專利名稱：磺酰異氰酸酯柱前衍生化法測定水分含量的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬分析化學(xué)領(lǐng)域，涉及水的柱前衍生化方法，具體涉及一種采用磺酰異氰酸酯柱前衍生化法測定水分含量的方法(簡稱DZY法)。
背景技術(shù)：
現(xiàn)有技術(shù)公開的測定樣品中水分的方法主要有烘干法、甲苯法、減壓干燥法、氣相色譜法、費休氏容量滴定法、卡爾費休水分滴定儀法等。上述烘干法、甲苯法、減壓干燥法、費休氏容量滴定法等方法存在操作煩瑣、準(zhǔn)確性低、易受干擾的缺點；而氣相色譜法和卡爾費休水分滴定儀法等方法所需儀器價格昂貴不易普及。
在分析化學(xué)領(lǐng)域的研究中，研究者一直在尋找一種易普及、廉價的，能快速高效的、高靈敏度測定微量水分的方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種水的柱前衍生化方法，尤其是提供一種反應(yīng)條件溫和、快速高效的水的柱前衍生化方法，具體涉及采用磺酰異氰酸酯柱前衍生化法測定水分含量的方法。
本發(fā)明方法以磺酰異氰酸酯類為衍生化試劑進(jìn)行柱前衍生化，與高效液相色譜、高效液相色譜-質(zhì)譜、毛細(xì)管電泳、毛細(xì)管電泳-質(zhì)譜或者薄層色譜法等方法聯(lián)合使用，可以實現(xiàn)對樣品中微量水分的高靈敏度測定。
本發(fā)明方法通過下述技術(shù)方案實現(xiàn)取含有待測水分的樣品，經(jīng)過樣品預(yù)處理后，加入不含活潑氫的反應(yīng)溶劑，以及磺酰異氰酸酯類衍生化試劑，混勻，室溫下放置1-20分鐘，加羥基或巰基化合物終止反應(yīng)，聯(lián)和使用高效液相色譜、高效液相色譜-質(zhì)譜、毛細(xì)管電泳、毛細(xì)管電泳-質(zhì)譜或者薄層色譜法等方法，測定水分的濃度。按下述步驟進(jìn)行1)按常規(guī)方法預(yù)處理待測含水樣品，2)加入不含活潑氫的反應(yīng)溶劑和磺酰異氰酸酯類衍生化試劑，混勻，3)室溫放置1-20分鐘，加羥基或巰基化合物終止反應(yīng)，
4)用高效液相色譜、高效液相色譜-質(zhì)譜、毛細(xì)管電泳、毛細(xì)管電泳-質(zhì)譜法或者薄層色譜法測定水分的含量。
本發(fā)明方法所述的衍生化試劑是磺酰異氰酸酯類化合物，其結(jié)構(gòu)通式可表示為RSO2NCO，其中R可以為烷基或芳基基團。
本發(fā)明使用磺酰異氰酸酯類化合物作為衍生化試劑，衍生化反應(yīng)在室溫下即可以發(fā)生。將所述的衍生化試劑與待測溶液混勻僅需1-20分鐘后，衍生化反應(yīng)即已經(jīng)完成。
本發(fā)明方法所述的不含活潑氫的溶劑是乙腈、四氫吠喃、乙醚、苯、甲苯、或四氯化碳等溶劑。
本發(fā)明方法可以通過高效液相色譜、高效液相色譜-質(zhì)譜、毛細(xì)管電泳、毛細(xì)管電泳-質(zhì)譜或者薄層色譜等多種儀器實現(xiàn)，特別是高效液相色譜-紫外檢測器具有普及、廉價等優(yōu)點。本發(fā)明方法與現(xiàn)有技術(shù)比較，具有測定快速、準(zhǔn)確、簡便、易于推廣、成本低、反應(yīng)條件溫和、副反應(yīng)產(chǎn)物少和過量衍生化試劑不會干擾待測物的測定等優(yōu)點。


圖1是空白乙腈衍生化高效液相色譜(HPLC)圖，其中，內(nèi)標(biāo)色譜峰、水衍生化產(chǎn)物色譜峰、甲醇衍生化產(chǎn)物色譜峰基線分離；乙腈含有微量水分因此仍有水衍生化產(chǎn)物色譜峰。
圖2是含水乙腈衍生化高效液相色譜(HPLC)圖，圖中內(nèi)標(biāo)色譜峰、水衍生化產(chǎn)物色譜峰、甲醇衍生化產(chǎn)物色譜峰基線分離。
圖3是腸內(nèi)營養(yǎng)粉劑樣品乙腈溶液衍生化高效液相色譜(HPLC)圖，圖中內(nèi)標(biāo)色譜峰、水衍生化產(chǎn)物色譜峰、甲醇衍生化產(chǎn)物色譜峰基線分離，未見雜質(zhì)色譜峰干擾檢驗，其中，1是內(nèi)標(biāo)(對氨基苯甲酸)；2是水衍生化產(chǎn)物；3是甲醇衍生化產(chǎn)物。
具體實施例方式
實施例1
儀器與條件日本島津10A型高效液相色譜系統(tǒng)，包括二元梯度系統(tǒng)、柱溫控制箱、紫外可見可變波長檢測器、杭州英譜HS2000工作站以及20μL手動進(jìn)樣系統(tǒng)；色譜柱150×4.6mm ID，5μm DiamonsilTMC18(DIKMA)；水相稱取0.69gKH2PO4溶于500ml純水中，再用磷酸調(diào)節(jié)pH值為2.5。有機相乙腈。等比洗脫，水相∶有機相＝55∶45；流速1.0mL/min；柱溫25℃；檢測波長227nm；進(jìn)樣量20μL。
實驗步驟精密稱取水200mg，置于10mL容量瓶中，乙腈溶解并稀釋至刻度，配制成濃度20mg/mL的對照品儲備液，再用乙腈稀釋至20mg/mL，10mg/mL，5mg/mL，3mg/mL，2mg/mL的濃度，供制備標(biāo)準(zhǔn)曲線。
取50μL標(biāo)準(zhǔn)液，加入20％對甲苯磺酰異氰酸酯(v/v)乙腈溶液100μL，漩渦混勻，室溫放置20分鐘，待其充分反應(yīng)后，加入50μL甲醇去除未反應(yīng)的衍生化試劑。取50μL反應(yīng)液加入23mg/ml對氨基苯甲酸乙腈內(nèi)標(biāo)溶液100μL，再加2mL乙腈溶液，漩渦混勻。用乙腈稀釋1000倍，進(jìn)樣20μL，同做隨行空白。記錄內(nèi)標(biāo)和水衍生化產(chǎn)物峰面積，以兩者比值計算線性方程。
精密稱取腸內(nèi)營養(yǎng)粉劑6.28g，置于50mL容量瓶中，乙腈溶解并稀釋至刻度，同樣取50μL與標(biāo)準(zhǔn)液以相同條件制備，相同色譜條件進(jìn)樣20μL，記錄內(nèi)標(biāo)和水衍生化產(chǎn)物峰面積，兩者比值代入線性方程中，計算其測定值，將計算值除以實際取樣量計算水分含量。
權(quán)利要求
1.磺酰異氰酸酯柱前衍生化法測定水分含量的方法，其特征是待測樣品預(yù)處理后，加入不含活潑氫的反應(yīng)溶劑，以磺酰異氰酸酯類為衍生化試劑進(jìn)行柱前衍生化，與高效液相色譜、高效液相色譜-質(zhì)譜、毛細(xì)管電泳、毛細(xì)管電泳-質(zhì)譜或者薄層色譜法聯(lián)和使用，測定水分含量。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的磺酰異氰酸酯柱前衍生化法測定水分含量的方法，其特征是所述的衍生化試劑是磺酰異氰酸酯類化合物，其結(jié)構(gòu)通式為RSO2NCO，其中R為烷基或芳基基團。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的水的磺酰異氰酸酯柱前衍生化法測定水分含量的方法，其特征是按下述步驟進(jìn)行1)待測含水樣品預(yù)處理，2)加入不含活潑氫的反應(yīng)溶劑和磺酰異氰酸酯類衍生化試劑，混勻，3)室溫放置1-20分鐘，加羥基或巰基化合物終止反應(yīng)，4)用高效液相色譜、高效液相色譜-質(zhì)譜、毛細(xì)管電泳、毛細(xì)管電泳-質(zhì)譜法或者薄層色譜法測定樣品中水分含量。
4，根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征是所述的不含活潑氫的反應(yīng)溶劑選自乙腈、四氫呋喃、乙醚、苯、甲苯或四氯化碳。
5，根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征是所述的衍生化反應(yīng)為室溫放置1-20分鐘，反應(yīng)完畢，加羥基或巰基化合物終止反應(yīng)。
全文摘要
本發(fā)明屬分析化學(xué)領(lǐng)域，涉及磺酰異氰酸酯柱前衍生化法測定水分含量。本發(fā)明以磺酰異氰酸酯類化合物為衍生化試劑，對水進(jìn)行柱前衍生化之后，加羥基或巰基化合物終止反應(yīng)。本發(fā)明提供的衍生化方法測定快速、準(zhǔn)確、簡便、易于推廣、成本低，還具有反應(yīng)條件溫和、副反應(yīng)少、過量衍生化試劑不干擾水分的測定等優(yōu)點，本發(fā)明衍生化方法與高效液相色譜、高效液相色譜－質(zhì)譜、毛細(xì)管電泳、毛細(xì)管電泳－質(zhì)譜或者薄層色譜法等方法聯(lián)合使用可以實現(xiàn)對水分的靈敏測定。
文檔編號G01N1/28GK1963492SQ20061011893
公開日2007年5月16日 申請日期2006年11月29日 優(yōu)先權(quán)日2006年11月29日
發(fā)明者段更利, 周濤, 郁穎佳 申請人:復(fù)旦大學(xué)