專利名稱：一種混合水溶維生素的分析方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及物質(zhì)的分析方法，尤其涉及一種混合水溶維生素的分析方法。
技術(shù)背景混合水溶維生素包括維生素Bi、維生素B2、維生素B6和維生素C，傳統(tǒng) 的毛細(xì)管電泳分離方法，由于受到壓力進(jìn)樣和落差進(jìn)樣等傳統(tǒng)進(jìn)樣方式的限 制，定量差，實驗結(jié)果的重現(xiàn)性偏低， 一般在2%-5%之間。高精度定量毛細(xì)管電泳儀是一種新型的微量分析儀器，它采用壓力和電滲 流驅(qū)動電解質(zhì)溶液通過毛細(xì)管柱。樣品以溶液狀態(tài)進(jìn)入毛細(xì)管柱，不同組份在 高壓電場的作用下，以不同的速度定向遷移，先后依次通過紫外檢測器進(jìn)行檢 測，根據(jù)各組分的遷移時間和響應(yīng)值進(jìn)行定性、定量分析。電泳的支持物是石 英毛細(xì)管，采用納升級定量進(jìn)樣閥，可實現(xiàn)高精度定量進(jìn)樣。發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的就是為了解決上述現(xiàn)有技術(shù)存在的問題，提供一種高精度定 量毛細(xì)管電泳儀的混合水溶維生素的分析方法。為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用了以下技術(shù)方案 一種混合水溶維生素的 分析方法，采用高精度定量毛細(xì)管電泳儀分析，所述的高精度定量毛細(xì)管電泳 儀包含高精度微流液體輸送泵、微流控制裝置、進(jìn)樣閥、高壓電源、電場隔離裝置和紫外檢測器，所述的混合水溶維生素的分析方法包括以下步驟A、 制備樣品溶液準(zhǔn)確稱取維生素B。維生素B2、維生素B6標(biāo)準(zhǔn)品各100mg，維生素C標(biāo)準(zhǔn) 品lrag置于100ml容量瓶中，用lOmM硼砂溶液溶解并稀釋至刻度，作為樣品溶 液；B、 儀器準(zhǔn)備將高精度定量毛細(xì)管電泳儀各部分連接好，檢查是否漏液，保證儀器的密 閉性；打開紫外檢測器電源，預(yù)熱30min;打開高精度微流液體輸送泵、高壓 電源和微流控制裝置，調(diào)節(jié)電壓為15kV，泵流速為0. 02ml/min;C、 進(jìn)樣分析從進(jìn)樣閥注入樣品溶液進(jìn)行分析，并采集圖譜；D、 連續(xù)進(jìn)樣分析7次，記錄保留時間和積分面積，并計算相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。 步驟c中所述的進(jìn)樣分析的分析條件為-毛細(xì)管柱內(nèi)徑150um，柱長100 cm，有效柱長60 cm; 流動相10mM硼砂緩沖溶液； 檢測波長254nm。本發(fā)明混合水溶維生素的分析方法由于采用高精度定量毛細(xì)管電泳儀進(jìn) 行分析，解決了傳統(tǒng)毛細(xì)管電泳定量差的固有缺陷，四種水溶維生素達(dá)到基線 分離，定性重現(xiàn)性RSD7〈0. 5%，定量重現(xiàn)性RSD7〈1%。


圖1是本發(fā)明的分析方法所采用的高精度定量毛細(xì)管電泳儀的結(jié)構(gòu)原理圖；圖2是采用本發(fā)明的分析方法得到混合水溶維生素的圖譜。
具體實施方式
本發(fā)明混合水溶維生素的分析方法，采用高精度定量毛細(xì)管電泳儀分析， 這種高精度定量毛細(xì)管電泳儀的主要結(jié)構(gòu)如圖l所示，它包括流動相貯液瓶l 和2、連接管3、高精度微流液體輸送泵4和5、混合閥6、微流控制裝置7、 電場隔離裝置8、定量進(jìn)樣閥9、高壓電源10、分離毛細(xì)管11、紫外檢測器12、 高壓導(dǎo)線13、高壓電極14、三通15、連接管16和廢液收集瓶17。本發(fā)明混合水溶維生素的分析方法的步驟是首先以維生素B"維生素B2、 維生素B6和維生素C標(biāo)準(zhǔn)品為樣品，制備出它們的混合溶液。分別準(zhǔn)確稱取維 生素Bi、維生素B2、維生素Be標(biāo)準(zhǔn)品各100mg、維生素C標(biāo)準(zhǔn)品lmg置于100ml 容量瓶中，用10mM硼砂溶液(pH9.2)溶解并稀釋至刻度，作為樣品溶液。在該樣品溶液中，維生素Bi、維生素B2、維生素Be的濃度均為1.0X10—3g/ml，維 生素C的濃度為1.0X10—5g/ml。將高精度定量毛細(xì)管電泳儀各部分連接好，檢查是否漏液，保證儀器的密 閉性。接著打開紫外檢測器電源，預(yù)熱30 min;打開高精度微流液體輸送泵， 控制泵流速為0. 02ml/min，開始輸送流動相；打開高壓電源，調(diào)節(jié)電壓為15kV， 并打開微流控制裝置，控制流動相的流量和流速，至紫外檢測器檢測出流動相 的穩(wěn)定基線。然后從定量進(jìn)樣閥注入樣品溶液進(jìn)行分析。分析條件為毛細(xì)管 柱內(nèi)徑150um，柱長100 cm，有效柱長60 cm;流動相l(xiāng)OmM硼砂緩沖溶 液；檢測波長254nm。采集四種水溶維生素的圖譜，如圖2所示。圖2中3. 78 為維生素B!的譜峰，4.50為維生素B2的譜峰，5. 14為維生素Be的譜峰，6.38 為維生素C的譜峰。為了證明本方法的效果，按照上述方法連續(xù)進(jìn)樣分析7次，分別記錄保留 時間和積分面積，并計算相對標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD。實驗結(jié)果表明，四種水溶維生素 達(dá)到基線分離，定性重現(xiàn)性RSD/0. 5%，定量重現(xiàn)性RSD7<1%。
權(quán)利要求
1、一種混合水溶維生素的分析方法，其特征在于，采用高精度定量毛細(xì)管電泳儀分析，所述的高精度定量毛細(xì)管電泳儀包含高精度微流液體輸送泵、微流控制裝置、進(jìn)樣閥、高壓電源、電場隔離裝置和紫外檢測器，所述的混合水溶維生素的分析方法包括以下步驟A、制備樣品溶液準(zhǔn)確稱取維生素B1、維生素B2、維生素B6標(biāo)準(zhǔn)品各100mg，維生素C標(biāo)準(zhǔn)品1mg置于100ml容量瓶中，用10mM硼砂溶液溶解并稀釋至刻度，作為樣品溶液；B、儀器準(zhǔn)備將高精度定量毛細(xì)管電泳儀各部分連接好，檢查是否漏液，保證儀器的密閉性；打開紫外檢測器電源，預(yù)熱30min；打開高精度微流液體輸送泵、高壓電源和微流控制裝置，調(diào)節(jié)電壓為15kV，泵流速為0.02ml/min；C、進(jìn)樣分析從進(jìn)樣閥注入樣品溶液進(jìn)行分析，并采集圖譜；D、連續(xù)進(jìn)樣分析7次，記錄保留時間和積分面積，并計算相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。
2、 根據(jù)權(quán)利要求l所述的混合水溶維生素的分析方法，其特征在于步 驟C中所述的進(jìn)樣分析的分析條件為毛細(xì)管柱內(nèi)徑150um，柱長100 cm，有效柱長60 cm; 流動相l(xiāng)OmM硼砂緩沖溶液； 檢測波長254nm。
全文摘要
一種混合水溶維生素的分析方法，采用高精度定量毛細(xì)管電泳儀進(jìn)行分析，以10mM硼砂為緩沖液，利用高精度微流液體輸送泵進(jìn)行流動相輸送，流速0.02mL/min，流動相經(jīng)過專屬分流裝置形成極低流速用來提供電泳所需流動相。使用長100cm，有效長度60cm的帶有電隔離槽的毛細(xì)管柱進(jìn)行分離，分離電壓為15kV。本發(fā)明混合水溶維生素的分析方法解決了傳統(tǒng)毛細(xì)管電泳定量差的固有缺陷，四種水溶維生素達(dá)到基線分離，定性重現(xiàn)性RSD₇＜0.5％，定量重現(xiàn)性RSD₇＜1％。
文檔編號G01N27/447GK101334375SQ200710042959
公開日2008年12月31日 申請日期2007年6月28日 優(yōu)先權(quán)日2007年6月28日
發(fā)明者鵬 李, 申克宇, 超 閻, 黃曉晶, 路 黎 申請人:上海通微分析技術(shù)有限公司