專利名稱：一種檢測喹乙醇的酶聯(lián)免疫試劑盒的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及酶聯(lián)免疫和獸藥殘留檢測領(lǐng)域。具體而言，本發(fā)明涉及一種用于檢測喹乙醇的酶聯(lián)免疫試劑盒。
背景技術(shù)：
喹乙醇(Olaquindox)，又名快育靈、倍育諾(Bayonox)、奧拉金、喹酰胺醇、Fedan。分子式C-(12)H-(13)N-3甲酸甲酯-3-O-4。由2-甲基喹噁啉-1、4-二氧化物與乙醇胺縮合而成的淡黃色結(jié)晶性粉末，微溶于水。
喹乙醇抗菌效力好，促進(jìn)生長發(fā)育，增加瘦肉率，價(jià)格便宜。因此曾經(jīng)被作為抗菌促生長作用的飼料添加劑大量使用。
然而，喹乙醇在被大量使用后，人們也發(fā)現(xiàn)了許多問題，如雞等禽類對(duì)喹乙醇敏感。人們對(duì)使用喹乙醇添加劑的雞進(jìn)行病理解剖時(shí)，發(fā)現(xiàn)雞的臟器有藥物致?lián)p的現(xiàn)象。喹乙醇在動(dòng)物體內(nèi)的殘留時(shí)間長，蓄積毒性大，不僅能使動(dòng)物中毒或死亡，而且殘留在肉中對(duì)人體也有較大危害。由于喹乙醇是由2-甲酸甲酯-3-甲基喹噁啉-1、4-二氧化物與乙醇胺縮合而成的，有人認(rèn)為喹乙醇在動(dòng)物體內(nèi)代謝后會(huì)生成甲基喹噁啉-1、4-二氧化物，這種物質(zhì)能抑制脫氧核糖核酸的合成，對(duì)染色體畸變有影響，是一種致癌物。
鑒于喹乙醇的毒性和存在的潛在危害，因而人們重新對(duì)喹乙醇的安全性進(jìn)行評(píng)價(jià)，對(duì)喹乙醇的使用也做出了新的規(guī)定。美國沒有批準(zhǔn)使用；歐盟也從1999年開起始全面禁止使用喹乙醇；我國對(duì)喹乙醇使用的限制也更加嚴(yán)格。我國農(nóng)業(yè)部頒布的《動(dòng)物性食品獸藥最高殘留限量》中也列入了喹乙醇。國家進(jìn)出口檢驗(yàn)檢疫局制定了肉中喹乙醇?xì)埩袅康臋z驗(yàn)方法《中華人民共和國進(jìn)出口商品檢驗(yàn)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)——出口肉中喹乙飼料添加劑質(zhì)量監(jiān)督檢測實(shí)施細(xì)則》也把雞飼料、飲水及魚飼料中的喹乙醇作為違禁藥物進(jìn)行監(jiān)督檢驗(yàn)。
現(xiàn)有的喹乙醇檢測方法多為色譜法，但是這些方法的靈敏度受樣品的凈化、濃縮等步驟的影響較大；再者這些方法需要復(fù)雜的儀器，且過程繁瑣，不適應(yīng)現(xiàn)場大量樣本的篩查?；诳乖贵w免疫反應(yīng)的免疫學(xué)檢測技術(shù)為小分子殘留物的分析檢測提供了一個(gè)新的途徑。該技術(shù)研究的關(guān)鍵是半抗原分子的設(shè)計(jì)、合成和人工全抗原及抗體的制備。
因?yàn)猷掖际切》肿踊衔?，本身沒有免疫原性，必須將其與大分子載體蛋白偶聯(lián)得到具有免疫原性的人工抗原。喹乙醇人工抗原和特異性抗體以及在此基礎(chǔ)上建立免疫分析方法尚未見報(bào)道。并且本發(fā)明首次用固體光氣作為連接劑用于制備喹乙醇的人工抗原。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種快速檢測喹乙醇的酶聯(lián)免疫試劑盒。
本發(fā)明提供了一種快速檢測喹乙醇的酶聯(lián)免疫試劑盒，該試劑盒包括喹乙醇特異性抗體、喹乙醇-載體蛋白偶聯(lián)物和酶標(biāo)二抗。其中喹乙醇特異性抗體為兔抗喹乙醇的多克隆抗體，可用喹乙醇與載體蛋白偶聯(lián)物作為免疫原通過免疫動(dòng)物(例如兔)制得。所述的載體蛋白為牛血清白蛋白、人血清白蛋白、卵清蛋白或鑰孔銅蘭蛋白(KLH)。所述的喹乙醇-載體蛋白偶聯(lián)物采用化學(xué)方法偶聯(lián)得到。所述酶標(biāo)二抗的標(biāo)記酶為辣根過氧化物酶，所述酶標(biāo)二抗可以用商品化的辣根過氧化物酶酶標(biāo)二抗，也可以通過過碘酸鈉法或戊二醛法將辣根過氧化物酶與二抗偶聯(lián)制得。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，所述酶標(biāo)二抗為羊抗兔IgG抗體。
用于制備所述酶標(biāo)板的固相材料，包括但不限于，例如，聚苯乙烯、聚乙烯、聚丙烯。載體的形式是微量反應(yīng)板凹孔。
為方便現(xiàn)場檢測和大量樣本篩查，所述試劑盒還可以進(jìn)一步包括喹乙醇抗原或抗喹乙醇特異性抗體的酶標(biāo)板、喹乙醇標(biāo)準(zhǔn)溶液、底物顯色劑、洗滌液、終止液和濃縮樣品稀釋液。
所述的洗滌液為0.05％-0.5％吐溫-20磷酸鹽緩沖液。所述的顯色劑由顯色劑A液和顯色劑B液組成(例如，體積比為1∶1)，顯色劑A液為過氧化氫或過氧化脲，顯色劑B液為四甲基聯(lián)苯胺或鄰苯二胺或四甲基聯(lián)苯胺。所述的濃縮樣品稀釋液為含0.1％吐溫-20的磷酸鹽緩沖液。
另一方面，本發(fā)明還提供了一種檢測樣品中喹乙醇含量的方法，包括步驟(1)樣品前處理；(2)用權(quán)利要求1-9任一所述的試劑盒進(jìn)行檢測，向包被有喹乙醇抗原的酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品溶液，再加入抗喹乙醇多克隆抗體，孵育后洗滌拍干，加入酶標(biāo)記二抗，孵育后洗滌拍干，顯色、終上，用酶標(biāo)儀測定吸光度值；(3)分析檢測結(jié)果。
本發(fā)明試劑盒的檢測原理為將喹乙醇抗原吸附于固相載體上，加入樣本或喹乙醇標(biāo)準(zhǔn)品溶液并加入喹乙醇抗體工作液，待測樣品中喹乙醇和固相載體上包被的喹乙醇抗原競爭喹乙醇抗體，再加入酶標(biāo)記抗抗體進(jìn)行酶活性的放大作用，顯色后終止，測定樣品的吸光度值，該值與樣品中喹乙醇的量呈負(fù)相關(guān)，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出喹乙醇濃度范圍。
有益效果本發(fā)明檢測喹乙醇的試劑盒主要采用間接競爭酶聯(lián)免疫測定法定性或定量樣品中喹乙醇含量；對(duì)樣品的前處理要求低，樣品前處理過程簡單，能同時(shí)快速檢測大批樣品。
本發(fā)明該試劑盒采用高特異性的喹乙醇多克隆抗體，主要試劑以工作液形式提供，可以減少試劑盒的操作步驟，為使用者節(jié)省時(shí)間并降低因操作步驟冗繁造成的誤差，本發(fā)明具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、高精確度、高準(zhǔn)確度、對(duì)儀器設(shè)備要求低、試劑保存時(shí)間長、自動(dòng)化程度高、無放射性同位素污染的等優(yōu)點(diǎn)，可在飼料及動(dòng)物源性產(chǎn)品檢測中發(fā)揮重要作用。


圖1為喹乙醇酶聯(lián)免疫檢測試劑盒結(jié)構(gòu)圖。其中1為試劑盒盒體，2為包被了喹乙醇抗原或抗喹乙醇特異性抗體的酶標(biāo)板，3為系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，4為顯色劑A，5為顯色劑B，6為抗體溶液，7為酶標(biāo)二抗溶液，8為酶標(biāo)二抗稀釋液，9為濃縮洗滌液，10為濃縮樣品稀釋液，11為試劑瓶架。
圖2為喹乙醇抑制曲線。
提供下述實(shí)施例是為了更好地進(jìn)一步理解本發(fā)明，而決不對(duì)本發(fā)明的內(nèi)容和保護(hù)范圍構(gòu)成任何限制。
實(shí)施例2實(shí)施例1 免疫原的合成及免疫血清的制備1.1試劑與儀器喹乙醇(湖北中牧安達(dá)藥業(yè)有限公司生產(chǎn))，固體光氣(BTC)(購自北京耀北生物技術(shù)有限公司)，吡啶(Pyridine，AR.WM＝79.10，含量＞99.5％，天津市科密歐化學(xué)試劑開發(fā)中心)，N，N-二甲基甲酰胺(Dimethylformamide，DMF，美國新澤西州ACROSORGANICS公司生產(chǎn)，購自百靈威化學(xué)試劑公司)，正三丁胺(Tributylamine，美國新澤西州ACROSORGANICS公司生產(chǎn)，購自百靈威化學(xué)試劑公司)，牛血清白蛋白(BSA)，二氯甲烷(北京世紀(jì)紅星化工有限責(zé)任公司生產(chǎn))
雙光束紫外可見分光光度儀(TU-1909，北京普析通用儀器有限公司)，層析裝置(3057型便攜式記錄儀，重慶川儀四廠；SBS系列數(shù)控計(jì)滴器，恒流泵，自動(dòng)部分收集器，層析柱，上海滬西分析儀器廠)，磁力攪拌器(上海東榮豐科學(xué)儀器有限公司)，臺(tái)式離心機(jī)(Minispin最大轉(zhuǎn)速13400rpm最大離心力12100rcf，2ml×12)，1.2喹乙醇人工抗原的合成稱取26.3mg喹乙醇溶于3ml的吡啶和N，N-二甲基甲酰胺(DMF)混合(1∶1)溶液中，稱取固體光氣(BTC)9.9mg溶于1ml二氯甲烷中。
將上述喹乙醇和固體光氣兩溶液混合。具體方法為在冰浴條件下先將少許BTC溶液滴加入喹乙醇溶液中，反應(yīng)幾分鐘后將剩余的BTC溶液全部加入，轉(zhuǎn)入室溫?cái)嚢璺磻?yīng)1小時(shí)，得到混合溶液A。
稱取50mg載體蛋白BSA或KLH分別溶于0.1mol/L pH8.4的5ml硼酸鈉緩沖液中，向其中加入1ml DMF得到載體蛋白溶液B。
將溶液A逐滴加于載體蛋白溶液B中，緩慢滴加，半小時(shí)內(nèi)加完，室溫下反應(yīng)4小時(shí)。
然后，將偶聯(lián)物過SephadexG-25M凝膠層析純化，用0.01M pH7.4 PBS三倍柱床體積平衡，調(diào)節(jié)流速至3ml/min，樣品濃縮至5ml加入到平衡好的層析柱中層析提純偶聯(lián)物，洗脫液用pH7.4 0.01M PBS。
通過紫外線掃描鑒定偶聯(lián)物。具體操作為將喹乙醇溶于PBS(0.01M pH7.4)，濃度為15μg/ml；BSA溶于PBS(0.01M pH7.4)，濃度為1.03mg/ml；將純化后的偶聯(lián)物同樣用PBS(0.01M pH7.4)作適當(dāng)稀釋，使其濃度與BSA濃度接近。將這三種溶液在200nm-400nm之間進(jìn)行紫外掃描，得出各物質(zhì)的紫外掃描波譜，如圖1-3所示。從圖1-3中可以看出喹乙醇與載體蛋白BSA偶聯(lián)成功。
免疫及特異性抗體的制備將上述喹乙醇-BSA偶聯(lián)物用生理鹽水稀釋成1mg/ml溶液備用。
選取6只體重2～2.5Kg健康雄性新西蘭大白兔。將偶聯(lián)物與等量弗氏完全佐劑通過注射器對(duì)抽法混合成油包水的乳濁液，按1mg/Kg體重的量進(jìn)行首次免疫，采取背部皮下多點(diǎn)注射。每隔兩周加強(qiáng)免疫一次，用弗氏不完全佐劑代替弗氏完全佐劑，劑量及方法同首次免疫。從第三次免疫開始，每次免疫后10天，耳緣靜脈取血1ml，進(jìn)行抗體效價(jià)檢測，當(dāng)抗體效價(jià)不再升高時(shí)，不加佐劑進(jìn)行最后一次(第7次)免疫，大腿肌肉注射，7天后頸動(dòng)脈放血，室溫凝固2h后4℃過夜，8000r/min離心10分鐘，除去血塊，血清部分用50％飽和硫酸銨溶液沉淀，離心去上清液，沉淀用磷酸鹽緩沖液重懸，再用33％飽和硫酸銨溶液沉淀兩次，沉淀物用盡可能少的磷酸緩沖液溶解，經(jīng)透析后用SephadexG-25M層析，即得多克隆抗體。
實(shí)施例2 免疫檢測方法的建立2.1 ELISA方法確定最佳包被濃度將1000μg/ml、100μg/ml、10μg/ml、5μg/ml、1μg/ml、0.25μg/ml系列濃度的卵清蛋白(OVA)-喹乙醇偶聯(lián)物按每孔100μl包被酶標(biāo)板，4℃包被24h，洗滌5次，拍干，按每孔200μl封閉液4℃下封閉12h，洗滌3次，拍干。加入1∶500稀釋的抗血清100μl，室溫作用2h，洗滌三次，立即加入100μl酶標(biāo)羊抗兔抗體，室溫作用30min，洗滌三次，加100μl底物液，室溫避光作用15min，50μl終止液終止反應(yīng)，酶標(biāo)儀檢測A值(450nm)。同時(shí)設(shè)置空白對(duì)照孔(不加抗血清，只加其稀釋液)和平行重復(fù)孔，取OD值為1.0左右時(shí)的包被濃度為最佳濃度。試驗(yàn)數(shù)據(jù)列于表3。
表1 不同包被濃度的OD值

由表3的數(shù)據(jù)中可以確定，最佳包被濃度為1μg/ml。
2.2間接ELISA檢測抗體效價(jià)以1μg/ml濃度包被酶標(biāo)板，從400倍開始倍比稀釋抗血清，按2.1的ELISA步驟操作。以兩倍于陰性血清OD值的抗血清OD值對(duì)應(yīng)的抗血清稀釋度為抗血清效價(jià)?？寡逍r(jià)檢測結(jié)果見表4。
表2 抗血清效價(jià)檢測結(jié)果

從表4的數(shù)據(jù)可以確定本發(fā)明制備的抗血清的效價(jià)在6000以上。
2.3間接競爭ELISA檢測抗體特異性ELISA操作方法同2.1。不同的是每孔加入50μl不同濃度的游離喹乙醇與卵清蛋白(OVA)-喹乙醇偶聯(lián)物競爭抗體，隨后加入抗血清，得出不同的OD值。根據(jù)2.1的結(jié)果，所用抗血清最佳濃度為1∶500。喹乙醇系列濃度和試驗(yàn)孔的排列順序見表3，同時(shí)設(shè)置平行重復(fù)孔和空白對(duì)照孔。以0抑制孔的OD值為最大值B0，其它抑制濃度孔OD值為B，B/B0＝50％時(shí)對(duì)應(yīng)的喹乙醇濃度為此抗體的IC50值?？贵w的特異性檢測結(jié)果的數(shù)據(jù)列于表3。然后，用所得數(shù)據(jù)繪制出喹乙醇抑制曲線(圖2)。
表3 抗血清特異性檢測結(jié)果

由表3中數(shù)據(jù)可知，喹乙醇抗血清IC50值在5ng/ml左右，表明本發(fā)明制備的抗血清是具有良好的特異性的抗喹乙醇多克隆抗體。
實(shí)施例3 檢測喹乙醇的酶聯(lián)免疫試劑盒的組建組建檢測喹乙醇的酶聯(lián)免疫試劑盒，使其包含下述組分(1)包被喹乙醇抗原的酶標(biāo)板；(2)蛋白濃度為1mg/L的抗喹乙醇多克隆抗體；(3)用辣根過氧化物酶標(biāo)記的羊抗兔抗抗體；(4)喹乙醇標(biāo)準(zhǔn)品溶液6瓶，濃度分別為0μg/L、0.5μg/L、1.5μg/L、4.5μg/L、13.5μg/L、40.5μg/L；(5)底物顯色液A液為過氧化脲，底物顯色液B液為四甲基聯(lián)苯胺；(6)洗滌液為含0.05％吐溫20的磷酸鹽緩沖液；(7)濃縮樣品稀釋液為0.1％吐溫-20的磷酸鹽緩沖液；(8)終止液為2mol/L的鹽酸溶液。
實(shí)施例3 檢測喹乙醇的酶聯(lián)免疫試劑盒的組建組建檢測喹乙醇的酶聯(lián)免疫試劑盒，使其包含下述組分(1)包被羊抗兔抗抗體的酶標(biāo)板；(2)蛋白濃度為5mg/L的抗喹乙醇多克隆抗體；(3)用辣根過氧化物酶標(biāo)記的喹乙醇；(4)喹乙醇標(biāo)準(zhǔn)品溶液6瓶，濃度分別為0μg/L、0.5μg/L、1.5μg/L、4.5μg/L、13.5μg/L、40.5μg/L；(5)底物顯色液A液為過氧化脲，底物顯色液B液為鄰苯二胺；
[6)洗滌液為0.5％吐溫-20磷酸鹽緩沖液；(7)濃縮樣品稀釋液為0.1％吐溫-20的磷酸鹽緩沖液；(8)終止液為2mol/L的鹽酸溶液。
實(shí)施例4 樣品中莢克多巴胺殘留的檢測1、樣品前處理準(zhǔn)確稱取5g飼料于40ml離心管中。加入20ml樣品稀釋液(0.01％吐溫-20的磷酸鹽緩沖液)，加熱至60℃，充分振蕩10分鐘，4000rpm離心10min，取上清5ml。
2、用試劑盒進(jìn)行檢測向喹乙醇-OVA偶聯(lián)物包被的酶標(biāo)板微孔中加系列標(biāo)準(zhǔn)品或樣品溶液50μl，再加入抗體工作液(1mg/L的抗喹乙醇多克隆抗體)50μl，室溫反應(yīng)1小時(shí)。倒出孔中液體，每孔加入250μl經(jīng)10倍稀釋了的洗滌液，30秒后倒出孔中液體，如此重復(fù)操作共洗板3次，用吸水紙拍干。每孔加入酶標(biāo)記抗抗體100μl，避光室溫孵育30min。底物顯色液A液(過氧化脲)50μl，再加B液(四甲基聯(lián)苯胺)50μl，輕輕振蕩混勻，室溫避光顯色15min，每孔加入終止液(2mol/L鹽酸)50μl，輕輕振蕩混勻，用酶標(biāo)儀測定每孔吸光度值(OD值)。
結(jié)果分析計(jì)算百分吸光度值并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，相對(duì)應(yīng)每一個(gè)樣品中喹乙醇的濃度可以從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出，也可以用回歸方程法計(jì)算出在樣本中喹乙醇的含量。利用專業(yè)電腦軟件更便于大量的樣本的快速分析。根據(jù)酶標(biāo)板上的樣本顏色的深淺與系列濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液顏色的比較，可以判斷出樣本中喹乙醇的濃度范圍。
實(shí)驗(yàn)例1 試劑盒精密度試驗(yàn)本實(shí)驗(yàn)例為標(biāo)準(zhǔn)可重復(fù)性試驗(yàn)。具體操作為從每批實(shí)施例2或3中的方法制備的酶標(biāo)板中，各抽取10個(gè)孔，測定4.5μg/L的標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度值(OD)，重復(fù)3次，計(jì)算變異系數(shù)CV％。
結(jié)果表明變異系數(shù)范圍在4.8-7.6％之間，符合了變異系數(shù)小于20％的規(guī)定，說明本試劑盒標(biāo)準(zhǔn)品精密度達(dá)到了要求。
實(shí)驗(yàn)例2 試劑盒的回收率試驗(yàn)取兩個(gè)濃度的喹乙醇標(biāo)樣，對(duì)樣品進(jìn)行添加回收試驗(yàn)，每個(gè)濃度做4個(gè)平行，分別計(jì)算回收率。結(jié)果表明飼料中的添加回收率為60％-85％。
實(shí)驗(yàn)例3 試劑盒保存期試驗(yàn)試劑盒保存條件為2-8℃，經(jīng)過6個(gè)月的測定，試劑盒的最大吸光度值(零添加)、50％抑制濃度、喹乙醇添加實(shí)際測定值均在正常范圍之內(nèi)。考慮在運(yùn)輸和使用過程中，會(huì)有非正常保存條件出現(xiàn)，將試劑盒在37℃保存條件下放置6天，進(jìn)行加速老化實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明該試劑盒各項(xiàng)指標(biāo)完全符合要求?？紤]到試劑盒冷凍情況發(fā)生，將試劑盒放入-20℃冰箱冷凍5天，測定結(jié)果也表明試劑盒各項(xiàng)指標(biāo)完全正常。從以上結(jié)果可得出試劑盒可以在2-8℃保存6個(gè)月以上。
權(quán)利要求
1.一種檢測喹乙醇的酶聯(lián)免疫試劑盒，其中包括喹乙醇特異性抗體、喹乙醇-載體蛋白偶聯(lián)物和酶標(biāo)二抗。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的酶聯(lián)免疫試劑盒，其特征在于所述試劑盒還包括包被了喹乙醇抗原或抗喹乙醇特異性抗體的酶標(biāo)板、喹乙醇標(biāo)準(zhǔn)溶液、底物顯色劑、洗滌液、終止液和濃縮樣品稀釋液。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的酶聯(lián)免疫試劑盒，其特征在于所述喹乙醇特異性抗體為多克隆抗體。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的酶聯(lián)免疫試劑盒，其特征在于所述的載體蛋白為牛血清白蛋白、卵清蛋白或鑰孔銅蘭蛋白(KLH)。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的酶聯(lián)免疫試劑盒，其特征在于所述的酶標(biāo)二抗的酶為辣根過氧化物酶。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的酶聯(lián)免疫試劑盒，其特征在于所述的酶標(biāo)二抗為羊抗兔IgG抗體。
7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的酶聯(lián)免疫試劑盒，其特征在于所述的洗滌液為含有0.05％-0.5％吐溫-20磷酸鹽緩沖液。
8.根據(jù)權(quán)利要求2所述的酶聯(lián)免疫試劑盒，其特征在于所述的顯色劑由顯色劑A和顯色劑B組成，顯色劑A為過氧化氫或過氧化脲，顯色劑B為鄰苯二胺或四甲基聯(lián)苯胺。
9.根據(jù)權(quán)利要求2所述的酶聯(lián)免疫試劑盒，其特征在于所述的濃縮樣品稀釋液為含0.1％吐溫-20的磷酸鹽緩沖液。
10.一種檢測樣品中喹乙醇含量的方法，包括步驟(1)樣品前處理；(2)用權(quán)利要求1-9任一所述的試劑盒進(jìn)行檢測，向包被有喹乙醇抗原的酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品溶液，再加入抗喹乙醇多克隆抗體，孵育后洗滌拍干，加入酶標(biāo)記二抗，孵育后洗滌拍干，顯色、終上，用酶標(biāo)儀測定吸光度值；(3)分析檢測結(jié)果。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種檢測喹乙醇的酶聯(lián)免疫試劑盒。本發(fā)明所提供的喹乙醇的酶聯(lián)免疫試劑盒包括喹乙醇特異性抗體、喹乙醇與載體蛋白的偶聯(lián)物、和酶標(biāo)二抗。本發(fā)明的檢測喹乙醇的酶聯(lián)免疫試劑盒靈敏、快速、準(zhǔn)確，主要用于大批樣品的篩查；盒中的主要試劑均以工作液的形式提供，使用方便，具有高特異性、高靈敏性、高精確性、高準(zhǔn)確性等特點(diǎn)，可快速檢測飼料及畜產(chǎn)品中殘留的喹乙醇。
文檔編號(hào)G01N33/544GK1888903SQ200610103899
公開日2007年1月3日 申請(qǐng)日期2006年8月8日 優(yōu)先權(quán)日2006年8月8日
發(fā)明者楊曙明, 于洪俠 申請(qǐng)人:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)業(yè)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)與檢測技術(shù)研究所