專利名稱：惡性腫瘤電化學(xué)篩查與早期診斷儀的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種醫(yī)療診斷儀器，具體地說(shuō)是涉及一種腫瘤標(biāo)志物的免疫測(cè)定及快速電化學(xué)篩查與早期診斷儀。
背景技術(shù)：
免疫分析是利用抗原/抗體之間高特異性的反應(yīng)實(shí)現(xiàn)對(duì)抗體、抗原或相關(guān)物質(zhì)進(jìn)行檢測(cè)的一種高靈敏度、高選擇性的方法，它為血清腫瘤標(biāo)志物的臨床免疫測(cè)定提供了有力手段。通常血清腫瘤標(biāo)志物的臨床免疫測(cè)定方法大多采用“雙抗體夾心”法，如放射免疫分析法、酶標(biāo)法、時(shí)間分辨熒光法、化學(xué)發(fā)光和電化學(xué)發(fā)光法等。由于放射免疫分析法的放射性危害和試劑壽命的局限性，非放射性標(biāo)記的免疫分析方法相繼得到發(fā)展。這些方法極大地促進(jìn)了臨床免疫檢測(cè)項(xiàng)目的推陳出新和檢測(cè)手段的自動(dòng)化、智能化和網(wǎng)絡(luò)化。然而，這些方法需采用專用包被板(管)，檢測(cè)過程需要較長(zhǎng)時(shí)間的溫育、多次洗板和專用儀器檢測(cè)，檢測(cè)周期長(zhǎng)，操作步驟繁瑣，成本高。盡管已出現(xiàn)全自動(dòng)免疫分析儀，但可同時(shí)檢測(cè)標(biāo)志物的數(shù)目有限，儀器和試劑也相當(dāng)昂貴，難以推廣使用，因而在惡性腫瘤的早期診斷、預(yù)后監(jiān)測(cè)和大規(guī)模篩查方面的應(yīng)用受到限制。
近年來(lái)，隨著基因芯片和蛋白質(zhì)芯片的發(fā)展，免疫芯片得到人們的關(guān)注。已有公司推出利用化學(xué)發(fā)光和CCD方法結(jié)合能同時(shí)檢測(cè)13個(gè)腫瘤標(biāo)志物的儀器，但該儀器價(jià)格十分昂貴，在定量檢測(cè)方面也存在局限性，因而難以推廣。如何簡(jiǎn)化操作步驟，縮短分析時(shí)間，降低測(cè)定成本，發(fā)展新的免疫檢測(cè)技術(shù)，提高檢測(cè)手段的靈敏度、準(zhǔn)確性，研制高通量的多腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)儀以適應(yīng)對(duì)惡性腫瘤的大規(guī)模篩查、早期診斷和預(yù)后監(jiān)測(cè)的需要是亟待解決的問題。
電化學(xué)分析具有許多優(yōu)越性，如測(cè)試探頭可微型化，不受體系濁度和顏色影響，方法靈敏度高、速度快、花費(fèi)低、危害小等。它還具有檢測(cè)儀器簡(jiǎn)單、易于微型化的特點(diǎn)，且其中的安培檢測(cè)信號(hào)強(qiáng)度與待測(cè)物質(zhì)的濃度有線性關(guān)系，線性范圍寬、靈敏度高，因而在高通量多腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)方面具有潛力，2005年有可同時(shí)測(cè)定2種腫瘤標(biāo)志物的電化學(xué)免疫分析方法的報(bào)道，這些作者在2006年又進(jìn)一步提出了多標(biāo)志物同時(shí)電化學(xué)免疫分析的方法。這些方法有一定實(shí)用性，但因不能直觀地給出濃度值，也不能提供在芯片分析中普遍實(shí)用的圖像結(jié)果，更未突破腫瘤相關(guān)抗原特異性的缺陷，開發(fā)出檢測(cè)儀器，并推廣使用。
絲網(wǎng)印刷技術(shù)以其墨層厚覆蓋力強(qiáng)、適合各種類型的油墨、印刷方式靈活多樣、不受承印物大小和性狀的限制等特點(diǎn)已廣泛用于電化學(xué)傳感器制備方面，所獲得的一次性電極成本低，樣品和試劑的消耗量少，相互間重復(fù)性好，結(jié)果準(zhǔn)確、可靠，在25℃干燥條件下，傳感器能獲得很好的穩(wěn)定性。利用該技術(shù)和電化學(xué)分析方法，本發(fā)明提出了能同時(shí)快速測(cè)定多種腫瘤標(biāo)志物的多通道電化學(xué)檢測(cè)芯片，并根據(jù)惡性腫瘤篩查與早期診斷的需要，通過實(shí)驗(yàn)和臨床對(duì)照，設(shè)置閾值，將圖像結(jié)果與聯(lián)合診斷相結(jié)合，用該芯片進(jìn)一步研制惡性腫瘤電化學(xué)篩查與早期診斷儀。該儀器可將安培檢測(cè)信號(hào)轉(zhuǎn)變?yōu)橹庇^的圖像結(jié)果，以便于非專業(yè)人士使用。同時(shí)，可直觀地報(bào)道與病程相關(guān)的多種腫瘤標(biāo)志物的濃度值，以便進(jìn)行病程監(jiān)測(cè)。
該發(fā)明包括多通道電化學(xué)檢測(cè)芯片和多通道電化學(xué)檢測(cè)儀器，報(bào)告結(jié)果直觀，檢測(cè)成本低廉，自動(dòng)化程度高，與聯(lián)合診斷相結(jié)合克服了腫瘤相關(guān)抗原特異性的缺陷，可進(jìn)行惡性腫瘤的早期發(fā)現(xiàn)、早期診斷和病程監(jiān)測(cè)，實(shí)現(xiàn)檢測(cè)的普及化和家庭化，以提高癌癥防治資源的利用效率，對(duì)我國(guó)腫瘤防治事業(yè)的發(fā)展也非常有意義。

發(fā)明內(nèi)容
1.本發(fā)明目的是提供一種以電化學(xué)分析技術(shù)為基礎(chǔ)，可同時(shí)對(duì)多種腫瘤標(biāo)志物進(jìn)行測(cè)定的高通量免疫檢測(cè)方法、測(cè)定儀器和直觀顯示電化學(xué)結(jié)果的惡性腫瘤電化學(xué)篩查與早期診斷儀。
2.技術(shù)方案1)惡性腫瘤電化學(xué)篩查與早期診斷儀惡性腫瘤電化學(xué)篩查與早期診斷儀如圖1所示，由八通道免疫測(cè)定芯片(1)，時(shí)間分辨多通道恒電位儀(2)和數(shù)據(jù)處理與顯示系統(tǒng)(3)所組成；八通道免疫測(cè)定芯片(1)通過接口與時(shí)間分辨多通道恒電位儀(2)相連接，數(shù)據(jù)處理與顯示系統(tǒng)(3)通過接口也與時(shí)間分辨多通道很電位儀(2)相連接；2)八通道免疫測(cè)定芯片，包括分別固定不同腫瘤相關(guān)抗原的功能化膜和這些功能化膜修飾的八個(gè)工作電極(M1、M2、M3、M4、M5、M6、M7、M8)、Ag/AgCl參比電極(b)和碳對(duì)電極(c)，銀導(dǎo)線(a)、絕緣膜(d)，如圖2所示。該芯片(1)通過接口直接插時(shí)間分辨多通道恒電位儀(2)上進(jìn)行測(cè)量，并由數(shù)據(jù)處理與顯示系統(tǒng)(3)以圖像顏色顯示定性檢測(cè)結(jié)果。
3)惡性腫瘤電化學(xué)篩查與早期診斷儀的電化學(xué)檢測(cè)原理基于競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)模式，將樣品(抗原)和特定濃度的多種酶標(biāo)抗體溶液的混合液作為溫育液，利用免疫芯片上固定的不同抗原和樣品抗原競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)溫育液中相對(duì)應(yīng)的辣根過氧化物酶標(biāo)記的酶標(biāo)抗體，從而使辣根過氧化物酶固定在電極表面，催化H2O2與電子傳遞媒介體的反應(yīng)，通過催化電流的大小間接檢測(cè)待測(cè)抗原的含量。
4)這一過程通過研制的時(shí)間分辨多通道恒電位儀(圖1中第2個(gè)部件)實(shí)現(xiàn)。通常的恒電位儀一次操作只能檢測(cè)1個(gè)樣品，而已商品化的多通道恒電位儀包括多個(gè)恒電位系統(tǒng)，成本較高，而且同時(shí)檢測(cè)對(duì)象的數(shù)目直接取決于恒電位系統(tǒng)數(shù)，不利于提高實(shí)用性。本發(fā)明設(shè)計(jì)的時(shí)間分辨多通道恒電位儀，使用單個(gè)恒電位儀系統(tǒng)，通過設(shè)計(jì)控制系統(tǒng)，在較短時(shí)間內(nèi)改變檢測(cè)芯片上工作電極的順序，獲得“同時(shí)”獲得多個(gè)對(duì)象(多種腫瘤標(biāo)志物)含量的信息，并以峰形曲線圖像顯示將檢測(cè)到的樣品中的各種腫瘤標(biāo)志物含量的峰形曲線與其相應(yīng)的閾值相比，通過軟件處理后最后以圖像的形式顯示定性和定量結(jié)果，如圖3所示。
通常的恒電位儀顯示出圖3中峰形結(jié)果，通過自動(dòng)處理，可給出峰電流值，利用工作曲線，檢測(cè)者可獲得檢測(cè)對(duì)象的濃度。
5)數(shù)據(jù)處理與顯示系統(tǒng)本發(fā)明根據(jù)惡性腫瘤篩查與早期診斷的需要，通過實(shí)驗(yàn)和臨床對(duì)照，設(shè)置閾值，將多通道電化學(xué)檢測(cè)芯片得到的電化學(xué)免疫安培檢測(cè)信號(hào)進(jìn)行圖像顯示。將峰信號(hào)超過閾值15％的樣品設(shè)置為紅色(●)，表示陽(yáng)性；峰信號(hào)在閾值附近15％的樣品設(shè)置為中橙色 表示可疑；峰信號(hào)低于閾值15％的樣品設(shè)置為藍(lán)色(○)，表示陰性，并以圖像的形式顯示定性和定量結(jié)果(見圖3)。
6)進(jìn)一步將聯(lián)合診斷概念引入結(jié)果顯示，自動(dòng)分析多種腫瘤標(biāo)志物的檢測(cè)結(jié)果，提出篩查結(jié)果，進(jìn)行早期診斷。同時(shí)利用定量結(jié)果進(jìn)行病程監(jiān)測(cè)。提出的惡性腫瘤電化學(xué)篩查與早期診斷儀克服了腫瘤相關(guān)抗原特異性的缺陷，檢測(cè)成本低，可便于非專業(yè)人士使用。
3.有益效果1)本發(fā)明結(jié)合競(jìng)爭(zhēng)免疫分析方法，利用免疫芯片上固定的抗原和樣品抗原競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)溫育液中的辣根過氧化物酶標(biāo)記的酶標(biāo)抗體，從而使辣根過氧化物酶反應(yīng)到電極表面，從而催化H2O2與電子傳遞媒介體的反應(yīng)，通過催化電流的大小間接檢測(cè)待測(cè)抗原的含量。該方法無(wú)需專用儀器檢測(cè)，檢測(cè)周期短，操作步驟簡(jiǎn)單，易于自動(dòng)化、智能化，便于非專業(yè)人士使用。
2)本發(fā)明結(jié)合化學(xué)修飾、微加工和絲網(wǎng)印刷等技術(shù)發(fā)展了可批量制備的一次性多腫瘤標(biāo)志物同時(shí)快速測(cè)定的免疫芯片，不僅將樣品和試劑的耗量降至微升，縮短溫育時(shí)間，減少樣品消耗，且可以一次完成多種腫瘤標(biāo)志物的測(cè)定，降低測(cè)定成本，提高檢測(cè)速度和效率。
3)本發(fā)明提出了電化學(xué)檢測(cè)時(shí)間分辨的概念，研制出時(shí)間分辨多通道恒電位儀多通道恒電位儀，通過順序檢測(cè)，獲得芯片上不同檢測(cè)電極上樣品的信號(hào)，得到“同時(shí)”獲得多個(gè)對(duì)象(多種腫瘤標(biāo)志物)含量的信息。
4)電化學(xué)結(jié)果的圖像顯示。通過臨床對(duì)照，獲得相應(yīng)的閾值，利用閾值與信號(hào)對(duì)比，以圖像的形式顯示定性和定量結(jié)果。
5)本發(fā)明將聯(lián)合診斷概念引入結(jié)果顯示，將多通道電化學(xué)檢測(cè)芯片得到的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析處理，提出篩查結(jié)果，進(jìn)行早期診斷，突破腫瘤相關(guān)抗原特異性的缺陷。
該診斷儀成本低廉，可微型化，智能化，以推進(jìn)免疫檢測(cè)技術(shù)和惡性腫瘤早期診斷普及化和室外化，在大規(guī)模篩查和預(yù)后監(jiān)測(cè)方面具有廣闊的應(yīng)用前景。
四

圖1.惡性腫瘤電化學(xué)篩選與早期診斷儀結(jié)構(gòu)示意圖(1)-八通道免疫測(cè)定芯片，(2)-時(shí)間分辨多通道恒電位儀，(3)-數(shù)據(jù)處理與顯示系統(tǒng)圖2.八通道免疫測(cè)定芯片的結(jié)構(gòu)示意圖(a)-Ag導(dǎo)線，(b)-Ag/AgCl參比電極，(c)碳對(duì)電極，(d)-絕緣膜，M1、M2、M3、M4、M5、M6、M7、M8分別表示固定有不同抗原功能化膜的八個(gè)工作電極。
圖3.惡性腫瘤電化學(xué)篩選與早期診斷儀的分析檢測(cè)過程示意圖紅色●-陽(yáng)性(警告)、橙色 -可疑、藍(lán)色○陰性(排除)；C1、C2、C3、C4、C5、C6、C7、C8分別表示測(cè)得的八個(gè)腫瘤標(biāo)志物的濃度。
五具體實(shí)施例方式
1.八通道免疫測(cè)定芯片的制備利用絲網(wǎng)印刷技術(shù)在的PVC薄膜上印刷整合有Ag/AgCl參比電極、碳對(duì)電極和多個(gè)(8個(gè))碳工作電極的基片，電極的制作是先在PVC薄膜上印刷銀導(dǎo)電層，然后在參比電極的部位上印刷上Ag/AgCl漿形成Ag/AgCl參比電極(b)，在工作電極和碳對(duì)電極的部位上印刷上碳漿形成8個(gè)碳工作電極M1、M2、M3、M4、M5、M6、M7、M8和碳對(duì)電極(c)，最后印刷上綠油絕緣膜(d)。綠油絕緣膜(d)既可以保護(hù)銀導(dǎo)電層(a)，也可以控制反應(yīng)的體積。
2.抗原分子功能化膜的制備將殼聚糖粉末在1％的醋酸溶液中超聲溶解配制成1％的殼聚糖溶液，將一定濃度的標(biāo)準(zhǔn)待測(cè)腫瘤標(biāo)志物(抗原)溶液與該1％的殼聚糖溶液以一定比例混合均勻并在4℃下放置12小時(shí)，吸取1μL該混合溶液滴涂于工作電極表面，獲得包含固定不同腫瘤相關(guān)抗原分子功能化膜修飾的八個(gè)工作電極。
3.腫瘤標(biāo)志物的測(cè)定3.1測(cè)定原理該惡性腫瘤電化學(xué)篩查與早期診斷儀利用安培分析法，結(jié)合競(jìng)爭(zhēng)免疫分析方法，對(duì)腫瘤標(biāo)志物進(jìn)行快速免分離測(cè)定。當(dāng)溫育液中只存在適量辣根過氧化酶標(biāo)記腫瘤標(biāo)志物抗體(酶標(biāo)抗體)時(shí)，溫育后酶標(biāo)抗體與電極表面固定的抗原分子功能化膜上的抗原分子發(fā)生免疫反應(yīng)使其連接到電極表面。此時(shí)固定化的HRP能催化溶液中H2O2與電子傳遞媒介體反應(yīng)，從而可以在工作電極上獲得催化H2O2氧化的催化電流，并且該催化電流與溶液中待測(cè)抗原含量成反比。通過催化電流的響應(yīng)值可以間接獲得溶液中待測(cè)抗原的含量。
3.2測(cè)定過程(1)交叉干擾反應(yīng)實(shí)驗(yàn)。在本全自動(dòng)惡性腫瘤電化學(xué)篩查與早期診斷儀中用了八通道的免疫檢測(cè)芯片。為了防止各個(gè)電極之間可能發(fā)生的交叉干擾反應(yīng)，設(shè)計(jì)一系列工作電極間距離不同的免疫檢測(cè)芯片，選擇出在檢測(cè)中不產(chǎn)生交叉干擾的最小電極間距。
(2)免疫測(cè)定條件的優(yōu)化，包括溫育時(shí)間、溫育溫度、pH值、測(cè)定溶液中H2O2和電子傳遞媒介體的濃度和反應(yīng)溶液中酶標(biāo)抗體的量。
(3)配制一系列含不同濃度的待測(cè)抗原標(biāo)準(zhǔn)溶液和固定量酶標(biāo)記抗體的溫育液，在最佳測(cè)定條件下，分別測(cè)定出標(biāo)記酶催化H2O2與電子傳遞媒介體的反應(yīng)的催化電流，得到該待測(cè)抗原的測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線。
(4)在最佳測(cè)定條件下，溫育含待測(cè)抗原和固定量酶標(biāo)記抗體，測(cè)定標(biāo)記酶催化H2O2與電子傳遞媒介體反應(yīng)的催化電流，在該抗原測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出相應(yīng)的濃度。
(5)把測(cè)得的實(shí)際樣品中的腫瘤標(biāo)志物的濃度與其相應(yīng)的閾值相比較，設(shè)計(jì)處理軟件，將峰信號(hào)超過閾值15％的樣品設(shè)置為紅色(●)，表示陽(yáng)性；峰信號(hào)在閾值附近15％的樣品設(shè)置為橙色 表示可疑；峰信號(hào)低于閾值15％的樣品設(shè)置為藍(lán)色(○)，表示陰性，以圖像的形式顯示定性和定量結(jié)果。
(6)將催化電流信號(hào)和閾值信號(hào)對(duì)比，以圖像顏色顯示定性檢測(cè)結(jié)果。
(7)將聯(lián)合診斷概念引入結(jié)果顯示，將多通道電化學(xué)檢測(cè)芯片得到的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析處理，提出篩查結(jié)果。
3.3具體實(shí)施例以癌胚抗原(CEA)、甲胎蛋白(AFP)、卵巢癌相關(guān)抗原(CA125)、乳腺癌相關(guān)抗原(CA153)、胰胃腸癌標(biāo)志物(CA199)、癌癥標(biāo)志物(CA50)、消化系統(tǒng)癌癥標(biāo)志物(CA242)、前列腺癌特異抗原(PSA)為例說(shuō)明惡性腫瘤電化學(xué)篩查與早期診斷儀的應(yīng)用。
1)惡性腫瘤電化學(xué)篩查與早期診斷儀的檢測(cè)芯片的制備將殼聚糖粉末在1％的醋酸溶液中超聲溶解配制成1％的殼聚糖溶液。CEA、AFP、CA125、CA153、CA199、CA50、CA242、PSA標(biāo)準(zhǔn)溶液分別與該1％的殼聚糖溶液以1∶1(V∶V)混合均勻并在4℃下放置12小時(shí)。上述混合溶液各取1μL分別滴涂于八個(gè)工作電極表面，室溫下干燥5-6小時(shí)。4℃干燥的情況下保存待用。
2)CEA、AFP、CA125、CA153、CA199、CA50、CA242、PSA的測(cè)定(1)測(cè)定條件的優(yōu)化分別改變溫育時(shí)間、溫育溫度、pH值、測(cè)定溶液中H2O2和硫堇的濃度以及反應(yīng)溶液中各種酶標(biāo)抗體的量，選擇最大電流響應(yīng)時(shí)相應(yīng)的量作為最佳測(cè)定條件。
(2)CEA、AFP、CA125、CA153、CA199、CA50、CA242、PSA的測(cè)定在優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)條件下，分別將一系列標(biāo)準(zhǔn)CEA、AFP、CA125、CA153、CA199、CA50、CA242、PSA抗原和固定量酶標(biāo)抗體的溫育液，加入全自動(dòng)惡性腫瘤電化學(xué)篩查與早期診斷儀的免疫檢測(cè)芯片中進(jìn)行溫育，溫育完后測(cè)定標(biāo)記HRP催化氧化H2O2的催化電流，分別獲得CEA、AFP、CA125、CA153、CA199、CA50、CA242、PSA測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)曲線，從而測(cè)定樣品中CEA、AFP、CA125、CA153、CA199、CA50、CA242、PSA各種抗原的濃度。
(3)把測(cè)定的樣品中的CEA、AFP、CA125、CA153、CA199、CA50、CA242、PSA抗原的濃度分別與它們各自的閾值相比，通過軟件處理，直接將檢測(cè)信號(hào)轉(zhuǎn)換為濃度值和篩查結(jié)果顯示。
(4)分析不同腫瘤標(biāo)志物的濃度，利用聯(lián)合診斷提出篩查結(jié)果。
權(quán)利要求
1.一種惡性腫瘤電化學(xué)篩查與早期診斷儀，其特征是它由八通道免疫測(cè)定芯片(1)，時(shí)間分辨多通道恒電位儀(2)和數(shù)據(jù)處理與顯示系統(tǒng)(3)所組成；八通道免疫測(cè)定芯片(1)通過接口與時(shí)間分辨多通道恒電位儀(2)相連接，時(shí)間分辨多通道恒電位儀(2)通過接口與數(shù)據(jù)處理與顯示系統(tǒng)(3)相連接；八通道免疫測(cè)定芯片(1)，包括分別固定不同腫瘤相關(guān)抗原的功能化膜修飾的八個(gè)工作電極(M1、M2、M3、M4、M5、M6、M7、M8)、Ag/AgCl參比電極(b)和碳對(duì)電極(c)，銀導(dǎo)線(a)、絕緣膜(d)，該芯片(1)通過接口直接插入時(shí)間分辨多通道恒電位儀(2)上進(jìn)行測(cè)量，并由數(shù)據(jù)處理與顯示系統(tǒng)(3)以圖像顏色顯示定性檢測(cè)結(jié)果。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的惡性腫瘤電化學(xué)篩查與早期診斷儀，其特征在于所述的時(shí)間分辨多通道恒電位儀(2)，使用單個(gè)恒電位儀系統(tǒng)，通過設(shè)計(jì)控制系統(tǒng)，在較短時(shí)間內(nèi)改變測(cè)定芯片(1)上工作電極的順序，獲得“同時(shí)”獲得多個(gè)對(duì)象(多種腫瘤標(biāo)志物)含量的信息。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的惡性腫瘤電化學(xué)篩查與早期診斷儀，其特征在于所述的八通道免疫測(cè)定芯片(1)是在PVC薄膜上印刷銀導(dǎo)電層，然后在參比電極部位上印刷上Ag/AgCl漿形成Ag/AgCl參比電極(b)，再在工作電極和碳對(duì)電極位置上印刷上碳漿形成8個(gè)碳工作電極M1、M2、M3、M4、M5、M6、M7、M8和碳對(duì)電極(c)、最后印刷上綠油絕緣膜(d)。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的惡性腫瘤電化學(xué)篩查與早期診斷儀，其特征在于所述的數(shù)據(jù)處理與顯示系統(tǒng)(3)將測(cè)量的實(shí)際樣品中的腫瘤標(biāo)志物的濃度與其相應(yīng)的閾值相比較，設(shè)計(jì)處理軟件，將峰信號(hào)超過閾值15％的樣品設(shè)置為紅色(●)，表示陽(yáng)性；峰信號(hào)在閾值附近15％的樣品設(shè)置為橙色( )，表示可疑；峰信號(hào)低于閾值15％的樣品設(shè)置為藍(lán)色(○)，表示陰性，并可獲得定量結(jié)果。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的惡性腫瘤電化學(xué)篩查與早期診斷儀，其特征在于所述的功能膜修飾的工作電極是將殼聚糖粉沫在1％的醋酸溶液中超聲溶解配制成1％的殼聚糖溶液，將標(biāo)準(zhǔn)待測(cè)腫瘤標(biāo)志物即抗原溶液與1％的殼聚糖溶液以1∶1(V/V)混合均勻在4℃下放置12小時(shí)，吸1μL該混合液滴涂于工作電極表面，獲得包含固定不同腫瘤相關(guān)抗原分子功能化膜修飾的八個(gè)工作電極。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種惡性腫瘤電化學(xué)篩查與早期診斷儀，該儀器的免疫測(cè)定芯片(1)通過接口與時(shí)間分辨多通道恒電位儀(2)相連接，時(shí)間分辨多通道恒電位儀(2)通過接口和數(shù)據(jù)處理與顯示系統(tǒng)(3)相連接；其中免疫測(cè)定芯片(1)包括固定有不同抗原分子功能化膜的八個(gè)工作電極和Ag導(dǎo)線(a)、Ag/AgCl參比電極(b)、碳對(duì)電極(c)、絕緣膜(d)；利用電極表面固定的抗原分子與樣品中的抗原分子競(jìng)爭(zhēng)溫育溶液中的酶標(biāo)抗體，使部分酶標(biāo)抗體連接到電極表面，獲得催化電流，間接獲得溶液中待測(cè)的8種抗原的含量；通過軟件處理，以直觀易讀的圖像顏色，顯示測(cè)定結(jié)果。本診斷儀成本低，智能化，檢測(cè)快，在腫瘤的篩查和監(jiān)測(cè)方面具有廣闊的應(yīng)用前景。
文檔編號(hào)G01N27/416GK1866018SQ20061004005
公開日2006年11月22日 申請(qǐng)日期2006年4月30日 優(yōu)先權(quán)日2006年4月30日
發(fā)明者鞠熀先 申請(qǐng)人:南京大學(xué)