專利名稱：一種無(wú)需稀釋血漿樣本測(cè)定纖維蛋白原含量的試劑及其測(cè)定方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及血漿樣本纖維蛋白原(FIB)含量的測(cè)定試劑及其測(cè)定方法，屬于臨床檢測(cè)試劑及檢測(cè)方法技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
血漿纖維蛋白原(FIB)定量測(cè)定是臨床上廣泛進(jìn)行的血凝四項(xiàng)之一(即PT、TT、FIB和APTT)。馮·克勞斯(von Clauss)FIB測(cè)定方法屬于功能法測(cè)定，是美國(guó)國(guó)家臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)(NCCLS)推薦的方法。該法的原理是，高濃度凝血酶與低濃度FIB血漿反應(yīng)，F(xiàn)IB含量與血凝時(shí)間成反比。通過在雙對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上所做的標(biāo)準(zhǔn)曲線可以查出待測(cè)血漿的FIB含量。然而該法存在兩個(gè)缺點(diǎn)一、必須使用高濃度的凝血酶，通常為100～200單位/毫升；二、待測(cè)血漿必須提前稀釋5～30倍，降低其中的FIB含量。所以，該法成本較高，操作繁瑣，特別是稀釋血漿過程容易產(chǎn)生誤差。美國(guó)專利5,292,664和6,448,024通過在高濃度凝血酶溶液中添加凝血酶抑制劑，制成凝血活性降低了的FIB試劑，從而達(dá)到直接測(cè)定樣本中FIB含量的目的。但該法仍未解決FIB試劑的高成本問題。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù)中的缺點(diǎn)，而提供一種測(cè)定方法簡(jiǎn)便、測(cè)量準(zhǔn)確度高、成本低的一種無(wú)需稀釋血漿樣本測(cè)定纖維蛋白原含量的試劑及其測(cè)定方法。
本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案一、本發(fā)明的試劑的技術(shù)方案，配制本試劑的原料組成及其含量如下凝血酶每毫升本試劑含2-20單位緩沖劑每升本試劑含5-100毫摩爾穩(wěn)定劑每100毫升本試劑含0.05-10克去離子水余量。
所述的凝血酶采用用生化手段從動(dòng)物血或人血中提取的凝血酶，或者采用基因重組或化學(xué)修飾的凝血酶制品。
所述的緩沖劑選自下述中的任一種；HEPES 中文名為N-2-羥乙基呱嗪-N′-2-乙磺酸TRIS中文名為三(羥甲基)氨基甲烷PB 中文名為磷酸緩沖液MOPSO 中文名為3-(N-嗎啉)-2-羥基丙磺酸。
所述的穩(wěn)定劑選自下述中的一種或幾種無(wú)機(jī)鹽、有機(jī)酸及其鹽類、多羥基化合物、氨基酸、蛋白質(zhì)；各種穩(wěn)定劑的含量如下無(wú)機(jī)鹽 每100毫升本試劑含0.1-2克有機(jī)酸及其鹽類 每100毫升本試劑含0.1-5克多羥基化合物每100毫升本試劑含0.1-10克氨基酸 每100毫升本試劑含0.5-10克蛋白質(zhì) 每100毫升本試劑含0.05-2克。
所述的無(wú)機(jī)鹽選自下述中的一種氯化鈣、氯化鈉、氯化鉀、溴化鈣、溴化鈉、溴化鉀、硫酸鈉、硫酸鉀；所述的有機(jī)酸及其鹽類選自下述中的一種乙酸、丙酸、酒石酸、檸檬酸、山梨酸、乙酸鈉、丙酸鈉、酒石酸鈉、檸檬酸鈉、山梨酸鉀；所述的多羥基化合物選自下述中的一種蔗糖、乳糖、麥芽糖、甘油、聚乙二醇、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮；所述的氨基酸選自下述中的一種甘氨酸、賴氨酸、精氨酸、組氨酸；所述的蛋白質(zhì)選自下述中的一種牛血清白蛋白、明膠。
本試劑(以下簡(jiǎn)稱FIB試劑)的理論根據(jù)如下本申請(qǐng)人在試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，由低濃度凝血酶組成的FIB試劑(每毫升含2～20個(gè)單位的凝血酶)與高濃度FIB血漿(即未經(jīng)稀釋的正常血漿)反應(yīng)，F(xiàn)IB含量仍與血凝時(shí)間成反比；用低濃度凝血酶配制FIB試劑和高濃度FIB血漿所制作的標(biāo)準(zhǔn)曲線與用高濃度凝血酶配制的FIB試劑與低濃度FIB血漿所制作的標(biāo)準(zhǔn)曲線具有同樣好的線性相關(guān)(相關(guān)系數(shù)R2大于0.98)。所以用低濃度凝血酶配制的FIB試劑，無(wú)需稀釋血漿即可直接測(cè)定樣本的FIB含量。
二、本發(fā)明的測(cè)定方法的技術(shù)方案如下(1)用含穩(wěn)定劑的緩沖液配制每毫升含2-20單位凝血酶的本試劑；本試劑的PH值范圍為PH7.0-8.0；(2)用配制好的本試劑按常規(guī)方法繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；(3)測(cè)定方法a、將本試劑及血漿樣本分別于37℃溫育后，按1∶1的體積比混合；b、記錄血凝時(shí)間；c、通過標(biāo)準(zhǔn)曲線求出血漿樣本的纖維蛋白原含量。
所述的凝血酶采用用生化手段從動(dòng)物血或人血中提取的凝血酶，或者采用基因重組或化學(xué)修飾的凝血酶制品。
所述的緩沖劑選自下述中的任一種；HEPES 中文名為N-2-羥乙基呱嗪-N′-2-乙磺酸TRIS中文名為三(羥甲基)氨基甲烷PB 中文名為磷酸緩沖液MOPSO 中文名為3-(N-嗎啉)-2-羥基丙磺酸。
所述的穩(wěn)定劑選自下述中的一種或幾種無(wú)機(jī)鹽、有機(jī)酸及其鹽類、多羥基化合物、氨基酸、蛋白質(zhì)；所述的各種穩(wěn)定劑的含量如下無(wú)機(jī)鹽 每100毫升本試劑含0.1-2克有機(jī)酸及其鹽類 每100毫升本試劑含0.1-5克多羥基化合物每100毫升本試劑含0.1-10克氨基酸 每100毫升本試劑含0.5-10克蛋白質(zhì) 每100毫升本試劑含0.05-2克。
所述的無(wú)機(jī)鹽選自下述中的一種氯化鈣、氯化鈉、氯化鉀、溴化鈣、溴化鈉、溴化鉀、硫酸鈉、硫酸鉀；所述的有機(jī)酸及其鹽類選自下述中的一種乙酸、丙酸、酒石酸、檸檬酸、山梨酸、乙酸鈉、丙酸鈉、酒石酸鈉、檸檬酸鈉、山梨酸鉀；
所述的多羥基化合物選自下述中的一種蔗糖、乳糖、麥芽糖、甘油、聚乙二醇、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮；所述的氨基酸選自下述中的一種甘氨酸、賴氨酸、精氨酸、組氨酸；所述的蛋白質(zhì)選自下述中的一種牛血清白蛋白、明膠。
本發(fā)明的測(cè)定方法的具體方案如下FIB試劑用前先于37℃溫育5分鐘，使本試劑達(dá)到所需溫度。將50μl血漿加入血凝儀的比色杯中，37℃溫育1分鐘，立即添加50μl已預(yù)熱至37℃的FIB試劑，記錄血凝時(shí)間，改變FIB試劑中的凝血酶濃度使正常樣本(FIB含量為200～400mg/dl)的血凝時(shí)間達(dá)到6～80秒，更好是10～50秒，最好是15～30秒。
標(biāo)準(zhǔn)曲線制作將參比血漿用咪唑緩沖液進(jìn)行對(duì)倍稀釋，使FIB含量分別達(dá)到適宜的濃度梯度，如600mg/dl，300mg/dl、150mg/dl和100mg/dl，分別取此不同濃度的參比血漿50μl于血凝儀的比色杯中，37℃溫育1分鐘，立即添加50μl預(yù)熱至37℃的FIB試劑，記錄血凝時(shí)間(s)。以參比血漿的FIB含量(mg/dl)為縱坐標(biāo)，以相應(yīng)的血凝時(shí)間(s)為橫坐標(biāo)，在雙對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上作標(biāo)準(zhǔn)曲線；或用excel軟件進(jìn)行線性回歸處理和作圖(見圖1)。
在同樣條件下，待測(cè)血漿樣本直接與FIB試劑反應(yīng)，根據(jù)其血凝時(shí)間(s)，即可在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出相應(yīng)的FIB含量(mg/dl)。如果將定標(biāo)點(diǎn)的FIB含量和對(duì)應(yīng)的血凝時(shí)間(s)依次輸入全自動(dòng)或半自動(dòng)血凝儀，測(cè)定結(jié)束時(shí)，儀器將自動(dòng)給出待測(cè)血漿樣本的FIB含量(mg/dl)。
本發(fā)明的有益效果如下(1)測(cè)定時(shí)不用稀釋血漿樣本，使測(cè)定方法簡(jiǎn)便。
(2)與臨床常用的clauss FIB試劑相比(其凝血酶濃度通常為每毫升含100～200個(gè)單位)大大降低了凝血酶用量，從而降低了本試劑的制造成本。
(3)提高了測(cè)量的準(zhǔn)確度，減少了操作誤差。這一優(yōu)點(diǎn)體現(xiàn)在以下3個(gè)方面a、使用液體試劑，無(wú)需復(fù)溶，不存在瓶間差問題；b、省去了測(cè)定過程中的血漿樣本稀釋步驟，避免了稀釋過程產(chǎn)生的誤差；c、制作標(biāo)準(zhǔn)曲線所用定標(biāo)點(diǎn)的FIB含量涵蓋了正常血漿FIB含量范圍(200～400mg/dl)，避免了稀釋血漿引起的生理環(huán)境變化，因而更符合功能測(cè)定方法的要求。


圖1為用本發(fā)明的FIB試劑所作的FIB標(biāo)準(zhǔn)曲線。
具體實(shí)施例方式
一、本發(fā)明試劑的實(shí)施例如下表

注(1)上表中的凝血酶采用用生化手段從動(dòng)物血或人血中提取的凝血酶，或者采用基因重組或化學(xué)修飾的凝血酶制品。
(2)上表中的緩沖劑選自下述中的任一種；HEPES 中文名為N-2-羥乙基呱嗪-N′-2-乙磺酸TRIS中文名為三(羥甲基)氨基甲烷PB 中文名為磷酸緩沖液MOPSO 中文名為3-(N-嗎啉)-2-羥基丙磺酸。
(3)上表中的穩(wěn)定劑選自下述中的一種或幾種無(wú)機(jī)鹽、有機(jī)酸及其鹽類、多羥基化合物、氨基酸、蛋白質(zhì)；各種穩(wěn)定劑的含量如下無(wú)機(jī)鹽 每100毫升本試劑含0.1-2克有機(jī)酸及其鹽類 每100毫升本試劑含0.1-5克多羥基化合物每100毫升本試劑含0.1-10克氨基酸 每100毫升本試劑含0.5-10克蛋白質(zhì) 每100毫升本試劑含0.05-2克。
在實(shí)施例1中，用1種穩(wěn)定劑；在實(shí)施例2中，用2種穩(wěn)定劑；
在實(shí)施例3中，用3種穩(wěn)定劑；在實(shí)施例4中，用4種穩(wěn)定劑；(4)在上表中，所述的無(wú)機(jī)鹽選自下述中的一種氯化鈣、氯化鈉、氯化鉀、溴化鈣、溴化鈉、溴化鉀、硫酸鈉、硫酸鉀；所述的有機(jī)酸及其鹽類選自下述中的一種乙酸、丙酸、酒石酸、檸檬酸、山梨酸、乙酸鈉、丙酸鈉、酒石酸鈉、檸檬酸鈉、山梨酸鉀；所述的多羥基化合物選自下述中的一種蔗糖、乳糖、麥芽糖、甘油、聚乙二醇、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮；所述的氨基酸選自下述中的一種甘氨酸、賴氨酸、精氨酸、組氨酸；所述的蛋白質(zhì)選自下述中的一種牛血清白蛋白、明膠。
二、本發(fā)明測(cè)定方法的實(shí)施例實(shí)施例5本實(shí)施例的測(cè)定方法如下(1)按上述實(shí)施例1要求稱取0.61克的TRIS(5mmol/L相當(dāng)?shù)目藬?shù))；然后用800毫升去離子水溶解，調(diào)PH7.35，最后用去離子水定容1立升。
(2)將上述溶液轉(zhuǎn)入1立升燒杯中，向該溶液表面均勻添撒0.5克牛血清白蛋白和2000單位的牛凝血酶凍干粉，靜置不動(dòng)，待干粉全部進(jìn)入溶液中，緩慢攪勻，并經(jīng)細(xì)菌漏斗過濾除菌。此濾液即為FIB試劑(TRIS 5mmol/L，牛凝血酶2單位/毫升)，2～8冰箱內(nèi)放置，臨用前于37℃溫育5分鐘。
(3)向血凝儀比色杯中添加37℃快速融化的市售血漿50μl，37℃溫育1分鐘，立即加入50μl已預(yù)熱至37℃的FIB試劑，計(jì)時(shí)，血凝時(shí)間為26.6s。血漿用咪唑緩沖液稀釋2和4倍，其血凝時(shí)間分別為27.2s和28.0s。用excel軟件進(jìn)行線性回歸處理，R2＝0.9944。
實(shí)施例6本實(shí)施例的測(cè)定方法如下(1)按上述實(shí)施例2要求稱取4.8克HEPES(相當(dāng)于含HEPES 20mmol/L)，15克氯化鈉，15克山梨酸鉀；然后用800毫升去離子水溶解，調(diào)PH7.0，定容到1立升。
(2)將上述溶液轉(zhuǎn)入1立升燒杯中，向該溶液表面均勻添撒5000單位凝血酶凍干粉，靜置不動(dòng)，待干粉全部進(jìn)入溶液中，緩慢攪勻，并經(jīng)細(xì)菌漏斗過濾除菌。此濾液即為FIB試劑(含HEPES 20mml/L，人凝血酶5單位/毫升)，2～8℃冰箱內(nèi)放置，臨用前于37℃溫育5分鐘。
(3)向血凝儀比色杯中添加37℃快速融化的市售血漿50μl，37℃溫育1分鐘，立即加入50μl已預(yù)熱至37℃的FIB試劑，計(jì)時(shí)，血凝時(shí)間為12.1s。血漿用咪唑緩沖液稀釋2和4倍，其血凝時(shí)間分別為15.0s和18.3s。用excel軟件進(jìn)行線性回歸處理，R2＝0.9995。
實(shí)施例7本實(shí)施例的測(cè)定方法如下(1)按上述實(shí)施例3要求稱取14.4克磷酸氫二鈉(PB)，2.4克磷酸二氫鉀(PB)，9克硫酸鈉，50克甘氨酸；然后用800毫升去離子水溶解，調(diào)PH7.35，定容到1立升。
(2)將上述溶液轉(zhuǎn)入1立升燒杯中，向該溶液表面均勻添撒1克明膠和10000單位重組人凝血凍干粉，靜置不動(dòng)，待干粉全部進(jìn)入溶液中，緩慢攪勻，過濾除菌。此濾液即為FIB試劑(含PB 60mmol/L，重組人凝血酶10單位/毫升)，2～8冰箱內(nèi)放置，臨用前于37℃溫育5分鐘。
(3)向凝血儀比色杯中添加于37℃快速融化的市售血漿50μl，37℃溫育1分鐘，立即加入50μl已預(yù)熱至37℃的FIB試劑，計(jì)時(shí)，血凝時(shí)間為13.7s。血漿用咪唑緩沖液稀釋2和4倍，其血凝時(shí)間分別為18.7s和26.3s。用excel軟件進(jìn)行線性回歸處理，R2＝0.9993。
實(shí)施例8本實(shí)施例的測(cè)定方法如下(1)按上述實(shí)施例4要求稱取22.5克MOPSO(相當(dāng)于100mmol/L)，25克溴化鈉，10克賴氨酸，15克丙酸鈉，50克甘油；然后用800毫升去離子水溶解，調(diào)PH8.0，最后用去離子水定容1立升。
(2)將上述溶液轉(zhuǎn)入1立升燒杯中，向該溶液表面均勻添撒20000單位豬凝血凍干粉，靜置不動(dòng)，待干粉全部進(jìn)入溶液中，緩慢攪勻，過濾除菌。此濾液即為FIB試劑(含MOPSO 100mmol/L，豬凝血酶20單位/毫升)，2～8冰箱內(nèi)放置，臨用前于37℃溫育5分鐘。
(3)向凝血儀比色杯中添加于37℃快速融化的市售血漿50μl，37℃溫育1分鐘，立即加入50μl已預(yù)熱至37℃的FIB試劑，計(jì)時(shí)，血凝時(shí)間為7.3s。血漿用咪唑緩沖液稀釋2和4倍，其血凝時(shí)間分別為11.1s和18.0s。用excel軟件進(jìn)行線性回歸處理，R2＝0.9983。
權(quán)利要求
1.一種無(wú)需稀釋血漿樣本測(cè)定纖維蛋白原含量的試劑，其特征在于配制本試劑的原料組成及其含量如下凝血酶每毫升本試劑含2-20單位緩沖劑每升本試劑含5-100毫摩爾穩(wěn)定劑每100毫升本試劑含0.05-10克去離子水余量。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種無(wú)需稀釋血漿樣本測(cè)定纖維蛋白原含量的試劑，其特征在于所述的凝血酶采用用生化手段從動(dòng)物血或人血中提取的凝血酶，或者采用基因重組或化學(xué)修飾的凝血酶制品。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種無(wú)需稀釋血漿樣本測(cè)定纖維蛋白原含量的試劑，其特征在于所述的緩沖劑選自下述中的任一種；HEPES 中文名為N-2-羥乙基呱嗪-N′-2-乙磺酸TRIS中文名為三(羥甲基)氨基甲烷PB 中文名為磷酸緩沖液MOPSO 中文名為3-(N-嗎啉)-2-羥基丙磺酸。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種無(wú)需稀釋血漿樣本測(cè)定纖維蛋白原含量的試劑，其特征在于所述的穩(wěn)定劑選自下述中的一種或幾種無(wú)機(jī)鹽、有機(jī)酸及其鹽類、多羥基化合物、氨基酸、蛋白質(zhì)；各種穩(wěn)定劑的含量如下無(wú)機(jī)鹽每100毫升本試劑含0.1-2克有機(jī)酸及其鹽類每100毫升本試劑含0.1-5克多羥基化合物 每100毫升本試劑含0.1-10克氨基酸每100毫升本試劑含0.5-10克蛋白質(zhì)每100毫升本試劑含0.05-2克。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種無(wú)需稀釋血漿樣本測(cè)定纖維蛋白原含量的試劑，其特征在于無(wú)機(jī)鹽選自下述中的一種氯化鈣、氯化鈉、氯化鉀、溴化鈣、溴化鈉、溴化鉀、硫酸鈉、硫酸鉀；有機(jī)酸及其鹽類選自下述中的一種乙酸、丙酸、酒石酸、檸檬酸、山梨酸、乙酸鈉、丙酸鈉、酒石酸鈉、檸檬酸鈉、山梨酸鉀；多羥基化合物選自下述中的一種蔗糖、乳糖、麥芽糖、甘油、聚乙二醇、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮；氨基酸選自下述中的一種甘氨酸、賴氨酸、精氨酸、組氨酸；蛋白質(zhì)選自下述中的一種牛血清白蛋白、明膠。
6.一種無(wú)需稀釋血漿樣本測(cè)定纖維蛋白原含量的方法，其特征在于(1)用含穩(wěn)定劑的緩沖液配制每毫升含2-20單位凝血酶的本試劑；本試劑的PH值范圍為PH7.0-8.0；(2)用配制好的本試劑按常規(guī)方法繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；(3)測(cè)定方法a、將本試劑及血漿樣本分別于37℃溫育后，按1∶1的體積比混合；b、記錄血凝時(shí)間；c、通過標(biāo)準(zhǔn)曲線求出血漿樣本的纖維蛋白原含量。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種無(wú)需稀釋血漿樣本測(cè)定纖維蛋白原含量的方法，其特征在于所述的凝血酶采用用生化手段從動(dòng)物血或人血中提取的凝血酶，或者采用基因重組或化學(xué)修飾的凝血酶制品。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種無(wú)需稀釋血漿樣本測(cè)定纖維蛋白原含量的方法，所述的緩沖劑選自下述中的任一種；HEPES 中文名為N-2-羥乙基呱嗪-N′-2-乙磺酸TRIS中文名為三(羥甲基)氨基甲烷PB 中文名為磷酸緩沖液MOPSO 中文名為3-(N-嗎啉)-2-羥基丙磺酸。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的一種無(wú)需稀釋血漿樣本測(cè)定纖維蛋白原含量的方法，其特征在于所述的穩(wěn)定劑選自下述中的一種或幾種無(wú)機(jī)鹽、有機(jī)酸及其鹽類、多羥基化合物、氨基酸、蛋白質(zhì)；各種穩(wěn)定劑的含量如下無(wú)機(jī)鹽每100毫升本試劑含0.1-2克有機(jī)酸及其鹽類每100毫升本試劑含0.1-5克多羥基化合物 每100毫升本試劑含0.1-10克氨基酸每100毫升本試劑含0.5-10克蛋白質(zhì)每100毫升本試劑含0.05-2克。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的一種無(wú)需稀釋血漿樣本測(cè)定纖維蛋白原含量的方法，其特征在于無(wú)機(jī)鹽選自下述中的一種氯化鈣、氯化鈉、氯化鉀、溴化鈣、溴化鈉、溴化鉀、硫酸鈉、硫酸鉀；有機(jī)酸及其鹽類選自下述中的一種乙酸、丙酸、酒石酸、檸檬酸、山梨酸、乙酸鈉、丙酸鈉、酒石酸鈉、檸檬酸鈉、山梨酸鉀；多羥基化合物選項(xiàng)自下述中的一種蔗糖、乳糖、麥芽糖、甘油、聚乙二醇、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮；氨基酸選自下述中的一種甘氨酸、賴氨酸、精氨酸、組氨酸；蛋白質(zhì)選自下述中的一種牛血清白蛋白、明膠。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種無(wú)需稀釋血漿樣本測(cè)定纖維蛋白原含量的試劑及其測(cè)定方法，配制本試劑的原料組成及其含量如下凝血酶每毫升本試劑含2－20單位；緩沖劑每升本試劑含5－100毫摩爾；穩(wěn)定劑每100毫升本試劑含0.05－10克；去離子水余量。本發(fā)明的測(cè)定方法如下(1)用含穩(wěn)定劑的緩沖液配制每毫升含2－20單位凝血酶的本試劑；(2)測(cè)定方法a.將本試劑及血漿樣本分別于37℃溫育后，按1∶1的體積比混合；b.記錄血凝時(shí)間；c.通過標(biāo)準(zhǔn)曲線求出血漿樣本的纖維蛋白原含量。本發(fā)明的有益效果是測(cè)定時(shí)不用稀釋血漿樣本，使測(cè)定方法簡(jiǎn)便；降低了本試劑的制造成本；提高了測(cè)量的準(zhǔn)確度，減少了操作誤差。
文檔編號(hào)G01N33/86GK101059521SQ200710062020
公開日2007年10月24日 申請(qǐng)日期2007年5月30日 優(yōu)先權(quán)日2007年5月30日
發(fā)明者靜天玉 申請(qǐng)人:保定天岳生物工程有限公司