專利名稱：：用于檢測激素的磁顆粒競爭法化學(xué)發(fā)光免疫分析測定試劑盒及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及免疫分析醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，具體地，本發(fā)明提供了一種磁顆粒竟?fàn)幏ɑ瘜W(xué)發(fā)光免疫分析定量測定試劑盒及其制備方法。
背景技術(shù)：
：由于納米材料的表面效應(yīng)、量子尺寸效應(yīng)及宏觀量子隧道效應(yīng)等，使得納米材料在許多領(lǐng)域呈現(xiàn)出常規(guī)材料所不具備的特性，"納米材料"、"納米技術(shù)"已經(jīng)滲透到日常生活的各個(gè)領(lǐng)域。因此，納米材料具有十分廣泛的應(yīng)用前景。納米技術(shù)引入現(xiàn)代醫(yī)學(xué)即形成了栽藥納米顆粒，納米顆粒的尺寸一般比生物體內(nèi)的細(xì)胞小得多，這就為生物學(xué)研究提供了一個(gè)新的研究途徑，即利用納米顆粒進(jìn)行細(xì)胞分離及利用納米顆粒制成特殊藥物或新型抗體進(jìn)行局部定向治療等。磁納米顆粒具有超順磁性，在磁場下具磁場響應(yīng)性，將磁顆粒應(yīng)用于免疫檢測的固相，將大大提高反應(yīng)的表面積，更容易進(jìn)行固相、液相分離，可提高檢測的靈敏度。采用微小的磁顆粒作為固相可增加包被表面積，從而增加抗原或抗體的吸附量，既加快了反應(yīng)速度，也使清洗和分離更簡便。近十年來標(biāo)記免疫分析技術(shù)的研究和應(yīng)用發(fā)展迅速，已廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)理論研究及臨床疾病診斷各領(lǐng)域。其中技術(shù)工藝成熟，具有先進(jìn)性且實(shí)用性強(qiáng)，易于推廣的主要有放射免疫分析、酶免疫分析、時(shí)間分辨熒光免疫分析和化學(xué)發(fā)光免疫分析等四種。磁化學(xué)發(fā)光技術(shù)是酶標(biāo)記免疫技術(shù)的新發(fā)展，該技術(shù)以微米級磁顆粒為栽體，利用表面有機(jī)物提供的羧基活性基團(tuán)與蛋白質(zhì)氨基共價(jià)結(jié)合，采用抗體進(jìn)行"搭橋"成免疫磁顆粒，可進(jìn)行抗原、抗體反應(yīng)。該技術(shù)的新穎之處有(l)利用順磁鐵顆粒為固相載體，外包被單克隆抗體，增加抗原、抗體的接觸面積及底物發(fā)光面積，提高反應(yīng)的靈敏度，并采用旋轉(zhuǎn)磁場使磁顆粒起攪拌作用及分離結(jié)合抗原-抗體與游離抗體的作用；(2)在液相反應(yīng)中，使用發(fā)光增強(qiáng)劑，將水分子從發(fā)光底物的發(fā)光位點(diǎn)排開，同時(shí)還可縮短發(fā)光的達(dá)峰時(shí)間；(3)金剛烷衍生物是理想的堿性磷酸酶發(fā)光底物，酶促反應(yīng)摩爾衰退系數(shù)達(dá)18,600mol/(s.cm),發(fā)光時(shí)間長，信號強(qiáng)，檢出限量可達(dá)10"Sg/mL;(4)采用單克隆抗體，提高了反應(yīng)的特異性?，F(xiàn)有國外的化學(xué)發(fā)光免疫分析試劑盒為封閉式全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光測量系統(tǒng)，需要昂貴的全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光測量儀，從而限制了推廣使用，無法廣泛地應(yīng)用于臨床診斷和科研工作。本發(fā)明的試劑盒可應(yīng)用于開放式的化學(xué)發(fā)光測量儀，可以通過磁顆粒分離劑，操作簡便，使用成本低，更易推廣應(yīng)用。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明同時(shí)解決了上述問題，即將磁顆粒技術(shù)與化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)有效地結(jié)合，提供了一種能夠簡便、快速、靈敏、穩(wěn)定地檢測試劑盒，該試劑盒適于在產(chǎn)業(yè)上有效地推廣應(yīng)用。本發(fā)明的目的是提供一種用于檢測激素的磁顆粒竟?fàn)幏ɑ瘜W(xué)發(fā)光免疫分析定量測定試劑盒。本發(fā)明的再一目的是提供一種制備上述試劑盒的方法。根據(jù)本發(fā)明的試劑盒包括1)校準(zhǔn)品；2)包被激素抗體的磁顆粒；3)酶標(biāo)記的激素抗原；以及4)上述酶所作用的化學(xué)發(fā)光底物。根據(jù)本發(fā)明的試劑盒，其中，所述標(biāo)記酶為堿性磷酸酶或辣根過氧化物酵。根據(jù)本發(fā)明的試劑盒，其中，所述化學(xué)發(fā)光底物為1,2-二氧乙烷類衍生物、魯米諾或異魯米諾。優(yōu)選地，上述試劑盒中，所述1，2-二氧乙烷類衍生物為(金剛烷)-1，2-二氧乙烷、3-(2'-螺旋金剛烷)-4-曱氧基-4-(3"-磷酰氧基)苯基-l，2-二氧乙烷、CSPD或CDP-Star。進(jìn)一步，根據(jù)本發(fā)明的制備上述試劑盒的方法包括以下步驟1)以純品原^F配制4交準(zhǔn)品；2)以激素抗體包被J茲顆粒；3)用酶標(biāo)記激素抗原；4)分裝上述校準(zhǔn)品、酶標(biāo)記抗原和該酶所作用的化學(xué)發(fā)光底物；以及5)組裝為成品。在根據(jù)本發(fā)明的方法中，在所述包被步驟2)中激素抗體包被的磁顆粒為13pm粒徑、四氧化三鐵內(nèi)核、表面包裹帶有活性基團(tuán)如氨基(NH2-)、羧基(-COOH)的聚合物，其使用濃度為5~10mg/mL;通過碳二亞胺法進(jìn)行包被磁顆粒；以封閉液封閉包被的磁顆粒，所述封閉液為含有1.0%牛血清白蛋白、1.0%酪蛋白、pH值為7.4的0.05mol/L磷酸緩沖液。在標(biāo)記步驟3)中，所述酶標(biāo)記抗原以20~50%小牛血清配制而成。在上述方法中，優(yōu)選，所述酶為堿性磷酸酶或辣根過氧化物酶。在上述方法中，優(yōu)選，所述化學(xué)發(fā)光底物為1,2-二氧乙烷類衍生物、魯米諾或異魯米諾。在上述方法中，優(yōu)選，所迷1，2-二氧乙烷類衍生物為(金剛烷)-1,2-二氧乙烷、3-(2'-螺旋金剛烷)-4-曱氧基-4-(3"-磷酰氧基)苯基-l,2-二氧乙烷、CSPD或CDP-Star。具體的上述試劑盒可以包括校準(zhǔn)品、包被抗體的磁顆粒、酶標(biāo)記物、化學(xué)發(fā)光底物液與洗滌緩沖液等。其中，所述校準(zhǔn)品的原料為標(biāo)準(zhǔn)級，純度不低于90%;激素抗體包被于磁顆粒上；標(biāo)記酶為偶聯(lián)堿性磷酸酶或辣根過氧化物酶；化學(xué)發(fā)光底物液為3-(2'-螺旋金剛烷)-4-曱氧基-4-(3"-磷酰氧基)苯基-l,2-二氧乙烷(AMPPD)或魯米諾(Luminol);洗滌緩沖液為Tris-HCl。本發(fā)明"用于檢測激素的磁顆粒竟?fàn)幏ɑ瘜W(xué)發(fā)光免疫分析定量測定試劑盒"具有簡便、快速、靈敏、穩(wěn)定等優(yōu)點(diǎn)。該測定試劑盒的各項(xiàng)指標(biāo)均達(dá)到或超過酶聯(lián)免疫分析法。并且，根據(jù)本發(fā)明的檢測系統(tǒng)為開放式操作，簡便快速，不需要昂貴的全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光測量儀，特別適合廣大的中小醫(yī)院推廣使用，為臨床診斷和科研工作提供一種非常有價(jià)值的檢測手段。根據(jù)本發(fā)明的試劑盒，采用"竟?fàn)幰徊椒ǎ磻?yīng)模式，既有效地利用了磁顆粒技術(shù)和化學(xué)發(fā)光技術(shù)原理，又確保了檢測的靈敏度。另外，這種模式還便于操作和生產(chǎn)。本發(fā)明的試劑盒應(yīng)用的是酶催化發(fā)光底物，通過檢測發(fā)光底物產(chǎn)生的光信號代替酶聯(lián)免疫分析中的顯色底物，因而具有與酶聯(lián)免疫分析同等的特異性，而靈敏度大大提高，比現(xiàn)今的酶聯(lián)免疫吸附分析靈敏度提高約IO倍，可為臨床診斷提供更為特異、快速、可靠的依據(jù)。圖1顯示了北華醫(yī)院用本發(fā)明的T4磁顆粒竟?fàn)幏ɑ瘜W(xué)發(fā)光免疫分析定量測定試劑盒和天津新灣試劑盒檢測66份病人相關(guān)性的結(jié)果，其中，天津新灣試劑盒的測定值為X軸，本發(fā)明的試劑盒的測定值為Y軸，結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理得相關(guān)系數(shù)r=0.9855,y=0.9352x+4.0471。圖2顯示了北華醫(yī)院用本發(fā)明的T磁顆粒竟?fàn)幏ɑ瘜W(xué)發(fā)光免疫分析定量測定試劑盒和天津新灣試劑盒^r測60份病人相關(guān)性的結(jié)果，其中，天津新灣試劑盒的測定值為X軸，本發(fā)明的試劑盒的測定值為Y軸，結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理得相關(guān)系數(shù)r=0.9846，y=0.920lx+0.1906。具體實(shí)施例方式實(shí)施例1制備本發(fā)明的甲狀腺素(T4)磁顆粒竟?fàn)幏ɑ瘜W(xué)發(fā)光免疫分析定量測定試劑盒(采用堿性磷酸酶制備標(biāo)記物)一、才示i己物制備堿性磷酸酶標(biāo)記T4抗原采用戊二醛法，具體標(biāo)記過程如下按堿性磷酸酶T4抗原=1:2的比例混合，加入混合液體積10%的標(biāo)記用戊二醛，混勻后室溫反應(yīng)1~2小時(shí)。將溶液轉(zhuǎn)入透析袋中，用50mMpH7.4的PBS溶液透析過夜，中間換液兩次。將溶液轉(zhuǎn)入玻璃瓶中，加入等量優(yōu)質(zhì)丙三醇，混勻后，-20。C以下保存。二、T4校準(zhǔn)品的制備用T4純品配制，分裝O、10、25、50、150、300ng/mL共6瓶。三、標(biāo)記抗原濃度選定采用方陣法選擇標(biāo)記抗原的工作濃度大于1:3000。四、》茲顆4立的制備將粒徑為1~3nm的磁顆粒子加磁場，靜置510min,倒出上清，用pH值為7.4的0.01mol/L磷酸鹽緩沖液清洗三次，并用該溶液進(jìn)行懸浮，濃度為10~20mg/mL;每毫升懸浮液中加入T4抗體100~200嗎和EDC，在4。C下攪拌過夜后，加磁場，靜置5~10min，倒出上清，用含有0.5%~1.0%牛血清白蛋白、0.5%~1.0%酪蛋白、0.02mol/L的磷酸緩沖液(pH為7.4)于室溫封閉3~4小時(shí)；最后用pH值為7.4、含0.5%BSA的0.05mol/LTris-HCl緩沖液清洗3~5次，并用該溶液配制成810mg/mL的工作液。磁顆粒在4。C保存，不應(yīng)凍存，用時(shí)輕輕搖勻。五、標(biāo)記抗原稀釋液Tris12.12gBSA5gProclin1mL雙蒸水1000mL六、化學(xué)發(fā)光底物液NaH2P042H204gNa2HP04.12H2026g雙蒸水1000mLProclin3001mLAMPPD200mL溶解后混合均勻。七、洗滌緩沖液Tris24gNaCl160gKC14gHC115mL去離子水1000mL調(diào)整pH值至7.4。八、半成品及成品組成上述步驟所得產(chǎn)品分裝即為半成品。抽出三份經(jīng)過特異性、精密性、靈敏度及穩(wěn)定性檢定合格才能組裝成T4磁顆粒竟?fàn)幏ɑ瘜W(xué)發(fā)光免疫分析定量測定試劑盒，組裝成試劑盒后還需抽檢合格后才能出廠。按本領(lǐng)域中常規(guī)的制造及檢定規(guī)程對制備的試劑盒進(jìn)行檢定，結(jié)果見下表1:表1<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>北華醫(yī)院用本發(fā)明的曱狀腺素(T4)磁顆粒竟?fàn)幏ɑ瘜W(xué)發(fā)光免疫分析定量測定試劑盒和天津新灣試劑盒檢測66份病人，結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理得相關(guān)系數(shù)r=0.9855，y=0.9352x+4.0471。說明曱狀腺素(T4)f茲顆粒竟?fàn)幏ɑ瘜W(xué)發(fā)光免疫分析定量測定試劑盒的臨床符合率、準(zhǔn)確性、特異性、精密性、靈敏度和穩(wěn)定性是完全合格的。本發(fā)明的試劑盒還可以檢測下列激素曱狀腺功能系列其中，所述用于檢測曱狀腺功能的激素為游離曱狀腺素(FT4)、三硤曱腺原氨酸(T3)、游離三碘曱腺原氨酸(FT3)或3,3',5'—反三碘曱腺原氨酸(rT3)。綜上，在本發(fā)明的研究過程中，本發(fā)明的發(fā)明人首先對所用的原材料進(jìn)行了歸選試驗(yàn)和質(zhì)量鑒定，包括標(biāo)記抗原與包被抗體的活性、磁顆粒的吸附性能和變異大小、酶的活性、化學(xué)發(fā)光底物的發(fā)光強(qiáng)度及發(fā)光持續(xù)時(shí)間等。然后對包被方法進(jìn)行了研究，用不同的包被液和封閉液進(jìn)行試驗(yàn)，選擇出最適合的包被液和封閉液，通過抗體不同包被濃度試驗(yàn)找到最佳的濃度條件。對于酶的標(biāo)記可以有不同的方法，通過反復(fù)探索和對比實(shí)驗(yàn)最終找到了簡便、產(chǎn)率高、成本低、質(zhì)量可靠的標(biāo)記方法，并對不同的酶稀釋液進(jìn)行了長期的考察試驗(yàn)，配制出了能夠使酶標(biāo)記物長期保持活性穩(wěn)定的稀釋液。本發(fā)明的發(fā)明人還對試劑盒的反應(yīng)模式和反應(yīng)條件進(jìn)行了試驗(yàn)研究，最終確定了竟?fàn)幰徊椒ǚ磻?yīng)模式，并就不同的反應(yīng)時(shí)間對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響進(jìn)行了試驗(yàn)，確定最適合的反應(yīng)時(shí)間。通過對化學(xué)發(fā)光底物液發(fā)光持續(xù)時(shí)間的測定及不同發(fā)光時(shí)間對測定值的影響試驗(yàn)表明在加入化學(xué)發(fā)光底物液后5~30分鐘之間進(jìn)行測量為最佳，其結(jié)果也較為準(zhǔn)確。實(shí)施例2制備本發(fā)明的甲狀腺素(T4)磁顆粒竟?fàn)幏ɑ瘜W(xué)發(fā)光免疫分析定量測定試劑盒(采用辣根過氧化物酶制備標(biāo)記物)辣根過氧化物酶標(biāo)記T4抗原采用高碘酸鈉氧化法，具體標(biāo)記過程如下稱取5mgHRP溶解于1mL雙蒸水中。于上述溶液中加入0.2mL新配的0.1MNaK)4溶液，室溫下避光攪拌20分鐘。加20pL0.2MpH9.5的碳酸鹽緩沖液，使以上醛化HRP的pH升高到9.0~9.5,然后立即加入10mgT4抗原在1mL0.01M碳酸鹽緩沖液中，室溫避光輕輕攪拌2小時(shí)。將上述溶液裝入透析袋中，對0.15MpH7.4PBS透析，4'C過夜。10,000rpm離心30分鐘去除沉淀，上清液即為酶結(jié)合物，加入等量優(yōu)質(zhì)丙三醇，分裝后，-20°0!保存。除以辣根過氧化物酶標(biāo)記T4抗原、以魯米諾(Luminol)作為化學(xué)發(fā)光底物外，使用與實(shí)施例1相同的方法制備此T4磁顆粒竟?fàn)幏ɑ瘜W(xué)發(fā)光免疫分析定量測定試劑盒。實(shí)施例3制備本發(fā)明的睪酮(T)磁顆粒竟?fàn)幏ɑ瘜W(xué)發(fā)光免疫分析定量測定試劑盒除以T抗體包被》茲顆粒、以酶標(biāo)記T抗原制備酶標(biāo)記物、校準(zhǔn)品濃度為0、0.5、1.0、2.5、10、20ng/mL以外，使用與實(shí)施例l、2相同的方法制備T磁顆粒竟?fàn)幏ɑ瘜W(xué)發(fā)光免疫分析定量測定試劑盒。按本領(lǐng)域中常規(guī)的制造及檢定規(guī)程對制備的試劑盒進(jìn)行檢定，結(jié)果見下表2:表2<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>北華醫(yī)院用本發(fā)明的睪酮(T)磁顆粒竟?fàn)幏ɑ瘜W(xué)發(fā)光免疫分析定量測定試劑盒和天津新灣試劑盒檢測60份病人，結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理得相關(guān)系數(shù)r=0.9846，y-0.9201X+0.1906。說明睪酮(T)磁顆粒竟?fàn)幏ɑ瘜W(xué)發(fā)光免疫分析定量測定試劑盒的臨床符合率、準(zhǔn)確性、特異性、精密性、靈敏度和穩(wěn)定性是完全合格的。本發(fā)明的試劑盒還可以檢測下列激素性激素系列其中，所述性激素為孕酮(P)、雌二醇(E2)或雌三醇(E3)。這些試劑盒均可采用本發(fā)明所提供的制備方法，只是所采用的抗原、抗體名稱不同，其組成、制備方法和檢測原理均相同。實(shí)施例4本發(fā)明的磁顆粒竟?fàn)幏ɑ瘜W(xué)發(fā)光免疫分析定量測定試劑盒的使用方法實(shí)施例1制備的T4磁顆粒竟?fàn)幏ɑ瘜W(xué)發(fā)光免疫分析定量測定試劑盒的具體操作如下1)自4。C冰箱中取出試劑盒，室溫平衡15分鐘；2)將圓底聚苯乙烯試管編號；3)反應(yīng)管中分別加待測樣本和各濃度校準(zhǔn)品每孔加O、10、25、50、150、300ng/mL各50nL,然后各孔加標(biāo)記物100^L,再加磁分離劑100^L，用微量震蕩器充分振蕩混勻，室溫溫育1小時(shí)；4)將各管插入磁分離器上，放置2分鐘后，傾倒上清，倒放在吸水紙上吸干，再將分離器復(fù)位(切勿拔出試管)；5)每管加稀釋洗滌液500^L，從磁分離器上取下試管架，混勻，將試管架放回磁分離器，扣緊，放置2分鐘，再傾倒上清，分離器倒放在吸水紙上吸干后，再將分離器復(fù)位(勿拔出試管)。重復(fù)操作一次；6)各孔加化學(xué)發(fā)光底物液1007)必須于加化學(xué)發(fā)光底物液后的第30~90分鐘內(nèi)測量，在化學(xué)發(fā)光測量儀上依序測量各孔的發(fā)光強(qiáng)度(RLU),測量時(shí)間1秒/孔；8)以校準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)，RLU值為縱坐標(biāo)繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，以各待測血清RLU值在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出該血清的T4的濃度。本發(fā)明的磁顆粒竟?fàn)幏ɑ瘜W(xué)發(fā)光免疫分析定量測定試劑盒的使用方法和操作過程與曱狀腺素(T4)磁顆粒竟?fàn)幏ɑ瘜W(xué)發(fā)光免疫分析定量測定試劑盒的使用方法和操作過程完全一致。權(quán)利要求1、一種用于檢測激素的磁顆粒競爭法化學(xué)發(fā)光免疫分析測定試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括:1)校準(zhǔn)品；2)包被有激素抗體的磁顆粒；3)酶標(biāo)記的激素抗原；以及4)上述酶所作用的化學(xué)發(fā)光底物。2、如權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述酶為堿性磷酸酶或辣根過氧化物酶。3、如權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述化學(xué)發(fā)光底物為1,2-二氧乙烷類衍生物、魯米諾或異魯米諾。4、如權(quán)利要求3所述的試劑盒，其特征在于，所述1,2-二氧乙烷類衍生物為(金剛烷)-l，2_二氧乙烷、3-(2'-螺旋金剛烷)-4-曱氧基-4-(3〃-磷酰氧基)苯基-l，2-二氧乙烷、CSPD或CDP-Star。5、如權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述激素為1)曱狀腺功能系列其中，所述用于檢測甲狀腺功能的激素為曱狀腺素、游離甲狀腺素、三碘曱腺原氨酸、游離三碘曱腺原氨酸或3，3'，5'—反三碘曱腺原氨酸；2)性激素系列其中，所述性激素為睪酮、孕酮、雌二醇或雌三醇。6、一種制備權(quán)利要求1所述試劑盒的方法，其特征在于包括以下步驟1)以純品原料配制校準(zhǔn)品；2)以激素抗體包被》茲顆粒；3)用酶標(biāo)記激素抗原；4)分裝上述校準(zhǔn)品、酶標(biāo)記抗原和該酶所作用的化學(xué)發(fā)光底物；以及5)組裝為成品。7、如權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，在所述包被步驟2)中激素抗體包被的磁顆粒為1~3nm粒徑、四氧化三鐵內(nèi)核、表面包裹帶有活性基團(tuán)的聚合物，其使用濃度為5~10mg/mL;通過碳二亞胺法包被磁顆粒；以封閉液封閉包被的磁顆粒，所述封閉液為含有1.0%牛血清白蛋白、1.0%酪蛋白、pH值為7.4的0.05mol/L磷酸緩沖液。8、如權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于，所述活性基團(tuán)為氨基或羧基。9、如權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，在標(biāo)記步驟3)中，所述酶標(biāo)記抗原以20-50%小牛血清配制而成。10、如權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，所述酶為堿性磷酸酶或辣根過氧化物酶。11、如權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，所述化學(xué)發(fā)光底物為1，2-二氧乙烷類衍生物、魯米諾或異魯米諾。12、如權(quán)利要求11所述的方法，其特征在于，所述1,2-二氧乙烷類衍生物為(金剛烷)-l，2-二氧乙烷、3-(2'-螺旋金剛烷)-4-曱氧基-4-(3"-磷酰氧基)苯基-1,2-二氧乙烷、CSPD或CDP-Star。全文摘要本發(fā)明涉及免疫分析醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，具體地，本發(fā)明提供了一種用于檢測激素的磁顆粒競爭法化學(xué)發(fā)光免疫分析測定試劑盒及其制備方法。根據(jù)本發(fā)明的試劑盒包括1)校準(zhǔn)品；2)包被有激素抗體的磁顆粒；3)酶標(biāo)記的激素抗原；以及4)化學(xué)發(fā)光底物。進(jìn)一步，根據(jù)本發(fā)明制備上述試劑盒的方法包括以下步驟1)以純品原料配制校準(zhǔn)品；2)以抗體包被磁顆粒；3)制備酶標(biāo)記抗原；4)分裝上述校準(zhǔn)品、化學(xué)發(fā)光底物和酶標(biāo)記抗原；以及5)組裝為成品。本發(fā)明的試劑盒具有簡便、快速、靈敏、穩(wěn)定等優(yōu)點(diǎn)。文檔編號G01N21/76GK101377491SQ200710121169公開日2009年3月4日申請日期2007年8月31日優(yōu)先權(quán)日2007年8月31日發(fā)明者唐寶軍,應(yīng)希堂,胡國茂申請人:北京科美東雅生物技術(shù)有限公司