專利名稱:IgG抗A(B)抗體快速檢測(cè)試劑盒的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及一種用于ARO血型系統(tǒng)IgG抗A(B)抗體快速檢測(cè)試劑盒。
背景技術(shù):
新生兒黃疸是常見的新生兒疾病,嚴(yán)重的新生兒黃疸會(huì)影響智力發(fā)育甚至危及生命。半數(shù)以上的新生兒黃疸是由母嬰ABO血型不合所致。如果孕婦血型是O型,而胎兒為A型或B型,孕婦血液中IgG抗A(B)會(huì)通過胎盤進(jìn)入胎兒血液,導(dǎo)致新生兒溶血和黃疸。孕婦血清IgG抗A(B)檢測(cè)能及早發(fā)現(xiàn)其抗體效價(jià)的高低,以便采取適當(dāng)?shù)姆乐未胧苊饣驕p輕新生兒溶血和黃疸的發(fā)生和危害。但孕婦血清存在的抗A(B)血型抗體主要包括IgG、IgM、IgA三種類型,其中的IgM和IgA不能通過胎盤不會(huì)對(duì)胎兒造成影響,而IgG抗A(B)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血液導(dǎo)致新生兒溶血和黃疸。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種IgG抗A(B)抗體快速檢測(cè)試劑盒,它可快速判斷新生兒溶血和黃疸的發(fā)生機(jī)率和嚴(yán)重程度。
為了達(dá)到上述目的,本發(fā)明由以下的技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)。
一種IgG抗A(B)抗體快速檢測(cè)試劑盒,其特征在于試劑盒組成成份包括裂解液、A型紅細(xì)胞懸液、B型紅細(xì)胞懸液、抗人IgG抗體、Liss液、濃縮洗滌液;采用裂解液破壞IgM、IgA而保存IgG活性,將其倍量稀釋后與A型紅細(xì)胞懸液反應(yīng),使紅細(xì)胞致敏,再加入抗人IgG抗體,觀察紅細(xì)胞凝集的最高稀釋倍數(shù)即為IgG抗A(B)抗體效價(jià)。通過其抗體效價(jià)來快速判斷新生兒溶血和黃疸的發(fā)生機(jī)率和嚴(yán)重程度。
具體實(shí)施例方式
下面的實(shí)施例和制劑實(shí)施例可更詳細(xì)地說明本發(fā)明,但不以任何形式限制本發(fā)明。
實(shí)施例1本發(fā)明試劑盒組成成份包括裂解液8ml、A型紅細(xì)胞懸液8ml、B型紅細(xì)胞懸液8ml、抗人IgG抗體16ml、Liss液16ml、濃縮洗滌液25ml。
測(cè)試樣品靜脈取血2-5ml,置試管待凝固后離心分離血清,血清標(biāo)本保存在2-8℃,在24小時(shí)內(nèi)不能測(cè)試的標(biāo)本應(yīng)放-20℃保存,嚴(yán)重溶血,有絮狀物或霉變的血清標(biāo)本會(huì)影響測(cè)試。
測(cè)試步驟將濃縮洗滌液用蒸餾水按1∶20稀釋成洗滌液;取試管一支加受檢者血清和裂解液各0.2ml,混勻,加蓋,置37℃溫箱30分鐘;排列小試管(10×60)兩排,每排8支,各加洗滌液0.1ml;在每排第一支試管各加裂解后的血清0.1ml,混勻后吸取0.1ml加入第2試管內(nèi),依次倍量稀釋至第8管,使每管留有1∶4、1∶8……1∶512不同稀釋度血清0.1ml;第一排管各加A型紅細(xì)胞懸液1滴,第二排管各加B型紅細(xì)胞懸液1滴,每個(gè)試管均加Liss液1滴,混勻后置37℃溫箱30分鐘;從溫箱取出試管,置離心機(jī)1000轉(zhuǎn)/分,離心一分鐘,棄去上清液;每管加入洗滌液1ml,混勻,置離心機(jī)1000轉(zhuǎn)/分,離心一分鐘,棄去上清液,留取壓積紅細(xì)胞;重復(fù)該操作三次;每管各加抗人IgG抗體1滴,混勻;置離心機(jī)3000轉(zhuǎn)/分,離心15秒鐘,輕輕搖動(dòng)觀察結(jié)果,紅細(xì)胞凝集的最高稀釋倍數(shù)即為抗A或抗B抗體效價(jià)。
結(jié)果判斷根據(jù)血型反應(yīng)程度以++++、+++、++、+、一判定結(jié)果,以紅細(xì)胞凝集(+)的最高稀釋倍數(shù)即為抗A(B)的抗體效價(jià)。
臨床意義孕婦血清IgG抗A(B)抗體效價(jià)低于64,一般不會(huì)引起新生兒溶血,抗體效價(jià)高于64,可引起新生兒溶血和黃疸,黃疸程度隨抗體效價(jià)升高而加重。
本發(fā)明試劑盒宜2-8℃冷藏,嚴(yán)禁凍存,洗滌應(yīng)充分,每次離心后要將上清液甩干。血清應(yīng)新鮮,及時(shí)分離血清,置4℃保存,24小時(shí)之內(nèi)不做檢測(cè)的血清應(yīng)置-20℃凍存。本發(fā)明試劑第1管凝集抗體效價(jià)為4,因?yàn)樵谑軝z血清加等量裂解液裂解時(shí),即為2倍稀釋,再加入等量洗滌液,則稀釋倍數(shù)為4。
權(quán)利要求
1.一種IgG抗A(B)抗體快速檢測(cè)試劑盒,其特征在于試劑盒組成成份包括裂解液、A型紅細(xì)胞懸液、B型紅細(xì)胞懸液、抗人IgG抗體、Liss液、濃縮洗滌液;采用裂解液破壞IgM、IgA而保存IgG活性,將其倍量稀釋后與A型紅細(xì)胞懸液反應(yīng),使紅細(xì)胞致敏,再加入抗人IgG抗體,觀察紅細(xì)胞凝集的最高稀釋倍數(shù)即為IgG抗A(B)抗體效價(jià)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒,其特征在于試劑盒組成成份含量包括裂解液8ml、A型紅細(xì)胞懸液8ml、B型紅細(xì)胞懸液8ml、抗人IgG抗體16ml、Liss液16ml、濃縮洗滌液25ml。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒,其特征在于試劑盒的測(cè)試步驟為將濃縮洗滌液用蒸餾水按1∶20稀釋成洗滌液;取試管一支加受檢者血清和裂解液各0.2ml,混勻,加蓋,置37℃溫箱30分鐘;排列小試管(10×60)兩排,每排8支,各加洗滌液0.1ml;在每排第一支試管各加裂解后的血清0.1ml,混勻后吸取0.1ml加入第2試管內(nèi),依次倍量稀釋至第8管,使每管留有1∶4、1∶8……1∶512不同稀釋度血清0.1ml;第一排管各加A型紅細(xì)胞懸液1滴,第二排管各加B型紅細(xì)胞懸液1滴,每個(gè)試管均加Liss液1滴,混勻后置37℃溫箱30分鐘;從溫箱取出試管,置離心機(jī)1000轉(zhuǎn)/分,離心一分鐘,棄去上清液;每管加入洗滌液1ml,混勻,置離心機(jī)1000轉(zhuǎn)/分,離心一分鐘,棄去上清液,留取壓積紅細(xì)胞;重復(fù)該操作三次;每管各加抗人IgG抗體1滴,混勻;置離心機(jī)3000轉(zhuǎn)/分,離心15秒鐘,輕輕搖動(dòng)觀察結(jié)果,紅細(xì)胞凝集的最高稀釋倍數(shù)即為抗A或抗B抗體效價(jià)。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種用于ABO血型系統(tǒng)IgG抗A(B)抗體快速檢測(cè)試劑盒。試劑盒組成成份包括裂解液、A型紅細(xì)胞懸液、B型紅細(xì)胞懸液、抗人IgG抗體、Liss液、濃縮洗滌液;采用裂解液破壞IgM、IgA而保存IgG活性,將其倍量稀釋后與A型紅細(xì)胞懸液反應(yīng),使紅細(xì)胞致敏,再加入抗人IgG抗體,觀察紅細(xì)胞凝集的最高稀釋倍數(shù)即為IgG抗A(B)抗體效價(jià)。通過其抗體效價(jià)來快速判斷新生兒溶血和黃疸的發(fā)生幾率和嚴(yán)重程度。
文檔編號(hào)G01N1/28GK101021540SQ20071013567
公開日2007年8月22日 申請(qǐng)日期2007年3月12日 優(yōu)先權(quán)日2007年3月12日
發(fā)明者馬偉民, 張永頂 申請(qǐng)人:深圳市伯勞特生物制品有限公司