圖中如有與對(duì)氨基酚保留時(shí)間一致的色譜峰，其面積不得大于對(duì)照溶液(2)中相應(yīng)峰的峰面積(0.1％)，其他雜質(zhì)峰面積的和，不得大于對(duì)照溶液(1)主峰面積之和(1.0％)。
測(cè)定結(jié)果理論板數(shù)按對(duì)乙酰氨基酚峰計(jì)大于4000，按鹽酸曲馬多峰計(jì)大于50000，對(duì)氨基酚、對(duì)乙酰氨基酚及鹽酸曲馬多峰與相鄰峰的分離度均符合規(guī)定。
三批樣品有關(guān)物質(zhì)

三批樣品有關(guān)物質(zhì)均符合規(guī)定。
實(shí)施例4對(duì)氨基酚加樣回收試驗(yàn)制劑同實(shí)施例1精密稱(chēng)取對(duì)氨基酚適量，用流動(dòng)相A(醋酸-醋酸鈉緩沖液(pH4.5)-甲醇(82∶18))溶解，制成每1ml中約含對(duì)氨基酚32.5μg的溶液，作為對(duì)氨基酚母液(需臨用現(xiàn)配)，精密量取1ml，置10ml量瓶中，加流動(dòng)相A稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照溶液；另精密稱(chēng)取氨酚曲馬多口腔崩解片研細(xì)粉末適量(約相當(dāng)于對(duì)乙酰氨基酚325mg)置50ml量瓶中，加流動(dòng)相A(醋酸-醋酸鈉緩沖液(pH4.5)-甲醇(82∶18))超聲使溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)。平行兩份。精密量取續(xù)濾液5ml置10ml量瓶，每份供試品均量取四份，其中三份分別精密移入新配制的對(duì)氨基酚母液0.5ml、1.0ml、1.5ml，另一份為空白，加流動(dòng)相A(醋酸-醋酸鈉緩沖液(pH4.5)-甲醇(82∶18))稀釋至刻度，搖勻。分別量取上述八份溶液及對(duì)照溶液各20μl注入色譜儀(色譜條件同實(shí)施例1)，記錄色譜圖，計(jì)算加入對(duì)氨基酚的回收率。其結(jié)果見(jiàn)圖3，圖中6為對(duì)乙酰氨基酚，7為鹽酸曲馬多，8為對(duì)氨基酚。
對(duì)氨基酚加樣回收試驗(yàn)

對(duì)氨基酚的平均加樣回收率為99.60％，RSD為0.56％，證明該方法測(cè)定對(duì)氨基酚含量準(zhǔn)確度高。
實(shí)施例5破壞性試驗(yàn)制劑同實(shí)施例1取本品10片，精密稱(chēng)定，研細(xì)，精密稱(chēng)取細(xì)粉適量(約相當(dāng)于對(duì)乙酰氨基酚162.5mg)置50ml量瓶中，平行6份，其中一份作為未破壞對(duì)照，另五份分別照下述方法進(jìn)行熱、紫外光照、強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、強(qiáng)氧化破壞后，加流動(dòng)相(A)超聲使溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過(guò)，各取續(xù)濾液20μl注入色譜儀。色譜條件同實(shí)施例1。
(1)強(qiáng)酸破壞加入1N鹽酸使?jié)櫇?，?0℃下放置6小時(shí)。見(jiàn)圖4，9為對(duì)乙酰氨基酚，10為鹽酸曲馬多。
(2)強(qiáng)堿破壞加入1N氫氧化鈉使?jié)櫇?，?0℃下放置4小時(shí)。見(jiàn)圖5，11為對(duì)乙酰氨基酚，12為鹽酸曲馬多。
(3)強(qiáng)氧化破壞加入10％過(guò)氧化氫溶液使?jié)櫇?，?0℃下放置2小時(shí)。見(jiàn)圖6，13為對(duì)乙酰氨基酚，14為鹽酸曲馬多。
(4)紫外光照破壞置紫外燈下照射96小時(shí)。見(jiàn)圖7，15為對(duì)乙酰氨基酚，16為鹽酸曲馬多。
(5)熱破壞100℃下加熱4小時(shí)。見(jiàn)圖8，17為對(duì)乙酰氨基酚，18為鹽酸曲馬多。
比較破壞前后的色譜圖，結(jié)果表明本品在強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、強(qiáng)氧化、紫外光照以及熱條件下破壞，均會(huì)產(chǎn)生降解產(chǎn)物，主峰與各降解產(chǎn)物峰均分離良好，說(shuō)明該方法專(zhuān)屬性強(qiáng)，可較好地分離并檢測(cè)出鹽酸曲馬多/對(duì)乙酰氨基酚復(fù)方制劑的雜質(zhì)。
權(quán)利要求
1.一種對(duì)乙酰氨基酚和鹽酸曲馬多制劑中雜質(zhì)的測(cè)定方法，其特征在于，包括如下步驟取供試品細(xì)粉適量，精密稱(chēng)定，加溶劑溶解并稀釋制成每1ml中含鹽酸曲馬多0.15～0.75mg的溶液，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液作為供試品溶液；精密將供試品溶液加溶劑稀釋20～500倍，作為自身對(duì)照溶液；另取對(duì)氨基酚對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加溶劑制成濃度為1.3～6.5μg/ml的溶液，作為對(duì)氨基酚對(duì)照溶液；所說(shuō)的溶劑選自水、甲醇水溶液或流動(dòng)相A；甲醇水溶液中，水與甲醇的體積比為78∶22～86∶14；所說(shuō)的流動(dòng)相A為pH4～5的醋酸-醋酸鈉緩沖液與甲醇的混合物，醋酸-醋酸鈉緩沖液與甲醇的體積比為78∶22～86∶14；照高效液相色譜法，用十八烷基鍵合硅膠為填充劑；以pH為4～5的醋酸-醋酸鈉緩沖液與甲醇的混合物為流動(dòng)相A，甲醇為流動(dòng)相B，進(jìn)行梯度洗脫，檢測(cè)波長(zhǎng)為260～280nm；理論板數(shù)按對(duì)乙酰氨基酚峰和鹽酸曲馬多峰計(jì)算均應(yīng)不低于2000，對(duì)氨基酚、對(duì)乙酰氨基酚及鹽酸曲馬多峰與相鄰峰的分離度均應(yīng)符合要求；醋酸-醋酸鈉緩沖液與甲醇的混合物中，醋酸-醋酸鈉緩沖液與甲醇的體積比為醋酸-醋酸鈉緩沖液∶甲醇＝78∶22～86∶14；精密量取相同體積的供試品溶液與對(duì)照溶液，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，供試品溶液的色譜圖中如有與對(duì)氨基酚保留時(shí)間一致的色譜峰，按外標(biāo)法計(jì)算對(duì)氨基酚的含量，其他雜質(zhì)峰面積的和與自身對(duì)照溶液主峰面積之和相比，按自身對(duì)照法計(jì)算。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，按下表進(jìn)行梯度洗脫
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種對(duì)乙酰氨基酚和鹽酸曲馬多制劑中雜質(zhì)的測(cè)定方法。采用本發(fā)明的方法，可以簡(jiǎn)便快速和準(zhǔn)確的檢測(cè)制劑中的對(duì)氨基酚的含量，其檢測(cè)誤差僅為0.4％，同時(shí)可檢測(cè)出其它未知雜質(zhì)的總量，能夠滿(mǎn)足有關(guān)方面的需要。
文檔編號(hào)G01N30/34GK101025409SQ200610024109
公開(kāi)日2007年8月29日 申請(qǐng)日期2006年2月23日 優(yōu)先權(quán)日2006年2月23日
發(fā)明者張冬梅, 余偉民 申請(qǐng)人:信誼藥廠