專利名稱：一種芙樸感冒顆粒及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及的是一種治療風(fēng)熱或風(fēng)熱挾濕感冒中成藥及其制備方法，尤其是指一種以芙蓉葉、厚樸、陳皮、牛蒡子為原料制成的顆粒劑，屬于中藥制藥技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
中藥芙蓉葉為錦葵科植物木芙蓉Hibiscus mutabilis L.或重瓣木芙蓉Hibiscus mutabilis L.cv.Plenus的干燥葉，厚樸為木蘭科植物厚樸或凹葉厚樸的干燥干皮、根皮及枝皮，陳皮為蕓香科植物橘Citrus reticulata Blanco及其栽培變種的干燥成熟果皮，牛蒡子為菊科植物牛蒡Arctium lap L.的干燥成熟果實(shí)。由上述四味配伍組成的芙樸感冒顆粒，具有清熱解毒、宣肺利咽、寬中理氣之功能，主治中醫(yī)辨證屬風(fēng)熱或風(fēng)熱夾濕感冒引起的發(fā)熱頭痛、咽痛、肢體酸痛、鼻塞、胃納減退等癥。
芙樸感冒沖劑為我公司80年代研發(fā)的新藥，源于名老中醫(yī)吳士元多年臨床驗(yàn)方，由于當(dāng)時(shí)條件所限，其制備工藝落后(采用敞口常壓濃縮、濕法制粒、熱循環(huán)烘箱干燥，其工序復(fù)雜、生產(chǎn)周期長(zhǎng)、有效成份損耗大，且質(zhì)控指標(biāo)低，無鑒別和含測(cè)項(xiàng)目)。自批準(zhǔn)生產(chǎn)至今，其處方和制法均未被公開。
在芙樸感冒沖劑的基礎(chǔ)上，1993年研發(fā)了芙樸感冒膠囊(至今獨(dú)家生產(chǎn))，現(xiàn)收于中成藥部頒標(biāo)準(zhǔn)(標(biāo)準(zhǔn)編號(hào)WS3-B-2896-98)，由于其為全浸膏制劑，易吸潮，保質(zhì)期短(常溫貯藏3個(gè)月即吸潮變性)，且在濃縮時(shí)敞口常壓，仍采用濕法制粒干燥，將浸膏濃縮至1.35～1.40(能耗大)，浸膏烘干溫度高、干燥時(shí)間長(zhǎng)，使厚樸酚等有效成份破壞較多，影響其臨床療效。由于存在上述不足，多年來無市場(chǎng)銷售。
申請(qǐng)人還于2003年7月22日提交了一份申請(qǐng)?zhí)枮?3141807.4的有關(guān)芙樸感冒藥物的申請(qǐng)，但由于該技術(shù)方案本身并不成熟，還存在許多不足，申請(qǐng)人在此基礎(chǔ)上繼續(xù)進(jìn)行研究探討，發(fā)現(xiàn)了在采取同樣的制備方法的情況下，通過實(shí)驗(yàn)研究確認(rèn)各步驟的最佳參數(shù)選擇，無論在制備過程還是制得的產(chǎn)品上均獲得了很好的效果。
本發(fā)明的芙樸感冒顆粒制備方法改進(jìn)了現(xiàn)有芙樸感冒藥物制備方法的不足，不僅延長(zhǎng)了制得的藥物的保質(zhì)期、提高了其生物利用度，而且整個(gè)制備過程中成形溫度低、干燥時(shí)間短、有效成份損失少、生產(chǎn)效率高，非常利于工業(yè)大生產(chǎn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于提供一種用中藥材芙蓉葉、厚樸、陳皮、牛蒡子(炒)為原料，針對(duì)原有芙樸感冒膠囊的制備技術(shù)進(jìn)行深入研究和創(chuàng)新，使產(chǎn)品質(zhì)量、臨床療效及生產(chǎn)效率得到明顯提高。
本發(fā)明通過以下方案予以實(shí)施。
本發(fā)明一方面提供了一種芙樸感冒顆粒劑的制備方法，其特征在于制備方法包括下列步驟(1)取原料芙蓉葉900g、厚樸150g、陳皮250g、炒牛蒡子250g；(2)取陳皮，提取揮發(fā)油，提取揮發(fā)油時(shí)蒸汽壓力控制在0.05～0.10MP，加按重量計(jì)2～4倍的水，提取3～5小時(shí)，獲得的揮發(fā)油備用；(3)將陳皮殘?jiān)c芙蓉葉、厚樸、炒牛蒡子加水煎煮二次，第一次加按重量計(jì)4～8倍的水煎煮2小時(shí)，第二次加按重量計(jì)3～6倍的水1煎煮小時(shí)，合并煎液，濾過，濃縮，冷卻，加入2倍量乙醇，靜置24小時(shí)；(4)取上清液回收乙醇，濃縮成浸膏；(5)取上述浸膏與適量蔗糖或赤砂糖經(jīng)噴霧干燥制粒法或濕法制粒法制成顆粒，噴入陳皮油悶潤4～8小時(shí)，即得，其中步驟(5)的噴霧干燥制粒法中，物料溫度為55～65℃，噴霧壓力為1.0～3.0bar，粘合劑流量為5～8Hz；濕法制粒法中，取浸膏加糖粉混勻，用制粒機(jī)制成顆粒，于50～80℃烘干。
該制備方法中的其他可選的特征有其中，步驟(3)所述的減壓濃縮液，濃縮至50℃測(cè)相對(duì)密度為1.10～1.30。
其中，步驟(4)所述的浸膏的相對(duì)密度為80℃測(cè)1.02～1.30。
本發(fā)明另一方面提供了一種上述制備方法制得的芙樸感冒顆粒。
本發(fā)明還提供了一種上述芙樸感冒顆粒的質(zhì)控方法，包括(1)陳皮薄層鑒別
取本品30g，加熱水40ml使溶解，放冷，用60~90℃的石油醚振搖提取2次，每次20ml，合并提取液，用水10ml洗滌，棄去水液，石油醚液蒸干，殘?jiān)?0~90℃的石油醚1ml使溶解，作為供試品溶液。另取陳皮對(duì)照藥材0.3g，加60~90℃的石油醚10ml，超聲處理10分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)?0~90℃的石油醚1ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，參見中國藥典2005年版一部附錄VI B，吸取供試品溶液10μl、對(duì)照藥材溶液2μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以苯-丙酮10∶2為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％三氯化鋁乙醇溶液，置紫外光燈在365nm下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；(2)牛蒡子薄層鑒別取本品30g，加甲醇60ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液置已處理好的中性氧化鋁柱上，柱的條件為100~200目、5g、內(nèi)徑10~15mm，用40％甲醇50ml洗脫，收集洗脫液，置水浴上蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取牛蒡甙對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含3mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，參見中國藥典2005年版一部附錄VI B，吸取供試品溶液2μl、對(duì)照品溶液6μl，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以氯仿-甲醇-水15∶4∶1的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈在254nm下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；再噴以10％硫酸乙醇溶液，于110℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(3)牛蒡甙含量測(cè)定方法色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-水30∶70為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為280nm，理論板數(shù)按牛蒡甙峰計(jì)算應(yīng)不低于5000；對(duì)照品溶液的制備精密稱取經(jīng)五氧化二磷干燥器中減壓干燥24小時(shí)的牛蒡甙對(duì)照品適量，用甲醇制成每1ml含0.25mg的溶液，即得；供試品溶液的制備取本品1g，精密稱定，置錐形瓶中。精密加入甲醇10ml，稱定。超聲處理20分鐘，放冷至室溫再稱定，用甲醇補(bǔ)足減失的重量。搖勻，濾過。取續(xù)濾液，以0.45μm的微孔濾膜濾過，即得；測(cè)定法精密吸取對(duì)照品溶液5μl，供試品溶液5~10μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，計(jì)算，即得。
本發(fā)明的芙樸感冒顆粒的制備方法改進(jìn)了現(xiàn)有芙樸感冒藥物制備方法的不足，通過實(shí)驗(yàn)研究確認(rèn)各步驟的最佳參數(shù)選擇，不僅延長(zhǎng)了制得的藥物的保質(zhì)期、提高了其生物利用度，而且整個(gè)制備過程中成形溫度低、干燥時(shí)間短、有效成份損失少、生產(chǎn)效率高，非常利于工業(yè)大生產(chǎn)。
由于藥品標(biāo)準(zhǔn)公布的芙樸感冒膠囊的制備方法與申請(qǐng)?zhí)枮?3141807.4的有關(guān)芙樸感冒藥物的專利申請(qǐng)中記載的制備方法基本相同，故統(tǒng)稱為原工藝，同時(shí)將本發(fā)明的制備方法稱為新工藝。雖然新工藝是在原工藝的基礎(chǔ)上對(duì)各步驟的參數(shù)以及使用的方法進(jìn)行的研究，但經(jīng)過了我們的努力和不斷嘗試，發(fā)現(xiàn)各步驟中某些特定的參數(shù)將使得整個(gè)制備方法更為優(yōu)化、更適于工業(yè)生產(chǎn)，同時(shí)制得的產(chǎn)品具有保質(zhì)期長(zhǎng)、生物利用度高的優(yōu)點(diǎn)。
下面將對(duì)我們所做的藥效學(xué)及臨床比較研究進(jìn)行描述，證明新工藝優(yōu)于原工藝，新工藝制得的產(chǎn)品也優(yōu)于原工藝制得的產(chǎn)品，具體情況如下，首先是新工藝的創(chuàng)新表現(xiàn)如下1、用噴霧干燥法制粒噴霧干燥法(一步制粒)是一種將噴霧干燥技術(shù)和流化床技術(shù)結(jié)合為一體的新型制粒工藝技術(shù)，粘合劑(中藥浸膏)在壓縮空氣的作用下從噴嘴處霧化成細(xì)小液滴，噴灑在流化床制粒室中呈流化狀態(tài)的粉末上，使之膠結(jié)成團(tuán)，制成顆粒。原工藝中并無對(duì)制粒的具體方法進(jìn)行說明，我們發(fā)現(xiàn)在眾多制粒法中噴霧干燥法制粒是最適合的，因此，選擇了這種方法。常規(guī)使用的均為濕法制粒，我們對(duì)其進(jìn)行了對(duì)比。
一步制粒與濕法制粒比，具有如下優(yōu)點(diǎn)A、顆粒溶散快、無焦屑不需攪拌，能在1min內(nèi)自動(dòng)溶解，且分散均勻；B、生產(chǎn)周期短濕法制粒需72小時(shí)以上，而采用一步制粒只需3小時(shí)；C、生產(chǎn)能力大，自動(dòng)化程度高；D、過程污染少、無需整粒。
2、改進(jìn)了浸膏干燥方法，對(duì)干燥過程中的具體參數(shù)進(jìn)行優(yōu)選。
原工藝使用蒸汽加熱揮發(fā)水分，干燥溫度高(80℃以上)，干燥時(shí)間長(zhǎng)(需72小時(shí)以上)，厚樸酚、牛蒡子甙、芙蓉葉總黃酮等有效成份損耗大，生產(chǎn)率效低。
新工藝使用噴霧干燥，干燥溫度低(60℃以下)，干燥時(shí)間短(只需3小時(shí))，有效成份相對(duì)損耗少，生產(chǎn)率效高。
3、用減壓濃縮替代常壓濃縮，對(duì)濃縮過程中的具體參數(shù)進(jìn)行優(yōu)選。
原工藝采用常壓濃縮(溫度100℃)，工藝要求濃縮至相對(duì)密度為1.35以上，不利于有效成份保留，操作工時(shí)長(zhǎng)，生產(chǎn)率效低。
新工藝采用三效節(jié)能減壓濃縮工藝，濃縮溫度低(在真空條件下，藥液沸點(diǎn)低于65℃)，耗時(shí)短(濃縮時(shí)間縮短3～5倍)，活性成份損耗少，節(jié)約能源，生產(chǎn)率效高。
4、輔料選擇合理原工藝制得的產(chǎn)品為全浸膏制劑，只用少量淀粉為輔料，其抗吸濕性差；新工藝中選用了赤砂糖為輔料，口感好、對(duì)感冒病癥治療有協(xié)同作用。服用顆粒劑須用水溶解，增加水分補(bǔ)充利于病情好轉(zhuǎn)。
5、濃縮密度的控制原工藝中浸膏的密度濃縮至1.35以上用于干燥，而新工藝中浸膏的密度只需控制在1.02～1.30即可，優(yōu)選為1.15～1.20。這有利于節(jié)約能源、減少有效成份損耗和提高生產(chǎn)效率。
6、增加了鑒別和含測(cè)項(xiàng)目藥品標(biāo)準(zhǔn)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中只有性狀和膠囊劑的常規(guī)檢查，不利于控制產(chǎn)品質(zhì)量；本發(fā)明增加了陳皮和牛蒡子薄層鑒別，增加了牛蒡子甙HPLC含測(cè)項(xiàng)。
為了驗(yàn)證本發(fā)明的新工藝制得的顆粒劑具有質(zhì)量穩(wěn)定、療效顯著、工藝合理，申請(qǐng)人進(jìn)行了一系列試驗(yàn)研究，具體如下1.新工藝制得的顆粒與原工藝制得的顆粒的穩(wěn)定性及顆粒質(zhì)量比較研究采用加速穩(wěn)定性試驗(yàn)方法，考察新工藝制得的顆粒與原工藝制得的顆粒在實(shí)驗(yàn)條件下的穩(wěn)定性情況。在加速試驗(yàn)條件下保存(溫度40℃±2℃，75％±5％RH)，于1月、2月、3月、6月考核其性狀、水分及牛蒡子甙含量。結(jié)果表明原工藝制得的顆粒易吸潮變性(見表1.1)，新工藝制得的顆粒質(zhì)量?jī)?yōu)(見表1.2)。
表1.1 新工藝制得的顆粒與原工藝制得的顆粒穩(wěn)定性比較研究
表1.2 新工藝制得的顆粒與原工藝制得的顆粒質(zhì)量比較研究 2.新工藝與原工藝對(duì)厚樸酚含量及生產(chǎn)效率的比較取芙蓉葉90kg、厚樸15kg、陳皮25kg、牛蒡子(炒)25kg，按工藝制得稠膏，取1/5烘干(原工藝)，取4/5噴霧干燥(新工藝)，比較兩者厚樸酚含量轉(zhuǎn)移率。結(jié)果表明新工藝厚樸酚含量轉(zhuǎn)移率較高(見表2.1)，且生產(chǎn)周期短、能耗少(見表2.2)。
表2.1 新工藝與原工藝成形工藝對(duì)厚樸酚含量的影響 表2.2 新工藝與原工藝成形工藝生產(chǎn)效率的比較
3.新工藝與原工藝的藥效學(xué)研究比較3.1解熱試驗(yàn)取大鼠50只，體重80±10g，雌雄各半。實(shí)驗(yàn)室溫度為24±1℃。實(shí)驗(yàn)前2天，每日上下午各測(cè)體溫一次，剔除第一次測(cè)得的體溫，實(shí)驗(yàn)日按上述方法再測(cè)一次，將體溫波動(dòng)在0.3℃以上的大鼠剔除，以四次體溫的平均值作為基礎(chǔ)體溫。測(cè)定基礎(chǔ)體溫后，按體溫隨機(jī)分成五組，于實(shí)驗(yàn)日當(dāng)天皮下注射15％鮮酵母生理鹽水混懸液1ml/100g致熱，并同時(shí)按表3劑量分別灌胃給藥，給藥體積為1.5ml/100g。陰性對(duì)照組給等體積水，新工藝制得的顆粒與原工藝制得的顆粒分高低兩種劑量，測(cè)定給藥后0.5、1、2、4、6、8、10和12小時(shí)的體溫。結(jié)果表明新工藝制得的顆粒對(duì)酵母引起的大鼠發(fā)熱有明顯的解熱作用，且優(yōu)于原工藝制得的顆粒(見表3.1)。
表3.1 新工藝制得的顆粒與原工藝制得的顆粒解熱實(shí)驗(yàn)(單位℃，n＝10，X±SD)

注與對(duì)照組比較 ***P＜0.001 **P＜0.01 *P＜0.053.2鎮(zhèn)痛試驗(yàn)(熱板法)取小鼠雌性60只，每次一只放在熱板(事先將熱板溫度調(diào)在55±1℃)上，小鼠自放在熱板上至出現(xiàn)舔后足所需時(shí)間(秒)作為該鼠的痛閾值，即痛反應(yīng)潛伏期。凡舔后足時(shí)間小于5秒或大于30秒或跳躍者棄之不用。將合格的小鼠隨機(jī)分成5組，重復(fù)測(cè)其正常痛閾值，取兩次正常痛閾值的平均值，作為該鼠給藥前的痛閾值(痛反應(yīng)潛伏期)。于實(shí)驗(yàn)前16小時(shí)按表3.2劑量先給藥一次，實(shí)驗(yàn)日再給藥一次，給藥體積為0.15ml/10g。于給藥后30min、60min、90min分別測(cè)小鼠的痛閾值(痛反應(yīng)潛伏期)。如60秒鐘仍無反應(yīng)，將小鼠取出，以免燙傷，其痛閾以60秒計(jì)算。結(jié)果表明新工藝制得的顆粒對(duì)熱板致痛有較好的鎮(zhèn)痛作用，且優(yōu)于原工藝制得的顆粒(見表3.2)。
表3.2 新工藝制得的顆粒與原工藝制得的顆粒對(duì)小鼠的鎮(zhèn)痛影響(X±SD，n＝10)

注與對(duì)照組比較**P＜0.01*P＜0.053.3抗炎試驗(yàn)(大鼠足腫脹法)取SD大鼠50只，體重135±25g，隨機(jī)分成五組，每組10只，按表3.3劑量灌胃給藥，對(duì)照組給等體積生理鹽水。給藥體積為1.5ml/100g，實(shí)驗(yàn)前一日先給藥一次(Pm17:00)，實(shí)驗(yàn)日用毛細(xì)管放大測(cè)量法測(cè)大鼠右后足跖的體積后，再給藥一次，給藥后30分鐘，于大鼠右后足跖皮下注射10％新鮮蛋清0.06ml/只致炎，分別于致炎后0.5、1、2、4、6小時(shí)測(cè)定右后足跖容積，與給藥前足跖體積比較，計(jì)算腫脹度(給藥后足跖體積-給藥前足跖體積)。結(jié)果表明新工藝制得的顆粒對(duì)蛋清引起的大鼠足跖炎癥有顯著的抑制作用，且優(yōu)于原工藝制得的顆粒(見表3.3)。
表3.3 新工藝制得的顆粒與原工藝制得的顆粒對(duì)蛋清致大鼠足跖腫脹的影響(X±SD，n＝10)

注與對(duì)照組比較，***P＜0.001**P＜0.01*P＜0.05
4.新工藝制得的顆粒(試驗(yàn)組)與原工藝制得的顆粒(對(duì)照組)臨床比較4.1一般資料選擇凡符合中醫(yī)辨證屬風(fēng)熱或風(fēng)熱挾濕感冒、西醫(yī)診斷為上呼吸道感染的患者100例，其中試驗(yàn)組50例、對(duì)照組50例。各組性別、年齡、治療前病情(證候積分值)、中醫(yī)證型等情況比較分別見表4.1、表4.2、表4.3、表4.4、表4.5。
表4.1 兩組性別情況比較

表4.2 兩組年齡分布情況比較表

表4.3 兩組治療前病情(證候積分值)比較表

表4.4 兩組中醫(yī)證型分布比較表

結(jié)果表明各組的性別、年齡、治療前病情(證候積分值)、中醫(yī)證型等情況，分別與對(duì)照組比較，無顯著差異，具有可比性(P＞0.05)。
4.2試驗(yàn)結(jié)果試驗(yàn)組50例中，臨床痊愈11例(22.0％)，顯效26例(52.0％)，有效11例(22.0％)，無效2例(4.0％)，總顯效率為74.0％，總有效率為96.0％。
表4.5 試驗(yàn)組各癥狀體征治療前后積分變化比較

結(jié)果表明治療后各癥狀積分均有非常顯著性下降，P＜0.05～0.01。
對(duì)照組50例中，臨床痊愈8例(16.0％)，顯效10例(20.0％)，有效23例(46.0％)，無效9例(18.0％)，總顯效率為36.0％，總有效率為82.0％。
表4.6 對(duì)照組各癥狀體征治療前后積分變化比較


結(jié)果表明治療后各癥狀(胸悶泛惡除外)積分均有非常顯著性下降，P＜0.05～0.01。
4.3兩組比較表4.7 兩組總體療效

結(jié)果表明兩組總體療效經(jīng)Ridit檢驗(yàn)有顯著性差異，P＜0.05。
4.4安全性評(píng)價(jià)試驗(yàn)組5例患者于治療前后分別作血、尿、糞常規(guī)、肝腎功能及心電圖等安全性檢查，結(jié)果表明未見明顯異常改變，治療前后無差異(P＞0.05)。
表4.8 安全性指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果

5.新制備工藝的研究5.1對(duì)陳皮提揮發(fā)油的加水量，罐內(nèi)壓力控制以及提取時(shí)間進(jìn)行了研究，結(jié)果表明加3倍量的水更利于揮發(fā)油的提??；罐內(nèi)壓力控制在0.05～0.10MP，保持微沸，揮發(fā)油提取率明顯提高；以出油率為指標(biāo)，提取4小時(shí)出油率已達(dá)90％以上。
表5.1.1 提揮發(fā)油加水量研究

注加水量過多，揮發(fā)油混懸于水中，不利于揮發(fā)。
表5.1.2 罐內(nèi)壓力研究

注罐內(nèi)壓力增大，水份揮發(fā)過快，不利于揮發(fā)油提取，罐內(nèi)壓力小，將延長(zhǎng)提取時(shí)間。
表5.1.3 提取時(shí)間研究

注提取時(shí)間大于4小時(shí)，出油率無明顯提高。
5.2對(duì)煎煮加水量進(jìn)行了研究，結(jié)果表明，第一煎加6倍量水，第二煎加4倍量水的出膏率最合理。
表5.2 加水量研究

注加水量過少時(shí)出膏率明顯降低，加水量過大時(shí)出膏率及含測(cè)指標(biāo)無明顯提高。
5.3對(duì)乙醇用量及方法進(jìn)行了研究，結(jié)果表明加2倍量乙醇是合理的，加入乙醇時(shí)的藥液溫度應(yīng)低于50℃，加乙醇時(shí)應(yīng)不斷攪拌。
表5.3 乙醇用量研究

注乙醇用量減少后醇沉液不清，不利于去除雜質(zhì)。
5.4對(duì)醇沉靜置時(shí)間取液方法進(jìn)行了研究，結(jié)果表明靜置24小時(shí)是合理的，取液宜用虹吸法。
表5.4 靜置時(shí)間研究

5.5對(duì)回收乙醇后的濃縮液相對(duì)密度進(jìn)行了研究，結(jié)果表明相對(duì)密度1.15是合理的。
表5.5 相對(duì)密度研究

5.6對(duì)噴霧干燥的工藝參數(shù)研究噴霧壓力有助于將流體狀液滴細(xì)化成霧狀小液滴，增大液滴的覆蓋面積，不易結(jié)塊。但噴霧壓力過大，液滴粒徑太小，大部分小液滴在未撞擊到粉末粒子表面就已經(jīng)變成干粉；噴霧壓力過小，容易形成較大的液滴，顆粒成長(zhǎng)過快，內(nèi)部來不及干燥，水份偏高。
物料流速與液滴的粒徑成正比，流速增加，粒徑增大。但流速過大會(huì)使得顆粒來不及干燥，易形成白心顆粒；而流速過小延長(zhǎng)噴霧時(shí)間，且小液滴易被帶向過濾室。
流化床溫度過高，液滴干燥過快，在下降的過程中由于自身的膨脹作用，密度減小，容易形成中空顆粒，大而不實(shí)；溫度過低會(huì)造成顆粒結(jié)塊、粘壁以致死床。所以選擇噴霧壓力、物料流速、流化床溫度作為考察因素，選用L9(34)正交表進(jìn)行試驗(yàn)，對(duì)顆粒的一次行合格率進(jìn)行考察(見表5.6.1)表5.6.1 因素水平表

注(1)顆粒的粒徑要求在10~30目之間，大于10目或小于30目的顆粒都被判為不合格；(2)水分≤1.5％判為合格。
正交試驗(yàn)表及結(jié)果由方差分析表可以看出，A、B、C三個(gè)因素對(duì)顆粒的一次性合格率影響程度不同，各因素的影響程度依次為B＞C＞A，其中，B對(duì)制粒的合格率有顯著的影響。
表2 L9(34)正交試驗(yàn)表


表2結(jié)果表明，一次性合格率最高的是第5號(hào)試驗(yàn)，即最優(yōu)組合是A2B2C3，而預(yù)計(jì)最優(yōu)組合是A2B2C2，其中的差別在于對(duì)水平因素C項(xiàng)的選擇不同，通過對(duì)A2B2C2組合進(jìn)行試驗(yàn)，同A2B2C3進(jìn)行對(duì)比，結(jié)果A2B2C3組合優(yōu)，故最優(yōu)組合工藝條件為浸膏流速(5～8Hz)、物溫(55～65)、噴霧壓力(1.0～3.0bar)。
6.質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)的研究6.1陳皮薄層鑒別取本品30g，加熱水40ml使溶解，放冷，用石油醚(60~90℃)振搖提取2次，每次20ml，合并提取液，用水10ml洗滌，棄去水液，石油醚液蒸干，殘?jiān)邮兔?60~90℃)1ml使溶解，作為供試品溶液。另取陳皮對(duì)照藥材0.3g，加石油醚(60~90℃)10ml，超聲處理10分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)邮兔?60~90℃)1ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品溶液10μl、對(duì)照藥材溶液2μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以苯-丙酮(10∶2)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％三氯化鋁乙醇溶液，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
結(jié)果表明方法簡(jiǎn)便，圖譜清晰，缺味無干擾。
6.2牛蒡子薄層鑒別取本品30g，加甲醇60ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液置已處理好的中性氧化鋁柱(100~200目，5g，內(nèi)徑10~15mm)上，用40％甲醇50ml洗脫，收集洗脫液，置水浴上蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取牛蒡甙對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含3mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品溶液2μl、對(duì)照品溶液6μl，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以氯仿-甲醇-水(15∶4∶1)的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(254nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；再噴以10％硫酸乙醇溶液，于110℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
結(jié)果表明方法可行，圖譜清晰，缺味無干擾。
6.3牛蒡子苷含量測(cè)定方法研究6.3.1儀器與試藥SSI IV型高效液相色譜儀(美國)，Model 201紫外檢測(cè)器，Anastar色譜工作站。
牛蒡甙對(duì)照品由中國藥品生物制品檢定所提供，批號(hào)819-9401，純度為98.1％，乙腈為色譜純，試劑均為分析純。
6.3.2測(cè)定波長(zhǎng)的選擇牛蒡甙對(duì)照品溶液與芙樸感冒顆粒的醇提液在280nm處均有最大吸收，故本含量測(cè)定項(xiàng)選擇280nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)。有報(bào)道在270nm作為檢測(cè)波長(zhǎng)，但此吸收峰型較銳，在280nm測(cè)定的峰面積要比270nm高30％，故選擇280nm為檢測(cè)波長(zhǎng)較為合理。
6.3.3色譜條件色譜柱Sumtek C18(250mm×4.6mm)；流動(dòng)相乙腈-水(30∶70)；檢測(cè)波長(zhǎng)280nm，檢測(cè)靈敏度0.1AFUS；室溫，流速1.0ml/min，色譜柱的理論塔板數(shù)按牛蒡甙峰計(jì)算大于5000，分離度大于2。
曾根據(jù)有關(guān)文獻(xiàn)，本文也考察了甲醇-水流動(dòng)相體系，結(jié)果分離效果不理想，也分別試驗(yàn)了乙腈-水多種比例，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明以乙腈-水(30∶70)作為流動(dòng)相，得到了較理想的效果，特征峰保留時(shí)間在8min左右，故本文選擇了乙腈-水(30∶70)為流動(dòng)相。
6.3.4提取條件的選擇根據(jù)牛蒡甙的性質(zhì)及常用提取方法，考察芙樸感冒顆粒用超聲提取、回流及水溶醇提方法，并對(duì)不同溶劑和提取時(shí)間進(jìn)行了綜合考察，結(jié)果表明以甲醇超聲處理20分鐘的提取方法為最佳。
提取方法及溶劑的選擇

超聲時(shí)間的選擇

6.3.5線性關(guān)系考察精密稱取經(jīng)五氧化二磷干燥器中減壓干燥24小時(shí)的牛蒡甙對(duì)照品適量，加甲醇配成每ml含牛蒡甙0.2467mg對(duì)照品溶液。精密吸取對(duì)照品溶液1、2、4、6、8、10μl，注入高效液相色譜儀，按上述色譜條件進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果見表3。以牛蒡甙吸收峰面積的積分值為縱坐標(biāo)Y，進(jìn)樣量X(μg)為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
線性關(guān)系考察

線性回歸方程Y＝-3988.1+367007.2XR＝1 在0.2476～2.476μg范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。
6.3.6對(duì)照品溶液與供試品溶液的制備對(duì)照品溶液的制備精密稱取經(jīng)五氧化二磷干燥器中減壓干燥24小時(shí)的牛蒡甙對(duì)照品適量，用甲醇制成每1ml含0.25mg的溶液，即得。
供試品溶液的制備取本品1g，精密稱定，置錐形瓶中，精密加入甲醇10ml，稱定，超聲處理20分鐘，放置室溫，再稱定，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，以微孔濾膜(0.45μm)濾過，即得。
6.3.7精密度試驗(yàn)精密吸取供試品溶液10μl，注入高效液相色譜儀，重復(fù)進(jìn)樣6次，得到牛蒡甙峰面積(見表4)，結(jié)果RSD＝0.49％(n＝6)。
精密度試驗(yàn)

6.3.8穩(wěn)定性試驗(yàn)精密吸取同一供試品溶液10μl，每間隔一定時(shí)間測(cè)定一次，共測(cè)定6次，結(jié)果表明供試品溶液在32小時(shí)內(nèi)基本穩(wěn)定，RSD＝0.54％，n＝6。
穩(wěn)定性試驗(yàn)

6.3.9空白試驗(yàn)按處方配比投入缺牛蒡子的其它中藥材和輔料，制成空白制劑，按供試品色譜的提取方法與色譜條件測(cè)試，結(jié)果在牛蒡甙對(duì)照峰處未出現(xiàn)色譜峰，因此不干擾測(cè)定。
6.3.10重現(xiàn)性試驗(yàn)精密稱取同一批號(hào)芙樸感冒顆粒6份，依法測(cè)定，數(shù)據(jù)見表6，結(jié)果RSD為1.62％(n＝6)。

6.3.11回收率試驗(yàn)精密稱取已知含量的芙樸感冒顆粒約0.25g，共6份，精密加入牛蒡甙對(duì)照品適量，按供試品溶液制備法制備，依法測(cè)定。
芙樸感冒顆粒中牛蒡甙的回收率

本測(cè)定方法的回收率為99.97％(n＝6)，RSD為1.80％。
具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說明，下述各實(shí)施例僅用于說明本發(fā)明，但對(duì)本發(fā)明并沒有限制。
實(shí)施例一按處方比例稱取芙蓉葉900g、厚樸150g、陳皮250g、牛蒡子(炒)250g，取陳皮，加3倍量水，提取揮發(fā)油4小時(shí)，提取罐內(nèi)壓力控制在0.05～0.10MP，收集并分離揮發(fā)油，備用。將陳皮殘?jiān)c芙蓉葉、厚樸、牛蒡子(炒)加水煎煮2次，第一次2小時(shí)(加6倍量水)，第二次1小時(shí)(加4倍量水)，合并煎液，過濾，將濾液濃縮至相對(duì)密度為1.15～1.20，加入2倍量的乙醇進(jìn)行醇沉，靜置24小時(shí)，取上清液，回收乙醇，將藥液濃縮成為相對(duì)密度約為1.15～1.18的浸膏，備用。取上述浸膏與赤砂糖粉混勻后噴霧制粒，物料溫度為55～65℃，噴霧壓力為1.0～3.0bar，粘合劑流量為5～8Hz，噴入陳皮揮發(fā)油悶潤4～8小時(shí)，即得。
實(shí)施例二按處方比例稱取芙蓉葉900g、厚樸150g、陳皮250g、牛蒡子(炒)250g，取陳皮，加2倍量水，提取揮發(fā)油3小時(shí)，提取罐內(nèi)壓力控制在0.05～0.10MP，收集并分離揮發(fā)油備用。將陳皮殘?jiān)c芙蓉葉、厚樸、牛蒡子(炒)合并加水煎煮2次，第一次2小時(shí)(加4倍量水)，第二次1小時(shí)(加3倍量水)，合并煎液，過濾，將濾液濃縮至相對(duì)密度為1.10～1.15，加入2倍量的乙醇進(jìn)行醇沉，靜置24小時(shí)，取上清液，回收乙醇，將藥液濃縮成為相對(duì)密度為1.02～1.15的浸膏，備用。取上述浸膏與蔗糖細(xì)粉混勻，用制粒機(jī)制成顆粒，于50～80℃烘干，得顆粒1000g。
實(shí)施例三按處方比例稱取芙蓉葉900g、厚樸150g、陳皮250g、牛蒡子(炒)250g，取陳皮，加4倍量水，提取揮發(fā)油5小時(shí)，提取罐內(nèi)壓力控制在0.05～0.10MP，收集并分離揮發(fā)油備用。將陳皮殘?jiān)c芙蓉葉、厚樸、炒牛蒡子合并加水煎煮2次，第一次2小時(shí)(加8倍量水)，第二次1小時(shí)(加6倍量水)，合并煎液，過濾，將濾液濃縮至相對(duì)密度為1.20～1.30，加入2倍量的乙醇進(jìn)行醇沉，靜置24小時(shí)，取上清液，回收乙醇，將藥液濃縮成為相對(duì)密度為1.18～1.30的浸膏，備用。取上述浸膏與蔗糖粉混勻后噴霧制粒，物料溫度為55～65℃，噴霧壓力為1.0～3.0bar，粘合劑流量為5～8Hz，噴入陳皮揮發(fā)油悶潤4～8小時(shí)，即得。
權(quán)利要求
1.一種芙樸感冒顆粒的制備方法，其特征在于制備方法包括下列步驟(1)取原料芙蓉葉900g、厚樸150g、陳皮250g、炒牛蒡子250g；(2)取陳皮，提取揮發(fā)油，提取揮發(fā)油時(shí)蒸汽壓力控制在0.05～0.10MP，加按重量計(jì)2～4倍的水，提取3～5小時(shí)，獲得的揮發(fā)油備用；(3)將陳皮殘?jiān)c芙蓉葉、厚樸、炒牛蒡子加水煎煮二次，第一次加按重量計(jì)4～8倍的水煎煮2小時(shí)，第二次加按重量計(jì)3～6倍的水1煎煮小時(shí)，合并煎液，濾過，濃縮，冷卻，加入2倍量乙醇，靜置24小時(shí)；(4)取上清液回收乙醇，濃縮成浸膏；(5)取上述浸膏與適量蔗糖或赤砂糖經(jīng)噴霧干燥制粒法或濕法制粒法制成顆粒，噴入陳皮油悶潤4～8小時(shí)，即得。其中步驟(5)的噴霧干燥制粒法中，物料溫度為55～65℃，噴霧壓力為1.0～3.0bar，粘合劑流量為5～8Hz；濕法制粒法中，取浸膏加糖粉混勻，用制粒機(jī)制成顆粒，于50～80℃烘干。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種芙樸感冒顆粒的制備方法，其特征在于步驟(3)所述的減壓濃縮液，濃縮至50℃測(cè)相對(duì)密度為1.10～1.30。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種芙樸感冒顆粒的制備方法，其特征在于步驟(4)所述的浸膏的相對(duì)密度為80℃測(cè)1.02～1.30。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的制備方法制得的芙樸感冒顆粒。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的芙樸感冒顆粒的質(zhì)控方法，其特征在于其質(zhì)控方法包括下列內(nèi)容(1)陳皮薄層鑒別取本品30g，加熱水40ml使溶解，放冷，用60~90℃的石油醚振搖提取2次，每次20ml，合并提取液，用水10ml洗滌，棄去水液，石油醚液蒸干，殘?jiān)?0~90℃的石油醚1ml使溶解，作為供試品溶液；另取陳皮對(duì)照藥材0.3g，加60~90℃的石油醚10ml，超聲處理10分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)?0～90℃的石油醚1ml使溶解，作為對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，參見中國藥典2005年版一部附錄VI B，吸取供試品溶液10μl、對(duì)照藥材溶液2μl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以苯-丙酮10∶2為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％三氯化鋁乙醇溶液，置紫外光燈在365nm下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；(2)牛蒡子薄層鑒別取本品30g，加甲醇60ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液置已處理好的中性氧化鋁柱上，柱的條件為100~200目、5g、內(nèi)徑10~15mm，用40％甲醇50ml洗脫，收集洗脫液，置水浴上蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取牛蒡甙對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含3mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，參見中國藥典2005年版一部附錄VI B，吸取供試品溶液2μl、對(duì)照品溶液6μl，分別點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上，以氯仿-甲醇-水15∶4∶1的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈在254nm下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；再噴以10％硫酸乙醇溶液，于110℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；(3)牛蒡甙含量測(cè)定方法色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-水30∶70為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為280nm，理論板數(shù)按牛蒡甙峰計(jì)算應(yīng)不低于5000；對(duì)照品溶液的制備精密稱取經(jīng)五氧化二磷干燥器中減壓干燥24小時(shí)的牛蒡甙對(duì)照品適量，用甲醇制成每1ml含0.25mg的溶液，即得；供試品溶液的制備取本品1g，精密稱定，置錐形瓶中；精密加入甲醇10ml，稱定。超聲處理20分鐘，放冷至室溫再稱定，用甲醇補(bǔ)足減失的重量；搖勻，濾過。取續(xù)濾液，以0.45μm的微孔濾膜濾過，即得；測(cè)定法精密吸取對(duì)照品溶液5μl，供試品溶液5~10μl，注入液相色譜儀，測(cè)定，計(jì)算，即得。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種芙樸感冒顆粒的制備方法和質(zhì)控方法，它是以芙蓉葉、厚樸、陳皮、牛蒡子(炒)為原料，取陳皮提取揮發(fā)油，將陳皮殘?jiān)c芙蓉葉、厚樸、牛蒡子(炒)加水煎煮，合并煎液，減壓濃縮，醇沉，靜置，回收乙醇，濃縮成稠膏，將稠膏與適量輔料制成顆粒。本發(fā)明的芙樸感冒顆粒改進(jìn)了原工藝的不足，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定、有效成分保留率高、療效顯著、生產(chǎn)效率高，未見不良反應(yīng)，其制備方法及質(zhì)控方法成熟合理可行。
文檔編號(hào)G01N30/00GK101053603SQ20071008721
公開日2007年10月17日 申請(qǐng)日期2007年3月21日 優(yōu)先權(quán)日2006年9月5日
發(fā)明者王天亮, 樊雪君, 王永華 申請(qǐng)人:浙江天一堂集團(tuán)有限公司